CN104706650B - 一种阿扎胞苷冻干制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种性质稳定的阿扎胞苷冻干制剂，活性成分为治疗有效量的阿扎胞苷；冻干前溶液中还含有有机溶剂、冻干支撑剂和注射用水；所述有机溶剂选自乙醇、异丙醇、甲醇或其任意比混合液，优选乙醇；所述有机溶剂的用量为冻干前溶液总体积的0.3‑6.0％。本发明还提供一种工艺简单、适合规模化生产、可临床使用的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法。

Description

一种阿扎胞苷冻干制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于药物制剂技术领域。具体涉及一种阿扎胞苷冻干制剂及制备方法。

背景技术

阿扎胞苷(Azacitidine)为DNA甲基转移酶抑制剂，可引起DNA低甲基化，并具有直接细胞毒作用，2004年5月美国FDA批准该药物冻干制剂Vidaza上市，用于对骨髓增生异常综合症的所有亚型的治疗。

阿扎胞苷结构式如下：

阿扎胞苷(化合物1)是一种胞嘧啶核苷类似物，在水中极易水解，主要产生两个水解产物，是注射用阿扎胞苷的主要杂质。如下式反应所示，阿扎胞苷的含氮杂环首先开环得到化合物2(RGU-CHO)，这一步反应为可逆反应，化合物2进一步水解得到化合物3(RGU)，这一步为不可逆反应。

由于该药物活性成分阿扎胞苷在水中迅速水解，因此其上市剂型为冻干剂，通过冷冻 干燥去除制剂中水分，从而保证产品在储存过程中的质量。

在冻干制剂制备过程中首先应将原料溶解到注射用水中，得到均一的溶液，然后才能进行冷冻干燥，然而阿扎胞苷原料溶解度极低，约13.8mg/ml，属于难溶性药物，这一药物特性导致在配料过程中原料溶解时间较长，从而产生大量水解杂质，产品质量难于控制。

因此，在含阿扎胞苷的制剂制备工艺中保护阿扎胞苷的稳定性显得极为重要。阿扎胞苷制剂的关键点是一方面缩短阿扎胞苷与水的接触时间，减少水解时间，另一方面降低温度，减缓水解速度。

US2011/0042247 A1公布了一种阿扎胞苷冻干制剂的制备方法，按照其中的实施例1进行样品制备过程中发现原料溶解速度慢，配料时间长，水解杂质较高，从而导致产品有关物质较大，不利于产品的质量保证。

CN 103251564 A公布了一种注射用阿扎胞苷及其制备方法，采用调节溶液pH的措施减缓原料水解速度，但由于本品水解速度受pH影响较小，因此其通过控制溶液pH来减缓原料水解并不理想。

WO 2013/012135 A1公布了一种阿扎胞苷冻干制剂的制备方法，配料工艺采用将阿扎胞苷直接溶解于40％-60％的叔丁醇水溶液中，由于阿扎胞苷在叔丁醇中不溶，原料在混合溶液中溶解速度慢，导致其配料速度慢，用时较长；且有机溶剂用量较大，所以溶解的原料容易重新结晶析出；叔丁醇为高沸点有机溶剂，不易通过冷冻干燥除去，最终在制剂中残留较高，且叔丁醇并不是《中国药典》2010年版规定的低毒类有机溶剂，产品安全性无法保证；大量采用有机溶剂对环境和设备污染大，不利于放大生产。

目前阿扎胞苷粉针剂在制备过程中普遍存在的问题是：1、原料极易水解，且为难溶性药物，原料溶解速度慢，配料时间长，产生水解杂质，不利于产品质量的保证；2、加入额外辅料改善料液的稳定性、提升产品质量，但效果不够理想；3、为改善料液稳定性， 料液中加入大量高沸点有机溶剂，不利于工业放大生产和环境保护。

发明内容

针对现有技术中阿扎胞苷冻干粉针剂及制备工艺的不足之处，本发明提供一种质量稳定、适合临床使用的阿扎胞苷冻干制剂，以及一种配料时间短、溶解速度快、工艺简单、适合规模化生产的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法。

发明人通过研究发现，在配料工艺中采用有机溶剂分散药物后，再加入注射用水中进行溶解，能够显著缩短配料时间、提高料液稳定性，从而提高阿扎胞苷制剂质量。

本发明主要通过如下方法降低杂质水平：1、通过在配料过程中引入有机溶剂，能够加快药物溶解速度，缩短配料时间；2、通过低温配料，能够降低药物水解速度。通过以上两个方法降低了冻干品中的有关物质水平，从而提高了产品质量，有利于产品工业化生产。

发明人在试验过程中发现，药物颗粒加入水中后，药物颗粒与空气形成的固-气界面应被药物颗粒与水形成的固-液界面取代，才能够进行后续溶解，而阿扎胞苷原料颗粒在水中溶解速度较慢，原因之一是阿扎胞苷原料颗粒加入水中后，由于原料粒子表面吸附的气体不能全部被水分子取代，从而造成阿扎胞苷原料粒子表面存在固-气界面，阻挡了阿扎胞苷固体颗粒与水分子接触，从而导致溶解速度大大降低。提高阿扎胞苷溶解速度的方法之一为增大原料溶解过程中原料与水接触的固-液界面。

发明人在试验过程中同时发现，有机溶剂能够快速浸润原料粒子表面，取代表面吸附的气体，增大液-固界面积，从而降低在上述溶解过程中阻碍溶解、无法利用的气-固表面积。原料颗粒与水分子接触面积迅速增大，使溶解速度大大提升，同时有机溶剂的药物分散液与水混合过程中，由于有机溶剂和水在互溶过程中分子扩散作用，会在粒子表面形成剧烈紊流，这种紊流也加快了药物溶解，另外由于料液中含有有机溶剂，降低了药物分子与水分子接触机会，同时增加了料液稳定性。

本发明的创新点主要在于：所选用的有机溶剂均为阿扎胞苷的不良溶剂，阿扎胞苷在所选用的有机溶剂中并不能够溶解，因此为了将原料顺利溶解，配料过程中不应引入有机溶剂，但通过本发明，如果将原料首先分散在有机溶剂中，然后再加入水性溶液中搅拌，可以显著加快药物溶解速度。这种在处方工艺中引入药物不良溶剂而增快药物溶解速度的效果是意想不到的。通过本发明，有机溶剂能够促使原料在水中的溶解，缩短配料时间，从而出人意料的保证了产品质量。

本发明所选择的有机溶剂均为《中国药典》2010年版中规定的第二类或第三类有机溶剂，这两类有机溶剂毒性较低，同时有机溶剂在处方中所占比例较小，因此对环境的污染和设备的损害较小。所采用的有机溶剂均为低沸点有机溶剂，比起高沸点有机溶剂，其最终可以轻松通过冷冻干燥去除，在制剂中的最终残留远低于《中国药典》2010年版要求，因此能够保证产品安全性。

本发明提供一种阿扎胞苷冻干制剂，活性成分为治疗有效量的阿扎胞苷；冻干前溶液中还含有有机溶剂、冻干支撑剂和注射用水；所述有机溶剂选自乙醇、异丙醇、甲醇或其任意比混合液。优选乙醇。

本发明的阿扎胞苷冻干制剂中，所述有机溶剂的用量为冻干前溶液总体积的0.3-6.0％，优选0.6-3.0％。

本发明的阿扎胞苷冻干制剂中，所述冻干支撑剂选自氯化钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、海藻糖、木糖醇、蔗糖、山梨醇、右旋糖、白蛋白、羟乙基淀粉、环糊精、甘氨酸之一或任意组合；优选甘露醇。

本发明的阿扎胞苷冻干制剂，使用时加入溶媒复溶使用，质量稳定，在治疗方案中使用安全、方便、快捷。

本发明还提供一种上述阿扎胞苷冻干制剂的制备方法，包括如下步骤：

1)在注射用水中加入冻干支撑剂，降温到-3℃～10℃后备用；

2)称取阿扎胞苷，将阿扎胞苷分散在有机溶剂中，得到阿扎胞苷有机溶剂分散液；

3)将阿扎胞苷有机溶剂分散液溶解在上述备用水溶液中，得到的料液保温范围为-5℃～10℃；

4)将溶解后的料液过滤除菌后分装到玻璃瓶；

5)将无菌料液冷冻干燥除去有机溶剂及注射用水；

6)真空压塞或充氮气保护，压塞扎铝塑盖密封。

优选地，本发明的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法中，所得阿扎胞苷制剂中有机溶剂的残留量不超过制剂总质量的0.5％。

优选地，本发明的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法中，所述步骤4)中的过滤除菌是指用0.45μm和0.22μm滤膜分别除菌过滤，或者直接用0.22μm滤膜除菌过滤。

本发明的制备工艺简单，方便可行，重复性好，易于工业放大，保证了产品可工业放大的要求；缩短了配料时间，节约了成本，降低产品杂质，保证了产品的安全性和有效性。

本发明人惊喜的发现：如果将阿扎胞苷先分散在占溶液总体积0.3～6.0％的有机溶剂中，再加入经过预冷的含有冻干支撑剂的水溶液中，可加快阿扎胞苷的溶解速度，从而在根本上降低产品有关物质，工艺优势在于比常规搅拌溶解药物的配料时间大大缩短，同时可避免采用高速剪切将药物直接剪切、溶解在水溶液中所产生的局部高温，这种瞬间局部高温不利于药物在水溶液中的稳定。而且制备过程中有机溶剂的用量较少，且最终通过冷 冻干燥除去，其限度符合《中国药典》2010年版要求。

本发明提供的阿扎胞苷冻干制剂制备方法简单、配料速度快，能够从根本上保证产品质量；所采用的低沸点有机溶剂最终很容易通过冷冻干燥除去，其限度远低于《中国药典》2010年版要求，能够保证产品安全性；制备过程中的有机溶剂用量少，不会污染冻干设备和环境。本发明的阿扎胞苷冻干制剂物理化学稳定性都非常好，产品外观为白色疏松的块状物或粉末，符合冻干剂外观的要求。更为详细的优良效果将在实施例中加以说明。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明做进一步详细说明，但不限于此。

实施例1

量取950ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到20ml乙醇中，将阿扎胞苷乙醇分散液与注射用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例2

量取950ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到20ml异丙醇中，将阿扎胞苷的异丙醇分散液与注射用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例3

量取950ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到20ml甲醇中，将阿扎胞苷的甲醇分散液与注射 用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例4

量取950ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到30ml混合有机溶剂中(甲醇：乙醇：异丙醇＝1:1：1)，将阿扎胞苷的有机溶剂分散液与注射用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例5

量取950ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到20ml混合有机溶剂中(乙醇：异丙醇＝1:1)，将上述阿扎胞苷的分散液与注射用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例6

量取950ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到15ml乙醇中，将阿扎胞苷的乙醇分散液与注射用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例7

量取1000ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到10ml乙醇中，将阿扎胞苷的乙醇分散液与注射用水混合溶解后，加水至1250ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，25ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例8

量取900ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到50ml乙醇中，将阿扎胞苷的乙醇分散液与注射用水混合溶解后，加水至1000ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

实施例9

量取1000ml注射用水，冷却到-3～-1℃，称取5g甘露醇溶解到上述注射用水中，称取5g阿扎胞苷，将阿扎胞苷搅拌分散到10ml乙醇中，将阿扎胞苷的乙醇分散液与注射用水混合溶解后，加水至1500ml，料液搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，30ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

对照例1(参考WO 2013/012135A1实施例2-1)

量取700ml叔丁醇和300ml注射用水混合均匀，加入5g甘露醇搅拌溶解，料液降温到5℃，加入5g阿扎胞苷搅拌溶解完全，搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，20ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

对照例2(US2011/0042247A1实施例1)

量取950ml注射用水，冷却到-3到-1℃，称取4g甘露醇加入上述溶液中搅拌溶解，溶解完毕后，称取4g阿扎胞苷加入上述注射用水中搅拌溶解，溶解完毕后加冷却水至1000ml，料液搅拌5分钟，搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻 璃瓶，25ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

对照例3(CN 103251564 A实施例1)

量取800ml注射用水，加入4g甘露醇搅拌溶解完全，注射用水补充到1000ml，降温到-3～-1℃，调节pH到大约6，加入4g阿扎胞苷，搅拌至溶解完全，搅拌均匀后用0.22μm微孔滤膜过滤，过滤的溶液分装到玻璃瓶，25ml/支，冷冻干燥得到阿扎胞苷冻干粉。

按照实施例1-9处方和对照例1-3处方配制相应的阿扎胞苷溶液，冷冻干燥制备得到冻干粉。考察配料过程中的原料溶解时间和产品有机残留以及质量情况，结果见表1。

表1实施例与对照例配料时间与产品质量对比

结果表明，本发明实施例1-9配料速度均快于对照例1、2和3，由于配料速度快，产品中有关物质低于所有对照例。所有实施例中的有机溶剂残留较低，符合《中国药典》2010年版要求，并且远低于对照1中叔丁醇残留，产品不论从有关物质方面还是有机残留方面，均能够保证产品的安全性。

采用本发明，在制备过程中引入有机溶剂有利于加快配料速度，从根本上降低产品有关物质，保证产品质量，产品中采用的有机溶剂最终通过冷冻干燥除去，其残留限度远低于《中国药典》2010年版要求，能够保证产品安全性。本品有机溶剂用量较少，对设备和环境污染小，适合规模化放大生产。

Claims (8)

1.一种阿扎胞苷冻干制剂，活性成分为治疗有效量的阿扎胞苷；冻干前溶液中还含有有机溶剂、冻干支撑剂和注射用水；其特征在于，所述有机溶剂选自乙醇、异丙醇、甲醇或其任意比混合液；

所述有机溶剂的用量为冻干前溶液总体积的0.3-6.0％；

所述冻干制剂的制备方法包含：将所述阿扎胞苷先分散在所述有机溶剂中，然后再加入到经过预冷的含有冻干支撑剂的所述注射用水中；

所述预冷是指降温到-3℃～10℃。

2.根据权利要求1所述的阿扎胞苷冻干制剂，其特征在于，所述有机溶剂的用量为冻干前溶液总体积的0.6-3.0％。

3.根据权利要求1所述的阿扎胞苷冻干制剂，其特征在于，所述有机溶剂为乙醇。

4.根据权利要求1所述的阿扎胞苷冻干制剂，其特征在于，所述冻干支撑剂选自氯化钠、葡萄糖、乳糖、甘露醇、海藻糖、木糖醇、蔗糖、山梨醇、白蛋白、羟乙基淀粉、环糊精、甘氨酸之一或任意组合。

5.根据权利要求1所述的阿扎胞苷冻干制剂，其特征在于，所述冻干支撑剂为甘露醇。

6.根据权1-5中任一项所述的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法，包括如下步骤：

1)在注射用水中加入冻干支撑剂，降温到-3℃～10℃后备用；

2)称取阿扎胞苷，将阿扎胞苷分散在有机溶剂中，得到阿扎胞苷有机溶剂分散液；

3)将阿扎胞苷有机溶剂分散液溶解在上述备用水溶液中，得到的料液保温范围为-5℃～10℃；

4)将溶解后的料液过滤除菌后分装到玻璃瓶；

5)将无菌料液冷冻干燥除去有机溶剂及注射用水；

6)真空压塞或充氮气保护，压塞扎铝塑盖密封。

7.根据权利要求6所述的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法，所得阿扎胞苷制剂中有机溶剂的残留量不超过制剂总质量的0.5％。

8.根据权利要求6所述的阿扎胞苷冻干制剂的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中的过滤除菌是指用0.45μm和0.22μm滤膜分别除菌过滤，或者直接用0.22μm滤膜除菌过滤。