CN102898540A - 透明质酸的提取工艺 - Google Patents
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Abstract
透明质酸的提取工艺涉及一种化妆品原料的提取工艺，更具体地说，是涉及透明质酸的提取工艺。本发明提供了一种原料易得、提取率高的透明质酸的提取工艺。本发明采用如下技术方案，本发明的工艺步骤为：将蛋壳膜过筛，用蒸馏水浸泡5～6h，加入1～3％的NaCl，在90～95℃下搅拌10～15min，冷却至室温，加入4000～9000U的蛋白酶，在30～80℃下酶解3～8h；离心、过滤，收集上清液；调节体系的pH值为5.0～10.0，加入2倍的95％乙醇醇沉12h；离心收集沉淀；脱水、干燥、成品。
Description
技术领域：
本发明涉及一种化妆品原料的提取工艺，更具体地说，是涉及透明质酸的提取工艺。
背景技术：
透明质酸(HA)是由葡糖醛酸和乙酰氨基葡糖组成的双糖单位以糖苷键重复连接而成，是组成细胞外基质的几种糖胺聚糖之一。透明质酸在水溶液中的无规则卷曲状态和它的流体动力学特点赋予其重要的物理特性，即高度黏弹性、可塑性、渗透性和良好的生物相容性，因此透明质酸作为一种功能性化妆品原料，在化妆品、保健食品、美容手术和医药领域均具有广泛的应用前景。
蛋壳膜中已探测到重要数量的透明质酸，壳膜中透明质酸的浓度证明比包括鸡冠在内的其它任何组织的含量都高，占湿膜重量的0.5％～10％，因此，蛋壳膜可以作为提取透明质酸的资源。而蛋壳是一类数量巨大的废弃物，所以如何从废弃的蛋壳膜中提取透明质酸，进行科学的综合利用，变废为宝是一件非常有意义的事。
除发酵法制备透明质酸外，国内大多从鸡冠、人脐带、动物眼球等组织中提取透明质酸，但是受到原料的限制，不能满足市场对透明质酸的需求。国内还未有厂家对蛋壳中的透明质酸进行提取。
发明内容：
本发明就是针对上述问题，提供了一种原料易得、提取率高的透明质酸的提取工艺。
为了实现本发明的上述目的，本发明采用如下技术方案，本发明的工艺步骤为：将蛋壳膜过筛，用蒸馏水浸泡5～6h，加入1～3％的NaCl，在90～95℃下搅拌10～15min，冷却至室温，加入4000～9000U的蛋白酶，在30～80℃下酶解3～8h；离心、过滤，收集上清液；调节体系的pH值为5.0～10.0，加入2倍的95％乙醇醇沉12h；离心收集沉淀；脱水、干燥、成品。
本发明的有益效果：
1.本发明以蛋壳膜为原料，使资源得到了充分的利用；
2.本发明的提取量为13.294mg/g。
附图说明：
图1为酶添加量对透明质酸提取效果的影响；
图2为酶解温度对透明质酸提取效果的影响；
图3为酶解时间对透明质酸提取效果的影响；
图4为pH值对透明质酸提取效果的影响。
具体实施方式：
本发明的工艺步骤为：将蛋壳膜过筛，用蒸馏水浸泡5～6h，加入1～3％的NaCl，在90～95℃下搅拌10～15min，冷却至室温，加入4000～9000U的蛋白酶，在30～80℃下酶解3～8h；离心、过滤，收集上清液；调节体系的pH值为5.0～10.0，加入2倍的95％乙醇醇沉12h；离心收集沉淀；脱水、干燥、成品。
图1表明，酶用量越大，透明质酸提取量越大。这是因为酶分子越多，与蛋白质分子肽键接触几率增加，酶解反应速度越快，酶解效果越好。
图2表明，当温度达到50℃时，透明质酸提取量最高，酶解效果最好；当温度高于50℃，透明质酸提取量随温度的升高而呈下降趋势，一是因为温度升高，酶逐渐变性，二是因为透明质酸在温度高的条件下会发生降解。
图3表明，酶解时间为7h时，透明质酸提取量最高，水解时间进一步延长，透明质酸提取量变化不大，这说明在7h里酶解反应已经进行的比较充分。原因是蛋白酶具有专一性，随着水解时间的延长，蛋白酶可水解的肽键减少，同时蛋白酶活力以半衰期方式下降；另外，水解时间过长，不但生产效率降低，还易发生微生物污染，分解破坏透明质酸，反而使透明质酸提取量降低。
作为一种优选方案，本发明的工艺步骤为：加酶量为8000U，在50℃下酶解7h。
图4表明pH为8时提取效果增强，偏离此pH值，酶的空间构象就会改变，酶活力降低，甚至导致酶变性而失活。另外，酸性或碱性过强均会引起透明质酸自身分解，从而导致透明质酸的含量下降。
作为一种优选方案，本发明的工艺步骤为：体系pH值为8。
Claims (3)
1.透明质酸的提取工艺，其特征在于，本发明采用如下技术方案，本发明的工艺步骤为：将蛋壳膜过筛，用蒸馏水浸泡5～6h，加入1～3％的NaCl，在90～95℃下搅拌10～15min，冷却至室温，加入4000～9000U的蛋白酶，在30～80℃下酶解3～8h；离心、过滤，收集上清液；调节体系的pH值为5.0～10.0，加入2倍的95％乙醇醇沉12h；离心收集沉淀；脱水、干燥、成品。
2.根据权利要求1所述的透明质酸的提取工艺，其特征在于，本发明的工艺步骤为：加酶量为8000U，在50℃下酶解7h。
3.根据权利要求1所述的透明质酸的提取工艺，其特征在于，本发明的工艺步骤为：体系pH值为8。
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