CN104958287A - 一种阿魏酸衍生物作为神经保护药物的用途 - Google Patents

Abstract

一类阿魏酸衍生物在制备治疗和/或预防与神经细胞损伤相关的神经变性疾病的药物中的应用。所述神经变性疾病包括但不限于阿尔兹海默病、血管性痴呆、帕金森病、多发性硬化、糖尿病神经病变、缺血性脑卒中和出血性脑卒中。

Description

一种阿魏酸衍生物作为神经保护药物的用途

技术领域

本发明涉及一种阿魏酸衍生物在制备治疗和/或预防与神经细胞损伤相关的神经变性疾病的药物中的用途，属于医药领域。

背景技术

阿魏酸（ferulic acid），化学名为4-羟基-3-甲氧基苯丙烯酸，是植物界普遍存在的一种酚酸类化合物，也是川芎、当归、升麻、藁本等中药的药效成分之一。阿魏酸具有抗血栓、抗血小板聚集、抗动脉粥样硬化、降血脂、抗氧化、抗炎、镇痛等多种药理作用。阿魏酸及其钠盐临床用于冠心病、动脉硬化、脑血管病、肾小球疾病、肺动脉高压、糖尿病性血管病变、脉管炎等血管性疾病的辅助治疗以及白细胞和血小板减少，亦可用于偏头痛、血管性头痛的治疗。

研究表明，阿魏酸及其钠盐具有神经保护作用。阿魏酸钠对慢性脑缺血造成的神经氧化损伤具有保护作用（周红伟, 章军建, 熊丽. 慢性脑缺血大鼠海马PARP、MDA的表达及阿魏酸钠的抗氧化作用. 中风与神经疾病杂志, 2005 (3): 213~215.）；阿魏酸钠可减轻谷氨酸等兴奋性氨基酸所致的神经元损伤（邓奕, 汪宁, 朱荃, 等. 阿魏酸对损伤神经细胞的保护作用. 中药药理与临床, 2008, 24: 32~34.）；阿魏酸钠可降低细胞兴奋性，减少大脑梗死面积，对减轻局灶性脑缺血损伤（王强, 熊利泽, 陈绍洋, 等. 阿魏酸钠对局灶性脑缺血突触后致密物质95活化的影响. 中国中西医结合急救杂志, 2003, 10: 138~141.）；阿魏酸钠还对阿尔兹海默病的主要致病因素β-淀粉样蛋白引起的神经细胞损伤具有保护作用（姚素艳, 邹金发, 李淑云, 等. 阿魏酸钠对淀粉样β蛋白致神经细胞损伤的保护作用. 中国临床康复, 2005, 45: 26~28+197.）。

由于阿魏酸及其钠盐亲脂性差、难以透过血脑屏障，且存在生物利用度低、体内有效药物浓度维持时间短等问题，这些缺陷严重限制了其作为神经保护药物的临床应用。因此，以阿魏酸为先导化合物进行结构改造，对于发现活性更好的神经保护药物具有重要意义。

发明内容

为克服阿魏酸及其钠盐已有的缺陷和不足，获得更好的神经保护治疗效果，申请人提出了本发明。

本发明的目的之一，提供一种阿魏酸衍生物在制备治疗和/或预防与神经细胞损伤相关的神经变性疾病的药物中的应用。所述神经变性疾病包括但不限于阿尔兹海默病、血管性痴呆、帕金森病、多发性硬化、糖尿病神经病变、缺血性脑卒中和出血性脑卒中。

本发明所述的阿魏酸衍生物，其特征在于此类化合物的结构通式为：

                                                      

通式Ⅰ和Ⅱ中：R₁表示H或乙酰基；R₂、R₃独立地表示H、羟基、羟甲基、羟乙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、乙酰氧基、甲酰基、乙酰基、硝基、氨基、N-甲基氨基、N、N-二甲基氨基或羧基。

本发明所述的阿魏酸衍生物，优选阿魏酸-4-羟甲基苯酚酯、阿魏酸-3-羟甲基苯酚酯、阿魏酸-4-羟基苯酚酯、阿魏酸-4-甲氧基苯酚酯、阿魏酸-4-甲酰基苯酚酯、阿魏酸-4-羧基苯酚酯、阿魏酸-4-乙酰氧基苯酚酯、阿魏酸-4-羟基苯甲醇酯、阿魏酸-3-羟基苯甲醇酯、阿魏酸-4-甲氧基苯甲醇酯、阿魏酸-4-甲酰基苯甲醇酯、阿魏酸-4-乙酰氧基苯甲醇酯、阿魏酸-3-甲氧基-4-羟基苯甲醇酯、阿魏酸-3,4-二羟基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-4-羟甲基苯酚酯、乙酰阿魏酸-4-甲酰基苯酚酯、乙酰阿魏酸-4-羟基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-4-甲氧基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-3-甲氧基-4-羟基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-3,4-二羟基苯甲醇酯。

本发明所述的阿魏酸衍生物，进一步优选阿魏酸-4-羟甲基苯酚酯（C-1）、阿魏酸-4-羟基苯甲醇酯（C-2）、阿魏酸-4-甲酰基苯酚酯（C-3），其化学结构式如下：

   

本发明的目的之一，提供一种药物组合物，包括治疗有效量的一种或多种阿魏酸衍生物。

作为优选的实施方案之一，该药物组合物可进一步加入一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制成药学上可接受的药物制剂。

所述“治疗有效量”是指引起研究者或医生所针对的组织、系统或动物的生物或医药反应的药物或药剂的量。

所述“组合物”是指通过将一种以上物质或组份混和而成的产品。

所述“药学上可接受的载体”是指药学上可接受的物质、组合物或载体，如：液体或固体填充剂、稀释剂、赋形剂、溶剂或包囊物质，它们携带或转运某种化学物质。

本发明所述的药物制剂包括片剂、胶囊剂、丸剂、颗粒剂、滴丸剂、散剂、锭剂、注射剂、冻干粉针、糖浆剂、口服液、透皮贴剂、喷雾剂，经口服、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、舌下、透皮、口腔喷雾、鼻腔喷雾途径给药。

实验显示本发明所公开的阿魏酸衍生物不仅能够减轻LPS诱导的细胞炎症损伤，还能减轻H₂O₂诱导的细胞自由基损伤，改善细胞活力，具有显著的神经保护作用。

附图说明

以下，结合附图来详细说明本发明的实施方案，其中：图1为正常组（Con）、模型组（LPS）和经不同浓度本发明化合物（C-1、C-2和C-3）及阿魏酸（FA）预处理后的RAW264.7巨噬细胞分泌NO的浓度。与模型组比较：** P < 0.01；*** P < 0.001。

图2为正常组（Con）、模型组（LPS）和经本发明化合物（C-1、C-2和C-3，10 μM）及阿魏酸（FA）预处理后的RAW264.7巨噬细胞分泌IL-6的浓度。与模型组比较：** P < 0.01；*** P < 0.001。

图3为对照组、H₂O₂损伤模型组和经本发明化合物（C-1、C-2和C-3，10 μM）及阿魏酸（FA）预处理后的PC12细胞的存活率。与模型组比较：* P < 0.05；** P < 0.01；*** P < 0.001。

具体实施方式

以下实施例是对本发明的进一步说明，但绝不是对本发明范围的限制。下面参照实施例进一步详细阐述本发明，但是本领域技术人员应当理解，本发明并不限于这些实施例以及使用的制备方法。而且，本领域技术人员根据本发明的描述可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，但这些都将包括在本发明的范围内。

实施例1：阿魏酸衍生物对NO的影响。

数生长期的RAW264.7巨噬细胞，调整细胞密度为5×10⁵个/ml，接种于96孔板，100 μl/well，置于37 ℃、5%CO₂培养箱中培养。待细胞贴壁20 h后，弃去孔内培养基，并加入80 μl/well基础培养基，同时加10 μl/well不同浓度的受试化合物处理，1 h后加入LPS，终浓度为1 μg/ml，20 h后收集细胞上清液。采用比色法，以NaNO₂显色，于550 nm波长处检测NO含量。

结果显示，LPS刺激RAW264.7巨噬细胞20 h后，NO含量显著增加。而阿魏酸衍生物能剂量依赖性的抑制NO产生，但阿魏酸对LPS引起的NO分泌增加则未表现出抑制作用。结果见图1。

实施例2：阿魏酸衍生物对促炎细胞因子IL-6生成的影响。

取处于对数生长期的RAW264.7巨噬细胞，调整细胞密度为5×10⁵个/ml，接种于96孔板，100 μl/well，置于37 ℃、5%CO₂培养箱中培养。待细胞贴壁20 h后，弃去孔内培养基，并加入80 μl/well基础培养基，同时加10 μl/well不同的受试化合物（终浓度10 μM）处理，1 h后加入LPS，终浓度为1 μg/ml，20 h后收集细胞上清液。采用双抗体夹心ABC-ELISA法测定IL-6浓度。

结果表明，与正常组比较，仅用LPS处理的RAW264.7巨噬细胞培养上清中IL-6含量显著升高。但是，经药物预处理1 h后，10 μM的阿魏酸衍生物均能显著降低IL-6的分泌，且效果优于阿魏酸。结果见图2。

实施例3：阿魏酸衍生物对H₂O₂诱导的神经细胞损伤的保护作用。

取处于对数生长期的PC12细胞，调整细胞密度为1 × 10⁶个/ml，接种于96孔板，100 μL/well，置37 ℃、5% CO₂培养箱中培养24 h。更换培养液，给药组分别加入不同的受试化合物（终浓度10 μM）预处理1 h，除正常组外加入H₂O₂（终浓度200 μM）造成细胞自由基损伤，再培养24 h。然后依据MTT法检测每组的细胞活力，即每孔加入5 mg/mL MTT 15 μL，继续培养4 h，弃去上清液，每孔加入200 μL DMSO，反复振荡5 min，直至蓝紫色结晶完全溶解，用酶标仪以490 nm波长测定各孔的OD值。

结果表明，本发明所公开的阿魏酸衍生物能够减轻H₂O₂诱导的PC12 细胞损伤，且效果优于阿魏酸。结果见图3。

Claims (7)

1.一种阿魏酸衍生物在制备治疗和/或预防与神经细胞损伤相关的神经变性疾病的药物中的应用，所述神经变性疾病包括但不限于阿尔兹海默病、血管性痴呆、帕金森病、多发性硬化、糖尿病神经病变、缺血性脑卒中和出血性脑卒中。

2.根据权利要求1所述的阿魏酸衍生物，其特征在于选自通式Ⅰ和Ⅱ：

                                                  

通式Ⅰ和Ⅱ中：R₁表示H或乙酰基；R₂、R₃独立地表示H、羟基、羟甲基、羟乙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、乙酰氧基、甲酰基、乙酰基、硝基、氨基、N-甲基氨基、N、N-二甲基氨基或羧基。

3.根据权利要求1所述的阿魏酸衍生物，其特征在于包括阿魏酸-4-羟甲基苯酚酯、阿魏酸-3-羟甲基苯酚酯、阿魏酸-4-羟基苯酚酯、阿魏酸-4-甲氧基苯酚酯、阿魏酸-4-甲酰基苯酚酯、阿魏酸-4-羧基苯酚酯、阿魏酸-4-乙酰氧基苯酚酯、阿魏酸-4-羟基苯甲醇酯、阿魏酸-3-羟基苯甲醇酯、阿魏酸-4-甲氧基苯甲醇酯、阿魏酸-4-甲酰基苯甲醇酯、阿魏酸-4-乙酰氧基苯甲醇酯、阿魏酸-3-甲氧基-4-羟基苯甲醇酯、阿魏酸-3,4-二羟基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-4-羟甲基苯酚酯、乙酰阿魏酸-4-甲酰基苯酚酯、乙酰阿魏酸-4-羟基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-4-甲氧基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-3-甲氧基-4-羟基苯甲醇酯、乙酰阿魏酸-3,4-二羟基苯甲醇酯。

4.根据权利要求2所述的阿魏酸衍生物，其特征在于包括阿魏酸-4-羟甲基苯酚酯（C-1）、阿魏酸-4-羟基苯甲醇酯（C-2）、阿魏酸-4-甲酰基苯酚酯（C-3）：

 。

5.一种药物组合物，包括治疗有效量的一种或多种如权利要求2所述的阿魏酸衍生物。

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于该药物组合物进一步含有一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂。

7.一种药物制剂，其特征在于主要由一种或多种如权利要求2所述的阿魏酸衍生物和一种或多种药学上可接受的载体或赋形剂制成。