CN102405046B

CN102405046B - 表现出抗炎性质的药物组合物

Info

Publication number: CN102405046B
Application number: CN201080017578.8A
Authority: CN
Inventors: 法比安·普里姆; 英格丽德·雅克蒙-科莱特
Original assignee: BIOXTRACT S A
Current assignee: BIOXTRACT S A
Priority date: 2009-03-20
Filing date: 2010-03-22
Publication date: 2014-07-02
Anticipated expiration: 2030-03-22
Also published as: TN2011000471A1; MA33220B1; EP2408442A1; EP2408442B1; RU2532384C2; WO2010106191A1; BRPI1006229A2; AU2010224811B2; MX339414B; ES2604127T3; AU2010224811A1; MX2011009785A; RU2011138101A; CN102405046A

Abstract

本发明涉及一种包含足量姜黄素和足量乳化剂的组合物，所述组合物用作药物。

Description

表现出抗炎性质的药物组合物

技术领域

本发明涉及一种新的药物组合物、营养(或食物(或饲料)添加剂)组合物或功能性食品(或饲料)组合物，其表现出改善的植物提取物制剂以增加存在于该组合物中的活性组分的生物利用度，还涉及其在炎症相关综合征或病症的治疗和/或预防中的用途。

背景技术

许多从果实和植物中鉴定出的药剂可干扰若干细胞信号转导通路。所述药剂包括姜黄素(姜黄)，但也包括白藜芦醇(存在于红葡萄、花生和浆果中)、染料木素(genistein)(存在于大豆中)、二烯丙基硫醚(存在于葱属植物中)、S-烯丙基半胱氨酸(存在于葱属植物中)、蒜辣素(存在于大蒜中)、番茄红素(存在于番茄中)、辣椒素(存在于红辣椒中)、薯蓣皂苷元(存在于胡芦巴中)、6-姜醇(存在于姜中)、鞣花酸(存在于石榴中)、熊果酸(存在于苹果、梨、李中)、水飞蓟宾(存在于乳蓟中)、茴香脑(存在于茴芹、樟脑和茴香中)、儿茶素(存在于绿茶中)、丁子香酚(存在于丁香中)、吲哚-3-甲醇(存在于十字花植物中)、苎烯(存在于柑桔类水果中)、β胡萝卜素(存在于胡萝卜中)和膳食纤维(存在于多种蔬菜和水果中)。

在体外，被姜黄素抑制的细胞信号转导通路似乎包括一个或多个下列生物学因子：NF-κB、AP-1、STAT3、Akt、Bcl-2、Bcl-XL、半胱天冬酶(caspases)、PARP、IKK、EGFR、HER2、JNK、MAPK、COX2和5-LOX。

姜黄素是常见的印度咖喱香料姜黄的主要的类姜黄素(curcuminoid)。类姜黄素是多酚并且决定着姜黄的黄色。

已经进行了大量工作试图确立姜黄素的至少在体外(包括在培养细胞上进行的实验)的生物学活性和药理作用。姜黄素可能在抗肿瘤(癌症)、抗氧化、抗风湿、抗缺血、抗糖尿病、抗淀粉状蛋白和抗炎性质方面有益，除此之外还可能在心血管疾病、神经疾病和克罗恩病方面有益。

然而，在中性和碱性pH下，姜黄素在体外迅速降解。

此外，当食用时，姜黄素很少(或不)被吸收：姜黄素经历强烈的肠内代谢，其肠吸收低，致使不能达到与其体外所显示效果相符的姜黄素血液浓度。

现有技术中主张约0.5μM至约6μM的姜黄素(及其衍生物)血液浓度是安全的，且与体外测定的有利效果相符。

除代谢之外，姜黄素的快速全身消除可进一步导致其临床效果相当有限。

为了改善其生物利用度(血浆和组织水平)，已经采取了多种方法。这些方法可包括使用辅助剂(adjuvant)，如胡椒碱。实际上，胡椒碱干扰葡糖苷酸化，所述葡糖苷酸化是一种对生物体的正常生物化学而言外来的化合物(诸如药物和毒物)进行修饰以增加其水溶性和排泄的生理机制(发生在肝脏和小肠中)。

共补充20mg胡椒碱(从黑胡椒中提取)可增加姜黄素的血浆浓度。

然而，由于胡椒碱对药物代谢的作用(即抑制葡糖苷酸化)，在采用其他药物疗法时胡椒碱应慎重地个体化使用(如果有的话)。

或者，将姜黄素在摄取前溶于热水中、或溶于温热的油状液体中，看似增加其生物利用度，但是该事实并未充分证实，且常常认为姜黄素是热不稳定的。

姜黄素的热和光稳定性似乎因其被包合进环糊精中而增加(Szente等，1998，Journal of inclusion Phenomena and Molecular Recognition inChemistry，32，81-89)。

其它的姜黄素稳定代谢物，例如四氢姜黄素用于局部施用且可能在体内被发现，但是不清楚是否它们具有与姜黄素一样的治疗活性。

酸的存在增加姜黄素的稳定性但降低它的溶解度。相反，碱性环境增加姜黄素的溶解度，但是以急剧降低的稳定性作为代价。

所以，当配制更高生物有效的姜黄素的时候必须小心谨慎。

包含姜黄素与藻酸盐或姜黄素与明胶的组合物具有在pH＝5下增加＞10⁴倍的溶解度。然而姜黄素对水解或光解降解不稳定。

使用脂质体姜黄素或姜黄素纳米颗粒或姜黄素磷脂复合物可能是有益的。

例如，在人癌细胞系模型中，与游离姜黄素相比，平均粒径小于100纳米的包含姜黄素的纳米颗粒表现出可比至更好的效力。然而，这些纳米颗粒的实际体内吸收情况还未得到证实。

WO2007/101551描述了一种增加姜黄素生物利用度的方法，其包括用大豆磷脂制备复合物的简便步骤，然而使用该制剂获得的姜黄素血浆浓度仅仅达到0.033微摩尔每升。

WO2006/130679描述了用于治疗过敏性鼻炎的包含具有羰基官能团之化学物质的组合物。

该国际专利申请WO2006/130679提出，姜黄素(具有羰基)也许可通过形成席夫碱而与组胺在体外反应，该反应涉及姜黄素的羰基和组胺的胺基，因此推测具有羰基官能团的化合物可能在治疗过敏性鼻炎(体内)方面具有价值。

在专利申请WO2006/130679的一个实施例中，使用了姜黄素和聚山梨酯的商业混合物。

然而，在专利申请WO2006/130679中，姜黄素与聚山梨酯的商业组合物被证明不能有效地与组胺反应。

此外，现有技术还教导应当避免过于酸性的混合物，因为没有席夫碱可在酸性pH下形成。

最后，专利申请WO2006/130679没有披露体内数据。

因此，需要导致姜黄素体内效果提高的新方法，以将该有前途的天然产物带到治疗多种人类疾病的治疗剂的最前沿。

发明内容

本发明提供了一种新的组合物以及获取和使用该组合物的方法，所述组合物不存在现有技术中产品的缺点，具体地，本发明提供了一种改善姜黄素在哺乳动物血液中(尤其是人血液中)之生物利用度的组合物和方法。

此外，本发明还提供了一种仅包含食物成分或组分的组合物，所述组合物可相容性地适于作为食物(或饲料)添加剂施用或者用在功能性食品(或饲料)组合物中。

最后，本发明提供了下述的组合物，其可用于改善炎症或炎症相关综合征或病症的治疗和/或预防，而可能需要比现有技术中已知组合物低的施用剂量。

本发明人已经发现了一种增加活性化合物姜黄素生物利用度的方法，所述方法通过给动物(优选哺乳动物，包括人)施用包含可食用(以及有利地食物相容性)乳化剂的组合物而提供该姜黄素来实现。

有利地，本发明的组合物还可包含精油(优选单萜和/或倍半萜的(无水)混合物)。

通过将该组合物提供(给施用)给动物，所述姜黄素(包括姜黄素衍生物，优选地选自二氢姜黄素、四氢姜黄素，以及姜黄素、二氢姜黄素和四氢姜黄素的葡糖苷酸和硫酸酯衍生物)在该动物血液(优选哺乳动物(包括人)血液)中的浓度值为至少0.5μM。

有利地，在发明的方法中，将存在于该组合物中的约20mg至约500mg的姜黄素(优选地约40mg至约120mg姜黄素)按每日计给予(施用)(口服)(成人)，以达到所述姜黄素和姜黄素衍生物(也包括姜黄素(以及可能的四氢姜黄素)的葡糖苷酸和硫酸酯衍生物)的血液浓度为至少(约)0.5μM(在成人内)，优选地至少(约)1μM。

或者，将存在于本发明组合物中约100mg至约250mg的姜黄素，优选约150mg(或者约168mg)的姜黄素按每日计给予(施用)(口服)，以达到所述姜黄素和姜黄素衍生物(也包括姜黄素(以及可能的四氢姜黄素)的葡糖苷酸和硫酸酯衍生物)的血液浓度为至少(约)1.5μM(在成人中)，优选至少(约)2μM。

因此，本发明一个方面涉及一种药物组合物、营养组合物(也称为食物(或饲料)添加剂组合物)或功能性食品组合物或功能性饲料组合物，其包含下述组分(或由下述组分组成)：

-可能的合适的(药物或食物(饲料)相容性的)载体或稀释剂，和

-足量的姜黄素(E100)、乳化剂和可能的精油(超过50％萜化合

物(单萜和/或倍半萜)的(无水)混合物)；

该组合物优选用作药物，更优选用于炎症或炎症相关综合征或病症的治疗和/或预防，优选用于骨关节炎的治疗和/或预防。

有利地，在本发明的(药物)组合物中，所述姜黄素的足量(存在于一粒胶囊中)为约2mg至约200mg，优选约2mg至约100mg，更优选约20mg至约50mg，优选约42mg；或者约30mg。

炎症相关综合征或病症，是指由发炎状态(包括炎症)引起的哺乳动物(人)的疾病，或者表现出发炎状态(包括炎症)的哺乳动物(人)的疾病。

更确切地说，炎症相关综合征或病症包括癌症、心血管疾病，优选选自动脉粥样硬化和缺血性心脏病(局部缺血)、哮喘、自身免疫疾病、慢性炎症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、过敏、炎性肠病、盆腔炎性疾病、再灌注损伤、自身免疫疾病或变态反应病(例如鼻炎、骨关节炎(类风湿性关节炎)、移植排异反应)、脉管炎、腹型肥胖和/或神经退行性疾病(例如阿尔茨海默病、帕金森病或亨廷顿病)。

这些综合征或病症还包括过敏性反应(以前称为1型过敏(其为引起炎症的不当免疫反应的结果)(炎症相关病症))以及由抗体反应介导并通过吸引白细胞而诱发炎症的其他过敏反应(2型和3型)，其损害周围组织。这些综合征和病症还包括由免疫系统不当攻击肌肉成分导致肌肉炎症所引起的炎性肌病(其可能与其它免疫病症并发，所述其它免疫病症例如系统性硬化、皮肌炎、多发性肌炎和包涵体肌炎)。这些综合征和病症还包含若干高水平的炎症相关标记物，优选选自与肥胖有关的IL-6、IL-8和TNF-α。

迁延的炎症(炎症相关病症)(称为急性或慢性炎症)导致存在于炎症部位的细胞类型的进行性改变，其特征在于炎性过程对组织的破坏和愈合同时进行，该炎性过程可导致已知的慢性疾病综合征或病症，其优选地选自肥胖、糖尿病、心血管和脑血管疾病(例如高血压或局部缺血)、自身免疫疾病(包括来源于炎症的疾病，如关节炎或狼疮)、脑病(包括神经退行性疾病，例如阿尔茨海默病、帕金森病、亨廷顿病、多发性硬化、抑郁或精神分裂症)、哮喘、系统性硬化、过敏和癌症，由本发明组合物治疗和/或预防的一种或全部的上述鉴定的疾病。

骨关节炎是用本发明组合物治疗和/或预防的最优选疾病。

炎症相关病症的另一个后果是疼痛，其也将用本发明的组合物来治疗和/或预防。

包含结缔组织疼痛的疾病(例如纤维肌痛)也是本发明治疗和/或预防的综合征或病症。

因此，在本说明书中，申请人处于同样的效果，将使用词语“慢性炎症”、“慢性炎症相关疾病”或“炎性病症”，其构成统称为炎症相关综合征或病症的综合征和病症的大的相关组，其为多种哺乳动物(人)疾病的原因。

优选地、本发明的药物组合物还可包含酸组分，优选有机酸，更优选柠檬酸(E330)、苹果酸(E296)、乙酸(E260)、酒石酸(E334)、乳酸(E270)、藻酸(E400)或其混合物。

有利地，本发明的药物组合物与合适的载体联合(包封)，所述载体优选胶囊、珠、丸剂或片、即优选食物相容的(例如明胶(胶囊剂))、其可是更优选用(食物相容的)成分包衣，使得该组合物对胃内的胃内消化有抗力，更优选地，所述成分是E904(虫胶)。

本发明还涉及一种药物组合物、营养组合物或功能性食品/饲料组合物(包括食物/饲料添加剂)，优选为非水溶液并且包含下述组分(或由下述组分组成)：

-足量的姜黄素、足量的乳化剂和足量的柠檬酸和可能的足量的精油(单萜和/或倍半萜的(无水)混合物)，

优选用作药剂，更优选用于炎症、炎症相关综合征或病症的治疗和/或预防，更优选用于骨关节炎(类风湿性关节炎)的治疗和/或预防。

有利地，本发明的组合物(以非水溶液形式，或固体组合物形式和/或在胶囊中)包含足量的姜黄素、足量的乳化剂和可能的足量的酸，其口服施用且是一种经口(药物或营养或功能性食品/饲料)组合物。

根据本发明，优选地，将约2mg至约200mg的姜黄素，更优选约2mg至约100mg的姜黄素，更优选约20mg至约50mg的姜黄素、足量的一种乳化剂和可能的足量的酸配制在一粒胶囊中，该胶囊为本发明的药物组合物。

有利地，按日计对象服用本发明的1、2、3、4、5、6、7、8、9或多达10粒胶囊，优选1至6粒胶囊，更优选2至4粒胶囊。

“约”，优选指正负10％的偏差。例如，约5％指从4.5％到5.5％的每个实数。

有利地，该组合物适于口服，每天一次、两次或三次。

本发明的口服组合物还可包含足量的植物精油。

根据本发明优选的精油选自琼脂油、Ajwain油、茴香油、香脂油、欧芹油、香柠檬油、小豆蔻籽油、胡萝卜籽油、甘菊油、菖蒲油、肉桂油、香茅油、小茴香籽油、胡芦巴油、乳香油、高良姜油、天竺葵油、姜油、葡萄柚油、指甲花油、刺柏油、熏衣草油、柠檬草油、蜂花油、薄荷油、没药油、橙油、牛至油、鸢尾油、薄荷油、松油、玫瑰果油(Rosehip oil)、鼠尾草油、五味子油、甘松、Tarrangon油、茶树油、麝香草油、姜黄油、缬草油、西洋蓍草油和蓬莪术油，更优选姜黄油。

有利地，在本发明的组合物中，存在约3％(w∶w)至约30％(w∶w)，优选约5％(w∶w)至约15％(w∶w)，更优选约7％(w∶w)的精油(被加入(到本发明组合物的其它成分中))。

在本发明的药物(或营养)组合物中，优选可以加入约25毫升至约200毫升、更优选约50毫升的(无水)精油。

精油，指天然来源的(通常是植物来源的)挥发性液体(但不是水溶液)芳香化合物，其在水中的溶解度差。

精油通常通过提取技术来制备，所述提取技术优选选自蒸馏(包括水蒸汽蒸馏)、冷压、萃取(浸渍)和/或溶剂提取。

本发明的精油包含超过50％的萜(相关)化合物，或基本上由萜(相关)化合物组成，所述萜(相关)化合物例如单萜和/或倍半萜且优选是无水的。

“基本上由萜(相关)化合物组成”，意指至少50％(按摩尔计)，优选至少70％，更优选至少80％的精油或全部精油由萜(相关)化合物组成且优选是无水的。

萜由异戊二烯单元通过生物合成衍生得到。单萜由二个异戊二烯单元组成，倍半萜由三个异戊二烯单元组成。在异戊二烯(单萜和/或倍半萜)骨架上，附加的水解和/或重排和氧化生成精油最终的萜化合物。

另外地，可在本发明的组合物中使用精油中含量最大的分子(来自精油的萜化合物)来代替复合精油，例如萜(相关)化合物，优选选自芳基姜黄酮、姜黄酮、姜黄新酮(Curlone)、芳基姜黄烯和对伞花烃及其混合物。

有利地，若干乳化剂存在于和组合(混合)于本发明的组合物中，前体是其平均HLB、粘度、含量和含量比保持下文所公开的范围之内。

根据本发明的一个实施方案，优选的乳化剂具有低粘度和良好的水溶性。

有利地，本发明组合物中存在的乳化剂具有约0.100-0.800Pa.s的低粘度(25℃)，并且具有中(6-10)到高(11-25)的亲水亲油平衡值(HLB)，所述乳化剂优选聚山梨酯80。

有利地，在根据本发明的(非水溶液形式)组合物中，足量的低粘度乳化剂为约200mg至约700mg，更优选约400mg至约700mg，仍然更优选约600mg至约700mg，优选约600mg至约650mg的乳化剂。

有利地，在本发明的(非水溶液形式)组合物中，足量的姜黄素为约5mg至约200mg，优选约10mg至约100mg，更优选约30mg至约50mg，优选约40mg(或者约42mg)的姜黄素。

优选地，姜黄素与低粘度乳化剂的比例为约1∶99至约30∶70(w∶w)，更优选约5∶95至约15∶85(w∶w)，仍然更优选约5∶95至约12∶88(w∶w)，仍然更优选约6∶94(w∶w)。

有利地，在本发明的组合物(非水溶液)中，所述酸成分(优选柠檬酸)以约0.5mg至约35mg，更优选约1mg至约10mg，更优选约2mg至约5mg，更优选约3mg(或者，优选约3.5mg)的浓度(含量)存在。

可能的话，本发明的组合物(非水溶液)还可包含足量的精油(单萜和/或倍半萜)。

或者，在本发明的另一个实施方案中，本发明(固体)组合物中存在的乳化剂具有约75.0至约175.0Pa.的高粘度(50℃)，以及中(6-10)到高(11-25)的亲水亲油平衡值(HLB)，该乳化剂优选聚山梨酯60。

有利地，在本发明的(固体)组合物中，足量的高粘度乳化剂为约100mg至约700mg，更优选约200mg至约500mg，仍然更优选约300mg至约500mg，和更优选约300mg(或者约260mg)的高粘度乳化剂。

有利地，在本发明的(固体)组合物中，足量的姜黄素为约2mg至约100mg，优选约5mg至约50mg，更优选约10mg至约30mg，更优选约16mg的姜黄素。

优选地，所述组合物存在中的姜黄素与高粘度乳化剂的比例为约1∶99至约20∶80(w∶w)，更优选约5∶95至约15∶85(w∶w)，仍然更优选约5∶95至约12∶88(w∶w)，仍然更优选约6∶94(w∶w)。

有利地，在本发明的(固体)组合物中，所述酸成分以约0.25mg至约35mg，优选约1mg至约10mg，更优选约1mg至约5mg，更优选约1.5mg的浓度(含量)存在。

可能的话，本发明的(固体)组合物还可包括足量的精油(单萜和/或倍半萜)(或其混合物)。

有利地，该(固体)组合物包含足量的姜黄素、足量的高粘度乳化剂，足量的酸和干燥剂。

存在于该组合物中的干燥剂是任何能吸附(因此提供像粉末一样的固体相)高粘度乳化剂的(惰性且食与物相容)的物质，优选地选自纤维素、纤维素衍生物(例如甲基纤维素、羟丙基纤维素(及其组合))和SiO₂。

本发明优选的干燥剂是SiO₂。

有利地，该组合物中包含的干燥剂(优选SiO₂颗粒)的量为约50mg至约400mg，优选约100mg至约300mg，更优选约120mg。

优选地，该干燥剂(优选SiO₂)以1∶10至约5∶10，更优选约3∶10(w∶w)加入到所述药物组合物中。

优选地，被加到本发明组合物中的SiO₂颗粒由高吸收能力的二氧化硅制成。

优选地，被加到本发明组合物中的SiO₂颗粒由低粒径的二氧化硅制成，其平均直径为约5μm至约100μm，可以名称Sipernat 50S销售。

优选地，本发明的SiO₂是非衍生化的。

本发明的另一个方面是提供一种治疗炎性疾病的方法，包括向可能患有上述疾病、综合征和病症之一的哺乳动物对象(优选人患者)施用足量的本发明组合物的步骤。

更优选地，在本发明的方法中，按每日计给该哺乳动物对象(优选成年患者)施用约20mg至约500mg的姜黄素(优选约40mg至约170mg的姜黄素；或则，约40mg至约120mg)，以使该姜黄素和姜黄素衍生物的血液浓度达到至少(约)0.5μM(在成人中)的浓度值。

本发明的最后的一个方面是获得本发明组合物的方法，其包括下述步骤或者由下述步骤组成：

-制备或获得基本上纯的姜黄素，

-将所述基本上纯的姜黄素溶解在合适量的乳化剂中，优选使用有机酸，

-任选地，加入足量的精油(单萜和/或倍半萜)(或混合物)，

-任选地，将由该姜黄素和该乳化剂组成的组合物混合到干燥剂上并将颗粒粉碎，

-将包含该姜黄素和该乳化剂以及可能的该干燥剂的组合物(或由其组成的组合物)装填到(明胶)胶囊中，

-可能地，获得该(明胶)胶囊的肠溶包衣(通过加入E904层)，和

-回收本发明的组合物。

优选地，该(明胶)胶囊允许填装约700mg至约1000mg的本发明(液体)组合物。优选地，该(明胶)胶囊允许填装约400mg的本发明(固体)组合物。

本发明的详细说明

定义

姜黄素，也被称为[1，7-双(4-羟基-3-甲氧基苯基)-1，6-庚二烯-3，5-二酮，作为二阿魏酰基甲烷(diferuloylmethane)或作为E100食品添加剂。

本发明包括姜黄素，包括它的酮式和烯醇式形式，但优选不是姜黄素的化学衍生形式，也不是二氢姜黄素、四氢姜黄素或六氢姜黄素。

聚山梨酯80，E433，Tween

80或PEG20单油酸失水山梨醇酯是乳化剂。

聚山梨酯60，E435，Tween

60，PEG20单硬脂酸失水山梨醇酯是乳化剂。

粘度，指动力粘度，用Pa*s表示。

乳化剂，指为两亲性的可食用化合物，因此具有通过在液-液界面上吸附而减少疏水化合物(例如姜黄素)和水之间界面张力的潜能。本发明的乳化剂可以集结成聚集物(例如胶束)，其可以包载本发明的疏水化合物。

出乎意料的是，本发明人发现，本发明的姜黄素与乳化剂以及可能的精油(单萜和/或倍半萜)的酸混合物导致姜黄素的改善的稳定性，且在十二指肠环境下产生持续的溶解性(例如在pH 6.8、37℃下的磷酸盐缓冲液中)、生物利用度和临床效果。

实施例

实施例1：

使用纯度至少为90％的市售姜黄素(本发明人优选选择具有至少95％或96％和可能接近100％的纯度的姜黄素批次)。这些批次是在用乙醇提取且用甲醇重结晶之后获得的。

液体提取物的制备

姜黄素制剂优选使用具有细小粒度的姜黄素粉末(具有优选的且有利地包括约100至约200μm的粒度)来制备。首先，将柠檬酸晶体(有利地具有小于150μm的粒度)与姜黄素混合。将所得混合物搅拌入聚山梨酯80中。在加热至30℃以适当匀化后，将该全部混合物混合45分钟。然后将该全部混合物用三辊轧机(优选砂磨机)研磨并密封充入氮气以除去存在的空气。配制之后立刻装填入明胶胶囊中，优选每粒胶囊约700mg。本发明人使用非包衣胶囊，同时也使用加入E904(虫胶)的肠溶包衣胶囊。纯姜黄素的浓度优选6％，用0.5％的柠檬酸和聚山梨酯80加至100％。

实施例2：

如实施例1制备制剂，但是采用高粘度乳化剂，优选聚山梨酯60。然后将SiO₂以10％至60％、优选30％至最大40％(更优选约30％)的最终百分比加入到行星式混合器或高剪切搅拌器中，直到获得均质的流体粉末。该粉末可压成片剂或装填入硬壳胶囊(优选每粒胶囊400mg)中。纯姜黄素在最终组合物中的浓度优选4％，含有0.35％的柠檬酸和最终浓度优选30％的SiO₂。

所有的百分比均基于重量比(w∶w)。

实施例3：

姜黄素在实施例1的液体组合物中的溶解度通过将1.4g(相当于每日2粒700mg胶囊的剂量)该制剂(包含84mg姜黄素)在900毫升pH 6.8的磷酸盐缓冲液中在37℃下搅拌1小时来测量。为比较，在37℃下将同样量的姜黄素(84mg)溶解在pH 6.8的磷酸盐缓冲液中1小时。

在1小时以后，将溶液经0.2μm过滤器滤过并定量溶解的姜黄素。

在实施例1的液体组合物中溶解的姜黄素为35％的初始剂量。

在实施例1的组合物中的姜黄素与没有聚山梨酯和柠檬酸的姜黄素相比增溶8750倍。

姜黄素在实施例2的粉末组合物中的溶解度通过将1.2g(相当于每日3粒400mg胶囊的剂量)该制剂(包含48mg姜黄素)在900毫升pH 6.8的磷酸盐缓冲液中在37℃下搅拌1小时来测量。

为比较，在37℃下将同样量的姜黄素(48mg)溶解在pH 6.8的磷酸盐缓冲液中1小时。

在实施例2的组合物中溶解的姜黄素为30％的初始剂量。

在实施例2的组合物中的姜黄素与没有聚山梨酯和柠檬酸的姜黄素相比增溶6000倍。

实施例4：

组合物：

如实施例1一样，采用具有细小粒度的姜黄素粉末(100至200μm)来制备姜黄素制剂。首先，将柠檬酸结晶(具有有利的低于150μm的粒度)与姜黄素混合。将所得的混合物搅拌入聚山梨酯80和姜黄精油中，所述姜黄精油由姜黄(Curcuma longa L.)的根茎通过超临界提取而提取得到。其包含最小60％的总姜黄酮(芳香姜黄酮、α-姜黄酮和β-姜黄酮)。水蒸气蒸馏或蒸汽蒸馏也可用于提取所述精油。在加热至30℃后，将全部混合物混合45分钟。然后将全部混合物用三辊轧机(优选砂磨机)研磨并密闭充入氮气以除去存在的空气。然后将所述制剂迅速填装入明胶胶囊中，优选肠溶包衣胶囊，优选每粒胶囊约700mg。

所得组合物由6％(w∶w)的姜黄素，0.5％(w∶w)的柠檬酸和7.14％(w∶w)的姜黄精油组成，加聚山梨酯80(86.36％；w∶w)至100％。

溶解度：

姜黄素在实施例4的液体组合物中的溶解度通过将1.4g(相当于每日2粒700mg胶囊的剂量)该制剂(包含84mg的姜黄素)在900毫升pH 6.8的磷酸盐缓冲液中在37℃下搅拌1小时来测量。为比较，在37℃下将实施例1的同样量的姜黄素制剂(84mg)溶解在pH6.8的磷酸盐缓冲液中1小时。

在1小时以后，将溶液经0.2μm过滤器滤过并定量溶解的姜黄素。实施例1的溶解的姜黄素为35％的初始剂量。实施例4的溶解的姜黄素(加入有精油)为50％的初始剂量。

本发明人重复同样的实验但是用同样量的薄荷精油替换姜黄精油，获得与仅包含乳化剂的姜黄素组合物相比同样改善的溶解度。

作为对照，发明人用精油与姜黄素混合，仅测量到很差的姜黄素溶解度，其接近于纯姜黄素的溶解度。

发明人得出结论，姜黄素在包含乳化剂和补充有精油的组合物中的溶解度与含有精油但不含乳化剂的姜黄素组合物相比增溶12.500倍，且尽管乳化剂在含有柠檬酸、乳化剂和精油的姜黄素组合物中的量降低，但与含有乳化剂和柠檬酸(没有精油)的姜黄素组合物相比，仍增溶1.5倍。

实施例5：

口服生物利用度试验

发明人首先评价了本发明制剂的急性毒性。发明人未观察到毒性。

将预定高剂量(5000mg/公斤)的实施例1制剂以单次口服剂量给予大鼠。每日观察动物，至少观察14天。

然后在人类志愿者中研究实施例1的制剂，以评价相对口服生物利用度。24名年龄在18至55岁之间的健康个体志愿者被选作本研究。下列处理为单剂量给药(每日一次)：1“肠溶包衣”胶囊(6男和6女)和2“肠容包衣”胶囊(6男和6女)。“肠溶包衣”胶囊是用虫胶包衣的明胶胶囊，且填充有姜黄素(6％；42mg)、柠檬酸(0.5％；3.5mg)和作为乳化剂的聚山梨酯80的700mg混合物。血样在0小时时以及周期性地以1小时或半小时间隔在12小时内(在给药后的0、0.5、1、1.5、2、3、4、6、8和12小时)采取。在各采样点，将6毫升血被采样到肝素管内。离心后，将血浆转移到两个标记的管内。第一管掺有内标物(克仑特罗)且用甲醇和乙腈提取。提取物经UPLC-MS/MS在BEH-C18柱(100x2.1mm，粒径1.7μm)上以水+甲酸和乙腈+甲酸作溶剂来分析。洗脱液流速为0.6ml/分钟，用电喷雾电离源(ESI)以阳离子模式进行检测。从血样中回收姜黄素的提取步骤的效率用正常血样中姜黄素的回收率来测定。姜黄素的回收率用在三个不同浓度水平下至少5次重复通过将所得姜黄素峰面积与在相同浓度水平下一式三份直接注入参比溶液而获得的峰面积进行比较来计算。

不管受试者、时间点和剂量如何，都没有观察到可定量的痕量的未代谢姜黄素。

在利用β-葡糖醛酸酶和芳基硫酸酯酶水解可能的姜黄素的缀合代谢物之后，将血样进行分析。在将血浆样品与酶β-葡糖醛酸酶和硫酸酯酶孵育之后测定姜黄素及其缀合物。对这些测定来说，将血浆样品(200μL)与20μL 1M醋酸盐缓冲液(pH5.5)、5μL β-葡糖醛酸酶和芳基硫酸酯酶溶液、以及20μL内标物溶液(克伦特罗；2μg/ml)混合。将样品在37℃下孵育3小时(在运行试验后测定)。用1毫升乙酸乙酯/甲醇(95∶5；v/v)提取样品。离心后，将上清液在氮气流下于环境温度下温和地蒸发至干，并在100μL甲醇和50μL水中重构，将7.5μL注入到UPLC系统中。

在用β-葡糖醛酸酶和芳基硫酸酯酶处理后，发明人注意到姜黄素在血中的Cmax值为196ng/ml和333ng/ml(表1)。

表1：姜黄素衍生物(姜黄素衍生物水解后作为姜黄素而测量)的统计汇总表；每剂量药动学参数

不同的论文已经证明了此低剂量的口服(未配制)姜黄素(42或84mg的姜黄素)，甚至在代谢形式(姜黄素的葡糖苷酸或硫酸盐)下都根本不可生物利用。

本发明人通过给予在700mg胶囊中的不含乳化剂的同样量的姜黄素进一步证实了这方面。甚至，如上所述，用葡糖醛酸酶和芳基硫酸酯酶处理后，他们仍未在血液中检测到姜黄素。

本发明人然后比较了包含同样量姜黄素和乳化剂的肠溶包衣胶囊和未包衣胶囊。

如上用葡糖醛酸酶和芳基硫酸酯酶处理后，本发明人注意到相似的血液峰值，在两种情况下姜黄素在血液中的Cmax值均约为300-350ng/ml(给予2粒胶囊)。

总之，本发明人得出结论，他们开发的组合物是生物可利用的且主要测定到姜黄素衍生物。

实施例6：

临床试验

发明人然后在骨关节炎治疗方面评价了本发明的组合物(优选实施例1的组合物)。

发明人选择了患有膝骨关节炎的280名患者，并将其随机(50∶50)分到安慰剂组和处理组中。处理组每日接受4粒本发明的胶囊剂(每粒胶囊：姜黄素，42mg；柠檬酸，3.5mg和作为乳化剂的聚山梨酯80)，持续14日，而安慰剂组则接受4粒(外观)同样的但不含姜黄素的胶囊。

本研究为双盲研究，在几个地点进行，并由风湿病学专家监查。

按照纳入标准和排除标准选择患者，所述纳入标准例如年龄(40-80岁)，存在与疼痛相关的膝骨关节炎(用视觉模拟量表法；VAS；通常患者在不服用止痛药时已具有持续24小时的VAS＞50毫米)，所述排除标准例如同时存在的其他类风湿性疾病或其他药物疗法(除对乙酰氨基酚外)。

在第0天和第14天测定Lequesne指数(疼痛和患者体能的综合指数)，以及他们的疼痛(VAS)和其受关节炎影响的膝盖的影像。

要求病人每日记录下其按李克特量表(Likert scale)的疼痛评价(0：根本没有疼痛；10：最大疼痛)，如果他们服用对乙酰氨基酚，则量(最大4g每日，除在第13至14日对乙酰氨基酚不被允许外)。在研究期间，还要求患者不得服用抗炎药或止痛化合物(除对乙酰氨基酚以外的化合物)。

发明人还监视测任何发生的不良事件。

在第14天，采集疼痛(VAS)的评价、Lequesne指数以及患者所收集的所有数据(病人在李克特量表上的疼痛评价、服用的对乙酰氨基酚的量)。

当所有患者均已完成14日的处理时，发明人将数据揭盲。

安慰剂组和处理组之间在不良事件方面没有差异。

安慰剂组的主要区别是疼痛(VAS和/或李克特量表)和/或Lequesne得分的减少(如内科医师和/或患者从第0天至第14天测定的那样)和/或对乙酰氨基酚在第1至12天的摄取。

总的说来，本发明人得出结论，接受本发明胶囊剂(包含姜黄素、有机酸和乳化剂)的患者具有减少的疼痛和改善的能力。他们因此得出结论，他们所开发的制剂在治疗骨关节炎和/或其症状方面是有效的。

Claims

1.一种组合物，其包含足量的姜黄素、足量的可食用乳化剂和选自柠檬酸、苹果酸、乙酸、酒石酸、乳酸、藻酸或其混合物的酸，所述组合物用作药物，其中所述姜黄素的足量为20mg至200mg，

其中所述可食用乳化剂是低粘度乳化剂，其在25℃时的粘度为0.100Pa.s至0.800Pa.s，并且具有中到高亲水亲油平衡值(HLB)并且其中所述姜黄素：低粘度乳化剂比为1：99至15：85(w/w)，或者

其中所述可食用乳化剂是高粘度乳化剂，其在50℃时的粘度为75.0Pa.s至175.0Pa.s，并且具有中到高亲水亲油平衡值(HLB)并且其中所述姜黄素：高粘度乳化剂比为1：99至15：85(w/w)，

其中所述中亲水亲油平衡值为6-10以及所述高亲水亲油平衡值为11-25。

2.根据权利要求1的组合物，其中所述可食用乳化剂是混合物。

3.根据权利要求1的组合物，其被进一步装入明胶胶囊中。

4.根据权利要求1的组合物，还包含3％(W：W)至30％(W：W)的精油，所述精油包含超过50％的萜化合物。

5.根据前述权利要求中任一项的组合物，其中所述乳化剂在25℃时的粘度为0.100Pa.s至0.800Pa.s。

6.根据权利要求5的组合物，其中所述姜黄素的足量为20mg至100mg。

7.根据权利要求6的组合物，其中所述乳化剂的足量为200mg至700mg。

8.根据权利要求5的组合物，其中所述酸的足量为0.5mg至35mg。

9.根据前述权利要求1至4中任一项的组合物，其中所述乳化剂在50℃时的粘度为75.0Pa.s至175.0Pa.s。

10.根据权利要求9的组合物，其中所述乳化剂的足量为100mg至700mg。

11.根据权利要求10的组合物，其中所述姜黄素的足量为20mg至50mg。

12.根据权利要求9的组合物，还包含干燥剂。

13.根据权利要求12的组合物，其中所述酸的足量为0.5mg至35mg。

14.根据权利要求1的组合物，用于炎症和/或炎症相关疾病的治疗和/或预防。

15.权利要求14的组合物，其中所述炎症相关疾病为骨关节炎。

16.一种组合物，包含10mg至200mg的姜黄素、100mg至700mg的可食用乳化剂、选自柠檬酸、苹果酸、乙酸、酒石酸、乳酸、藻酸或其混合物的酸且进一步被装入明胶胶囊中，

其中所述可食用乳化剂是低粘度乳化剂，其在25℃时的粘度为0.100Pa.s至0.800Pa.s，并且具有中到高的亲水亲油平衡值(HLB)并且其中所述姜黄素：低粘度乳化剂比为1：99至15：85(w/w)，或者

其中所述可食用乳化剂是高粘度乳化剂，其在50℃时的粘度为75.0Pa.s至175.0Pa.s，并且具有中到高的亲水亲油平衡值(HLB)并且其中所述姜黄素：高粘度乳化剂比为1：99至15：85(w/w)，

其中所述中亲水亲油平徜值为6-10以及所述高亲水亲油平徜值为11-25。

17.根据权利要求16的组合物，其中所述可食用乳化剂是混合物。

18.权利要求16的组合物，包含30mg至50mg的姜黄素。

19.根据权利要求18的组合物，包含400mg至700mg的乳化剂。

20.根据权利要求16至19中任一项的组合物，包含1mg至5mg的酸。