CN104717969A

CN104717969A - 姜黄提取物的新型制剂和应用

Info

Publication number: CN104717969A
Application number: CN201380052627.5A
Authority: CN
Inventors: I·帕斯尔; T·Z·沃德玛利亚姆
Original assignee: Pharmaceutical College Of North University Of California
Current assignee: Pharmaceutical College Of North University Of California; California Northstate College of Pharmacy LLC
Priority date: 2012-08-21
Filing date: 2013-08-19
Publication date: 2015-06-17
Also published as: AU2013306104A1; EP2887950A1; US20140056829A1; EP4147707A1; US10973778B2; US20240342112A1; US20140056828A1; JP2015527361A; EP3636273B1; EP3636273A1; EP3981418A1; US10231940B2; US20210267913A1; EP3981418B1; US12053439B2; AU2013306104B2; US20140056830A1; WO2014031504A1; US8815220B2; HK1211834A1

Abstract

本发明提供了姜黄植物提取物的制剂和应用，例如以安全的用于局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药。本发明还提供了一种含有姜黄提取物的防晒剂，所述防晒剂具有横跨UVA和UVB范围的吸收能力，在无需添加二氧化钛下符合FDA最新建议。还提供了制备提取物的方法，该方法包括使用至少基本上无毒的且还可在液体剂型中用作载体的提取溶剂。该提取方法还得到了比现有领先技术明显更高的单次提取收率。液体剂型可以在无需去除提取溶剂下直接通常该提取方法制得，降低了现有技术的复杂性和成本。还提供了微乳液和纳米乳液以提高提取物的生物利用度和稳定性。

Description

姜黄提取物的新型制剂和应用

INDIRAN PATHERTIBEBE ZEWDIE WOLDEMARIAM

背景技术

技术领域

本发明大体涉及姜黄植物(Curcuma longa L.plants)的提取物的制剂和应用，例如安全的用于局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药。

相关技术描述

姜黄提取物作为防晒剂(sunscreen)的新用途

出人意料地，本发明表明姜黄的提取物具有非常好的紫外线能量吸收性能且贯穿整个兴趣波长范围，使其在作为防晒剂上极具吸引力。而且，姜黄的成分已经被证明可提供其他的治疗作用。例如，抗氧化性和抗炎的效果已被证明，而对阿尔茨海默病、帕金森疾病、囊肿性纤维化、肝损伤、酒精性肝病(alcohol-induced liver disease)、多发性硬化症、人体免疫缺损病毒(HIV)和癌症的治疗也已被提出。因此，姜黄提取物作为防晒剂的应用具有提供额外的治疗益处的潜力这可能远远超过仅保护皮肤免受太阳的UV射线的作用。

显然市场上有许多防晒产品，并且都利用化学试剂吸收UV辐射。UV辐射是具有比可见光更短的波长的辐射大约在10nm-400nm的范围内。较低的波长，高至约290nm，可被地球的臭氧层所屏蔽对该段波长一般并不感兴趣。因此，防晒产品关注于290nm-400nm的波长范围。波长范围从290nm-320nm被称为“UVB”射线，尽管UVB射线具有更高的强度，但是它们具有更低的穿透力。因此，UVB射线可以损害皮肤的表层但是不会更深入的穿透，它们不会穿透玻璃，并且它们的作用通常在美国时间的10a和4p才能被最好地感知。波长范围从320nm-400nm被称为“UVA”射线。UVA强度小但是可更深入的穿透皮肤导致皮肤的更深层损伤，并可穿过玻璃，且它的作用不会受一天中的某一时间的影响。UVA由于强度较低它造成损伤比UVB的小，并且UVB光被认为是晒伤的主要原因，包括是黑色瘤和其它皮肤癌的主要原因。然而，UVA/s的能力却可造成皮肤的更深层的损伤，并且它比UVB更普遍约30-50倍，因此近来UVA辐射更加备受关注。例如，已表明UVA可加强来自UVB的致癌作用和影响免疫功能。有趣的是，2011年6月17日，FDA报告了防晒产品应该对UVA和UVB都有保护，并且UVA的范围有两个独特的兴趣区域，UVA₁区域为从340nm-400nm的范围和UVA₂区域为从320nm-340nm的范围。FDA还表示对UVB太过重视，至少应该将20％的保护针对UVA₂区域，以及至少应该将60％的保护针对UVA₁区域，并强调UVA₁区域的重要性。

问题在于目前可用的防晒化学物质吸收的光要么在UVA范围内要么在UVB范围内。因此，消费者期望的保护水平，至少如FDA所指出的，并不能得到满足。目前，为了解决这个问题，本领域使用(i)二氧化钛以扩大防护的UVA范围、(ii)重叠和扩大防护的UV光谱的防晒剂组合，或者(iii)二氧化钛和重叠范围(overlapping ranges)的组合。然而，依然存在严重的问题。其中一个问题为峰的重叠使得皮肤在UV光谱的区域内防护弱，这是由于无法充分地跨UV光谱重叠防护。另一个问题为二氧化钛能渗透皮肤，这使得它在暴露于UV中可能转换为具有危险的致癌化合物的潜在问题。

制备姜黄提取物的问题

现有的提取方法存在着多个问题。一个问题为这些方法将采取不良水平的不良化学物质，例如，二氯乙烷、二氯甲烷以及乙酸乙酯。也可以使用乙醇，但是为了体内使用它只能以有限量存在，并且由于副作用局部应用也受限。因此，大量的努力都花费在试图保持残留溶剂至极限值以下。例如，现有的提取方法一般需要复杂的过程，其包括去除不良的或者有毒的提取溶剂以满足FDA的规则，例如可以包括蒸馏溶剂以形成提取物的粉末，将提取物反萃到不同的但适于具体应用的溶剂中，与金属离子络合，调至高pH以与氨形成复合物并沉淀，用甲醇和水洗，以及在高的温度下干燥。至少从上述来看，现有的提取方法存在(i)需要步骤除去所使用的有毒溶剂并且存在着有毒残留物的风险，(ii)多个步骤加热以提取和纯化；(iii)对姜黄使用的pH高达9.5，姜黄在pH 7.0以上将降解；并且，事实上(iv)多步骤的方法复杂又高价。目前还没有一种姜黄的提取方法，其使用的溶剂适合于局部使用和体内使用。

改善姜黄提取物在其他的给药中的应用，例如口服或者直肠给药

中草药制剂，包括姜黄根，可商购，通常作为胶囊并含有干燥的和研磨的植物材料。姜黄可以作为抗氧化剂、自由基清除剂使用，以除去对人体组织并不利的但许多疾病都产生的活性氧(ROS)。它也可以用来作为一种抗炎药。问题在于现有的制剂通常量大以获得所需的剂量，或者需要用多个胶囊，这给使用者带来不便，当然非依从性(non-compliance)。本领域技术人员清楚的是为了增加给药依从性，以及生物利用度，对给药后的提取物组分的依从性，可采用稳定的、浓缩制剂，例如溶液、乳剂、微乳液(microemulsion)和纳米乳液(nanoemulsions)。

本领域技术人员希望得到具有(i)横跨UVA和UVB范围的具有非常宽的吸收带和理想强度的防晒剂且不需要加入二氧化钛。此外，本领域希望得到(ii)不需要移除提取溶剂的制备提取物的方法，以减少操作的复杂性和花费。而且，本领域还希望得到(iii)抗氧化剂剂型，其不仅可以直接使用于提取过程，而且还是有效的且可浓缩为小量使用的，以满足日益增长各种给药和应用的依从性。尤其，本领域希望得到具有(iv)可以很容易的从提取过程直接制备的微乳液和纳米乳液的制剂，其不需要进一步分离提取溶剂，并且该乳剂具有增强的提取物生物利用度和稳定性。而且，本领域也希望得到(v)提取物的制剂其可以组合用作局部、口服和/或直肠给药的组合物以应对本文教导的各种适应症。最后，本领域希望得到具有可以满足以上所有需求的提取方法同时也提供(vi)具有显著比本领域最先进的方法更高收率的提取方法。

发明内容

本发明主要涉及可以从姜科(Zingiberaceae family)中分离出来的活性组分，以安全的用于局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药，例如，即姜黄属(Curcuma family)，以及特别是姜黄(Curcuma longa L.)或者“郁金(turmeric)”。在一些实施方式中，本发明涉及一种组合物作为防晒剂的应用，该组合物含有姜黄根的提取物。

在一些实施方式中，本发明涉及一种药学上可接受的组合物，该组合物含有从姜黄植物的根中得到的纯化的液体提取物。所述液体提取物可以含有兴趣化合物(compounds of interest)，例如姜黄素；去甲氧基姜黄素；双去甲氧基姜黄素；或者它们的组合。所述液体提取物也含有至少基本上无毒的提取溶剂，该提取溶剂在提取过程中将兴趣化合物从姜黄植物的根中脱除；并且，该提取溶剂作为药学上可接受的载体具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性(acute oral toxicity)或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性(acute dermal toxicity)；其中，所述提取溶剂用于在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除以及选作保留为所述药学上可接受的组合物的成分。

应当理解的是，术语“纯化的(purified)”指的是从姜黄植物中分离出的提取物，在一些实施方式中，例如是指将兴趣化合物是从植物的剩余部分以可溶形式分离出。因此，本领域技术人员理解的是兴趣化合物可与植物的其他成分被携带入提取物中。例如，这样的其他组分可以包括选自半纤维素、树脂类(resins)、油类、挥发性物质、无机盐类或者它们的任意组合组成的组。在一些实施方式中，术语“纯化的”指的由兴趣化合物的任何一种或者任意组合组成的提取物，或者基本上由兴趣化合物的任何一种或者任意组合组成的提取物。在一些实施方式中，所述提取物含有提取溶剂。在一些实施方式中，一种提取物“基本上”由兴趣化合物的任何一种或者任意组合组成，其中来自该植物的任何其它成分的存在对兴趣化合物的效果具有微不足道的影响(negligible effect)。使用的术语“微不足道的影响”的意思为在分别地与兴趣化合物的任何一种或者任意组合相比时(并不包括其他组成)活性没有提高或者减少多于约10％。在一些实施方式中，使用的术语“微不足道的影响”指的是变化低于10％、低于9％、低于8％、低于7％、低于6％、低于5％、低于4％、以及低于3％。在一些实施方式中，使用的术语“微不足道的影响”指的是变化范围为约3％-约10％，以1％为增量。在一些实施方式中，所述其他成分，例如，半纤维素、树脂类、油类、挥发性物质、无机盐类或者它们的任意组合可以提高兴趣化合物的活性。例如，兴趣化合物的活性可以被提高的量为约10％-约300％、约20％-约200％、约25％-约250％、约30％-约300％、约35％-约275％、约40％-约225％、约15％-约100％，或者它们的1％增量的范围。

应该理解的是术语“提取物(extract)”可以用于指兴趣化合物的粉末形式、感兴趣化合物的液体形式，或者兴趣化合物的任何一种或者任意组合的粉末或者液体形式。本领域技术人员理解的是术语“提取物”可以用于指在从植物中脱除之前、脱除期间或之后的兴趣化合物。在一些实施方式中，兴趣化合物可使用本领域技术人员都熟知的常规化学方法合成得到，因此本领域技术人员不使用本文教导的提取方法，而是合成并单独或组合使用所述兴趣化合物。

本领域技术人员所了解的任何剂型都可以用于给药，例如包括，局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药。在一些实施方式中，所述组合物可以局部给药的剂型用于本文中所描述的任何应用中。在一些实施方式中，所述组合物作为防晒剂局部施用。而且，在一些实施方式中，所述组合物为口服给药的剂型。在一些实施方式中，所述剂型可以为胶囊或者片剂。所述组合物可用作膳食补充剂。在一些实施方式中，所述膳食补充剂可以作为受试者(subject)的抗氧化剂。

本发明还涉及一种药学上可接受的乳剂，该乳剂含有从姜黄植物的根中得到的纯化的液体提取物。所述乳剂可以含有姜黄素；去甲氧基姜黄素；双去甲氧基姜黄素；或者它们的组合。所述乳剂含有至少基本上无毒的提取溶剂，该提取溶剂在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除；并且，该提取溶剂作为药学上可接受的载体具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性；其中，所述提取溶剂(iii)用于在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除以及(iv)选作保留为所述药学上可接受的组合物的成分。所述乳剂含有药学上可接受的油；以及乳化剂。本领域技术人员理解的是乳剂可以是微液滴很好的分散在它不溶的或者不易溶的另一液体中。因此，含药学上可接受的油和乳化剂的乳剂也可以含有水、乙醇，或者任何其它的适合的亲水液体，例如聚乙二醇200(PEG 200)或者聚乙二醇400(PEG 400)。

本发明还涉及了一种制备本文中所述的药学上可接受的组合物方法。该方法可以包括在至少基本上无毒的提取溶剂中将至少部分的姜黄根浸泡有效的时间。在这些实施方式中，该提取溶剂与包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的酚二酮类是可混溶的；以及，可作为酚二酮类的药学上可接受的载体。作为载体，它应该具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性。所述浸泡包括用提取溶剂覆盖该部分根。所述方法还包括分离所述提取溶剂和浸泡的根以得到姜黄的液体提取物。

本发明还涉及了制备含有本发明的提取物的药学上可接受的乳剂方法。该方法包括在至少基本上无毒的提取溶剂中将至少部分的姜黄根浸泡有效的时间，该提取溶剂与包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的酚二酮类是可混溶的；并且该提取溶剂为酚二酮类的药学上可接受的载体，且该载体具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性。该方法还包括分离所述提取溶剂和浸泡的根以得到姜黄的液体提取物，以及，乳化该液体提取物。

在一些实施方式中，所述乳化包括向所述液体提取物中加入药学上可接受的油以得到液体提取物的乳剂。而且，在一些实施方式中，所述乳化包括向所述液体提取物中加入乳化剂以得到同上所述的液体提取物的乳剂。

在本发明中使用的提取溶剂可以为本领域技术人员知道符合标准的任意的这样的提取溶剂，或者这样的溶剂的任意组合。在一些实施方式中，所述提取溶剂包括聚乙二醇(20)脱水山梨糖醇油酸酯(TWEEN 80)，聚乙二醇、肉豆蔻酸异丙酯(isopropyl myristate)或者它们的组合。在一些实施方式中，所述提取溶剂包括TWEEN 80和肉豆蔻酸异丙酯的组合。在一些实施例中，所述提取溶剂中包含的TWEEN 80HP：肉豆蔻酸异丙酯的比例为约20:80-约50:50。

在本发明中使用的所述药物学上可接受的油可以为本领域技术人员知道符合标准的任意的这样的油，或者油的任意组合。在一些实施方式中，所述药物学上可接受的油包括选自动物油、鱼油、植物油或者矿物油组成的组中的油。在一些实施方式中，所述药物学上可接受的油包括选自橄榄油、向日葵油、芝麻油、杏仁油(almond oil)、玉米油、橙油(orange oil)、梨莓油(lime oil)、黑胡椒油、肉豆蔻油、罗勒油、迷迭香油、丁香油、葡萄柚油(grapefruit oil)、茴香油、芫荽油(coriander oil)、佛手柑油(bergamot oil)、肉桂油(cinnamon oil)、柠檬油、薄荷油、大蒜油、百里香油、马郁兰油(marjoram oil)、柠檬草油、姜油(ginger oil)、小豆蔻油(cardamon oil)、液体石蜡、棉花籽油、花生油、坚果油、豆油、菜籽油(rapeseed oil)、维生素E油、维生素E TPGS油、鱼油、动物脂衍生的油(tallow-derived oil)、硅油(silicone oil)、蓖麻油、角鲨烯油(squalene oil)或者它们任意的混合物组成的组中的食用油。

本发明还涉及一种试剂盒，该试剂盒包括局部剂型、口服剂型或者直肠剂型的组合以用于受试者的给药。在一些实施方式中，所述试剂盒用于保护真皮组织免于UVA和UVB照射，所述试剂盒包括作为口服剂型的姜黄根的提取物；作为局部剂型的姜黄根的提取物；以及，用于局部剂型、口服剂型，或者局部和口服剂型的组合的给药说明。

本发明的提取物可以用于多种治疗种。在一些实施方式中，本发明涉及处理皮肤以防止或抑制皮肤受UVA和UVB照射的方法，该方法包括对受试者的真皮组织(dermal tissue)局部给药有效量的本文中所述的组合物。在一些实施方式中，该方法进一步包括对受试者口服给药有效量的本文中所述的组合物的口服剂型以系统地治疗疾病或者紊乱(disease or disorder)，例如本文给出的疾病或者紊乱。在一些实施方式中，所述方法进一步包括对受试者口服给药有效量的本文所述的组合物的口服剂型以作为膳食补充剂。在一些实施方式中，该方法进一步包括在联合所述局部给药的情况下对受试者进行口服给药有效量的本文所述的组合物。

在一些实施方式中，本发明涉及治疗受试者的组织炎症的方法，该方法包括对受试者的组织给药有效量的本文中所述的组合物。在一些实施方式中，本发明涉及治疗受伤组织的方法，该方法包括对受试者的组织给药有效量的本文所述的组合物。

任何组织都可以通过接触一种或多种本发明所述的提取物的活性组分以得到治疗。所述组织可以为，例如，结缔组织、肌肉组织、神经组织和/或上皮组织。在一些实施方式中，所述组织为真皮组织。在一些实施方式中，所述组织为粘膜组织(mucosal tissue)。以及，在一些实施方式中，所述组织为胃肠道组织(gastrointestinal tissue)。在一些实施方式中，第一组织接触一种或多种本发明所述的提取物的活性组分并且第二组织受益则作为二次效应(secondary effect)。

本领域技术人员在阅读随后的内容后将理解这些概念可以延伸出额外的实施方式其超出权利要求的文字记载范围、权利要求的记载的发明范围以及权利要求记载的术语范围。

附图说明

图1A-1F根据一些实施方式，对比了代表性的现有技术领先的防晒剂的吸收光谱与姜黄的吸收光谱。

图2A和2B根据一些实施方式，对比了姜黄的TWEEN提取物的抗氧化活性与白藜芦醇的抗氧化活性。

具体实施方式

本发明涉及可以从姜科植物中分离出来的活性提取物、组合物以用于局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药，例如，姜黄属(Curcuma genus)，以及更特别是姜黄(Curcuma longa L.)或者“郁金(turmeric)”。从姜科中获得的任何活性提取物都可以用于本发明。在一些实施方式中，本发明涉及一种组合物作为防晒剂的应用，该组合物含有姜黄根提取物。

在一些实施方式中，可使用姜黄(Curcuma)或者姜黄(Curcuma L.)属的提取物。在一些实施方式中，所述提取物可以来自于绿脓姜黄(Curcumaaeruginosa)、白顶姜黄(Curcuma albicoma)、白花姜黄(Curcuma albiflora)、姜荷花(Curcuma alismatifolia)、芒果姜(Curcuma amada Roxb)、极苦姜黄(Curcuma amarissima)、安格佛利亚姜黄(Curcuma angustifolia)、毛郁金(Curcuma aromatica)、春秋姜黄(Curcuma attenuata)、桔红姜黄(Curcumaaurantiaca)、澳洲斯卡姜黄(Curcuma australasica)、唇兰姜黄(Curcumabakeriana)、双色姜黄(Curcuma bicolor)、海地姜黄(Curcuma bhatii)、巴蒂姜黄(Curcuma burttii)、青灰姜黄(Curcuma caesia)、姜黄触角鞘(Curcumaceratotheca)、川莪术(Curcuma chuanezhu)、川姜黄(Curcumachuanhuangjiang)、川郁金(Curcuma chuanyujin)、山皮姜黄(Curcumacochinchinensis)、忍冬姜黄(Curcuma codonantha)、蓝花姜黄(Curcumacoerulea)、彩色姜黄(Curcuma colorata)、柯木莎姜黄(Curcuma comosa)、革叶姜黄(Curcuma coriacea)、地西盆姜黄(Curcuma decipiens)、家郁金(Curcuma domestica)、阿卡拉塔姜黄(Curcuma ecalcarata)、紫草姜黄(Curcuma euchroma)、尔克马塔姜黄(Curcuma ecomata)、大莪术(Curcumaelata)、细莪术(Curcuma exigua)、镑色莪术(Curcuma ferruginea)、黄花姜黄(Curcuma flaviflora)、革兰姜黄(Curcuma glans)、纤细姜黄(Curcumagracillima)、大花姜黄(Curcuma grandiflora)、哈利沙姜黄(Curcuma haritha)、哈曼迪姜黄(Curcuma harmandii)、海尼姜黄(Curcuma heyneana)、因朵拉姜黄(Curcuma inodora)、因朵拉姜黄(Curcuma inodora)、卡娜塔肯斯姜黄(Curcuma karnatakensis)、库维姜黄(Curcuma kudagensis Velayudhan)、广西莪术(Curcuma kwangsiensis)、披针姜黄(Curcuma lanceolata)、拉森依姜黄(Curcuma larsenii)、拉佛拉姜黄(Curcuma latiflora)、拉佛利亚姜黄(Curcuma latifolia)、流克巴克姜黄(Curcuma leucorrhiza)、龙晶姜黄(Curcuma loerzingii)、姜黄(Curcuma longa L)、姜黄(Curcuma longa)、长穗姜黄(Curcuma longispica)、马拉巴尔(Curcuma malabarica)、宽额姜黄(Curcuma meraukensis)、木碧利斯姜黄(Curcuma mutabilis)、雷仁思姜黄(Curcuma neilgherrensis)、尼拉仁思姜黄(Curcuma nilamburensis)、少花姜黄(Curcuma oligantha)、欧娜塔姜黄(Curcuma ornata)、白纸质苞片姜黄(Curcuma parviflora)、帕瓦拉姜黄(Curcuma parvula)、披纱姜黄(Curcumapeethapushpa)、女王郁金(Curcuma petiolata)、蓬莪术(Curcuma phaeocaulis)、哥木姜黄(Curcuma pierreana)、疲沓姜黄(Curcuma plicata)、坡菲力亚姜黄(Curcuma porphyrotaenia)、帕沙姜黄(Curcuma prakasha)、潘多拉姜黄(Curcuma pseudomontana)、紫冠姜黄(Curcuma purpurascens)、红毛姜黄(Curcuma purpurea)、拉坎塔姜黄(Curcuma raktakanta)、黎娜塔姜黄(Curcuma reclinata)、啦多塔姜黄(Curcuma rhabdota)、罗巴姜黄(Curcumarhomba)、马来姜黄(Curcuma roscoeana)、东陵姜黄(Curcuma rubescens)、茹芭提雅姜黄(Curcuma rubrobracteata)、沙哑萨伊姜黄(Curcuma sattayasaii)、四川姜黄(Curcuma sichuanensis)、兴格拉姜黄(Curcuma singularis)、斯帕佛利亚姜黄(Curcuma sparganiifolia)、斯坦拉姜黄(Curcuma stenochila)、思卓必拉姜黄(Curcuma strobilifera)、苏卡塔姜黄(Curcuma sulcata)、苏门姜黄(Curcuma sumatrana)、水苏姜黄(Curcuma sylvatica)、沙卡利斯姜黄(Curcuma thalakaveriensis)、托瑞里姜黄(Curcuma thorelii)、太三沙姜黄(Curcuma trichosantha)、瓦曼姜黄(Curcuma vamana)、卫克里斯姜黄(Curcuma vellanikkarensis)、温郁金(Curcuma wenyujin)、温州姜黄(Curcumawenchowensis)、黄红姜黄(Curcuma xanthorrhiza)、云南姜黄(Curcumayunnanensis)、白莪术(Curcuma zedoaria)、莪术酮(Curcuma zedoaroides)以及它们的任意组合。

在一些实施方式中，所述提取物可以来自于绿脓姜黄、家郁金、姜黄、曼加姜黄(Curcuma manga)、黄红姜黄或者它们的组合。在一些实施方式中，所述提取物可以来自于阿飞噶(Alpina galaiga)、阿曼豆蔻(Amonumkepulaga)、佛立么姜(Phoeomera speciosa)、卡萨蒙纳姜(Zinger cassumunar)或者它们的组合。

本文所提供的组合物可以被称为提取物、组合物、化合物、药剂(agents)、活性试剂、生物活性试剂、补充剂、药物等。在一些实施方式中，术语“组合物”、“药剂”、“活性的”、“活性试剂”、“生物活性试剂”、“补充剂”以及“药物”可以互换使用，应该理解的是“制剂”可以含有它们中的任意一种或者任意组合。同样地，在一些实施方式中，所述组合物也可以为液型(liquidform)或者干型(dry form)，所述干型在一些实施方式中可以为粉末形式，并且液型可以含有水或者无水成分。此外，术语“生物活性”可以指组合物对受试者进行口服给药、局部给药或者直肠给药的功能。

在一些实施方式中，使用的术语“靶点(target site)”指的是在受试者的外面或里面的能够受益于给药本发明的化合物(无论是局部给药或者口服给药)的选区。在一些实施方式中，靶点可以包括任何试剂活性使得受试者受益的作用位点，例如抗氧化剂活性、抗炎活性或者防UVA和UVB的活性。所述靶点可以为受试者的健康组织或者损伤组织。因此，本发明包括一种对健康组织或损伤组织(包括真皮组织、粘膜组织、胃肠道组织或其他的)给药本发明的一种或多种化合物的方法。

本领域技术人员理解的是所述组合物或者制剂应该保持稳定或者至少基本上稳定，直到使用时或者被活化时，并且这与保存期限(shelf life)或者在制得和给药所述组合物之间的时间或者它们的组合有关。在一些实施方式中，所述组合物为稳定的或者基本稳定的，以在合理的时间段内进行使用，该时间为本领域技术人员认为的合理的时间。在一些实施方式中，所述组合物应该在从制备到给药该组合物的合理的时间内稳定，以及在一些实施方式中，所述组合物应该具有合理的商业保存期限(commercial shelf life)，该保存期限为本领域技术人员认为的合理的保存期限。在一些实施方式中，合理的保存期限可以为至少6个月、至少一年、至少18个月、至少2年、至少3年，或者以约1个月为增量的中间的任意时间。

在一些实施方式中，如果组合物或者制剂的活性损失低于它的原始活性的10％可认为为“稳定的”。在一些实施方式中，如果组合物或者制剂的活性损失低于它的原始活性的5％、3％、2％或者1％可认为为稳定的。在一些实施方式中，如果组合物或者制剂的活性损失大于它的原始活性的约10％可认为为“基本稳定的”，只要所述组合物可以达到指定用途的合理功效。在一些实施方式中，所述组合物活性损失的量大于约12％、约15％、约25％、约35％、约45％、约50％、约60％或者甚至约70％，则可以认为为基本稳定的。所述活性损失可以通过对比包装时的活性和给药时的活性来测量得到，并且这可以包括合理的保存期限。在一些实施方式中，如果所述组合物在3个月-3年、6个月-2年、1年里都可用，或者以约1个月为增量的任何时间段内都可用，那么认为所述组合物为稳定的或者基本稳定的。

使用方法

本发明的提取物可以用于各种治疗、预防、改善，或者其它的，也用作膳食补充剂。该应用可以包括药用目的、作为健康的补充剂、营养的组合物、预防药，或者治疗已患病况。在一些实施方式中，任何可以与本发明的提取物的活性成分的一种或多种接触的组织都可以被治疗。在一些实施方式中，在受试者中的其他地方与本发明的提取物的活性成分的一种或多种接触时组织可以具有可观的二次效应，如此一种或多种活性组分可以接触第一组织，而第二组织实现有益效果。例如，所述第一组织可以为胃粘膜(stomachlining)，而所述第二组织可以通过释放神经递质或者神经冲动来实现有益效果。所述组织例如可以为结缔组织、肌肉组织、神经组织和/或上皮组织。在一些实施方式中，所述组织为真皮组织。在一些实施方式中，所述组织为粘膜组织。以及，在一些实施方式中，所述组织为胃肠道组织。

在一些实施方式中术语“治疗(treat)”、“处理(treating)”和“治疗(treatment)”可以互换，并且指的是给药或使用本发明的组合物和制剂，包括健康的或者营养补充剂的这种给药，并且如本文给出的，所有给药涉及症状的预防、抑制、改善，或者甚至是病况的治愈。在一些实施方式中使用的术语“疾病”、“病况(condition)”、“紊乱(disorder)”，以及“小病(ailment)”可以互换。在一些实施方式中使用的术语“受试者(subject)”和“病人(patient)”可以互换，并且指的是动物如哺乳动物(包括但不限于，非灵长类动物，例如奶牛、猪、马、猫、狗、大鼠和小鼠；以及灵长类，例如，猴子或者人类)。因此，术语“受试者”和“病人”也可以用于包括非人类的生物应用，包括但不限于，兽医、宠物、商业的牲畜，以及类似的。

在一些实施方式中，本发明还涉及一种处理皮肤以防止或抑制皮肤受UVA和UVB照射的方法，该方法包括对受试者的真皮组织局部给药有效量的本发明所述的组合物。在一些实施方式中，该方法进一步包括对受试者口服给药有效量的本文中所述的组合物的口服剂型以系统地治疗疾病或者紊乱，例如本文给出的疾病或者紊乱。在一些实施方式中，该方法进一步包括对受试者口服给药有效量的本文所述的组合物的口服剂型以作为膳食补充剂。在一些实施方式中，该方法进一步包括在联合所述局部给药的情况下对受试者进行口服给药有效量的本文所述的组合物。在一些实施方式中，本发明涉及治疗受试者的组织炎症的方法，所述方法包括对受试者的组织给药有效量的本文所述的组合物。在一些实施方式中，本发明涉及治疗受伤组织的方法，该方法包括对受试者的组织给药有效量的本文所述的组合物。

化合物的“有效量(effective amount)”描述的是治疗有效量或者预防有效量。有效量也可以为改善疾病症状的量。“治疗有效量”可以指一种剂量上和在一段时间内能够达到期望的治疗结果的量，也可以指活性化合物、前药或者药剂引起组织、体系或者受试者任何生物学上的或医学上的响应的量(这是研究员、兽医、医生或者其他临床医师所寻求的且可以作为达到预期作用的部分治疗方案)。在一些实施方式中，所述在治疗有效量应该是给药了足够的量会使得紊乱的一个或多个症状得到改善、紊乱恶化得到抑制或者紊乱退化。在一些实施方式中，例如，治疗有效量是指可提供所述组合物的理想作用的可测响应的至少5％、至少10％、至少15％、至少20％、至少25％、至少30％、至少35％、至少40％、至少45％、至少50％、至少55％、至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或者至少100％的试剂的量。

在预防或者抑制疾病或者紊乱的发作时，或者考虑要给药至可预防的，可以使用本发明的组合物或者制剂的预防有效量。“预防有效量”指的是在剂量上和在一段时间内能够达到期望的预防结果的量，如防止晒伤、炎症、过敏、恶心、腹泻、感染等的发生。通常情况下，预防剂量为疾病发病前，或者在疾病发作的早期阶段用于受试者，以防止或者抑制疾病或者疾病症状的发作。预防有效量可以小于、大于或者等于治疗有效量。

在一些实施方式中，组合物的治疗有效量或者预防有效量可以为约0.01nM-约0.10nM；约0.01nM-约0.5nM；约0.1nM-约150nM；约0.1nM-约500μM；约0.1nM-约1000nM；约0.001μM-约0.10M；约0.001μM-约0.5M；约0.01μM-约150μM；约0.01μM-约500μM；约0.01μM-约1000nM，或者任何其中的范围内的浓度。在一些实施约中，所述组合物的给药量的范围为约0.005mg/kg-约100mg/kg；约0.005mg/kg-约400mg/kg；约0.01mg/kg-约300mg/kg；约0.01mg/kg-约250mg/kg；约0.1mg/kg-约200mg/kg；约0.2mg/kg-约150mg/kg；约0.4mg/kg-约120mg/kg；约0.15mg/kg-约100mg/kg；约0.15mg/kg-约50mg/kg；约0.5mg/kg-约10mg/kg，或者其中的任何范围，其中，人类受试者通常假定为平均约70kg。除了本文提供的作为防晒霜用以外，本发明的所述提取物可以提供多种治疗益处。这种益处例如可以包括自由基清除剂和抗氧化剂，抑制脂质过氧化(lipid peroxidation)和DNA氧化损伤(oxidative DNA damage)；抗炎活性；对阿尔兹海默症疾病(抗淀粉样蛋白和其它效果)、帕金森疾病以及其它神经性紊乱的神经治疗；抗关节炎治疗；抗缺血治疗(anti-ischemic treatment)；治疗多发性骨髓瘤和骨髓增生异常综合症；牛皮癣治疗(局部给药和口服给药)；囊性纤维化治疗(cystic fibrosistreatments)；用于肝损伤和酒精性肝病治疗；多发性硬化症的治疗；抗病毒治疗，包括人体免疫缺陷病毒(HIV)治疗；糖尿病治疗；癌症治疗；以及，降低患心脏病的风险；在此仅举几个例子。

因此，姜黄提取物作为防晒剂的应用具有潜在的提供额外的治疗益处的潜力这可能远远超过可能远远超过仅保护皮肤免受太阳的UV射线的作用。对于皮肤，这种效果可以有助于防止个人敏感肌肤的反应。这种反应的限制可以有助于解决潮红(flushing)、脸红(blushing)、红斑痤疮(rosacea)和该个体中的相似的病。鉴于上述情况，所述防晒剂可用于为运动员提供有益的效果(由于在体育比赛期间持续不断的小刮伤和受伤，而在使用它后可以较快愈合)。它对园丁，那些在海滩上的人，背包客等都有相似的优势。所述提取物可以例如用于作为膳食补充剂或者药学上可接受的剂型。

在一些实施方式中，本发明所述的提取物可以通过口服给药途径用作抗氧化剂，以作为自由基清除剂，以去除在多种疾病中都产生的活性氧(ROS)，使其不可作用与人体组织。在一些实施方式中，所述膳食补充剂可以在受试者中作为抗氧化剂。在一些实施方式中所述组合物可以用作膳食补充剂。

所述组合物或者制剂还可用于治疗炎症。在一些实施方式中，它们被给药于处理任何组织的炎症，例如在受试者中的皮肤炎症、粘膜炎症，或者肠胃道炎症，它们例如可以被局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药以预防、治疗、抑制或者改善组织炎症的症状。

在一些实施方式中，所述组合物和制剂可以用于预防、治疗、改善所述症状，甚至治愈，严重的或者慢性的肠胃道病况。这种病况可以包括，但不限制于胃酸过多症、结肠炎、肠易激综合征、克罗恩病(Crohn’s disease)、坏死性肠炎、功能性结肠疾病(functional colonic diseases)、吸收障碍、消化性溃疡、胃肠道道返流疾病(gastro-esophageal reflux disease)、溃疡性结肠炎以及憩室炎(diverticulitis)。在一些实施方式中，所述组合物和制剂可以用于降低粘膜组织的炎症、功能紊乱或者损伤。这种病况例如可以通过药物的副作用、化学治疗、失调、辐射、正常菌群的变化、高度免疫、自身免疫反应、免疫缺陷、神经过敏、敏感症、化学性刺激以及紧张引起。在一些实施方式中，所述肠胃道病况的症状例如可以包括腹泻、脱水、营养不良(malnutrition)、便秘、恶心和/或痉挛(cramping)。而且，在一些实施方式中，所述肠胃道病况的症状可能是暂时的且包括酸刺激(acid irritation)、消化不良、腹胀(bloating)、痉挛、痉挛性蠕动(spasmodic peristalsis)、腹泻以及便秘。在一些实施方式中，给药所述组合物或者制剂以用于治疗和/或控制肠胃道病况可认为是一种营养的或者健康的补充。

所述组合物或者制剂还可用于处理伤口。一般而言，它们可用以保护皮肤或粘膜、促进皮肤或粘膜愈合或者改善皮肤或者粘膜的功能。在一些实施方式中，例如，可治疗的伤口和慢性炎症的病况包括，但并不限制于通过(i)物理损伤、(ii)糖尿病皮肤病变(diabetic skin lesion)、(iii)褥疮(bed sore)，(iv)灼伤、(v)感冒疮(cold sore)、(vi)牛皮癣、(vii)湿疹以及(viii)由病原体引起的皮肤病炎症引起的伤口，在此仅举几个例子。

制备和给药所述提取物

制备姜黄提取物

一般而言，例如，可以将至少部分的姜黄根的一部分压碎然后浸在溶剂中以得到浸泡液。所述浸泡液过滤而滤渣可重新多次提取。可调节提取物的效力并且储存在琥珀色的瓶子中。所述提取物可以制备为酒精提取物(alcoholic extract)、油提取物(oily extract)或者可以使用另一种类的有机溶剂。所述提取物可以以酒精溶液使用或者可以蒸发溶剂并将干粉掺入适当的人类使用的制剂。提取也可以使用适于人体使用的油作为溶剂，该溶剂的优点为所述提取物可直接渗入到防晒霜或者防晒露(lotion)制剂中。

在一些实施方式中，所述溶剂可以为低级烷醇。低级烷醇在提取中可以使用的浓度范围，例如为20％-30％、30％-40％、40％-50％、50％-60％、60％-70％、70％-80％、80％-90％，或者其中的任何浓度。所述烷醇可用于额外清洗以将所述提取物进一步纯化。提取沉淀物例如可以用大量的低级烷醇清洗，通常洗涤例如可以包括用95％的乙醇洗三次。然后沉淀物可在水中以适于进一步操作的浓缩进行悬浮，例如约18-20％重量/体积。通过在水中加入低级烷醇进行再沉淀可以用于移除额外的不溶于水的物料。上层清液可以更高浓度的低级烷醇进行沉淀。

在一些实施方式中，所述更高浓度的低级烷醇例如可以为乙醇。乙醇为优良的提取溶剂，至少对于将所述提取物从植物中分离出来来说，并相比于本领域现有的其他方法来说能够得到相当高的收率。此外，所述提取物并不粘稠使得更容易过滤。由于乙醇为适合的提取溶剂以及油类可以被掺入到制剂中，也可以将乙醇提取物反萃入适合的油类中，例如芝麻油。对于后者，可采用多个提取步骤。

在一些实施方式中，可以使用40-80％乙醇，60-70％乙醇，或者50-60％乙醇得到粗提物。在一些实施方式中，乙醇可以在大约室温下以约70％乙醇的浓度加入，并且所述提取可以以这样的步骤完成，即第一步先使用约35％乙醇的较低浓度，然后在第二步骤中使用约70％乙醇的较高浓度。

在一些实施方式中，所述提取物可以被干燥。然而采用加热应该小心的完成，因为在进行加热时所述提取物会降解，从而所述提取物的活性可能受到不利影响。总之，最好加热尽量短时间内以便可限制降解。在一些实施方式中，所述提取物被干燥的时间范围可以为约30秒-约1分钟、约1分钟-约5分钟、约5分钟-约10分钟、约10分钟-约20分钟、约20分钟-约30分钟、约30分钟-约40分钟。在一些实施方式中，所述提取物可被干燥约30分钟-1小时或者更多的时间，这取决于使用的条件。在一些实施方式中，所采用的加热温度为约90℃以下，约30℃-约80℃、约40℃-约70℃、约50℃-约60℃、约70℃-约80℃，或者其中的任意范围。在一些实施方式中，所述加热的温度为25℃-70℃间的以5℃为增量的温度。应当理解的是本领域技术人员所知道的任何可避免或至少是过度加热的方法都可使用，例如包括室温下在干燥器中干燥、喷雾干燥、真空干燥、冷冻干燥、临界点干燥、溶剂交换，以及本领域技术人员知道的它们的任意组合。

在一些实施方式中，所述提取物可以进行过滤。例如，将提取物再溶解，并且得到适合于过滤的浓度以进一步去除不想要的物料。在一些实施方式中，所述适于过滤的浓度可以为约1％、约2％、约3％、约4％、约5％、约6％、约7％、约8％、约9％、约10％、约12％、约14％或者它们的0.2％增量的任意浓度。

在一些实施方式中，所述萃取是使用油或者其他溶剂完成。在一些实施方式中，所述溶剂可以含有表面活性剂。表面活性剂的实例包括阴离子型、阳离子型、两性离子型以及非离子型表面活性剂。阳离子型表面活性剂的实例包括十二烷基硫酸钠(SDS)。阴离子表面活性剂的实施例包括溴化十六烷基吡啶(cetylpyridinium bromide)。两性离子型表面活性剂的实例包括二棕榈酰基磷脂酰胆碱(dipalmitoyl phosphatidylcholine，卵磷脂(lecithin))。非离子型表面活性剂的实例包括聚氧乙烯(4)十二烷基醚(BRIJ30)。在一些实施方式中，可采用SPAN-或者TWEEN-型表面活性剂，包括SPAN 60、SPAN80、TWEEN 60以及TWEEN 80。实际上，在某种程度上可以采用本领域技术人员可已知的任意一种表面活性剂或其任意组合，有理由相信这样的使用将与本文提供的教导一致。

在一些实施方式中，所述溶剂可以包括油。所述油和/或表面活性剂可以用于提取姜黄根，通过压碎根和将压碎的根浸在溶剂中以形成浸泡液。然后过滤所述浸泡液以获得提取物。所述浸渍物通常含有多量的提取物，这样，在一些实施方式中其残渣可以被多次提取，以及可以使用任意一种或者任意溶剂的组合以从根部获得提取物。在一些实施方式中，可以使用芝麻油，因为它被认为是至少基本上无毒和轻的，从而提取物可以容易的地过滤并且涂敷到皮肤上时不表现出过多油性。

本发明的制备药学上可接受的组合物的方法，该方法包括在至少基本上无毒的提取溶剂中将至少部分的姜黄根浸泡有效的时间。在这些实施方式中，所述提取溶剂为与包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的酚二酮类是可混溶的；并且，该提取溶剂为酚二酮类的药学上可接受的载体。该方法还包括分离所述提取溶剂和浸泡的根以得到姜黄的液体提取物。

本发明还涉及了制备药学上可接受的乳剂的方法，该乳剂含有本发明的提取物。在一些实施方式中，所述乳化包括将药学上可接受的油加入到所述液体提取物中以得到所述液体提取物的乳剂。而且，在一些实施方式中，所述乳化包括将乳化剂加入到所述液体提取物以得到液体提取物的乳剂。如此，该方法包括在至少基本上无毒的提取溶剂中将至少部分的姜黄根浸泡有效的时间，该提取溶剂与包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的酚二酮类是可混溶的；并且，该提取溶剂为酚二酮类的药学上可接受的载体。该方法还包括分离所述提取溶剂和浸泡的根以得到姜黄的液体提取物，以及，乳化该液体提取物。

使用的术语“至少基本上无毒的(at least substantially non-toxic)”可以表示所述提取溶剂基本上比乙醇毒性低，这样本领域技术人员可以在用于局部给药、口服给药或者直肠给药的制剂中使用至少比乙醇多50％、75％、100％、200％或者300％的溶剂。使用指导可以参照美国FDA的条例。在一些实施方式中，所述提取溶剂具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性。

在本发明中使用的提取溶剂可以为任意的这样的提取溶剂，或者这样的溶剂的任意组合，这是标准的技术人员所熟知的。在一些实施方式中，所述提取溶剂包括聚氧乙烯(20)山梨醇酐单油酸酯(TWEEN 80)、聚乙二醇、肉豆蔻酸异丙酯或者它们的组合。在一些实施方式中，所述提取溶剂包括TWEEN 80和肉豆蔻酸异丙酯的组合。在一些实施提取中，所述提取溶剂中包含的TWEEN 80：肉豆蔻酸异丙酯的比例范围为约20:80-约50:50。

在本发明中使用的所述药物学上可接受的油可以为任意的这样油，或者油的任意组合，这是标准的技术人员所熟知的。在一些实施方式中，所述药物学上可接受的油包括选自由动物油、鱼油、植物油或者矿物油组成的组中的油。在一些实施方式中，所述药物学上可接受的油包括选自由橄榄油、向日葵油、芝麻油、杏仁油、玉米油、橙油、梨莓油、黑胡椒油、肉豆蔻油、罗勒油、迷迭香油、丁香油、葡萄柚油、茴香油、芫荽油、佛手柑油、肉桂油、柠檬油、薄荷油、大蒜油、百里香油、马郁兰油、柠檬草油、姜油、小豆蔻油、液体石蜡、棉花籽油、花生油、坚果油、豆油、菜籽油、维生素E油及其衍生物(包括维生素E TPGS(d-α生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯)油)、鱼油、动物脂衍生的油、硅油、蓖麻油、角鲨烯油或者它们任意的混合物组成的组中的食用油。

制剂

姜黄可以应用于非肠胃的靶组织。在一些实施方式中，所述组合物或者制剂例如可以至少局部地、口服地、直肠地或者阴道地使用。并且，本领域技术人员已知的任何剂型都可以用于局部给药、口服给药、直肠给药或者阴道给药。

所述制剂的设计例如可以包括(i)确认病况或应用；(ii)确认靶点；以及(ii)匹配用于给药的剂型和靶位。确认靶位例如包括选择治疗的目标组织，如所述制剂可以应用于健康的或受伤的组织以预防、抑制、治疗或者改善病情的症状。一旦选择了应用、靶点以及给药方法，本领域技术人员可以根据本领域技术人员已知的任何多种因素来容易的选择剂量，包括但不限制于应用的位点的环境条件，例如，阳光、热量、水、pH、胃酸等。在一些实施方式中，这种制剂可以给药到非人类的动物中的应用。

在一些实施方式中，所述组合物为局部给药的剂型以用于本文阐述的任何应用中。局部给药可以使用于任何受益于局部应用的组织，包括皮肤、粘膜以及胃肠道。对于局部给药，适当的制剂可以包括生物相容性的油、蜡、凝胶、粉末、乳剂、聚合物或者其他的液体或固体载体。这样的制剂可以通过直接施用到受影响的组织进行给药。例如，霜制剂(cream formulation)可以给药到皮肤上的靶区域。还可以采用经皮给药，包括通过皮肤的经皮吸收姜黄化合物。经皮制剂(Transdermal formulations)可以包括贴剂、油膏(ointments)、霜、凝胶剂、药膏(salves)等。在一些实施方式中，所述组合物作为防晒剂进行局部施用。

在一些实施方式中，所述组合物为用于口服给药的剂型。在一些实施方式中，该剂型可以为胶囊或者片剂。粉末形式也可以从本发明的方法制得的液体提取物得到，以及本领域技术人员所知的所述粉末可以制成到更便于的使用的剂型中，例如装入胶囊或者压入片剂中。在一些实施方式中粉末还可以提供液体更高的稳定性。

在一些实施方式中，所述提取物可以为油提取物或者表面活性剂提取物，其可以装入胶囊里，或者它可以为酒精提取物，其可以被干燥为粉末，并且该粉末可装入胶囊里或者配置到片剂中。在一些实施方式中，所述提取物可以用食用油作为提取溶剂进行提取，从而这样的油提取物可以被乳化并且至少基本上无毒的。由于根的可提成分为高油溶性的，因此它们主要保持在乳剂的油相中这有助于产物的稳定性。所述液体提取物在装入胶囊里后将用明胶(gelatin)或者羟丙基甲基纤维素(HPMC)溶液进行密封，其取决于所述胶囊壳是否由明胶或者羟丙基甲基纤维素组成。所述密封基本阻止了所述液体从壳中泄漏。

在一些实施方式中，所述组合物或者制剂可以以持续释放的制剂进行给药，并且所述制剂可以包括除了本发明的组合物以外的一种或多种药剂。在一些实施方式中，所述持续释放的制剂可以减少剂量和/或对受试者给药这种药的频次。

在一些实施方式中，所述组合物或者制剂可以与至少一种其他的用于治疗该病况的治疗药剂联合给药。所述药剂的用量可以减少，甚至大幅地减少，这样该药剂或者期望的药剂的用量将降低到受试者检测到有明显响应的程度。一种“明显响应(significant response)”可以包括，但并不限制于，症状的减少或者消除，期望的治疗效果明显增加，对治疗较快的响应，对治疗更有选择性的响应，或者它们的组合。在一些实施方式中，所述其他的治疗药剂例如可以被给药约0.1μg/kg-约1mg/kg、约0.5μg/kg-约500μg/kg、约1μg/kg-约250μg/kg、约1μg/kg-约100μg/kg、约1μg/kg-约50μg/kg的范围内的量，或者其中的任意范围。联合治疗可以给药30分钟、1小时、2小时、4小时、8小时、12小时、18小时、1天、2天、3天、4天、5天、6天、7天、8天、9天、10天、2周、3周、4周、6周、3个月、6个月、1年，它们的组合，或者本领域技术人员认为的任何可行的时间量。所述药剂可以附随地(concomitantly)、连续地、周期地给药到受试者。循环治疗包括在预定的时间段给药第一药剂，在第二预定的时间段给药第二药剂或者治疗，并且可为任何所需目的重复这个循环，例如，为了提高治疗的效力。所述药剂也可以同时被给药。术语“同时地(concurrently)”并不限于恰好相同的时间给药药剂，而是指所述药剂可以按次序以及在时间间隔内被给药，这样所述药剂可以一起作用以提供附加的益处。每种药剂都可以分别地或者一起地以任何恰当的形式使用任何恰当的给药手段进行给药。本领域技术人员容易选择频次、持续时间以及可能的每个并发给药(concurrent administration)的循环。

以提取物形式存在的姜黄素化合物，干的或者液体的，可以方便地选择剂量和所在剂型里的浓度。多种其他药剂或者添加剂可以被包括进来以提供对期望的治疗效果的附加控制、提供化妆品的吸引力或者或许有助于对推荐应用的依从性。稳定的、浓缩的制剂，例如溶液、乳剂、微乳液以及纳米乳液，例如可以提高给药的依从性和在给药之后所述提取物的成分的生物利用度。期望的治疗效果例如可以包括增加局部应用或者使用的所述提取物的生物利用度，通过添加第二药剂提供额外的治疗效果，调节防晒剂的防晒系数(spf)等。在防晒剂中，例如，所述乳剂可以配制成小球以提供更完全的皮肤覆盖。在一些实施方式中，该小球的大小可以用于调整UV防护和提高乳剂的稳定性。化妆品的吸引力可以包括，例如，使得所述提取物成为霜或者露，调节组合物的油性，增加令人愉快的气味或者润肤膏(moisturizer)等。助于依从性例如可以包括调整所述剂量以形成促进病人依从性的剂型，并通过浓缩所述提取物以提供供消耗的小剂型，或者可以，提供一种延时剂型来减少病人为了获得具体治疗效果而给药的频次。

在一些实施方式中，药学上可接受的组合物将含有纯化的和/或分离的姜黄植物的根的液体提取物。所述液体提取物可以含有姜黄素；去甲氧基姜黄素；双去甲氧基姜黄素；或者它们的组合。所述液体提取物还含有至少基本上无毒的提取溶剂，该提取溶剂在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除；并且作为药学上可接受的载体；其中，所述提取溶剂用于在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除以及选作保留为所述药学上可接受的组合物的成分。

在一些实施方式中，油提取物例如可以采用表面活性剂作为乳化剂来进行乳化。因此，可以制备得到一种药学上可接受的乳剂其含有纯化的姜黄植物的根的液体提取物。所述乳剂可以含有姜黄素；去甲氧基姜黄素；双去甲氧基姜黄素；或者它们的组合。所述乳剂含有至少基本上无毒的提取溶剂，该提取溶剂在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除；并且，该提取溶剂作为药学上可接受的载体具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性；其中，所述提取溶剂(i)用于在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除以及(ii)选作保留为所述药学上可接受的组合物的成分。所述乳剂含有药学上可接受的油；以及乳化剂。

表面活性剂的实例包括阴离子型、阳离子型、两性离子型以及非离子型表面活性剂。阳离子型表面活性剂的实例包括十二烷基硫酸钠(SDS)。阴离子表面活性剂的实例包括溴化十六烷基吡啶。两性离子型表面活性剂的实例包括二棕榈酰基磷脂酰胆碱(卵磷脂)。非离子型表面活性剂的实例包括聚氧乙烯(4)十二烷基醚(BRIJ30)。在一些实施方式中，可采用SPAN-或者TWEEN-型表面活性剂，包括SPAN 60、SPAN 80、TWEEN 60以及TWEEN80。实际上，在某种程度上可以采用本领域技术人员可已知的任意一种表面活性剂或其任意组合，有理由相信这样的使用将与本文提供的教导一致。

在一些实施方式中，所述制剂的pH值可调节。所述制剂的pH值为对现有技术的一种改进，因为其pH值可以调节。在一些实施方式中，例如，所述pH值被调节为皮肤的pH。由于皮肤的pH值约为4.2-5.5，在一些实施方式中，根据个体和身体区域的不同，局部制剂的pH值范围可以为约4-约6.5，在一些实施方式中为约4.3-约5.8，在一些实施方式中为约4.5-约5.5，或者其中的任何范围。在一些实施方式中，所述pH值可以为3.8、4.0、4.2、4.4、4.6、4.8、5.0、5.2、5.4、5.6、5.8、6.0、6.2、6.4、6.6，或者它们的任何约0.1的增量。

在一些实施方式中，所述制剂的粘性可以调节。所述制剂的粘性为对现有技术的一种改进，因为所述粘性可以调节。例如，所述粘性可以通过溶剂或者例如油的选择进行调节，或者通过操作的温度调节，一般地，温度影响粘性是暂时的。在一些实施方式中，所述粘性可以加热所用的油来进行调节，只要该加热不会太高而导致所述姜黄提取物降解。在一些实施方式中，油可以被加热直到约65℃、约55℃、约45℃、约35℃，或者它们的以约1℃为增量的任意温度。

所述提取物可以以干型或者液型进行储存。以液型时，所述提取物可以通过调整浓度以改变效力。以及，无论干型或者液型，为了稳定所述提取物可以被存储在琥珀色的瓶子内。

给药

任何本领域技术人员已知的给药媒介物都适合于本发明的化合物、组合物和制剂的给药。“媒介物(vehicle)”例如可以指稀释剂、赋形剂或者载体来与化合物一起对受试者给药。

术语“给药(administration)”或者“给药(administering)”可以用来指将组合物施用到受试者组织或细胞上面或里面，或者体内或体外来测试体系的活性，以及诊断、预防、治疗或者改善疾病或者病情的症状。在一种实施方式中，化合物可以使用本发明给出的任何方法给药到受试者的体内。在另一种实施方式中，化合物可以进行体外给药以使所述化合物与受试者的细胞组织结合，其目的包括但并不限制于，分析检验组合物的实用性和功效。并且，当然，所述组合物可以在体内使用以测试它们的稳定性、活性、毒性、功效等。当所述化合物与一种或多种活性剂联合用于受试者中时，术语“给药(administration)”或者“给药(administering)”可以包括相继地或者同时地将所述化合物与其它试剂一起施用，例如上述描述的任意试剂。在一些实施方式中，组合物可以配制得与指定的给药途径相容。

所述化合物可以以单位剂量给药。术语“单位剂量”可以指的是离散的、预先确定的化合物的量其可以以单位的剂量给药到受试者。所选的预先确定的活性化合物的量可以得到期望的治疗效果并且可以与药学上可接受的载体一起给药。在每个单位剂量中的预先确定的量可以取决于这些因子，包括但并不限制于(a)活性化合物独特的特征和能够获得的具体的治疗效果，以及(b)本领域固有的制备和给药这样的单位剂量的限制。

“药学上可接受的载体”为与所述组合物一起给药的稀释剂、佐剂、赋形剂或者媒介物。载体为药学上可接受的且通过国家的或者联邦的管理结构许可的或者美国药典委员会(U.S.Pharmacopeial Convention)中的列出的或者其他被公认为的可对受试者施用的来源。所述药物载体包括任意和所有生理学相容的溶剂、分散介质、涂料、抗菌剂和抗真菌剂、等渗剂和吸收延迟剂(absorption delaying agent)等。药物载体的实例包括但并不限制于无菌液体如水、油类和脂质类(例如磷脂和糖脂)。这些无菌液体包括但并不限制于这些从石油、动物、蔬菜或者合成物源衍生而得的油，例如花生油、大豆油、矿物油、芝麻油等。

适合的药物赋形剂包括但不限制于，淀粉、糖类、惰性聚合物(inertpolymers)、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、大米、面粉、粉笔(chalk)、硅胶、硬脂酸钠、单硬脂酸甘油酯、滑石(talc)、氯化钠、脱脂牛奶(driedskim milk)、甘油、丙二醇、水、乙醇等。在一些实施方式中，所述组合物也可以含有少量的润湿剂、乳化剂、pH值缓冲剂或者它们的组合。口服制剂例如可以包括标准载体，例如，药用级的甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁等。见Martin,E.W.Remington’s的药物科学。

如本文所描述的，所述组合物可以为露、霜、悬浮液、乳剂、片剂、丸剂、胶囊、粉剂、缓释制剂(sustained-release formulations)等形式。在一些实施方式中，所述组合物或者制剂可以用本领域技术人员已知的任意非肠胃方式给药到受试者，不然的话，肠胃给药将包括刺穿皮肤或者粘膜。根据靶组织，所述给药可以为局部的、口腔的、眼部的、耳部的、鼻部的、泌尿生殖器的、直肠的、真皮的、阴道的或者其它到粘膜的方式。口服给药例如可以包括消化道给药、口腔给药以及舌下给药，并且可以使用固体或者液体载体。本领域技术人员将理解选择的治疗方案、给药药剂、受试者的病情以及期望的效果，都将对给药计划和方案造成影响。

所述组合物或者制剂可以被包于以下形式包括片剂、锭剂(troches)、胶囊、酏剂(elixirs)、饮料、悬浮液、糖浆剂、干胶片(wafers)、口香糖、凝胶、水凝胶等。片剂、丸剂、胶囊、锭剂液等也可以含有粘结剂(binders)、赋形剂、崩解剂、润滑剂、助流剂(glidants)、螯合剂、缓冲剂、张力调节剂(tonicity modifiers)、表面活性剂、甜味剂(sweetening agents)以及芳香剂(flavoring agents)。粘结剂的一些实例包括微晶纤维素、黄蓍树胶(gumtragacanth)或明胶。赋形剂的一些实例包括淀粉或麦芽糖糊精。崩解剂的一些实例包括海藻酸、玉米淀粉等。润滑剂的一些实例包括硬脂酸镁或硬脂酸钾。螯合剂的实例为EDTA。缓冲剂的一些实例为乙酸盐、柠檬酸盐或磷酸盐。张力调节剂的一些实例包括氯化钠和右旋糖。用于形成胶束或增加细胞透过的表面活性剂的一些实例透包括椰子皂、阴离子型、阳离子型或者乙氧基洗涤剂(ethoxylate detergents)。助流剂的实例为胶体的二氧化硅。甜味剂的一些实例包括蔗糖、糖精等。芳香剂的一些实例包括薄荷、甘菊(chamomile)、橙香精(orange flavoring)等。

在消化道中，例如，在一些实施方式中固体可以包括丸剂、胶囊、片剂，或者定时释放技术(time-release technology)；以及，液体可以包括溶液、软凝胶(soft gel)、悬浮液、乳剂、糖浆、酏剂、酊剂(tincture)或水凝胶。消化道给药可以包括使用本领域技术人员已知的任意方法的口服给药或者直肠给药。对于口腔给药、舌下(sublinqual)给药、以及唇下(sublabial)给药来说，固体可以包括口腔崩解片、膜、棒棒糖(lollipop)、锭剂或者口香糖；以及，液体包括漱口水、牙膏、油膏或口腔喷雾。

本领域技术人员理解的是给药量可以根据这样的因素变化，例如，受试者的疾病类型、年龄、性别以及体重，以及给药方法。也可以调节剂量方案以优化治疗响应。在一些实施方式中，可以给药单次大剂量(single bolus)；多个分开的剂量可以在一段时间内给药；所述剂量可以成比例的减少或增加；或者它们的任意组合，并可通过本领域技术人员已知的紧急治疗情况和因素进行指示。应注意的是剂量值可以随所要减轻的病况的严重程度而改变，以及根据所述给药是否为预防性的而改变，这样病况并没有发作或者产生症状。剂量方案可以根据个体需要和对个人的给药所述组合物的管理或监控的专业判断来随时调节，以及本文阐述的任意剂量范围仅是示例性的，不会限制可选的剂量范围。

加工用品

提供了包有已完成的、包装了的以及贴了标签的产品的试剂盒。加工用品将适当的单位剂型(unit dosage form)包括在适当的管(vessel)或者容器中，例如，小玻璃瓶(glass vial)或者其它可封闭的容器。在剂型适合口服给药的情况下，其活性成分，例如本文教导的剂型包括的药剂的一种或者多种，也可以适合局部给药、口服给药、直肠给药、阴道给药等。另外，单位剂型可以为适合口服、经皮、局部或者粘膜递送的固体。

对于任何此类产品，所述包装材料和容器都是设计来保护在存储和装运期间产品的稳定性。另外，加工用品可以包括为使用者提供建议的使用说明或者其他信息采用的说明，例如，医师、技术员或者病人涉及的关于怎样适合地给药该组合物以预防、治疗或改善所关注的疾病。在一些实施方式中，说明可以进行指导或者建议配量方案，包括但不限制于实际剂量和监控程序。

在一些实施方式中，所述说明可以包括指导怎样去针对具体应用或者一系列应用进行给药组合物，比如本文给出的具体指导(particular indication)，例如，还包括怎样去监控受试者对于给药的阳性的和/或阴性的响应。

在一些实施方式中，还提供了含有局部剂型、口服剂型、直肠剂型或者阴道剂型组合以对受试者给药的试剂盒，以及在一些实施方式中还包括使用说明，从而该试剂盒可设计为医师、病人或者任何非处方(over the counter)使用的受试者。在一些实施方式中，所述试剂盒可用于保护真皮组织免于UVA和UVB照射，该试剂盒包括作为口服剂型的姜黄根提取物；作为局部剂型的姜黄根的提取物；以及，局部剂型的、口服剂型的或者局部剂型和口服剂型的组合给药说明。在一些实施方式中，所述试剂盒可为用于治疗任何本文教导的其他适应症，这样所述试剂盒可以具有局部剂型、口服剂型以及直肠剂型的任意组合，并且选择性地使用说明。说明可为医师、病人或者任意的受试者进行设计，例如包括混合给药用的成分的说明，对各种靶点的建议稀释因子(dilution factors)，以及组合给药的潜在组合治疗法，例如局部给药与口服给药联合。建议的稀释因子可以选择本文给出的给药范围，例如，根据一些实施方式中可以修饰至期望的范围并掺入到组合物中。

在不局限于任何理论或者作用机理下，以下提供的实施例将进一步阐明本发明。应当理解多种改变都是本领域技术人员可预期的，并且实施例并不旨在限制权利要求。

实施例1用乙醇提取姜黄根

各种溶剂都可以用于提取姜黄根，该实施例将给出怎样使用乙醇完成提取。

准备新鲜的姜黄根以用于提取

所述提取可以用新鲜的姜黄根，该根可按如下制备：

原料

新鲜的姜黄根 50g

方法

1、在水中清洗新鲜的根去除少量的泥土或者其它污物；

2、排水以去除过量的水；

3、用干纸巾拍干；

4、使用锋利的刀或者手术刀，将根切至约1/2”x1/2”的块，以及，

5、将湿润的、新切下的根块用于提取。

准备干燥的姜黄根以用于提取

姜黄根可以进行干燥例如以用于存储。如下制备干燥的根以用于提取：

原料

干燥的姜黄根 30g

方法

1、在盛有水的盘子中清洗该干燥的根以去除少量的泥土或者其它污物，必要时可换洗涤水；

2、排掉洗涤水；

3、添加新的水以覆盖根；

4、浸泡过夜；

5、排掉水并且用干纸巾拍干；

6、使用锋利的刀或者手术刀，将根切至约1/2”x1/2”的块；

7、将湿润的、新切下的根块用于提取；

用乙醇提取

乙醇是一种高效的提取溶剂，如下方法可用于提取：

原料

制备好的姜黄根 50g

方法

1、将该制备好的姜黄根转移到250mL的烧杯中；

2、往烧杯中倒入90％乙醇直到覆盖该制备好的原料并且在该制备好的根的水平面上有约20mL的乙醇；

3、盖住烧杯以防止乙醇损失；

4、浸泡24小时；

5、倾出清澈的溶剂；

6、在真空下过滤剩余的溶剂

从乙醇提取物中制备干燥的提取物

将提取物与乙醇分离并将储存以作为干燥组合物使用。而且，由于乙醇的毒性级别，乙醇只能在局部和口服中使用有限的量。

原料

姜黄乙醇提取液

方法

1、制备好的乙醇提取液转移到旋转蒸发仪的圆底烧瓶中；

2、溶液最高被加热至40℃的温度，冷凝的乙醇通过冷凝管收集以在随后的提取中重新使用；

3、将得到的粉末储存在琥珀色瓶子中备用；以及

4、另一种方法为将水加入到乙醇提取物中(例如，直到乙醇的浓度大约为25％时)然后冻干混合物。

在油里反萃乙醇提取物

提取物可以通过反萃乙醇提取物并进入到基本上无毒的油中，如食用油，从而与乙醇分离(乙醇为有毒的且高于一定水平便不可取)。

原料

50mL姜黄的乙醇提取物

方法

1、将50mL的乙醇提取物转移到200mL的分液漏斗中；

2、加入50mL的芝麻油；

3、在机械摇动器上摇动30分钟；

4、将分液漏斗竖直放置并且使得液体层分离约6小时；

5、小心的移除芝麻油层，芝麻油可以用于防晒制剂中；以及，

6、一体积的乙醇可以多次萃取使得乙醇被高效萃取。

然而，理论上该反萃的方法可以对乙醇萃取溶液采用任何不溶性的油，但是该萃取似乎在使用芝麻油或者棉花籽油时相比于使用液体石蜡或甘油时更为有效。对于使用特定的油时反萃的相对效率例如可以使用分光光度分析法进行测量和比较。

制备粉末状的姜黄根以用于提取

姜黄根可以转变为粉末。提取效率例如可以在提取前通过样品粉末化而得到改善。

原料

干燥的姜黄根

方法

1、将约50gm干燥的根块加到韦奇伍德研钵(Wedgewood mortar)里或者其他表面粗糙的研钵里(玻璃研钵是不适合的)；

2、用研杵控制捶捣，将根块碎至小块状；

3、用研杵紧压，将原料研磨为粗粉末；以及，

4、使用咖啡机或者类似的实验室研磨机(例如锤式粉碎机)研磨原料为细粉末；

姜黄细粉可以用于乙醇提取或者用油提取如本文所描述的，粉末的优点是防晒成分的收率更好，这是对通过紫外分光光度分析法对提取物进行测评的。另一方面，用粘性油提取粉末将得到难于过滤的粘浆液。

实施例2用芝麻油提取姜黄根

用至少基本上无毒的油脱除的提取物，如本文所讨论的，被认为是本领域技术人员可最为认可的，因为该提取物可以直接包括到局部制剂或者口服制剂中而不用额外的分离步骤，例如包括在制得可使用的至少基本上无毒的制剂前将所述提取物与提取溶剂分离的步骤。

原料

制备好的姜黄根 50g

方法

1、将该制备好的姜黄根转移到250mL的烧杯中；

2、往烧杯中倒入芝麻油直到覆盖该制备好的原料；

3、浸泡48小时，并在24小时后混合；

4、倾出清澈的溶剂；

5、在烧杯中加入第二次量的芝麻油以覆盖该制备好的姜黄根；

6、进一步的浸泡48小时；

7、倾出清澈的溶剂；

8、在真空下过滤剩余的溶剂；

尽管这类的提取物似乎比乙醇提取物稀，但是可以被直接掺入露和霜里。而且，所述油提取物的浓度可以在分光光度测定油的浓度后通过加热计算好的姜黄的干燥提取物来调节到预定的水平。

其他油性溶剂如液体石蜡、甘油、角鲨烯和棉花籽油都可使用，尽管使用更粘的溶剂，如液体石蜡和甘油，就更难分离残留物。

实施例3评价不同溶剂体系的提取效率

不同溶剂体系的提取效率可通过从姜科植物中(特别是姜黄)对姜黄素、去氧姜黄素、双去氧姜黄素和可能的其它姜黄素的衍生物以及有关的物质(以下统称为“姜黄素类化合物”)的提取来进行测定。然而在不受任何理论或者作用原理的限制下，理想的是利用全部的提取物，因为植物成分被认为是共同作用于成分活性的调节的。生物相容性溶剂是重点，其原理如前文所述的，包括将液体形式的提取物(包括提取溶剂)直接地用于药物制剂中的能力，该制剂为至少基本上无毒的并且是人类应用可接受的，局部地或者口服地。

原料

液体石蜡(轻的和重的)、甘油、芝麻油、乙醇、棉花籽油、聚乙二醇(液体级包括PEG 400)、肉豆蔻酸异丙酯(IPM)、聚山梨醇酯80(TWEEN80)以及这些成分的2个和3个的组合与芝麻油、液体石蜡以及棉花籽油的混合物将被测试。

方法

该方法测定了多种溶剂的萃取效率，如下：

1、获得的结果一式三份(triplicate)，并且使用该结果与各种萃取的功效相关联；

2、采用本文中的乙醇提取物作为对照，并将提取物蒸发至干；

3、所述乙醇提取物以干燥的提取物计量，并且溶解在特定体积的乙醇中；并且，从该第一溶液，制备了一系列已知浓度的稀释液以作为标准溶液去构造标准浓度曲线用于比较结果；

4、测定每个标准溶液在最大吸收波长(420nm)的吸收，该结果用于构造吸收对浓度的标准曲线；

5、将在多种溶剂中的实验提取液的等分试样溶解在乙醇中，并且测定该溶液的吸收。

该提取结果(至少同乙醇提取一样有效)可以在表中比较：

所有提取都以乙醇提取作为控制组，值得一提的是乙醇实用价值有限在于其内部消耗是有限的，并且它不能在未稀释下重复应用于大面积的皮肤还不产生副作用。

另外乙醇、芝麻油以及棉花籽油被发现是较为理想的。例如，发现了芝麻油和棉花籽油可提取合理量的姜黄素类化合物，并且可能直接掺入到制剂中如内部或外部使用的乳剂。IPM和TWEEN 80(以及它们的组合)是更可取的，特别是使用TWEEN 80，具有的提取效率比乙醇提取的高至38％。对于TWEEN80与IPM的不同的组合，即10％、20％、30％，等等...直到90％的TWEEN 80(按体积计)，惊奇的发现20％或者50％的TWEEN 80组合似乎比其他组合的提取效率高，如30％和40％的TWEEN 80。我们发现，出人意料地，TWEEN 80(购自Croda Inc.,Edison,NJ 08837聚山梨醇酯80)是比一般的聚山梨醇酯80更好的溶剂。TWEEN 80HP甚至表现得比TWEEN80(非HP级)的更好。这是令人惊讶的，因为制备者只是声明TWEEN 80HP含有较少的杂质，如过氧化物，这可以在应用位点产生刺激。理论上，较高纯度级别并不能预期可以改善提取能力。

实施例4将乙醇提取物的组合物与使用IPM和TWEEN 80得到的提取物的组合物进行比较

本实施例将如本文给出的姜黄根的乙醇提取物的组合物与TWEEN 80提取物和IPM提取物进行比较。比较数据为(i)姜黄素类化合物的总收率和(ii)各个姜黄素类化合物的相对比例。

原料

制备好的姜黄根

方法

1、如本文教导的制备乙醇提取物；

2、分离粗提物；

3、分离混合物的各个组分；

4、使用NMR和LCMS确定各个姜黄类化合物并且与文献值进行比对；以及，

5、使用TLC和HPLC将乙醇提取物与用TWEEN 80和IPM提取溶剂得到的提取物进行比较。

提取过程

如本文教导的将姜黄根(3g)研磨成粉末和用40ml乙醇提取过夜。采用Whatman 1号滤纸过滤该提取物，并且使用旋转蒸发仪去除乙醇得到～180mg姜黄素类化合物粗品。将该粗提物在室温下保存在琥珀色的玻璃瓶中。

分离粗品提取物

将所述姜黄素类化合物采用硅胶60柱色谱进一步分离纯化，并用CH₂Cl₂/甲醇梯度洗脱液。流动相的组成从100％：0到90：10％变化以得到纯片段的姜黄素(1)，去甲氧基姜黄素(2)，以及双去甲氧基姜黄素(3)，如下：

所有的片段和洗脱液可通过薄层色谱(TLC)(使用预涂硅胶60F254，0.25mm的玻璃背板(Merck))检测。通过喷涂香草醛-H₂SO₄试剂并加热来监测斑点。所有用于TLC的化学药品和试剂都是分析纯的。所测试的LC片段表现出了与TLC板收集的相同图案，以及移除有机溶剂以获得粉末形式的各个化合物以用于鉴定和纯度测试(通过额外的标准化学测试)。

鉴定和纯度检测

采用TLC检测、高效液相色谱法(HPLC)/质谱法和核磁共振(NMR)分析鉴定每个姜黄类化合物及其纯度并通过文献数据比较。例如参见，Masuda,T等Phytochemistry 31：3645-3647(1992)；Syu,W.-J.等J.Nat.Prod.61:1531-1534(1998)；Huang,M.-T.等Carcinogenesis 16:2493-2497(1995)和Byeoung-Soo Park等J.Agric.Food Chem.53:9005-9009(2005)。

NMR

¹H-和¹³C-NMR谱是在BRUKER 600AV III光谱仪上用5mm TCI探针得到并以四甲基硅烷作为内标物。化学位移以δ(ppm)表示。

质谱

质谱是在AGILENT 1200系列LC/MSD VL系统上测定。MS数据是在带有5973网络质量选择检测器(Network Mass Selective Detector，MS模型)的安捷伦科技(HP)仪器上测得。

HPLC

反相HPLC方法为用水：乙腈梯度100：0到0:100％至15分钟。姜黄素类化合物的纯度和鉴定是通过配备有光电二极管阵列检测器(L-2455)的反相HPLC(HITACHI，Elite La Chrome)测得并用分离的纯化合物作为基准。以下为这些化合物的物理化学性质结果。

结构1-3是通过将光谱数据与文献上记载的这些数据比较进行鉴定的。见Id。下面的数据用于该对照：

姜黄素[1]

视觉：橙色晶体；

LC-APCIMS(负)：MS，m/z 367；C₂₁H₂₀O₆；

HPLC：保留时间12.41min

1H NMR(CDCl3)数据：δ7.53(2H,d,J＝16Hz,HC＝C,1,7-H,alkene,trans),7.15(2H,m,6-ArH),6.82(4H,m,2.5-ArH),6.61(2H,d,J＝16,＝CH-CO-,2,6-H,alkene,trans),5.91(1H,s,CH＝C(OH)-,4-H),3.89(6H,s,3-ArOCH₃),ppm；

13C NMR(CDCl₃)数据:δ185.0,184.9,150.6,149.6,142.3,128.7,124.3,122.44,122.41,116.7,111.9,102.2,56.6ppm.

去甲氧基姜黄素[2]

视觉：橙色晶体；

LC-APCIMS(负)：MS，m/z 337；C₂₀H₁₈O₅；HPLC：Rt 12.20min

1H NMR(CDCl3)数据:δ7.58(d,1H),7.49(d,1H),7.21(s,1H),7.12(dd,1H),6.84(d,2H),6.61(t,1H),5.95(br s,-OH),3.89(s,3H,-OCH3)

13C NMR(CDCl₃)数据:δ185.1,184.8,161.3,142.3,142.0,131.3,128.7,124.3,122.1,117.0,116.7,111.9,56.6ppm。

双去甲氧基姜黄素[3]

视觉：橙色晶体；

LC-APCIMS(负)：MS，m/z 307；C₁₉H₁₆O₄；Rt 11.99min

1H NMR(500MHz,(CDCl₃)数据:δ7.57(d,2H),7.49(d,4H),6.82(d,4H),6.59(d,2H),5.92(s,1H).

13C NMR(CDCl₃)数据:δ84.5,161.3,141.5,131.3,128.2,122.1,117.0,102.2。

TWEEN 80和IPM提取物与乙醇提取物一样的成分且比例大致相同。TWEEN 80和IPM提取物中的姜黄素类化合物的鉴定和相对比例是通过HPLC测定。

实施例5姜黄根提取物的收率和稳定性

收率：本文教导的所有实施例都从姜黄根中获得了显著收率的提取物。当将姜黄制备为粉末状的根时，将从单次提取中获得更高收率的提取物。用乙醇从50g粉末状的根得到的提取物，例如用50mL乙醇单次提取约1.5gm干燥的提取物。用芝麻油以及或角鲨烯从粉末状的根得到的提取物也将有合理的收率。

稳定性：通过分光光度法检测所有提取物，存储在琥珀色玻璃瓶中一年多都是稳定的。

实施例6使用IPM提取物以及用TWEEN80：IPM提取物生产的制剂

使用TWEEN 80和IPM的组合获得的提取物可以直接从液体提取物配制为乳剂(霜或者露)以外部使用；并且，限定量的该混合物，或者从它生产的乳剂，可被人类受试者所使用。使用IPM获得的提取物也能直接进入用于局部给药或者口服给药的制剂，值得一提的是，当应用于局部给药时IPM可以使用较高的量，例如，作为皮肤防晒剂。该实施例提供一些在局部应用和口服应用的制剂。

一种直接使用仅用IPM获得的提取物制得的简单油性制剂

1、在搅拌下降丁基羟基甲苯溶解于IPM提取物中。稍加热以促进溶解；

2、加入芝麻油并搅拌且不再加热；以及，

3、加入柑橘提取物并搅拌。

另一种制剂

一种直接从用20％TWEEN 80和80％IPM的组合获得的提取物制得的露制剂(lotion formulation)

在80％IPM中有20％的Tween 80的提取物50g

Span 80 4.86g

水 45.14g

玫瑰香精(Rose perfume) 0.1g

1、温热提取物到50℃；

2、加入SPAN 80继续加热并搅拌直到均匀(SPAN 80的量如本文所述的计算；IPM具有11.5的HLB)；

3、单独加热水到52℃-54℃；

4、在快速搅拌下一次加入所有水并继续快速搅拌直到制成乳剂；

5、间歇缓慢搅拌冷却；以及，

6、当差不多冷却到室温时，加入香精并且搅拌。

另一种制剂

一种直接从用20％TWEEN 80和80％IPM的组合获得的提取物制得的霜制剂(cream formulation)

1、温热提取物到50℃；

2、加入Polawax继续加热并搅拌直到蜡均匀分散；

3、单独加热水到52℃-54℃；

5、间歇缓慢搅拌冷却；以及，

6、当差不多冷却到室温时，加入香精并且搅拌。

所述提取物可以配制为乳剂(例如，霜和露)，其含有一种以上的油相成分如以下实施例阐述的。掺入的不同油的HLB值比例将用来计算油相全部所需的HLB。然后加入到TWEEN 80的第二乳化剂的量可以很容易的被测定。在以下实施例中，当液体石蜡、芝麻油以及IPM(分别具有12.7和11.5的所需的HLBs)以这里的制剂中给出的比例进行组合，发现全部所需的HLB为10.5。增加乳化剂混合，计算占乳化剂总重量的重量百分比，为42％SPAN 80(HLB＝4.3)对58％TWEEN 80(HLB＝15)并得到理想的HLB为10.5的混合物。

另一种制剂

一种直接使用仅用IPM获得的组合物制得的乳剂，该乳剂按配制为含有多种油相成分

1、温热轻质液体石蜡和芝麻油到50℃；

2、加入SPAN 80并且继续加热、搅拌直到所有成分均匀分散；

3、加入TWEEN 80提取物并且短暂加热；

4、单独加热水到52℃-54℃；

5、在快速搅拌下一次加入所有水并继续快速搅拌直到制成乳剂；

6、间歇缓慢搅拌冷却；以及，

7、当差不多冷却到室温时，加入香精并且搅拌。

另一种制剂

一种直接从用20％TWEEN 80和80％IPM的组合获得的提取物制得的微乳液

用20％：80％的Tween 80：IPM得到的提取物50g

异丙醇 20g

水 4g

1、在搅拌下将提取物和异丙醇混合(不加热)；以及，

2、在搅拌下加入水(不加热)。

另一种制剂

一种直接从用TWEEN 80获得的提取物制得的微乳液

1、在低强度搅拌下降所有成分混合并不加热；以及，

2、所述微乳液被观察为透明的，并且小球的大小使用MalvernNanosizer S的动态光散射测量并且显示单峰最大值262.4nm。所述制剂的大小、单分散性、没采用加热的温和(ease)，以及溶液的透明都证实它是微乳液。

另一种制剂

一种直接从用TWEEN 80获得的提取物制得的可食用乳剂

1、加热矿物油和SPAN到50℃-52℃并且缓慢搅拌；

2、加入TWEEN提取物并且小心加热到50℃-52℃，注意不要过热；

3、搅拌混合物直到均匀；

4、加热水到50℃-52℃，并且慢慢并一次性加入到混合物；以及，

5、剧烈搅拌直到乳剂制成，然后间歇搅拌直到乳剂达到室温。

另一种制剂

一种可食用纳米乳剂旨在消耗时增加生物利用度，所述纳米乳剂是直接从用TWEEN 80获得的提取物制得

1、加热矿物油和SPAN到50℃-52℃并且缓慢搅拌；

3、搅拌混合物直到均匀；

5、剧烈搅拌直到乳剂制成，然后间歇搅拌直到乳剂达到室温；以及，

6、将乳剂反复通过微流化器以小球大小减少到200nm以下。

所述微流化器对粘度敏感，而粘度可以被调节，例如通过(i)加入水；(ii)较少油相；或者(iii)它们的组合。提取物的含量应该保持较高，在该实施例中保持TWEEN较高即可，因为这是提取物的来源。

非水液体，如TWEEN 80或者油类的提取物，或者TWEEN 80提取物与相容的吸收增强型液体的混合物(如聚乙二醇400)，或者液体提取物和熔化的固体(molten solids)的混合物(如GELUCIRE或者固体聚乙二醇，例如，聚乙二醇4000)可以被填充到两片式明胶胶囊内并且密封以防止填充液体从胶囊中泄漏。所述密封可使用设备如QUALICAPSHARD-CAPSULE-BAND-SEALING(QUALICAPS的硬胶囊带密封机)机器完成。胶囊，用于填充提取物，可放置到适合胶囊的大小的板条上。该机器通过拉动装有胶囊的金属板条以穿过机器同时施加密封材料膜(明胶或者羟丙基甲基纤维素(HPMC)的溶液(取决于是否使用明胶或者羟丙基甲基纤维素胶囊)。在穿过机器的第二通道中，将密封切边以有效地将窄带的密封材料施加上。以下为制备密封溶液的方法的实施例：

制备剂型的另一个实施例

制备用于胶囊密封的明胶溶液

1、量取750mL的ddH₂O(双蒸馏水)倒入干净的1L烧杯中并且加热水到57-60℃；

2、将染料加到水中，搅拌直到染料完全溶解并且形成均匀溶液，并且加热到57-60℃；

3、称取503g上述水(57-60℃)倒入新的1L烧杯中(去皮重归零)(taredto zero)；

4、加入0.6g Tween 80到上述的烧杯中；

5、称取141g明胶到去皮重的舟皿(tared weighing boat)里；

6、将明胶加入到上述烧杯中并用手搅拌(压舌板或者搅拌棒)；

7、继续搅拌直到明胶均匀分散在溶液中，用铝箔盖上烧杯；

8、烧杯放入烘箱中(预先加热到55℃)，每20-30min搅拌，以防止明胶沉淀底部；以及，

9、继续搅拌直到所有明胶溶解并且形成清澈均匀的溶液(2-3hr)。

制备剂型的另一个实施例

制备用于胶囊密封的HPMC溶液

1、称取100g HPMC粉末加到新的1L烧杯中(去皮重归零)；

2、称取344g的无水乙醇并不断添加到HPMC粉末中同时用手连续搅拌(使用压舌板或者小刀)，搅拌约20-30分钟直到形成均匀的糊状(没有团簇或干燥的HPMC粉末)；

3、加入181gm的ddH₂O到上述HPMC糊状中(HPMC+乙醇)连续用手搅拌(不需要加热)；

4、将染料加到水中，搅拌直到染料完全溶解并且形成均匀的溶液；以及，

5、继续搅拌直到形成清液(15-20min)，一旦清液形成，用封口膜(parafilm)封上烧杯，并且让它在使用前静置至少1小时(气泡消散)。

制备剂型的另一个实施例

栓剂和阴道药栓制剂

分别用于对受试者的直肠或阴道给药的栓剂和阴道药栓制剂，例如可以通过将Tween 80提取物或者油提取物与适合的栓剂基底或阴道药栓基底组合而制得。在熔化的状态下，将基底和提取物的组合倾倒入合适的模具内(可购买到)。当凝固时，从模具中移除该栓剂。栓剂基底的实例包括甘油酯(Gelucire)和聚乙二醇。基底可具有多种熔点级(melting point grades)，并且可熔化释放活性成分，可施用混合级的从而所得栓剂或者阴道药栓可在体温下熔化。提取物的给药通过这些途径和其他的，但不包括吞咽剂型，由于避免了胃肠道和肝脏的降解，可获得药物的较高吸收。

可用的基底的实例为明胶、可可脂、聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、明胶/甘油组合、酯化脂肪酸、聚氧乙烯脱水山梨醇(polyoxyethelene sorbitans)和聚氧乙烯脱水山梨醇脂肪酸酯。可加入的多种添加剂包括表面活性剂和吸收促进剂如中链(C8-C12)脂肪酸和脂肪酸酯。各种商购的基底，其可以包含不同成分的混合物，在商标名为Imhausen、Witepsol和Gelucire下出售。每种基底的多种级别可用于特定的应用中。也可采用各种基底的混合物以获得所需性能的栓剂或者阴道药栓。其他用于形成栓剂或者阴道药栓的成形的方法包括冷塑法也可以使用压缩。

实施例7制备含有姜黄根提取物的防晒露(sunscreen lotion)

一种姜黄根提取物的乳剂例如可在采用非离子型表面活性剂的芝麻油中制得。应首先选择具有正确的可应用的溶解度的表面活性剂或者表面活性剂对(surfactant pair)。对于非离子型表面活性剂，我们可以计算亲水-亲油平衡值(HLB)以使得HLB匹配应用。

计算表面活性剂的比率以获得期望的HLB

所述HLB为亲水-亲油平衡值并且指明了表面活性剂的溶解度。

第一步骤为选择表面活性剂或者表面活性剂对。本领域技术人员认为的在制备乳剂中可采用的任何理想的表面活性剂或者表面活性剂都可用于本发明。SPAN表面活性剂和TWEEN表面活性剂可认为是制备芝麻油的姜黄根提取物的乳剂的理想的表面活性剂对。SPAN表面活性剂例如可以指脱水山梨醇链烷酸酯(sorbitan alkanoate)，并且SPAN 60具有的HLB为4.7。TWEEN表面活性剂例如可以指乙氧基化的脱水山梨糖醇烷酸酯(ethoxylatedsorbitan alkanoate)，并且TWEEN 60具有的HLB为14.9。

以下过程可用于计算的SPAN 60和TWEEN 60的相对百分比以用于芝麻油的乳剂中来确定表面活性剂的比率而获得所需的HLB：

1、芝麻油的水包油乳剂的理想HLB已经公开为7.0。例如见作者Haus的Oral Lipid-based Formulations:Enhancing the Bioavailability of PoorlyWater-Soluble Drugs.Informa Healthcare USA,Inc.,New York,NY(2007)。

2、假设SPAN 60的部分＝X，

3、然后，TWEEN 60的部分＝1-X。求解X

x(4.7)+(1-x)14.9＝7；以及

X＝0.775

因此，这意味着在该例子中理想的乳剂应该使用77.5％的SPAN 60和22.5％的TWEEN 60的混合物来制备以获得HLB 7.0的混合物。

从芝麻油的姜黄根提取物开始制备乳剂

以下为采用芝麻油提取物制备的有效的乳剂

原料

1、如本文描述的提取姜黄根；

2、制定乳剂的全部重量为200g；

3、称取60g芝麻油提取物；

4、制定6重量％的表面活性剂对，SPAN 60/TWEEN 60，HLB 7.0，以及相应将9.3g SPAN 60与2.7g TWEEN 60混合；以及，

5、称取128g水作为剩余物。

方法

1、在烧杯中小心的加热芝麻油提取物到50℃，注意不要过热；

2、加入SPAN 60并且用玻璃棒搅拌以溶解；

3、单独地，预热水约到55℃；

4、将TWEEN 60上述水中并且用玻璃棒搅拌以溶解；

5、将含有TWEEN 60的水加到油相成分中同时采用螺旋浆式搅拌器快速搅拌油，快速搅拌直到乳剂形成，然后间歇搅拌直到冷却；以及，

6、用琥珀色玻璃瓶装该露。

上述为基础的制剂可根据需要向其中加入抗氧化剂、额外的润肤剂、维生素等。作为制备防晒露的另一种方式，可将干燥的姜黄提取物掺入到乳液中。

从干燥的姜黄提取物制备乳剂

原料

如本文描述的干燥的姜黄提取物。

方法

1、称取25mg干燥的提取物到小的、去皮重的烧杯内；

2、加入大约100g的芝麻油到烧杯中；

3、使用磁性搅拌器，搅拌溶液过夜直到所有的粉末被溶解；以及，

4、使用该油性溶液去制备如本文描述的乳剂。

实施例8新型的具有宽光谱(broad spectrum)性能的姜黄根防晒剂同现有技术的防晒剂的比较

该实施例将对现有技术领先的防晒剂化学品性能与姜黄提取物的性能进行对比。

图1A-1F对比了代表性的现有技术领先的防晒试剂的吸收光谱和根据一些实施方式的姜黄的吸收光谱。图1A表示甲氧基肉桂酸辛酯在5ug/ml甲醇的浓度下的吸收光谱，图1B表示奥克立林(octocrylene)在0.5ug/ml甲醇的浓度下的吸收光谱，图1C表示氧苯酮在1ug/ml甲醇的浓度下的吸收光谱，图1D表示胡莫柳酯(homosalate)在20ug/ml甲醇的浓度下的吸收光谱，以及，图1E表示阿伏苯宗(avobenzone)在5ug/ml甲醇的浓度下的吸收光谱。

该代表性的防晒试剂在吸收光谱中在290nm-400nm(该范围为兴趣范围)的波长间出现峰值。理想上，期望的试剂将吸收横跨290nm-400nm整个范围的能量。例如在图1A-1E中，在该代表性的试剂中可观察到多个各种峰值位置，在峰值的波长处表现出高的(令人满意的)吸收而自然波谷处表现出较低或者零的吸收，而这是不理想的。甚至将具有峰值和波谷的防晒试剂进行组合也将留有不被覆盖的区域，留下具有较少或镁盐UV防护的波长，这是不理想的情况。

图1A表示甲氧基肉桂酸辛酯实际上在比约350nm更高的波长处没有吸收。图1B表示奥克立林在超过约在370nm的波长处吸收较低而实际上在超过约380nm后吸收为零。图1C表示氧苯酮实际上在超过约380nm时吸收为零。图1D表示胡莫柳酯吸收实际上在超过约340nm时吸收为零。图1E表示仅阿伏苯宗具有宽光谱活性但它也在超过约390nm时吸收较低。

另一方面，图1F表示根据一些实施方式的姜黄根提取物具有非常宽的光谱吸收。姜黄提取物的扫描显示在280nm-400nm的波长间的UV光吸收中没有下降或者波谷。其实，这是令人惊讶和意想不到的发现，姜黄提取物能够横跨整个人类需要防晒的波长范围提供如此宽的防伤害性的太阳辐射的保护。

从图1F看出，UV吸收光谱延伸横跨整个280nm-400nm的范围。而且，不像所测试的其他试剂，吸收水平没有降低而是当它越是接近较高的UV范围却越是惊奇地增加。例如姜黄的UV吸收覆盖所有的重要的UVA区域以及，而且UVA ₁ 的吸收水平较高而不是最小限度的最好(minimal at best)，正如现有技术领先的防晒剂那样。因此，当相比于代表性的防晒试剂时并且使用了至少在2011年6月17日、在本文讨论的FDA报道的标准，可知姜黄是非常卓越的防晒试剂。在本节重点重申，美国FDA表示：

(i)防晒产品应该具有UVA和UVB两重防护；以及，

(ii)UVA范围具有两个单独的兴趣区域：

UVA₁区域范围为340nm-400nm；以及，

UVA₂区域范围为320nm-340nm。

FDA还指出太多的重点已放在UVB上，至少应当将20％的保护放在UVA₂区域内，以及至少应当将60％的保护放在UVA₁区域内，并强调了UVA₁区域的相对重要性。于是，姜黄提取物的UV吸收光谱不仅独特，而且，其还是非常理想的(相比于目前使用的最领先的防晒试剂来说)。

作为防晒剂的提取物的性能是相当令人意外的，特别地，由于可在较宽的光谱内防护日晒而不需要使用化学添加剂如TiO₂便可屏蔽UVA和UVB二者。应当理解本发明的提取物具有非常宽的UV吸收峰，覆盖了UVA₁、UVA₂和UVB，这是在本领域中较为独特的且可比很多不能覆盖较宽UV波长范围的多种化合物提供更好的防护。本领域技术人员将理解的是，即使使用多种防晒试剂，每一种试剂可以展示它自己在吸收光谱中的峰值，其结果为组合的试剂仍然包含弱的UV吸收区域。

通过加入少量的蓝色和红色，提取物的自然色可以制备为棕褐色(tancolor)。当用于皮肤较暗的人时，这种颜色将与皮肤的颜色融合，对外观没有其他影响。然而，当用于浅肤色的人时，它将产生“晒黑的(tanned)”的外观。本领域技术人员可以产生一系列颜色其可被不同色调的浅肤色的人所接受，同时地，防护来自于太阳的UV辐射以及提供晒黑的外观。本领域技术人员也可添加天然植物提取物，其具有蓝色/紫色的颜色(例如蓝莓提取物)，以达到相同的肤色效果。后一种方法的优点为所选择的天然提取物可以为所述产品添加附加价值，例如，使用蓝莓提取物的情况下，抗氧化剂(antoxidants)的第二来源将为姜黄素提取物的补充抗氧化效果。

实施例9在人类受试者上测试防晒制剂的方法

在本节中提供的方法与在FDA关防晒剂的制备和测试的最后条款(FDA’s final rule)中详细描述的方法相符，其公布于21CFR 352.70(a)中，日期2011年6月17日(以下称为“条例”)。

受试者

十三(13)位受试者进行了登记目标在于使得至少10名受试者完成该研究。相比于全身吸收的药物评价研究(systemically-absorbed drug evaluationstudies)，通常，涉及到一些药物的副作用，本研究的退出率并非如预计的那么高。引用FDA指南指出，至少需要10个受试者得到有效结果。

排除标准

排除标准包括以下内容：

1、对阳光具有极度过敏的病史且在短期暴露下就会导致严重晒伤；或者对阳光具有异常的响应，例如在正常暴露下的光毒性或者光变应性的响应；

2、服用了已知的对光照产生异常反应的药物(局部或者全身)；

3、测试的背面区域具有不均匀的皮肤色调；

4、暴露区域上有任意损伤；

5、暴露区域上有纹身和伤疤；

6、糖尿病患者；以及，

7、孕妇。

纳入标准

浅肤色的男性和女性受试者应该基于他们的分类进行选择，使用以下指南内容，如皮肤类型I、II和III。该分类根据浅肤色的人在经过冬季没有日晒下首次暴露于太阳下30-45分钟的响应：

1、总是很容易灼伤；从来没有晒黑(敏感型)；

2、总是很容易灼伤；最低程度的晒黑(敏感型)；

3、适度的灼伤；逐渐晒黑(浅褐色)(普通型)；

4、最低限度的灼伤；总是晒得很黑(中度褐色)(普通型)；

5、很少灼伤；大量的晒黑(深褐色)(不敏感型)；以及，

6、从来没有灼伤；深色(不敏感型)。

选择受试者

从志愿者池中选择受试者，每个人都提供具有法律效力的书面征得同意书。并采集每个受试者的病史重点放在阳光对他们皮肤的影响上。通过体检的方式确定个人的综合健康。另外，对测试部分进行检测并重点放在排除标准3、4、5上。存在痣(nevi)、斑(blemishes)或者胎记(moles)可以被接受，如果在医生的判断中，它们不会干涉研究结果的话。如果剪短了毛发，那么背部多余的毛发是可以接受的。剃须是不被接受的，因为太多的表皮将被去除。

试验材料

试验的材料包括：

1、测试材料-含有姜黄提取物的防晒霜或防晒露作为防晒材料(测试组)；以及，

2、参照标准-该标准是含有7％的对二甲氨基甲酸辛酯(padimate O)和3％的氧苯酮的霜作为防晒材料(参照组)。参照标准的组合物如条例^*中给出的如下：

^*联邦公报(Federal Register)/Vol.76，No.117/2011年6月17号星期五：标记和有效性测试；防晒药物产品作为人类非处方使用。

参照组制备方法

所述方法可以按如下进行：

1、将部分A的成分加到适合的配备有螺旋搅拌器的不锈钢壶内，在77-82℃下搅拌直到均匀；

2、将部分B的水加到适合的配备有螺旋搅拌器的不锈钢壶内，并且在77-82℃开始搅拌，加入部分B余下的成分并且搅拌直到均匀；

3、批次1加到批次2中并且在77-82℃下搅拌直到平稳和均匀，慢慢冷却该批次至49-54℃；

4、在49-54℃下将部分C的苯甲醇加到批次3中，搅拌直到均匀，继续冷却该批次至35-41℃；

5、在35-41℃下将部分D的充足的水加到批次4中以获得100g的标准SPF，搅拌直到均匀，冷却该批次至27-32℃。

用于人体测试UV光源

本研究将使用符合条例的太阳模拟器，该模拟器应该能提供这样的UV辐射：

1、UVA II(320-340nm)应该等于或者超过20％的整个UV(290nm-400nm)辐射度；

2、UVA I(340nm-400nm)应该等于或者超过60％的整个UV(290nm-400nm)辐射度；

3、总辐射度应该限制为1500W/m²；以及，

4、总辐射范围应该为250-1400nm。

人体测试的方法

该方法可以按一下内容完成：

1、测试的位置为受试者的背部在腰部和肩部(肩胛骨)之间且在人体中线的侧面。将在这个区域测定受试者对UV辐射的自然敏感性，将对防晒剂和标准进行应用和评估；

2、标准和测试的评估将基于最小红斑剂量(minimal erythemal dose，MED)的原则进行，即引起红斑的UV辐射最低剂量。首先，在患者皮肤上在没有使用任何试剂下(无保护)评估MED以获得他的基线或者MED控制组。此后，应用测试制剂和标准制剂并再一次测定MED。

3、在测试位置内，应用了产品或者标准防晒剂的每个区域(“测试位点”)都用墨水画上轮廓。在区域中每个测试位点最小为30cm²。如果受试者是在直立的位置进行测试，此线条将在受试者直立下的皮肤上进行描绘。如果受试者是在俯卧中进行测试，该标记将在受试者俯卧下进行绘制。因此皮肤的拉伸和起皱不会改变测试和标准应用的区域范围。

4、每个测试位点区域将进一步被分为四或者五个子区域，每一个这样的区域至少为0.5cm²，子区域之间的距离至少为0.8cm。

5、将受试防晒产品和标准防晒剂都以标准速率(standardized rate)应用到它们的各自区域。在条例中说明的该速率为2毫克每平方厘米。制剂的密度将首先被测定以及标准重量将使用适当尺寸的注射器按体积加入。

6、防晒药物产品和受试产品将在相同的研究中进行评价。这些产品将以盲筛、随机的方式进行应用。用手指套铺展每个产品。手指套不需要预饱和。

7、应用产品之后，需要等待至少15分钟后再将测试位点区域暴露到辐射中。

8、然后，测试位点区域内的每个子区域将接受指定剂量的UV辐射。一系列增加的UV辐射暴露将用于测量MED。

9、为了保持盲筛，评价了MED响应的人不同于在测试位点应用了防晒药物产品或者施用了UV剂量的人。此外，小心地使得评估员不知道这些信息。

10、在完成了来自太阳模拟器的UV辐射下的暴露后，将记录受试者的对暴露的立即响应。囊括所有响应是非常重要的。立即响应的实例包括以下：

a、变黑或者晒黑，典型的淡灰色或者略带紫色的颜色，在30-60分钟内褪色，归结于存在的黑色素粒子(melaningranules)的光氧化(photo-oxidation)；

b、立即变红，迅速褪色，被视为毛细血管和小静脉的对热、可见光和红外辐射的正常响应；以及，

c、立即的普遍的热响应，类似刺痛性的痱子(heat rash)，在30-60分钟褪色，显然由热和湿气引起的通常对皮肤表面有刺激。

11、将注意到立即响应之后，将保护每个受试者的暴露区域在剩余的测试天内免受UV辐射。

12、MED在暴露22-24小时之后进行测定并在以下条件下进行测定：

13、照明源可以是钨灯泡或者暖白色荧光灯泡(warm white fluorescentlight bulb)，可在试验位点提供450-550勒克斯(lux)的照明水平。

14、当测试位点受辐射时，该受试者应该在相同的位置。

15、测定暴露的每一系列在导致泛红时的最小能量剂量。为了统计，泛红必须延及在22-24小时暴露下的暴露位点的边界处。甚至还一定产生更为严重的红斑，以此知道产生红斑的最小剂量。该目标是为了获得一些绝对不会产生效果的暴露，一些能够延及暴露位点边界处的泛红的暴露(因此可以算作产生所需效果的最小暴露)以及一些产生比所需要的更大的效果的暴露(不将其计算在内)。

16、如果一系列暴露都未能在处理的或未保护的皮肤位点引起MED响应都将放弃该测试数据，或者如果在处理位点上的该响应为随机的缺失的也将放弃该测试数据(其表明该产品没有均匀的铺开)。

人体测试的定义

MED-最小红斑剂量-所述MED为能产生清晰可见的皮肤泛红(红斑)并能在16-24小时的UV暴露之后清楚地延及指定边界的最小UV剂量。

MEDu-对于未受保护的皮肤的MED-在没有应用防晒剂的测试位点上进行测定。

MEDp-对于受保护的皮肤的MED-在应用了防晒剂的测试位点上进行测定。

ssMEDp-对于标准防晒剂的MEDp。

tpMEDp-对于受试防晒产品的MEDp。

测试子区域的评价-为了使评价测试子区域的人不存在偏向，他/她不应当是在测试位点应用了防晒药物产品的人或者被施用UV剂量的人。

立即响应-施用UV剂量后，应该记录所有的立即响应。这些可以包括立即变黑或者晒黑，局部淡灰色或者略带紫色的颜色，其在30-60分钟内褪色；由于皮肤受热在子区域立即泛红，但快速褪色；立即的普遍的热响应，传播超过该子区域，其在30-60分钟内褪色。

MED测定-注意到立即响应之后，每个受试者都应该受保护暴露区域免受进一步的UV辐射直到MED被测定。应当在16-24小时的UV暴露后进行测定，即最终的MEDu、ssMEDp和tpMEDp通常在确定了初始的MEDu后的一天里测定。采用钨灯泡或者暖白色荧光灯泡来提供至少450勒克斯的照明以评价每个测试位点的红斑响应。对于该评价，该受试者应该在与他或者她在照射测试位点时相同的位置。

SPF测定-

1、每个受试者或者测试个人的SPF的计算(SPFi)如下所示：

SPFi = \frac{{MED}_{p}}{{MED}_{u}}

2、计算平均SPF(MEAN SPF)和SPFi值中的标准偏差(S)。计算标准差(SE)，其等于s/√n(其中，n等于提供有效测试结果的受试者数量)。从学生的分布表中获得t值对应于高至5％的点与n-1个自由度(the upper 5-percent point with n—1degrees of freedom)。

测定标示的SPF值，其等于小于以下值的最大整数

MEAN SPF-(t*SE)

3、为了评价受试产品的SPF测定有效，标准SPF的SPF值应在预期SPF的标准偏差范围内(即16.3±3.43)。

实施例10测试姜黄提取物的抗氧化活性

对姜黄的抗氧化活性进行评估并且与白藜芦醇(众所周知的抗氧化剂)进行比较。

原料

如本文所给出的制备TWEEN的姜黄提取物；

白藜芦醇(反式-3,5,4'-三羟基二苯乙烯)为红葡萄皮的提取物并在红酒中发现存在白藜芦醇。

方法

使用DPPH(1,1-二苯基-2-苦苯肼)试验、一种测试抗氧化活性的常规方法(well-established method)来进行该比较。DPPH试验是基于抗氧化剂对DPPH自由基的吸光度抑制，具有的特征吸收光谱且最大值在517nm。

将白藜芦醇被溶解在甲醇中，并且所述TWEEN提取物和白藜芦醇以相同浓度4.2mg/mL被测。

将1,1-二苯基-2-苦苯肼溶解于甲醇中以制备50μM DPPH-自由基溶液。

1、在517nm读取DPPH-自由基溶液(如上述制备)的吸光度(控制组)；

2、将0.1mL的Tween的姜黄提取物用0.4mL的甲醇稀释；

3、加入2mL DPPH试剂并在60秒的反应时间之后读取吸光度，用甲醇稀释0.1mL的Tween作为空白组；

4、采用分光光度计上的自动化功能每间隔60秒读取溶液3的吸光度；

5、制备白藜芦醇溶液(4.2mg/mL)；

6、0.1mL的白藜芦醇溶液用0.4mL的甲醇稀释以及加入2mL DPPH试剂且在60秒的反应时间之后读取该溶液吸光度，使用甲醇作为空白组；

7、采用分光光度计上的自动化功能每间隔60秒读取溶液6的吸光度；以及，

8、使用下述公式计算DPPH-自由基的％抑制，其中A为吸光度，控制组为DPPH，并且样品为TWEEN提取物和白藜芦醇：

％抑制＝[A_控制-A_样品)/A _控制 ]x 100

图2A和2B比较了根据一些实施方式的TWEEN姜黄提取物的抗氧化活性与白藜芦醇的抗氧化活性。图2A表示了在20分钟内对比200，其中可以看出TWEEN提取物205的抗氧化活性和白藜芦醇210的抗氧化活性在5分钟之后便比得上了。图2B表示了在5分钟内的对比，其中，很明显TWEEN提取物205的活性在前数分钟内比白藜芦醇210的高出数倍，并且TWEEN提取物205的活性和白藜芦醇210的活性从约5分钟到约20分钟的时间变得可相较。

因此，可以推断TWEEN提取物的抗氧化活性可与众所周知的具有可接受的和理想的活性的抗氧化剂相较，从而提供了可接受的和理想的治疗结果。白藜芦醇在预防和/或治疗以下上表现出潜力：

1、动物癌症；

2、通过抑制血管细胞粘附来减少心脏疾病的风险，抑制血管平滑肌细胞增殖，抑制血小板聚集，抑制LDL的过氧化反应，刺激内皮型一氧化氮合成酶(endolethelial nitric oxide synthase，eNOS)的活性；

3、糖尿病，通过它的降血糖和降血脂作用，以及它还可以改善普通糖尿病的症状，如多食症、烦渴以及暴瘦；

4、神经保护作用，包括减少在大脑中斑块形成(plaque formation)，阿尔兹海默疾病和其它神经退行性疾病的成分。

5、抗炎作用，包括抑制急性的和慢性的炎症过程，并且在治疗关节炎上也很有潜力，例如，炎症性关节炎的进展。

6、抗病毒作用，包括通过抑制在病毒复制周期中的早期步骤来抑制单纯性疱疹病毒(HSV)类型1和2的复制，抑制阴道内的HSV复制，限制了阴道外(extravaginal)疾病，抑制水痘带状疱疹病毒、流感病毒、呼吸道病毒以及人类巨细胞病毒。它还与多种抗HIV药物在抗HIV-1治疗活性上显示出协同增强作用。

7、睾酮水平，包括增加激素水平和精子数量。

因此，除了文献上的姜黄以外，在本实施例中所提供的给出可相较的抗氧化活性，这表明姜黄素提取物在治疗至少这些病况中可以是有潜力的。

Claims

1.一种药学上可接受的组合物，该组合物含有从姜黄植物的根中得到的纯化的液体提取物，所述纯化的液体提取物含有：

姜黄素；

去甲氧基姜黄素；

双去甲氧基姜黄素；以及，

至少基本上无毒的提取溶剂，

该提取溶剂在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除；并且，

该提取溶剂作为药学上可接受的载体具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性；

其中，所述提取溶剂(iii)用于在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除以及(iv)选作保留为所述药学上可接受的组合物的成分。

2.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述提取溶剂包括聚氧乙烯(20)山梨醇酐单油酸酯(TWEEN 80HP)、聚乙二醇、肉豆蔻酸异丙酯或者它们的组合。

3.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述提取溶剂包括TWEEN 80HP和肉豆蔻酸异丙酯的组合。

4.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述提取溶剂中包含的TWEEN80HP：肉豆蔻酸异丙酯的比例为约20:80-约50:50。

5.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物含有药学上可接受的油，该药学上可接受的油选自由动物油、鱼油、植物油或者矿物油组成的组中。

6.根据权利要求5所述的组合物，其中，所述药学上可接受的油包括选自由橄榄油、向日葵油、芝麻油、杏仁油、玉米油、橙油、梨莓油、黑胡椒油、肉豆蔻油、罗勒油、迷迭香油、丁香油、葡萄柚油、茴香油、芫荽油、佛手柑油、肉桂油、柠檬油、薄荷油、大蒜油、百里香油、马郁兰油、柠檬草油、姜油和小豆蔻油、液体石蜡、棉花籽油、花生油、坚果油、豆油、菜籽油、维生素E油、维生素E TPGS油、鱼油、动物脂衍生的油、硅油、蓖麻油、角鲨烯油或者它们的混合物组成的组中的食用油。

7.根据权利要求5所述的组合物，其中，所述药学上可接受的油包括芝麻油。

8.根据权利要求5所述的组合物，其中，所述药学上可接受的油包括棉花籽油。

9.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物为用于局部给药的剂型。

10.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物作为防晒剂局部施用。

11.根据权利要求1所述的组合物，其中，所述组合物为用于口服给药的剂型。

12.一种含有权利要求1所述的组合物的口服剂型，该剂型包括胶囊或者片剂。

13.一种含有权利要求1所述的组合物的膳食补充剂，其中，所述膳食补充剂在使用该膳食补充剂的受试者中作为抗氧化剂。

14.一种药学上可接受的乳剂，该乳剂含有从姜黄植物的根中得到的纯化的液体提取物，所述乳剂含有：

姜黄素；

去甲氧基姜黄素；

双去甲氧基姜黄素；

至少基本上无毒的提取溶剂，

其中，所述提取溶剂(iii)用于在提取过程中将所述提取物从姜黄植物的根中脱除以及(iv)选作保留为所述药学上可接受的组合物的成分；

药学上可接受的油；以及，

乳化剂。

15.根据权利要求14所述的乳剂，其中，所述乳剂为水乳液。

16.根据权利要求14所述的乳剂，其中，所述提取溶剂包括TWEEN 80HP。

17.根据权利要求14所述的乳剂，其中，所述提取溶剂包括肉豆蔻酸异丙酯。

18.根据权利要求14所述的乳剂，其中，所述药学上可接受的油包括选自由橄榄油、向日葵油、芝麻油、杏仁油、玉米油、橙油、梨莓油、黑胡椒油、肉豆蔻油、罗勒油、迷迭香油、丁香油、葡萄柚油、茴香油、芫荽油、佛手柑油、肉桂油、柠檬油、薄荷油、大蒜油、百里香油、马郁兰油、柠檬草油、姜油和小豆蔻油、液体石蜡、棉花籽油、花生油、坚果油、豆油、菜籽油、维生素E油、鱼油、动物脂衍生的油、硅油、蓖麻油、角鲨烯油或者它们的混合物组成的组中的食用油。

19.根据权利要求14所述的乳剂，其中，所述药学上可接受的油包括芝麻油。

20.根据权利要求14所述的乳剂，其中，所述药学上可接受的油包括棉花籽油。

一种制备权利要求1所述的药学上可接受的组合物的方法，所述方法包括：

在至少基本上无毒的提取溶剂中将至少部分的姜黄根浸泡有效的时间，

该提取溶剂与包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的酚二酮类是可混溶的；并且，

该提取溶剂为酚二酮类的药学上可接受的载体，该载体具有(i)LD50至少为49700mg/kg的急性口服毒性或者(ii)至少为5000mg/kg的急性皮肤毒性；

其中，所述浸泡包括用提取溶剂覆盖该部分根；

以及，

分离所述提取溶剂和浸泡的根以得到姜黄的液体提取物。

21.根据权利要求20所述的方法，其中，所述提取溶剂包括TWEEN 80HP。

22.根据权利要求20所述的方法，其中，所述提取溶剂包括肉豆蔻酸异丙酯。

23.一种制备权利要求14所述的药学上可接受的乳剂的方法，所述方法包括：

在至少基本上无毒的提取溶剂中将至少部分的姜黄根浸泡有效的时间，该提取溶剂与包括姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素的酚二酮类是可混溶的；并且，

其中，所述浸泡包括用提取溶剂覆盖该部分根；

分离所述提取溶剂和浸泡的根以得到姜黄的液体提取物；以及，

乳化该液体提取物。

24.根据权利要求23所述的方法，其中，所述提取溶剂包括TWEEN 80HP。

25.根据权利要求23所述的方法，其中，所述提取溶剂包括肉豆蔻酸异丙酯。

26.根据权利要求23所述的方法，其中，所述乳化包括将药学上可接受的油加入到所述液体提取物中以得到所述液体提取物的乳剂。

27.根据权利要求23所述的方法，其中，所述乳化包括将乳化剂加入到所述液体提取物中以得到所述液体提取物的乳剂。

28.根据权利要求26所述的方法，其中，所述药学上可接受的油包括芝麻油。

29.根据权利要求26所述的方法，其中，所述药学上可接受的油包括棉花籽油。

30.一种含有姜黄根的提取物的组合物作为防晒剂的应用。

31.一种用于保护真皮组织免于UVA和UVB照射的试剂盒，所述试剂盒包括：作为口服剂型的权利要求1所述的组合物；

作为局部剂型的姜黄根的提取物；以及，

局部剂型的、口服剂型的或者局部剂型和口服剂型的组合给药说明。

32.一种处理皮肤以防止或抑制皮肤受UVA和UVB照射的方法，该方法包括对受试者的真皮组织局部给药有效量的权利要求1所述的组合物。

33.根据权利要求32所述的方法，其中，该方法进一步包括在联合所述局部给药的情况下对受试者进行口服给药有效量的权利要求1所述的组合物的口服剂型。

34.一种治疗受试者的组织炎症的方法，该方法包括对受试者的组织给药有效量的权利要求1所述的组合物。

35.根据权利要求34所述的方法，其中，所述组织为真皮组织。

36.根据权利要求34所述的方法，其中，所述组织为粘膜组织。

37.根据权利要求34所述的方法，其中，所述组织为胃肠道组织。

38.一种处理受试者的受伤组织的方法，该方法包括对受试者的受伤组织给药有效量的权利要求1所述的组合物。

39.根据权利要求38所述的方法，其中，所述组织为真皮组织。

40.根据权利要求38所述的方法，其中，所述组织为粘膜组织。

41.根据权利要求38所述的方法，其中，所述组织为胃肠道组织。