JP7321229B2 - ウコン根茎からクルクミノイドを分離する方法 - Google Patents
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Description
一般的な実験材料:
1. ウコン根茎の粉末の調製
以下の実施例で使用されたウコン根茎の粉末は、台湾台南市左鎮区で購入した新鮮な赤ウコン根茎を脱イオン水で洗浄した後、24時間凍結乾燥し、粉砕機(メーカー:Hsiang Tai Machinery Industry Co., Ltd.; 型番:SM-3C)を使用して粉砕し、目開き0.18mmの篩いを使用して篩い分けることによって調製された。
1. クルクミノイドの定量分析
以下の実施例において、各実験サンプル中のクルクミノイド(クルクミン、ビスデメトキシクルクミン、及びデメトキシクルクミンを含む)の含有量は、台湾衛生福利部が2015年3月19日に公告した「カプセル及び錠状食品中のクルクミノイドの試験方法」に記載された方法を参考し、ウォーターズコーポレーションのACQUITY UPLC(登録商標)フォトダイオードアレイ(photodiode array,PDA)eλ検出器を使用して超高速液体クロマトグラフィー(ultra performance liquid chromatography,UPLC)分析を行うことによって測定された。ULPC分析を行う際の操作条件を以下の表1に示す。
A.異なる抽出方法によるクルクミノイド総含有量への影響
一般的な実験材料のセクション1で調製したウコン根茎の粉末を、1つの実験群(すなわち、実験群1)及び2つの比較実験群(すなわち、比較実験群1及び比較実験群2)に分け、以下の表2に示す抽出工程にかけた。
ウコン根茎の粉末を、1つの実験群(すなわち、実験群1)及び2つの比較実験群(すなわち、比較実験群1及び比較実験群2)に分けた。実験群1のウコン根茎の粉末は、上記セクションAの実験群1について記載された手順に従って攪拌抽出を行った。比較実験群1と2のそれぞれのウコン根茎の粉末は、比較実験群1と2において、95%のエタノールの代わりに、それぞれ50%のエタノール及び75%のエタノールを使用すること以外は、上記セクションAの実験群1について記載された手順と同様な手順に従って行った。
ウコン根茎のエタノールによって抽出した産物のクルクミノイド(クルクミン、ビスデメトキシクルクミン、及びデメトキシクルクミンを含む)を精製する際に、様々な結晶化条件が及ぼす影響を評価するため、以下の実験を行った。
上記実施例1のセクションAに記載された実験群1のウコン根茎のエタノールによって抽出した産物を、1つの実験群(すなわち、実験群1)及び2つの比較実験群(すなわち、比較実験群1及び比較実験群2)に分けた。実験群1及び比較実験群1と2のそれぞれのウコン根茎のエタノールによって抽出した産物に対して、下記の表5に示す条件で、4℃で結晶化工程を行った。
結果:
ウコン根茎の粉末を、1つの実験群(すなわち、実験群1)及び2つの比較実験群(すなわち、比較実験群1及び比較実験群2)に分けた。実験群1のウコン根茎の粉末は、95%のエタノールの代わりに、以前の抽出工程から得られたリサイクルされた90%のエタノールを使用すること以外は、上記実施例1のセクションAの実験群1について記載された手順に従って攪拌抽出を行った。濃縮工程によって得られた濃縮物を、2℃から8℃の温度で、24時間の期間をかけて放置し、沈殿物(オレオレジン)を形成した。
結果:
実験手順:
ウコン根茎の粉末に対して、実施例1のセクションAの実験群1について記載された手順に従って攪拌抽出を行った。ウコン根茎のエタノールによって抽出した産物の結晶化及び実験サンプルの調製は、実施例2の「実験手順」のセクションの実験群1について記載された手順に従って行った。その後、実験サンプル中のクルクミン、ビスデメトキシクルクミン、及びデメトキシクルクミンの含有量を、一般的な実験手順のセクション1に記載された手順に従って分析し、クルクミノイド総含有量をさらに計算した。実験は、3回繰り返し、得られたデータを平均値±標準偏差(standard deviation,S.D.)で表す。
結果:
Claims (12)
- ウコン根茎からクルクミノイドを分離する方法であって、
(A)90%から100%の範囲のエタノール濃度を有する第1エタノール溶液を用いて、100rpmから300rpmの範囲の攪拌速度で、ウコン根茎に対して抽出を行い、エタノールによって抽出した産物を得る、ステップAと、
(B)90%から100%の範囲のエタノール濃度を有する第2エタノール溶液を用いて、2℃から8℃の範囲の温度、及び40rpmから300rpmの範囲の攪拌速度で、前記エタノールによって抽出した産物を結晶化させ、クルクミノイドを得る、ステップBと、を含む方法。 - 前記ステップAにおいて、前記第1エタノール溶液の量の範囲、前記ウコン根茎のグラム当たり5mLから10mLである、請求項1に記載の方法。
- 前記ステップAにおいて、前記抽出は、10℃から100℃の範囲の温度及び15分から150分の範囲の期間で行う、請求項1又は2に記載の方法。
- 前記ステップBにおいて、前記第2エタノール溶液の量の範囲は、前記エタノールによって抽出した産物のグラム当たり1gから20gである、請求項1~3のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ステップBにおいて、前記結晶化は、3℃から6℃の範囲の温度及び12時間から72時間の範囲の期間で行う、請求項1~4のいずれか一項に記載の方法。
- 前記クルクミノイドは、クルクミン、ビスデメトキシクルクミン、デメトキシクルクミン、又はそれらの組み合わせを含む、請求項1~5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ステップAの前に、12時間から48時間の範囲の期間をかけ、前記ウコン根茎を凍結乾燥することをさらに含む、請求項1~6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記凍結乾燥は、前記ウコン根茎を-20℃から-10℃の範囲の温度に凍結することと、30℃から40℃の範囲の第1上昇温度で3時間から6時間の範囲の第1期間、及び50℃から60℃の範囲の第2上昇温度で18時間から21時間の範囲の第2期間をかけ、前記ウコン根茎を乾燥することと、を含む、請求項7に記載の方法。
- 前記ステップAにおいて、前記抽出は、95%のエタノール濃度を有する前記第1エタノール溶液を用いて、280rpmの攪拌速度で行う、請求項1~8のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ステップAにおいて、前記第1エタノール溶液はリサイクルされたエタノール溶液である、請求項1~9のいずれか一項に記載の方法。
- 前記ステップBの前に、前記エタノールによって抽出した産物を、-20℃から8℃の範囲の温度で24時間の期間をかけて放置することをさらに含む、請求項10に記載の方法。
- 前記ステップBの後に、20メッシュから100メッシュの篩いに掛けて、前記クルクミノイドを篩い分けることをさらに含む、請求項10又は11に記載の方法。
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