CN104726602A - 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法 - Google Patents
鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104726602A CN104726602A CN201510160949.2A CN201510160949A CN104726602A CN 104726602 A CN104726602 A CN 104726602A CN 201510160949 A CN201510160949 A CN 201510160949A CN 104726602 A CN104726602 A CN 104726602A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- tomato
- plant
- yellow leaf
- leaf curl
- primer
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 38
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 26
- 241000702308 Tomato yellow leaf curl virus Species 0.000 title claims abstract description 19
- 239000003147 molecular marker Substances 0.000 title claims abstract description 9
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims abstract description 32
- 239000003550 marker Substances 0.000 claims abstract description 28
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 23
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims abstract description 18
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 claims abstract description 16
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 claims abstract description 8
- 241000227653 Lycopersicon Species 0.000 claims abstract 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 9
- 238000009395 breeding Methods 0.000 claims description 6
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 claims description 6
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 5
- 241001098122 Tomato yellow leaf curl China virus Species 0.000 claims description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 5
- 238000012797 qualification Methods 0.000 claims description 5
- 238000000137 annealing Methods 0.000 claims description 3
- 230000004087 circulation Effects 0.000 claims description 3
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 claims description 3
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 claims description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims description 3
- 239000013589 supplement Substances 0.000 claims description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 abstract description 22
- 241000700605 Viruses Species 0.000 abstract description 3
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 28
- 230000009182 swimming Effects 0.000 description 11
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 8
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 8
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 8
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 7
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M Cetrimonium bromide Chemical compound [Br-].CCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)C LZZYPRNAOMGNLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 240000000060 Tomato yellow leaf curl virus - Il Species 0.000 description 2
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 2
- 239000012154 double-distilled water Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N isoamylol Chemical compound CC(C)CCO PHTQWCKDNZKARW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 241000702463 Geminiviridae Species 0.000 description 1
- 241000258937 Hemiptera Species 0.000 description 1
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 239000007984 Tris EDTA buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000013461 design Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 239000011536 extraction buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 1
- 238000009413 insulation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000013507 mapping Methods 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000013138 pruning Methods 0.000 description 1
- 238000007894 restriction fragment length polymorphism technique Methods 0.000 description 1
- 231100000241 scar Toxicity 0.000 description 1
- 238000002444 silanisation Methods 0.000 description 1
- 206010042772 syncope Diseases 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
- C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/13—Plant traits
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Botany (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明公开了一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法。该方法为：提取番茄的基因组DNA；用分子标记引物对前述提取的番茄基因组DNA进行PCR扩增，对前述PCR扩增产物进行电泳分析，如果电泳图中产生690bp的条带，则表明植株中含有黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1，为抗病植株；如果电泳图中产生409bp的条带，则表明植株为含ty-1基因位点的株系，为不抗病植株。本发明标记方法中的电泳图带型简单，易于鉴别，可直接应用于标记辅助选择，节省了时间、物力、人力，且提高鉴定的准确性。
Description
技术领域
本发明农业生物技术领域，具体涉及一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法。
背景技术
番茄黄化曲叶病毒病为中国番茄黄化曲叶病毒(Tomato yellow leaf curlvirus，TYLCV)，属于双生病毒科。番茄黄化曲叶病毒病与蔬菜上常见其它病毒病(如花叶、厥叶、条斑等病毒病)相比较而言，具有暴发突然、扩展迅速、危害性强、治疗难度大等特点，是目前番茄生产上一种毁灭性的植物病害，是一种严重威胁全世界番茄生产的病害。培育抗病品种已成为防治该病害的主要技术手段。
标记辅助选择是育种的重要组成部分，加快了培育番茄杂交种的育种进程。分子标记技术已经被广泛应用于番茄抗病基因的定位，关于番茄抗双生病毒的分子标记的开发国外取得了很大进展。Zamir等将感病系M82–1–8作为母本与抗TYLCV的智利番茄LA1969杂交，分析后代RFLP标记和抗性，把耐TYLCV的不完全显性的主效基因Ty-1基因定位在6号染色体的标记TG297(4cM)和TG97(8.6cM)附近。Ji和Scott利用感病品种‘Horizon’和抗病材料(智利番茄)杂交后的F3分离群体进行RAPD进行分析，找到了与抗TYLCV基因紧密连锁的2个RAPD标记UBC697和UBC264，并将其转化为SCAR标记。可用于标记Ty-1基因还有CAPS标记。但以上标记存在的问题是操作流程较多，有些需要酶切等，此外与标记基因的连锁程度不高。
发明内容
本发明的目的是，提供一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法。旨在解决现有技术中番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的标记操作流程较多、需要酶切、与标记基因连锁程度不高的技术问题。
本发明为解决上述技术问题所采用的技术方案如下：
一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法，该方法包括如下步骤：
步骤1，提取番茄的基因组DNA；
步骤2，用分子标记引物对前述提取的番茄基因组DNA进行PCR扩增，所述分子标记引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示)，所述分子标记引物的反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示)；
步骤3，对前述PCR扩增产物进行电泳分析，如果电泳图中产生690bp的条带，则表明植株中含有黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1，为抗病植株；如果电泳图中产生409bp的条带，则表明植株为含ty-1基因位点的株系，为不抗病植株。
进一步地，所述步骤3中PCR扩增产物的电泳图中如果同时产生690bp和409bp的条带，表明植株为含Ty-1/ty-1位点的株系，为杂抗植株。
进一步地，所述步骤2中PCR扩增的反应条件如下：
PCR的反应体系是：10ng/uL的模板DNA 3μL，10umol/L的正向引物2.5μL，10umol/L的反向引物2.5μL，10mmol/L的dNTP 0.625μL，10×PCR buffer 2.5μL，10mmol/L的Mg2+2.5ul，Taq酶1U，补充ddH2O至25μL；
PCR程序分别为：94℃预变性3min，然后94℃变性30s，退火温度57℃60s，72℃60s，进行35个循环，最后72℃延伸10min。
本发明还提供了一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记引物，其特征在于：该引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示)，反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示)。
本发明还提供了上述的分子标记引物在番茄黄化曲叶病毒抗性基因定位、检测或标记辅助育种中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
(1)由于番茄黄化曲叶病毒为烟粉虱传播，传统田间鉴定方法需要的且对条件要求苛刻。本发明提供的标记方法则省去了田间鉴定所需要的长周期及对条件要求的苛刻。
(2)本发明标记方法中的电泳图带型简单，易于鉴别，可直接应用于标记辅助选择，节省了时间、物力、人力，且提高鉴定的准确性。将该标记应用于苗期育种选择，能够准确的筛选出具有抗病基因的个体植株，从而加速育种进程。
附图说明
图1为本发明中的分子标记引物对待检测番茄材料进行PCR扩增后产物的电泳图。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案进行详细说明。以下采用的试剂和生物材料如未特别说明，均为商业化产品。
实施例1，分子标记引物的筛选
采用BSA法分别构建抗病基因池和感病基因池，用于分子标记引物的筛选。
Zamir等将黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1定位在6号染色体上，与该基因连锁的RAPD标记及CAPS标记均已被筛选出。本发明根据该定位结果以及番茄基因组序列和SSR遗传图谱，新设计一系列标记引物。然后针对设计的一系列标记引物对抗病材料和不抗病材料进行多态性筛选。筛选结果只有一对引物能够扩增出多态性，可作为分子标记引物。该分子标记引物在含Ty-1位点的抗病材料中能够扩增出690bp的片段；在含ty-1位点的不抗病材料中则扩增出409bp的片段；对于含Ty-1/ty-1位点的杂抗植株，则同时产生690bp和409bp的片段。
进一步，通过构建的抗病基因池和感病基因池对筛选的分子标记引物进行稳定性鉴定，确定该分子标记引物扩增的多态性稳定。
筛选获得的分子标记引物为：正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示)，反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示)。
实施例2，利用筛选的分子标记引物鉴定黄化曲叶病毒抗性基因
1，利用CTAB法提取番茄基因组DNA
待鉴定材料为以下品种的番茄材料：申粉8号、申粉918、浦红9号、浦红10号、申粉V-1、东农721、先正红珠。
采集上述品种番茄材料的新叶，用CTAB法提取DNA，具体提取方法如下：
(1)取1-50g新鲜植物材料，于液氮中研成粉。(2)将冻粉转入预冷的离心管中，立即加入等体积(w/v)2×CTAB提取缓冲液，65℃保温10-20分钟，其间不时摇动。(3)加入等体积的氯仿/异戊醇，轻缓颠倒离心管混匀，室温下，12000r/min离心10-20分钟。(4)将上清液转入另一离心管中,加入等体积的氯仿/异戊醇，颠倒离心管混匀，室温、12000r/min离心10分钟。(5)将上层水相转入新的经硅烷化处理的离心管中，加入0.6-1倍体积的异丙醇,混匀，室温下放置30分钟。(6)3500-4000r/min离心5-10分钟，去上清液,70％乙醇漂洗，沉淀吹干。(7)风干后加入40ul的TE缓冲液溶解DNA，-20℃保存备用。
2，用分子标记引物对番茄DNA进行PCR扩增
用筛选的分子标记引物对前述提取的番茄基因组DNA进行PCR扩增，所述分子标记引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.1所示)，所述分子标记引物的反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’(其核苷酸序列如SEQ ID No.2所示)。
PCR的反应体系是：10ng/uL的模板DNA 3μL，10umol/L的正向引物2.5μL，10umol/L的反向引物2.5μL，10mmol/L的dNTP 0.625μL，10×PCR buffer 2.5μL，10mmol/L的Mg2+2.5ul，Taq酶1U，补充ddH2O至25μL；
PCR程序分别为：94℃预变性3min，然后94℃变性30s，退火温度57℃60s，72℃60s，进行35个循环，最后72℃延伸10min。
3，对PCR扩增产物进行电泳分析
将前述PCR扩增产物于2％的琼脂糖凝胶中进行电泳。参见图1，该图为本发明中的分子标记引物对待检测番茄材料进行PCR扩增后产物的电泳图。图1中M代表的泳道为TaKaRa DL1000DNA Marker；1代表的泳道为空白对照H2O；2代表的泳道为申粉8号的番茄材料；3代表的泳道为申粉918的番茄材料；4代表的泳道为浦红9号的番茄材料；5代表的泳道为浦红10号的番茄材料；6代表的泳道为申粉V-1的番茄材料；7代表的泳道为东农721的番茄材料；8代表的泳道为先正红珠的番茄材料。其中泳道6出现690bp条带，表明对应的番茄材料申粉V-1为抗病番茄品种；其它泳道均出现409bp的条带，表明其它番茄材料均为不抗病番茄品种。
上述仅为本发明的部分优选实施例，本发明并不仅限于实施例的内容。对于本领域中的技术人员来说，在本发明技术方案的构思范围内可以有各种变化和更改，所作的任何变化和更改，均在本发明保护范围之内。
<110> 上海孙桥现代农业联合发展有限公司
<120> 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法
<130> 2015
<160> 2
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 21
<212> DNA
<213> 正向引物
<400> 1
cgttctgctt aatgtggcaa t 21
<210> 2
<211> 20
<212> DNA
<213> 反向引物
<400> 2
caacggaggg agcatatcat 20
Claims (5)
1.一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法，该方法包括如下步骤：
步骤1，提取番茄的基因组DNA；
步骤2，用分子标记引物对前述提取的番茄基因组DNA进行PCR扩增，所述分子标记引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’，所述分子标记引物的反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’；
步骤3，对前述PCR扩增产物进行电泳分析，如果电泳图中产生690bp的条带，则表明植株中含有黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1，为抗病植株；如果电泳图中产生409bp的条带，则表明植株为含ty-1基因位点的株系，为不抗病植株。
2.如权利要求1所述的鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法，其特征在于：所述步骤3中PCR扩增产物的电泳图中如果同时产生690bp和409bp的条带，表明植株为含Ty-1/ty-1位点的株系，为杂抗植株。
3.如权利要求1所述的鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法，其特征在于，所述步骤2中PCR扩增的反应条件如下：
PCR的反应体系是：10ng/uL的模板DNA 3μL，10umol/L的正向引物2.5μL，10umol/L的反向引物2.5μL，10mmol/L的dNTP 0.625μL，10×PCR buffer2.5μL，10mmol/L的Mg2+2.5ul，Taq酶1U，补充ddH2O至25μL；
PCR程序分别为：94℃预变性3min，然后94℃变性30s，退火温度57℃60s，72℃60s，进行35个循环，最后72℃延伸10min。
4.一种鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记引物，其特征在于：该引物的正向引物序列为5’-CGTTCTGCTTAATGTGGCAAT-3’，反向引物序列为5’-CAACGGAGGGAGCATATCAT-3’。
5.权利要求4所述的分子标记引物在番茄黄化曲叶病毒抗性基因定位、检测或标记辅助育种中的应用。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510160949.2A CN104726602B (zh) | 2015-04-07 | 2015-04-07 | 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty‑1的分子标记方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201510160949.2A CN104726602B (zh) | 2015-04-07 | 2015-04-07 | 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty‑1的分子标记方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104726602A true CN104726602A (zh) | 2015-06-24 |
| CN104726602B CN104726602B (zh) | 2017-09-29 |
Family
ID=53451012
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201510160949.2A Expired - Fee Related CN104726602B (zh) | 2015-04-07 | 2015-04-07 | 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty‑1的分子标记方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104726602B (zh) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107794310A (zh) * | 2017-11-15 | 2018-03-13 | 江苏绿港现代农业发展有限公司 | 一种Ty‑3分子标记的引物ACY及其标引方法 |
| CN108330204A (zh) * | 2017-01-18 | 2018-07-27 | 中国种子集团有限公司 | 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因的分子标记及其应用 |
| CN105463079B (zh) * | 2015-12-10 | 2018-08-24 | 江苏省农业科学院 | 一种番茄Ty-3基因和ty-5基因的多重PCR检测方法 |
| CN105463081B (zh) * | 2015-12-10 | 2018-08-24 | 江苏省农业科学院 | 一种番茄Ty-1基因和ty-5基因的多重PCR检测方法 |
| CN111961750A (zh) * | 2020-09-14 | 2020-11-20 | 河北省农林科学院经济作物研究所 | 检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物及其应用 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101560566A (zh) * | 2009-04-13 | 2009-10-21 | 浙江省农业科学院 | 番茄抗黄化曲叶病毒病育种的分子标记辅助选择方法 |
-
2015
- 2015-04-07 CN CN201510160949.2A patent/CN104726602B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101560566A (zh) * | 2009-04-13 | 2009-10-21 | 浙江省农业科学院 | 番茄抗黄化曲叶病毒病育种的分子标记辅助选择方法 |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| 付琬等: "番茄Ty-1、Ty-2 和Ty-3 基因的多重PCR 技术鉴定", 《中国园艺文摘》 * |
| 胡霞等: "番茄抗TYLCV 基因新标记的开发及其在多抗聚合选择中的应用", 《中国蔬菜》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105463079B (zh) * | 2015-12-10 | 2018-08-24 | 江苏省农业科学院 | 一种番茄Ty-3基因和ty-5基因的多重PCR检测方法 |
| CN105463081B (zh) * | 2015-12-10 | 2018-08-24 | 江苏省农业科学院 | 一种番茄Ty-1基因和ty-5基因的多重PCR检测方法 |
| CN108330204A (zh) * | 2017-01-18 | 2018-07-27 | 中国种子集团有限公司 | 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因的分子标记及其应用 |
| CN107794310A (zh) * | 2017-11-15 | 2018-03-13 | 江苏绿港现代农业发展有限公司 | 一种Ty‑3分子标记的引物ACY及其标引方法 |
| CN111961750A (zh) * | 2020-09-14 | 2020-11-20 | 河北省农林科学院经济作物研究所 | 检测番茄黄化曲叶病毒病抗病基因Ty-1的KASP引物及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104726602B (zh) | 2017-09-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN105385697B (zh) | 芝麻花序有限基因Sidt1及其SNP标记 | |
| CN107557369B (zh) | 薄壳山核桃品种Nacono的特征序列、标记引物及鉴定方法 | |
| CN104726602A (zh) | 鉴定番茄黄化曲叶病毒抗性基因Ty-1的分子标记方法 | |
| CN107557434B (zh) | 薄壳山核桃品种Van Deman的特征序列、标记引物及鉴定方法 | |
| CN110305978B (zh) | 一种与辣椒果实朝向紧密关联的snp位点及其通用性分子标记、获取方法和应用 | |
| CN105368935B (zh) | 用于辣椒品种汇丰2号种子纯度鉴定的ssr引物组及方法 | |
| CN107488659B (zh) | 一种与柑橘果皮红黄颜色性状相关的序列及其应用 | |
| CN108165653B (zh) | 用于鉴定辣椒熟性的InDel分子标记及其应用 | |
| CN110499390B (zh) | 用于烟草抗斑萎病rtsw基因辅助选择的分子标记引物、辅助选择的方法及其应用 | |
| CN108330163B (zh) | 薄壳山核桃品种Nacono和Sumner的特征序列、引物及鉴定方法 | |
| CN110791586B (zh) | 鉴定板栗品种的ssr标记引物组及其应用 | |
| CN105176978B (zh) | 番茄黄化曲叶病抗病基因ty‑5的分子标记引物及其应用 | |
| CN106434944A (zh) | 与桃抗蚜基因紧密连锁的snp分子标记的应用 | |
| CN105925680A (zh) | 一种四倍体马铃薯高通量测序开发标记的方法及其应用 | |
| CN112695125B (zh) | 一种卡特兰属ssr分子标记引物组合物及其应用 | |
| CN111621586B (zh) | 一种南瓜黄茎性状紧密连锁的snp分子标记及其应用 | |
| CN105112557B (zh) | 快速鉴定兰属植物的方法 | |
| CN107164367A (zh) | 一种高通量桃叶片基因组dna的提取方法 | |
| CN106636412A (zh) | 一种采用its序列识别黄檀属和紫檀属木种的方法 | |
| CN106676175B (zh) | 用于快速鉴定油茶良种岑软2号的特异性标记引物对及鉴定方法 | |
| KR20150121794A (ko) | 오이 노균병 저항성 개체 선별용 프라이머 세트 및 이를 이용한 선별방법 | |
| CN111321237B (zh) | 基于ssr标记的‘惠’自花结实性后代的高效选育试剂盒 | |
| CN108034755B (zh) | 与水稻耐旱基因qLRI9相连锁的分子标记及其应用 | |
| CN108330164B (zh) | 薄壳山核桃品种Moore的特征序列、引物及鉴定方法 | |
| CN106755288B (zh) | 荷花品种摄山丹叶的分子鉴定方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20180620 Address after: No. 185, Mian North Road, Sun Qiao, Pudong New Area, Shanghai Co-patentee after: SHANGHAI SUNQIAO AGRICULTURAL SCIENCE AND TECHNOLOGY CO.,LTD. Patentee after: SHANGHAI SUNQIAO MODERN AGRICULTURE UNITED DEVELOPMENT CO.,LTD. Address before: No. 185, Mian North Road, Sun Qiao, Pudong New Area, Shanghai Patentee before: SHANGHAI SUNQIAO MODERN AGRICULTURE UNITED DEVELOPMENT CO.,LTD. |
|
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170929 |
|
| CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |