CN104974202A - 一种从天然产物中提取分离牡荆素木糖苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种提取效率高，易于实现工业化的分离提纯牡荆素木糖苷的方法。工艺步骤包括：乙醇提取、大孔吸附树脂柱层析、制备高效液相色谱分离纯化。本发明制备的牡荆素木糖苷纯度达到90％以上，制备方法具有安全、简单、成本较低，适用于工业生产的特点。
Description
技术领域
本发明涉及从天然产物中提取分离牡荆素木糖苷的方法，特别是一种从木菠萝叶中提取分离牡荆素木糖苷的方法。
背景技术
牡荆素木糖苷或牡荆素木糖甙，其英文名称为vitexin-2″-O-xyloside或者vitexin-2-O-xyloside，分子式C26H28O14，分子量：564，结构式如下：
木菠萝(Artocarpus heterophyllus lam)为桑科木菠萝属植物，其果实又称菠萝蜜、树菠萝、蜜冬瓜、牛肚子果等，为世界著名热带水果，原产于热带亚洲，在热带潮湿地区广泛栽培，引入我国已有1000多年历史。木菠萝的果肉性平、味甘微酸、无毒，有生津、止渴解烦、醒酒、益气、助消化之功效。《本草纲目》中记载：“菠萝蜜生交趾南番诸国。内肉层叠如桔，食之味至甜美如蜜，瓤韦，甘香微酸，止渴解烦，醒酒益气，令人悦泽，核中仁，补中益气，令人不饥轻健。”木菠萝是集水果、木本粮食及珍贵用材于一体的热带树种。目前国内外对木菠萝叶的研究文献较少，从目前已有的化学成分文献报道中可知，木菠萝叶中的化学成分主要为黄酮类化合物、多糖类化合物和多酚类化合物等。
牡荆素木糖苷在植物中分布并不广泛，目前对其各方面的研究文献都很少，在已有的文献报道中可知，牡荆素木糖苷具有一定的药理活性，其具有抗癌和抗氧化的药理作用。虽然有文献报道木菠萝叶中含有黄酮类化合物，但是到目前为止，没有任何文献报道木菠萝叶中含有牡荆素木糖苷，也没有任何文献报道过从木菠萝叶中提取分离高纯度牡荆素木糖苷的制备方法。
发明内容
本发明的目的是提供一种能源消耗小，牡荆素木糖苷得率在70％以上，纯度达90％以上，产量大，易于实现工业化的牡荆素木糖苷提取工艺。
本发明的目的采用如下技术方案实现：
(1)乙醇提取：将木菠萝叶粉碎后用30～50％的乙醇提取，料液比为1∶10～1∶15，提取方法可以有以下几种：回流提取法、超声提取法和微波提取法，提取次数为2～3次，提取时间每次为30～60分钟，合并提取液，回收乙醇，并将提取液浓缩至料液比为1∶0.5～1∶0.8，静置12～24小时，过滤，得到浓缩液。
(2)大孔吸附树脂柱层析：上述浓缩液通过8～10倍体积的大孔吸附树脂进行饱和吸附，先后用纯水和不同浓度的乙醇溶液进行洗脱，将含有牡荆素木糖苷的洗脱液减压浓缩，得到含牡荆素木糖苷粗品的浸膏。
(3)制备高效液相色谱分离纯化：将上述含牡荆素木糖苷粗品的浸膏用3～5倍量体积的纯水溶解，用制备高效液相色谱进行分离纯化，将含有牡荆素木糖苷的洗脱液减压浓缩，得牡荆素木糖苷。
上述牡荆素木糖苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB-8、HZ-806、HPD-100、HPD-400和X-5。
上述牡荆素木糖苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂柱层析的洗脱过程为：先用4～5倍量柱体积的纯水洗脱去掉大分子量的水溶性杂质，再用4～5倍量柱体积的10～20％乙醇洗脱去掉分子量较小的极性杂质，最后用4～5倍量柱体积30～60％乙醇洗脱得到牡荆素木糖苷粗品。
上述牡荆素木糖苷的制备方法，其特征在于所述制备高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱为全制备或者半制备ODS色谱柱，流动相为15～30％乙腈或者20～40％甲醇，紫外检测波长为270nm或者330nm。
本发明的有益效果
和现有技术相比，本发明有如下有益效果：
1、本发明方法的提取效率较好，经高效液相色谱法检测，对木菠萝叶中所含牡荆素木糖苷的提取得率达70％以上。
2、本发明制备的牡荆素木糖苷纯度较高，经高效液相色谱法检测，牡荆素木糖苷的含量可达到90％以上。
3、本发明的原料为木菠萝叶，木菠萝树在中国广西、广东和海南等南方省份分布很广，其叶子一般是被视为农作物废弃物而遗弃掉，既造成极大的浪费，同时也对环境造成不良影响，本发明提供了木菠萝叶废物利用的新用途。
4、本发明分离的牡荆素木糖苷为首次在木菠萝叶中分离得到，该化合物具有一定抗癌和抗氧化的药理活性，本发明为充分利用牡荆素木糖苷的药用价值提供了高纯度牡荆素木糖苷的制备方法。
5、目前没有任何文献报道过从天然产物中制备牡荆素木糖苷的方法，本发明具有溶剂安全、工艺简单、成本较低，适用于工业生产的特点。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。
实施例1
取1kg木菠萝叶(经高效液相色谱法检测，此批木菠萝叶中牡荆素木糖苷的含量为2.5mg/g，1kg木菠萝叶总共含有2.5g的牡荆素木糖苷)，粉碎成粗粉，加入15L浓度为30％的乙醇回流提取60分钟，过滤，药渣加入10L浓度为30％的乙醇回流提取30分钟，过滤，合并两次提取液，减压回收乙醇，并将提取液浓缩至0.5L，提取液室温静置12小时，过滤，得到浓缩液。浓缩液通过柱体积5L的D101大孔吸附树脂柱进行饱和吸附，先后用20L纯水和20L 10％的乙醇洗脱除杂，接着用20L 30％的乙醇溶液洗脱牡荆素木糖苷，将30％乙醇洗脱液减压回收乙醇至干燥，所得浸膏用3倍量体积的超纯水超声溶解，溶液用微孔滤膜过滤，滤液用高效液相色谱法进行进一步分离纯化，色谱条件为：制备高效液相色谱仪(LC-8A，日本岛津公司)，半制备ODS色谱柱(10×250mm，5μm，美国菲罗门公司)，进样量为1mL，流动相为18％的乙腈，流速为5mL/min，检测波长为270nm。收集含有牡荆素木糖苷的洗脱液减压浓缩，得到1.95g含量为93.2％的牡荆素木糖苷(提取得率为78.0％)。
提取得率的计算公式如下：
实施例2
取1kg木菠萝叶(经高效液相色谱法检测，此批木菠萝叶中牡荆素木糖苷的含量为2.5mg/g，1kg木菠萝叶总共含有2.5g的牡荆素木糖苷)，粉碎成粗粉，加入15L浓度为50％的乙醇超声提取60分钟，过滤，药渣加入10L浓度为50％的乙醇超声提取30分钟，过滤，合并两次提取液，减压回收乙醇，并将提取液浓缩至0.8L，提取液室温静置24小时，过滤，得到浓缩液。浓缩液通过柱体积6.5L的X-5大孔吸附树脂柱进行饱和吸附，先后用30L纯水和30L 20％的乙醇洗脱除杂，接着用30L 50％的乙醇溶液洗脱牡荆素木糖苷，将50％乙醇洗脱液减压回收乙醇至干燥，所得浸膏用5倍量体积的超纯水超声溶解，溶液用微孔滤膜过滤，滤液用高效液相色谱法进行进一步分离纯化，色谱条件为：制备高效液相色谱仪(LC-8A，日本岛津公司)，半制备ODS色谱柱(20×250mm，5μm，日本岛津公司)，进样量为5mL，流动相为25％的甲醇，流速为10mL/min，检测波长为330nm。收集含有牡荆素木糖苷的洗脱液减压浓缩，得到2.03g含量为95.1％的牡荆素木糖苷(提取得率为81.2％)。
虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
Claims (4)
1.一种从天然产物中提取分离牡荆素木糖苷的方法，包括以下几个步骤：
(1)乙醇提取：将木菠萝叶粉碎后用30～50％的乙醇提取，料液比为1∶10～1∶15，提取方法可以有以下几种：回流提取法、超声提取法和微波提取法，提取次数为2～3次，提取时间每次为30～60分钟，合并提取液，回收乙醇，并将提取液浓缩至料液比为1∶0.5～1∶0.8，静置12～24小时，过滤，得到浓缩液；
(2)大孔吸附树脂柱层析：上述浓缩液通过8～10倍体积的大孔吸附树脂进行饱和吸附，先后用纯水和不同浓度的乙醇溶液进行洗脱，将含有牡荆素木糖苷的洗脱液减压浓缩，得到含牡荆素木糖苷粗品的浸膏；
(3)制备高效液相色谱分离纯化：将上述含牡荆素木糖苷粗品的浸膏用3～5倍量体积的纯水溶解，用制备高效液相色谱进行分离纯化，将含有牡荆素木糖苷的洗脱液减压浓缩，得到牡荆素木糖苷。
2.根据权利要求1所述牡荆素木糖苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂的型号为D101、AB-8、HZ-806、HPD-100、HPD-400和X-5。
3.根据权利要求1所述牡荆素木糖苷的制备方法，其特征在于所述大孔吸附树脂柱层析的洗脱过程为：先用4～5倍量柱体积的纯水洗脱去掉大分子量的水溶性杂质，再用4～5倍量柱体积的10～20％乙醇洗脱去掉分子量较小的极性杂质，最后用4～5倍量柱体积30～60％乙醇洗脱得到牡荆素木糖苷粗品。
4.根据权利要求1所述牡荆素木糖苷的制备方法，其特征在于所述制备高效液相色谱的色谱条件为：色谱柱为全制备或者半制备ODS色谱柱，流动相为15～30％乙腈或者20～40％甲醇，紫外检测波长为270nm或者330nm。
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| PING WEN，等: "C-glycosylfavones and aromatic glycosides from Campylotropis hirtella(Franch.) Schindl.", 《ASIAN JOURNAL OF TRADITIONAL MEDICINES》 * |
| 江新德，等: "菠萝蜜叶中水溶性黄酮的分离与纯化", 《南昌工程学院学报》 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105254691A (zh) * | 2015-10-27 | 2016-01-20 | 中国科学院华南植物园 | 一种制备2”-O-β-D-xylosylvitexin的方法 |
| CN105254691B (zh) * | 2015-10-27 | 2018-07-06 | 中国科学院华南植物园 | 一种制备2”-O-β-D-xylosylvitexin的方法 |
| CN114452293A (zh) * | 2022-02-23 | 2022-05-10 | 深圳市瑞世兴科技有限公司 | 牡荆素木糖苷的降尿酸用途及其制备方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104974202B (zh) | 2017-11-28 |
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