CN104876997A

CN104876997A - 一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法

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Publication number: CN104876997A
Application number: CN201510095429.8A
Authority: CN
Inventors: 李玉山
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2015-03-01
Filing date: 2015-03-01
Publication date: 2015-09-02

Abstract

一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，包括如下步骤：1)甘草次酸琥珀酸半酯的酯化反应；2)甘草次酸琥珀酸半酯的成盐反应；3)甘草次酸半琥珀酸酯二钠的纯化；4)3乙酰-18β-甘草次酸的酯化；5)3-乙酰-18α甘草次酸的纯化。本发明采用加入抗氧化剂无水亚硫酸钠和通入氮气保护，反应温度较低，有效避免氧化反应的发生，可有效改善产品色泽，无需特定的条件，反应过程温和易控。乙酰化中母液套用可以提高酰化反应收率，节约生产成本；固体催化剂回收，可重复使用、反应条件温和、产率高、操作简便、腐蚀性小和污染小等优点。

Description

一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法

技术领域

本发明涉及一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法。

背景技术

甘草次酸(Glycyrrhetinic acid)分子式：C₃₀H₄₆O₄，分子量：470.68384，CAS No.471-53-4，MDL No.MFCD00003706，EINECS No.207-444-6，RTECS No.RK0180000，BRN No.2229654。(3B，20B)-3-羟基-11-氧代-齐墩果-12-烯-29-酸，(3β，20β)-3-羟基-11-氧代-齐墩果-12-烯-29-酸，3β-羟基-11-氧-12-齐墩果烯-30-酸，甘草亭酸，18 beta甘草次酸，甘珀酸。英文别名：(2S，4AS，6AS，6BR，8AR，10S，12AS，12BR，14BR)-10-Hydroxy-2，4A，6A，6B，9，9，12A-Heptamethyl-13-oxo-1，2，3，4，4A，5，6，6A，6B，7，8，8A，9，10，11，12，12A，12B，13，14B-icosahydro-Picene-2-Carboxylicacid；(3beta，18alpha，20beta)-3-Hydroxy-11-oxoolean-12-en-29-oic acid；3beta-Hydroxy3-beta-Hydroxy-11-oxo-18beta，20beta-olean-12-en-29-oicacid；3 beta-Hydroxy-11-oxo-18beta-olean-12-en-30-oic acid；3b-hydroxy-11-oxo-18b，20b-olean-12-en-29-oic acid；3B-Hydroxy-11-oxo-18B-olean-12-en-30-oicacid；18-beta-glycyrrheticacid；3beta-Hydroxy-11-oxo-12-oleanen-30-oicacid：3-beta-hydroxy-11-oxo-olean-12-en-30-oicaci；3-beta-hydroxy-11-oxoolean-12-en-30-oicacid。甘草次酸琥珀酸半酯二钠盐又名甘铂酸钠(Carbenoxolone Sodium)，分子式：C₃₄H₄₈Na₂O₇，分子量：614.72，CAS No.7421-40-1，EINECS No.231-044-0，化学名：3-(3-羧基-1-氧代丙氧基)-11-氧代齐墩果烷-12-烯-29-甲酸二钠盐；18β-甘草次酸半琥珀酸酯二钠；英文名：18-beta-glycyrrhetinicacidhy Drogensuc Cinate，Disodiumsalt；20-beta)-3-bet；3-beta-hydroxy-11-oxoolean-12-en-30-oicacidhydrogensuccinate，disodiumsal；3-o-(beta-carboxypropionyl)-11-oxo-18-beta-olean-12-en-30-oicacid，disodium；disodiumglycyrrheti nylsuccina。英文别名：Disodium(2S，4aS，6aR，6aS，6bR，8aR，10s，12aS，14bR)-2，4a，6a，6b，9，9，12a-heptamethyl-10-(4-oxido-4-oxobutanoyl)oxy-13-oxo-3，4，5，6，6a，7，8，8a，10，11，12，14b-dodccahydro-1H-picenc-2-carboxylate。别名：生胃酮钠，甘珀酸钠为白色或类白色粉末，味微甜带皂味，有引湿性，粉末对鼻粘膜有刺激性。在乙醚、氯仿中不溶，在乙醇中溶解，在水中易溶。3-乙酰-18β-甘草次酸为亮白色结晶，溶于热氯仿，微溶于无水乙醇和乙酸乙酯，不溶于水。结构式如下：

甘草次酸在吡啶中易溶，在乙醇或氯仿中溶解，在汽油或乙醚中微溶，在水中不溶。甘草次酸3位羟基可生成酰化成酰胺，酯化成酯。甘草次酸具有以下药理作用：1)肾上腺皮质激素样作用，能促进钠、水潴留、排钾增加，呈现去氧皮质酮样作用，与氧化可的松同用出现协同作用，若仅用甘草次酸出现储钠能力丧失的阿狄森氏危象。其结构与皮质固醇类相似能产生钠潴留及抗利尿和抗炎作用。2)抗炎及抗免疫作用，具有保泰松或氢化可的松的抗炎作用，对多种急性炎症均有抑制作用。3)对消化系统的作用，可使血胆红素降低，尿胆红素排泄增加，此作用较葡萄醛酸内酯或蛋氨酸强，有良好的抗溃疡作用。4)镇咳去痰作用，甘草次酸对刺激神经引起的咳嗽均有明显的镇咳作用。5)抗肿瘤作用，甘草次酸对骨髓瘤有抑制作用，其钠盐对小鼠艾氏腹水癌及肉瘤-45细胞的生长有轻微的抑制。6)抗利尿作用，甘草次酸及其盐类有明显的抗利尿作用。能增强肾小管对钠氯的重吸收而抗利尿作用。7)对内耳听觉功能的影响，注射甘草次酸后豚鼠听神经动作电位反应阈值降低，具有提高豚鼠内耳听觉功能的作用。8)对乙酰胆碱酯酶的抑制作用，对乙酰胆碱酯酶有明显的抑制作用。9)对氧自由基的清除作用，对O-2和-OH有明显的清除作用，对化学发光有显著的抑制作用，有直接捕获氧自由基的作用。10)其它作用甘草次酸能抑制雌激素，体外能抑制金黄色葡萄球菌，中和破伤风毒素，抑制A-23187或f-MLP诱导的Neu(Ca²⁺)增加，延长小鼠在正常压及减压条件下的存活时间，增强小鼠组织缺氧和脑循环缺氧的耐受力，明显对抗急性心肌缺血心电图的变化。

甘草次酸3位羟基被取代后，其抗炎、抗溃疡的活性较为显著，且3，30位分别成酯后具有较高的抗炎活性。以二甲苯引起的小鼠耳肿胀模型评价其抗炎活性，结果表明，对18β-甘草次酸的结构修饰主要集中在C₃羟基、C₁₁羰基和C₂₀羧基等官能团上，通过在A环不同位置上引入环内和环外双键及羟基，同时利用重排反应合成了一系列新颖的A环开环衍生物，初步研究了它们对人体肝癌细胞(IIepG-2)的体外细胞毒活性，探讨了其构效关系^[3]。

义献[16]报道了甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，制备出一系列化合物。3-乙酰-18β-甘草次酸的制备：向三颈瓶中加入2.0g 18β-甘草次酸和32mL乙酸酐，加热回流1.5h，反应结束后，趁热加入10mL蒸馏水和5mL冰乙酸，冷却至室温，生成白色沉淀，抽滤；滤饼用蒸馏水洗涤4次，真空冷冻干燥得亮白色粉末2.1g，产率96％^[1]。3-羧基-4-烯-开环甘草次酸：将甘草次酸和KOH溶于THF-H₂O混合溶剂中，回流，反应液用稀盐酸调节pH，然后用二氯甲烷萃取，水及饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩。粗品经柱层析分离得白色粉末；3-乙酰基-2-烯-甘草次酸：将3-氧-甘草次酸和对甲苯磺酸溶于异丙烯基乙酸酯中回流，反应液用二氯甲烷溶解，水及饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品经柱层析分离得棕色固体；2-羟基-3-氧-甘草次酸：将甘草次酸和Na₂HPO₄溶于CH₂Cl₂中，于0℃下缓慢加入m-CPBA，室温下反应，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，得粗品；3-乙酰基-2，3-氧-甘草次酸：取此粗品溶于CH₂Cl₂和CH₃OH的混合溶剂中，然后加入KOH溶液，回流，反应液用HCl调pH，然后用二氯甲烷萃取，水及饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩.粗品经柱层析分离得白色粉末；2-羟基-1-烯-3-氧-甘草次酸：将3-氧-甘草次酸和t-BuOK溶于t-BuOH中，在通氧气条件下室温反应，反应液用稀盐酸调pH，用二氯甲烷萃取，水及饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色固体；A环内酯甘草次酸：将化合物溶于甲醇中，缓慢加入NaBH4，室温下反应后用盐酸终止反应，用乙酸乙酯萃取，水及饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩.粗品经柱层析分离得白色针状固体^[2]。2-羟基亚甲基-3-氧-甘草次酸：将甲酸乙酯和甲醇钠加入到甘草次酸的无水甲苯溶液中，于室温下搅拌，蒸除溶剂，用二氯甲烷溶解，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离，得白色粉末；2，3-二羧基-开环甘草次酸：将化合物和甲醇钠溶于甲醇和四氢呋喃的混合溶剂中，缓慢加入H₂O₂，于室温下搅拌，反应液用饱和硫代硫酸钠溶液洗涤后用乙酸乙酯萃取，有机相用水和饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色针状固体；2-肟-3-氧-甘草次酸：将化合物和叔丁醇钾溶于叔丁醇和四氢呋喃的混合溶剂中，在氮气保护下缓慢加入正丁基亚硝酸酯，于室温下搅拌，蒸除溶剂，经乙酸乙酯溶解后用水和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色片状固体；2-肟-3-羟基-甘草次酸：将化合物溶于甲醇中，缓慢加入硼氢化钠，于室温下反应3h，蒸除溶剂，经乙酸乙酯溶解后用水和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色粉末。2-氰基-3-醛基-开环甘草次酸：将化合物和对甲苯磺酰氯溶于无水吡啶中，于室温下反应后将反应液倒入水中，静置沉淀，过滤，所得固体干燥后进行柱层析分离得白色针状固体；2，3-环氧-甘草次酸甲酯：将化合物、间氯过氧苯甲酸和碳酸钾溶于二氯甲烷和甲醇的混合溶剂中，于室温下反应，反应液用亚硫酸钠溶液洗涤后用二氯甲烷萃取，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色片状固体；2，3-二羟基-甘草次酸甲酯：将化合物溶于1，4-二氧六环和水的混合溶剂中，缓慢加入高氯酸，于室温下反应，蒸除溶剂，用二氯甲烷溶解后分别用饱和碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品经柱层析分离得白色针状固体；2，3-二羟基-甘草次酸：将化合物和氢氧化钾溶于四氢呋喃和水的混合溶剂中，回流，蒸除溶剂，二氯甲烷溶解后用水和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色粉末；1-烯-2-羟基-3-氧-甘草次酸：将化合物溶于丙酮中，冰浴冷却后缓慢加入Jones’试剂(25mg CrO₃，0.4mL H₂O，0.1mL 98％H₂SO₄)，于室温下继续搅拌，加入异丙醇终止反应，蒸除溶剂，用二氯甲烷溶解，有机相用饱和食盐水洗涤，无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩.粗品进行柱层析分离得白色针状固体；A环内酯甘草次酸：将化合物、间氯过氧苯甲酸和碳酸氢钠溶于二氯甲烷中，于室温下搅拌，蒸除溶剂后静置，用二氯甲烷溶解后分别用亚硫酸钠溶液、碳酸氢钠溶液和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩，粗品进行柱层析分离得白色粉末；3-羧酸甲酯-4-羟基-开环甘草次酸：将化合物和甲醇钠溶于甲醇中，于室温下搅拌，蒸除溶剂，用二氯甲烷溶解后用水和饱和食盐水洗涤，有机相用无水硫酸镁干燥，过滤，浓缩.粗品进行柱层析分离得白色粉末；A环内酰胺和3-氰基-4-烯-开环甘草次酸：将化合物、对甲苯磺酰氯和DMAP溶于无水吡啶中，回流1后倒入水中，静置沉淀，过滤，所得固体干燥后进行柱层析分离得白色片状固体^[3]。N-乙酰胺基乙酸甘草次酸醋乙酰甘氨酸和DCC溶于CH₂Cl₂，冰浴搅拌，滴入甘草次酸与催化量DMAP的CH₂Cl₂溶液，超声回流，TLC显示反应结束后经柱色谱分离得白色结晶作为对照品^[4]。在圆底烧瓶中，分别加入甘草次酸、DCC和CH₂Cl₂，冰浴下搅拌后，将甘草次酸与催化量DMAP的CH₂Cl₂溶液逐滴滴至上述反应体系中，室温下搅拌，TLC监测至反应结束，过滤除去生成的N，N-二环己基脲，滤液用水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压脱溶，得淡黄色固体，柱层析分离，以乙酸乙酯-石油醚(1∶4)为展开剂，得白色结晶。用同样的方法，合成的5种新型甘草次酸3位酯类衍生物^[5]。甘草次酸3-位羟基的结构修饰取甘草次酸甲/乙酯溶于吡啶中，再加入无水乙酸酐，连接干燥管后常温搅拌，待反应结束后将反应液倾入冰-水-稀盐酸中，放置过夜。抽滤，用盐酸冲至无吡啶味，以水冲洗至中性，再用甲醇重结晶，得白色粒状晶体，分别为甘草次酸甲酯-3-O-乙酸酯和甘草次酸乙酯-3-O-乙酸酯^[6]。

甘草次酸琥珀酸半酯二钠为甘草次酸的衍生物，为抗消化性溃疡药。其作用特点是：①直接与溃疡部位的上皮细胞接触，不增加胃黏液的黏稠度下促进胃黏液的分泌，加强胃黏膜保护不受胆汁的损伤。②减少胃上皮细胞的脱落，延长其存活时间，促进组织再生和愈合，具自体保护和抗溃疡作用。3.在胃黏膜细胞内抑制胃蛋白酶原，在胃内极易与胃蛋白酶结合，抑制酶的活力，起到抗胃黏膜攻击因子的作用。4.可预防胆汁反流入胃，避免H反弥散透入胃黏膜上皮。本品胃肠道吸收，胃内pH＞2时，吸收减少。本品99％以上与血浆蛋白结合，血浆中治疗浓度为10-100μg/mL。口服1h后血药浓度可达峰值。由于本品代谢物存在肠肝循环，故口服2-3h后血药浓度可出现第二次高峰。血药浓度峰值为20-30 μg/ml。本药在肝脏与葡萄糖醛酸结合后，经胆汁随粪便排泄，极少量随尿排出。甘珀酸钠适应症：①用于治疗慢性胃溃疡，对十二指肠溃疡疗效略差；②用于治疗轻度肾上腺皮质功能不全；③用于治疗口腔溃疡；④用于胃食管反流综合征。

甘铂酸钠系60年代至今临床常用抗溃疡药，本品主治胃溃疡、十二指肠溃疡、食管炎、镇咳祛痰等。1977年Bioiex Lioiex Ltd的专利报道其可治疗子宫癌、直肠癌、乳腺癌及膀胧癌，无一般抗癌药的副作用，甘铂酸钠可治疗顽固性口腔溃疡、粘膜炎等，本品与黄嘿吟衍生物的协同作用治疗胃肠病[7-12]。彭宇等 ^[13]报道了甘铂酸钠用4-二甲胺基吡啶作催化剂，氯仿作溶剂，考察了催化剂用量、反应物配比、温度诸因素对甘铂酸钠的质量及收率的影响，由正交设计选出最佳反应条件，反应时间4h，反应温度80℃。专利CN201010551625.9报道了甘草次酸和丁二酸酐在1，1-二氯乙烷或氯仿为溶剂下，在三乙胺或4-二甲胺基吡啶作催化剂，得到甘铂酸钠粗品通过重结晶，加碱调节pH值，喷雾干燥得到产品。

合成甘铂酸钠的条件文献报道的温度范围80-100℃，经过实验最终确定为85℃。大部分文献反应时间为4h，然而经过高效液相监控发现10h并不能反应完全，而在反应了14h之后，高效液相监控显示反应相对完全，所以反应时间确定为15h。在合成工艺中无水吡啶易在产品中残留，常规方法是采用纯化水进行洗涤，但纯化水洗涤效果并不理想，有报道使用酸性水溶液可以改善吡啶残留的洗涤效果。选择冰醋酸和稀盐酸进行了对比试验，结果证明，以5％盐酸水溶液对吡啶残留的洗涤效果最好。甘草次酸丁二酸酯：甘草次酸和丁二酸酐于三颈瓶内，再加吡啶，搅拌，油浴加热回流，抽滤得粗甘草次酸丁二酸酯，再置其入三颈瓶内，用乙醇溶解，加活性炭，搅拌，加热回流，趁热滤入沸水中重结晶，得银白色片状晶体；甘草次酸丁二酸酯二钠盐：将甘草次酸丁二酸酐溶于适量95％乙醇中，用氢氧化钠处理，重结晶，得白色片状晶体^[6]。

乙酰化就是将有机化合物分子中的氮、氧、碳原子上引入乙酰基CH₃CO-的反应。常用氯乙酰和醋酸酐等作为乙酰化剂。3-乙酰-18β-甘草次酸中文名为3-氧-乙酰基-11-氧代-齐墩果-12-烯-29酸，英文名3-O-acetyl-glycyrrhetinic，分子式C₃₂H₄₈O₅.以甘草酸单铵盐为底物，首次在质量配比组成为46∶46∶8的醋酸-水-硫酸反应体系中一步合成了乙酰甘草次酸，经TLC、IR、¹H NMR和¹³C NMR等表征并得以确认。抑菌测试初步表明，乙酰甘草次酸对金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、白色链球菌均有明显的抑制效果。3-乙酰-18β-甘草次酸具治疗十二指肠溃疡、胃溃疡等，3-乙酰-18β-甘草次酸常被用作药物中间体，如Turner John Cameron和S.R ozen将3-氧-乙酰-甘草次酰氯与香叶醇在吡啶中反应，制得3-氧-乙酰-甘草次酸香叶醇酯，及与三乙胺在二氯甲烷中于甘氨酸乙酯盐酸盐反应，制得N-(3-氧-乙酰-甘草次酰基)-甘氨酸乙酯，治疗胃溃疡。Kiyoshitakiura将甘草次酸钠在DMF中于溴乙酰葡萄糖反应，在脱乙酰基，得到甘草次酸葡萄糖酯，是水溶性的抗炎化合物。

本发明对甘草次酸的3位羟基进行了酯化，制备了两种典型的3-乙酰-甘草次酸和甘草次酸半琥珀酸酯二钠盐(甘铂酸钠)。文献报道的反应在实际操作过程中较难控制，且温度过高产品容易树脂化，后处理中加水固化不宜析晶疏散，产品色泽偏黄，相关物质较高，吡啶残留量较大。本发明采用加入抗氧化剂无水亚硫酸钠和通入氮气保护，可有效隔绝氧气，反应温度较低，避免氧化反应的发生，加大了抗氧剂无水亚硫酸钠的用量，可有效改善产品色泽，反应不需要特定的条件，过程温和易控，后处理中加水后全部固化析出疏松的白色粉末状产品，使用酸性溶液洗涤物料有效降低了产品中的溶剂残留，操作简单，生产成本低，简单易行，适合大规模制备，有较好的应用推广价值。母液套用可以提高酰化反应收率，节约生产成本；氨基磺酸作为固体有机酸催化剂，具有性质稳定、价格低廉、活性高、用量少、易于回收、可重复使用、反应条件温和、产率优异、操作简便、腐蚀性小和污染小等优点，因此，氨基磺酸作为一种非常实用的环境友好绿色催化剂，其催化有机合成反应将更加广泛。

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发明内容

为克服背景技术中的不足，本发明旨在提供一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法。

本发明的技术解决方案是：

一种甘草次酸3--位羟基结构修饰方法，包括如下步骤：

(1)甘草次酸琥珀酸半酯的酯化反应。

(2)甘草次酸琥珀酸半酯的成盐反应。

(3)甘草次酸半琥珀酸酯二钠的纯化。

(4)3乙酰18β-甘草次酸的酯化

(5)3乙酰18α甘草次酸的纯化

具体实施方式

甘草次酸琥珀酸半酯二钠制备方式一：在装有机械搅拌、恒压滴液漏斗、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的1000ml。四口圆底烧瓶中加入甘草次酸50g、丁二酸酐50g、无水亚硫酸钠3g，充分混匀后加入无水吡啶200mL，通入N₂保护，油浴缓缓加热至85-90℃，控温反应12h，以薄层色谱检查反应终点，展开剂：氯仿-甲醇-乙酸(40∶2∶0.1)，反应完全后在-(0.093-0.095)Mpa下减压浓缩至比重1.15-1.20，向浓缩物中加入100mL乙醇，搅拌成糊状，加入少许氯仿，析出白色固体，抽滤干，以少许乙醇洗涤，抽滤干，滤饼溶于无水乙醇，重结晶，抽滤，常温下真空干燥，得甘铂酸钠白色固体。

甘草次酸琥珀酸半酯二钠制备方式二：在装有机械搅拌、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的500mL四口圆底烧瓶中加入甘草次酸60g、丁二酸酐70g、无水亚硫酸钠5g，加入二甲基甲酰胺300mL，通入N₂保护，加热至85-95℃，搅拌反应13h，以薄层色谱检查反应终点，展开剂：氯仿-甲醇-乙酸(40∶2∶0.1)，反应完全后在-(0.093-0.095)Mpa下减压浓缩至比重1.15-1.20，向浓缩物中加入400mL纯化水中，析出大量白色固体，向白色固体加入pH2-4的500mL盐酸溶液浸泡4h，抽滤干，再用500mL纯化水浸泡3h，用冰水浴降温至10℃以下，并维持此温度搅拌15min，抽滤，用300mL水洗涤，得到浅黄色固体，于25℃下减压干燥20h，得到类白色固体。

甘草次酸琥珀酸半酯二钠制备方式三：在装有机械搅拌、恒压滴液漏斗、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的500mL四口圆底烧瓶中加入甘草次酸80g、丁二酸酐120g、无水亚硫酸钠7g、吗啉400mL，通入N₂保护，油浴缓缓升温加热至95℃，控温反应15h，反应过程中由HPLC监控，反应完全后在-(0.093-0.095)Mpa下减压浓缩至比重1.15-1.20，然后向浓缩物中加入500mL去离子水，滴加入5％盐酸调节pH3-5，约30min内滴完，滴加完毕后，用冰水浴降温至10℃以下，并维持此温度搅拌15min，抽滤，用300mL去离子水洗涤，得到浅黄色固体，于25℃下减压干燥20h，得到类白色固体。

3-乙酰-18β-甘草次酸制备方式一：在装有机械搅拌、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的500mL四口圆底烧瓶中加入加入20.0g 18β-甘草次酸和300mL乙酸酐，1.5g碘做催化刑，30-50℃反应3-5h，反应结束后，浓缩至比重1.15-1.20，向浓缩物中加入100mL蒸馏水和80mL冰乙酸，充分搅拌，冷却至室温，生成白色沉淀，抽滤，滤饼用蒸馏水洗涤4次，真空冷冻干燥得亮白色粉末22g。

3-乙酰-18β-甘草次酸制备方式二：[MORBSA][HSO4]离子液体的制备：将吗啡啉和1，4-丁烷磺内酯置于容器中，在50-60℃条件下加入乙醇作溶剂混合搅拌3-5h；反应结束后，得到白色固体1-烷基-3-(丁基-4-磺酸基)吗啉盐，用乙醚洗涤，真空干燥，在室温下，与上述1-烷基-3-(丁基-4-磺酸基)吗啉盐的浓硫酸逐滴加入该盐中，于70-80℃下搅拌3-6h，得到[MORBSA][HSO4】离子液体，用乙醚洗涤，除去非离子残余物后进行旋蒸除去乙醚。在装有机械搅拌、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的500mL四口圆底烧瓶中加入乙酰化反应在室温下，醇或酚和乙酸酐摩尔比为1∶1.0-4.0的溶液中加0.5-1.0mol％[MORBSA][HSO4]离子液体，室温反应10-30min；反应完毕，得产物。

3-乙酰-18β-甘草次酸制备方式三：在装有机械搅拌、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的2000mL四口圆底烧瓶中加入甘草次酸50g，水550g，硫酸90g，冰乙酸600g，90-100℃下反应，用薄层色谱(TLC)检测，展开剂：甲醇-水-冰乙酸(7∶2∶1)，反应完全后，水洗沉淀至中性，干燥，得浅黄色粗品，加入氯仿溶解，过滤，浓缩至干，加入乙醇结晶。得白色无定型粉末。

3-乙酰-18β-甘草次酸制备方式四：在装有机械搅拌、温度计、带有干燥管和回流冷凝管的500mL四口圆底烧瓶中加入甘草次酸、150mL冰醋酸和少量锌粉，摇匀。开始加热，保持反应液微沸约20min，逐渐升温，反应温度维持在100-105℃。反应30min后可适当升温至110℃，蒸出大部分水和剩余的乙酸，温度出现波动时，可认为反应结束。趁热将反应物倒入盛有250mL冷水的烧杯中，既有白色固体析出，稍加搅拌，冷却后抽滤，并用少量水洗涤晶体，粗产品用水重结晶，得到白色片状晶体，抽滤、烘干后称重。

3-乙酰-18α-甘草次酸制备方式一：将8g无水乙酸钠研细，置入200mL圆底三口烧瓶并加入50mL乙酸酐，搅拌下加热至90-100度，并继续搅拌约20min后分批缓缓加入10g 18α-甘草次酸。待固体溶解溶液澄清后，继续搅拌1-2h，薄层色谱监测原料消失后停止反应，将反应液冷却至室温，有白色固体析出。

3-乙酰-18α-甘草次酸制备方式二：在冰水浴的条件下，向100mL三口瓶中加入0.1mL高氯酸、12.5mL乙酸酐，在搅拌下，缓缓分批加入2.5g粉末状18α-甘草次酸，10℃下反应1h。TLC点板监测原料点消失后，将反应物倒入有冰水的烧杯中，搅拌混合物，使产生的油状物完全固化。抽滤，用少量冷水洗涤，粗产品用无水甲醇或乙醇重结晶。

3-乙酰-18α-甘草次酸制备方式三：在2000mL反应瓶中依次加入138g18α-甘草次酸、冰醋酸300g、氨基磺酸15g，搅拌下缓慢加入153g乙酸酐，加完后水浴加热至80-85℃，搅拌反应30min，趁热过滤，收集催化剂氨基磺酸。滤液自然冷却至室温，抽滤，蒸馏水洗涤，干燥得粗品。粗产品用乙醇-水混合溶剂重结晶，干燥得白色晶体精品。

3-乙酰-18α-甘草次酸制备方式四：向150mL干燥锥形瓶中加入2.0g18α-甘草次酸、5mL乙酸酐和5滴浓硫酸，振荡，待其溶解后，控制温度在85-90℃条件下反应5-10min。然后冷却，即有3-乙酰-18α-甘草次酸晶体析出。减压过滤，用滤液淋洗锥形瓶，直至所有晶体被收集到布氏漏斗中。抽滤时用少量冷水洗涤晶体几次，继续抽滤，尽量将溶剂抽干。然后将粗产品转移至表面皿上，在空气中风干。

Claims

1.一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，以甘草次酸为原料，该方法包含以下步骤：

(1)甘草次酸琥珀酸半酯的酯化反应。

(2)甘草次酸琥珀酸半酯的成盐反应。

(3)甘草次酸半琥珀酸酯二钠的纯化。

(4)3-乙酰-18β-甘草次酸和3-乙酰-18α-甘草次酸的合成。

(5)3-乙酰-甘草次酸粗品的纯化。

2.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(1)中反应介质为吡啶、吗啉、哌啶、二甲基甲酰胺或二甲基亚砜中之一，用量为甘草次酸的1-5(V/W)倍；酯化试剂为琥铂酸酐，其用量为甘草次酸的1-2(W/W)倍，反应温度为80-100℃，反应时间10-16h。反应过程中通入氮气，加入抗氧化剂亚硫酸钠，用量为甘草次酸量的5-10％(W/W)。

3.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(2)中将甘草次酸琥珀酸半酯用稀乙醇溶解，搅拌下缓缓加入饱和NaHCO₃水溶液或10％Na₂CO₃水溶液或5-10％的氢氧化钠溶液，待溶液中无明显气泡生成后静置约30min，随后减压抽滤，用少量冰水洗涤滤饼3次，用无水乙醇重结晶一次或两次，将重结晶所得固体减压抽滤，在远红外干燥箱中干燥，将甘草次酸琥珀酸半酯置于烧杯中，搅拌并缓慢加入饱和碳酸氢钠溶液，加完后继续搅拌2-3min，直到没有二氧化碳气体产生为止，过滤，用蒸馏水洗涤沉淀，合并滤液于烧杯中，不断搅拌，即有晶体析出。抽滤，用冷水洗涤晶体1-2次，再抽干水分，即得产品。

4.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(3)中反应完全后在-(0.093-0.095)Mpa下减压浓缩至比重1.15-1.20，向浓缩物中加入乙醇，搅拌成糊状，加入少许氯仿，析出白色固体，抽滤干，以少许乙醇洗涤，抽滤干，滤饼溶于无水乙醇，重结晶，抽滤，常温下真空干燥，得甘铂酸钠白色固体；或向浓缩物中加入纯化水中，析出白色固体，向白色固体加入pH2-4的盐酸溶液浸泡4h，抽滤干，再用纯化水浸泡3h，用冰水浴降温至10℃以下，并维持此温度搅拌15min，抽滤，用纯化水洗涤，得到浅黄色固体，于50℃下减压干燥20h，得到类白色固体；或向浓缩物中加入去离子水，滴加入5％盐酸调节pH3-5，约30min内滴完，滴加完毕后，用冰水浴降温至10℃以下，并维持此温度搅拌15min，抽滤，用去离子水洗涤，得到浅黄色固体，于50℃下减压干燥20h，得到类白色固体。

5.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(4)中所用的酰化剂为：乙酰氯、乙酸酐、苯甲酰氯和冰醋酸中之一；反应体系为：乙酸酐/吡啶、乙酸酐/4-二甲氨基吡啶(DMAP)、乙酸酐/羧酸钠、乙酸酐/氯化锌、乙酰氯/DMAP、乙酰氯/吡啶、冰醋酸/乙酸酐中之一；催化剂为：Lewis酸AlCl₃、BF₃、ZnCl₂、I₂、氨基磺酸、Zn粉、离子液体[MORBSA][H₂SO₄]、[TMBSA][H₂SO4]或DMAP中之一；缚酸剂为：三乙胺、吡啶、吗啉或二甲基甲酰胺中之一；所用溶剂为：吡啶、醚类溶剂、二氯甲烷或乙酸乙酯溶中之一。

6.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(4)中以甘草次酸和乙酸酐为原料，以冰乙酸为溶剂，用氨基磺酸催化合成3-乙酰-甘草次酸的最佳反应条件是n(甘草次酸)∶n(乙酸酐)∶n(催化剂)＝4∶7∶1，反应温度控制在90-95℃，搅拌反应60min，乙酰氯为酰化剂，氮气保护下史莱克管中加入反应物和溶剂，冰浴下慢慢滴入乙酰氯，在催化剂下与乙酰氯发生傅氏酰基化反应。乙酸为酰化剂时加入甘草次酸，10-12倍量(W/W)的去离子水，0.2倍量(W/W)的硫酸，10-15倍量(W/W)的冰乙酸，100℃下反应3-5h，反应过程以薄层色谱检测，展开剂：乙醇-水-冰乙酸(7∶2∶1)。

7.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(4)中[MORBSA][H₂SO₄]、[TMBSA][H₂SO₄]离子液体的制备：催化剂用量占反应原料总摩尔数的0.5-1.0％，分离催化剂，将摩尔比为1.1∶1的吗啡啉和1，4-丁烷磺内酯置于容器中，在50℃条件下，加入与反应物摩尔比为1∶0.8-1.2的乙醇作溶剂混合搅拌4-5h；反应结束后，得到白色固体1-烷基-3-(丁基-4-磺酸基)吗啉盐，将该盐用乙醚洗涤2-4次，并进行真空干燥，在室温下，将与上述1-烷基-3-(丁基-4-磺酸基)吗啉盐等摩尔的浓硫酸逐滴加入该盐中，于70-90℃下搅拌4-6h，得到[MORBSA][H₂SO₄]、[TMBSA][H₂SO4]离子液体，所得离子液体用乙醚洗涤2-4次，除去非离子残余物后进行旋蒸除去乙醚。

8.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(5)中反应液过滤，除去固体催化剂，滤液减压浓缩至比偶中1.15-1.20，沉淀，水洗沉淀，干燥，得浅黄色粗品，加入三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯或丙酮中之一溶解，过滤，浓缩至干，加入乙醇结晶。得产品。

9.如权利要求1所述的一种甘草次酸3-位羟基结构修饰方法，其特征在于，步骤(5)中反应液过滤过滤，趁热将反应物倒入盛有冷水的烧杯中，既有白色固体析出，稍加搅拌，冷却后抽滤，并用少量水洗涤晶体，粗产品用水重结晶，得到白色片状晶体，抽滤、烘干后称重。