CN104725405A - 长春瑞滨的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物合成领域，提供了一种合成酒石酸长春瑞滨的新方法。本发明选用酒石酸长春质碱和文多灵为起始原料，将原来的四步反应变成只需两步“一锅煮”反应即得到长春瑞滨粗品，简化了合成步骤，提高了收率。长春瑞滨粗品再经过正相硅胶柱纯化以及反相硅胶柱纯化，得到的长春瑞滨纯品的纯度显著提高，同时由于长春瑞滨纯度的提高对其与酒石酸成盐效果有明显影响，从而使酒石酸长春瑞滨的纯度经重结晶后达到99.5%以上，符合美国药典要求，更有竞争优势，同时，所有操作过程均为常规操作，也更有利于工业化生产。

Description

长春瑞滨的制备方法

技术领域：

本发明属于药物合成领域，尤其涉及到一种抗肿瘤化合物酒石酸长春瑞滨的合成方法。

背景技术：

酒石酸长春瑞滨(Vinorelbine Tartrate)，是由法国PierreFabre公司研发的长春花生物碱类药物，1989年首次在法国上市。本品具有广谱抗肿瘤活性，不良反应少，在细胞有丝分裂中期阻断活动，与微管蛋白单体结合，抑制微管形成，造成细胞分裂，最终导致细胞凋亡。临床主要用于治疗非小细胞癌、乳腺癌、卵巢癌、软组织及内脏转移癌和淋巴癌。

有关文献报道的关于酒石酸长春瑞滨的主要有陈永江等中国医药工业杂志，1999,30(1),6-8、闫家福等中国中药杂志，2007，32(16)，1717-1718、Kutney JP等Helv Chim Acta,1975,58(6):1690-1719、Atta-ur-Rahman等Tetrahedron Lett,1976,1727:2351-2354、Mangeney P等Tetrahedron,1979,35(18):2175-2179、Magnus P等J Am Chem Soc,1990,112(22):8210-8213、Langlois N等J AmChem Soc,1976,98(22):7017-7024和H.Ishikawa等J.Am.Chem.Soc.2009,131(13),4904-4916以及专利CN101284842A、CN1763047A、CN101781322A、CN1552715A、CN101037446A等。

文献报道的酒石酸长春瑞滨的合成方法有以下五种，现综述如下：

方法一：脱水长春碱经间氯过氧苯甲酸氧化，得N-氧化物，然后用三氟乙酸酐处理开环，接着在水存在下重排而得长春瑞滨，然后与酒石酸成盐得酒石酸长春瑞滨。

方法二：脱水长春碱经N-氯代苯并三唑氯代，所得6'-氯代物在水存在下用四氟化硼银处理缩环得到长春瑞滨，然后与酒石酸成盐得酒石酸长春瑞滨。

方法三：脱水长春花碱经间氯过氧苯甲酸氧化，得N-氧化物，然后用三氟乙酸酐处理开环，接着用四氟化硼银处理缩环得到长春瑞滨，然后与酒石酸成盐得酒石酸长春瑞滨。

方法四：以硫酸长春碱为起始原料，与DMF脱水形成脱水长春花碱，然后经N-氯代苯并三唑氯代，所得9'-位氯代物在水存在下用四氟化硼银处理缩环得到长春瑞滨，然后与酒石酸成盐得酒石酸长春瑞滨。

方法五：以酒石酸长春质碱和文多林为起始原料，在盐酸的作用下与六水合三氯化铁反应，然后经硼氢化钠还原，所得脱水长春碱在三氟乙酸酐的作用下经过水处理得到长春瑞滨，然后与酒石酸成盐得酒石酸长春瑞滨。

五种合成方法大体上相同，但由于引入的取代基先后不同和对取代基的修饰方式不同而有所差异。第一种合成方法步骤较少，反应条件温和，副反应较少，但合成起始原料脱水长春花碱价格昂贵，导致成本较高；第二种方法和第三种方法相同点较多，副反应均较多，因此需要在超低温下反应，在工业化生产中不易控制；第四种方法与其他合成方法相对比，区别在于采用了以硫酸长春碱为起始原料，与DMF脱水形成脱水长春碱为第一步，其他步骤与第二种方法基本相同。第五种合成方法反应条件虽然温和，但反应步骤较多，副反应亦较多，所得中间体不稳定；另外，因未用卤代烃和四氟硼酸银处理，导致开环重排反应发生困难，使得终产品收率较低，纯度不高，虽然原料成本低，但综合起来生产成本较高，不利于产业化。

本发明在查阅大量相关文献及专利的基础上，通过对多条合成路线的摸索，并根据以往研发经验，最终确定如下工艺方案：选用酒石酸长春质碱和文多灵为起始原料，在氨基乙酸和盐酸的作用下与六水合三氯化铁反应，然后反应液经硼氢化钠溶液还原得到中间体脱水长春碱，脱水长春碱于低温条件下在三氟乙酸的作用下与NBS反应生成溴代物，溴代物在四氟硼酸银和水的作用下重排得到长春瑞滨粗品，长春瑞滨粗品再经过两次柱纯化以及与酒石酸成盐并重结晶得到酒石酸长春瑞滨纯品。

本发明新颖性体现在：

1.将多步反应变成只需两步“一锅煮”反应即得到长春瑞滨粗品，简化了合成步骤，提高了收率；

2.长春瑞滨粗品再经过正相硅胶柱纯化以及反相硅胶柱纯化，得到的长春瑞滨纯品的纯度显著提高，同时由于纯度的提高对其后与酒石酸成盐效果有明显影响，从而使酒石酸长春瑞滨的纯度经重结晶后达到99.8%以上，符合美国药典要求，更有竞争优势；

3.所有操作过程均为常规操作，更有利于工业化生产。

4.起始原料采用酒石酸长春质碱和文多灵，原料便宜，降低了成本；

主要合成路线如下：

针对现有技术的上述问题，本发明提出了一种反应步骤简单、后处理纯化简便、终产品纯度高、更适合工业化生产的酒石酸长春瑞滨的制备方法。

发明内容

本发明的目的在于针对现有酒石酸长春瑞滨合成方法上存在的问题，提出了一种反应步骤简单、后处理纯化简便、终产品纯度高、更适合工业化生产的酒石酸长春瑞滨的制备方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

酒石酸长春瑞滨的合成方法，

（1）脱水长春碱的制备：

（2）长春瑞滨粗品的制备：

（3）长春瑞滨纯品的制备：

正相硅胶柱纯化及C-18反相硅胶柱纯化。

（4）酒石酸长春瑞滨纯品的制备：

其中脱水长春碱的制备，选用酒石酸长春质碱和文多林为起始原料，在氨基乙酸和盐酸的作用下与六水合三氯化铁反应，然后反应液经硼氢化钠溶液还原，“一锅法”得到中间体脱水长春碱。

长春瑞滨粗品的制备，脱水长春碱于低温条件下在三氟乙酸的作用下与NBS反应生成溴代物，溴代物在四氟硼酸银和水的作用下重排，“一锅法”得到长春瑞滨粗品。

长春瑞滨纯品的制备，先向无水甲醇溶液中通入氨气制备饱和的甲醇-氨气溶液，然后取刚配好的甲醇-氨气溶液加入到二氯甲烷中混合均匀制备流动相溶液。采用该流动相溶液进行正相硅胶柱纯化，纯度及收率均较高，并且有利于后续反应。

长春瑞滨纯品的制备，采用反相硅胶柱纯化。

长春瑞滨纯品的制备，反相硅胶柱纯化流动相的配制：将L-（+）-酒石酸溶于蒸馏水中搅拌全溶后加入氢氧化钠，搅拌全溶，得缓冲液，再将重蒸甲醇加入,混匀，得流动相。

长春瑞滨纯品的制备，采用反相硅胶柱纯化：①将反向硅胶用重蒸甲醇搅拌均匀后装入柱子中，平衡至液面高出界面5cm左右，然后依次用90%，80%，70%，60%的甲醇水溶液梯度平衡，用流动相平衡至液面高出界面5mm左右，待上样品；②样品处理及上样：用流动相溶解样品，加到柱中；③洗脱：加入流动相，控制流速为3ml/min，开始洗脱；④收集：用100ml的棕色瓶分别收集，TLC监测，收集目标物洗脱液，以二氯甲烷萃取三次，合并二氯甲烷层，于20℃减压浓缩得固体，用油泵抽4h恒重，得长春瑞滨纯品，纯度及收率均较高，并且有利于后续步骤的进行。

酒石酸长春瑞滨纯品的制备中，采用了创新方法：①溶解：将长春瑞滨纯品用乙酸乙酯溶解，将L-(+)-酒石酸用丙酮搅拌溶解，将长春瑞滨的乙酸乙酯溶液滴加到酒石酸的丙酮溶液中，室温下搅拌反应1小时，抽滤溶液；②浓缩：于20～25℃水浴减压浓缩至干，再用乙醇溶解，抽滤。溶液于20～25℃水浴减压浓缩至干，用油泵抽12小时恒重；③干燥：避光条件下，将产品刮至托盘，在20～25℃条件下用真空干燥箱烘干48小时，得酒石酸长春瑞滨纯品。

与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：（1）在制备中间体脱水长春碱的步骤中，创新性的采用“一锅法”反应，酒石酸长春质碱和文多林为起始原料，在氨基乙酸和盐酸的作用下与六水合三氯化铁反应，然后反应液经硼氢化钠溶液还原，“一锅法”得到中间体脱水长春碱。（2）在制备中间体长春瑞滨粗品的步骤中，创新性的采用“一锅法”反应，脱水长春碱于低温条件下在三氟乙酸的作用下与NBS反应生成溴代物，溴代物在四氟硼酸银和水的作用下重排，“一锅法”得到长春瑞滨粗品。（3）本发明在制备中间体长春瑞滨纯品的步骤中，创新性的采用先向无水甲醇溶液中通入氨气制备饱和的甲醇-氨气溶液，然后取刚配好的甲醇-氨气溶液加入到二氯甲烷中混合均匀制备流动相溶液。采用该流动相溶液进行正相硅胶柱纯化，纯度及收率均较高，并且有利于后续步骤的进行；（4）在制备中间体长春瑞滨纯品的步骤中，创新性的采用反相硅胶柱纯化；（5）反相硅胶柱纯化流动相的配置采用了创新方法：将L-（+）-酒石酸溶于蒸馏水中搅拌全溶后加入氢氧化钠，搅拌全溶，得缓冲液，再将重蒸甲醇加入，混匀，得流动相；（6）反相硅胶柱纯化采用了创新性的方法：①将反向硅胶用重蒸甲醇搅拌均匀后装入柱子中，平衡至液面高出界面5cm左右，然后依次用90%，80%，70%，60%的甲醇水溶液梯度平衡，用流动相平衡至液面高出界面5mm左右，待上样品；②样品处理及上样：用流动相溶解样品，加到柱中；③洗脱：加入流动相，控制流速为3ml/min，开始洗脱；④收集：用100ml的棕色瓶分别收集，TLC监测，收集目标物洗脱液，以二氯甲烷萃取三次，合并二氯甲烷层，于20℃减压浓缩得固体，用油泵抽4h恒重，得长春瑞滨纯品，纯度及收率均较高，并且有利于后续步骤的进行；（7）在制备酒石酸长春瑞滨纯品的步骤中采用了创新方法：①溶解：将长春瑞滨纯品用乙酸乙酯溶解，将L-(+)-酒石酸用丙酮搅拌溶解，将长春瑞滨的乙酸乙酯溶液滴加到酒石酸的丙酮溶液中，室温下搅拌反应1小时，抽滤溶液；②浓缩：于20～25℃水浴减压浓缩至干，再用乙醇溶解，抽滤。溶液于20～25℃水浴减压浓缩至干，用油泵抽12小时恒重；③干燥：避光条件下，将产品刮至托盘，在20～25℃条件下用真空干燥箱烘干48小时，得酒石酸长春瑞滨纯品。

本发明所述酒石酸长春瑞滨的合成方法简化了合成步骤，提高了收率和纯度，纯度达到99.8%以上，符合美国药典要求，更有竞争优势；同时，操作方法简单，所使用原料价格较低，更有利于工业化生产。故本发明提供的制备酒石酸长春瑞滨的新方法具有广阔的产业化应用前景。

具体实施方式

为了更好的理解本发明，下面结合实施例对本发明进一步的详细说明。

实施例1

避光条件下，通N₂排尽50L反应釜中空气，将10.8L蒸馏水加入反应瓶中，然后依次将67.00g氯化钠、85.00g甘氨酸、640.00g六水合三氯化铁、200.00g酒石酸长春质碱、200.00g文多灵用10.5L0.1N盐酸水溶液溶解加入反应釜中，室温搅拌反应24h后，将22.00g硼氢化钠溶解于2.5L冰冻氨水中用恒压滴液漏斗逐滴加入反应液中，约30min内滴加完毕，继续室温搅拌反应30min后停止反应，依次用3500ml、3000ml、3000ml的二氯甲烷萃取三次，合并有机相加入200.00g无水硫酸钠干燥10min，然后用装有350.00g硅藻土的砂芯漏斗过滤干燥液，并用800ml+800ml+400ml的二氯甲烷洗涤硅藻土漏斗，合并滤液于20℃减压浓缩至油状物，加1000ml甲醇溶解油状物，置于-20℃以下冷藏24h重结晶。抽滤得固体，以200ml+200ml冷冻甲醇淋洗滤饼两次，抽干，将滤饼转入旋蒸瓶中于20℃用油泵抽6h至恒重。称量得240.52g类白色粉末，纯度为95%。

实施例2

避光条件下，通N₂排尽10L反应瓶中空气，将240.00g脱水长春碱加入到10L反应瓶中，然后加入940ml二氯甲烷，搅拌溶解，调节干冰-丙酮浴温至-65～-60℃并维持20min，将60.00g NBS和40ml三氟乙酸溶解于410ml二氯甲烷并用恒压滴液漏斗逐滴加入反应液中，约30min滴加完毕，继续控温在-65～-60℃搅拌反应2h，然后将65.00g乙酸铵溶于360ml蒸馏水并加入反应液，将-65～-60℃丙酮浴更换为-30～-20℃的丙酮浴继续搅拌反应10min，加入用520ml四氢呋喃和520ml蒸馏水溶解68.00g四氟硼酸银的混合溶液，撤去-30～-20℃丙酮浴于室温搅拌反应24h，最后加入用2600ml的蒸馏水溶解68.00g碳酸氢钠混合溶液终止反应。将反应液用装有350.00g硅藻土的砂芯漏斗过滤，然后依次用1000ml+600ml+600ml+400ml的二氯甲烷淋洗滤饼，将滤液用分液漏斗分出有机层，水层再依次用400ml+400ml+400ml的二氯甲烷萃取三次，合并有机层，加入200.00g无水硫酸钠干燥10min，用布氏漏斗过滤，最后用400ml+400ml二氯甲烷淋洗干燥剂二次，滤液于20℃减压浓缩至干，用油泵抽16h至恒重，得260.32g长春瑞滨粗品，纯度为60%。

实施例3

正相硅胶柱纯化：

制备饱和的甲醇-氨气溶液：向无水甲醇溶液中通入氨气约3h至饱和状态。

制备流动相溶液：取刚配好的甲醇-氨气溶液2000ml加入到80L二氯甲烷中混合均匀。

装柱：避光下，称取8000g400～500目硅胶用40L流动相搅拌均匀装入柱中并平衡至液面高出界面2～5mm时关闭阀门。

上样：260ml流动相溶解260.00g长春瑞滨粗品，加入柱中。

洗脱：加入流动相，控制流速为3ml/min，开始洗脱,用500ml的棕色瓶分别收集，TLC监测，合并目标物洗脱液，减压浓缩至干，用油泵抽24h恒重，得目标物105.00g。

反相硅胶柱纯化：

流动相的配制：80.00g L-（+）-酒石酸溶于8000ml蒸馏水中搅拌全溶后加入27.00g氢氧化钠，搅拌全溶得缓冲液，再将14L重蒸甲醇加入，混匀，得流动相。

将4000g反向硅胶用8000ml重蒸甲醇搅拌均匀后装入柱子中，平衡至液面高出界面5cm左右，然后依次用90%，80%，70%，60%的甲醇水溶液各1000ml梯度平衡，用2000ml流动相平衡至液面高出界面5mm左右，待上样品。

样品处理及上样：用105ml流动相溶解105.00g样品，加到柱中。

洗脱：加入流动相，控制流速为3ml/min，开始洗脱。

收集：用100ml的棕色瓶分别收集，TLC监测，收集目标物洗脱液，以2000ml+1000ml+500ml二氯甲烷萃取三次，合并二氯甲烷层,于20℃减压浓缩得固体，用油泵抽4h恒重，得长春瑞滨纯品40.52g。

实施例4

溶解：将40.00g长春瑞滨纯品用40ml乙酸乙酯溶解，15.20g的L-(+)-酒石酸用530ml的丙酮搅拌溶解，将长春瑞滨的乙酸乙酯溶液滴加到酒石酸的丙酮溶液中，室温下搅拌反应1小时，抽滤溶液。

浓缩：于20～25℃水浴减压浓缩至干，再用550ml乙醇溶解，抽滤。溶液于20～25℃水浴减压浓缩至干，用油泵抽12小时恒重。

干燥：避光条件下，将产品刮至托盘，在20～25℃条件下用真空干燥箱烘干48小时，得55.20g酒石酸长春瑞滨纯品。

Claims (8)

1.一种酒石酸长春瑞滨的合成方法，其特征在于包括如下步骤：

（1）脱水长春碱的制备，

（2）长春瑞滨粗品的制备，

（3）长春瑞滨纯品的制备，

正相硅胶柱纯化及C-18反相硅胶柱纯化；

（4）酒石酸长春瑞滨纯品的制备。

2.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(1)中的脱水长春碱的制备，选用酒石酸长春质碱和文多林为起始原料，在氨基乙酸和盐酸的作用下与六水合三氯化铁反应，然后反应液经硼氢化钠溶液还原，“一锅法”得到中间体脱水长春碱。

3.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(2)中的长春瑞滨粗品的制备，脱水长春碱于低温条件下在三氟乙酸的作用下与NBS反应生成溴代物，溴代物在四氟硼酸银和水的作用下重排，“一锅法”得到长春瑞滨粗品。

4.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(3)中的长春瑞滨纯品的制备，先向无水甲醇溶液中通入氨气制备饱和的甲醇-氨气溶液，然后取刚配好的甲醇-氨气溶液加入到二氯甲烷中混合均匀制备流动相溶液。采用该流动相溶液进行正相硅胶柱纯化，纯度及收率均较高，并且有利于后续反应。

5.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(3)中的长春瑞滨纯品的制备，采用反相硅胶柱纯化。

6.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(3)中的长春瑞滨纯品的制备，反相硅胶柱纯化流动相的配制：将L-（+）-酒石酸溶于蒸馏水中搅拌全溶后加入氢氧化钠，搅拌全溶，得缓冲液，再将重蒸甲醇加入,混匀，得流动相。

7.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(3)中的长春瑞滨纯品的制备，采用反相硅胶柱纯化：①将反向硅胶用重蒸甲醇搅拌均匀后装入柱子中，平衡至液面高出界面5cm左右，然后依次用90%，80%，70%，60%的甲醇水溶液梯度平衡，用流动相平衡至液面高出界面5mm左右，待上样品；②样品处理及上样：用流动相溶解样品，加到柱中；③洗脱：加入流动相，控制流速为3ml/min，开始洗脱；④收集：用100ml的棕色瓶分别收集，TLC监测，收集目标物洗脱液，以二氯甲烷萃取三次，合并二氯甲烷层，于20℃减压浓缩得固体，用油泵抽4h恒重，得长春瑞滨纯品，纯度及收率均较高，并且有利于后续步骤的进行。

8.一种如权利要求1所述的合成方法，其特征在于步骤(4)酒石酸长春瑞滨纯品的制备中，采用了创新方法：①溶解：将长春瑞滨纯品用乙酸乙酯溶解，将L-(+)-酒石酸用丙酮搅拌溶解，将长春瑞滨的乙酸乙酯溶液滴加到酒石酸的丙酮溶液中，室温下搅拌反应1小时，抽滤溶液；②浓缩：于20～25℃水浴减压浓缩至干，再用乙醇溶解，抽滤。溶液于20～25℃水浴减压浓缩至干，用油泵抽12小时恒重；③干燥：避光条件下，将产品刮至托盘，在20～25℃条件下用真空干燥箱烘干48小时，得酒石酸长春瑞滨纯品。