CN104688679A - 促卵泡激素的液体制剂 - Google Patents

促卵泡激素的液体制剂 Download PDF

Info

Publication number
CN104688679A
CN104688679A CN201510082820.4A CN201510082820A CN104688679A CN 104688679 A CN104688679 A CN 104688679A CN 201510082820 A CN201510082820 A CN 201510082820A CN 104688679 A CN104688679 A CN 104688679A
Authority
CN
China
Prior art keywords
composition
fsh
liquid medicine
preparation
concentration
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201510082820.4A
Other languages
English (en)
Inventor
S·斯托尔曾伯格
E·科勒
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Thai Max Headquarters Uk Ltd
Original Assignee
Ratiopharm GmbH
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ratiopharm GmbH filed Critical Ratiopharm GmbH
Publication of CN104688679A publication Critical patent/CN104688679A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/186—Quaternary ammonium compounds, e.g. benzalkonium chloride or cetrimide
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/24—Follicle-stimulating hormone [FSH]; Chorionic gonadotropins, e.g. HCG; Luteinising hormone [LH]; Thyroid-stimulating hormone [TSH]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0014—Skin, i.e. galenical aspects of topical compositions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medical Preparation Storing Or Oral Administration Devices (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及促卵泡激素的液体制剂。具体而言，本发明涉及包含促卵泡激素多肽和作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇的液体药物组合物。组合物还任选地包含一种或多种其他的可药用赋形剂。在一个实施方案中，组合物含有作为抗氧化剂的甲硫氨酸。组合物表现出良好的贮藏稳定性，并且特别用于其中促卵泡激素制剂被视为有效疗法的病症和医学适应症的预防和治疗。

Description

促卵泡激素的液体制剂
本申请为2009年2月9日提交的、发明名称为“促卵泡激素的液体制剂”的PCT申请PCT/EP2009/051451的分案申请，所述PCT申请进入中国国家阶段的日期为2010年8月4日，申请号为200980104085.5。
技术领域
本发明涉及包含促卵泡激素多肽和作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇的液体药物组合物。组合物还任选地包含一种或多种其他的可药用赋形剂。在一个实施方案中，组合物含有作为抗氧化剂的甲硫氨酸。组合物表现出良好的储藏稳定性，并且特别用于其中促卵泡激素制剂被视为有效疗法的病症和医学适应症的预防和治疗。
背景技术
促卵泡激素(FSH)由垂体前叶的促性腺激素细胞产生并释放到循环系统中。FSH与促黄体激素(LH)一同控制女性的卵母细胞成熟和男性的精子发生。FSH和LH都属于由2个非共价连接的由不同基因编码的α-和β-链组成的异源二聚体糖蛋白家族。α-和β-链都是糖基化的。α-亚基由92个氨基酸残基组成，而β-亚基由111个氨基酸残基组成，它们各自都有2个潜在的连接天冬酰胺的糖基化位点。
人FSH用于治疗不排卵的女性、用于刺激多卵泡发生(超数排卵)和用于例如IVF、ICSI、GIFT或CIFT的辅助受孕的制剂。此外，人FSH用于刺激FSH生成量低或不产生FSH的女性的卵泡成熟和用于刺激患有先天的或后天的低促性腺素性功能减退症的男性的精子发生。
直到20世纪80年代，人FSH的主要来源是从孕龄妇女的尿液分离出来的尿源FSH。在20世纪90年代引入了高纯度的尿源FSH的进一步纯化的形式，并且最终从1998年起开发出重组FSH并得到广泛应用。随着重组DNA技术的出现，在被编码α-和β-链的核酸序列转染的细胞培养物中生产人FSH成为可能。在例如WO 88/10270、WO 86/04589和EP 0735139中已经公开了编码α-和β-链的DNA序列以及生产重组FSH的方法。
目前，在德国市场上有两种商品化的重组人FSH产品，和两者都是通过在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中表达编码人野生型α-和β-链的DNA序列来生产的。
通常，蛋白质的半衰期非常短，并且当蛋白质暴露于各种因素(例如不适宜蛋白质活性表达的温度、水、空气界面、高压、物理/机械胁迫、有机溶剂和微生物污染)时，其发生变性，例如单体的聚集、二聚体的解离、和吸附在容器表面上。
因此，变性蛋白丧失了内在的物理化学性质和生理活性作用。蛋白质的变性是不可逆的，因此，蛋白质一旦变性就几乎不能恢复其天然的性质而回到初始状态。
具体地讲，具有由2个不同亚基组成的异源二聚体结构并且每次以低于几百微克的痕量进行给药的蛋白质(例如人FSH)遭受了与相对高的蛋白损失有关的问题，包括因在水溶液中二聚体离解和蛋白质吸附在容器内表面上而引起的蛋白损失。离解的蛋白质丧失了其自身的生理活性，并且离解的单体非常易于聚集。而且，吸附在容器内表面上的蛋白质也非常容易通过变性过程聚集。当将其向人体给药时，如此变性的蛋白质可以成为形成对抗体内天然存在的蛋白质的抗体的诱因。
某些蛋白药物制剂已经通过冷冻干燥(冻干)克服了稳定性问题。虽然这些冻干制剂足够稳定以致能保证足够的半衰期，但是其具有在给药前必须进行重构(reconstitution)的缺点。因此，患者在使用前必须在溶剂(例如注射用水)中重构干燥的糖蛋白，这对于患者而言是缺点和不方便。此外，必须与FSH的冻干制剂一起提供溶剂。对于需要有规律地注射FSH的患者，例如为了诱导排卵而接受每日剂量的重组人FSH的患者，促性腺素制剂的易于处理、给药和注射是重要的。冻干的促性腺素制剂的重构要谨慎和小心，并且如果可能的话应避免重构。如果能够生产这些糖蛋白并将其分装为稳定的溶液，使患者无需重构就可直接注射药物，这将为促性腺素的使用提供便利。此外，冻干过程是费钱和耗时的加工步骤，如果在制备促性腺素制剂时能够避免该步骤，这将是有利的。
因此，需要即时可用(ready-for-use)的注射制剂，该制剂具有足够的稳定性从而保证合理的贮藏期。
作为应对这些限制的可选择的措施，可以通过向溶液状态的蛋白质加入稳定剂来改善蛋白质的稳定性。有用的蛋白质稳定剂的实例有已知的表面活性剂、蛋白质(例如白蛋白)、多糖、氨基酸、聚合物、盐等。然而，考虑到各种蛋白质的独特的物理化学性质，应该选择并使用最合适的稳定剂。而且，由于不同稳定剂之间的竞争作用和不良反应，不同稳定剂的联合使用可能带来预想的不良副作用。此外，由于不同的稳定剂具有特定的对稳定相应蛋白质有利的浓度范围，存在于溶液中的蛋白质的成功稳定还需要认真关注和很多努力。
已经将FSH配制成在管形瓶、笔胆(carpoule)或安瓿中的单剂量和多剂量的液体形式。单剂量形式在使用之前的贮存中必须保持稳定和有效。多剂量形式不仅在使用之前的贮存中必须保持稳定和有效，而且在安瓿开封之后的多剂量使用方案的给药期间也必须保持稳定、有效和相对无菌。出于该原因，多剂量形式经常含有抑菌剂。
一种人重组FSH的即时可用的液体制剂，可用作由注射笔给药的注射用溶液。溶液含有作为防腐剂的间甲酚(ROTE LISTE 2007，No.50004)。也可用作即时可用的注射用液体制剂，其含有作为防腐剂的苯甲醇(ROTE LISTE 2007，No.50010)。
含有防腐剂的FSH液体制剂也已记载于专利文献中。国际专利申请WO-A1-00/04913记载了包含防腐剂的FSH和FSH变体的制剂，所述的防腐剂选自苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苯甲醇、对羟基苯甲酸烷基酯、苯扎氯铵、苄索氯铵、脱氢醋酸钠和硫柳汞。尽管这些防腐剂的使用以一般的方式被提及，但并未公开重组人FSH液体制剂中的防腐剂的特定的组合或混合物。
此外，国际专利申请WO 2004/037607涉及人FSH的水性制剂，其包含甘氨酸、甲硫氨酸、非离子型表面活性剂和磷酸盐缓冲液作为稳定剂。另外，制剂可以任选地包括防腐剂，提及的有苯甲醇、甲酚、对羟基苯甲酸酯及其混合物。
国际专利申请WO 2004/087213A1记载了FSH的液体药物组合物，其包含选自F77、F87、F88和F68的表面活性剂。组合物可以进一步包含选自苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、苯甲醇、对羟基苯甲酸烷基酯、苯扎氯铵、苄索氯铵、脱氢醋酸钠和硫柳汞的抑菌剂。未提及抑菌剂的混合物或组合。
因此，虽然需要提供含有防腐剂的促性腺素制剂，以便制剂适合于多次给药，但生产含有人蛋白的防腐的药物制剂已经证明是困难的。已经发现，当使用防腐剂时，如果药物制剂贮存较长时间，其引起稳定性问题。在该过程中，人蛋白失活并且形成团块，这可能是造成所观察到的对注射溶液不耐受的原因。在活性的人蛋白成分存在的情况下，不能用通常的方法生产用于输液或注射的防腐的药物制剂，这是因为在121℃的高压灭菌器中的灭菌条件下活性物质被灭活并且其结构被破坏。也已知药剂学中通常所用的防腐剂与有活性的人蛋白成分发生反应从而使之灭活。所用的防腐剂的类型对于耐受性有重要作用。所有防腐剂都具有或高或低的过敏率。因此，为了实现良好的防腐，而且使与某种人糖蛋白组合的特定的防腐剂的缺点最小化，选择人蛋白制剂中的防腐剂是关键。
因此，仍然迫切需要开发新的人重组FSH液体制剂，其由防腐剂进行防腐并且能够在延长的时间内稳定维持人重组FSH的活性。
发明内容
根据本发明，该问题和其他的问题能够通过主权利要求的特征解决。
有利的实施方案在从属权利要求中进行定义。
令人惊讶地，已经发现在包含作为活性剂的FSH或其变体和作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇的液体药物组合物中配制重组人FSH提供了良好的组合物稳定性，以致其能够用于单剂量和多剂量用途。本发明的组合物不需冷藏就能在延长的时间内贮存，没有显著的活性损失并且没有显著的降解。推测作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇的组合特别有利于与糖激素FSH组合，这是因为其提供了更好的防腐效果和确保与FHS之间的不利的相互作用保持最低水平。
除非另有说明，以下定义是用来对用于描述本发明的各种术语的含义和范围进行举例说明和定义。
术语“FSH”是指作为全长成熟蛋白的促卵泡激素多肽，其非限制性地包括人FSH或“hFSH”，不论其是重组生产的还是从人源分离得到的(例如绝经后妇女的尿液)。技术人员根据科学文献和专利文献(参见例如WO 2004/087213)可以获知该人糖蛋白的蛋白质序列和人FSHβ-亚基的蛋白质序列。
如本说明书所附的，人FSH的α-链的氨基酸序列记载于SEQ ID No.1中，人FSH的β-链的氨基酸序列记载于SEQ ID No.2中。这些氨基酸序列对应于分别以登录号J 00152记载于EMBL数据库中和以登录号NM_000510记载于NCBI数据库中的人FSH的α-链和β-链的野生型氨基酸序列。
编码人FSH的野生型核酸序列在SEQ ID No.3(＝α-链)和No.4(＝β-链)中显示。
重组FSH可以按照如在人类中天然发现的野生型核酸序列编码，或者其可以被改变的核酸序列编码，所述的改变的核酸序列表达产生具有野生型氨基酸序列的FSH，即，与在人类中天然发现的野生型蛋白质序列相同。
例如，编码人FSH的核酸序列能够以这种方式发生改变：为了增加在这些宿主细胞中的重组FSH的表达水平和产率，使编码人FSH的α-和β-链的核酸序列中的一者或两者调整为在中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中选择使用的密码子。
编码人FSH并且按照CHO细胞中的密码子选择方面进行改良的核酸序列的实例记载于国际专利申请WO 2009/000913中。编码人FSH的β-链的改良核酸序列是记载于SEQ ID No.5中的核酸序列的编码区(在SEQ ID No.5中，编码区起始于核苷酸56并且延伸到核苷酸442)，编码人FSH的α-链的改良核酸序列是记载于SEQ ID No.6中的核酸序列的编码区(在SEQ ID No.6中，编码区起始于核苷酸19并且延伸到核苷酸366)。含有重组核苷酸分子(其包括编码人FSH的β-链的第一种改良的核酸序列和编码人FSH的α-链的第二种改良的核酸序列)的CHO细胞系以保藏号DSM ACC2833于2007年3月28日存放于在Braunschweig的DSMZ。
在优选的实施方案中，本发明的FSH液体制剂含有通过由FSH核酸序列的重组基因表达得到的重组人野生型FSH，就人FSH的β-链和FSH的α-链而言，所述的FSH核酸序列按照CHO细胞中的密码子选择进行了改良。在另一个优选的实施方案中，通过WO 2009/000913所公开的FSH核酸序列表达得到重组FSH。
表述“FSH变体”是指包括与人FSH在氨基酸序列、糖基化类型或亚基间连接上有所不同，但表现出FSH活性的那些分子。实例包括CTP-FSH，长效的改良的重组FSH，由野生型α-亚基和杂合的β-亚基组成，其中hCG的羧端肽已经与FSH的β-亚基的C末端融合，如LaPolt等人在内分泌学(Endocrinology),131,2514-2520(1992)中或者Klein等人在Human Reprod.,18,50-56(2003)中所述的。也包括单链CTP-FSH，由Klein等人在Fertility&Sterility,77,1248-1255(2002)中所述的单链分子。FSH变体的其他的实例包括具有引入α-和/或β-亚基的另外的糖基化位点的FSH分子，如WO 01/58493中所公开的，和具有亚基间S-S键的FSH分子，如WO 98/58957中所公开的。FSH变体的其他实例在WO 2004/087213中公开，其特征在于β-亚基的羧基端缺失。FSH变体的其他实例包括因蛋白质的氨基酸序列变化(其中该变化引入了另外的糖基化位点或者缺失天然存在的糖基化位点)而与野生型FSH相比具有改变的糖基化程度的FSH分子。
进一步地，本发明的FSH或FSH变体可以是已经被化学部分修饰的FSH分子。例如，这类FSH偶联物可包含聚亚烷基二醇(例如PEG)、羟烷基淀粉(例如HES)或其他聚合物部分。
FSH异源二聚体或FSH变体异源二聚体能够用任意合适的方法来生产，例如根据具体情况通过重组技术生产、从天然来源分离或纯化、或者通过化学合成，或者它们的任意组合。
术语“重组”的使用是指使用重组DNA技术(参见例如WO 85/01958)生产的FSH或FSH变体的制剂。有若干种的α-和β-亚基已知道FSH的基因组和cDNA克隆的序列。用重组技术生产重组FSH或FSH变体的各种方法记载于现有技术中，参见例如欧洲专利申请EP 0 711 894和欧洲专利申请EP 0 487 512。
本发明所用的FSH或FSH变体不但可以用重组方法(包括从哺乳动物细胞、例如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞)来生产，而且可以从其他生物来源(例如从尿液来源)纯化得到。现有技术中公开了可用的方法。
重组人FSH可以从宿主细胞培养上清液通过1个或多个纯化步骤纯化得到。合适的纯化方法是技术人员已知的并且包括离子交换色谱法、疏水作用色谱法、羟磷灰石色谱法、亲和色谱法和凝胶过滤。纯化重组人FSH的方法在例如WO 00/63248、WO 2006/051070和WO 2005/063811中公开。
在本发明优选的实施方案中，FSH或FSH变体分别对应于人FSH或源自人FSH。在本发明的优选的实施方案中，FSH或FSH变体已经用重组技术生产。
更优选地，FSH是已经重组生产的人FSH，特别优选在用载体或包含编码FSH的人糖蛋白α-亚基和β-亚基(由SEQ ID No.3和4(＝野生型核酸序列)或者由SEQ ID No.5和6(＝密码子优化的核酸序列)编码)的DNA的载体转染的中国仓鼠卵巢细胞中生产。编码α-和β-亚基的DNA可以存在于相同或不同的载体上。
重组FSH与其来自尿液的对应物相比具有若干优点。使用重组细胞的培养和分离技术保证批次间的一致性。相反地，不同批次的尿液的FSH在亚基的纯度、糖基化类型、唾液酸化作用和氧化方面差别巨大。由于重组FSH具有更好的批次间一致性和纯度，该激素可使用例如等电聚焦法(IEF)的技术容易地进行定性和定量。能够容易地对重组FSH进行定性和定量允许按激素重量填充管形瓶，而不是按生物测定来填充。
术语“FSH活性”是指FSH制剂引发与FSH相关的生物响应的能力，例如女性患者体内的在Steelman-Pohley检验(Steelman等人(1953)内分泌学(Endocrinology)53,604-616)中的卵巢重量增加或者卵泡生长。通过超声能够评估女性患者体内的卵泡生长，例如根据在刺激第8天平均直径为约16mm的卵泡的数量。用针对FSH的可接受的标准评估生物活性。
术语“水性稀释剂”是指含水的液体溶剂。水性溶剂系统可以仅由水组成，或者可以由水加上1种或多种可混溶的溶剂组成，并且可以含有溶解的溶质，例如糖、缓冲剂、盐或其他赋形剂。更常用的非水溶剂是短链有机醇(例如甲醇、乙醇、丙醇)、短链酮(例如丙酮)和多元醇(例如甘油)。在本发明的优选的实施方案中，水性稀释剂是水，即，本发明的即时可用的液体制剂是水性制剂。
“张力调节剂”或“等渗剂”是身体上耐受的并且为制剂赋予适当的张力从而防止穿过与制剂接触的细胞膜的水的净流量。合适的等渗剂非限制性地包括甘油、氨基酸或蛋白质(例如甘氨酸或白蛋白)、盐(例如氯化钠)、糖(例如右旋糖、蔗糖、海藻糖和乳糖)和糖醇(例如甘露醇和山梨醇)。
术语“抑菌的”或“抑菌剂”或“防腐剂”是指加入到制剂中的用作抗菌剂的成分或物质。本发明的含FSH或FSH变体的防腐制剂优选符合对于防腐效果的法律或法规，从而成为在商业上可行的多用途产品，优选用于人。
用于本发明的制剂的抑菌剂是苯扎氯铵和苯甲醇的组合。虽然组合物中可能包括其他防腐剂(即，除了苯扎氯铵和苯甲醇之外)，例如苯酚、间甲酚、对甲酚、邻甲酚、氯甲酚、对羟基苯甲酸烷基酯(甲基、乙基、丙基、丁基等)、苄索氯铵、脱氢醋酸钠或硫柳汞，但优选仅有苯扎氯铵和苯甲醇作为防腐剂存在。
术语“缓冲剂”或“生理上可接受的缓冲剂”是指制剂中已知安全的药用或兽医用的并且具有维持或控制制剂的pH在制剂所需的pH范围内的作用的化合物溶液。用于控制pH在适度酸性的pH至适度碱性的pH的可接受的缓冲剂非限制性地包括诸如磷酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、精氨酸、三羟甲基氨基甲烷和组氨酸的化合物。优选的缓冲剂是磷酸盐缓冲剂。
术语“磷酸盐缓冲剂”是指调整到需要的pH的含有磷酸或其盐的溶液。通常，磷酸盐缓冲剂是由磷酸或磷酸的盐(其非限制性地包括钠盐和钾盐)制成的。一些磷酸盐是本领域已知的，例如酸的钠和钾一价、二价和三价盐。磷酸的盐也已知以存在的盐的水合物存在。磷酸盐缓冲剂可以覆盖例如约pH4至约pH10的pH范围，优选的范围是约pH 5至约pH 9，最优选的pH范围是约6.0至约8.0，最优选是pH 7.0或约pH 7.0。在优选的实施方案中，缓冲系统仅由磷酸盐缓冲剂组成，即，制剂中除了磷酸盐之外不存在其他缓冲剂。
术语“管形瓶”宽泛地指适合于以液体形式在无菌状态保存FSH的容器。本文所用的管形瓶的实例包括安瓿、药筒、泡罩包装或其他适合于通过注射器、泵(包括渗透泵)、导管、透皮贴剂、肺或跨粘膜喷雾剂向患者递送FSH的贮库。适合于包装胃肠外、肺、跨粘膜或经皮给药的产品的管形瓶是本领域熟知和公认的。
术语“稳定性”是指本发明的制剂中的FSH的物理、化学和构象的稳定性(包括生物活性的保持)。蛋白制剂的不稳定性可能由蛋白质分子的化学降解或聚集从而形成更高数量级的聚合物引起，由异源二聚体离解成单体、去糖基化、糖基化修饰、氧化(特别是α-亚基的氧化)或任何其他降低本发明所包括的FSH多肽的至少1种生物活性的结构变化导致。
“稳定的”溶液或制剂或药物组合物是指其中蛋白质的降解程度、修饰、聚集、生物活性丧失等受到可接受地控制，并且不会随着时间而发生不可接受地增加。优选地，制剂保留至少80％或约80％的FSH活性并且在约2-8℃的温度下保持至少6个月时间。通过使用Steelman-Pohley卵巢增重生物检定法能够测量FSH活性。
术语“治疗”是指对需要以刺激卵巢或睾丸或者由FSH调节的任何其他生理反应为目的而施用FSH的患者进行给药、随访、管理和/或照料。因此，治疗可以非限制性地包括为了诱导或改善精子质量、刺激男性体内的睾酮释放或女性体内的卵泡发育或诱导排卵而施用FSH。
用语“多剂量给药”或“多剂量使用”是指包括用于1次以上注射(例如2、3、4、5、6或更多次注射)的FSH制剂的单个管形瓶、安瓿、笔胆或药筒的使用。优选在至少约12个小时、24个小时、48个小时等的时间内、优选多达约12天的时间内进行注射。可以间隔时间进行注射，例如间隔6、12、24、48或72小时。
发明人已经发现通过将FSH或FSH变体与作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇二者进行配制，得到了表现出高的蛋白稳定性同时具有良好防腐作用的制剂。而且，人们认为本发明的FSH制剂组合物与本领域中已知的FSH制剂相比表现出改进的局部耐受性(例如在注射点没有刺激)。
苯扎氯铵优选以足以在需要的贮藏期(例如6至12至24个月)内维持FSH稳定性并且足以防止细菌生长的浓度存在于制剂中。
优选地，本发明的液体制剂中的苯扎氯铵的浓度为约0.005mg/ml至约0.05mg/ml、更优选为约0.01mg/ml至约0.04mg/ml、最优选为0.02mg/ml或约0.02mg/ml(0.002％(w/v))。
苯甲醇优选以足以在需要的贮藏期(例如6至12至24个月)内维持FSH稳定性并且足以防止细菌生长的浓度存在于制剂中。
优选地，本发明的液体制剂中的苯甲醇的浓度为约0.5mg/ml至约20.0mg/ml、更优选为约1.0mg/ml至约15.0mg/ml、更特别优选为约5.0mg/ml至约12.0mg/ml、最优选为10.0mg/ml或约10.0mg/ml(1.0％(w/v))。
本发明的液体制剂之中的促卵泡激素(FSH)的浓度优选为约150IU/ml至约2,000IU/ml、更优选为约300IU/ml至约1,500IU/ml、更特别优选为约450IU/ml至约750IU/ml、最优选为600IU/ml或约600IU/ml。
重组FSH的体内生物比活性通常在约8,000IU FSH/mg蛋白质至约16,000IU FSH/mg蛋白质的范围。例如，可从商业上购买到的产品Puregon(来自Organon)中的重组人FSH具有约10,000IE/mg蛋白质的生物比活性，而对于来自Serono的Gonal-f，重组人FSH的生物活性为约13,600IE/mg蛋白质。
通过与FSH和其他促性腺素相关的已知方法可以测定FSH活性。这些方法包括例如酶免疫测定法(EIA)或报道基因测定法。通常用欧洲药典第5版中所述的源自尿液的FSH的生物检定法来测定生物活性。在这一过程中，通过将FSH增大用绒促性素处理的未成熟大鼠的卵巢的效果与标准制剂的同样效果相比较来评价生物活性。
本发明的液体药物组合物中的FSH或FSH变体的浓度通常在10至200μg/ml的范围。如果组合物是用于多用途给药(例如通过使用注射笔)，FSH或FSH变体的可用浓度将在30至150μg/ml的范围、优选在40至100μg/ml的范围。
一般而言，FSH浓度取决于用途(单剂量或多剂量)、给药方式、给药工具和FSH或FSH变体的生物活性。
优选地，FSH或FSH变体是药物组合物中唯一存在的药物活性剂，虽然可能包括其他的促性腺激素(例如LH)。
为了防止FSH或FSH变体吸附到管形瓶、安瓿、笔胆、药筒或注射器的表面上，本发明的药物组合物可以进一步包含表面活性剂，优选非离子表面活性剂。在此，非离子表面活性剂降低蛋白质溶液的表面张力，从而防止蛋白质吸附或聚集在疏水表面上。能够用于本发明的非离子表面活性剂的优选的实例可以包括基于聚山梨醇酯的非离子表面活性剂和基于泊洛沙姆的非离子表面活性剂。这些非离子表面活性剂可以单独或者以其任意组合使用。基于聚山梨醇酯的非离子表面活性剂是特别优选的。基于聚山梨醇酯的非离子表面活性剂的具体实例包括聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯40、聚山梨醇酯60和聚山梨醇酯80。聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80是更特别优选的，聚山梨醇酯20是最优选的。聚山梨醇酯20具有相对低的临界胶束浓度。因此，聚山梨醇酯20不仅在即使低浓度下减少或防止蛋白质的表面吸附，而且抑制蛋白质的化学降解。在本发明的液体组合物中使用高浓度的非离子表面活性剂是不合适的。这是因为使用高浓度的非离子表面活性剂导致干扰效应，因此当使用如紫外光谱或等电聚焦的分析方法进行蛋白质的浓度测定或稳定性评价时，很难精确地评价蛋白质的稳定性。因此，本发明的水性制剂含有浓度低于1.0mg/ml和更优选0.05至0.5mg/ml的非离子表面活性剂。
在优选的实施方案中，聚山梨醇酯20是制剂中唯一存在的表面活性剂。
优选地，本发明的FSH制剂的pH在约6.0和约8.0之间、更优选约6.5至约7.5、包括约pH 6.8、pH 7.0、pH 7.2和pH 7.4。优选的缓冲剂是磷酸盐，优选的反荷离子是钠或钾离子。
在总溶液中缓冲剂浓度能够在5mM、10mM、50mM、100mM、150mM、200mM、250mM和500mM之间变化。优选地，缓冲剂的浓度是50mM或约50mM。具有pH 7.0的50mM的磷酸盐缓冲剂是特别优选的。
能够通过加入适量的合适酸或碱来调节制剂的pH。在一个实施方案中，用NaOH调节液体药物组合物的pH。
优选地，本发明的制剂含有抗氧化剂，例如甲硫氨酸、亚硫酸氢钠、乙二胺四乙酸(EDTA)的盐、丁羟甲苯(BHT)和丁羟茴醚(BAH)。最优选甲硫氨酸。抗氧化剂防止FSH(特别是α-亚基)的氧化。
液体药物组合物中的甲硫氨酸的浓度优选是约0.1至约1.0mg/ml、更优选约0.2至0.8mg/ml、最优选是0.5mg/ml或约0.5mg/ml。
在优选的实施方案中，甲硫氨酸是本发明的制剂中唯一存在的抗氧化剂。
优选地，本发明的制剂含有作为稳定剂和张力调节剂的单糖或二糖或者糖醇，例如蔗糖、右旋糖、乳糖、山梨醇和/或甘油。最优选的是糖醇，特别优选甘露醇。
糖或糖醇的浓度优选为约1.0至10mg/ml、最优选的浓度为5.0mg/ml或约5.0mg/ml。在一个实施方案中，本发明的组合物中所存在的甘露醇的量为5.0mg/ml
在优选的实施方案中，甘露醇是本发明的制剂中唯一存在的张力调节剂。
在优选的实施方案中，本发明的制剂不含任何甘氨酸。
在一个实施方案中，本发明的液体药物组合物含有作为活性剂的FSH或其变体、作为表面活性剂的聚山梨醇酯20和/或聚山梨醇酯80、作为张力调节剂的甘露醇、作为缓冲剂的磷酸盐、作为稳定剂的甲硫氨酸和作为防腐剂的苯甲醇和苯扎氯铵、以及水，并且没有其他赋形剂。
如上所述，本发明提供单次使用和多剂量使用的液体制剂，其含有至少2种抑菌剂的组合。本发明的制剂适合于药用或兽医用。
在一个实施方案中，本发明提供了用于人药用的制备物品，其包括包装材料和容器，所述容器包含在水性稀释剂中的FSH或FSH变体以及苯甲醇和苯扎氯铵、任选地含有缓冲剂和/或其他赋形剂的溶液，其中所述的包装材料包含标明该溶液可以在第一次使用后保存24小时或更长的时间的书面材料。容器优选是注射器、管形瓶、输液瓶、安瓿或笔胆。最优选地，容器是在注射笔中的笔胆。
在第一次使用之前，在容器封闭前，管形瓶、安瓿、笔胆或药筒已经被打破，本发明的制剂可以保持至少约6个月、12个月或24个月。在优选的贮藏条件下，在第一次使用前，本发明的药物组合物保持远离强光(优选在暗处)、在约2-8℃温度下。
本发明的制剂能够使用公认的装置进行给药。包含这些单个的管形瓶系统的实例包括用于递送溶液的笔注射器装置，例如已知的 笔、笔、-笔、-笔和
可以将稳定的防腐的制剂以澄清溶液提供给患者。溶液可以单次使用或者其可以重复多次使用并且可以满足单次或多次循环的患者治疗，因此提供了比当前可用的治疗方案更方便的治疗方案。
本发明的水性制剂是即时可用的溶液，FSH制剂在任何时间点都不需重构。
可以通过本领域中熟知的多种给药方法将本文所述的稳定的防腐制剂中的FSH或FSH变体给予符合本发明的患者，包括皮下或肌肉注射、经皮、肺、跨粘膜、植入、渗透泵、药筒、微量泵、口服或技术人员理解的其他方法。
提供以下实施例，仅仅是用来进一步地举例说明本发明的制剂和组合物的制备。本发明的范围不应解释为仅仅由以下实施例组成。
本发明也涉及含有本发明的液体药物组合物的药物容器。合适的药物容器可从现有技术获知。例如，容器可以是注射器、管形瓶、输液瓶、安瓿或笔胆。在优选的实施方案中，当容器是注射器时，注射器装配有针头保护系统。可从现有技术获知的该针头保护系统帮助降低伤害的危险。在另一个实施方案中，容器是注射笔中的笔胆。
本发明也涉及制备本发明的液体药物组合物的方法，其中将作为活性剂的FSH或FSH变体配制在包含作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇以及其他药用赋形剂的水性制剂中。
在另一方面，本发明涉及本发明的液体药物组合物用于多剂量给药的用途。本发明的药物组合物能够有利地用于治疗不育症和与FSH相关的其他病症。在优选的实施方案中，本发明的FSH制剂用于人的治疗。然而，通常也可将本发明药物组合物给予其他哺乳动物，例如绵羊、牛、猪或马。
发现本发明的药物液体制剂表现出非常好的贮藏稳定性。在本发明的范围内，术语“贮藏稳定的”被理解为指在25℃下制剂贮藏3个月之后，活性的FSH或FSH变体的含量仍然达到原始浓度的80％或更多。优选地，在25℃贮藏3个月之后，FSH活性的剩余含量仍达到原始活性的至少85％、更优选至少90％和最优选至少95％。
FSH或FSH变体的生物活性能够通过在给定的条件下，将其增大用绒促性素处理的未成熟大鼠的卵巢的效果与国际标准制剂或以国际单位标定的参照制剂的同样效果相比较来进行评价(欧洲药典，第5版)。
例如，Albanese等人在Mol.Cell Endocrinol.101:211–219(1994)中描述了FSH体外活性的测定。
用于本发明的制剂的FSH或FSH变体的纯度应当为至少95％、优选至少97％、更优选至少99％和最优选高于99％。借助HPLC分析能够测定纯度。实施该分析的合适的材料和方案能够从例如Vydac或TOSOHBioscience的商业供应商获得。
配制本发明的溶液的组分能够从常规来源获得，例如从如Sigma或Merck公司获得。
本发明的制剂能够根据常规的方法来进行生产。制剂的组分能够溶解于水性缓冲液中。或者，由于纯化过程，已经能够在水性缓冲液中得到FSH或FSH变体。
最后，将制成的液体制剂填充到合适的药物容器中，在其中贮藏直至给药。
以下实施例是为了举例说明本发明，而不是限制其范围。
具体实施方式
实施例
实施例1
通过重组技术制备重组人FSH
用标准方法在转染的CHO宿主细胞中生产重组人FSH。这些方法包括CHO细胞克隆的传代(所述克隆产生来自编码人FSH的α-链和β-链的一种或多种重组核酸分子的重组人FSH)、在合适的条件下培养宿主细胞和从细胞培养物中提纯重组人FSH。合适的方法记载于如上所述的现有技术中。
在优选的实施方案中，重组人FSH按照国际专利申请WO2009/000913所述生产。
实施例2
液体FSH制剂
通过在水性磷酸盐缓冲溶液中配制以下组分来制备包含重组人FSH的液体制剂。
组分
重组人FSH 600IU/ml
聚山梨醇酯20 0.2mg/ml
磷酸钠 50mM
甘露醇 5.0mg/ml
L-甲硫氨酸 0.5mg/ml
苯甲醇 10.0mg/ml
苯扎氯铵 0.02mg/ml
注射用水
PH 7.0
测定重组人FSH的活性为约10,000IU/mg。
通过加入NaOH调节组合物的pH值。所有组分的质量都符合欧洲药典(Ph.Eur.)。制剂具有254mOsmol/kg的张力。
此外，制备2个现有技术中的FSH制剂作为对比制剂：
A)对比制剂Gonal-f：10mM磷酸钠，60mg/ml蔗糖，0.1mg/ml甲硫氨酸，0.1mg/ml泊洛沙姆188，3mg/ml间甲酚，pH 7.0。
B)对比制剂Puregon：50mM柠檬酸钠，50mg/ml蔗糖，0.5mg/ml甲硫氨酸，0.2mg/ml聚山梨醇酯20，10mg/ml苯甲醇，pH 7.0。
实施例3
本发明的制剂的稳定性试验
如实施例2中所述的水性制剂等分为1ml/瓶并且在2-8℃、25℃和37℃贮藏。在25℃贮藏12周和在37℃贮藏9周之后，检验样品的各试验参数。根据欧洲药典第5版检验充分的防腐效果。用SE-HPLC和SDS-PAGE测定％FSH的回收率、％二聚体FSH的减少(FSH离解成单体)和FSH的纯度。
在2-8℃、25℃和37℃贮藏，本发明的制剂表现出高于95％的重组人FSH的回收率。此外，在2-8℃、25℃和37℃贮藏，该制剂表现出低于5％的二聚体FSH的减少。进一步地，在2-8℃、25℃和37℃贮藏，该制剂表现出高于95％的FSH的纯度。
从这些结果，可见本发明的FSH水性制剂(包含作为表面活性剂的聚山梨醇酯20、作为张力调节剂的甘露醇、作为缓冲剂的磷酸盐、作为稳定剂的甲硫氨酸和作为防腐剂的苯甲醇和苯扎氯铵)防止蛋白质损失和变性以及蛋白质离解为构成的单体，并且使FSH在延长的时间内稳定。此外，由于其有益的防腐性能，该制剂是用于多剂量给药的有用的制剂。
用根据欧洲药典第5版的挑战试验(challenge test)测定本发明的FSH制剂的抗菌防腐效果。试验包括：用限定的微生物的规定的接种物接种水性制剂组合物、在规定的温度贮藏接种后的制剂、在规定的时间间隔从制剂中取样和计数所取出的样品中的微生物。如果制剂的防腐性足够，微生物的数量有显著降低或至少不增加。
本发明的FSH制剂表现出微生物数量显著降低，从而证明有非常良好的防腐性。
此外，发现本发明的制剂具有与现有技术的对比制剂Gonal-f和Puregon的稳定性相当的稳定性。
序列表：
SEQ ID No.1：人FSH的α-链的氨基酸序列
SEQ ID No.2：人FSH的β-链的氨基酸序列
SEQ ID No.3：编码人FSH的α-链的野生型核酸序列
SEQ ID No.4：编码人FSH的β-链的野生型核酸序列
SEQ ID No.5：编码人FSH的β-链的密码子优化的核酸序列
SEQ ID No.6：编码人FSH的α-链的密码子优化的核酸序列
实施方案
实施方案1：液体药物组合物，其包含促卵泡激素(FSH)或其变体和作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇。
实施方案2：根据实施方案1的液体药物组合物，其中所存在的苯扎氯铵的浓度为0.005-0.03mg/ml和所存在的苯甲醇的浓度为5.0-12.0mg/ml。
实施方案3：根据实施方案1或2的液体药物组合物，其中所存在的FSH或其变体的浓度为10至200μg/ml。
实施方案4：根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含作为抗氧化剂的甲硫氨酸。
实施方案5：根据实施方案4的液体药物组合物，其中所存在的甲硫氨酸的浓度为0.1至1.0mg/ml。
实施方案6：根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含表面活性剂。
实施方案7：根据实施方案6的液体药物组合物，其中表面活性剂是聚氧乙烯脱水山梨醇烷基酯。
实施方案8：根据实施方案7的液体药物组合物，其中聚氧乙烯脱水山梨醇烷基酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。
实施方案9：根据实施方案8的液体药物组合物，其中所存在的聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的浓度为0.05至0.5mg/ml。
实施方案10：根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含张力调节剂。
实施方案11：根据实施方案10的液体药物组合物，其中张力调节剂是糖醇或糖。
实施方案12：根据实施方案11的液体药物组合物，其中张力调节剂是甘露醇。
实施方案13：根据实施方案12的液体药物组合物，其中所存在的甘露醇的浓度为1.0至10mg/ml。
实施方案14：根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物，其具有6.5至7.5的pH范围。
实施方案15：根据实施方案14的液体药物组合物，其中pH范围是6.8至7.2。
实施方案16：根据实施方案14或15的液体药物组合物，其中用NaOH调节pH。
实施方案17：根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含生理上可接受的缓冲剂。
实施方案18：根据实施方案17的液体药物组合物，其中缓冲剂是磷酸盐。
实施方案19：根据实施方案17或18的液体药物组合物，其中所存在的缓冲剂的浓度为10-100mmol/l。
实施方案20：根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物，其中组合物含有作为活性剂的FSH或其变体、作为表面活性剂的聚山梨醇酯20和/或聚山梨醇酯80、作为张力调节剂的甘露醇、作为缓冲剂的磷酸盐、作为稳定剂的甲硫氨酸和作为防腐剂的苯甲醇和苯扎氯铵，并且没有其他赋形剂。
实施方案21：药物容器，其含有根据上述实施方案中任意一项的液体药物组合物。
实施方案22：根据实施方案21的药物容器，其中容器是注射器、管形瓶、输液瓶、安瓿或笔胆。
实施方案23：根据实施方案21或22的药物容器，其中容器是在注射笔中的笔胆。
实施方案24：制备根据实施方案1-20中任意一项的液体药物组合物的方法，其中将作为活性剂的FSH或其变体配制到水性制剂中，所述水性制剂包含作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇以及其他药用赋形剂。
实施方案25：制备包装的药物组合物的方法，其包括将包含FSH或其变体以及苯扎氯铵和苯甲醇的溶液置于管形瓶、安瓿、笔胆或药筒中。
实施方案26：根据实施方案1-20中任意一项的液体药物组合物用于多剂量给药的用途。

Claims (26)

1.液体药物组合物，其包含促卵泡激素(FSH)或其变体和作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇，其中所存在的苯扎氯铵的浓度为0.005-0.05mg/ml。
2.根据权利要求1的液体药物组合物，其中所存在的苯扎氯铵的浓度为0.005-0.03mg/ml和所存在的苯甲醇的浓度为5.0-12.0mg/ml。
3.根据权利要求1或2的液体药物组合物，其中所存在的FSH或其变体的浓度为10至200μg/ml。
4.根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含作为抗氧化剂的甲硫氨酸。
5.根据权利要求4的液体药物组合物，其中所存在的甲硫氨酸的浓度为0.1至1.0mg/ml。
6.根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含表面活性剂。
7.根据权利要求6的液体药物组合物，其中表面活性剂是聚氧乙烯脱水山梨醇烷基酯。
8.根据权利要求7的液体药物组合物，其中聚氧乙烯脱水山梨醇烷基酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。
9.根据权利要求8的液体药物组合物，其中所存在的聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80的浓度为0.05至0.5mg/ml。
10.根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含张力调节剂。
11.根据权利要求10的液体药物组合物，其中张力调节剂是糖醇或糖。
12.根据权利要求11的液体药物组合物，其中张力调节剂是甘露醇。
13.根据权利要求12的液体药物组合物，其中所存在的甘露醇的浓度为1.0至10mg/ml。
14.根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物，其具有6.5至7.5的pH范围。
15.根据权利要求14的液体药物组合物，其中pH范围是6.8至7.2。
16.根据权利要求14或15的液体药物组合物，其中用NaOH调节pH。
17.根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物，其进一步包含生理上可接受的缓冲剂。
18.根据权利要求17的液体药物组合物，其中缓冲剂是磷酸盐。
19.根据权利要求17或18的液体药物组合物，其中所存在的缓冲剂的浓度为10-100mmol/l。
20.根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物，其中组合物含有作为活性剂的FSH或其变体、作为表面活性剂的聚山梨醇酯20和/或聚山梨醇酯80、作为张力调节剂的甘露醇、作为缓冲剂的磷酸盐、作为稳定剂的甲硫氨酸和作为防腐剂的苯甲醇和苯扎氯铵，并且没有其他赋形剂。
21.药物容器，其含有根据上述权利要求中任意一项的液体药物组合物。
22.根据权利要求21的药物容器，其中容器是注射器、管形瓶、输液瓶、安瓿或笔胆。
23.根据权利要求21或22的药物容器，其中容器是在注射笔中的笔胆。
24.制备根据权利要求1-20中任意一项的液体药物组合物的方法，其中将作为活性剂的FSH或其变体配制到水性制剂中，所述水性制剂包含作为防腐剂的苯扎氯铵和苯甲醇以及其他药用赋形剂。
25.制备包装的药物组合物的方法，其包括将根据权利要求1-20中任意一项的液体药物组合物置于管形瓶、安瓿、笔胆或药筒中。
26.根据权利要求1-20中任意一项的液体药物组合物在制备用于多剂量给药的药物中的用途。
CN201510082820.4A 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂 Pending CN104688679A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP08151231 2008-02-08
EP08151231.1 2008-02-08

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2009801040855A Division CN101970010A (zh) 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN104688679A true CN104688679A (zh) 2015-06-10

Family

ID=40568186

Family Applications (3)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910216104.9A Pending CN110433136A (zh) 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂
CN2009801040855A Pending CN101970010A (zh) 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂
CN201510082820.4A Pending CN104688679A (zh) 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂

Family Applications Before (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201910216104.9A Pending CN110433136A (zh) 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂
CN2009801040855A Pending CN101970010A (zh) 2008-02-08 2009-02-09 促卵泡激素的液体制剂

Country Status (27)

Country Link
US (4) US20110054410A1 (zh)
EP (2) EP2412385A1 (zh)
JP (1) JP5620824B2 (zh)
KR (2) KR101573773B1 (zh)
CN (3) CN110433136A (zh)
AT (1) ATE523209T1 (zh)
AU (1) AU2009211331B2 (zh)
BR (1) BRPI0908887B8 (zh)
CA (2) CA2713386C (zh)
CY (1) CY1112082T1 (zh)
DE (1) DE202009009905U1 (zh)
DK (1) DK2249869T3 (zh)
EA (1) EA019530B1 (zh)
ES (1) ES2372470T3 (zh)
HK (1) HK1149494A1 (zh)
HR (1) HRP20110801T1 (zh)
IL (1) IL206759A (zh)
ME (1) ME01337B (zh)
MX (1) MX2010008802A (zh)
NZ (1) NZ586588A (zh)
PL (1) PL2249869T3 (zh)
PT (1) PT2249869E (zh)
RS (1) RS52106B (zh)
SI (1) SI2249869T1 (zh)
UA (1) UA99337C2 (zh)
WO (1) WO2009098318A1 (zh)
ZA (1) ZA201004457B (zh)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101105871B1 (ko) * 2005-09-27 2012-01-16 주식회사 엘지생명과학 인 난포자극호르몬의 안정한 용액 제형
LT2349324T (lt) 2008-10-17 2017-12-27 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulino ir glp-1 agonisto derinys
ES2534191T3 (es) 2009-11-13 2015-04-20 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Composición farmacéutica que comprende un agonista de GLP-1, una insulina y metionina
PL2498801T3 (pl) 2009-11-13 2018-08-31 Sanofi Aventis Deutschland Kompozycja farmaceutyczna zawierająca desPro<sup>36</sup>eksendyno-4(1-39)-Lys6-NH2 i metioninę
JP5800527B2 (ja) * 2010-03-30 2015-10-28 日東電工株式会社 安定化医薬組成物、安定化医薬組成物溶液製剤、フィルム状製剤及びフィルム状製剤の製造方法
AR081755A1 (es) * 2010-04-02 2012-10-17 Hanmi Holdings Co Ltd Formulacion de accion prolongada de la hormona estimuladora de los foliculos donde se usa un fragmento de inmunoglobulina, metodo de preparacion y metodo para tratar a un sujeto que sufre un trastorno reproductivo
HUE031181T2 (en) 2010-08-30 2017-06-28 Sanofi Aventis Deutschland Use of AVE0010 for the manufacture of a medicament for the treatment of type 2 diabetes
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
CN108079281A (zh) 2011-08-29 2018-05-29 赛诺菲-安万特德国有限公司 用于2型糖尿病患者中的血糖控制的药物组合
AR087744A1 (es) 2011-09-01 2014-04-16 Sanofi Aventis Deutschland Composicion farmaceutica para uso en el tratamiento de una enfermedad neurodegenerativa
MX2014005204A (es) * 2011-11-09 2014-05-28 Adisseo France Sas Dieta previa al sacrificio que incluye metionina.
EP2968391A1 (en) 2013-03-13 2016-01-20 Moderna Therapeutics, Inc. Long-lived polynucleotide molecules
US9950039B2 (en) 2014-12-12 2018-04-24 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Insulin glargine/lixisenatide fixed ratio formulation
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
CN105727260A (zh) * 2016-02-03 2016-07-06 华侨大学 一种卵泡刺激素的长效制剂
GB201603280D0 (en) 2016-02-24 2016-04-13 Ferring Bv Stable liquid gonadotropin formulation
CN105726468A (zh) * 2016-02-28 2016-07-06 中国农业科学院特产研究所 梅花鹿用超数排卵聚乙烯吡咯烷酮fsh复合缓释注射剂
US10085971B2 (en) 2016-08-22 2018-10-02 Navinta Iii Inc Pharmaceutical solution of asenapine for sublingual or buccal use
CN108728465A (zh) * 2017-04-14 2018-11-02 深圳新诺微环生物科技有限公司 一种表达靶细胞-效应细胞桥接器的微环dna载体及其制备方法和应用
US20230364172A1 (en) * 2022-05-14 2023-11-16 Syncotrance, LLC Modulation of solubility, palatability, absorption, and bioavailability of mitragyna speciosa-derived compounds for oral and buccal delivery

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1191139A (zh) * 1997-01-15 1998-08-26 阿克佐诺贝尔公司 含有促性腺素的液体制剂
CN1309567A (zh) * 1998-07-23 2001-08-22 伊莱利利公司 Fsh和fsh变体制剂,产品和方法

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4923805A (en) 1983-11-02 1990-05-08 Integrated Genetics, Inc. Fsh
US4840896A (en) 1983-11-02 1989-06-20 Integrated Genetics, Inc. Heteropolymeric protein
IT1206302B (it) 1987-06-26 1989-04-14 Serono Cesare Ist Ricerca Ormone follicolo-stimolante urinario
US5763394A (en) * 1988-04-15 1998-06-09 Genentech, Inc. Human growth hormone aqueous formulation
CA2018676C (en) 1989-06-20 2003-05-06 Christie A. Kelton Novel heteropolymeric protein production methods
DE4126983A1 (de) * 1991-08-15 1993-02-18 Boehringer Mannheim Gmbh Verfahren zur herstellung von humanprotein-enthaltenden, konservierten arzneimitteln fuer infusions- oder injektionszwecke
DE4440587A1 (de) 1994-11-14 1996-05-15 Fliether Karl Gmbh & Co Basquill-Schloß
CN1302010C (zh) 1997-06-25 2007-02-28 应用研究系统Ars股份公司 二硫键交联的糖蛋白激素类似物及其制备和应用
US20030166525A1 (en) * 1998-07-23 2003-09-04 Hoffmann James Arthur FSH Formulation
ATE358139T1 (de) 1999-04-16 2007-04-15 Inst Massone S A Verfahren zur herstelllung von gonadotropin- zusammensetzungen
WO2001058493A1 (en) 2000-02-11 2001-08-16 Maxygen Aps Conjugates of follicle stimulating hormones
DE10249817A1 (de) 2002-10-24 2004-05-13 Daimlerchrysler Ag Schaltanordnung zur Betätigung von Beleuchtungssystemen an einem Kraftfahrzeug
AR043972A1 (es) 2003-04-02 2005-08-17 Ares Trading Sa Formulaciones farmaceuticas de fsh y lh
JP4763616B2 (ja) 2003-12-22 2011-08-31 アレス トレーディング ソシエテ アノニム Ｆｓｈを精製するための方法
MX2007005327A (es) 2004-11-09 2007-08-02 Ares Trading Sa Metodo para purificacion de la hormona foliculo estimulante (hfe).
KR101105871B1 (ko) * 2005-09-27 2012-01-16 주식회사 엘지생명과학 인 난포자극호르몬의 안정한 용액 제형
UA103598C2 (uk) 2007-06-28 2013-11-11 Биодженерикс Аг Клон клітин, що продукують fsh

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1191139A (zh) * 1997-01-15 1998-08-26 阿克佐诺贝尔公司 含有促性腺素的液体制剂
CN1309567A (zh) * 1998-07-23 2001-08-22 伊莱利利公司 Fsh和fsh变体制剂,产品和方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
上海科技年鉴编辑部编: "《2005上海科技年鉴》", 31 August 2005 *
江明性: "《新编实用药物学》", 30 June 2000, 科学出版社 *

Also Published As

Publication number Publication date
EP2249869A1 (en) 2010-11-17
EA201070940A1 (ru) 2010-12-30
CY1112082T1 (el) 2015-11-04
CN101970010A (zh) 2011-02-09
IL206759A0 (en) 2010-12-30
JP2011514317A (ja) 2011-05-06
ZA201004457B (en) 2011-05-25
BRPI0908887B1 (pt) 2021-01-19
IL206759A (en) 2015-02-26
RS52106B (en) 2012-08-31
CA2713386A1 (en) 2009-08-13
PL2249869T3 (pl) 2012-02-29
MX2010008802A (es) 2011-03-29
KR101573773B1 (ko) 2015-12-02
ATE523209T1 (de) 2011-09-15
EP2249869B1 (en) 2011-09-07
ME01337B (me) 2013-12-20
US20160303202A1 (en) 2016-10-20
KR101662631B1 (ko) 2016-10-05
KR20150138428A (ko) 2015-12-09
BRPI0908887B8 (pt) 2021-05-25
CA2713386C (en) 2016-04-19
CA2926500A1 (en) 2009-08-13
EP2412385A1 (en) 2012-02-01
HRP20110801T1 (hr) 2011-12-31
US20160303238A1 (en) 2016-10-20
KR20100123697A (ko) 2010-11-24
SI2249869T1 (sl) 2012-01-31
DK2249869T3 (da) 2011-12-12
US20160303201A1 (en) 2016-10-20
HK1149494A1 (en) 2011-10-07
CN110433136A (zh) 2019-11-12
UA99337C2 (ru) 2012-08-10
ES2372470T3 (es) 2012-01-20
US20110054410A1 (en) 2011-03-03
JP5620824B2 (ja) 2014-11-05
EA019530B1 (ru) 2014-04-30
WO2009098318A1 (en) 2009-08-13
AU2009211331A1 (en) 2009-08-13
BRPI0908887A2 (pt) 2015-09-15
DE202009009905U1 (de) 2009-10-29
AU2009211331B2 (en) 2014-07-03
PT2249869E (pt) 2011-12-16
NZ586588A (en) 2012-10-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104688679A (zh) 促卵泡激素的液体制剂
JP5551601B2 (ja) Ｌｈ液体調製物
CN102821782B (zh) 促卵泡激素的液体配制品
JP4699991B2 (ja) 非イオン性界面活性剤を一緒に伴うｆｓｈ及びｌｈの液体医薬組成物
JP4871124B2 (ja) 凍結乾燥ｆｓｈ／ｌｈ製剤
ES2358330T3 (es) Formulaciones farmacéuticas de fsh y/o lh líquidas o liofilizadas junto con el tensioactivo no iónico poloxámero 188 y un agente bacteriostático.
TWI322692B (en) Fsh and lh pharmaceutical formulations

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
TA01 Transfer of patent application right

Effective date of registration: 20180611

Address after: London, England

Applicant after: Thai Max headquarters UK Limited

Address before: Ulm

Applicant before: Ratiopharm GmbH

TA01 Transfer of patent application right
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20150610

RJ01 Rejection of invention patent application after publication