CN104694382A

CN104694382A - 一种核酸快速提取装置及方法

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Publication number: CN104694382A
Application number: CN201510101883.XA
Authority: CN
Inventors: 余家昌; 杜正平; 熊槐
Original assignee: Ai Jiesi Bio Tech Ltd; Bio Tech (guangzhou) Co Ltd
Current assignee: Bio Tech (Guangzhou) Co., Ltd.
Priority date: 2015-03-09
Filing date: 2015-03-09
Publication date: 2015-06-10
Anticipated expiration: 2035-03-09
Also published as: CN104694382B

Abstract

本发明提供了一种核酸快速提取装置，包括离心柱，所述离心柱包括两个被分隔形成的独立腔体，所述独立腔体包括第一腔体和第二腔体，第一腔体与第二腔体之间设置有将二者分隔成独立腔体的竖直分隔体和水平分隔体；离心柱中还设置有微孔过滤膜和核酸吸附膜，所述离心柱顶部设置有分别与所述第一腔体和第二腔体连接的开口，所述离心柱底部的内侧设置有该核酸吸附膜。本发明还提供了一种基于该核酸快速提取装置实现的核酸快速提取方法。本发明的技术方案，在针对痕量（如法医鉴定）样品的核酸提取过程中，能够有效避免因拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材的吸附和离心管壁的吸附而造成微量核酸物证的损失，提高核酸提取效率，同时减少交叉污染。

Description

一种核酸快速提取装置及方法

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一种用于实验室或者医疗检测的核酸快速提取装置以及基于该核酸快速提取装置实现的核酸快速提取方法。

背景技术

目前，在生物技术领域中使用传统的离心柱法或磁珠法进行核酸提取，一般需要进行裂解、结合、漂洗、洗脱等四个步骤。首先，使用蛋白酶K、表面活性剂等成分，破坏细胞结构，释放核酸进入溶液；然后，加入高浓度的离液盐和乙醇等成分，使核酸和吸附膜或磁珠结合；再对吸附膜或磁珠进行漂洗，去除抑制物；最后，将吸附膜或磁珠上的核酸洗脱。而在法医DNA鉴定过程中，经常遇到拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材，这些检材容易吸附含有核酸的溶液，使得这部分溶液中的核酸不能被离心柱或磁珠吸附，从而造成提取效率低下。

除此之外，裂解、结合、漂洗步骤是在不同的离心管中进行的，需要将含有核酸的溶液进行转移操作，在这个过程中，会因为离心管壁和移液器吸头壁的吸附，而再一次造成核酸的损失，如果操作不谨慎，还有液体飞出，造成交叉污染的可能。

针对上述技术问题，本领域一般通过以下两个方面入手得以实施改进策略：一方面，通过对核酸提取的试剂和方法，简化提取步骤，提高提取效率并克服可能存在的交叉污染问题；另一方面，从核酸提取装置的结构入手，尽量避免含有核酸的溶液成分的转移和离心柱、离心管的转管使用情况的出现。然而现有技术中采用的方案，尤其是针对核酸提取装置的改进和核酸提取的试剂的优化并不能使上述问题得到完美解决，因此，从核酸提取装置的结构以及核酸提取的试剂入手，开发出一种核酸快速提取装置尽量避免含有核酸的溶液成分的转移和离心柱、离心管的转管使用情况是本领域技术人员亟待解决的技术问题，并具备广阔的市场前景。

发明内容

针对现有技术中的不足，本发明解决的技术问题在于提供一种核酸快速提取装置，通过将离心柱分隔成两个独立腔体，并在其中一个独立腔体中完成核酸的裂解、结合、漂洗步骤，在另一个独立腔体中完成洗脱步骤，使该核酸快速提取装置用于核酸提取过程中，尤其针对痕量（如法医鉴定）样品的核酸提取过程中，能够有效避免因拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材的吸附和离心管壁的吸附而造成微量核酸物证的损失，提高核酸提取效率，同时减少交叉污染。

本发明解决的技术问题还在于提供一种基于该核酸快速提取装置实现的核酸快速提取方法，结合提取装置结构改进和提取试剂的成分优化而实现的提取步骤，能够有效避免因拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材的吸附和离心管壁的吸附而造成微量核酸物证的损失，并有效地裂解各种类型检测材料尤其是针对痕量（如法医鉴定）样品的检测材料中的含核酸成分，充分释放细胞内核酸，提高提取效率。

为了解决上述技术问题，一方面，本发明实施例提供了一种核酸快速提取装置，包括离心柱，所述离心柱包括两个被分隔形成的独立腔体，所述独立腔体包括第一腔体和第二腔体，所述第一腔体与第二腔体之间设置有将二者分隔成独立腔体的竖直分隔体和水平分隔体；离心柱管壁的局部与竖直分隔体、水平分隔体包围形成第一腔体，而离心柱管壁的剩余部分与竖直分隔体、水平分隔体及离心柱的底部包围形成第二腔体，所述水平分隔体设置有连通第一腔体与第二腔体的出液孔；所述离心柱中还设置有微孔过滤膜和位于微孔过滤膜下方的核酸吸附膜，所述离心柱顶部设置有分别与所述第一腔体和第二腔体连接的开口，所述离心柱底部的内侧设置有该核酸吸附膜；所述离心柱底部设置有具有通孔的装载封盖，该核酸吸附膜离心时承托于装载封盖并卡嵌在所述离心柱子的下端部内侧，所述核酸吸附膜位于所述第二腔体内并介于水平分隔体下方与所述离心柱底部的内侧。

作为本发明的优选方案，本发明的实施例提供的一种核酸快速提取装置进一步包括以下技术特征的部分或全部：

优选地，该微孔过滤膜设置于所述第一腔体的底部内侧或者设置于所述水平分隔体与所述离心柱底部之间。

优选地，所述微孔过滤膜为聚醚砜膜；所述核酸吸附膜为玻璃纤维膜或者硅胶膜。

优选地，所述离心柱的水平横截面为圆形，所述竖直分隔体分割离心柱水平横截面圆形直径的3/4至4/5；所述水平分隔体距离心柱底部内侧的核酸吸附膜2-5mm。

优选地，所述核酸快速提取装置还包括套于所述离心柱外侧并与所述离心柱相匹配的离心管，以及盖合离心柱顶部设置的开口的管盖，所述管盖衔接设置于所述离心管的顶部边缘或者衔接设置于所述离心柱的顶部边缘。

另一方面，本发明实施例还提供了一种基于上述核酸快速提取装置实现的核酸快速提取方法，依次包括如下步骤：

（1）裂解：将待测样品或者附着有待测样品的检测材料放入离心柱第一腔体中，加入150-300ul裂解液，于56-65℃加热裂解10-30min；

（2）结合：静置冷却至室温，向离心柱第一腔体中加入结合液150-300ul，混匀，6000-20000g离心1-2min；

（3）漂洗：向离心柱第一腔体加入300-500ul 漂洗液A，6000-20000g离心1-2min；然后再向离心柱第一腔体加入300-500ul 漂洗液B，6000-20000g离心1-2min；空管20000g离心2-5min;

（4）洗脱：向离心柱第二腔体中加入20-100ul 洗脱液至核酸吸附膜上，室温静置5-10min，20000g离心2min。

其中，所述裂解液中含有如下含量的成分：胍盐0.1-1M，胍盐浓度优选0.2M，胍盐优选盐酸胍、异硫氰酸酸胍的一种或其组合；十二烷基磺酸钠或十二烷基硫酸钠 0.1- 4%，优选1%；Tris 1mM- 20 mM，优选10mM；CaCl2 1-10mM，优选2mM；Triton X-100 0.1-3%，优选1.5%；裂解液pH值7.2-8.0，优选7.5。优选地，在裂解步骤中还可以与裂解液一同添加蛋白酶K 2-20U每次（每人份），优选12U每次（每人份）。

所述结合液中含有如下含量的成分：胍盐1-6M，胍盐浓度优选4M，胍盐优选盐酸胍、异硫氰酸酸胍的一种或其组合；聚合度为6000-20000的聚乙二醇10-40%，聚乙二醇聚合度优选8000，聚乙二醇浓度优选30%；无水乙醇30-80%（v/v），优选50%；Tris 1mM- 20 mM，优选10mM；结合液pH值 6-7.5，优选7.0。

所述漂洗液A中含有如下含量的成分：胍盐0.1-2M，胍盐浓度优选1M，胍盐优选盐酸胍、异硫氰酸酸胍的一种或其组合；EDTA 1-10mM，优选2mM；无水乙醇30-80%（v/v），优选50%；Tris 1mM- 20 mM，优选10mM；漂洗液A的 pH值为 6-7.5，优选7.0。

所述漂洗液B：NaCl0.1-2M，优选0.5M ；Tris 1mM- 20 mM，优选10mM；无水乙醇30-80%（v/v），优选50%；漂洗液B的 pH值为 6-7.5，优选7.0。

所述洗脱液为去离子水或pH8.0的10mM Tris-HCl。

相比于现有技术，本发明的技术方案至少具有如下有益效果：

本发明的核酸快速提取装置，通过将离心柱分隔成两个独立腔体，并在其中一个独立腔体中完成核酸的裂解、结合、漂洗步骤，在另一个独立腔体中完成洗脱步骤，使该核酸快速提取装置用于核酸提取过程中，尤其针对痕量（如法医鉴定）样品的核酸提取过程中，能够有效避免因拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材的吸附和离心管壁的吸附而造成微量核酸物证的损失，提高核酸提取效率；另外，虽然离心柱被分隔成两个独立腔体，但在整个核酸提取过程中，裂解、结合、漂洗、洗脱等步骤在同一个离心柱内进行，没有转管操作，避免了交叉污染的同时，进一步提高核酸提取效率。再则，本发明的核酸快速提取方法结合提取装置结构改进和提取试剂的成分优化而实现的提取步骤，能够有效地裂解各种类型检测材料尤其是针对痕量（如法医鉴定）样品的检测材料中的含核酸成分，充分释放细胞内核酸，提高提取效率。

附图说明

图1是本发明优选实施例提供的核酸快速提取装置的结构示意图。

图2为本发明实施例5针对实施例1和2中样品进行电泳检测的实验结果图；

图3为本发明实施例5针对实施例3和4中样品进行电泳检测的实验结果图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

图1为本发明优选实施例提供的核酸快速提取装置的结构示意图。如图1所示，本发明优选实施例提供的核酸快速提取装置包括离心管10和离心柱20。具体实现时，离心柱20包括两个被分隔形成的独立腔体，独立腔体包括第一腔体21和第二腔体22，第一腔体21与第二腔体22之间设置有将二者分隔成独立腔体的竖直分隔体23和水平分隔体24。离心柱20管壁的局部与竖直分隔体23、水平分隔体24包围形成第一腔体21，而离心柱20管壁的剩余部分与竖直分隔体23、水平分隔体24及离心柱20的底部包围形成第二腔体22。在本发明实施例中，第一腔体21的底部内侧设置有微孔过滤膜26，该微孔过滤膜位于水平分隔体24上方，水平分隔体24设置有连通第二腔体的出液孔25，从而实现离心过程液体的连通，并最终将液体离心至离心柱下方套接收的离心管10中。当然在本发明的其他实施例中，将微孔过滤膜设置于水平分隔体24与离心柱底部24之间，并保证核酸吸附膜位于微孔过滤膜的下方，也能够解决本发明的技术问题，达到相应技术效果。

在本发明优选实施例中，离心柱20顶部设置有分别与第一腔体21和第二腔体22连接的开口30，离心柱底部的内侧设置有核酸吸附膜29。其中，离心柱20底部设置有具有通孔28的装载封盖27，该核酸吸附膜27离心时承托于装载封盖27并卡嵌在离心柱20的下端部内侧，同时，为了在核酸提取步骤中的吸附步骤中有效地吸附在第一腔体21中经过裂解、结合、漂洗而获得的样品中的核酸，核酸吸附膜位于第二腔体22内并介于水平分隔体下方与离心柱底部的内侧，从而高效率的获取得到样品中的核酸。需要说明的是，当本发明的核酸快速提取装置用于痕量（如法医鉴定）样品的核酸提取时，直接将收集痕量样品的拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材直接放置于第一腔体21，经过经典的核酸提取步骤中所采用的裂解、结合、漂洗步骤，使样品中的核酸充分收集从而达到高效率提取的目的，有效避免因拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材的吸附和离心管壁的吸附而造成微量核酸物证的损失，提高核酸提取效率。

另外，关于离心管的使用，本发明主要是通过离心柱的改进从而达到提高核酸提取效率以及避免交叉污染的技术效果，在本发明的其他实施例中，如果仅仅处于上述技术目的，本发明的方案中可以不包含离心管的设置。另外对于离心管的选择也可以参照现有技术选择与本发明技术方案中匹配的各种类型的离心管作为液体收集装置。当然需要说明的是，由于在核酸提取的结合、漂洗、洗脱步骤中均包含离心步骤，在结合、漂洗步骤中离心管可以视情况而定考虑是否更换，而最后的洗脱步骤中，核酸最终通过该步骤收集与离心管中，因此，洗脱步骤中需要更换原先步骤中所用离心管。

从提取效果上来看，核酸吸附膜及微孔过滤膜的选择均非常重要，直接关系到核酸提取的效率以及最终提取的核酸的质量，因此，在本发明优选实施例中微孔过滤膜为聚醚砜膜，而核酸吸附膜为玻璃纤维膜。其中，聚醚砜膜具有物理、化学性能稳定，有很好的相容性，且其孔径，孔隙率高、纳污量大、可反冲和高温消毒的特点，有效地滤除样品中核酸外杂质。而或者玻璃纤维膜具有良好的核酸吸附性能，将样品中的核酸成分充分有效地吸附，保证核酸提取效率。另外，在本发明的其他实施例中，也可以根据具体的需要，在保证核酸提取效率及质量的前提下，选择其他成分的微孔过滤膜或者核酸吸附膜也是完全可行的，例如，选择采用硅胶膜作为核酸吸附膜也是完全可行的。

具体实现时，本发明实施例中采用的离心柱的水平横截面为圆形，竖直分隔体分割离心柱水平横截面圆形直径的3/4至4/5。同时为了保证有效分隔及核酸吸附膜的充分吸附，水平分隔体距离心柱底部内侧的核酸吸附膜2-5mm。

当然，作为优化方案，核酸快速提取装置还包括盖合离心柱顶部设置的开口30的管盖31。在本发明优选实施例中，管盖衔接设置于离心柱的顶部边缘在加入样品或者相应缓冲液后都需要进行闭管操作，以避免交叉污染。当然，在本发明的其他实施例中，也可以将管盖衔接设置于离心管的顶部边缘，在离心柱放入离心管时，也能够通过衔接设置于离心管的顶部边缘的管盖合离心柱顶部的开口30。

所述洗脱液为去离子水或pH8.0的10mM Tris-HCl。

结合上述实现方式，本发明还提供了如下实施例对本发明的核酸快速提取方法进行进一步详细说明：

实施例1

本发明的核酸快速提取装置拭子检材中的全血DNA，包括以下步骤：

（1）准备模拟拭子检材

将无菌Omni拭子放入本发明离心柱第一腔体21中，按压杆的末端，弹出拭子，向拭子上加入50ul新鲜EDTA抗凝小鼠全血，作为模拟拭子检材。

（2）裂解

向拭子上加入200ul 裂解液（Lysis buffer）和20ul蛋白酶K，盖上管盖，65℃裂解20min。

（3）结合

向拭子上加入200ul结合液（binding buffer），混匀后，20000g离心2min。

（4）漂洗

向离心柱第一腔体中加入500ul漂洗液A（wash buffer A），盖好管盖，12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中，加入500ul 漂洗液B(wash buffer B)，盖好管盖，再次12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中，20000g离心2min。

（5）离心柱转移至新的离心管中，从离心柱的第二腔体22中往核酸吸附膜上加入50ul 洗脱液(Elution buffer)，室温放置5min，20000g离心1min，丢弃离心柱，离心管中的DNA溶液用于检测或-20℃储存。

实施例2

常规离心柱法提取拭子检材中的全血DNA，包括以下步骤：

（1）准备模拟拭子检材

将无菌Omni拭子放入1.5ml离心管中，按压杆的末端，弹出拭子，向拭子上加入50ul新鲜EDTA抗凝小鼠全血，作为模拟拭子检材。

（2）裂解

向拭子上加入200ul Lysis buffer和20ul蛋白酶K，盖上管盖，65℃裂解20min。

（3）结合

向拭子上加入200ul binding buffer，混匀后，12000g离心1min，将上清液转移至常规离心柱中，12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中。

（4）漂洗

向离心柱中加入500ul wash buffer A，盖好管盖，12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中，加入500ul wash buffer B，盖好管盖，再次12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中，20000g离心2min。

（5）离心柱转移至新的离心管中，向离心柱正中央加入50ul Elution buffer，室温放置5min，20000g离心1min，丢弃离心柱，离心管中的DNA溶液用于检测或-20℃储存。

实施例3：

本发明的核酸快速提取装置提取血斑检材中的DNA，包括以下步骤：

（1）准备模拟血斑检材

切下0.5 cm²牛仔织物，向牛仔织物上加入50ul新鲜EDTA抗凝小鼠全血，室温放置1小时，使其自然干燥，作为模拟血斑检材。然后将模拟血斑检材剪成小块，放入本离心柱第一腔体21中。

（2）裂解

向模拟血斑检材上加入200ul Lysis buffer和20ul蛋白酶K，盖上管盖，65℃裂解20min。

（3）结合

向模拟血斑上加入200ul binding buffer，混匀后，20000g离心2min。

（4）漂洗

向离心柱的第一腔体21中加入500ul wash buffer A，盖好管盖，12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中，加入500ul wash buffer B，盖好管盖，再次12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中，20000g离心2min。

（5）离心柱转移至新的离心管中，从离心柱的第二腔中往核酸吸附膜上加入50ul Elution buffer，室温放置5min，20000g离心1min，丢弃离心柱，离心管中的DNA溶液用于检测或-20℃储存。

实施例4：

常规离心柱法提取血斑检材中的DNA，包括以下步骤：

（1）准备模拟血斑检材

切下0.5 cm² 牛仔织物，向牛仔织物上加入50ul新鲜EDTA抗凝小鼠全血，室温放置1小时，使其自然干燥，作为模拟血斑检材。然后将模拟血斑检材剪成小块，放入1.5ml离心管中。

（2）裂解

向模拟血斑上加入200ul Lysis buffer和20ul蛋白酶K，盖上管盖，65℃裂解20min。

（3）结合

向模拟血斑上加入200ul binding buffer，混匀后，12000g离心1min，将上清液转移至常规离心柱中，12000g离心1min，将离心柱转移到新的收集管中。

（4）漂洗

上述实施例1-4中所用的试剂成分如下：

裂解液中含有如下含量的成分：异硫氰酸酸胍0.2M，十二烷基磺酸钠1%；Tris 10mM；CaCl₂2mM；Triton X-100 1.5%；裂解液pH值7.5。

结合液中含有如下含量的成分：盐酸胍4M，聚合度为8000的聚乙二醇30%；无水乙醇50%（v/v），Tris 10mM；结合液pH 7.0。

漂洗液A中含有如下含量的成分：异硫氰酸酸胍1M， EDTA 2mM；无水乙醇50%（v/v），Tris 10mM；漂洗液A pH 7.0。

漂洗液B：NaCl 0.5M ，Tris 10mM，无水乙醇50%（v/v），漂洗液B的 pH值7.0。

洗脱液为去离子水。

实施5

电泳检测实施1-4中提取的DNA

图1 拭子检材中提取的DNA琼脂糖凝胶电泳图。10ul DNA样品与2ul 6 loading buffer混合液于1%琼脂糖凝胶，1TAE buffer，4V/cm条件下电泳，然后使用4SYBR GreenI染色20min，于凝胶成像系统检测。1：本发明离心柱法提取的拭子全血DNA；2：常规离心柱法提取的拭子全血DNA；M：DL2000 DNA marker。

图2 血斑检材中提取的DNA琼脂糖凝胶电泳图。10ul DNA样品与2ul 6loading buffer混合液于1%琼脂糖凝胶，1TAE buffer，4V/cm条件下电泳，然后使用4SYBR GreenI染色20min，于凝胶成像系统检测。M：DL2000 DNA marker；1：本发明离心柱法提取的血斑DNA；2：常规离心柱法提取的血斑DNA。

从本实施例的实验结果可以看出，采用本发明的核酸快速提取装置及方法，能够显著地提高核酸提取效率，因而本发明的装置和方法核酸提取过程中，尤其针对痕量（如法医鉴定）样品的核酸提取过程中，能够有效避免因拭子、棉签、精斑、血斑、烟蒂等检材的吸附和离心管壁的吸附而造成微量核酸物证的损失，提高核酸提取效率，同时减少交叉污染。

以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。

Claims

1.一种核酸快速提取装置，包括离心柱，其特征在于：所述离心柱包括两个被分隔形成的独立腔体，所述独立腔体包括第一腔体和第二腔体，所述第一腔体与第二腔体之间设置有将二者分隔成独立腔体的竖直分隔体和水平分隔体；离心柱管壁的局部与竖直分隔体、水平分隔体包围形成第一腔体，而离心柱管壁的剩余部分与竖直分隔体、水平分隔体及离心柱的底部包围形成第二腔体，所述水平分隔体设置有连通第一腔体与第二腔体的出液孔；所述离心柱中还设置有微孔过滤膜和位于微孔过滤膜下方的核酸吸附膜，所述离心柱顶部设置有分别与所述第一腔体和第二腔体连接的开口，所述离心柱底部的内侧设置有该核酸吸附膜；所述离心柱底部设置有具有通孔的装载封盖，该核酸吸附膜离心时承托于装载封盖并卡嵌在所述离心柱子的下端部内侧，所述核酸吸附膜位于所述第二腔体内并介于水平分隔体下方与所述离心柱底部的内侧。

2.如权利要求1所述的核酸快速提取装置，其特征在于：该微孔过滤膜设置于所述第一腔体的底部内侧或者设置于所述水平分隔体与所述离心柱底部之间。

3.如权利要求1所述的核酸快速提取装置，其特征在于：所述微孔过滤膜为聚醚砜膜；所述核酸吸附膜为玻璃纤维膜或者硅胶膜。

4.如权利要求1所述的核酸快速提取装置，其特征在于：所述离心柱的水平横截面为圆形，所述竖直分隔体分割离心柱水平横截面圆形直径的3/4至4/5；所述水平分隔体距离心柱底部内侧的核酸吸附膜2-5mm。

5.如权利要求1所述的核酸快速提取装置，其特征在于：所述核酸快速提取装置还包括套于所述离心柱外侧并与所述离心柱相匹配的离心管，以及盖合离心柱顶部设置的开口的管盖，所述管盖衔接设置于所述离心管的顶部边缘或者衔接设置于所述离心柱的顶部边缘。

6.一种基于如权利要求1-5中任意一项所述的核酸快速提取装置实现的核酸快速提取方法，其特征在于，依次包括如下步骤：

7.如权利要求6所述的核酸快速提取方法，其特征在于，所述裂解液中含有如下含量的成分：胍盐0.1-1M，十二烷基磺酸钠或十二烷基硫酸钠 0.1- 4%，Tris 1mM- 20 mM，CaCl2 1-10mM，Triton X-100 0.1-3%；裂解液pH值7.2-8.0。

8.如权利要求6所述的核酸快速提取方法，其特征在于，所述结合液中含有如下含量的成分：胍盐1-6M，聚合度为6000-20000的聚乙二醇10-40%，无水乙醇体积百分比浓度30-80%，Tris 1mM- 20 mM；结合液pH值 6-7.5。

9.如权利要求6所述的核酸快速提取方法，其特征在于：

所述漂洗液A中含有如下含量的成分：胍盐0.1-2M，EDTA 1-10mM，无水乙醇体积百分比浓度30-80%，Tris 1mM- 20 mM；漂洗液A的 pH值为 6-7.5；

所述漂洗液B：NaCl0.1-2M，Tris 1mM- 20 mM，无水乙醇体积百分比浓度30-80%，漂洗液B的 pH值为 6-7.5。

10.如权利要求6所述的核酸快速提取方法，其特征在于，所述洗脱液为去离子水或pH8.0的10mM Tris-HCl。