CN105685972A - 具有减脂瘦身功能的益生菌组合物及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物及其制备方法与应用，该益生菌组合物包含如下质量百分比计的组分：益生菌干粉50～60％，金银花提取物粉5～10％，青蒿提取物粉5～10％，黄芪提取物粉10～15％，葛根提取物粉10～15％，黄苓提取物粉10～15％。有益菌和中药是两类国际公认的益生物质，两者作用机理一脉相通，在具体使用过程中也能完美互补，共同发挥优势。本发明将益生菌与中药完美结合，利用中药的增菌作用，促进益生菌增殖，调节肠内微生态平衡。双歧杆菌、植物乳杆菌和嗜酸乳杆菌等益生菌均能产生共轭亚油酸等营养物质，影响脂肪代谢，从而达到减脂瘦身的效果。
Description
【技术领域】
本发明属于生物医药领域，具体涉及一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物及其制备方法与应用。
【背景技术】
随着经济水平的发展，生活水平的提高，近30年来由肥胖引起的疾病在日渐增加，己经成为一个世界范围内的医学和公共卫生学问题。肥胖被视为一种以身体脂肪含量过多为主要特征的、多病因的、能够合并多种疾患的慢性病，它与心脑血管疾病、高血压、2型糖尿病、非酒精性脂肪肝、脂代谢紊乱等密切相关。然而，现在已有的针对肥胖的治疗方法是控制饮食、药物干预及外科手术治疗，其存在效果不佳、对身体损伤大、反弹严重等缺点。特别是对一些手术治疗及长期口服药物患者来说，其术后的身体损伤及药物不良反应也是不容忽视的。因此，寻求更安全、更有效治疗肥胖症的方法，对人类的健康就显得尤为重要。
基于大量的研究表明，通过人为补充益生菌，可以调节人体肠道菌群比例，增加有益菌的数量，并减少有害细菌，从而起到改善全身慢性炎症水平，促进外源性胆固醇排泄和增加饱腹感的作用，来达到控制体重，治疗肥胖。
【发明内容】
有鉴于此，为克服现有技术的不足，本发明提供一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物及其制备方法与应用。
本发明的目的在于提供一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物，该组合物能够有效减少脂肪含量，改善体型。
本发明的另一目的在于提供上述具有减脂瘦身功能的益生菌组合物的制备方法。
本发明的再一目的在于提供上述具有减脂瘦身功能的益生菌组合物的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物，包含如下按质量百分比计的组分：益生菌干粉50～60％，金银花提取物粉5～10％，青蒿提取物粉5～10％，黄芪提取物粉10～15％，葛根提取物粉10～15％，黄苓提取物粉10～15％。
优选的，所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物包含如下按质量百分比计的组分：益生菌干粉50％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉10％，黄芪提取物粉15％，葛根提取物粉10％，黄苓提取物粉10％。
所述的益生菌干粉由双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌按质量比为1：1：1的比例组成。
所述的益生菌干粉可以通过购买上市的原料或自行摸索制备工艺的方式获得，本发明对所选的益生菌干粉的制备工艺进行了优化；所述的益生菌干粉制备方法步骤优选如下：
1)分别将双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌经培养基活化后，接种于发酵培养基中，振荡培养，使菌体浓度达到对数生长期0.5～1.0×109cfu/ml；
2)将步骤1)中各菌种发酵液混合后离心，弃上清，菌体沉淀洗涤，离心，灭菌，得菌泥；
3)配制干粉保护剂；其中干粉保护剂的配方组成为：β-环状糊精10g、乳糖2-5g、海藻糖0.5-2g、酵母膏0.5-2g、维生素E0.05-0.1g、蒸馏水100mL；
4)将干粉保护剂和菌泥混合，进行成膜反应，然后，将混合物预冻，再冷冻干燥，制成具有包埋层的活性益生菌干粉；
其中，步骤1)所述的双歧杆菌为青春双歧杆菌，婴儿双歧杆菌，两歧双歧杆菌，长双歧杆菌中的至少两种等比例混合菌，优选青春双歧杆菌，婴儿双歧杆菌两种等比例混合菌。
其中，步骤3)所述的干粉保护剂的配方组成为：β-环状糊精10g、乳糖2-5g、海藻糖0.5-2g、酵母膏0.5-2g、维生素E0.05-0.1g、蒸馏水100mL。
金银花提取物粉为忍冬科植物忍冬的干燥花蕾提取物。“金银花”一名出自《本草纲目》，由于忍冬花初开为白色，后转为黄色，因此得名金银花。金银花系常用名贵中药材之一。具有清热解毒、通经活络、广谱抗菌及抗病毒等功效，70％以上的感冒、消炎中成药中都含有金银花。具有“中药抗生素”、“绿色抗菌素”之称。金银花的作用除药用外，其美容、减肥和保健养生的作用更为神奇，对身体所起到的巨大保护和修复作用是十分显著的。李时珍在他的《本草纲目》中如是说：久服轻身，长年益寿。金银花性甘寒，善于清热解毒、降火气、祛湿气，特别适合在夏天减肥服用。
青蒿提取物粉为菊科植物黄花蒿的干燥地上部分提取物。花蕾期采收，割取地上部分，切碎，晒干。入药具有清热、凉血、退蒸、解暑、祛风、止痒、止盗汗、防中暑等功效，用作阴虚潮热的退热剂。有研究表明：1％和2％金银花、青篙对植物乳杆菌及嗜酸乳杆菌的生长和保存活性表现出明显的促进作用。
黄芪提取物粉为豆科植物蒙古黄芪的根提取物。多年生草本，高50-100厘米。主根肥厚，木质，常分枝，灰白色。茎直立，上部多分枝，有细棱，被白色柔毛。多年生草本，高50-100厘米。产于内蒙古、山西、甘肃、黑龙江等地。黄芪的药用迄今已有2000多年的历史，具有增强免疫力，增强能量，抗疲劳，抗突变，保肝，抑制破骨细胞的作用。黄芪多糖具有降血脂，即降低胆固醇和甘油三酯、升高高密度脂蛋白的作用；能够预防和治疗心脑血管疾病，如动脉粥样硬化、冠状动脉病变、周围血管病变以及高脂血症等。另有研究表明，12.5％的黄芪对双歧杆菌有明显的促进生长作用。
葛根提取物粉为豆科植物野葛的根提取物。多年生植物，是中国南方一些省区的一种常食蔬菜，其味甘凉可口，常作煲汤之用，也可作为药物应用。主产湖南、浙江、河南、广东。葛根主要成分是淀粉，此外含有约12％的黄酮类化合物，包括大豆黄酮甙、葛根素、花生素等10余种；并含有蛋白质、胡萝卜甙、氨基酸、香豆素类等营养物质。有发表解肌，升阳透疹、解热生津之功效。另外，葛根中的葛根素能有效降低胆固醇和甘油三脂。
黄苓提取物粉为唇形科植物黄芩的根提取物。多年生草本，生于干燥向阳山坡，可治瘟病发热，肺热咳嗽、湿热黄疸，泻痢、胎动不安等症，并有抗菌、解热、降压等作用。有研究表明，用中药黄芪、葛根、黄苓等经提纯后制成的复方口服液降糖素对四氧嘧啶性糖尿病大鼠进行治疗，结果表明，糖尿病大鼠肠道内双歧杆菌、乳杆菌、类杆菌数量明显增多，菌群失调有所改善。其对肠道微生态有很好的调节作用，能促进体内益生菌数量及活性的增加，尤其是对双歧杆菌有明显的增菌作用。
本发明中使用的金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉为中药原料经水提后的产物，其均已在市场上广泛应用，各种提取物的制备是已有的技术，得到的产品只是在物质浓度上有所差别，其各种产品均可在本发明中实施应用。
本发明还提供一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物的制备方法，其步骤包括选料、过筛、配料、混合；
所述的选料步骤为：选取含有双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌的益生菌干粉，优质金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉；
所述的过筛步骤为：将选好的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉分别过80～100目筛；
所述的配料步骤为：将过筛后的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉按所述质量百分比称量备用；
所述的混合步骤为：将配好的原料于三维混合机中混合至色泽均匀一致，无色差，即得到具有减脂瘦身功能的益生菌组合物。
本发明还提供一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物在制备减脂瘦身食品/保健品中的应用，该组合物可以加一种或多种药学上可接受的载体制成片剂、胶囊、颗粒、口服液等剂型。本发明还提供一种减脂瘦身食品/保健品，包含上述具有减脂瘦身功能的益生菌组合物。
另外，本发明包含的双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌均可以产生共轭亚油酸(CLA)等调节脂类代谢的营养物质；CLA能降低人体中的脂肪沉积，PPAR属于核激素受体，可调节许多与糖和脂肪代谢有关的基因表达。CLA作为PPARγ的配体，结合后激活PPARγ，在前脂肪细胞增殖、分化过程中，刺激PPARγ表达增多，可以诱导与脂肪细胞分化相关基因的表达，CLA在PPARγ被激活的同时也发挥了抑制作用，使得脂肪细胞在增殖、分化过程中受到阻碍，因而CLA降低了体脂。因此，益生菌制剂可以作为一种改善肥胖的新疗法，并且具有来源安全、效果显著、无任何毒副作用等优点。
金银花、青蒿、黄芪、葛根、黄苓这些中药的主要有效成分通过抑制外源性脂质的吸收，减少内源性脂质的合成，促进脂质的转运和排泄，调节脂肪代谢四个方面而达到改善肥胖的目的。具有毒副作用小、材料容易获得且可长期服用等优势。
传统上中药的使用，绝大多数以方剂的形式通过口服吸收而发挥作用，中药中的有效成分在进入肠道之后不可避免地与肠道菌群发生关联，某些成分经相应细菌的作用发生生物转化后被吸收，因此，体内环境中肠道菌群是完成中药有效成分生物转化的重要因素之一。有益菌和中药是两类国际公认的益生物质，两者在基本理论观点上极为相似、一脉相通；在作用机理上显示极大的统一性；在具体使用过程中也能完美互补，共同发挥优势。因而中药对于有益菌而言，是绝佳的益生元。本发明将益生菌与中药完美结合，找出了具有明显减脂瘦身效果的益生菌组合物配方。
本发明的有益效果在于：本发明的益生菌组合物以益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉为原料直接投料，按重量科学配比而成。其含有维生素K，维生素B12、吡哆醇、生物素、叶酸、烟酸和硫胺素等营养成分，制备工艺简单，避免了提取时造成的药物损失和由于原药材质量差异造成的不同产品质量差异较大的缺点，使产品纯度更高，杂质少，安全性更高，且不同批次间质量差异小，质量更均匀稳定。通过传统中药与益生菌合理配伍用药，经药学实验证明，药效优于单独使用任何一种原料，各有效成分呈协同作用，具有减脂瘦身、排毒养颜等功效。
【具体实施方式】
为了更好地理解本发明，以下将结合具体实例对本发明进行详细的说明。
实施例1
(1)选料制备益生菌干粉：
1)分别将双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌经培养基活化后，接种于发酵培养基中，振荡培养，使菌体浓度达到对数生长期0.5～1.0×109cfu/ml；
双歧杆菌种子液的制备：取出菌种保藏管，用双歧杆菌固体培养基划平板进行复苏，37度厌氧培养72小时。在平板下挑取单个菌落接种50毫升双歧杆菌培养基中，在培养箱中37度厌氧培养48小时。种子采用5％的接种量，接种至10L大三角瓶中(装液量为9.5L)，37度厌氧培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过10亿/毫升，即可作为双歧杆菌液体菌种接种。其中所述的双歧杆菌培养基：蛋白胨5.0g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏5.0g/L，胰蛋白胨10.0g/L，葡萄糖10.0g/L，醋酸钠5.0g/L，柠檬酸二铵2.0g/L，吐温-801.0ml/L，硫酸镁0.1g/L，硫酸锌0.25g/L，磷酸氢二钾2g/L，固体培养基中加入琼脂2％。培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。
乳杆菌种子液的制备：取出菌种保藏管，用MRS固体培养基划平板进行复苏，37度厌氧培养48小时。在平板下挑取单个菌落接种250毫升MRS培养基中，在培养箱中37度厌氧培养24小时。种子采用5％的接种量，接种至10L大三角瓶中(装液量为9L)，37度厌氧培养20-28小时，检测其菌液浓度，菌含量超过100亿/毫升，即可作为乳杆菌液体菌种接种。其中所述的MRS培养基：蛋白胨10g/L，酵母提取物5g/L，牛肉膏10g/L，葡萄糖20g/L，醋酸钠5g/L，柠檬酸二铵2g/L，吐温-801ml/L，硫酸镁0.6g/L，硫酸锰0.05g/L，磷酸氢二钾2g/L，琼脂20g/L，碳酸钙20g/L，固体培养基中加入琼脂2％。其中所述的乳酸菌种子培养基：葡萄糖5％，蛋白胨1.5％，牛肉膏0.75％，氯化钠0.1％，硫酸锰0.001％，硫酸镁0.02％，醋酸钠0.05％，碳酸钙1％，pH6.0。各培养基灭菌的条件为：0.10-0.15MPa，121℃灭菌30分钟。
2)将各菌种发酵液混合后离心，弃上清，菌体沉淀洗涤，离心，灭菌，得菌泥；
3)配制干粉保护剂；其中干粉保护剂的配方组成为：β-环状糊精10g、乳糖2-5g、海藻糖0.5-2g、酵母膏0.5-2g、维生素E0.05-0.1g、蒸馏水100mL。
4)将干粉保护剂和菌泥混合，进行成膜反应，然后，将混合物预冻，再冷冻干燥，制成具有包埋层的活性益生菌干粉；
金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉均购自西安天一生物技术有限公司。
(2)过筛
将步骤(1)中的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉分别过80～100目筛。
(3)配料
称量过筛后的原料，按益生菌干粉50％、金银花提取物粉5％、青蒿提取物粉10％、黄芪提取物粉15％、葛根提取物粉10％、黄苓提取物粉10％配料，以上含量均为重量百分比含量。
(4)混合
将配好的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉于三维混合机中混合至色泽均匀一致，无色差，即得到具有减脂瘦身功能的益生菌组合物。
实施例2
具体步骤同实施例1，不同之处在于：步骤(3)中配料：称量过筛后的原料，按益生菌干粉50％、金银花提取物粉10％、青蒿提取物粉5％、黄芪提取物粉10％、葛根提取物粉15％、黄苓提取物粉10％配料，以上含量均为重量百分比含量。
实施例3
具体步骤同实施例1，不同之处在于：步骤(3)中配料：称量过筛后的原料，按益生菌干粉50％、金银花提取物粉5％、青蒿提取物粉5％、黄芪提取物粉15％、葛根提取物粉10％、黄苓提取物粉15％配料，以上含量均为重量百分比含量。
实施例4
具体步骤同实施例1，不同之处在于：步骤(3)中配料：称量过筛后的原料，按益生菌干粉50％、金银花提取物粉10％、青蒿提取物粉5％、黄芪提取物粉10％、葛根提取物粉15％、黄苓提取物粉10％配料，以上含量均为重量百分比含量。
实施例5
具体步骤同实施例1，不同之处在于：步骤(3)中配料：称量过筛后的原料，按益生菌干粉55％、金银花提取物粉6％、青蒿提取物粉6％、黄芪提取物粉11％、葛根提取物粉11％、黄苓提取物粉11％配料，以上含量均为重量百分比含量。
实验例1具有减脂瘦身功能的益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响
(1)营养性肥胖大鼠模型的建立
大鼠在武汉大学生命科学学院实验动物中心饲养室饲养。饲养期间大鼠4只一笼，自由摄食和饮水，明暗周期为12h，室温22～25℃，相对湿度40％～60％，通风良好。取80只雄性SD大鼠，按体重随机分为普食组(10只)和造模组(70只)。普食组投喂基础饲料，造模组投喂高脂饲料。每天称一次体重，喂养7周后，肥胖饲料组大鼠中有38只大鼠的平均体重超过基础饲料组大鼠平均体重加1.4倍标准差，成模率54.3％。
(2)分组与给药
随机取24只作为益生菌组合物干预实验大鼠，分为3组，分别为模型对照组、实施例1组合物组、益生菌干粉组，每组8只；基础饲料组中随机取8只作为正常对照组，共4组，各组与正常对照组相比差异显著(P<0.01)(表1)。用药组与模型组继续给食高脂饲料，正常对照组投喂基础饲料。实施例1组合物和益生菌干粉分别为1000，500mg·kg-1，用纯净水配成10％、5％的混悬液，灌胃给药体积为10mL·kg-1，连续6周。给药时间在下午15：00一17：00。模型组灌胃给予等体积的纯净水，正常对照组不作任何处理。
(3)益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响
实施例1组合物和益生菌干粉都能显著降低大鼠的体重，其中实施例1组合物效果更好。用药第1、2周，大鼠的体重开始降低，第3、4、5、6周与模型组相比差异非常显著，并且低于正常对照组(表1)。
表1益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响.n＝8，
Tab.1EffectofProbioticscompositiononthebodymassinobeserats.n＝8,x±s
注：与正常对照组相比，1)P<0.01；与模型组相比，2)P<0.05，3)P<0.01
Note:1)P<0.01；vsnormal，2)P<0.05，3)P<0.01,vsmodel
实验例2具有减脂瘦身功能的益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响
(1)营养性肥胖大鼠模型的建立
大鼠在武汉大学生命科学学院实验动物中心饲养室饲养。饲养期间大鼠4只一笼，自由摄食和饮水，明暗周期为12h，室温22～25℃，相对湿度40％～60％，通风良好。取80只雄性SD大鼠，按体重随机分为普食组(10只)和造模组(70只)。普食组投喂基础饲料，造模组投喂高脂饲料。每天称一次体重，喂养7周后，肥胖饲料组大鼠中有38只大鼠的平均体重超过基础饲料组大鼠平均体重加1.4倍标准差，成模率54.3％。
(2)分组与给药
随机取24只作为益生菌组合物干预实验大鼠，分为6组，分别为模型对照组、益生菌组合物1组(益生菌干粉45％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉5％，黄芪提取物粉15％，葛根提取物粉15％，黄苓提取物粉15％)、益生菌组合物2组(益生菌干粉50％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉10％，黄芪提取物粉15％，葛根提取物粉10％，黄苓提取物粉10％)、益生菌组合物3组(益生菌干粉55％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉5％，黄芪提取物粉10％，葛根提取物粉10％，黄苓提取物粉15％)益生菌组合物4组(益生菌干粉60％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉5％，黄芪提取物粉10％，葛根提取物粉10％，黄苓提取物粉10％)、益生菌组合物5组(益生菌干粉65％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉5％，黄芪提取物粉5％，葛根提取物粉10％，黄苓提取物粉10％)，每组8只；基础饲料组中随机取8只作为正常对照组，共7组，各组与正常对照组相比差异显著(P<0.01)(表2)。用药组与模型组继续给食高脂饲料，正常对照组投喂基础饲料。益生菌组合物组均为1000mg·kg-1，用纯净水配成10％、5％的混悬液，灌胃给药体积为10mL·kg-1，连续6周。给药时间在下午15：00一17：00。模型组灌胃给予等体积的纯净水，正常对照组不作任何处理。
(3)益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响
益生菌组合物组都能显著降低大鼠的体重，其中效果较好的成分组成为益生菌干粉50～60％，金银花提取物粉5～10％，青蒿提取物粉5～10％，黄芪提取物粉10～15％，葛根提取物粉10～15％，黄苓提取物粉10～15％，其中益生菌组合物2组效果最好。用药第1、2周，大鼠的体重开始降低，第3、4、5、6周与模型组相比差异非常显著，并且低于正常对照组(表2)。
表2益生菌组合物对肥胖大鼠体重的影响.n＝8，
Tab.1EffectofProbioticscompositiononthebodymassinobeserats.n＝8,x±s
注：与正常对照组相比，P<0.01；与模型组相比，P<0.01
Note:P<0.01；vsnormal，P<0.01,vsmodel。
Claims (8)
1.一种具有减脂瘦身功能的益生菌组合物，其特征在于：包含如下按质量百分比计的组分：益生菌干粉50～60％，金银花提取物粉5～10％，青蒿提取物粉5～10％，黄芪提取物粉10～15％，葛根提取物粉10～15％，黄苓提取物粉10～15％。
2.根据权利要求1所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物，其特征在于：包含如下按质量百分比计的组分：益生菌干粉50％，金银花提取物粉5％，青蒿提取物粉10％，黄芪提取物粉15％，葛根提取物粉10％，黄苓提取物粉10％。
3.根据权利要求1或2所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物，其特征在于：所述益生菌干粉由双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌按质量比为1:1:1的比例组成。
4.一种制备如权利要求1或2所述具有减脂瘦身功能的益生菌组合物的方法，其特征在于：它包含如下步骤：
(1)选料：选取含有双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌的益生菌干粉，金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉；
(2)过筛：将选好的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉分别过80～100目筛；
(3)配料：将过筛后的益生菌干粉、金银花提取物粉、青蒿提取物粉、黄芪提取物粉、葛根提取物粉、黄苓提取物粉称量备用；所述各组分质量百分比为益生菌干粉50～60％，金银花提取物粉5～10％，青蒿提取物粉5～10％，黄芪提取物粉10～15％，葛根提取物粉10～15％，黄苓提取物粉10～15％；
(4)混合：将配好的原料于三维混合机中混合至色泽均匀一致，无色差，即得到具有减脂瘦身功能的益生菌组合物。
5.根据权利要求4所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物的制备方法，其特征在于：所述益生菌干粉制备方法步骤如下：
1)分别将双歧杆菌、植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌经培养基活化后，接种于发酵培养基中，振荡培养，使菌体浓度达到对数生长期0.5～1.0×109cfu/ml；所述的双歧杆菌为青春双歧杆菌，婴儿双歧杆菌，两歧双歧杆菌，长双歧杆菌中的至少两种等比例混合菌，优选青春双歧杆菌，婴儿双歧杆菌两种等比例混合菌；
2)将步骤1)中各菌种发酵液混合后离心，弃上清，菌体沉淀洗涤，离心，灭菌，得菌泥；
3)配制干粉保护剂；所述的干粉保护剂的配方组成为：β-环状糊精10g、乳糖2-5g、海藻糖0.5-2g、酵母膏0.5-2g、维生素E0.05-0.1g、蒸馏水100mL；
4)将干粉保护剂和菌泥混合，进行成膜反应，然后将混合物预冻，再冷冻干燥，制成具有包埋层的活性益生菌干粉。
6.一种如权利要求1或2所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物在制备减脂瘦身食品/保健品中的应用。
7.根据权利要求6所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物在制备减脂瘦身食品/保健品中的应用，其特征在于：所述具有减脂瘦身功能的益生菌组合物，使用在粉剂、片剂、胶囊剂、颗粒、冲剂、果冻、饮料、乳制品、酸奶或小点心烘烤品中；所述保健品为粉剂、片剂、胶囊剂、液体剂、悬浮液、乳剂、口服液、果冻或冲剂中任一种。
8.一种减脂瘦身食品/保健品，其特征在于：它包含如权利要求1或2所述的具有减脂瘦身功能的益生菌组合物。
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |