CN105079450A - 缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂及其制备方法和应用 - Google Patents
缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂及其制备方法和应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂及其制备方法和应用。本发明的益生菌中药制剂组合物包括中药和益生菌,按重量份计由以下组分组成:黄精30-70份,玉竹1-15份,决明子10-25份,所述益生菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、青春双岐杆菌中的一种或多种,其中每克组合物中混合有108-109CFU的益生菌;制备益生菌中药制剂的方法操作简单,易于工业化生产;本发明的益生菌中药制剂具有缓解老年人阴虚型便秘的作用,同时还可调节肠道菌群平衡,提高抵抗力;且安全,保存期长,制剂产品可制成粉剂,片剂,胶囊等。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域,具体涉及一种缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂及其制备方法。
背景技术
便秘是临床上最常见的慢性消化道疾病,即大便秘结不通,排便间隔时间延长,或虽不延长而排便困难者。主要表现为每周排便不超过3次;至少有25%的时间出现排便硬少、或排便困难、或排便不畅;并常有直肠胀感、长期用力排便、排便不完全感、腹胀腹痛等一系列症候群。慢性便秘的症状常持续3个月以上。随着社会老龄化、现代生活节奏和饮食习惯的改变,便秘日益成为影响现代人,特别是老年人生活质量的重要疾病之一。据调查显示,便秘在人群中的发病率为3-4%,老年人高达30%,老年男性的发病率为9%-26%,女性的发病率为21%-34%。并呈逐年上升的趋势。功能性便秘是老年人便秘的主要类型。老年性便秘在祖国传统医学中属于“便秘”范畴,在中医文献中早有记载,如《内径》称之为“大便难”,并提出“以五谷为养、五果为助、五畜为益、五菜为充”的治疗原则。《伤寒论》则将此疾辨为阳结、阴结或脾约,仲师自拟脾约麻仁丸以疗此疾,并首创栓剂蜜煎导方。《诸病源候论》则称之为“大便不能”;孙思邈之《千金要方》称其为“闷塞”,宋《金匮翼》称之为“便闷”,其后则通称为便秘。
传统医学认为便秘之病症不外乎虚实两类,或因乎热结,或因乎气滞,或因乎寒凝,或因乎气血阴阳亏虚;现代医学则认为老年性便秘的发生与患者日常的不合理饮食及不良的排便习惯、神经异常及精神异常、内分泌失调、滥用药物及结肠、直肠器质性病变和功能性障碍等因素密切相关,根据中医理论分析,老年性便秘中以阴虚导致的便秘较为常见,而阴虚中常伴以气虚的存在。
功能性便秘的传统治疗方法包括改变生活和饮食习惯、食用纤维素、润滑肠道、应用缓泻剂、大便膨松剂等,但约有1/3的患者不能收到理想的效果。目前对便秘的治疗主要以药物治疗为主,主要可分为泻剂、促动力药、促分泌剂和灌肠剂等。泻药主要是增加粪便体积或者刺激肠壁促使排便。促动力剂主要作用于肠神经末梢,或直接作用于平滑肌,增加肠道动力,促进排便,这些药物见效快,但一般有较大副作用,长期服用容易产生依赖性,导致肠道自身功能减退,不宜久服。而且未注重人体的差异性,分症治疗。
近年来,人们发现便秘患者经常伴有肠道正常菌群的改变,如乳酸菌减少,产甲烷菌、条件致病菌和真菌增多等等,因此对应用益生菌改善排便情况的功效做了较多探索。2010年Chmielewska等的一篇系统综述显示某些种类的益生菌对便秘有改善作用,但由于数据所限未能对以上数据进行定量分析。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂及其制备方法,本发明制剂组合物包括中药和益生菌,本发明制得的益生菌中药制剂成品,具有很好的缓解老年人阴虚型便秘的作用,同时还可调节肠道菌群平衡,提高抵抗力。
为实现上述目的,本发明的技术方案为:
缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂组合物,包括中药和益生菌,按重量份计具体由以下组分组成:
黄精30-70份;
玉竹1-15份;
决明子10-25份;
所述益生菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、青春双岐杆菌中的任一种或多种。益生菌是指一类能对宿主产生有利影响的微生物,常见的有乳酸菌和双歧杆菌,益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,是定植于人体肠道、生殖系统内,能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物。
老年人便秘主要是体质阴虚所引起的,黄精性甘、平,归脾,肺,肾经,黄精的功效主要是滋肾润肺,补脾益气。玉竹味甘、平,具有养阴、润燥、除烦、止渴等功效,适用于治疗热病阴伤、咳嗽烦渴、虚劳发热等症。玉竹的养阴作用偏于脾胃、久服不会伤害脾胃。玉竹与黄精作用类似,但玉竹益气作用不如黄精,而黄精清热作用不如玉竹,两者搭配各发挥其所长,而决明子则具有清热平肝、降脂降压、润肠通便、明目益睛之功效。三种中药相互作用,滋阴补气,从整体调节人体体质,同时具有润肠通便的作用,从根本上缓解便秘症状。
进一步,所述的益生菌中药制剂组合物,包括中药和益生菌,按重量份计具体由以下组分组成:
黄精40-50份;
玉竹5-10份;
决明子15-25份;
所述益生菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、青春双岐杆菌中的任一种或多种。
进一步,每克所述组合物中含有8-109CFU的益生菌。
植物乳杆菌(Lactobacillusplantarum)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)、罗伊氏乳杆菌(Lactobacillusreuteri)、嗜酸乳杆菌(LactobacillusacidophilusBLCC2-0024)、青春双歧杆菌(Bifidobacteriumadolescentis)几株高效功能益生菌株进入人体后可以在肠道内大量存活,起到调节肠内菌群平衡、促进人体消化吸收;更好促进药食同源中药有效成分的吸收。同时增强宿主对微生物病原体的非特异性抵抗力。其代谢产物可促进双歧杆菌等有益菌的增殖,促进胃肠蠕动及宿便的排出。中药与益生菌协同作用,相互促进,整体调节机体体质,维护正常健康状态。
进一步,所述嗜酸乳杆菌BLCC2-0024分离自健康婴儿粪便,已于2015年3月18日保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号为CCTCCN0:M2015129,保藏地址为:中国武汉武汉大学。
本发明的目的之二在于提供一种用制备益生菌中药制剂的方法,包括以下步骤:
1)制备冻干菌粉:
a将所述益生菌的各菌种经培养活化,一级种子培养,制得一级种子液,再进行发酵培养,得发酵液;
b将步骤a所述发酵液离心,收集菌体,加入保护剂冻干,得各菌种冻干菌粉;
2)取上述重量份的中药经切段,粉碎,混合得中药混合物,粉碎后粒径≤50um;
3)将步骤1)所述的各菌种冻干菌粉混合,加入步骤2)所述中药混合物中,充分混合得益生菌中药制剂。
进一步,步骤1)所述转接到一级种子培养基的接种量为1-5%;所述发酵液中的菌体密度≥109cfu/mL。
作为一种优选,步骤1)所述益生菌中乳杆菌的培养活化条件为:25-40℃培养22-26h,一级种子培养的条件为:25-40℃条件下,静置培养12-24h,发酵培养的条件为:25-40℃条件下,间歇振荡培养48-96h,搅拌速度为间歇搅拌100r/min,5min/2h;步骤1)所述益生菌中双歧杆菌的培养活化条件为:25-40℃培养22-26h,一级种子培养的条件为:32-40℃厌氧培养20-28h,种子培养液培养条件为:32-40℃条件下静置培养16-30h,发酵培养条件为:28-40℃,初始pH值为6.0-7.0,发酵时间为48-96h。
作为一种优选,所述益生菌中乳杆菌的培养活化的培养基为MRS固体培养基,一级种子培养基和发酵培养基均为不含琼脂的MRS液体培养基;所述益生菌中双歧杆菌的培养活化培养基为TPY固体培养基,一级种子培养基和发酵培养基均为不含琼脂的TPY液体培养基。
进一步,步骤1)所述保护剂按重量份计具体由以下组分组成:10%脱脂奶粉70-90份,蔗糖1-15份,丙三醇0.1-5份。除上述以外,可以使用本领域中普遍采用的其他保护剂。
作为一种优选,步骤2)所述粉碎方法为气流粉碎。
进一步,步骤3)所述各菌种冻干菌粉的重量比为:植物乳杆菌:鼠李糖乳杆菌:罗伊氏乳杆菌:嗜酸乳杆菌:青春双岐杆菌=2-5:1-3:1-2:1-3:1-2。
本发明的目的之三在于提供一种用上述的方法制备的缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂产品,包括粉剂和/或片剂和/或胶囊。
进一步,所述的益生菌中药制剂产品中所述益生菌菌落总数≥6×109cfu/g。
本发明的有益效果在于:本发明提供了一种缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂及其制备方法。本发明制剂组合物包括中药和益生菌,益生菌是指一类能对宿主产生有利影响的微生物,能产生确切健康功效从而改善宿主微生态平衡、发挥有益作用的活性有益微生物。本发明制备益生菌中药制剂的方法,操作简单,易于工业化生产;本发明制得的益生菌中药制剂成品,经动物试验验证,具有很好的缓解老年人阴虚型便秘的作用,缓解便秘的同时还可调节肠道菌群平衡,提高抵抗力;且无毒、安全,保存期长,制剂产品可制成粉剂,片剂,胶囊等,具有广阔的市场前景。
附图说明
图1模型小鼠治疗后粪便粒数示意图。
图2模型小鼠治疗后粪便含水量示意图。
图3模型小鼠治疗后小肠推进率示意图。
图4模型小鼠治疗后肠道菌群计数结果示意图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白,以下结合附图及实施例,对本发明进行进一步详细说明。优选实施例中未注明具体条件的实验方法,通常按照常规条件,所举实施例是为了更好地对本发明的内容进行说明,但并不是本发明的内容仅限于所举实施例。所以,熟悉本领域的技术人员根据上述发明内容对实施方案进行非本质的改进和调整,仍属于本发明的保护范围。
实施例一缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂组合物1
缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂组合物,包括中药和益生菌,按重量份计具体由以下组分组成:
黄精35份;
玉竹10份;
决明子20份;
其中每克组合物中混合有109CFU的益生菌。
实施例二缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂组合物2
缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂配方,包括中药组合物和益生菌,按重量份计具体由以下组分组成:
黄精60份;
玉竹9份;
决明子25份;
其中每克组合物中混合有109CFU的益生菌。
实施例三益生菌中药制剂的制备
实验菌株:植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌和青春双岐杆菌。
培养基:
MRS固体培养基配方为:葡萄糖2.0%、柠檬酸铵0.2%、乙酸钠0.5%、磷酸氢二钾0.5%、硫酸锰0.02%、硫酸镁0.05%、蛋白胨1.0%、牛肉膏1.0%、酵母膏0.5%、土温-800.1%,1.5%琼脂粉(进口),调pH6.0。液体培养基为不含琼脂的固体培养基配方。
TPY固体培养基配方为:酪蛋白胨1%、大豆蛋白胨0.5%、酵母粉0.25%、磷酸氢二钾0.2%、MgCl2·6H2O0.05%、氯化钙0.015%、ZnSO4·7H2O0.025%、氯化铁0.01%、L-半胱氨酸盐酸盐0.005%、葡萄糖1.5%、吐温-801mL(1000mL加1mL),1.5%琼脂粉(进口),调节pH至6.3-6.6,115℃条件下灭菌20min。液体培养基为不含琼脂的固体培养基配方。
将植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和嗜酸乳杆菌分别接入MRS固体斜面培养基中,37℃培养24h;接着转接到MRS液体培养基中,37℃培养24h,制得一级种子液;然后再以5%的接种量转接入发酵培养基进行高密度培养,发酵条件为37℃间歇震荡72h。
将青春双歧杆菌接入TPY固体斜面培养基中,37℃培养24h;接着转接到TPY液体培养基中,37℃静置培养24h,制得一级种子液;然后再以5%的接种量转接入发酵培养基进行高密度培养,发酵条件为37℃静置72h。
待发酵液中菌体密度达到109cfu/mL,收集发酵液。离心收集获得菌体,加入由10%脱脂奶粉91%,蔗糖8%,丙三醇1%构成的保护剂,冻干成菌粉。最后按照植物乳杆菌:鼠李糖乳杆菌:罗伊氏乳杆菌:嗜酸乳杆菌:青春双岐杆菌=2:1:1:1:1的比例复配冻干菌粉。
取实施例1重量份的中药经切段,气流粉碎,得超微粉,粉碎后粒径最大不超过50um,将其混合得中药混合物。
在上述复配冻干菌粉,加入所述中药混合物中,充分混合即得益生菌中药制剂产品,益生菌中药制剂成品中5株菌菌落总数不少于6×109cfu/g。
实施例四动物实验验证
小鼠模型的构建:
材料:甲状腺素、利血平、阿拉伯树胶、活性炭。甲状腺素可加速机体代谢;利血平可耗竭机体内的去甲肾上腺素,降低交感-肾上腺素能神经的功能,使副交感神经功能亢进;两者并用可加速机体阴虚。
采用每日灌胃给予小鼠甲状腺素3mg和利血平0.02mg各1次,连续7d,结果模型小鼠表现出体重下降、心率增快、躁动不安、唇舌暗紫、粪便干结,量少,即造模成功。
检测指标:
小鼠饮水量、饮食量及体重的变化:详细记录每天每组小鼠的饮食量和饮水量,小鼠的初始体重和终体重。
小鼠首粒排黑便时间、排便粒数:空白组和模型组小鼠给予墨汁,每组灌胃相同剂量的墨汁(0.4ml/只),同时开始计时每只小鼠单独饲养,自由饮水、摄食,观察记录每只小鼠首次排黑便所需时间、5h内排便粒数和重量。
观察结束后粪便在100℃下干燥至恒重,计算粪便含水量:阴虚模型组的小鼠与对照组小鼠相比,体重和采食量和饮水量都显著低于对照组,小鼠状态萎靡,排便粒数和排便时间也显著长于对照组,小鼠粪便含水量测定发现,模型组的粪便含水量显著低于对照组,造模比较成功。
小鼠模型的治疗:
试验小鼠:
对照组(空白组):正常注射生理盐水。
阳性组:便可通中成药。
配方组(ZY1组):菌+中药(高剂量),黄精+玉竹+决明子(5:3:2)。
结果分析:
小鼠排便粒数、排便时间以及粪便含水量结果
小鼠肠道菌群计数结果
由以上两个表中实验数据和图1,2,3,4中可以看出,配方组治疗效果与阳性组的效果相比,小肠推进率及粪便含水量略高,更能够有效修复阴虚所导致的便秘,同时能促进小肠的蠕动,维护肠道菌群的健康。
实施例五益生菌中药制剂的应用
为验证本发明的益生菌中药制剂在缓解老年人阴虚型便秘的功效,符合入选标准的100例阴虚型便秘患者,入选人群为50-85岁之间,知情同意自愿参加本试验并签署知情同意书,其中男性45例,女性55例,病程6-48个月,平均18.2个月,达到显著治愈效果94例、有效5例、效果不太明显1例。治愈率99%,显效94%,无效1%。
最后说明的是,以上实施例仅用以说明本发明的技术方案而非限制,尽管参照较佳实施例对本发明进行了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的宗旨和范围,其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。
Claims (10)
1.缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂组合物,其特征在于,
包括中药和益生菌,按重量份计具体由以下组分组成:
黄精30-70份;
玉竹1-15份;
决明子10-25份;
所述益生菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、青春双岐杆菌中的任一种或多种。
2.根据权利要求1所述的益生菌中药制剂组合物,其特征在于,包括中药和益生菌,按重量份计具体由以下组分组成:
黄精40-50份;
玉竹5-10份;
决明子15-25份;
所述益生菌为植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗伊氏乳杆菌、嗜酸乳杆菌、青春双岐杆菌中的任一种或多种。
3.根据权利要求1所述的益生菌中药制剂组合物,其特征在于,每克所述组合物中含有8-109CFU的益生菌。
4.根据权利要求1所述的益生菌中药制剂组合物,其特征在于,所述嗜酸乳杆菌BLCC2-0024保藏编号为CCTCCM2015129。
5.基于权利要求1-4所述的益生菌中药制剂组合物制备益生菌中药制剂的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)制备冻干菌粉:
a将所述益生菌的各菌种经培养活化,一级种子培养,制得一级种子液,再进行发酵培养,得发酵液;
b将步骤a所述发酵液离心,收集菌体,加入保护剂冻干,得各菌种冻干菌粉;
2)取上述重量份的中药经切段,粉碎,混合得中药混合物,粉碎后粒径≤50um;
3)将步骤1)所述的各菌种冻干菌粉混合,加入步骤2)所述中药混合物中,充分混合得益生菌中药制剂。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤1)所述转接到一级种子培养基的接种量为1-5%;所述发酵液中的菌体密度≥109cfu/mL。
7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤1)所述保护剂按重量份计具体由以下组分组成:10%脱脂奶粉70-90份,蔗糖1-15份,丙三醇0.1-5份。
8.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤3)所述各菌种冻干菌粉的重量比为:植物乳杆菌:鼠李糖乳杆菌:罗伊氏乳杆菌:嗜酸乳杆菌:青春双岐杆菌=2-5:1-3:1-2:1-3:1-2。
9.权利要求5所述的方法制备的缓解老年人阴虚型便秘的益生菌中药制剂产品,其特征在于,包括粉剂和/或片剂和/或胶囊。
10.根据权利要求9所述的益生菌中药制剂产品中益生菌菌落总数≥6×109cfu/g。
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RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |