CN115153029A - 一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,属于益生菌菌群组合物技术领域,所述益生菌菌群组合物,按重量份计,由以下成分组成:75‑80份改性菌粉,10‑12份中药微胶囊,3‑5份冻干保护剂,6‑8份改性剂;所述改性剂的组成,按重量份计,由以下成分组成:5‑7份淀粉微球,1‑2份酪蛋白酸钠,0.5‑0.8份大豆磷脂,0.1‑0.3份硬脂酰乳酸钙;本发明的益生菌菌群组合物能够在提高降脂效果及降低益生菌的过敏反应的同时,避免对益生菌活性的影响,降低益生菌在使用中对肠道的刺激,同时还能够避免产生依赖性。

Description

一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物
技术领域
本发明涉及益生菌菌群组合物技术领域,具体涉及一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物。
背景技术
随着社会经济的发展和人们生活方式的改变,肥胖已成为一种潜在的健康杀手,严重威胁着人类的健康。椐WHO估计,目前全球肥胖症患者超过4亿,而超重人群已达到16亿,每年至少有260万人因肥胖症而死亡。肥胖是一种多因素影响的慢性代谢性疾病,是由于能量摄入过多而无法完全消耗,引发身体脂肪沉积过多的现象。超重和肥胖是诱发糖尿病、高血压、心血管疾病、癌症和睡眠呼吸障碍等很多疾病的关键因素,目前治疗肥胖和相关疾病的一个重要目标为营养消化和吸收抑制剂的发展。
在人类消化系统中膳食脂肪的消化主要靠胰腺脂肪酶,它能够将人体摄入的三酰基甘油酯水解40-70%;而人体摄入的碳水化合物则主要通过α-淀粉酶和α-糖苷酶来水解,因此,抑制胰脂肪酶、α-淀粉酶的活性,降低脂质和碳水化合物的吸收是开发治疗肥胖药物的一个极具吸引力的方法。脂肪酶失去活性则不能将食物中的脂肪分解为可以被人体吸收的游离脂肪酸和甘油,从而减少脂肪摄入,发挥降低血脂和体脂的作用,体内唾液和肠道α-淀粉酶失活,则能够降低淀粉等碳水化合物的分解消化,从而控制体重增长,减缓脂肪蓄积。
益生菌是通过定植在人体内,改变宿主某一部位菌群组成的一类对宿主有益的活性微生物,通过调节宿主黏膜与系统免疫功能或通过调节肠道内菌群平衡,促进营养吸收保持肠道健康的作用,从而产生有利于健康作用的单微生物或组成明确的混合微生物。研究发现,益生菌能够抑制胰脂肪酶、α-淀粉酶的活性,降低脂质和碳水化合物的吸收,因此,越来越多的人使用益生菌来降低血脂和体脂,但是益生菌在使用中存在以下缺点:见效慢,易反弹;服用益生菌后后会可能会产生过敏反应;对于肠道菌群原本就严重失衡的人群,在服用益生菌的一段时间内可能出现腹痛、腹泻、轻微腹胀等不适;在益生菌使用的过程中会产生胺类物质,可能引发机体的免疫反应,引起皮肤过敏。
现有技术中,虽然可以通过使用中药和益生菌复配,来提高益生菌的降脂效果,降低过敏反应,但是中药会影响益生菌的活性,从而影响了益生菌的使用效果;而且中药和益生菌复配后,并不能降低益生菌使用中产生的胺类物质引起的皮肤过敏现象,还会在使用中产生依赖性,一旦停用,容易造成血脂和体脂的再次升高,因此,研发一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,能够在提高降脂效果及降低益生菌的过敏反应的同时,避免对益生菌活性的影响,降低益生菌使用中产生的胺类物质引起的皮肤过敏现象,同时还能够避免产生依赖性,是目前急需解决的问题。
中国专利CN105030950B公开了一种防治高血脂的微生态制剂及其制备方法和应用,该制剂组合物包括纳豆冻干粉、益生菌和药食同源中药,按重量份计具体由以下组分组成:纳豆冻干粉20-40份,山楂15-40份,银杏18-35份,香菇5-25份;所述益生菌为植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌和青春双歧杆菌中的一种或多种;该发明制备的微生态制剂对高血脂有预防及辅助治疗的作用,在防治高血脂的同时还可调节肠道菌群平衡,提高抵抗力,但是加入的山楂、银杏会对益生菌的活性产生影响,还容易产生依赖性。
发明内容
针对现有技术存在的不足,本发明提供了一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,能够在提高降脂效果及降低益生菌的过敏反应的同时,避免对益生菌活性的影响,降低益生菌使用中产生的胺类物质引起的皮肤过敏现象,同时还能够避免产生依赖性。
为解决以上技术问题,本发明采取的技术方案如下:
一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,按重量份计,由以下成分组成:75-80份改性菌粉,10-12份中药微胶囊,3-5份冻干保护剂,6-8份改性剂。
所述改性菌粉的制备方法,由以下步骤组成:制备种子液、制备发酵液、干燥、改性;
所述制备种子液的方法为:分别将冷冻保存的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌在固体LB平板上划线进行活化,然后分别从LB平板中挑选单菌落接种于装有100mL液体培养基的250mL锥形瓶中,将250mL锥形瓶放入摇床进行摇床培养,控制摇床培养的温度为36-38℃,转速为220-240rpm,时间为12-14h,摇床培养结束后分别得到植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;
所述液体培养基,由以下成分组成:3-4g/L葡萄糖,2-3g/L胰蛋白胨,0.5-0.7g/L红糖,0.3-0.5g/L磷酸氢二钠,0.2-0.4g/L磷酸二氢钠,剩余为去离子水。
所述制备发酵液的方法为:分别将植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液依次接种于同一MRS液体培养基中,控制植物乳杆菌的接种量为1-1.5%,鼠李糖乳杆菌的接种量为1.5-2%,副干酪乳杆菌的接种量为1.5-2%,动物双歧杆菌的接种量为2-2.5%,两歧双歧杆菌的接种量为2-2.5%,罗伊氏乳杆菌的接种量为0.5-1%,接种完成后进行搅拌发酵培养,控制搅拌发酵培养的温度为36-38℃,转速为320-340rpm,通气量为1.5-1.7vvm,时间为18-20h,搅拌发酵培养结束得到发酵液;
所述MRS液体培养基,由以下成分组成:4-6g/L胰蛋白胨,5-7g/L葡萄糖,4-5g/L酵母膏,1.5-2g/L牛肉膏,1-1.2g/L吐温80,0.8-1g/L磷酸氢二钾,0.3-0.5g/L硫酸镁,剩余为去离子水。
所述干燥的方法为:对发酵液进行离心分离,控制离心分离时的转速为2800-3000rpm,时间为5-6min,离心分离结束后得到的固相物作为菌泥,对菌泥进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-40℃至-35℃,真空度为400-500Pa,处理时间为50-55min,真空冷冻干燥结束得到菌粉。
所述改性的方法为:将菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖混合均匀后,得到初级改性菌粉,将初级改性菌粉置于反应容器内,将反应容器内的温度控制到15-20℃,搅拌速度控制到100-120rpm,将改性液雾化后通入反应容器内,控制雾化速度为140-150g/min,雾化结束后继续搅拌12-15min,然后进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃至-30℃,真空度为300-400Pa,处理时间为30-35min,真空冷冻干燥结束得到改性菌粉;
所述改性中,菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖的重量比为80-85:5-7:2-4:3-6:2-5;
所述改性中,所述初级改性菌粉与改性液的重量比为100-105:3-5;
所述改性中,所述改性液的组成,按重量份计,包括:20-22份去离子水,1-3份氯化钠,1-1.5份大豆多糖,0.8-1份槐糖脂,0.5-0.8份硫酸锌;
所述改性菌粉中的益生菌的总数量为3.5×1010-4.0×1010cfu/g。
所述中药微胶囊的制备方法为:分别将白芷、连翘、黄芪、党参洗净后烘干,然后分别粉碎至200-300目,分别得到白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉,然后分别将白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉按照质量比为10-12:22-23:15-17:8-10混合均匀后得到混合中药粉,将混合中药粉与去离子水按照重量比为1:15-17混合均匀后进行超声破壁提取,控制超声破壁提取的声场频率为40-50kHz,声强为2.55W/cm2,提取时间为1.5-2h,提取结束得到中药提取液,将中药提取液进行离心分离,控制离心分离时的转速为3000-3200rpm,时间为6-7min,离心分离结束后得到的液相物作为滤液,将滤液、明胶、海藻酸钠混合后进行冷冻浓缩,控制冷冻浓缩的温度为-15℃至-10℃,时间为30-35min,冷冻浓缩结束得到浓缩液,向浓缩液中加入阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖,混合均匀后进行均质,控制均质的转速为4000-5000rpm,均质时间为5-6min,均质结束得到均质液,将均质液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为600-700Pa,进口温度为125-130℃,出口温度为65-70℃,真空喷雾干燥结束,得到中药微胶囊;
所述中药微胶囊的制备中,滤液、明胶、海藻酸钠的重量比为55-60:5-7:3-5;
所述中药微胶囊的制备中,浓缩液、阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖的重量比为50-55:3-5:2-4:4-6:1-2。
所述冻干保护剂的制备方法为:将预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖混合均匀后,置于球磨机中进行球磨,控制球磨时的球料比为12-15:1,转速为280-300rpm,时间为40-45min,球磨结束得到混合粉,将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,控制电磁震荡处理的频率为130-150kHz,时间为4-5min,电磁震荡结束,得到冻干保护剂;
所述冻干保护剂的制备中,预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖的重量比为15-18:3-5:4-6:2-3;
所述冻干保护剂的制备中,混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素的重量比为30-32:2-4:2-3:1-1.5。
所述改性剂的组成,按重量份计,由以下成分组成:5-7份淀粉微球,1-2份酪蛋白酸钠,0.5-0.8份大豆磷脂,0.1-0.3份硬脂酰乳酸钙;
所述淀粉微球的制备方法为:将玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1788、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠加入去离子水中,将温度升高至50-55℃,然后开启搅拌并将搅拌速度控制到200-220rpm,搅拌30-35min后,停止搅拌,得到初级淀粉液,将初级淀粉液以3-4℃/min的速度降温至-20℃至-15℃,在-20℃至-15℃下静置17-20min,然后以1.5-2℃/min的速度升温至32-35℃,在32-35℃下进行以200-220rpm的搅拌速度搅拌15-20min,然后对初级淀粉液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为300-400Pa,进口温度为135-140℃,出口温度为70-75℃,真空喷雾干燥结束,得到淀粉微球;
所述淀粉微球的制备中,玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1799、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠的重量比为20-22:2-4:1-3:2-5:2-4。
所述具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物的制备方法为:将改性菌粉、中药微胶囊、冻干保护剂、改性剂混合均匀后进行真空冷冻干燥,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃至-30℃,真空度为500-700Pa,处理时间为40-45min,真空冷冻干燥结束,得到降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物。
与现有技术相比,本发明的有益效果为:
(1)本发明的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,通过对菌粉进行改性,在冻干保护剂的制备中将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,以及在益生菌菌群组合物中加入改性剂,能够更好的发挥益生菌的降脂效果,在健康成年雄性sd大鼠上做实验,食用益生菌前的平均体重为428-431g,食用益生菌10d后的平均体重为352-359g,食用益生菌20d后的平均体重为320-325g,食用益生菌30d后的平均体重为316-320g;食用益生菌前血清TC为1.59-1.62mmol/L,食用益生菌前血清TG为1.15-1.19mmol/L,食用益生菌前血清LDL-C为0.26-0.29mmol/L,食用益生菌前血清HDL-C为0.83-0.87mmol/L,食用益生菌前脂体比为0.0168-0.0172;食用益生菌10d后血清TC为1.31-1.34mmol/L,食用益生菌10d后血清TG为0.76-0.79mmol/L,食用益生菌10d后血清LDL-C为0.17-0.19mmol/L,食用益生菌10d后血清HDL-C为1.07-1.09mmol/L,食用益生菌10d后脂体比为0.0142-0.0145;食用益生菌20d后血清TC为1.25-1.28mmol/L,食用益生菌20d后血清TG为0.59-0.62mmol/L,食用益生菌20d后血清LDL-C为0.16-0.18mmol/L,食用益生菌20d后血清HDL-C为1.10-1.13mmol/L,食用益生菌20d后脂体比为0.0136-0.0139;食用益生菌30d后血清TC为1.23-1.26mmol/L,食用益生菌30d后血清TG为0.58-0.60mmol/L,食用益生菌30d后血清LDL-C为0.16-0.17mmol/L,食用益生菌30d后血清HDL-C为1.12-1.14mmol/L,食用益生菌30d后脂体比为0.0132-0.0134;
(2)本发明的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,通过对菌粉进行改性,以及在益生菌菌群组合物中加入改性剂,能够降低益生菌的过敏反应,同时降低益生菌使用中产生的胺类物质引起的皮肤过敏现象,在健康成年雄性sd大鼠上做实验,在食用益生菌10d、20d和30d后无腹泻和皮肤过敏现象;
(3)本发明的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,通过对菌粉进行改性,在冻干保护剂的制备中将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,以及在益生菌菌群组合物中加入改性剂,能够避免中药对益生菌活性的影响,制备的益生菌菌群组合物中益生菌总数量为2.7×1010-3.0×1010cfu/g,在温度为2℃下避光保存10d后,益生菌菌群组合物中益生菌总数量为2.5×1010-2.8×1010cfu/g;
(4)本发明的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,通过对菌粉进行改性,在冻干保护剂的制备中将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,以及在益生菌菌群组合物中加入改性剂,能够对益生菌进行改性,从而避免对益生菌产生依赖,在健康成年雄性sd大鼠上做实验,停用益生菌20d后血清TC为1.24-1.29mmol/L,停用益生菌20d后血清TG为0.61-0.63mmol/L,停用益生菌20d后血清LDL-C为0.18-0.19mmol/L,停用益生菌20d后血清HDL-C为1.10-1.12mmol/L,停用益生菌20d后脂体比为0.0135-0.0138。
具体实施方式
为了对本发明的技术特征、目的和效果有更加清楚的理解,现说明本发明的具体实施方式。
实施例1
一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,按重量份计,由以下成分组成:75份改性菌粉,10份中药微胶囊,3份冻干保护剂,6份改性剂。
所述改性菌粉的制备方法,由以下步骤组成:制备种子液、制备发酵液、干燥、改性;
所述制备种子液的方法为:分别将冷冻保存的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌在固体LB平板上划线进行活化,然后分别从LB平板中挑选单菌落接种于装有100mL液体培养基的250mL锥形瓶中,将250mL锥形瓶放入摇床进行摇床培养,控制摇床培养的温度为36℃,转速为220rpm,时间为12h,摇床培养结束后分别得到植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;
所述液体培养基,由以下成分组成:3g/L葡萄糖,2g/L胰蛋白胨,0.5g/L红糖,0.3g/L磷酸氢二钠,0.2g/L磷酸二氢钠,剩余为去离子水。
所述制备发酵液的方法为:分别将植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液依次接种于同一MRS液体培养基中,控制植物乳杆菌的接种量为1%,鼠李糖乳杆菌的接种量为1.5%,副干酪乳杆菌的接种量为1.5%,动物双歧杆菌的接种量为2%,两歧双歧杆菌的接种量为2%,罗伊氏乳杆菌的接种量为0.5%,接种完成后进行搅拌发酵培养,控制搅拌发酵培养的温度为36℃,转速为320rpm,通气量为1.5vvm,时间为18h,搅拌发酵培养结束得到发酵液;
所述MRS液体培养基,由以下成分组成:4g/L胰蛋白胨,5g/L葡萄糖,4g/L酵母膏,1.5g/L牛肉膏,1g/L吐温80,0.8g/L磷酸氢二钾,0.3g/L硫酸镁,剩余为去离子水。
所述干燥的方法为:对发酵液进行离心分离,控制离心分离时的转速为2800rpm,时间为5min,离心分离结束后得到的固相物作为菌泥,对菌泥进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-40℃,真空度为400Pa,处理时间为50min,真空冷冻干燥结束得到菌粉。
所述改性的方法为:将菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖混合均匀后,得到初级改性菌粉,将初级改性菌粉置于反应容器内,将反应容器内的温度控制到15℃,搅拌速度控制到100rpm,将改性液雾化后通入反应容器内,控制雾化速度为140g/min,雾化结束后继续搅拌12min,然后进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃,真空度为300Pa,处理时间为30min,真空冷冻干燥结束得到改性菌粉;
其中,菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖的重量比为80:5:2:3:2;
所述初级改性菌粉与改性液的重量比为100:3;
所述改性液的组成,按重量份计,包括:20份去离子水,1份氯化钠,1份大豆多糖,0.8份槐糖脂,0.5份硫酸锌;
所述改性菌粉中的益生菌的总数量为3.5×1010cfu/g。
所述中药微胶囊的制备方法为:分别将白芷、连翘、黄芪、党参洗净后烘干,然后分别粉碎至200目,分别得到白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉,然后分别将白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉按照质量比为10:22:15:8混合均匀后得到混合中药粉,将混合中药粉与去离子水按照重量比为1:15混合均匀后进行超声破壁提取,控制超声破壁提取的声场频率为40kHz,声强为2.55W/cm2,提取时间为1.5h,提取结束得到中药提取液,将中药提取液进行离心分离,控制离心分离时的转速为3000rpm,时间为6min,离心分离结束后得到的液相物作为滤液,将滤液、明胶、海藻酸钠混合后进行冷冻浓缩,控制冷冻浓缩的温度为-15℃,时间为30min,冷冻浓缩结束得到浓缩液,向浓缩液中加入阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖,混合均匀后进行均质,控制均质的转速为4000rpm,均质时间为5min,均质结束得到均质液,将均质液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为600Pa,进口温度为125℃,出口温度为65℃,真空喷雾干燥结束,得到中药微胶囊;
其中,滤液、明胶、海藻酸钠的重量比为55:5:3;
其中,浓缩液、阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖的重量比为50:3:2:4:1。
所述冻干保护剂的制备方法为:将预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖混合均匀后,置于球磨机中进行球磨,控制球磨时的球料比为12:1,转速为280rpm,时间为40min,球磨结束得到混合粉,将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,控制电磁震荡处理的频率为130kHz,时间为4min,电磁震荡结束,得到冻干保护剂;
其中,预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖的重量比为15:3:4:2;
其中,混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素的重量比为30:2:2:1。
所述改性剂的组成,按重量份计,由以下成分组成:5份淀粉微球,1份酪蛋白酸钠,0.5份大豆磷脂,0.1份硬脂酰乳酸钙;
所述淀粉微球的制备方法为:将玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1788、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠加入去离子水中,将温度升高至50-55℃,然后开启搅拌并将搅拌速度控制到200rpm,搅拌30min后,停止搅拌,得到初级淀粉液,将初级淀粉液以3℃/min的速度降温至-20℃,在-20℃下静置17min,然后以1.5℃/min的速度升温至32℃,在32℃下进行以200rpm的搅拌速度搅拌15min,然后对初级淀粉液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为300Pa,进口温度为135℃,出口温度为70℃,真空喷雾干燥结束,得到淀粉微球;
其中,玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1799、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠的重量比为20:2:1:2:2。
所述具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物的制备方法为:将改性菌粉、中药微胶囊、冻干保护剂、改性剂混合均匀后进行真空冷冻干燥,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃,真空度为500Pa,处理时间为40min,真空冷冻干燥结束,得到降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物。
实施例2
一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,按重量份计,由以下成分组成:77份改性菌粉,11份中药微胶囊,4份冻干保护剂,7份改性剂。
所述改性菌粉的制备方法,由以下步骤组成:制备种子液、制备发酵液、干燥、改性;
所述制备种子液的方法为:分别将冷冻保存的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌在固体LB平板上划线进行活化,然后分别从LB平板中挑选单菌落接种于装有100mL液体培养基的250mL锥形瓶中,将250mL锥形瓶放入摇床进行摇床培养,控制摇床培养的温度为37℃,转速为230rpm,时间为13h,摇床培养结束后分别得到植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;
所述液体培养基,由以下成分组成:3.5g/L葡萄糖,2.5g/L胰蛋白胨,0.6g/L红糖,0.4g/L磷酸氢二钠,0.3g/L磷酸二氢钠,剩余为去离子水。
所述制备发酵液的方法为:分别将植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液依次接种于同一MRS液体培养基中,控制植物乳杆菌的接种量为1.2%,鼠李糖乳杆菌的接种量为1.7%,副干酪乳杆菌的接种量为1.7%,动物双歧杆菌的接种量为2.2%,两歧双歧杆菌的接种量为2.2%,罗伊氏乳杆菌的接种量为0.7%,接种完成后进行搅拌发酵培养,控制搅拌发酵培养的温度为37℃,转速为330rpm,通气量为1.6vvm,时间为19h,搅拌发酵培养结束得到发酵液;
所述MRS液体培养基,由以下成分组成:5g/L胰蛋白胨,6g/L葡萄糖,4.5g/L酵母膏,1.7g/L牛肉膏,1.1g/L吐温80,0.9g/L磷酸氢二钾,0.4g/L硫酸镁,剩余为去离子水。
所述干燥的方法为:对发酵液进行离心分离,控制离心分离时的转速为2900rpm,时间为5.5min,离心分离结束后得到的固相物作为菌泥,对菌泥进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-37℃,真空度为450Pa,处理时间为52min,真空冷冻干燥结束得到菌粉。
所述改性的方法为:将菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖混合均匀后,得到初级改性菌粉,将初级改性菌粉置于反应容器内,将反应容器内的温度控制到17℃,搅拌速度控制到110rpm,将改性液雾化后通入反应容器内,控制雾化速度为145g/min,雾化结束后继续搅拌13min,然后进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-32℃,真空度为350Pa,处理时间为32min,真空冷冻干燥结束得到改性菌粉;
其中,菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖的重量比为82:6:3:4:3;
所述初级改性菌粉与改性液的重量比为102:4;
所述改性液的组成,按重量份计,包括:21份去离子水,2份氯化钠,1.2份大豆多糖,0.9份槐糖脂,0.7份硫酸锌;
所述改性菌粉中的益生菌的总数量为3.7×1010cfu/g。
所述中药微胶囊的制备方法为:分别将白芷、连翘、黄芪、党参洗净后烘干,然后分别粉碎至250目,分别得到白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉,然后分别将白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉按照质量比为11:22.5:16:9混合均匀后得到混合中药粉,将混合中药粉与去离子水按照重量比为1:16混合均匀后进行超声破壁提取,控制超声破壁提取的声场频率为45kHz,声强为2.55W/cm2,提取时间为1.7h,提取结束得到中药提取液,将中药提取液进行离心分离,控制离心分离时的转速为3100rpm,时间为6.5min,离心分离结束后得到的液相物作为滤液,将滤液、明胶、海藻酸钠混合后进行冷冻浓缩,控制冷冻浓缩的温度为-12℃,时间为32min,冷冻浓缩结束得到浓缩液,向浓缩液中加入阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖,混合均匀后进行均质,控制均质的转速为4500rpm,均质时间为5.5min,均质结束得到均质液,将均质液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为650Pa,进口温度为127℃,出口温度为67℃,真空喷雾干燥结束,得到中药微胶囊;
其中,滤液、明胶、海藻酸钠的重量比为57:6:4;
其中,浓缩液、阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖的重量比为52:4:3:5:1.5。
所述冻干保护剂的制备方法为:将预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖混合均匀后,置于球磨机中进行球磨,控制球磨时的球料比为12-15:1,转速为290rpm,时间为42min,球磨结束得到混合粉,将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,控制电磁震荡处理的频率为140kHz,时间为4.5min,电磁震荡结束,得到冻干保护剂;
其中,预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖的重量比为16:4:5:2.5;
其中,混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素的重量比为31:3:2.5:1.2。
所述改性剂的组成,按重量份计,由以下成分组成:6份淀粉微球,1.5份酪蛋白酸钠,0.7份大豆磷脂,0.2份硬脂酰乳酸钙;
所述淀粉微球的制备方法为:将玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1788、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠加入去离子水中,将温度升高至52℃,然后开启搅拌并将搅拌速度控制到210rpm,搅拌32min后,停止搅拌,得到初级淀粉液,将初级淀粉液以3.5℃/min的速度降温至-17℃,在-17℃下静置18min,然后以1.7℃/min的速度升温至33℃,在33℃下进行以210rpm的搅拌速度搅拌17min,然后对初级淀粉液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为350Pa,进口温度为137℃,出口温度为72℃,真空喷雾干燥结束,得到淀粉微球;
其中,玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1799、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠的重量比为21:3:2:3:3。
所述具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物的制备方法为:将改性菌粉、中药微胶囊、冻干保护剂、改性剂混合均匀后进行真空冷冻干燥,控制真空冷冻干燥处理的温度为-32℃,真空度为600Pa,处理时间为42min,真空冷冻干燥结束,得到降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物。
实施例3
一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,按重量份计,由以下成分组成:80份改性菌粉,12份中药微胶囊,5份冻干保护剂,8份改性剂。
所述改性菌粉的制备方法,由以下步骤组成:制备种子液、制备发酵液、干燥、改性;
所述制备种子液的方法为:分别将冷冻保存的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌在固体LB平板上划线进行活化,然后分别从LB平板中挑选单菌落接种于装有100mL液体培养基的250mL锥形瓶中,将250mL锥形瓶放入摇床进行摇床培养,控制摇床培养的温度为38℃,转速为240rpm,时间为14h,摇床培养结束后分别得到植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;
所述液体培养基,由以下成分组成:4g/L葡萄糖,3g/L胰蛋白胨,0.7g/L红糖,0.5g/L磷酸氢二钠,0.4g/L磷酸二氢钠,剩余为去离子水。
所述制备发酵液的方法为:分别将植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液依次接种于同一MRS液体培养基中,控制植物乳杆菌的接种量为1.5%,鼠李糖乳杆菌的接种量为2%,副干酪乳杆菌的接种量为2%,动物双歧杆菌的接种量为2.5%,两歧双歧杆菌的接种量为2.5%,罗伊氏乳杆菌的接种量为1%,接种完成后进行搅拌发酵培养,控制搅拌发酵培养的温度为38℃,转速为340rpm,通气量为1.7vvm,时间为20h,搅拌发酵培养结束得到发酵液;
所述MRS液体培养基,由以下成分组成:6g/L胰蛋白胨,7g/L葡萄糖,5g/L酵母膏,2g/L牛肉膏,1.2g/L吐温80,1g/L磷酸氢二钾,0.5g/L硫酸镁,剩余为去离子水。
所述干燥的方法为:对发酵液进行离心分离,控制离心分离时的转速为3000rpm,时间为6min,离心分离结束后得到的固相物作为菌泥,对菌泥进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃,真空度为500Pa,处理时间为55min,真空冷冻干燥结束得到菌粉。
所述改性的方法为:将菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖混合均匀后,得到初级改性菌粉,将初级改性菌粉置于反应容器内,将反应容器内的温度控制到20℃,搅拌速度控制到120rpm,将改性液雾化后通入反应容器内,控制雾化速度为150g/min,雾化结束后继续搅拌15min,然后进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-30℃,真空度为400Pa,处理时间为35min,真空冷冻干燥结束得到改性菌粉;
其中,菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖的重量比为85:7:4:6:5;
所述初级改性菌粉与改性液的重量比为105:5;
所述改性液的组成,按重量份计,包括:22份去离子水,3份氯化钠,1.5份大豆多糖,1份槐糖脂,0.8份硫酸锌;
所述改性菌粉中的益生菌的总数量为4.0×1010cfu/g。
所述中药微胶囊的制备方法为:分别将白芷、连翘、黄芪、党参洗净后烘干,然后分别粉碎至300目,分别得到白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉,然后分别将白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉按照质量比为12:23:17:10混合均匀后得到混合中药粉,将混合中药粉与去离子水按照重量比为1:17混合均匀后进行超声破壁提取,控制超声破壁提取的声场频率为50kHz,声强为2.55W/cm2,提取时间为2h,提取结束得到中药提取液,将中药提取液进行离心分离,控制离心分离时的转速为3200rpm,时间为7min,离心分离结束后得到的液相物作为滤液,将滤液、明胶、海藻酸钠混合后进行冷冻浓缩,控制冷冻浓缩的温度为-10℃,时间为35min,冷冻浓缩结束得到浓缩液,向浓缩液中加入阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖,混合均匀后进行均质,控制均质的转速为5000rpm,均质时间为6min,均质结束得到均质液,将均质液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为700Pa,进口温度为130℃,出口温度为70℃,真空喷雾干燥结束,得到中药微胶囊;
其中,滤液、明胶、海藻酸钠的重量比为60:7:5;
其中,浓缩液、阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖的重量比为55:5:4:6:2。
所述冻干保护剂的制备方法为:将预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖混合均匀后,置于球磨机中进行球磨,控制球磨时的球料比为15:1,转速为300rpm,时间为45min,球磨结束得到混合粉,将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,控制电磁震荡处理的频率为150kHz,时间为5min,电磁震荡结束,得到冻干保护剂;
其中,预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖的重量比为18:5:6:3;
其中,混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素的重量比为32:4:3:1.5。
所述改性剂的组成,按重量份计,由以下成分组成:7份淀粉微球,2份酪蛋白酸钠,0.8份大豆磷脂,0.3份硬脂酰乳酸钙;
所述淀粉微球的制备方法为:将玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1788、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠加入去离子水中,将温度升高至55℃,然后开启搅拌并将搅拌速度控制到220rpm,搅拌35min后,停止搅拌,得到初级淀粉液,将初级淀粉液以4℃/min的速度降温至-15℃,在-15℃下静置20min,然后以2℃/min的速度升温至35℃,在35℃下进行以220rpm的搅拌速度搅拌20min,然后对初级淀粉液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为400Pa,进口温度为140℃,出口温度为75℃,真空喷雾干燥结束,得到淀粉微球;
其中,玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1799、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠的重量比为22:4:3:5:4。
所述具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物的制备方法为:将改性菌粉、中药微胶囊、冻干保护剂、改性剂混合均匀后进行真空冷冻干燥,控制真空冷冻干燥处理的温度为-30℃,真空度为700Pa,处理时间为45min,真空冷冻干燥结束,得到降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物。
对比例1
采用实施例1所述的技术方案,其不同之处在于:改性菌粉的制备中省略改性步骤。
对比例2
采用实施例1所述的技术方案,其不同之处在于:冻干保护剂的制备中省略将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理步骤,即将冻干保护剂的制备中的混合粉作为冻干保护剂使用。
对比例3
采用实施例1所述的技术方案,其不同之处在于:具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物的组成和制备中省略改性剂的加入。
试验例1
将实施例1-3和对比例1-3的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物进行小鼠试验,试验方法及结果如下:
选择120只8周龄,体重为200±10g的健康成年雄性sd大鼠,平分为6组,编号A1-A6组,每组20只,均饲喂于同一动物房,保证动物房内的温度为24±2℃,湿度为60±2%,动物自由进食,每组小鼠所进食的饲料相同,进行7d适应性饲养后,向饲料中添加蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸钠后混合均匀,得到加脂饲料,控制加脂饲料中蔗糖的质量分数为20%,猪油的质量分数为15%,胆固醇的质量分数为1.2%,胆酸钠的质量分数为0.2%,使用加脂饲料对每组小鼠进行继续喂食,喂食20d后,对每只小鼠进行称重作为食用益生菌前的体重,然后计算每组的平均体重作为食用益生菌前的平均体重;然后每组随机挑选1只小鼠麻醉,解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪,并称重,计算并记录脂/体比,再从每组随机挑选5只小鼠,对挑选出的5只小鼠标记后进行不禁食采血(眼内眦或尾部),采血后尽快分离血清,测定并记录血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并计算每组的平均值,作为食用益生菌前的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;
然后停止使用食用加脂饲料,改用未添加蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸钠的饲料继续进行喂养,同时分别对每组小鼠喂养实施例1-3和对比例1-3的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,控制每只小鼠每天喂养0.3g益生菌菌群组合物,每组小鼠与益生菌的对应关系如下:
Figure 388333DEST_PATH_IMAGE001
连续喂养益生菌菌群组合物10天后,分别对每只小鼠进行称重作为食用10d益生菌后的体重,然后计算每组平均体重作为食用益生菌10d后的平均体重;然后每组随机挑选1只小鼠麻醉,解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪,并称重,计算并记录脂/体比,再对每组做标记的5只小鼠标记后进行不禁食采血(眼内眦或尾部),采血后尽快分离血清,测定并记录血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并计算每组的平均值,作为食用益生菌10d后的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,同时观察每组小鼠是否存在腹泻和皮肤过敏现象;
连续喂养益生菌菌群组合物20天后,分别对每只小鼠进行称重作为食用20d益生菌后的体重,然后计算每组平均体重作为食用益生菌20d后的平均体重;然后每组随机挑选1只小鼠麻醉,解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪,并称重,计算并记录脂/体比,再对每组做标记的5只小鼠标记后进行不禁食采血(眼内眦或尾部),采血后尽快分离血清,测定并记录血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并计算每组的平均值,作为食用益生菌20d后的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,同时观察每组小鼠是否存在腹泻和皮肤过敏现象;
连续喂养益生菌菌群组合物30天后,分别对每只小鼠进行称重作为食用30d益生菌后的体重,然后计算每组平均体重作为食用益生菌30d后的平均体重;然后每组随机挑选1只小鼠麻醉,解剖取肾周围脂肪、睾丸周围脂肪,并称重,计算并记录脂/体比,再对每组做标记的5只小鼠标记后进行不禁食采血(眼内眦或尾部),采血后尽快分离血清,测定并记录血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并计算每组的平均值,作为食用益生菌30d后的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,同时观察每组小鼠是否存在腹泻和皮肤过敏现象;
脂体比的计算公式为:(肾周脂肪垫+附睾脂肪垫)/体重×100%;
计算及测试结果如下:
Figure 381172DEST_PATH_IMAGE002
Figure 973958DEST_PATH_IMAGE003
Figure 431484DEST_PATH_IMAGE004
Figure 777015DEST_PATH_IMAGE005
Figure 881369DEST_PATH_IMAGE006
Figure 679560DEST_PATH_IMAGE007
然后继续喂养20d,每组小鼠均不使用益生菌,且使用未添加蔗糖、猪油、胆固醇、胆酸钠的饲料进行喂养,最后对每只小鼠进行称重,并计算每组的平均体重作为停用益生菌20d后的平均体重;再对每组做标记的5只小鼠标记后进行不禁食采血(眼内眦或尾部),采血后尽快分离血清,测定并记录血清TC、TG、LDL-C、HDL-C水平,并计算每组的平均值,作为停用益生菌20d后的TC、TG、LDL-C、HDL-C水平;计算结果如下:
Figure 675198DEST_PATH_IMAGE008
Figure 875235DEST_PATH_IMAGE009
试验例2
分别对实施例1-3和对比例1-3的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物中的益生菌的总数量进行检测,作为避光保存前的益生菌总数量,然后在温度为2℃下避光保存10d后,分别对益生菌菌群组合物中的益生菌的总数量进行检测,作为避光保存后的益生菌总数量,检测结果如下:
Figure 603020DEST_PATH_IMAGE010
除非另有说明,本发明中所采用的百分数均为质量百分数。
最后应说明的是:以上所述仅为本发明的优选实施例而已,并不用于限制本发明,尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,对于本领域的技术人员来说,其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换。凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (5)

1.一种具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,其特征在于,按重量份计,由以下成分组成:75-80份改性菌粉,10-12份中药微胶囊,3-5份冻干保护剂,6-8份改性剂;
所述改性菌粉的制备方法,由以下步骤组成:制备种子液、制备发酵液、干燥、改性;
所述改性的方法为:将菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖混合均匀后,得到初级改性菌粉,将初级改性菌粉置于反应容器内,将反应容器内的温度控制到15-20℃,搅拌速度控制到100-120rpm,将改性液雾化后通入反应容器内,控制雾化速度为140-150g/min,雾化结束后继续搅拌12-15min,然后进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃至-30℃,真空度为300-400Pa,处理时间为30-35min,真空冷冻干燥结束得到改性菌粉;
所述改性中,菌粉、葡甘聚糖、刺槐豆胶、盐藻多糖、水苏糖的重量比为80-85:5-7:2-4:3-6:2-5;
所述改性中,所述初级改性菌粉与改性液的重量比为100-105:3-5;
所述改性中,所述改性液的组成,按重量份计,包括:20-22份去离子水,1-3份氯化钠,1-1.5份大豆多糖,0.8-1份槐糖脂,0.5-0.8份硫酸锌;
所述改性菌粉中的益生菌的总数量为3.5×1010-4.0×1010cfu/g;
所述中药微胶囊的制备方法为:分别将白芷、连翘、黄芪、党参洗净后烘干,然后分别粉碎至200-300目,分别得到白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉,然后分别将白芷粉、连翘粉、黄芪粉、党参粉按照质量比为10-12:22-23:15-17:8-10混合均匀后得到混合中药粉,将混合中药粉与去离子水按照重量比为1:15-17混合均匀后进行超声破壁提取,控制超声破壁提取的声场频率为40-50kHz,声强为2.55W/cm2,提取时间为1.5-2h,提取结束得到中药提取液,将中药提取液进行离心分离,控制离心分离时的转速为3000-3200rpm,时间为6-7min,离心分离结束后得到的液相物作为滤液,将滤液、明胶、海藻酸钠混合后进行冷冻浓缩,控制冷冻浓缩的温度为-15℃至-10℃,时间为30-35min,冷冻浓缩结束得到浓缩液,向浓缩液中加入阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖,混合均匀后进行均质,控制均质的转速为4000-5000rpm,均质时间为5-6min,均质结束得到均质液,将均质液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为600-700Pa,进口温度为125-130℃,出口温度为65-70℃,真空喷雾干燥结束,得到中药微胶囊;
所述中药微胶囊的制备中,滤液、明胶、海藻酸钠的重量比为55-60:5-7:3-5;
所述中药微胶囊的制备中,浓缩液、阿拉伯胶、麦芽糊精、三聚甘油单硬脂酸酯、低聚木糖的重量比为50-55:3-5:2-4:4-6:1-2;
所述冻干保护剂的制备方法为:将预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖混合均匀后,置于球磨机中进行球磨,控制球磨时的球料比为12-15:1,转速为280-300rpm,时间为40-45min,球磨结束得到混合粉,将混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素混合后进行电磁震荡处理,控制电磁震荡处理的频率为130-150kHz,时间为4-5min,电磁震荡结束,得到冻干保护剂;
所述冻干保护剂的制备中,预糊化淀粉、葡萄糖、麦芽糊精、乳糖的重量比为15-18:3-5:4-6:2-3;
所述冻干保护剂的制备中,混合粉、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮、茶皂素的重量比为30-32:2-4:2-3:1-1.5;
所述改性剂的组成,按重量份计,由以下成分组成:5-7份淀粉微球,1-2份酪蛋白酸钠,0.5-0.8份大豆磷脂,0.1-0.3份硬脂酰乳酸钙;
所述淀粉微球的制备方法为:将玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1788、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠加入去离子水中,将温度升高至50-55℃,然后开启搅拌并将搅拌速度控制到200-220rpm,搅拌30-35min后,停止搅拌,得到初级淀粉液,将初级淀粉液以3-4℃/min的速度降温至-20℃至-15℃,在-20℃至-15℃下静置17-20min,然后以1.5-2℃/min的速度升温至32-35℃,在32-35℃下进行以200-220rpm的搅拌速度搅拌15-20min,然后对初级淀粉液进行真空喷雾干燥,控制真空喷雾干燥中的真空度为300-400Pa,进口温度为135-140℃,出口温度为70-75℃,真空喷雾干燥结束,得到淀粉微球;
所述淀粉微球的制备中,玉米淀粉、环糊精、聚乙烯醇1799、海藻酸丙二醇酯、三偏磷酸钠的重量比为20-22:2-4:1-3:2-5:2-4。
2.根据权利要求1所述的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,其特征在于,所述制备种子液的方法为:分别将冷冻保存的植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、副干酪乳杆菌、动物双歧杆菌、两歧双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌在固体LB平板上划线进行活化,然后分别从LB平板中挑选单菌落接种于装有100mL液体培养基的250mL锥形瓶中,将250mL锥形瓶放入摇床进行摇床培养,控制摇床培养的温度为36-38℃,转速为220-240rpm,时间为12-14h,摇床培养结束后分别得到植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液;
所述液体培养基,由以下成分组成:3-4g/L葡萄糖,2-3g/L胰蛋白胨,0.5-0.7g/L红糖,0.3-0.5g/L磷酸氢二钠,0.2-0.4g/L磷酸二氢钠,剩余为去离子水。
3.根据权利要求1所述的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,其特征在于,所述制备发酵液的方法为:分别将植物乳杆菌种子液、鼠李糖乳杆菌种子液、副干酪乳杆菌种子液、动物双歧杆菌种子液、两歧双歧杆菌种子液、罗伊氏乳杆菌种子液依次接种于同一MRS液体培养基中,控制植物乳杆菌的接种量为1-1.5%,鼠李糖乳杆菌的接种量为1.5-2%,副干酪乳杆菌的接种量为1.5-2%,动物双歧杆菌的接种量为2-2.5%,两歧双歧杆菌的接种量为2-2.5%,罗伊氏乳杆菌的接种量为0.5-1%,接种完成后进行搅拌发酵培养,控制搅拌发酵培养的温度为36-38℃,转速为320-340rpm,通气量为1.5-1.7vvm,时间为18-20h,搅拌发酵培养结束得到发酵液;
所述MRS液体培养基,由以下成分组成:4-6g/L胰蛋白胨,5-7g/L葡萄糖,4-5g/L酵母膏,1.5-2g/L牛肉膏,1-1.2g/L吐温80,0.8-1g/L磷酸氢二钾,0.3-0.5g/L硫酸镁,剩余为去离子水。
4.根据权利要求1所述的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,其特征在于,所述干燥的方法为:对发酵液进行离心分离,控制离心分离时的转速为2800-3000rpm,时间为5-6min,离心分离结束后得到的固相物作为菌泥,对菌泥进行真空冷冻干燥处理,控制真空冷冻干燥处理的温度为-40℃至-35℃,真空度为400-500Pa,处理时间为50-55min,真空冷冻干燥结束得到菌粉。
5.根据权利要求1所述的具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物,其特征在于,所述具有降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物的制备方法为:将改性菌粉、中药微胶囊、冻干保护剂、改性剂混合均匀后进行真空冷冻干燥,控制真空冷冻干燥处理的温度为-35℃至-30℃,真空度为500-700Pa,处理时间为40-45min,真空冷冻干燥结束,得到降低血脂和体脂功能的益生菌菌群组合物。
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