CN104922658A - 一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂 - Google Patents

一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂 Download PDF

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CN104922658A CN201510420174.8A CN201510420174A CN104922658A CN 104922658 A CN104922658 A CN 104922658A CN 201510420174 A CN201510420174 A CN 201510420174A CN 104922658 A CN104922658 A CN 104922658A
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Abstract

本申请属于医学美容领域,尤其涉及一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂。本申请提供的组合物,以重量份数计,包括:干细胞生长因子0.03~4份;金银花提取物1~30份;蜂蜜50~300份;透明质酸0.1×10-3~1×10-3份;所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子中的至少两种。本申请通过在组合物中添加多种干细胞生长因子,显著提高了表皮细胞的增殖能力,同时通过优化组合物配方,高效发挥组合物中每种组分的功效,从而使该组合物具有丰富的营养成分、良好的保湿效果和抗氧化效果,进而使该组合物表现出优异的抗衰老功效。

Description

一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂
技术领域
本发明属于医学美容领域,尤其涉及一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂。
背景技术
皮肤是覆盖于人体表面的一个重要器官,由表皮、真皮、皮下组织和皮肤的附属器官构成,是外界环境和机体之间的一道天然屏障。然而,皮肤的保护作用是有限的,人的皮肤从20~25岁起就进入自然老化状态。一方面,随着年龄的增大,皮脂分泌量减少,角质细胞间质也减少,因而水份保持能力降低,皮肤的水份屏障功能逐步衰退,开始出现皮肤干燥问题;另一方面,表皮细胞分化能力降低,表皮恢复速率减慢,角质化功能衰退,角质层变薄,表皮萎缩产生细皱纹。
干细胞生长因子是医学美容领域新兴的一种抗衰老产品,其能激活机体内处于休眠状态下的各种干细胞群,以替代更新原有衰退和老化的组织细胞,达到组织器官功能的恢复,增强组织器官的活性,改善因衰老等因素所造成的细胞与细胞间、细胞与细胞外基质间的信息传递,增强和加快各组织细胞的新老更替。
因此,当干细胞生长因子能够源源不断地满足皮肤细胞需要时,皮肤的健康就会得到保证,皮肤老化问题就可以被有效地预防,皮肤就可以重新回到更年轻的状态。但是单独依靠干细胞生长因子能够达到的抗衰老效果有限,具体表现为其对细胞融合和细胞的增殖的促进效果不明显。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂,本发明提供的组合物具有显著的抗衰老效果。
本发明提供了一种具有抗衰老功效的组合物,以重量份数计,包括:
所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子中的至少两种。
优选的,所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子;
所述表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子的质量比为10~30:5~15:2~10:5~15。
优选的,所述干细胞生长因子包含于干细胞生长因子冻干粉中;所述干细胞生长因子冻干粉中干细胞生长因子的含量为30~80wt%。
优选的,所述干细胞生长因子冻干粉按照以下方法制备:
a)、培养间充质干细胞,收集细胞培养液;
b)、所述细胞培养液依次经过过滤和冻干,得到干细胞生长因子冻干粉。
优选的,所述金银花提取物含有新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸中的一种或多种。
优选的,所述金银花提取物含有新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸;
所述新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸的质量比为2~5:5~15:3~8:12~20。
优选的,所述透明质酸的数均分子量为5×105~15×105
本发明提供了一种具有抗衰老功效的生物制剂,包括水和上述技术方案所述的组合物。
优选的,所述组合物在生物制剂中的含量为50~350mg/mL。
优选的,所述生物制包括:
与现有技术相比,本发明提供了一种具有抗衰老功效的组合物及其制剂。本发明提供的组合物,以重量份数计,包括:干细胞生长因子0.03~4份;金银花提取物1~30份;蜂蜜50~300份;透明质酸0.1×10-3~1×10-3份;所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子中的至少两种。本发明通过在组合物中添加多种干细胞生长因子,显著提高了表皮细胞的增殖能力,同时通过优化组合物配方,高效发挥组合物中每种组分的功效,从而使该组合物具有丰富的营养成分、良好的保湿效果和抗氧化效果,进而使该组合物表现出优异的抗衰老功效。实验结果表明,在添加有本发明提供的组合物的培养基中进行细胞培养时,细胞融合度达到80%的耗时低于29h,培养8天后细胞总量增加200倍,说明本发明提供的组合物具有良好的抗衰老效果。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案,下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图仅仅是本发明的实施例,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据提供的附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的1号皿在低倍镜下观察到的细胞形态图;
图2是本发明实施例提供的4号皿在低倍镜下观察到的细胞形态图。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
本发明提供了一种具有抗衰老功效的组合物,以重量份数计,包括:
所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子中的至少两种。
本发明提供的具有抗衰老功效的组合物包括干细胞生长因子、金银花提取物、蜂蜜和透明质酸。其中,所述干细胞生长因子由具有刺激内源性干细胞生长的高效蛋白质和酶组成。在本发明中,所述干细胞生长因子包括表皮生长因子(EGF)、纤维细胞生长因子(FGF)、血小板源性生长因子(PDGF)和血管内皮生长因子(VEGF)中的至少两种,优选包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子。在本发明提供的一个干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子的实施例中,所述表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子的质量比为10~30:5~15:2~10:5~15;在本发明提供的另一个干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子的实施例中,所述表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子的质量比为10~18:8~15:2~5:5~10。
在本发明提供的一个实施例中,所述干细胞生长因子包含于干细胞生长因子冻干粉中。所述干细胞生长因子冻干粉中干细胞生长因子的含量优选为30~80wt%,更优选为33~50wt%。本发明对所述干细胞生长因子冻干粉的来源没有特别限定,可以采用市售的干细胞生长因子冻干粉,也可以按照以下方法进行制备:
a)、培养间充质干细胞,收集细胞培养液;
b)、所述细胞培养液依次经过浓缩和冻干,得到干细胞生长因子冻干粉。
在本发明提供的干细胞生长因子冻干粉的制备方法中,首先进行间充质干细胞的培养。其中,所述间充质干细胞优选由人体细胞组织经过组织贴壁法或酶消化法分离获得,所述人体细胞组织优选为脐带、胎盘或人体脂肪组织。在本发明中,培养所述间充质干细胞采用的培养基优选为无血清培养基,所述无血清培养基的型号优选为LONZA X-VIVO 15培养基、PC-1培养基、UltraMEM Reduced Serum培养基、UltraMDCKTM培养基或HL-1TM完全无血清培养基;培养所述间充质干细胞的细胞接种密度优选为105~106cell/mL。本发明优选向培养所述间充质干细胞的培养基中添加一定量的生长因子,所述生长因子优选为表皮生长因子(EGF),所述生长因子在培养基中的含量优选为1~10ng/mL。
间充质干细胞培养一段时间后,收集细胞培养液。在本发明中,优选收集第3代至第5代的细胞培养液。收集到的细胞培养液后,所述细胞培养液进行过滤,得到滤液。在本发明中,优选先采用0.4~0.45μm的滤膜对所述细胞培养液进行粗滤,之后再采用0.2~0.22μm的滤膜对所述细胞培养液进行精滤。本发明对所述过滤采用的设备没有特别限定,优选为本领域技术人员熟知的切向流过滤器。得到滤液后,对所述滤液进行冻干,得到干细胞生长因子冻干粉。本发明对所述冻干采用的设备没有特别限定,优选为本领域技术人员熟知的冻干机。
在本发明中,所述干细胞生长因子在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为0.03~4重量份;在本发明提供的一个实施例中,所述干细胞生长因子在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为0.03~1.6重量份;在本发明提供的另一个实施例中,所述干细胞生长因子在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为0.033~0.8重量份;在本发明提供的其他实施例中,所述干细胞生长因子在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为0.033~0.66重量份。在本发明中,所述干细胞生长因子的作用是促进表皮细胞的增殖和修复,同时通过与其他组分协同作用使本发明提供的具有抗衰老功效的组合物表现出良好的抗衰老功效。
在本发明中,所述金银花提取物提取自天然植物金银花,其主要成分为有机酸、黄酮、糖、挥发油和微量元素。在本发明中,所述金银花提取物的有效成分为有机酸。在本发明提供的一个实施例中,所述金银花提取物中的有机酸包括新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸中的一种或多种。在本发明提供的一个实施例中,所述新绿原酸在金银花提取物中的含量为2~5wt%;在本发明提供的另一个实施例中,所述新绿原酸在金银花提取物中的含量为4~5wt%。在本发明提供的一个实施例中,所述绿原酸在金银花提取物中的含量为5~15wt%;在本发明提供的另一个实施例中,所述绿原酸在金银花提取物中的含量为10~15wt%。在本发明提供的一个实施例中,所述咖啡酸在金银花提取物中的含量为3~8wt%;在本发明提供的另一个实施例中,所述咖啡酸在金银花提取物中的含量为5~8wt%。在本发明提供的一个实施例中,所述咖啡酰奎宁酸在金银花提取物中的含量为12~20wt%;在本发明提供的另一个实施例中,所述咖啡酰奎宁酸在金银花提取物中的含量为15~20wt%。在本发明提供的一个实施例中,所述金银花提取物含有新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸,所述新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸的质量比为2~5:5~15:3~8:12~20;在本发明提供的另一个实施例中,所述新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸的质量比为4~5:10~15:5~8:15~20。在本发明中,对所述金银花提取物的来源没有特别限定,可以采用市售的金银花提取物,也可以按照以下方法进行制备:
首先,使用溶剂对金银花粉末进行浸提。所述溶剂优选为乙醇水溶液,所述乙醇水溶液的浓度优选为40~50wt%。所述溶剂与金银花粉末的质量比优选为5~20:1,更优选为10~15:1。所述浸提的温度优选为60~90℃,更优选为70~80℃。所述浸提的时间优选为1~5h,更优选为2~3h。在本发明中,优选对金银花粉末进行多次浸提,所述多次浸提的次数优选为2~3次。
浸提完毕后,收集浸提液。所述浸提液调节pH值至2左右后进行萃取,所述萃取采用的萃取剂优选为乙酸乙酯。所述萃取剂与调节pH值后的浸提液的体积比优选为3~6:1,更优选为4~5:1。在本发明中,优选对调节pH值后的浸提液进行多次萃取,所述多次萃取的次数优选为4~5次。在本发明中,在所述浸提液进行pH调节之前,优选先对所述浸提液进行浓缩,所述浓缩的方式优选为减压浓缩。
萃取完毕后,收集萃取液。所述萃取液调节pH值至6~7后,静置分层,取水层。在本发明中,在所述萃取液进行pH调节之前,优选先对所述萃取液进行水洗,所述水洗的次数优选为2~3次。
获得水层后,所述水层依次进行浓缩和干燥,得到金银花提取物。所述浓缩的方式优选为加压浓缩;所述干燥的方式优选为常温风干。
在本发明中,所述金银花提取物在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为1~30重量份;在本发明提供的一个实施例中,所述金银花提取物在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为4~20重量份。在本发明中,所述金银花提取物的作用是提高表皮细胞的抗氧化能力,同时通过与其他组分协同作用使本发明提供的具有抗衰老功效的组合物表现出良好的抗衰老功效。
在本发明中,所述蜂蜜是蜜蜂从开花植物的花中采得的花蜜在蜂巢中酿制的蜜。在本发明中,所述蜂蜜在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为50~300重量份;在本发明提供的一个实施例中,所述蜂蜜在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为100~200重量份。在本发明中,所述蜂蜜的作用是为提供表皮细胞提供营养成分,同时通过与其他组分协同作用使本发明提供的具有抗衰老功效的组合物表现出良好的抗衰老功效。
在本发明中,所述透明质酸是一种酸性粘多糖。在本发明提供的一个实施例中,所述透明质酸的数均分子量为5×105~15×105。在本发明中,所述透明质酸在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为0.1×10-3~1×10-3重量份;在本发明提供的一个实施例中,所述透明质酸在所述具有抗衰老功效的组合物中的含量为0.1×10-3~0.5×10-3重量份。在本发明中,所述透明质酸的作用是对表皮细胞进行保湿,同时通过与其他组分协同作用使本发明提供的具有抗衰老功效的组合物表现出良好的抗衰老功效。
在本发明提供的一个实施例中,以重量份数计,所述组合物包括:
在本发明中,直接将组成所述具有抗衰老功效的组合物的各个组分进行混合,即可得到本发明提供的具有抗衰老功效的组合物。
本发明通过在组合物中添加多种干细胞生长因子,显著提高了表皮细胞的增殖能力,同时通过优化组合物配方,高效发挥组合物中每种组分的功效,从而使该组合物具有丰富的营养成分、良好的保湿效果和抗氧化效果,进而使该组合物表现出优异的抗衰老功效。实验结果表明,在添加有本发明提供的组合物的培养基中进行细胞培养时,细胞融合度达到80%的耗时低于29h,培养8天后细胞总量增加200倍,说明本发明提供的组合物具有良好的抗衰老效果。
本发明提供了一种具有抗衰老功效的生物制剂,包括水和上述技术方案所述的组合物。
本发明提供的具有抗衰老功效的生物制剂包括水和所述组合物。在本发明提供的一个实施例中,所述组合物在生物制剂中的含量为50~350mg/mL;在本发明提供的另一个实施例中,所述组合物在生物制剂中的含量为51~335mg/mL;在本发明提供的其他实施例中,所述组合物在生物制剂中的含量为104~221mg/mL。在本发明提供的一个实施例中,所述干细胞生长因子在所述生物制剂中的含量为0.03~4mg/mL;在本发明提供的另一个实施例中,所述干细胞生长因子在所述生物制剂中的含量为0.03~1.6mg/mL;在本发明提供的其他实施例中,所述干细胞生长因子在所述生物制剂中的含量为0.033~0.8mg/mL;在本发明提供的其他实施例中,所述干细胞生长因子在所述生物制剂中的含量为0.033~0.66mg/mL。在本发明提供的一个实施例中,所述干细胞生长因子以干细胞生长因子冻干粉的形式添加到所述具有抗衰老功效的生物制剂中,所述干细胞生长因子冻干粉中干细胞生长因子的含量优选为30~80wt%,更优选为33~50wt%。在本发明提供的一个实施例中,所述金银花提取物在所述生物制剂中的含量为1~30mg/mL;在本发明提供的另一个实施例中,所述金银花提取物在所述生物制剂中的含量为4~20mg/mL。在本发明提供的一个实施例中,所述蜂蜜在所述生物制剂中的含量为50~300mg/mL;在本发明提供的另一个实施例中,所述蜂蜜在所述生物制剂中的含量为100~200mg/mL。在本发明提供的一个实施例中,所述透明质酸在所述生物制剂中的含量为100~1000ng/mL;在本发明提供的另一个实施例中,所述透明质酸在所述生物制剂中的含量为100~500ng/mL。
在本发明提供的一个实施例中,所述生物制剂包括:
在本发明中,直接将干细胞生长因子、金银花提取物、蜂蜜、透明质酸和水进行混合,即可得到本发明提供的具有抗衰老功效的生物制剂,所述干细胞生长因子优选以干细胞生长因子冻干粉的形式与其他组分混合。
在本发明提供的一个实施例中,按照以下方式制备本发明提供的生物制剂:
首先配制金银花提取物水溶液、含干细胞生长因子冻干粉的透明质酸水溶液和蜂蜜水溶液;然后将金银花提取物水溶液、含干细胞生长因子冻干粉的透明质酸水溶液和蜂蜜水溶液混合;之后对混合得到的混合液进行过滤和浓缩,得到本发明提供的得到具有抗衰老功效的生物制剂。其中,所述金银花提取物水溶液中金银花提取物的含量为0.002~0.01g/mL;所述含干细胞生长因子冻干粉的透明质酸水溶液中透明质酸的含量优选为1~5μg/mL,干细胞生长因子冻干粉的含量优选为5~10mg/mL;所述蜂蜜水溶液中蜂蜜的含量优选为0.1~2g/mL。
本发明通过在生物制剂中添加多种干细胞生长因子,显著提高了表皮细胞的增殖能力,同时通过优化生物制剂配方,高效发挥组合物中每种组分的功效,从而使该生物制剂具有丰富的营养成分、良好的保湿效果和抗氧化效果,进而使该组合物表现出优异的抗衰老功效。实验结果表明,在培养基中添加10%(体积百分数)本发明提供的生物制剂后,其培养细胞时的细胞融合度达到80%的耗时低于29h,培养8天后细胞总量增加200倍,说明本发明提供的生物制剂具有良好的抗衰老效果。
为更清楚起见,下面通过以下实施例进行详细说明。
实施例1
干细胞生长因子的制备
取自体脂肪组织采用酶消化法分离获得原代间充质干细胞,该过程具体为:抽脂手术获得脂肪组织溶液,PBS(磷酸缓冲液)冲洗2~3次,加入终浓度为1wt%的BSA(牛血清白蛋白)和终浓度为0.1wt%的一型胶原酶,于振荡培养箱中37℃振荡30min;然后加入含10%(体积百分浓度)FBS(胎牛血清)的X-VIVO15无血清培养基,终止消化;之后80目网过滤未消化的组织,滤液400g离心10min;最后吸弃上面三层,下层的脂肪干细胞即为本实施例分离得到的原代间充质干细胞。
将原代间充质干细胞接种于含有5ng/mL EGF的LONZA X-VIVO15无血清培养基中,接种密度5×105cell/ml。3天一换液,收集第3至第5代细胞培养液。细胞培养液在Slice200切向流过滤器进行过滤,首先采用0.45μm滤膜过滤除去大颗粒物质,之后采用0.22μm滤膜过滤除去3KDa以下小颗粒物质,每次过滤的循环时间为3h。过滤结束后,滤液用冻干机冻干,得到干细胞生长因子冻干粉。
对上述干细胞生长因子冻干粉中的成分进行分析,结果为:干细胞生长因子含量为33wt%,具体为:EGF含量18wt%、FGF含量8wt%、PDGF含量2wt%、VEGF含量5wt%。
实施例2
金银花提取物的制备
首先取金银花粉末,加10倍质量的50wt%乙醇,80℃浸提2次,每次两小时,合并浸液并过滤;然后滤液减压浓缩,回收乙醇,将浓缩液的pH调至2左右,用4倍量的乙酸乙酯分4次萃取,合并萃取液;之后向萃取液中加适量水洗涤2次,用40wt%NaOH将pH调至6~7,静置分层,取水层;最后对水层加压浓缩至稠膏,常温风干,得到金银花提取物。
对上述金银花提取物的成分进行分析,结果为:新绿原酸含量4wt%、绿原酸含量10wt%、咖啡酸含量5wt%、咖啡酰奎宁酸含量15wt%。
实施例3
生物制剂的制备
配方设计:
制剂制备:
配制含干细胞生长因子冻干粉的透明质酸水溶液,其中,干细胞生长因子冻干粉含量1mg/mL,透明质酸含量为500ng/mL;配制蜂蜜含量1g/mL的蜂蜜水溶液;配制金银花提取物含量0.01g/mL的金银花提取物水溶液。将上述3种溶液混合均匀,经0.22μm滤膜过滤后,减压真空浓缩至各组分达到配方设计的含量,得到具有抗衰老功效的生物制剂。
实施例4
生物制剂的制备
配方设计:
制剂制备:
配制含干细胞生长因子冻干粉的透明质酸水溶液,其中,干细胞生长因子冻干粉含量1mg/mL,透明质酸含量为500ng/mL;配制蜂蜜含量1g/mL的蜂蜜水溶液;配制金银花提取物含量0.01g/mL的金银花提取物水溶液。将上述3种溶液混合均匀,经0.22μm滤膜过滤后,减压真空浓缩至各组分达到配方设计的含量,得到具有抗衰老功效的生物制剂。
实施例5
生物制剂的制备
配方设计:
制剂制备:
配制含干细胞生长因子冻干粉的透明质酸水溶液,其中,干细胞生长因子冻干粉含量1mg/mL,透明质酸含量为500ng/mL;配制蜂蜜含量1g/mL的蜂蜜水溶液;配制金银花提取物含量0.01g/mL的金银花提取物水溶液。将上述3种溶液混合均匀,经0.22μm滤膜过滤后,减压真空浓缩至各组分达到配方设计的含量,得到具有抗衰老功效的生物制剂。
实施例6
制剂抗衰老效果实验
人表皮纤维母细胞具有分泌胶原蛋白的功能,而人体的衰老体现在表皮纤维母细胞的衰老和胶原蛋白的流失,所以修复和促进表皮纤维母细胞的增殖是人体抗衰老的主要体现。
取正常生长表皮纤维母细胞1皿(1~2×106),消化平均分8皿(10cm小皿)接种,每皿接种量1×105个细胞。其中,1号和2号皿采用添加10%(体积百分浓度)FBS(胎牛血清)的DMEM高糖培养基;3号和4号皿采用添加10%(体积百分浓度)FBS和10%(体积百分浓度)实施例3制得的生物制剂的DMEM高糖培养基;5号和6号皿采用添加10%(体积百分浓度)FBS和10%(体积百分浓度)实施例4制得的生物制剂的DMEM高糖培养基;7号和8号皿采用添加10%(体积百分浓度)FBS和10%(体积百分浓度)实施例5制得的生物制剂的DMEM高糖培养基。每2~3天更换培养液一次,观察细胞生长速度和融合速度。
细胞培养24h后,用低倍镜(100×)对1号皿和4号皿中培养的细胞形态进行观察,结果如图1和图2所示。图1是本发明实施例提供的1号皿在低倍镜下观察到的细胞形态图;图2是本发明实施例提供的4号皿在低倍镜下观察到的细胞形态图。通过图1可以看出,1号皿的细胞未长满皿底,细胞融合度在60~70%左右;通过图2可以看出,4号皿的细胞长满皿底,排列紧密,细胞融合度达到80%以上;通过图1和图2的对比可知4号皿细胞增殖速度明显快于1号皿,说明本发明提供的生物制剂在促进表皮细胞增殖方面具有很好的效果。
上述细胞培养的细胞增殖数据如表1所示:
表1 细胞增殖数据表
组别(皿) 80%细胞融合度耗时(h) 第8天细胞总量(×106)
1、2 39;39 5.62;5.68
3、4 28;29 21.2;23.2
5、6 24;22 25.8;24.9
7、8 26;26 22.8;23.4
通过表1可以看出,3~8组细胞融合度达到80%的耗时比1~2组少10~17h,第8天细胞总量是1~2组的3~4倍,说明本发明提供的生物制剂在促进表皮细胞增殖方面具有很好的效果。5、6组细胞80%融合时间最短,第8天细胞量最大,所以最优生物制剂的配方为实施例4的生物制剂配方:金银花提取物20mg/ml;生长因子2mg/ml;蜂蜜200mg/ml;透明质酸300ng/mL。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种具有抗衰老功效的组合物,以重量份数计,包括:
所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子中的至少两种。
2.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述干细胞生长因子包括表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子;
所述表皮生长因子、纤维细胞生长因子、血小板源性生长因子和血管内皮生长因子的质量比为10~30:5~15:2~10:5~15。
3.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述干细胞生长因子包含于干细胞生长因子冻干粉中;所述干细胞生长因子冻干粉中干细胞生长因子的含量为30~80wt%。
4.根据权利要求3所述的组合物,其特征在于,所述干细胞生长因子冻干粉按照以下方法制备:
a)、培养间充质干细胞,收集细胞培养液;
b)、所述细胞培养液依次经过过滤和冻干,得到干细胞生长因子冻干粉。
5.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述金银花提取物含有新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸中的一种或多种。
6.根据权利要求5所述的组合物,其特征在于,所述金银花提取物含有新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸;
所述新绿原酸、绿原酸、咖啡酸和咖啡酰奎宁酸的质量比为2~5:5~15:3~8:12~20。
7.根据权利要求1所述的组合物,其特征在于,所述透明质酸的数均分子量为5×105~15×105
8.一种具有抗衰老功效的生物制剂,包括水和权利要求1~7任一项所述的组合物。
9.根据权利要求8所述的生物制剂,其特征在于,所述组合物在生物制剂中的含量为50~350mg/mL。
10.根据权利要求8所述的生物制剂,其特征在于,包括:
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