CN104640858A - 环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物及使用方法 - Google Patents

环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物及使用方法 Download PDF

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Abstract

式I的环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物，包括其立体异构体、几何异构体、互变异构体和药学上可接受的盐，其中R2为环醚且X为噻唑基、吡嗪基、吡啶基或嘧啶基，其用于抑制Pim激酶以及治疗由Pim激酶介导的疾病，例如癌症。本申请公开了使用式I化合物在体外、原位和体内诊断、预防或治疗哺乳动物细胞中的该类疾病或有关的病理病症的方法。

Description

环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物及使用方法
技术领域
本发明总体上涉及环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物，其用于治疗由Pim激酶(Pim-1、Pim-2和/或Pim-3)抑制剂介导的疾病，由此可用作癌症治疗剂。本发明还涉及组合物，更具体地，包含这些化合物的药物组合物，以及单独或组合使用它们用于治疗各种形式的癌症和过度增殖性疾病的方法，以及使用所述化合物用于体外、原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞或相关病理病症的方法。
背景技术
Pim激酶是由基因Pim-1、Pim-2和Pim-3编码的三个高度相关的丝氨酸和苏氨酸蛋白激酶的家族。该基因名称源于短语莫罗尼前病毒插入(ProviralInsertion，Moloney)，小鼠莫罗尼病毒的常用整合位点，其中所述插入在转基因Myc驱动的淋巴瘤模型中导致Pim激酶过表达和新生T-细胞淋巴瘤或肿瘤生成的急剧加速(Cuypers等人，(1984)Cell，卷37(1)141-50页；Selten等人，(1985)EMBO J.卷4(7)1793-8页；van der Lugt等人，(1995)EMBO J.卷14(11)2536-44页；Mikkers等人，(2002)Nature Genetics，卷32(1)153-9页；van Lohuizen等人，(1991)Cell，卷65(5)737-52页)。这些实验揭示了与癌基因c-Myc的协同作用，并表明抑制Pim激酶可具有治疗益处。
小鼠遗传学表明，拮抗Pim激酶可具有可接受的安全特征；Pim-1-/-；Pim-2-/-，Pim-3-/-基因敲除小鼠可存活，尽管比野生型同窝出生仔畜稍小(Mikkers等人，(2004)Mol Cell Biol卷24(13)6104-154页)。所述三种基因产生六种蛋白同工型，其包含蛋白激酶结构域，并明显没有可识别的调节结构域。全部六种同工型为组成性活性蛋白激酶，它们不需要为了活性的翻译后修饰，因此Pim激酶主要在转录水平调节(Qian等人，(2005)J Biol Chem，卷280(7)6130-7页)。Pim激酶表达由细胞因子和生长因子受体高度诱导，且Pim是Stat蛋白(包括Stat3和Stat5)的直接转录靶标。例如，Pim-1是gp130-介导的Stat3增殖信号所需的(Aksoy等人，(2007)Stem Cells，卷25(12)2996-3004页；Hirano等人，(2000)Oncogene卷19(21)2548-56页；Shirogane等人，(1999)Immunity卷11(6)709-19页)。
Pim激酶在细胞增殖和存活途径中平行于PI3k/Akt/mTOR信号轴起作用(Hammerman等人，(2005)Blood卷105(11)4477-83页)。事实上，包括Bad和eIF4E-BP1的PI3k轴的数个磷酸化靶标是细胞生长和凋亡调节子，以及也是Pim激酶的磷酸化靶标(Fox等人，(2003)Genes Dev卷17(15)1841-54页；Macdonald等人，(2006)Cell Biol卷7，1页；Aho等人，(2004)FEBS Letters卷571(1-3)43-9页；Tamburini等人，(2009)Blood卷114(8)1618-27页)。Pim激酶可影响细胞存活，这是由于Bad的磷酸化提高Bcl-2活性并因此促进细胞存活。同样地，通过mTOR或Pim激酶磷酸化eIF4E-BP1导致eIF4E的抑制，从而促进mRNA翻译和细胞生长。此外，已经确认Pim-1通过磷酸化CDC25A、p21和Cdc25C促进细胞周期进展(Mochizuki等人，(1999)JBiol Chem卷274(26)18659-66页；Bachmann等人，(2006)Int J Biochem CellBiol卷38(3)430-43页；Wang等人，(2002)Biochim Biophys Acta卷1593(1)45-55页。
Pim激酶在转基因小鼠模型中与c-Myc驱动的和Akt驱动的肿瘤显示协同作用(Verbeek等人，(1991)Mol Cell Biol卷11(2)1176-9页；Allen等人Oncogene(1997)卷15(10)1133-41页；Hammerman等人，(2005)Blood卷105(11)4477-83页)。Pim激酶与急性髓性白血病(AML)(包括Flt3-ITD、BCR-abl和Tel-Jak2)中鉴定的癌基因的转化活性有关。这些癌基因在BaF3细胞中的表达导致Pim-1和Pim-2表达的上调，从而导致IL-3非依赖性生长，以及随后的Pim抑制导致细胞凋亡和细胞生长停止(Adam等人，(2006)CancerResearch 66(7):3828-35)。在许多造血癌症(包括白血病和淋巴瘤)中也已经注意到Pim过表达和失调为经常性事件(Amson等人，(1989)Proc Natl Acad SciUSA 86(22):8857-61)；Cohen等人，(2004)Leuk Lymphoma 45(5):951-5；Hüttmann等人，(2006)Leukemia 20(10):1774-82)以及多发性骨髓瘤(Claudio等人，(2002)Blood 100(6):2175-86。多发性骨髓瘤(MM)是克隆的B-淋巴细胞恶性肿瘤，其特征在于末端分化的产生抗体的细胞在骨髓中的蓄积。
Pim-1已经显示过表达和与前列腺癌进展有关(Cibull等人，(2006)J ClinPathol 59(3):285-8；Dhanasekaran等人，(2001)Nature卷412(6849):822-6)。在小鼠模型中，Pim-1表达随着疾病的进展而提高(Kim等人，(2002)Proc NatlAcad Sci USA 99(5):2884-9)。据报道，Pim-1在具有c-Myc驱动的基因特征的人前列腺肿瘤样品的亚组中是最高度过表达的mRNA(Ellwood-Yen等人，(2003)Cancer Cell 4(3):223-38)。Pim-3也已经显示在胰腺癌和肝细胞癌中过表达并起功能性作用(Li等人，(2006)Cancer Research 66(13):6741-7；Fujii等人，(2005)Int J Cancer 114(2):209-18。
除了肿瘤学治疗和诊断应用之外，Pim激酶可在正常免疫系统功能中起重要作用，以及Pim抑制对于许多不同的免疫病理学可具有治疗作用，所述免疫病理学包括肿瘤生成(Nawijn等人，(2011)Nature Rev.11:23-34)、炎症、自身免疫性病症、过敏症和器官移植的免疫抑制(Aho等人，(2005)Immunology 116(1):82-8)。
发明概述
本发明涉及用于治疗由Pim激酶(Pim-1、Pim-2和/或Pim-3)抑制剂介导的疾病的环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物，式I化合物。
式I化合物具有以下结构：
其中R2选自以下结构：
其中波浪线表示连接位点且虚线表示任选的双键；
X选自以下结构：
及其立体异构体、几何异构体、互变异构体和药学上可接受的盐。各个取代基，包括R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7和X均如本文所定义。
本发明的一个方面为药物组合物，其包含式I化合物和药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。所述药物组合物还可包含化疗剂。
本发明包括治疗疾病或障碍的方法，所述方法包括向患有以下疾病或障碍的患者给药治疗有效量的式I化合物，所述疾病或障碍选自癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病，以及由Pim激酶介导的疾病或障碍。所述方法还包括给药另外的治疗剂，所述治疗剂选自化疗剂、抗炎剂、免疫调节剂、神经营养因子、心血管疾病的治疗剂、肝病治疗剂、抗病毒剂、血液疾病的治疗剂、糖尿病的治疗剂和免疫缺陷病的治疗剂。
本发明包括式I化合物在制备用于治疗癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病的药物中的用途，其中所述药物介导Pim激酶。
本发明包括用于治疗由Pim激酶介导的病症的试剂盒，其包含：a)包含式I化合物的第一药物组合物；和b)使用说明书。
本发明包括用作药物并用于治疗疾病或障碍的式I化合物，所述疾病或障碍选自癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病，以及由Pim激酶介导的疾病或障碍。
本发明包括制备式I化合物的方法。
发明详述
现在将详细地提及本发明的一些实施方案，其实例在随附的结构和化学式中说明。尽管本发明将与列举的实施方案一起进行描述，但是应理解的是，本发明不限于这些实施方案。相反地，本发明旨在涵盖可包含在由权利要求限定的本发明范围内的所有备选方案、修改方案和等同方案。本领域技术人员将识别与本文所述的方法和物质相似或等同的许多方法和物质，其可在本发明实践中使用。本发明绝不限于所描述的方法和物质。在一篇或多篇引用的文献、专利和类似材料与本申请不同或矛盾的情况(包括但不限于定义的术语、术语用法、描述的技术等)中，以本申请为准。除非另外定义，本文中所使用的所有技术和科学术语具有所属技术领域的人员通常所理解的相同含义。尽管可以使用等同于本申请所描述的方法和物质来实践或测试本发明，但是合适的方法和物质如下所述。在此将本文所提及的所有出版物、专利申请、专利和其他文献整体引入作为参考。除非另外指出，本申请所使用的命名基于IUPAC系统命名。
定义
当表示取代基的数目时，术语“一个或多个”是指从一个取代基至最高可能数目的取代基范围，即，由取代基代替一个氢至代替所有的氢。术语“取代基”表示替代母体分子上的氢原子的原子或一组原子。术语“(被)取代的”表示所指定的基团携带一个或多个取代基。虽然任意基团可以携带多个取代基且提供多种可能的取代基，但是各取代基是独立选择的且无需相同。术语“未(经)取代的”表示所指定的基团不带取代基。术语“任选取代的”表示所指定的基团是未经取代的或被一个或多个取代基所取代，所述取代基独立地选自可能取代基的集合。当表示取代基的数目时，术语“一个或多个”是指从一个取代基至最高可能数目的取代基的范围，即由取代基代替一个氢至代替所有的氢。
本文所用术语“烷基”是指具有1-12个碳原子(C1-C12)的饱和直链或支链的一价烃基，其中所述烷基可任选独立地被下述一个或多个取代基取代。在另一实施方案中，烷基具有1-8个碳原子(C1-C8)或1-6个碳原子(C1-C6)。烷基的实例包括，但不限于，甲基(Me，-CH3)、乙基(Et，-CH2CH3)、1-丙基(正丙基，-CH2CH2CH3)、2-丙基(异丙基，-CH(CH3)2)、1-丁基(正丁基，-CH2CH2CH2CH3)、2-甲基-1-丙基(异丁基，-CH2CH(CH3)2)、2-丁基(仲丁基，-CH(CH3)CH2CH3)、2-甲基-2-丙基(叔丁基，-C(CH3)3)、1-戊基(正戊基，-CH2CH2CH2CH2CH3)、2-戊基(-CH(CH3)CH2CH2CH3)、3-戊基(-CH(CH2CH3)2)、2-甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH2CH3)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH3)CH(CH3)2)、3-甲基-1-丁基(-CH2CH2CH(CH3)2)、2-甲基-1-丁基(-CH2CH(CH3)CH2CH3)、1-己基(-CH2CH2CH2CH2CH2CH3)、2-己基(-CH(CH3)CH2CH2CH2CH3)、3-己基(-CH(CH2CH3)(CH2CH2CH3))，2-甲基-2-戊基(-C(CH3)2CH2CH2CH3)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH(CH3)CH2CH3)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH3)CH2CH(CH3)2)、3-甲基-3-戊基(-C(CH3)(CH2CH3)2)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH2CH3)CH(CH3)2)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH3)2CH(CH3)2)，3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH3)C(CH3)3、1-庚基、1-辛基等。
本文所用术语“亚烷基”是指具有1-12个碳原子(C1-C12)的饱和直链或支链的二价烃基，其中所述亚烷基可任选独立地被下述一个或多个取代基取代。在另一实施方案中，亚烷基具有1-8个碳原子(C1-C8)或1-6个碳原子(C1-C6)。亚烷基的实例包括，但不限于，亚甲基(-CH2-)、亚乙基(-CH2CH2-)、亚丙基(-CH2CH2CH2-)等。
术语“烯基”是指具有2-8个碳原子(C2-C8)且具有至少一个不饱和位点，即，碳-碳sp2双键的直链或支链一价烃基，其中所述烯基可任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代且包括具有“顺式”和“反式”取向(或“E”和“Z”取向)的基团。实例包括，但不限于，乙烯基(-CH＝CH2)、烯丙基(-CH2CH＝CH2)等。
术语“亚烯基”是指具有2-8个碳原子(C2-C8)且具有至少一个不饱和位点，即，碳-碳sp2双键的直链或支链二价烃基，其中所述亚烯基可任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代且包括具有“顺式”和“反式”取向(或“E”和“Z”取向)的基团。实例包括，但不限于，亚乙烯基(-CH＝CH-)、亚烯丙基(-CH2CH＝CH-)等。
术语“炔基”是指具有2-8个碳原子(C2-C8)且具有至少一个不饱和位点，即，碳-碳sp叁键的直链或支链一价烃基，其中所述炔基可任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。实例包括，但不限于，乙炔基(-C≡CH)、丙炔基(炔丙基，-CH2C≡CH)等。
术语“亚炔基”是指具有2-8个碳原子(C2-C8)且具有至少一个不饱和位点，即，碳-碳sp叁键的直链或支链二价烃基，其中所述亚炔基可任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。实例包括，但不限于，亚乙炔基(-C≡C-)，亚丙炔基(亚炔丙基，-CH2C≡C-)等。
术语“碳环”、“碳环基”和“环烷基”是指具有3-12个碳原子(C3-C12)呈单环形式或具有7-12个碳原子呈二环形式的一价非芳香、饱和或部分不饱和环。具有7-12个原子的二环碳环可排列为例如二环[4,5]系统、二环[5,5]系统、二环[5,6]系统或二环[6,6]系统且具有9或10个环原子的二环碳环可排列为二环[5,6]系统或二环[6,6]系统或排列为桥连系统例如二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷。螺环部分也包括在本定义的范围内。单环碳环的实例包括，但不限于，环丙基、环丁基、环戊基、环戊-1-烯-1-基、环戊-2-烯-1-基、环戊-3-烯-1-基、环己基、环己-1-烯-1-基、环己-2-烯-1-基、环己-3-烯-1-基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基、环十二烷基等。碳环基任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。
“芳基”表示具有6-20个碳原子(C6-C20)的一价芳香烃基，其通过如下得到：由母体芳香环系中的一个碳原子除去一个氢原子。一些芳基在示例性结构中表示为“Ar”。芳基包括以下二环基团，其含有与饱和环、部分不饱和环或芳香碳环稠合的芳环。典型的芳基包括，但不限于，由苯(苯基)、取代的苯、萘、蒽、联苯、茚、茚满、1,2-二氢萘、1,2,3,4-四氢萘等得到的基团。芳基可任选独立地被本文所述的一个或多个取代基取代。
“亚芳基”表示具有6-20个碳原子(C6-C20)的二价芳香烃基，其通过如下得到：由母体芳香环系中的两个碳原子除去两个氢原子。一些亚芳基在示例性结构中表示为“Ar”。亚芳基包括以下二环基团，其含有与饱和环、部分不饱和环或芳香碳环稠合的芳环。典型的亚芳基包括，但不限于，由苯(亚苯基)、取代的苯、萘、蒽、联苯、茚、茚满、1,2-二氢萘、1,2,3,4-四氢萘等得到的基团。亚芳基可任选地被本文所述的一个或多个取代基取代。
术语“杂环”和“杂环基”在本文中可互换使用且是指具有3至约20个环原子的饱和或部分不饱和(即在环中具有一个或多个双键和/或叁键)的碳环基团，其中至少一个环原子为选自氮、氧、磷和硫的杂原子，其余环原子为C，其中一个或多个环原子任选独立地被一个或多个下述取代基取代。杂环可为具有3-7个环成员(2-6个碳原子及1-4个选自N、O、P和S的杂原子)的单环或具有7-10个环成员(4-9个碳原子及1-6个选自N、O、P和S的杂原子)的二环(例如二环[4,5]系统、二环[5,5]系统、二环[5,6]系统或二环[6,6]系统)。杂环参见Paquette,Leo A.；“Principles of Modern Heterocyclic Chemistry”(W.A.Benjamin,New York,1968)(特别是第1、3、4、6、7和9章)；“TheChemistry of Heterocyclic Compounds,A series of Monographs”(John Wiley&Sons,New York,1950至今)(特别是第13、14、16、19和28卷)；及J.Am.Chem.Soc.(1960)82:5566。“杂环基”还包括杂环基与饱和环、部分不饱和环、芳香碳环或芳香杂环稠合的基团。杂环的实例包括，但不限于，吗啉-4-基、哌啶-1-基、哌嗪基、2-氧代-哌嗪-4-基、3-氧代-哌嗪-4-基、吡咯烷-1-基、硫吗啉-4-基、S,S-二氧代硫吗啉-4-基、氮杂环辛烷-1-基(azocan-1-基)、氮杂环丁烷-1-基、八氢吡啶并[1,2-a]吡嗪-2-基、[1,4]二氮杂环庚-1-基、吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫吗啉代、硫杂氧杂环己基、哌嗪基、高哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧杂氮杂基、二氮杂基、硫杂氮杂基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1,3-二氧杂环戊基、吡唑啉基、二硫杂环己基、二硫杂环戊基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3-氮杂二环[4.1.0]庚基、氮杂二环[2.2.2]己基、3H-吲哚基、喹嗪基和N-吡啶基脲基。螺环部分也包括在该定义的范围内。其中2个环原子取代有氧代(＝O)部分的杂环基的实例为嘧啶酮基和1,1-二氧代-硫吗啉基。本申请杂环基任选独立地被本文所述的一个或多个取代基取代。
术语“杂芳基”是指呈5、6或7元环形式的一价芳香基团且包括具有5-20个原子的稠合环系(其中至少一个环是芳香的)，所述杂芳基含有独立选自氮、氧和硫的一个或多个杂原子。杂芳基的实例为吡啶基(包括，例如2-羟基吡啶基)、咪唑基、咪唑并吡啶基、嘧啶基(包括，例如4-羟基嘧啶基)、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁二唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、三唑基、噻二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、二氮杂萘基和呋喃并吡啶基。杂芳基任选独立地被本文所述的一个或多个取代基取代。
杂环基或杂芳基在可行的情况下可经碳连接或经氮连接的。例如但不限于此，经碳连接的杂环基或杂芳基在以下位置来连接：吡啶的2、3、4、5或6位；哒嗪的3、4、5或6位；嘧啶的2、4、5或6位；吡嗪的2、3、5或6位；呋喃、四氢呋喃、噻吩、吡咯或四氢吡咯的2、3、4或5位；噁唑、咪唑或噻唑的2、4或5位；异噁唑、吡唑或异噻唑的3、4或5位；氮杂环丙烷的2或3位；氮杂环丁烷的2、3或4位；喹啉的2、3、4、5、6、7或8位；或异喹啉的1、3、4、5、6、7或8位。
例如但不限于此，经氮连接的杂环基或杂芳基在氮杂环丙烷、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、二氢吲哚或1H-吲唑的1位连接；在异吲哚或异二氢吲哚的2位连接；在吗啉的4位连接；和在咔唑或β-咔啉的9位连接。
术语“治疗”是指治疗性治疗和预防性措施，其中目的是预防或减缓(减轻)不期望的生理学变化或障碍，例如癌的发展或扩散。出于本发明目的，有益或期望的临床结果包括但不限于缓解症状、降低疾病程度、稳定的(即不恶化的)疾病状态、延迟或减缓疾病进展、改善或缓和疾病状态及好转(部分好转或完全好转)，无论是可检测的还是不可检测的。“治疗”还可表示与未接受治疗的预期存活相比延长的存活。需要治疗的那些对象包括已患所述病症或障碍的那些对象及易患所述病症或障碍的那些对象或有待预防所述病症或障碍的那些对象。
短语“治疗有效量”表示(i)本发明化合物治疗或预防具体疾病、病症或障碍的量；(ii)本发明化合物削弱、改善或消除具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的量；或(iii)本发明化合物预防或延迟具体疾病、病症或障碍的一种或多种症状的发作的量。对于癌症，治疗有效量的药物可减小癌细胞数目；减小肿瘤尺寸；抑制(即在一定程度上减缓且优选为停止)癌细胞浸润到周围器官中；抑制(即在一定程度上减缓且优选为停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；和/或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。若药物可预防癌细胞生长和/或杀死已有癌细胞，则其可为细胞生长抑制性和/或细胞毒性的。对于癌症治疗，效力可例如通过评价疾病进展时间(TTP)和/或确定应答率(RR)来测量。
术语“癌症”是指或描述哺乳动物中通常以细胞生长失调为特征的生理学状态。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括，但不限于癌瘤、淋巴瘤、母细胞瘤、肉瘤及白血病或淋巴恶性肿瘤。上述癌症的更具体实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)；肺癌，包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞状细胞癌；腹膜癌；肝细胞癌；胃癌或胃部癌症，包括胃肠癌；胰腺癌；成胶状物细胞瘤；宫颈癌；卵巢癌；肝癌；膀胱癌；肝部癌症；乳腺癌；结肠癌；直肠癌；结肠直肠癌；子宫内膜癌或子宫癌；唾液腺癌；肾癌或肾部癌症；前列腺癌；外阴癌；甲状腺癌；肝部癌瘤；肛门癌；阴茎癌；及头颈癌。
“化疗剂”为可用于治疗癌症的化合物，无论作用机理如何。化疗剂的类别包括，但不限于：烷化剂、抗代谢药、纺锤体毒性植物生物碱、细胞毒性/抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、抗体、光敏剂和激酶抑制剂。化疗剂包括在“靶向治疗”和常规化学治疗中使用的化合物。化疗剂的实例包括：厄洛替尼(,Genentech/OSI Pharm.)、多西他赛(,Sanofi-Aventis)、5-FU(氟尿嘧啶,5-氟尿嘧啶,CAS No.51-21-8)、吉西他滨(,Lilly)、PD-0325901(CAS No.391210-10-9,Pfizer)、顺铂(顺式-二胺,二氯化铂(II),CAS No.15663-27-1)、卡铂(CAS No.41575-94-4)、紫杉醇(,Bristol-Myers Squibb Oncology,Princeton,N.J.)、曲妥珠单抗(,Genentech)、替莫唑胺(4-甲基-5-氧代-2,3,4,6,8-五氮杂二环[4.3.0]壬-2,7,9-三烯-9-甲酰胺,CAS No.85622-93-1,,,Schering Plough)、他莫昔芬((Z)-2-[4-(1,2-联苯基丁-1-烯基)苯氧基]-N,N-二甲基乙胺,)、多柔比星(),Akti-1/2,HPPD和雷帕霉素。
化疗剂的其它实例包括：奥沙利铂(,Sanofi)、硼替佐米(,Millennium Pharm.)、舒尼替尼(,SU11248,Pfizer)、来曲唑(,Novartis)、甲磺酸伊马替尼(,Novartis)、XL-518(MEK抑制剂,Exelixis,WO 2007/044515)、ARRY-886(MEK抑制剂,AZD6244,Array BioPharma,Astra Zeneca)、SF-1126(PI3K抑制剂,Semafore Pharmaceuticals)、BEZ-235(PI3K抑制剂,Novartis)、XL-147(PI3K抑制剂,Exelixis)、PTK787/ZK 222584(Novartis)、氟维司群(,AstraZeneca)、亚叶酸、雷帕霉素(西罗莫司,,Wyeth)、雷帕霉素类似物、mTOR抑制剂例如依维莫司、MEK抑制剂(GDC-0973)、Bcl-2抑制剂例如navitoclax(ABT-263)或ABT-199)、拉帕替尼(,GSK572016,Glaxo Smith Kline)、lonafarnib(SARASARTM,SCH66336,Schering Plough)、索拉非尼(,BAY43-9006,Bayer Labs)、吉非替尼(,AstraZeneca)、伊立替康(,CPT-11,Pfizer)、tipifarnib(ZARNESTRATM,Johnson&Johnson)、ABRAXANETM(不含有Cremophor)、紫杉醇的白蛋白工程化纳米粒制剂(AmericanPharmaceutical Partners,Schaumberg,Il)、vandetanib(rINN,ZD6474,,AstraZeneca)、苯丁酸氮芥、AG1478、AG1571(SU 5271；Sugen)、temsirolimus(,Wyeth)、pazopanib(GlaxoSmithKline)、canfosfamide(,Telik)、塞替派和环磷酰胺()；烷基磺酸酯，例如白消安、英丙舒凡和哌泊舒凡；氮杂环丙烷类，例如benzodopa、卡巴醌、meturedopa和uredopa；乙撑亚胺类和methylamelamine类，包括六甲蜜胺、三乙撑蜜胺、三亚乙基磷酰胺、三亚乙基硫代磷酰胺和trimethylomelamine；番荔枝内酯(acetogenin)类(尤其是bullatacin和bullatacinone)；喜树碱(包括合成性类似物拓扑替康)；苔藓抑素；callystatin；CC-1065(包括其阿多来新、卡折来新和比折来新合成性类似物)；cryptophycin类(特别是cryptophycin 1和cryptophycin 8)；多拉司他汀；多卡米星(包括合成性类似物KW-2189和CB1-TM1)；eleutherobin；pancratistatin；sarcodictyin；spongistatin；氮芥类，例如苯丁酸氮芥、萘氮芥、氯磷酰胺、雌莫司汀、异环磷酰胺、氮芥、盐酸氧化氮芥、美法仑、新氮芥、胆甾醇对苯乙酸氮芥、泼尼氮芥、曲磷胺和乌拉莫司汀；硝基脲类，例如卡莫司汀、氯脲菌素、福莫司汀、洛莫司汀、尼莫司汀和雷莫司汀；抗生素，例如烯二炔(enediyne)抗生素(例如卡奇霉素，包括卡奇霉素γ1I和卡奇霉素ωI1(AngewChem.Intl.Ed.Engl.(1994)33:183-186)；dynemicin，包括dynemicin A；二膦酸盐，例如氯膦酸盐；埃斯波霉素；新制癌菌素发色团和相关色蛋白烯二炔抗生素生色团(related chromoprotein enediyne antibiotic chromophore)、aclacinomysin类、放线菌素、authramycin、偶氮丝氨酸、博来霉素、放线菌素C、carabicin、洋红霉素、嗜癌霉素、色霉素、放线菌素D、柔红霉素、地托比星、6-重氮基-5-氧代-L-正亮氨酸、吗啉代-多柔比星、氰基吗啉代-多柔比星、2-吡咯啉子基-多柔比星、去氧多柔比星、表柔比星、依索比星、伊达比星、奈莫柔比星、麻西罗霉素、丝裂霉素类例如丝裂霉素C、麦考酚酸、诺拉霉素、橄榄霉素、培洛霉素、泊非霉素、嘌罗霉素、三铁阿霉素、罗多比星、链黑霉素、链佐星、杀结核菌素、乌苯美司、净司他丁和佐柔比星；抗代谢物，例如甲氨喋呤和5-氟尿嘧啶(5-FU)；叶酸类似物，例如二甲叶酸、甲氨喋呤、喋罗呤和三甲曲沙；嘌呤类似物，例如氟达拉滨、6-巯嘌呤、硫咪嘌呤和硫鸟嘌呤；嘧啶类似物，例如安西他滨、阿扎胞苷、6-氮杂尿苷、卡莫氟、阿糖胞苷、二脱氧尿苷、去氧氟尿苷、伊诺他滨和氟尿苷；雄激素，例如卡普睾酮、丙酸甲雄烷酮、环硫雄醇、美雄烷和睾内酯；抗肾上腺素药，例如氨鲁米特、米托坦和曲洛司坦；叶酸补充剂，例如亚叶酸；醋葡醛内酯；醛磷酰胺糖苷；氨基乙酰丙酸；恩尿嘧啶；安吖啶；bestrabucil；比生群；edatraxate；地磷酰胺；秋水仙胺；地吖醌；elfornithine；依利醋铵；epothilone；依托格鲁；硝酸镓；羟基脲；香菇多糖；lonidainine；maytansinoid类，例如美坦辛和安丝菌素；米托胍腙；米托蒽醌；mopidanmol；nitraerine；喷司他丁；蛋氨氮芥；吡柔比星；洛索蒽醌；鬼臼酸；2-乙基肼；丙卡巴肼；多糖复合物(complex)(JHS Natural Products,Eugene,OR)；雷佐生；根霉素；西佐喃；锗螺胺；替奴佐酸；三亚胺醌；2,2’,2”-三氯三乙胺；新月毒素(尤其是T-2毒素、verracurin A、杆孢菌素A和anguidine)；乌拉坦(urethan)；长春地辛；达卡巴嗪；甘露莫司汀；二溴甘露醇；二溴卫矛醇；哌泊溴烷；gacytosine；阿糖胞苷(“Ara-C”)；环磷酰胺；塞替派；6-硫代鸟嘌呤；巯嘌呤；甲氨喋呤；铂类似物，例如顺铂和卡铂；长春碱；依托泊苷(VP-16)；异环磷酰胺；米托蒽醌；长春新碱；长春瑞滨()；米托蒽醌；替尼泊苷；依达曲沙；柔红霉素；氨基喋呤；卡培他滨(,Roche)；伊班膦酸盐；CPT-11；拓扑异构酶抑制剂RFS2000；二氟甲基鸟氨酸(DMFO)；类视黄醇类，例如视黄酸；及上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。
以下物质也包括在“化疗剂”的定义中：(i)用于调节或抑制激素对肿瘤作用的抗激素药，例如抗雌激素药和选择性雌激素受体调节剂(SERM)，包括例如他莫昔芬(包括；柠檬酸他莫昔芬)、雷洛昔芬、屈洛昔芬、4-羟基他莫昔芬、曲沃昔芬、雷洛西芬、LY117018、奥那司酮和(柠檬酸托米芬)；(ii)抑制芳香酶(芳香酶在肾上腺中调节雌激素的产生)的芳香酶抑制剂，例如4(5)-咪唑类、氨鲁米特、(醋酸甲地孕酮)、(依西美坦；Pfizer)、formestanie、法倔唑、(伏氯唑)、(来曲唑；Novartis)和(阿那曲唑；AstraZeneca)；(iii)抗雄激素药，例如氟他胺、尼鲁米特、比卡鲁胺、亮丙瑞林和戈舍瑞林及曲沙他滨(1,3-二氧杂环戊烷核苷胞嘧啶类似物)；(iv)蛋白激酶抑制剂，例如MEK抑制剂(WO 2007/044515)；(v)脂质激酶抑制剂；(vi)反义寡核苷酸，特别是抑制异常细胞增殖所涉及的信号传导途径中基因表达的那些反义寡核苷酸，例如PKC-α、Ralf和H-Ras，例如oblimersen(,GentaInc.)；(vii)核酶，例如VEGF表达抑制剂(例如)和HER2表达抑制剂；(viii)疫苗，例如基因治疗疫苗，例如、和；rIL-2；拓扑异构酶1抑制剂，例如；和rmRH；(ix)抗血管生成药，例如贝伐单抗(,Genentech)；及上述任何物质的药用盐、酸和衍生物。
治疗性抗体也包括在“化疗剂”的定义中，例如阿仑单抗()、贝伐单抗(,Genentech)；西妥昔单抗(,Imclone)；帕尼单抗(,Amgen)、利妥昔单抗(,Genentech/BiogenIdec)、培妥单抗(pertuzumab)(OMNITARGTM,2C4,Genentech)、曲妥单抗(,Genentech)、托西莫单抗(Bexxar,Corixia,GlaxoSmithKline)。
具有作为化疗剂的治疗潜力而与本发明的式I化合物联用的人化单克隆抗体包括阿仑珠单抗、apolizumab、aselizumab、atlizumab、bapineuzumab、贝伐珠单抗、莫比伐单抗(bivatuzumab mertansine)、cantuzumab mertansine)、西利珠单抗、certolizumab pegol、cidfusituzumab、cidtuzumab、达克珠单抗、eculizumab、依法利珠单抗、依帕珠单抗、erlizumab、非维珠单抗、fontolizumab、奥吉妥单抗、奥英妥单抗(inotuzumab ozogamicin)、ipilimumab、labetuzumab、lebrikizumab、林妥珠单抗、matuzumab、美泊利单抗、motavizumab、motovizumab、那他珠单抗、nimotuzumab、nolovizumab、numavizumab、ocrelizumab、奥马珠单抗、帕利珠单抗、pascolizumab、pecfusituzumab、pectuzumab、培妥单抗、pexelizumab、ralivizumab、ranibizumab、reslivizumab、reslizumab、resyvizumab、罗维珠单抗、鲁利单抗、西罗珠单抗、siplizumab、sontuzumab、tacatuzumab tetraxetan、tadocizumab、talizumab、tefibazumab、tocilizumab、toralizumab、曲妥珠单抗、tucotuzumab西莫白介素、tucusituzumab、umavizumab、urtoxazumab和visilizumab。
“代谢物”为通过具体化合物或其盐的体内代谢而产生的产物。化合物的代谢物可使用本领域已知的常规技术来鉴定且它们的活性可使用本文所述的试验来确定。上述产物可源于例如对所给药的化合物进行的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶裂解等。因此，本发明包括本发明化合物的代谢物，包括通过以下方法而产生的化合物，所述方法包括使本发明式I化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。
术语“包装说明书”是指通常包括在治疗产品的市售包装中的说明书，其含有关于适应症、用法、剂量、给药、禁忌症和/或注意事项的信息，这些信息涉及上述治疗产品的使用。
术语“手性”是指具有镜像配对体(mirror image partner)不可重叠性的分子，而术语“非手性”是指可与其镜像配对体重叠的分子。
术语“立体异构体”是指具有相同的化学组成但原子或基团的空间排列不同的化合物。
“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心且其分子不互为镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质例如熔点、沸点、光谱性质和反应性。非对映异构体的混合物可通过高分辨率分析操作例如电泳和色谱来分离。
“对映异构体”是指化合物的互为不可重叠镜像的两种立体异构体。
本申请使用的立体化学定义和常识大体符合S.P.Parker,Ed.,McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill BookCompany,New York；和Eliel,E.and Wilen,S.,“Stereochemistry of OrganicCompounds”,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994。本发明化合物可含有不对称中心或手性中心，因此以不同的立体异构形式存在。本发明意在包括本发明化合物的所有立体异构形式，包括但不限于非对映异构体、对映异构体和阻转异构体(atropisomer)及它们的混合物例如外消旋混合物。多种有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有使平面偏振光的平面发生旋转的能力。当描述具有光学活性的化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子就其手性中心而言的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于指定化合物使平面偏振光发生旋转的符号，其中(-)或l表示化合物是左旋的。前缀为(+)或d的化合物是右旋的。对于所给定的化学结构，这些立体异构体除互为镜像外是相同的。具体的立体异构体也可称为对映异构体且上述异构体的混合物通常称为对映异构体的混合物。对映异构体的50:50混合物称为外消旋混合物或外消旋体，当化学反应或方法不具有立体选择性或立体特异性时，可出现所述外消旋混合物或外消旋体。术语“外消旋混合物”和“外消旋体”是指两种对映异构物质的等摩尔混合物，其不具有光学活性。对映异构体可以通过手性分离方法如超临界液相色谱(SFC)从外消旋混合物中分离。分离的对映异构体在手性中心处的构象的制定可以是暂定的，并且出于解释目的描绘在表1结构中，同时等待立体化学确定，如X射线晶体学数据。
术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指具有不同能量的可通过低能垒互相转化的结构异构体。例如，质子互变异构体(也称为质子转移互变异构体)包括通过质子的迁移来进行的互相转化，例如酮-烯醇异构化和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些成键电子的重组来进行的互相转化。
术语“药学上可接受的盐”表示非生物学上的或以其它方式不利的盐。药学上可接受的盐包括酸加成盐和碱加成盐。术语“药学上可接受的”表示物质或组合物必须与制剂所包含的其它成分和/或用其治疗的哺乳动物在化学上和/或在毒理学上是相容的。
术语“药学上可接受的酸加成盐”表示那些与无机酸或有机酸形成的药学上可接受的盐，无机酸如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸，有机酸选自脂肪族酸、环脂族酸、芳香族酸、芳脂族酸、杂环族酸、羧酸和磺酸类有机酸，如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡萄糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、双羟萘酸(embonicacid)、苯基乙酸、甲磺酸、乙磺酸、对甲苯磺酸和水杨酸。
术语“药学上可接受的碱加成盐”表示那些与有机碱或无机碱形成的药学上可接受的盐。可接受的无机碱包括钠、钾、铵、钙、镁、铁、锌、铜、镁和铝的盐。从药学上可接受的有机无毒碱衍生的盐包括伯胺、仲胺和叔胺、取代胺(包括天然存在的取代胺、环状胺和碱离子交换树脂)如异丙胺、三甲基胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙基氨基乙醇、三甲胺、二环己基胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明，胆碱，甜菜碱，乙二胺、葡萄糖胺、甲基葡糖胺、可可碱，嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶和聚胺树脂的盐。
“溶剂合物”是指一个或多个溶剂分子和本发明化合物的缔合物或复合物。形成溶剂合物的溶剂的实例包括，但不限于，水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。
术语“EC50”指半数最大有效浓度，并表示获得体内最大具体作用的50％时所需的具体化合物的血浆浓度。
术语“Ki”是抑制常数并表示特定抑制剂对受体的绝对结合亲和力。其使用竞争性结合测定进行测量并且等于特定抑制剂在没有竞争性配体(如放射性配体)存在时占据50％受体时的浓度。Ki值可以对数转化成pKi值(-log Ki)，其中更高的值在指数上表示更大的效力。
术语“IC50”是半数最大抑制浓度，并表示获得体外生物过程50％抑制所需的具体化合物的浓度。IC50值可以在对数上转化为pIC50值(-log IC50)，其中更大的值在指数上表示更大的效力。IC50值不是绝对数值，而是依赖于实验条件如所使用的浓度，且可以使用Cheng-Prusoff方程转化为绝对抑制常数(Ki)(Biochem.Pharmacol.(1973)22:3099)。
术语“本发明化合物”和“式I化合物”包括式I化合物及其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物、药用盐和前药。
本申请给出的任何化学式或结构式(包括式I化合物)还意在表示上述化合物的水合物、溶剂合物和多晶型物及它们的混合物。
本申请给出的任何化学式或结构式(包括式I化合物)还意在表示所述化合物的未标记的形式及经同位素标记的形式。经同位素标记的化合物具有本申请给出的化学式所描述的结构，不同的是，一个或多个原子被具有所选原子量或质量数的原子代替。可引入到本发明化合物中的同位素的实例包括氢、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，例如但不限于2H(氘,D)、3H(氚)、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl和125I。本发明包括各种经同位素标记的本发明化合物，例如放射性同位素例如3H、13C和14C被引入到其中的那些本发明化合物。上述经同位素标记的化合物可用于代谢研究、反应动力学研究、检测或成像技术例如正电子发射断层扫描术(PET)或单光子发射计算机断层扫描术(SPECT)包括药物或底物组织分布测定或对患者进行的放射性治疗。经氘标记或代替的本发明治疗性化合物可具有改善的DMPK(药物代谢和药物动力学)性质，包括吸收、分布、代谢和排泄(ADME)。用较重的同位素例如氘进行的代替可由于较好的代谢稳定性而得到一些治疗优点(例如体内半衰期的增加或剂量需要的降低)。经18F标记的化合物可用于PET或SPECT研究。经同位素标记的本发明化合物及其前药通常可如下制备：实施下述方案或实施例和制备中公开的操作且用容易得到的经同位素标记的试剂代替未经同位素标记的试剂。另外，用较重的同位素特别是氘(即2H或D)进行的代替可由于较好的代谢稳定性而得到一些治疗优点(例如体内半衰期的增加或剂量需要的降低或治疗指数的改善)。应该理解的是，本申请中的氘被认为是式(I)化合物中的取代基。上述较重的同位素特别是氘的浓度可通过同位素富集因子来定义。在本发明化合物中，未特别指定为具体同位素的任何原子意在表示该原子的任何稳定的同位素。除非另有说明，当某个位置被具体指定为“H”或“氢”时，应该理解的是，所述位置具有浓度为氢的天然丰度同位素组成的氢。因此，在本发明化合物中，具体指定为氘(D)的任何原子意在表示氘。
环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物
本发明提供式I的环醚吡唑-4-基-杂环基-甲酰胺化合物，包括式Ia-i及其药用制剂，其潜在地可用于治疗由Pim激酶调控的疾病、病症和/或障碍。
式I化合物具有以下结构：
及其立体异构体、几何异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：
R1选自H、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C6-C20芳基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C1-C20杂芳基和-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)；
R2选自以下结构：
其中波浪线表示连接位点；
R3独立地选自F、Cl、Br、I、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-CH＝CH2、-CH＝C(CH3)2、＝CH2、-CH2F、-CHF2、-CF3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2CH2NH2、-CH2CHCH2NH2、-CH2CH(CH3)NH2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH(CH3)2、-C(CH3)2CH2OH、-CH2CH2SO2CH3、-CN、-CO2H、-COCH3、-COCH2NH2、-CO2CH3、-CO2C(CH3)3、-COCH(OH)CH3、-CONH2、-CONHCH3、-CON(CH3)2、-C(CH3)2CONH2、-NO2、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCH2CHF2、-NHCH2CF3、-NHCH2CH2OH、-NHCOCH3、-N(CH3)COCH3、-NHC(O)OCH2CH3、-NHC(O)OCH2Cl3、-NHC(O)OC6H5、-NHS(O)2CH3、-N(CH3)C(CH3)2CONH2、-N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3、＝O、-OH、-OCH3、-OCHF2、-OCH2F、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、-OCH2CH(CH3)2、-OC(CH3)3、-S(O)2N(CH3)2、-SCH3、-CH2OCH3、-S(O)2CH3、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环丁烷基、氧杂环丁烷-3-基甲基氨基、(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)甲基氨基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、(哌啶-4-基)乙基)、吡喃基、(哌啶-4-基甲基)、吗啉代甲基和吗啉代；
或其中两个孪位R3基团形成选自以下的螺环：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯烷基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、哌嗪基或哌啶基环，其中所述螺环任选独立地被选自以下的一个或多个基团取代：-F、-OH、＝O、-CH3、-NH2、-CH2F、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2和-CF3；
或其中两个邻位R3基团形成五元或六元杂环基稠合环，其中所述杂环基稠合环任选地被选自以下的一个或多个基团所取代：-F、-OH、＝O、-CH3、-NH2、-CH2F、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2和-CF3；
n为0、1、2、3、4、5或6；
X选自以下结构：
其中波浪线表示连接位点；
R4独立地为H、F、-CH3或-NH2；和
R5选自H、Cl、Br、C1-C12烷基、-O-(C1-C12烷基)、-(C1-C12亚烷基)-(C3-C12碳环基)、-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)、-(C2-C8亚烯基)-(C3-C12碳环基)、-(C2-C8亚烯基)-(C2-C20杂环基)、C6-C20芳基、-(C6-C20亚芳基)-(C2-C20杂环基)、-(C6-C20亚芳基)-(C6-C20亚芳基)、-(C6-C20亚芳基)-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)、-(C6-C20亚芳基)-O-(C2-C20杂环基)、-(C6-C20亚芳基)-O-(C1-C12烷基)、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C1-C20杂芳基、-(C1-C20杂芳基)-(C2-C20杂环基)和-(C1-C20杂芳基)-(C1-C12烷基)；其中烷基、烯基、炔基、亚烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选独立地被选自以下的一个或多个基团取代：F、Cl、Br、I、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH2NH2、-CH2CH2NH2、-CH2CHCH2NH2、-CH2CH(CH3)NH2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH(CH2OH)2、-C(CH2OH)3、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH(CH3)2、-C(CH3)2CH2OH、-CH2CH2SO2CH3、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CO2H、-COCH3、-COCH(CH3)2、-CO2CH3、-CO2C(CH3)3、-COCH(OH)CH3、-CONH2、-CONHCH3、-CON(CH3)2、-C(CH3)2CONH2、-NO2、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCOCH3、-N(CH3)COCH3、-NHS(O)2CH3、-N(CH3)C(CH3)2CONH2、-N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3、＝O、-OH、-OCH3、-OCF3、-OCH(CH3)2、-S(O)2N(CH3)2、-SCH3、-CH2OCH3、-S(O)2CH3、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环丁烷基、苯基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、(哌啶-4-基)乙基)、吡喃基、(哌啶-4-基甲基)、吗啉代甲基和吗啉代。
式I化合物的示例性实施方案包括其中R1为H、C1-C12烷基(包括-CH3、-CH2CH3)、-CH2CHF2和-CH2CF3、C3-C12碳环基或-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)(包括氧杂环丁烷-3-基甲基)。
式I化合物的示例性实施方案包括其中R2具有以下结构：
式I化合物的示例性实施方案包括其中R3独立地选自F、Cl、-OH、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCH2CHF2、-NHCH2CF3、-CH2NHCH3和-OCH3；和n为1、2或3。
式I化合物的示例性实施方案包括其中R4为-NH2。
在具体实施方案中，式R4为-H。
式I化合物的示例性实施方案包括其中R5为C6-C20芳基(包括被一个或多个F取代的苯基)。
式I化合物的示例性实施方案包括式Ia-d的结构：
生物学评估
通过大量的直接和间接检测方法可以确定式I化合物的Pim激酶活性。测定了本文描述的具体示例性化合物的Pim激酶(包括亚型Pim-1、Pim-2和Pim-3)的结合活性(实施例901)以及针对肿瘤细胞的体外活性(实施例902)。本发明的具体示例性化合物具有小于约1微摩尔(μM)的Pim结合活性IC50值。本发明的具体化合物具有小于约1微摩尔(μM)的基于肿瘤细胞的活性EC50值，例如对于细胞系BaF3(鼠白介素-3依赖性原B细胞系)，其用作评估激酶致癌基因的潜能和下游信号的模型系统("Ba/F3cells and their use inkinase drug discovery"，Warmuth,M,等人，(2007年1月)Current Opinion inOncology，卷19(l):55-60)，以及对于MM1.S(多发性骨髓瘤细胞系)，其用作评估Pim抑制剂在治疗多发性骨髓瘤患者中疗效的模型系统(Greenstein等人，(2003)Exper.Hematol.31(4):271-282)。在实施例901和902所述的测试中具有小于1μM的Ki/IC50/EC50的式I化合物可用作治疗性的Pim激酶抑制剂(Pim-1、Pim-2和/或Pim-3)。
hERG(人Ether-à-go-go-相关基因)是编码已知为Kv11.1(钾离子通道的α亚单位)的蛋白的基因(KCNH2)。这个离子通道(有时候简单表示为“hERG”)最有名的是它对心脏电活动的贡献，其协调心脏的跳动(即，所述hERG通道介导心脏动作电位的复极化IKr电流)。当通过施用药物或经一些家族的罕见突变使得这个通道传导电流穿过细胞膜的能力被抑制或破坏时(Hedley PL等人，(2009)Human Mutation 30(11):1486-511)，这可能导致潜在的致命病症，该病症称为长QT综合征；许多临床上成功的上市药物已经具有抑制hERG的倾向，但却产生了猝死的并发风险，猝死为副作用，这就使得hERG抑制成为药物研发过程中必须避免的重要非靶标(anti target)(SanguinettiMC，Tristani-Firouzi M(March 2006)Nature 440(7083):463-9)。hERG也与以下有关：调控神经系统的一些细胞的功能(Chiesa N等人，(June 1997)J.Physiol.(Lond.).501(Pt 2)(2):313-8；Overholt JL，等人，(2000)Adv.Exp.Med.Biol.475:241-8)，以及建立并维持白血病细胞中的癌症样特征。按实施例903进行hERG测定。
根据本发明的方法制备和表征了表1a、1b和1c中的示例性式I化合物，并测试了它们对Pim激酶的抑制，所述化合物具有以下结构和相应的名称(ChemBioDraw Ultra,Version 11.0,CambridgeSoft Corp.,Cambridge MA)。表1中具有手性原子的一些化合物还没有完全表征出其立体化学。立体化学或相关其他基团的立体化学关系的暂定指定可以显示在结构中。立体异构体的分离手段和表征数据在实施例中给出。
表1a.
表1b.
表1c
本发明包括组合物(例如，药物组合物)，其包含式I化合物和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，和载体(药用载体)。本发明还包括组合物(例如，药物组合物)，其包含式I化合物和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，和载体(药用载体)，还包含第二化疗剂(如本申请所述的那些)。本发明组合物可用于抑制异常细胞生长或治疗哺乳动物(例如，人)中的过增殖性障碍如癌症。例如，本发明化合物和组合物可用于治疗哺乳动物(例如，人)中的多发性骨髓瘤、淋巴瘤、急性髓性白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、胰腺癌和/或结直肠癌。
本发明包括抑制异常细胞生长或治疗哺乳动物(例如，人)中的过增殖性障碍如癌症的方法，其包括向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物。例如，本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的多发性骨髓瘤、淋巴瘤、急性髓性白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、胰腺癌和/或结直肠癌的方法，其包括向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物(和/或其溶剂合物、水合物和/或盐)或其组合物。
本发明包括抑制异常细胞生长或治疗哺乳动物(例如，人)中的过增殖性障碍如癌症的方法，其包括与第二化疗剂(如本申请所述的那些)组合向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物。例如，本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的多发性骨髓瘤、淋巴瘤、急性髓性白血病、前列腺癌、乳腺癌、肝细胞癌、胰腺癌和/或结直肠癌的方法，其包括与第二化疗剂(如本申请所述的那些)组合向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物。
本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的淋巴瘤的方法，其包括单独地或与第二化疗剂组合地向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物，所述第二化疗剂例如抗-B-细胞抗体治疗药物(例如，和/或dacetuzumab)、吉西他滨、皮质类固醇(例如，泼尼松龙和/或地塞米松)、化学治疗药物混合剂(cocktail)(例如，CHOP(环磷酰胺、多柔比星、长春新碱、泼尼松龙)和/或ICE(isfosfamide、环磷酰胺、依托泊苷))、生物制品和化学治疗药物的组合(例如，R-Gem和/或D-R-Gem)、Akt抑制剂、PI3K抑制剂(例如，GDC-0941(Genentech)和/或GDC-0980(Genentech))、雷帕霉素、雷帕霉素类似物、mTOR抑制剂例如依维莫司或西罗莫司、MEK抑制剂(GDC-0973)和Bcl-2抑制剂(ABT-263或ABT-199)。
本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的多发性骨髓瘤的方法，其包括单独地或与第二化疗剂组合地向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物，所述第二化疗剂例如美法仑、“酰亚胺(免疫调节剂，例如，沙立度胺、来那度胺，和/或pomolidamide)、皮质类固醇(例如，地塞米松和/或泼尼松龙)，和硼替佐米或其它蛋白酶体抑制剂。
本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的多发性骨髓瘤、慢性淋巴细胞白血病(CLL)或急性髓性白血病(AML)的方法，其包括单独地或与第二化疗剂组合地向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物，所述第二化疗剂例如阿糖胞苷(araC)、蒽环类抗生素(例如，柔红霉素和/或伊达比星)、抗-髓性抗体治疗药物(例如，SGN-33)、抗-髓性抗体-药物缀合物(例如，)。
本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的慢性淋巴细胞白血病(CLL)的方法，其包括单独地或与第二化疗剂组合地向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物，所述第二化疗剂例如氟达拉滨、环磷酰胺、抗-B-细胞抗体治疗药物(例如，和/或dacetuzumab)。
本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的慢性髓性白血病(CML)的方法，其包括单独地或与第二化疗剂组合地向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物，所述第二化疗剂例如BCR-abl抑制剂(例如，伊马替尼、尼洛替尼，和/或达沙替尼(dasatinib))。
本发明包括治疗哺乳动物(例如，人)中的骨髓增殖异常疾病(MDS)和骨髓增殖病(包括真性红细胞增多症(PV)、原发性血小板增多(ET)或骨髓纤维化(MF))的方法，其包括单独地或组合地向所述哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，和/或其溶剂合物、水合物和/或盐，或其组合物。
本发明包括使用本发明化合物体外、原位和体内诊断或治疗哺乳动物细胞、组织或相关病理状态的方法。
本发明化合物(下文称为“活性化合物”)的给药可通过能够将所述化合物递送至作用位点的任何方法进行。这些方法包括口服途径、十二指肠内途径、肠胃外注射(包括静脉内、皮下、肌内、血管内或输注)、局部给药、吸入给药和直肠给药。
给药的活性化合物的量将取决于治疗的受试者、障碍或病症的严重性、给药速率、化合物的处置(disposition)和处方医师的考虑。然而，以单一剂量或分开的剂量，有效剂量为约0.001至约100mg/kg体重/天，优选约1至约35mg/kg/天。对于70kg的人，这将总计约0.05-7g/天，优选约0.05至约2.5g/天。在一些情况中，低于前述范围下限的剂量水平可足够，而在其它情况中，可使用更大的剂量而不会导致任何有害的副作用，条件是首先将这种较大剂量分成几个小剂量，用于在一天中给药。
活性化合物可作为单一疗法施用或者与一种或多种化学治疗药物(例如本申请所述的那些)组合施用。这种联合治疗可通过同时地、依次地或分开地给药单独的治疗组分来实现。
所述药物组合物可例如以适于口服给药的形式作为片剂、胶囊剂、丸剂、粉末剂、缓释制剂、溶液剂、混悬剂，以适于肠胃外注射的形式作为灭菌溶液剂、混悬剂或乳剂，以适于局部给药的形式作为软膏剂或乳膏剂，或者以适于直肠给药的形式作为栓剂。所述药物组合物可为适于单一给药前述剂量的单位剂量形式。所述药物组合物将包含常规药物载体或赋形剂和作为活性成分的本发明化合物。另外，它可包含其它医药或药用的药物、载体、辅助剂等。
示例性肠胃外给药形式包括式I化合物在灭菌含水溶液(例如，含水丙二醇或右旋糖溶液)中的溶液剂或混悬剂。如果希望，可将这种剂型合适地缓冲。
适合的药物载体包括惰性稀释剂或填充剂、水和各种有机溶剂。如果希望，药物组合物可含有另外的成分如矫味剂、粘合剂、赋形剂等。因此对于口服给药，可将含各种赋形剂如柠檬酸的片剂与各种崩解剂如淀粉、海藻酸和某些复合硅酸盐和与粘合剂如蔗糖、明胶和阿拉伯树胶一起使用。另外，润滑剂如硬脂酸镁、月桂基硫酸钠和滑石经常可用于制片用途。相似类型的固体组合物也可在软和硬的填充明胶胶囊中使用。因此，优选材料包括乳糖(lactose或milk sugar)和高分子量聚乙二醇。当口服给药需要含水混悬剂或酏剂时，可将其中的活性化合物与各种增甜或矫味剂、着色材料或染料和如果希望的话与乳化剂或助悬剂以及稀释剂如水、乙醇、丙二醇、丙三醇或其组合组合起来。
用特定量的活性化合物制备各种药物组合物的方法对于本领域技术人员而言是已知的，或将为显而易见的。例如，参见Remington’s PharmaceuticalSciences,Mack Publishing Company,Ester,Pa.,第15版(1975)。
式I化合物的给药
本发明式I化合物可通过适于待治疗的病症的任何途径来给药。合适的途径包括口服、胃肠外(包括皮下、肌内、静脉内、动脉内、皮内、鞘内和硬膜外)、经皮、直肠、经鼻、局部(包括口腔和舌下)、阴道、腹膜内、肺内和鼻内。对于局部免疫抑制治疗，所述化合物可通过损伤区给药(包括灌注或在移植前使移植物与抑制剂接触)来给药。应该理解的是，优选的途径可随例如接受者的情况而变化。当所述化合物口服给药时，可将其与药用载体或赋形剂一起配制成丸剂、胶囊剂、片剂等。当所述化合物胃肠外给药时，可如下所述将其与药用胃肠外媒介物一起配制且配制成单位剂量注射形式。
治疗人患者的剂量可为约10mg至约1000mg式I化合物。典型的剂量可为约100mg至约300mg所述化合物。剂量可每日给药一次(QID)、每日给药两次(BID)或更频繁地给药，这取决于具体化合物的药代动力学性质和药效学性质，包括吸收、分布、代谢和排泄。另外，毒性因素可影响剂量和给药方案。当口服给药时，丸剂、胶囊剂或片剂可每日或以更低的频率服用一段规定的时间。给药方案可重复多个治疗周期。
用式I化合物治疗的方法
本发明化合物可用于治疗过增殖性疾病、病症和/或障碍，所述过增殖性疾病、病症和/或障碍包括但不限于特征为Pim激酶(例如，Pim-1、Pim-2和Pim-3激酶)过表达的那些。相应地，本发明的另一方面包括治疗或预防可通过抑制Pim激酶来治疗或预防的疾病或病症的方法。在一个实施方案中，所述方法包括向需要的哺乳动物给药治疗有效量的式I化合物，或其立体异构体、几何异构体、互变异构体，或其药用盐。在一个实施方案中，用式I化合物和药用载体、辅助剂或媒介物治疗人患者，其中所述式I化合物以可检测地抑制Pim激酶活性的量存在。
可根据本发明方法治疗的癌症包括但不限于乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌症、食管癌、喉癌、成胶状物细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝癌以及胆道癌、肾癌、髓性障碍、淋巴性障碍、毛细胞癌、口腔癌和咽(口)癌、唇癌、舌癌、口癌、咽癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑癌和中枢神经系统癌症、霍奇金癌和白血病。
本发明的另一方面提供本发明化合物，其用于在患有本文所述的疾病或病症的哺乳动物例如人中治疗所述疾病或病症。本发明还提供本发明化合物在制备用于在患有本文所述的疾病和病症的温血动物例如哺乳动物例如人中治疗所述疾病和病症的药物中的用途。
药物制剂
为了使用式I化合物对哺乳动物(包括人)进行治疗性治疗(包括预防性治疗)，通常根据标准药学实践将其配制成药物组合物。本发明该方面提供药物组合物，其包含本发明化合物及药用稀释剂或载体。
典型的制剂通过将式I化合物与载体、稀释剂或赋形剂混合来制备。合适的载体、稀释剂和赋形剂是本领域技术人员公知的且包括以下物质：例如碳水化合物、蜡、水溶性聚合物和/或可溶胀性聚合物、亲水性物质或疏水性物质、明胶、油状物、溶剂、水等。所使用的具体载体、稀释剂或赋形剂将取决于应用本发明化合物的方式和目的。通常基于本领域技术人员认为给药于哺乳动物是安全的溶剂(GRAS)来选择溶剂。通常，安全溶剂为无毒性含水溶剂例如水和可在水中溶解或混溶的其它无毒性溶剂。合适的含水溶剂包括水、乙醇、丙二醇、聚乙二醇(例如PEG 400、PEG 300)等及它们的混合物。制剂还可包含以下物质中的一种或多种：缓冲剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、甜味剂、芳香剂、矫味剂和使药物(即本发明化合物或其药物组合物)具有优质外观或辅助药物产品(即药品)制备的其它已知添加剂。
制剂可使用常规溶解和混合操作来制备。例如，将大量药物物质(即本发明化合物或式I化合物的稳定化形式(例如与环糊精衍生物或其它已知复合剂在一起的复合物))在一种或多种上述赋形剂存在下溶于合适的溶剂中。通常将本发明化合物配制成药物剂型以提供可容易控制的药物剂量且使患者能够依从所开具的给药方案。
用于给药的药物组合物(或制剂)可按多种方式来包装，这取决于给药方法。通常，用于分配的制品包括容器，所述容器已在其中放置有呈合适形式的药物制剂。合适的容器是本领域技术人员公知的且包括以下容器：例如瓶(塑料瓶和玻璃瓶)、小袋、安瓿、塑料袋、金属筒等。容器还可包括防止不慎接触包装内含物的显窃启(tamper-proof)组件。另外，容器已在其上设置有描述容器内含物的标签。标签还可包括合适的注意事项。
可制备本发明化合物的药物制剂用于多种给药途径和类型。例如，具有所需纯度的式I化合物可任选与药用稀释剂、载体、赋形剂或稳定剂(Remington’s Pharmaceutical Sciences(1980)第16版,Osol,A.Ed.)混合成冻干制剂、研细粉末剂或含水溶液剂形式。配制可如下进行：在环境温度和合适的pH以所需纯度与生理学上可接受的载体(即在所使用的剂量和浓度时对接受者是无毒的载体)混合。制剂的pH主要取决于具体的用途和化合物的浓度，但范围可为约3至约8。在乙酸盐缓冲液中的pH为5的制剂是合适的实施方案。
用于本申请的本发明化合物优选为无菌的。具体地，用于体内给药的制剂必须是无菌的。上述无菌化通过用无菌滤膜进行过滤来容易地实现。
所述化合物通常可按固体组合物、冻干制剂或含水溶液剂形式贮存。
包含式I化合物的本发明药物组合物将以与良好医药实践一致的方式即量、浓度、时间安排、过程、媒介物和给药途径来配制、确定剂量和给药。在该背景下考虑的因素包括所治疗的具体障碍、所治疗的具体哺乳动物、个体患者的临床情况、障碍的原因、药物的递送位点、给药方法、给药的时间安排和医药实践者已知的其它因素。待给药的化合物的“治疗有效量”将取决于所考虑的上述因素且是预防、改善或治疗由凝血因子介导的障碍所需要的最小量。上述量优选低于对宿主具有毒性或使宿主显著较易于出血的量。
作为一般建议，胃肠外给药的式I化合物的最初药物有效量在每剂中将为约0.01-100mg/kg，即约0.1至20mg/kg患者体重/日，其中所使用的化合物的典型最初范围为0.3至15mg/kg/日。
可接受的稀释剂、载体、赋形剂和稳定剂在所使用的剂量和浓度时对接受者是无毒的且包括缓冲剂，例如磷酸盐、柠檬酸盐及其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和蛋氨酸；防腐剂(例如十八烷基二甲基苄基氯化铵；氯己双铵；苯扎氯铵、苄索氯铵；苯酚、丁醇或苄醇；对羟基苯甲酸烷基酯，例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；戊-3-醇；和间甲酚)；低分子量(少于约10个残基)多肽；蛋白质，例如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，例如聚乙烯基吡咯烷酮；氨基酸，例如甘氨酸、谷氨酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、二糖及其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，例如EDTA；糖，例如蔗糖、甘露醇、海藻糖或山梨醇；形成盐的抗衡离子，例如钠；金属复合物(例如Zn-蛋白质复合物)；和/或非离子型表面活性剂，例如TWEENTM、PLURONICSTM或聚乙二醇(PEG)。还可将活性药物成分包埋在例如通过凝聚技术或通过界面聚合而制备的微囊中，例如在胶体药物递送系统(例如脂质体、白蛋白微球、微乳、纳米粒和纳米囊)中或在巨乳液中分别为羟甲基纤维素或明胶微囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微囊。上述技术参见Remington’s Pharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.Ed.(1980)。
可制备式I化合物的持续释放制剂。持续释放制剂的合适实例包括固态疏水性聚合物的半透性基质，其含有式I化合物，所述基质以成形制品形式(例如膜或微囊)存在。持续释放基质的实例包括聚酯、水凝胶(例如聚(甲基丙烯酸2-羟基乙基酯)或聚(乙烯醇))、聚丙交酯(美国专利3,773,919)、L-谷氨酸和γ-乙基-L-谷氨酸的共聚物、不可降解的乙烯-乙酸乙烯基酯、可降解的乳酸-羟乙酸共聚物例如LUPRON DEPOTTM(由乳酸-羟乙酸共聚物和醋酸亮丙瑞林构成的注射用微球)和聚D-(-)-3-羟基丁酸。
所述制剂包括适于本申请所述给药途径的那些制剂。所述制剂可方便地以单位剂量形式存在且可通过药学领域公知的任何方法来制备。技术和制剂通常参见Remington’s Pharmaceutical Sciences(Mack Publishing Co.,Easton,PA)。上述方法包括对活性成分与构成一种或多种助剂的载体进行混合的步骤。通常，所述制剂如下制备：使活性成分与液态载体或微细分散的固态载体或与这两种载体均匀和密切地混合，然后按需对产品进行成形。
可将适于口服给药的式I化合物的制剂制备成离散的单位，例如各自含有预定量的式I化合物的丸剂、胶囊剂、扁囊剂或片剂。
压制片可如下制备：用合适的机器对活性成分进行压制，所述活性成分呈自由流动形式，例如粉末或颗粒，其任选混合有粘合剂、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、表面活性剂或分散剂。模制片可如下制备：用合适的机器对用惰性液态稀释剂润湿的粉末状活性成分的混合物进行模制。可任选对片剂进行包衣或压痕且任选进行配制以提供活性成分从所述片剂中的缓慢或控制释放。
可制备用于口服的片剂、含片剂、锭剂、水性或油状物性混悬剂、可分散的粉末剂或颗粒剂、乳剂、硬或软胶囊剂例如明胶胶囊剂、糖浆剂或酏剂。预期用于口服的式I化合物的制剂可根据药物组合物制备领域已知的任何方法来制备且上述组合物可含有包括甜味剂、矫味剂、着色剂和防腐剂在内的一种或多种物质以提供适口的制剂。含有与适于制备片剂的无毒的生理学上可接受的赋形剂混合在一起的活性成分的片剂是可接受的。这些赋形剂可为例如惰性稀释剂，例如碳酸钙或碳酸钠、乳糖、磷酸钙或磷酸钠；制粒剂和崩解剂，例如玉米淀粉或海藻酸；粘合剂，例如淀粉、明胶或阿拉伯胶；和润滑剂，例如硬脂酸镁、硬脂酸或滑石。片剂可不经包衣或可通过已知的技术(包括微囊化)来包衣以延迟在胃肠道中的崩解和吸收，由此提供历时较长时间的持续作用。例如，可使用时间延迟物质，例如单独的或与蜡在一起的单硬脂酸甘油状物酯或二硬脂酸甘油状物酯。
为了治疗眼部或其它外部组织例如嘴部和皮肤，所述制剂可按局部用软膏剂或乳膏剂形式来施用，其含有的活性成分(或多种活性成分)的量为例如0.075至20％w/w。当配制成软膏剂时，活性成分可与石蜡性或水可混溶性软膏基质一起使用。可选择地，活性成分可与水包油状物型乳膏基质一起配制成乳膏剂。
当需要时，乳膏基质中的水相可包括多元醇，即具有两个或更多个羟基的醇，例如丙二醇、丁-1,3-二醇、甘露醇、山梨醇、甘油状物和聚乙二醇(包括PEG 400)及它们的混合物。局部用制剂可按需包括促进活性成分吸收或渗透通过皮肤或其它作用区域的化合物。上述皮肤渗透促进剂的实例包括二甲基亚砜和相关类似物。
本发明乳剂中的油状物相可由已知的成分以已知的方式来构成。尽管所述相可仅包含乳化剂，但期望其包含至少一种乳化剂与脂肪或油状物或与脂肪和油状物两者的混合物。优选地，亲水性乳化剂与作为稳定剂的亲脂性乳化剂包括在一起。还优选包括油状物和脂肪两者。含有或不含有稳定剂(或多种稳定剂)的乳化剂(或多种乳化剂)一起构成所谓的乳化蜡且所述蜡与油状物和脂肪一起构成形成乳膏剂中的油状物性分散相的所谓的乳化软膏基质。适用于本发明制剂的乳化剂和乳剂稳定剂包括、十八烷基醇/十六烷基醇、苄醇、肉豆蔻醇、单硬脂酸甘油状物酯和月桂基硫酸钠。
式I化合物的水性混悬剂含有与适于制备水性混悬剂的赋形剂混合在一起的活性物质。上述赋形剂包括助悬剂，例如羧甲基纤维素钠、交联羧甲基纤维素、聚维酮、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、海藻酸钠、聚乙烯基吡咯烷酮、西黄蓍胶和阿拉伯胶；和分散剂或润湿剂，例如天然存在的磷脂(例如卵磷脂)、氧化烯与脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、氧化乙烯与长链脂肪醇的缩合产物(例如十七亚乙氧基十六烷基醇(heptadecaethyleneoxycetanol))、氧化乙烯与由脂肪酸和己糖醇酐(hexitolanhydride)衍生的偏酯(partial ester)的缩合产物(例如聚氧乙烯失水山梨醇单油状物酸酯(polyoxyethylene sorbitan monooleate))。水性混悬剂还可含有一种或多种防腐剂(例如对羟基苯甲酸乙酯或对羟基苯甲酸正丙酯)、一种或多种着色剂、一种或多种矫味剂和一种或多种甜味剂(例如蔗糖或糖精)。
式I化合物的药物组合物可呈无菌注射剂例如无菌注射用水性或油状物性混悬剂形式。该混悬剂可根据本领域已知的方法使用上述那些合适的分散剂或润湿剂和助悬剂来配制。无菌注射剂还可为在无毒的胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的无菌注射用溶液剂或混悬剂，例如在丁-1,3-二醇中的溶液剂或制备成冻干粉末剂。可使用的可接受的媒介物和溶剂包括水、林格溶液(Ringer’s溶液)和等渗氯化钠溶液。另外，无菌不挥发性油状物通常可用作溶剂或混悬介质。出于该目的，可使用任何温和的不挥发性油状物，包括合成的甘油状物一酯或甘油状物二酯。另外，脂肪酸例如油状物酸也可用于制备注射剂。
可与载体物质组合以制备单一剂量形式的活性成分的量将随所治疗的宿主和具体的给药模式而变化。例如，意在用于口服给药于人的定时释放制剂可含有约1至1000mg活性物质及合适和适宜量的载体物质，所述载体物质可占总组合物的约5至约95％(重量:重量)。可制备药物组合物以提供可容易测量的给药量。例如，意在用于静脉内输注的水性溶液剂可含有约3至500μg活性成分/毫升溶液，从而可进行速率为约30mL/hr的合适体积的输注。
适于胃肠外给药的制剂包括水性和非水性无菌注射溶液剂，其可含有抗氧化剂、缓冲剂、抑菌剂和使所述制剂与所预期的接受者的血液等渗的溶质；及水性和非水性无菌混悬剂，其可包含助悬剂和增稠剂。
适于局部给药于眼部的制剂还包括滴眼剂，其中将活性成分溶于或悬浮于合适的载体(尤其是用于活性成分的含水溶剂)中。存在于上述制剂中的活性成分的浓度优选为约0.5至20％w/w，例如约0.5至10％w/w，例如约1.5％w/w。
适于在口中局部给药的制剂包括糖锭剂，其含有处于矫味基质(通常为蔗糖和阿拉伯胶或西黄蓍胶)中的活性成分；锭剂，其含有处于惰性基质(例如明胶和甘油状物或蔗糖和阿拉伯胶)中的活性成分；和口腔洗剂，其包含处于合适的液态载体中的活性成分。
适于直肠给药的制剂可按含有合适基质(其包含例如可可脂或水杨酸酯)的栓剂形式存在。
适于肺内或经鼻给药的制剂具有例如范围为0.1至500微米的粒度(包括范围为0.1至500微米且增量微米数为例如0.5、1、30、35微米等的粒度)，其通过经由鼻道快速吸入或经口吸入来给药以到达肺泡囊。合适的制剂包括活性成分的水性或油状物性溶液剂。适于气雾给药或干粉给药的制剂可根据常规方法来制备且可与其它治疗剂(例如迄今用于治疗或预防下述障碍的化合物)一起递送。
适于阴道给药的制剂可按阴道栓剂、棉塞、乳膏剂、凝胶剂、糊剂、泡沫剂或喷雾剂形式存在，这些制剂除活性成分外还含有本领域已知为合适的载体。
所述制剂可包装在单位剂量容器或多剂量容器例如密封的安瓿或小瓶中且可在冷冻干燥(冻干)条件下贮存，其仅需要在使用前即时加入无菌液态载体例如水以供注射。现用现配的注射溶液剂和混悬剂由上述种类的无菌粉末剂、颗粒剂和片剂来制备。优选的单位剂量制剂为含有本申请上述日剂量或单位日亚剂量或其合适分数的活性成分的那些制剂。
本发明还提供兽用组合物，因此其含有上述至少一种活性成分及兽用载体。兽用载体为可用于给药所述组合物这一目的的物质且可为固态、液态或气态物质，这些物质在兽医领域中要么是惰性的要么是可接受的且与活性成分是相容的。这些兽用组合物可通过胃肠外、口服或任何其它期望的途径来给药。
组合治疗
式I化合物可单独使用或与其它治疗剂联用以治疗本文所述的疾病或障碍，例如过度增殖性障碍(例如癌症)。在一些实施方案中，式I化合物与具有抗过度增殖性或可用于治疗过度增殖性障碍(例如癌症)的第二化合物在药物组合制剂中联用或在作为联合治疗的给药方案中联用。所述药物组合制剂或给药方案中的第二化合物优选具有针对式I化合物的补充活性以使它们不彼此不利地影响。存在于组合中的上述化合物的量合适地为对于所预期的目的是有效的量。在一个实施方案中，本发明组合物包含式I化合物与本文所述的化疗剂的组合。
联合治疗可按同时给药方案或依次给药方案来给药。当依次给药时，组合可在两次或更多次给药中来给药。联合给药包括使用分开的制剂或单一的药物制剂来同时给药和以任何顺序来相继给药，其中优选在一段时间内两种(或所有)活性药物同时发挥它们的生物学活性。
任何上述共给药的药物的合适剂量为目前使用的那些剂量且可由于新鉴定的药物及其它化疗剂或治疗的联合作用(协同作用)而降低。
联合治疗可提供“协同作用”且被证实“是具有协同作用的”，即当活性成分一起使用时实现的作用大于分别使用这些化合物所得到的作用的总和。当活性成分(1)在所组合的单位剂量制剂中共配制及同时给药或递送；(2)以分开的制剂形式交替或平行递送；或(3)通过一些其它给药方案来给药时，可实现协同作用。当在交替治疗中递送时，当化合物例如通过不同注射器中的不同注射剂、分开的丸剂或胶囊剂或分开的输注剂来依次给药或递送时，可实现协同作用。通常，在交替治疗期间，将有效剂量的每种活性成分依次(即顺序)给药，而在联合治疗中，将有效剂量的两种或更多种活性成分一起给药。
在抗癌治疗的具体实施方案中，式I化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物、药用盐或前药可与其它化疗剂、激素药物或抗体药物(例如本文所述的那些药物)联用及与外科治疗和放射治疗联用。因此，本发明联合治疗包括给药至少一种式I化合物或其立体异构体、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物、药用盐或前药及使用至少一种其它癌症治疗方法。将对式I化合物(或多种式I化合物)及其它具有药物活性的化疗剂(或多种化疗剂)的量及相对的给药时间安排进行选择以实现所期望的联合治疗作用。
式I化合物的代谢产物
本文所述的式I的体内代谢产物也在本发明范围内。上述产物可源于例如对所给药的化合物进行的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶法裂解等。因此，本发明包括式I化合物的代谢物，包括通过以下方法来产生的化合物，所述方法包括使本发明化合物与哺乳动物接触足以产生其代谢产物的一段时间。
代谢产物通常如下鉴定：制备本发明化合物的经放射性标记的(例如14C或3H)同位素，将其以可检测的剂量(例如大于约0.5mg/kg)胃肠外给药于动物例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或人，允许足以发生代谢的时间(通常为约30秒至30小时)，然后从尿液、血液或其它生物样品中分离其转化产物。这些产物是容易分离的，这是因为对它们进行了标记(其它产物通过使用能够与代谢物中存活的抗原表位发生结合的抗体来分离)。代谢物的结构以常规方式例如通过MS、LC/MS或NMR分析来确定。通常，对代谢物的分析以与本领域技术人员公知的常规药物代谢研究相同的方式来进行。代谢产物，只要它们不是在体内另外存在的，就可用于对本发明化合物的治疗性给药进行诊断性测定。
制品
本发明另一个实施方案提供包含可用于治疗上述疾病和障碍的物质的制品或“试剂盒”。试剂盒包含容器，所述容器包含式I化合物。试剂盒还可包含在容器上或与容器相关的标签或包装说明书。术语“包装说明书”用于指通常包括在治疗产品的市售包装中的说明书，其含有关于适应症、用法、剂量、给药、禁忌症和/或注意事项的信息，这些信息涉及上述治疗产品的使用。合适的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可由多种材料(例如玻璃或塑料)来形成。容器可容纳有效治疗所述病症的式I或II化合物或其制剂且可具有无菌出口(例如容器可为静脉内溶液剂袋或具有可被皮下注射针头刺穿的塞的小瓶)。组合物中的至少一种活性药物为式I化合物。标签或包装说明书指示所述组合物可用于治疗所选择的病症例如癌症。另外，标签或包装说明书可指示有待治疗的患者为患有障碍例如过度增殖性障碍、神经变性、心脏肥大、疼痛、偏头痛或神经创伤性疾病或事件的患者。在一个实施方案中，标签或包装说明书指示包含式I化合物的组合物可用于治疗起因于异常细胞生长的障碍。标签或包装说明书还可指示所述组合物可用于治疗其它障碍。可选择地或额外地，所述制品还可包含第二容器，所述第二容器包含药用缓冲液，例如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和右旋糖溶液。其还可包含基于商业和使用者立场而期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针头和注射器。
试剂盒还可包含关于给药式I化合物及第二药物制剂(若存在)的指导。例如，若试剂盒包含第一组合物(其含有式I化合物)和第二药物制剂，则试剂盒还可包含关于将第一和第二药物组合物同时、依次或分开给药于需要其的患者的指导。
在另一个实施方案中，试剂盒适于递送式I或II化合物的固态口服形式，例如片剂或胶囊剂。上述试剂盒优选包含多个单位剂量。上述试剂盒可包含具有关于其预期用途的给药方法的卡片。上述试剂盒的实例为“泡罩包装”。泡罩包装在包装工业中是公知的且广泛用于包装药物单位剂量形式。当需要时，可提供记忆辅助件，其例如呈数字、字母或其它标记形式或带有日历插入件，其指明在治疗时间表中可进行给药的那些天。
根据一个实施方案，试剂盒可包含(a)在其中含有式I化合物的第一容器；和任选的(b)在其中含有第二药物制剂的第二容器，其中所述第二药物制剂包含具有抗过度增殖活性的第二化合物。可选择地或额外地，试剂盒还可包含第三容器，其包含药用缓冲液，例如抑菌性注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格溶液和右旋糖溶液。其还可包含基于商业和使用者立场而期望的其它物质，包括其它缓冲液、稀释剂、滤器、针头和注射器。
在试剂盒包含式I组合物和第二治疗剂的一些其它实施方案中，试剂盒可包含用于容纳分开的组合物的容器，例如分开的瓶或分开的箔包装，然而，分开的组合物也可容纳在单一的未分开的容器中。通常，试剂盒包含关于给药分开的组分的指导。当分开的组分优选以不同的剂型(例如口服和胃肠外)或不同的给药间隔来给药时或当逐渐增加组合中各个组分的剂量是开具处方的医生所期望的时，试剂盒形式是特别有利的。
式I化合物的制备
式I化合物可通过包含与化学领域中公知的方法相似的方法的合成路线合成，具体地，根据本申请包含的描述，和在以下文献中对其它杂环的描述：Comprehensive Heterocyclic Chemistry II,Editors Katritzky and Rees,Elsevier,1997,例如Volume 3；Liebigs Annalen der Chemie,(9):1910-16,(1985)；Helvetica Chimica Acta,41:1052-60,(1958)；Arzneimittel-Forschung,40(12):1328-31,(1990)，将每篇文献明确地并入本申请作为参考。起始物质一般可得自商业来源如Aldrich Chemicals(Milwaukee，WI)或容易使用本领域技术人员公知的方法制备(例如通过Louis F.Fieser and Mary Fieser,Reagents for Organic Synthesis,v.1-23,Wiley,N.Y.(1967-2006ed.)或BeilsteinsHandbuch der organischen Chemie,4,Aufl.ed.Springer-Verlag,Berlin(包括附录)(也可由Beilstein在线数据库得到)中一般描述的方法来制备)。
可在合成式I化合物以及必需的试剂和中间体中使用的合成化学转换和保护基团方法学(保护和脱保护)是本领域已知的，以及包括，例如，在以下文献中描述的那些：R.Larock,Comprehensive Organic Transformations,VCHPublishers(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts,Protective Groups in OrganicSynthesis,3rd Ed.,John Wiley and Sons(1999)；和L.Paquette,ed.,Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis,John Wiley and Sons(1995)及其随后的版本。
式I化合物可单独制备或制备成包含至少2种例如5至1,000种或10至100种化合物的化合物库。式I化合物的库可通过本领域技术人员已知的操作使用溶液相或固相化学通过组合性“分/混”(combinatorial‘split and mix’)措施或通过多重平行合成来制备。因此，本发明另一个方面提供包含至少2种化合物或其药用盐的化合物库。
一般操作和实施例提供了制备式I化合物的示例性方法。本领域技术人员应理解的是，其它合成路线可用于合成式I化合物。尽管在附图、一般操作和实施例中示出和讨论了具体起始物质和试剂，但是可用其它起始物质和试剂容易地代替，以提供多种衍生物和/或反应条件。另外，可将通过所述方法制备的许多示例性化合物根据本发明公开内容使用本领域技术人员已知的常规化学进一步改变。
当制备式I化合物时，可能需要对中间体中的末端官能团(remotefunctionality)(例如伯胺或仲胺)进行保护。对上述保护的需要将随末端官能团的性质和制备方法的条件而变化。合适的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、叔丁氧羰基(BOC)、苄氧羰基(CBZ)和芴-9-基甲基氧基羰基(Fmoc)。对上述保护的需要由本领域技术人员来容易地确定。关于保护基及其使用的一般描述参见T.W.Greene,Protective Groups in Organic Synthesis,John Wiley&Sons,New York,1991。
分离方法
在制备式I化合物的方法中，可能有利的是，将反应产物彼此分离和/或与原料分离。通过本领域常见技术将每步或多步中的所需产物分离和/或纯化至所需要的均匀度。通常，上述分离涉及多相萃取、从溶剂或溶剂混合物中结晶、蒸馏、升华或色谱。色谱可涉及任何数目的方法，包括例如反相和正相、尺寸排阻、离子交换、高、中和低压液相色谱法和装置、小规模分析、模拟移动床(SMB)和制备性薄层或厚层色谱及小规模薄层和快速色谱技术。
另一类分离方法涉及用所选择的试剂对混合物进行处理以与所需产物、未反应的原料、反应副产物等结合或使所需产物、未反应的原料、反应副产物等可分离。上述试剂包括吸附剂或吸收剂，例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。可选择地，所述试剂可为酸(在碱性物质的情况下)、碱(在酸性物质的情况下)、结合剂例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例如冠醚、液/液离子萃取剂(LIX)等。对合适分离方法的选择取决于所涉及的物质性质，例如沸点和分子量(在蒸馏和升华中)、存在或不存在极性官能团(在色谱中)、物质在酸性和碱性介质中的稳定性(在多相萃取中)等。
非对映异构体的混合物可基于其理化差异通过本领域技术人员公知的方法(例如色谱和/或分级结晶)来分离成其单独的非对映异构体。对映异构体可如下分离：对映异构体的混合物通过与具有光学活性的合适化合物(例如手性助剂例如手性醇或Mosher酰氯)反应而转化为非对映异构体的混合物，对非对映异构体进行分离，然后将单独的非对映异构体转化(例如水解)为相应的纯对映异构体。另外，一些本发明化合物可为阻转异构体(例如取代的联芳香化合物)且被认为是本发明一部分。对映异构体还可通过使用手性HPLC柱来分离。
单一的立体异构体，例如基本不含有其立体异构体的对映异构体，可通过对外消旋混合物进行拆分来得到，所述拆分所使用的方法为例如使用具有光学活性的拆分剂来形成非对映异构体(Eliel,E.and Wilen,S.“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994；Lochmuller,C.H.,(1975)J.Chromatogr.,113(3):283-302)。本发明手性化合物的外消旋混合物可通过任何合适的方法来分离，所述方法包括(1)与手性化合物形成离子性非对映异构盐且通过分级结晶或其它方法来分离；(2)与手性衍生剂形成非对映异构化合物，对非对映异构体进行分离且转化为纯立体异构体；和(3)在手性条件例如在手性吸附剂上通过HPLC或SFC(超临界流体色谱)下对基本纯的或富集的立体异构体进行直接分离，参见Whiteand Burnett(2005)Jour.of Chrom.A1074:175-185；“Drug Stereochemistry,Analytical Methods and Pharmacology”,(1993)Irving W.Wainer,Ed.,MarcelDekker,Inc.,New York。
在方法(1)中，非对映异构盐可如下形成：使对映异构体纯的手性碱例如马钱子碱、奎宁、麻黄碱、番木鳖碱、α-甲基-β-苯基乙胺(安非他明)等与带有酸性官能团的不对称化合物例如羧酸和磺酸反应。对非对映异构盐的分离可通过分级结晶或离子色谱来实现。为了对氨基化合物的光学异构体进行分离，加入手性羧酸或磺酸例如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸，这可引起非对映异构盐的形成。
可选择地，通过方法(2)使待拆分的物质与手性化合物的一种对映异构体反应以形成非对映异构体对(Eliel,E.and Wilen,S.“Stereochemistry ofOrganic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,1994,p.322)。非对映异构化合物可如下形成：使不对称化合物与对映异构体纯的手性衍生剂例如薄荷基衍生物反应，然后对非对映异构体进行分离且进行水解，得到纯的或富集的对映异构体。确定光学纯度的方法涉及制备外消旋混合物的手性酯(例如在碱存在下制备薄荷基酯例如氯甲酸(-)-薄荷基酯或制备Mosher酯即乙酸α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基酯(Jacob III.J.Org.Chem.(1982)47:4165))，且分析1HNMR光谱确定两种阻转异构性对映异构体或非对映异构体的存在。阻转异构性化合物的稳定非对映异构体可按照对阻转异构性萘基-异喹啉类化合物进行分离的方法(WO 1996/15111)通过正相和反相色谱来分离。在方法(3)中，两种对映异构体的外消旋混合物可通过使用手性固定相的色谱来分离(“Chiral Liquid Chromatography”(1989)W.J.Lough,Ed.,Chapman and Hall,New York；Okamoto,J.Chromatogr.,(1990)513:375-378)。富集的或纯化的对映异构体可通过用于区分具有不对称碳原子的其它手性分子的方法例如旋光或圆二色性来区分。
一般制备方法
反应式1：从硝基-1H-吡唑1合成4-氨基吡唑化合物5。
其中R1和R2均如本文所定义。
反应式1显示的是示例性地合成4-氨基吡唑化合物5。在合适的溶剂中或不用溶剂，将4-硝基-1H-吡唑1用碱处理，然后加入烷化剂(例如硫酸二甲酯)处理，将其转化成1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物2。在适当的温度(例如-78℃)，在合适的溶剂(例如THF(四氢呋喃))中，可将化合物2用碱处理(例如六甲基二硅基氨基锂或正丁基锂)处理，将其转化成5-氯-4-硝基-1H-吡唑3。用已知的方法，通过直接SnAr或过渡金属催化的交叉偶联反应(例如Suzuki、Sonogashira、Heck、Buchwald、Goldberg条件)，可将化合物3转化成化合物4。可通过合适的还原方法(例如用锌粉和甲酸铵在四氢呋喃中处理，或用H2和过渡金属催化剂(例如钯碳)氢化)，可从4合成4-氨基吡唑5。
Buchwald偶联反应可通过如下进行：在Buchwald钯催化条件下，用下表中的Buchwald预催化的环钯配合物(palladacycle)和配体试剂，其描述于：Biscoe等人，(2008)J.Am.Chem.Soc.130:6686-6687；Kinzel等人，(2010)J.Am.Chem.Soc.132:14073-14075；Molander等人，(2012)J.Am.Chem.Soc.134:11667-11673；Walker等人，(2004)Angew.Chem.Int.Ed.43:1871；Billingsley等人，(2007)Angew.Chem.Int.Ed.46:5359-5363；US 6946560；US 7026498；US 7247731；US 7560582；US 6307087；US 6395916；US7223879；US 7858784，其引入本文作为参考。该试剂是市售可得的(JohnsonMatthey Inc.，Wayne，PA；Sigma Aldrich Fine Chemical，St.Louis，MO；StremChemicals，Inc.，Newburyport，MA)。
反应式2：从羟胺化合物6合成4-羧基-噻唑11
其中R5如本文所定义。
反应式2显示了从羟胺化合物6示例性地合成4-羧基-噻唑11。在合适的溶剂(例如Na2S2O3的水溶液)中，用还原剂将6还原成7，该化合物7可通过酰化试剂在合适的溶剂和合适的碱中(例如苯甲酰氯在二氯甲烷和碳酸氢钠中)转化成8。可将化合物8通过含硫试剂在合适试剂中(例如Lawesson试剂在吡啶中)转化成9，并用合适的保护基团(例如Boc(叔丁氧羰基))将9保护成10。使用合适的碱和溶剂(例如LiOH在甲醇和水中)对10进行酯水解，得到11。
反应式3：通过将12的C-2位溴化，然后对13进行Suzuki反应，合成2-取代的、4-羧基-5-氨基噻唑11
其中R5如本文所定义。
反应式3显示了示例性合成2-取代的、4-羧基-5-氨基噻唑11，其通过在C-2位溴化5-氨基噻唑-4-羧酸酯(例如12)，然后进行2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-羧酸酯(例如13)的Suzuki反应。可将5-氨基噻唑-4-羧酸酯(例如12)用溴化剂在合适的溶剂中(例如NBS(N-溴琥珀酰亚胺)在二氯甲烷中)溴化成13。所述Suzuki型偶联反应用于连接杂环或杂芳基，其是通过取代式I化合物的合成中的噻唑环、吡啶环、吡嗪环或嘧啶环2位的卤化物。例如，2-溴(或氯)噻唑13可与约1.5当量的芳基、杂环基或杂芳基硼酸或硼酸酯试剂和过量的碳酸钠水溶液在乙腈中反应。加入催化量或更多的低价钯试剂，例如双(三苯基膦)二氯化钯(II)。可使用各种硼酸或硼酸酯。硼酸酯包括频哪醇酯(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)。此外，可保护杂环或杂芳基的氮原子，例如N-THP。在一些情况下，使用乙酸钾来代替碳酸钠以调节水层pH。可将该反应在微波反应器(例如Biotage Optimizer(Biotage，Inc.))中，减压加热至约140-150℃，持续10-30分钟。将该内容物用乙酸乙酯或另一有机溶剂萃取。蒸发有机层后，所述Suzuki偶合产物可用硅胶或反相HPLC纯化。
在形成示例性式I化合物的Suzuki偶合步骤中，可使用各种钯催化剂。在Suzuki偶合反应中，可使用低价Pd(II)和Pd(0)催化剂，包括PdCl2(PPh3)2，Pd(t-Bu)3、PdCl2dppf CH2Cl2、Pd(PPh3)4、Pd(OAc)/PPh3、Cl2Pd[(Pet3)]2、Pd(DIPHOS)2、Cl2Pd(Bipy)、[PdCl(Ph2PCH2PPh2)]2、Cl2Pd[P(o-tol)3]2、Pd2(dba)3/P(o-tol)3、Pd2(dba)/P(furyl)3、Cl2Pd[P(furyl)3]2、Cl2Pd(PmePh2)2、Cl2Pd[P(4-F-Ph)3]2、Cl2Pd[P(C6F6)3]2、Cl2Pd[P(2-COOH-Ph)(Ph)2]2、Cl2Pd[P(4-COOH-Ph)(Ph)2]2和包裹性催化剂Pd EnCatTM 30、Pd EnCatTMTPP30和Pd(II)EnCatTM BINAP30(US 2004/0254066)。
可使用各种固体吸附剂钯清除剂来除去Suzuki、Suzuki-Miyaura或Buchwald反应后的钯。钯清除剂的示例性实施方案包括 硫醇和硫脲。其他钯清除剂包括硅胶、可控孔径玻璃(TosoHaas)和衍生的低交联聚苯乙烯QuadraPureTM AEA、QuadraPureTM IMDAZ、QuadraPureTM MPA、QuadraPureTM TU(Reaxa Ltd.，Sigma-Aldrich Chemical Co.)。
反应式4：通过将4-氨基吡唑化合物5与2-取代的、4-羧基-5-氨基噻唑11偶合，合成偶合的吡唑-噻唑化合物12
其中R1，R2和R3均如本文所定义。
反应式4显示了示例性合成偶合的吡唑-噻唑化合物12。在合适的溶剂(例如二氯甲烷或DMF)中，使用下述形成酰胺(肽)的偶合试剂将4-氨基吡唑化合物5与2-取代的、4-羧基-5-氨基噻唑11偶合，形成12中的酰胺键，所述形成酰胺(肽)的偶合试剂，例如二环己基碳二亚胺(DCC)、二异丙基碳二亚胺(DIC)、HATU(O-(7-偶氮苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲鎓六氟磷酸盐)、HBTU(O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N′,N′-四甲基脲鎓六氟磷酸盐或PyBOP((苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基磷鎓六氟磷酸盐)(Hermanson，G.Bioconjugate Techniques，第2版(2008)Academic Press，San Diego)。可将Boc和12的其他保护基团在通常条件下脱除，使得在例如HCl在二噁烷和水中或三氟乙酸在二氯甲烷中的条件下，将Boc、Fmoc或其他对酸敏感的保护基团从5的4-氨基脱除。
反应式5：从5-氯-4-硝基-1H-吡唑化合物3合成6-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-胺化合物21
其中R1如本文所定义。
反应式5显示了从5-氯-4-硝基-1H-吡唑化合物3示例性合成6-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-胺化合物21，例如6-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-胺，其中R为甲基。在合适的溶剂(例如DMSO)中在碱(例如碳酸钾)的存在下，或通过文献中描述的类似的方法，用丙二酸二甲酯置换3中的氯，得到2-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)丙二酸酯化合物13。在文献中所述的碱性、酸性或二者的组合的条件下，对13脱羧，得到2-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)乙酸烷基酯化合物14。在合适的溶剂(例如DMF)中使用合适的碱(例如氢化钠)，或用文献中所述的方法，烯丙基化14，得到2-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-4-烯酸烷基酯化合物15。在合适的溶剂(例如THF)中通过合适的还原试剂(DIBAL)，或通过文献所述的方法，可完成对15的还原，得到2-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-4-烯-1-醇化合物16。在合适的溶剂(例如DMF)中使用合适的碱(例如氢化钠)，或通过文献所述的方法，烯丙基化式16化合物，可得到5-(1-(烯丙氧基)戊-4-烯-2-基)-4-硝基-1H-吡唑化合物17。在合适的条件下，使用Grubb或相关的钌催化剂(RCM＝钌催化的复分解)进行17的关环复分解反应，可得到4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-3-基)-1H-吡唑化合物18。用Grubb或Wilkinson催化剂异构化18，可得到4-硝基-5-(2,3,4,5-四氢氧杂环庚三烯-3-基)-1H-吡唑化合物19。使用文献所述的关环复分解反应条件，可将化合物17在一锅法操作中直接转化成19。使用文献所述的条件硼氢化19，可得到6-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇化合物20，所述化合物20可被氧化成酮，然后还原胺化，得到6-(4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-胺化合物21，或所述化合物20经磺化，然后用胺试剂置换。
反应式6：从1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物2合成5-(5-叠氮基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物28
其中R1如本文所定义。
反应式6显示了从1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物2示例性合成5-(5-叠氮基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物28。在合适的溶剂(例如THF)中在所需的温度使用合适的碱(例如六甲基二硅基氨基锂)，或通过文献所述的步骤，将2与戊-4-烯醛22反应，得到1-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-4-烯-1-醇化合物23。在合适的催化剂(例如三(二亚苄基丙酮)二钯(0))和三苯基膦存在下在溶剂(例如二噁烷)中，或使用文献所述的方法，加热23和碳酸二烯丙酯，得到5-(1-(烯丙氧基)戊-4-烯基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物24。在合适的溶剂(例如甲苯)中，通过加热，用合适的催化剂(例如Grubbs一代催化剂(RCM))环化24，或根据文献所述方法来环化24，得到1-取代的-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)-1H-吡唑化合物25。在溶剂(如二氯甲烷)中用环氧化试剂(例如m-CPBA(间氯过氧苯甲酸))处理25，或通过文献所述的类似方法处理25，得到5-(3,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物26。根据文献的方法，用叠氮化钠将环氧化物26开环，得到4-叠氮基-7-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇化合物27。在合适的溶剂(例如DCM)中用试剂(例如)氟化27，或用文献所述的方法氟化27，得到28。
反应式7：由5-(1-(烯丙氧基)戊-4-烯基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物24合成5-(5-叠氮基-4-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物33和5-(4-叠氮基-5-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物34
其中R1如本文所定义。
反应式7显示了由5-(1-(烯丙氧基)戊-4-烯基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物24示例性合成5-(5-叠氮基-4-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物33和5-(4-叠氮基-5-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物34。在合适的溶剂(例如二氯甲烷)中，通过加热，用合适的催化剂(例如Grubbs二代催化剂(RCM))环化24，或根据文献所述方法来环化24，得到1-取代的-4-硝基-5-(2,3,6,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)-1H-吡唑化合物29。在溶剂(如二氯甲烷)中，用环氧化试剂(例如m-CPBA)环氧化29，或通过文献所述的类似方法环氧化29，得到5-(4,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-3-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物30。用叠氮试剂处理(叠氮化)30可得到开环化合物5-叠氮基-2-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-醇31和5-叠氮基-7-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-醇32的混合物。在合适的溶剂(例如DCM)中用氟化试剂(例如)氟化31和32，或用文献所述的方法氟化31和32，分别得到33和34。
反应式8：由1-取代的-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)-1H-吡唑化合物25合成5-(5-叠氮基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物37
其中R1如本文所定义。
反应式8显示的是由1-取代的-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)-1H-吡唑化合物25示例性合成5-(5-叠氮基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物37。在分子筛的存在下，在合适的溶剂(例如二氯甲烷)中用N-溴琥珀酰亚胺和乙酸处理25，然后在合适的溶剂(例如甲醇)中，用碳酸钾处理，或根据文献所述的方法处理25，得到5-(3,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物35。根据文献的方法，25的环氧化物开环，得到4-叠氮基-7-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇化合物36。在溶剂(例如DCM)中，用氟化试剂(例如)氟化36，或根据文献所述的方法氟化36，得到37。
反应式9：由5-氯-4-硝基-1H-吡唑化合物3合成2-甲基-N-(2-取代的-7-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)丙-2-亚磺酰胺化合物42
其中R1如本文所定义。
反应式9显示的是由5-氯-4-硝基-1H-吡唑化合物3示例性合成2-甲基-N-(2-取代的-7-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)丙-2-亚磺酰胺化合物42。在合适的催化剂(例如1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物)存在下，在溶剂(例如DMF和水)中，通过加热用乙烯三氟硼酸钾和碳酸铯进行3的Suzuki反应，然后在合适的溶剂(例如二氯甲烷)中，将所得的烯烃用臭氧处理，或使用文献所述方法处理，得到1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-甲醛化合物38。在合适的溶剂(例如二氯甲烷)中，用(R)-三甲基(1-(1-(三甲基硅基氧基)环丙基)丙-2-基氧基)硅烷化合物39和三氟甲磺酸三甲基硅酯处理38，或使用文献所述的方法(Minbiole等人，(2005)Org.Lett.7:515)处理38，得到5-((5R,7R)-7-取代的-4,6-二氧杂螺[2.5]辛-5-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物40。在溶剂(例如二氯甲烷)中，用合适的Lewis酸(例如四氯化钛)处理40，或使用文献中所述的方法处理，得到重排产物，(2R,7R)-2-取代的-7-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-酮化合物41。在合适的Lewis酸(例如乙醇钛(IV))存在下，在溶剂(例如THF)中，通过加热，用(R)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺还原胺化41，然后在合适的溶剂中用硼氢化钠处理，或使用文献中所述的方法处理，得到42。
反应式10：由1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-甲醛化合物38合成(2R,3R,4S,5R)-5-羟基-3,5-二甲基-2-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢-2H-吡喃-4-基氨基甲酸叔丁酯化合物49
其中R1如本文所定义。
反应式10显示了由1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-甲醛化合物38示例性合成(2R,3R,4S,5R)-5-羟基-3,5-二甲基-2-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢-2H-吡喃-4-基氨基甲酸叔丁酯化合物49。在Resolve-AlTM EuFOD(铕(III)-三(1,1,1,2,2,3,3-七氟-7,7-二甲基-4,6-辛二酮)，Sievers’试剂，三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮酸)铕，Sigma-Aldrich产品编号160938，CAS号17631-68-4)的存在下，在合适的溶剂(例如氯仿)中加热38和二烯((1E,3Z)-1-甲氧基-2-甲基戊-1,3-二烯-3-基氧基)三甲基硅烷50，或使用文献所述的方法，得到3,5-二甲基-2-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-2H-吡喃-4(3H)-酮化合物43。在氯化铈(III)七水合物存在下，在合适的溶剂(例如甲醇)中，用合适的还原剂(例如硼氢化钠)处理43，或使用文献中所述的类似方法，得到3,5-二甲基-2-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-3,4-二氢-2H-吡喃-4-醇化合物44。用对甲苯磺酸在甲醇中加热44，或使用文献中所述的方法，得到重排产物，5-(6-甲氧基-3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物45。在合适的溶剂(例如二氯甲烷)中，用Lewis酸(例如三氟化硼乙醚化物)和还原剂(例如三乙基硅烷)处理45，或使用文献所述的方法，得到5-(3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物46。用环氧化试剂(例如m-CPBA)或使用文献中报道的类似操作环氧化46，得到5-(1,5-二甲基-3,7-二氧杂二环[4.1.0]庚-4-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物47。根据文献方法，用叠氮化钠开环47的环氧化物，得到4-叠氮基-3,5-二甲基-6-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢-2H-吡喃-3-醇化合物48。在THF和水中，通过加热，用三甲基膦进行48的Staudinger叠氮化物还原，然后使用文献中所概括或描述的方法，用合适的保护基团(例如Boc-保护基团)对所得胺进行保护，得到49。
反应式11：由1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物2合成(5-(4-氨基-1-取代的-1H-吡唑-5-基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基氨基甲酸叔丁酯化合物56
其中R1如本文所定义。
反应式11显示了由1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物2示例性合成(5-(4-氨基-1-取代的-1H-吡唑-5-基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基氨基甲酸叔丁酯化合物56。在适当的温度，将2与(Z)-环庚-4-烯酮50和合适的碱(例如六甲基二硅基氨基锂)在溶剂(例如THF)中反应，或使用文献中所述的方法，得到1-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚-4-烯醇化合物51。在合适的溶剂(例如DCM)中用氟化试剂(例如)，或使用文献中所述的方法氟化51，得到5-(1-氟环庚-4-烯基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物52。用m-CPBA或文献中描述的类似方法环氧化52，得到5-(4-氟-8-氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-取代的-4-硝基-1H-吡唑化合物53。根据文献方法，用叠氮化钠对53的环氧化物进行开环，得到2-叠氮基-5-氟-5-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚醇化合物54。在THF和水中，通过加热，用三苯基膦对54进行Staudinger叠氮化物还原，然后用合适的保护基团(例如Boc-保护基团)，或使用文献中概括或描述的方法保护所得胺，得到(5-氟-2-羟基-5-(1-取代的-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚基氨基甲酸叔丁酯化合物55。在合适的催化剂(例如10％钯碳)存在下，在适当的温度和氢气氛下，通过在合适的溶剂(例如THF和甲醇的混合物)中加热氢化55，得到56。
实施例
实施例1 5-氯-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
向含有4-硝基-1-H-吡唑(5g，44.2mmol)的500mL圆底烧瓶中加入氢氧化钠(1M，200mL)和硫酸二甲酯(31mL，330mmol)。将该混合物在室温搅拌72h并将该混合物用CH2Cl2(2x 150mL)萃取。将有机层分离并将该溶剂蒸除，得到1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为白色固体(4.30g，76％)。
根据WO 2007/99326，向500mL的3颈圆底烧瓶中加入1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(4.30g，33.8mmol)和THF(12mL)。将该混合物冷却至-78℃并用滴液漏斗滴加六甲基二硅基氨基锂的THF溶液(1M，88.4mL，90mmol)，持续20min。将该棕色混合物搅拌30min并温热至-45℃，持续30min。将该混合物冷却回–78℃并用滴液漏斗滴加溶于THF(20mL)中的六氯乙烷(10.5g，44.2mmol)，持续15min。将该混合物搅拌2.5h，从-78℃温热至-40℃并将该反应用LCMS监测。该反应一旦完成，将该反应用饱和NH4Cl溶液(150mL)淬灭并加入乙酸乙酯(100mL)。将该有机层分离并将水层用乙酸乙酯(100mL)萃取。将合并的有机层用水(150mL)洗涤，用Na2SO4干燥并将有机溶剂蒸除。将粗产物用快速色谱(CH2Cl2/7％MeOH)纯化，得到5-氯-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为白色固体(1.40g，20％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.13(s，1H)，3.92(s，3H)；ESIMS m/z＝162.0(M+1)。
实施例2 2-氨基-2-氰基乙酸乙酯
向(E)-2-氰基-2-(羟基亚胺基)乙酸乙酯(20g，0.14mol)在水(250mL)中的搅拌溶液中加入NaHCO3在水(160mL)中的饱和溶液，然后加入Na2S2O4(60g，0.423mol)。将该反应混合物温热至35℃并搅拌额外的2小时。然后将其用NaCl(150g)使之饱和并用DCM(3x 350mL)萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩，得到2-氨基-2-氰基乙酸乙酯，其为红色的油状物(7.8g，43％)，其无需进一步纯化用于下一步。1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：4.45(s，1H)，4.34(q，J＝7.0Hz，2H)，1.36(t，J＝7.0Hz，3H)；MS(ESI)m/z：129[M+H+]。
实施例3 2-苯甲酰氨基-2-氰基乙酸乙酯
向化合物2-氨基-2-氰基乙酸乙酯(0.64g，5mmol)在DCM(15mL)中的搅拌溶液中加入NaHCO3在水(15mL)中的饱和溶液。伴随着剧烈搅拌，加入苯甲酰氯(0.84g，6mmol)。将该反应混合物在室温搅拌额外的30min，之后用DCM(3x 15mL)萃取。将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤并用Na2SO4干燥，过滤，真空浓缩。将所得残余物用硅胶柱色谱(5:1PE/EtOAc)纯化，得到2-苯甲酰氨基-2-氰基乙酸乙酯(0.25g，22％)，其为白色固体：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：7.83-7.85(m，2H)，7.59(t，J＝7.5Hz，1H)，7.49(t，J＝7.5Hz，2H)，7.02(d，J＝7.0Hz，1H)，5.72(d，J＝7.5Hz，1H)，4.40(q，J＝7.5Hz，2H)，1.39(t，J＝7.0Hz，3H)；MS(ESI)m/z：233[M+H+]。
实施例4 5-氨基-2-苯基噻唑-4-甲酸乙酯
向化合物2-苯甲酰氨基-2-氰基乙酸乙酯(0.46g，2mmol)在吡啶(20mL)中的搅拌溶液中加入Lawesson试剂(0.81g，2mmol)。将该反应混合物加热回流15小时。然后将其浓缩并用EtOAc(40mL)稀释。将该稀释的混合物用水(3x 20mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该残余物用硅胶柱色谱(10:1PE/EtOAc)纯化，得到5-氨基-2-苯基噻唑-4-甲酸乙酯(0.2g，40％)，其为黄色固体：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：7.80(d，J＝6.5Hz，1H)，7.36-7.41(m，3H)，4.43(q，J＝7.0Hz，2H)，1.44(t，J＝7.0Hz，3H)；MS(ESI)m/z：249[M+H+]。
实施例5 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基噻唑-4-甲酸乙酯
向化合物5-氨基-2-苯基噻唑-4-甲酸乙酯(248mg，1mmol)在CH3CN(10mL)中的溶液中加入DMAP(6mg，0.05mmol)，然后加入(Boc)2O(262mg，1.2mmol)。将该反应混合物在室温保持额外的30min。然后将该混合物真空蒸发，得到5-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基噻唑-4-甲酸乙酯，其为红色固体(340mg，95％)，其无需进一步纯化用于下一步骤中。
实施例6 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基噻唑-4-甲酸
向化合物5-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基噻唑-4-甲酸乙酯(348mg，1mmol)在MeOH/H2O(10mL，1:1)中的溶液中加入LiOH.H2O(20mg，5mmol)。将该反应混合物在50-55℃加热，直至用原料从TLC消失。将其在约0-4℃冷却，并滴加浓HCl，直至pH约5。然后将所得混合物用DCM(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(2x 20mL)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并真空浓缩。将该残余物用硅胶柱色谱(50:1DCM:MeOH)纯化，得到5-(叔丁氧羰基氨基)-2-苯基噻唑-4-甲酸(0.22g，68％)，其为白色固体：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.69(s，1H)，7.89-7.91(m，2H)，7.46-7.47(m，3H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：321[M+H+]。
实施例7 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例19-23的操作并如反应式2所示，2-氟苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.70(s，1H)，8.19-8.23(m，1H)，7.42-7.45(m，1H)，7.20-7.30(m，2H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：339[M+H+]。
实施例8 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例19-23的操作并如反应式2所示，2,6-二氟苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ(ppm)：7.42-7.46(m，1H)，7.06(t，J＝8.5Hz，2H)，1.47(s，9H)；MS(ESI)m/z：355[M+H+]。
实施例9 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氯苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例19-23的操作并如反应式2所示，2-氯苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氯苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：13.57(s，1H)，10.05(s，1H)，8.14-8.17(m，1H)，7.63-7.65(m，1H)，7.49-7.51(m，2H)，1.53(s，9H)；MS(ESI)m/z：355[M+H+]。
实施例10 2-(5-溴-2-氟苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，5-溴-2-氟苯甲酰氯转化成2-(5-溴-2-氟苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.70(s，1H)，8.32-8.34(m，1H)，7.49-7.52(m，1H)，7.09-7.13(m，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：418[M+H+]。
实施例11 2-(5-溴-2-氯苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，5-溴-2-氯苯甲酰氯转化成2-(5-溴-2-氯苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.70(s，1H)，8.31(d，J＝2.5Hz，1H)，7.47(dd，J＝2.5Hz，J＝8.5Hz，1H)，7.35(d，J＝9.0Hz，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：433[M+H+]。
实施例12 2-(3-溴苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，3-溴苯甲酰氯转化成2-(3-溴苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.68(s，1H)，8.08(s，1H)，7.78(d，J＝8.0Hz，1H)，7.56(d，J＝8.0Hz，1H)，7.32(t，J＝8.0Hz，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：399[M+H+]。
实施例13 2-(4-溴-2-氟苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，4-溴-2-氟苯甲酰氯转化成2-(4-溴-2-氟苯基)-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.67(s，1H)，8.07(t，J＝8.0Hz，1H)，7.42(d，J＝9.5Hz，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：417[M+H+]。
实施例14 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸
在室温，向吡啶-2-甲酸(1.23g，10mmol)、EDC.HCl(1.91g，10mmol)和HOBT(1.35g，10mmol)在THF(80mL)中的溶液中加入DIPEA(3.6g，30mmol)。在相同温度，将该反应混合物保持1小时，此时加入2-氨基-2-氰基乙酸乙酯(1.28g，10mmol)在THF(5mL)中的溶液。将该反应混合物在室温搅拌额外的6小时。然后将其浓缩并将该残余物用硅胶柱色谱(5:1PE/EtOAc)纯化，得到2-氰基-2-(吡啶-2-甲酰胺基)乙酸乙酯(0.7g，30％)，其为黄色固体。
如实施例19-23的操作并如反应式2所示，将2-氰基-2-(吡啶-2-甲酰胺基)乙酸乙酯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.72(s，1H)，8.61(d，J＝4.5Hz，1H)，8.09(d，J＝8.0Hz，1H)，7.81(t，J＝7.5Hz，1H)，7.34(dd，J＝5.5Hz，J＝7.0Hz，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：322[M+H+]。
实施例15 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-异丙基噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将异丁酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-异丙基噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.54(s，1H)，3.16-3.21(m，1H)，1.54(s，9H)，1.37(d，J＝7.0Hz，6H)；MS(ESI)m/z：287[M+H+]。
实施例16 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-环己基噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将环己烷甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-环己基噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.53(s，1H)，2.84-2.89(m，1H)，2.08-2.12(m，2H)，1.84(dd，J＝3.5Hz，J＝10.0Hz，2H)，1.73(d，J＝13.0Hz，1H)，1.53(s，9H)，1.35-1.50(m，4H)，1.25-1.27(m，1H)；MS(ESI)m/z：327[M+H+]。
实施例17 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-邻甲苯基噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2-甲基苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-邻甲苯基噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ(ppm)：7.34(s，1H)，7.13-7.22(m，3H)，2.32(s，3H)，1.43(s，9H)；MS(ESI)m/z：335[M+H+]。
实施例18 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2-甲氧基苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ(ppm)：9.63(s，1H)，8.27(d，J＝7.5Hz，1H)，7.42(t，J＝8.0Hz，1H)，7.09(t，J＝7.5Hz，1H)，7.04(d，J＝9.0Hz，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：351[M+H+]。
实施例19 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2-(三氟甲基)苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CD3OD，500MHz)δ(ppm)：7.76(d，J＝7.5Hz，1H)，7.58-7.64(m，3H)，1.46(s，9H)；MS(ESI)m/z：389[M+H+]。
实施例20 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-甲基噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将乙酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-甲基噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.62(s，1H)，2.62(s，3H)，1.54(s，9H)；MS(ESI)m/z：259[M+H+]。
实施例21 5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
在0℃氮气氛(N2)下，将HCOOH(2.44g，53mmol)加至Ac2O(6.48g，63.6mmol)中。将其温热至室温后，将该反应在50℃加热15小时。将其冷却至室温。然后在0℃，将这个混合酸酐滴加至2-氨基-2-氰基乙酸乙酯(128mg，1mmol)在无水THF(5mL)中的溶液中。移去冷却浴后，将该反应在室温维持额外的1小时。将该反应混合物浓缩并用硅胶柱色谱(5:1PE/EtOAc)纯化，得到2-氰基-2-甲酰胺基乙酸乙酯(110mg，70％)，其为白色固体。
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2-氰基-2-甲酰胺基乙酸乙酯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.70(s，1H)，8.29(s，1H)，1.55(s，9H)；MS(ESI)m/z：245[M+H+]。
实施例22 2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
向5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸(1.72g，10mmol)在DCM(50mL)中的溶液中，分三次加入NBS(1.95g，11mmol)；将该反应混合物在室温搅拌1h。将该反应真空浓缩；所得残余物用硅胶柱色谱(6:1石油状物醚-EtOAc)纯化，得到2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸(1.75g，70％)，其为白色固体：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：13.65(s，1H)，10.03(s，1H)，1.49(s，9H)。MS(ESI)m/z：324[M+H+]。
实施例23 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,5-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2,5-二氟苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,5-二氟苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.68(s，1H)，7.87-7.91(m，1H)，7.15-7.26(m，1H)，7.08-7.13(m，1H)，1.57(s，9H)；MS(ESI)m/z：357[M+H+]。
实施例24 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,4-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2,4-二氟苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,4-二氟苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.66(s，1H)，8.16-8.21(m，1H)，6.95-7.04(m，2H)，1.62(s，9H)；MS(ESI)m/z：357[M+H+]。
实施例25 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2,3-二氟苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CD3OD，400MHz)δ(ppm)：7.45(s，1H)，7.07-7.16(m，2H)，1.42(s，9H)；MS(ESI)m/z：357[M+H+]。
实施例26 2-苄基-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将2-苯基乙酰氯转化成2-苄基-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.63(s，1H)，7.27-7.35(m，5H)，4.25(s，2H)，1.50(s，9H)；MS(ESI)m/z：335[M+H+]。
实施例27 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(喹啉-7-基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将喹啉-7-甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(喹啉-7-基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：10.14(s，1H)，9.11(d，J＝5Hz，1h)，8.68(s，1H)，8.55(s，1H)，8.21-8.25(m，2H)，7.75-7.77(m，1H)，1.54(s，9H)；MS(ESI)m/z：372[M+H+]。
实施例28 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将咪唑并[1,2-a]吡啶-2-甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(咪唑并[1,2-a]吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：10.12(s，1H)，8.58(d，5Hz，1H)，8.45(s，1H)，7.61(d，5Hz，1H)，7.31-7.34(m，1H)，6.97-6.99(m，1H)，1.53(s，9H)；MS(ESI)m/z：361[M+H+]。
实施例29 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-叔丁基噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将新戊酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-叔丁基噻唑-4-甲酸：1H-NMR(CDCl3，500MHz)δ(ppm)：9.55(s，1H)，1.55(s，9H)，1.42(s，9H)；MS(ESI)m/z：301[M+H+]。
实施例30 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(3-氯苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将3-氯苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(3-氯苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：9.67(s，1H)，7.91(s，1H)，7.72(d，J＝7Hz，1H)，7.38-7.40(m，2H)，1.56(s，9H)；MS(ESI)m/z：355[M+H+]。
实施例31 5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作并如反应式2所示，将4-氯苯甲酰氯转化成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(4-氯苯基)噻唑-4-甲酸：1H-NMR(DMSO，500MHz)δ(ppm)：9.66(s，1H)，7.81(d，J＝8.5Hz，2H)，7.42(d，J＝8.5Hz，2H)，1.56(s，9H)；MS(ESI)m/z：355[M+H+]。
实施例32 5-氨基-N-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺
根据反应式4所示的操作，将1-甲基-1H-吡唑-4-胺、5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸反应，经两步，得到5-氨基-N-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺，其为白色固体(13mg，32％)。ESIMS m/z＝336.1(M+1)。
实施例33 2-(4-环丙基-2-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷
步骤A：三氟甲磺酸3-氟-4-硝基苯基酯
在0℃，向3-氟-4-硝基酚(10.00g，63.65mmol)和三氟甲磺酸酐(20.0mL，119mmol，1.87当量)在无水DCM(100.0mL)中的搅拌溶液中滴加三乙胺(33.27mL，238.7mmol，3.75当量)。将所得棕色反应混合物在0℃搅拌2h，然后在室温搅拌16h。将该反应混合物用水缓慢淬灭并用DCM(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用盐水(1x)洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将粗制的油状物用快速柱色谱纯化，用0-65％DCM/己烷洗脱，得到15.67g(85.1％)的三氟甲磺酸3-氟-4-硝基苯基酯，其为油状物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ8.23(t，J＝8.52Hz，1H)，7.34-7.27(m，2H)。
步骤B：4-环丙基-2-氟-1-硝基苯
将三氟甲磺酸3-氟-4-硝基苯基酯(7.15g，24.73mmol)、环丙基硼酸(2.55g，29.67mmol)、与二氯甲烷复合的[1,1'-双(二苯基膦基)-二茂铁]二氯化钯(II)(1:1)(1.62g，1.98mmol)和2M碳酸铯的水溶液(19.8mL，39.56mmol)在甲苯(39.5mL)中的混合物脱气20min。将该反应混合物在90℃，氮气下搅拌2.5h。将该反应冷却至RT，用乙酸乙酯(200mL)稀释并经硅藻土垫过滤。将该滤液用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将该粗制残余物用快速柱色谱纯化，用0-75％DCM/己烷洗脱，得到4.11g(91.7％)4-环丙基-2-氟-1-硝基苯，其为油状物。1H NMR(400MHz，MeOD)δ7.98(dd，J＝10.2，6.6Hz，1H)，7.12–7.02(m，2H)，2.11–1.97(m，1H)，1.20–1.11(m，2H)，0.89–0.82(m，2H)。
步骤C：4-环丙基-2-氟苯胺
将4-环丙基-2-氟-1-硝基苯(3.36g，18.55mmol)、铁粉(4.35g，77.9mmol)和2M氯化铵水溶液(19.8mL)的混合物与3:2:1v/v EtOH:THF:H2O(86mL)在氮气下搅拌回流17h。将该反应混合物冷却至RT并经硅藻土垫过滤。将该硅藻土垫用乙酸乙酯(约50mL)充分浸润。将饱和NaHCO3水溶液缓慢地加至该滤液中以中和该反应混合物。将该反应混合物用乙酸乙酯(3x 200mL)萃取。将合并的有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将该粗制残余物用快速柱色谱纯化，用0-75％乙酸乙酯/己烷洗脱，得到2.80g(99％)橙色油状物，其在20℃固化。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.75–6.63(m，3H)，3.57(s，2H)，1.87–1.72(m，1H)，0.93–0.83(m，2H)，0.64–0.51(m，2H)；MS(ESI)m/z：152.3[M+H]+。
步骤D：4-环丙基-2-氟-1-碘苯
在0℃，向4-环丙基-2-氟苯胺(1.63g，10.78mmol)在水(20mL)中的搅拌混合物中滴加浓硫酸(8.6mL，15.0当量)，同时保持温度恒定在0℃。加入亚硝酸钠(781.0mg，11.32mmol，1.05当量)在水(2.7mL)中的溶液并搅拌5分钟。然后将所得反应混合物加至碘化钾(3.76g，22.64mmol，2.1当量)在水(9.7mL)中的溶液，并将该反应混合物在60℃搅拌3h。将DCM(400mL)加至该冷却的反应中。将二相层分离并将水层用DCM(2x 150mL)萃取。将合并的有机层用饱和Na2S2O4水溶液、水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将该粗制残余物用快速柱色谱纯化，用100％庚烷洗脱，得到2.01g(71.28％)4-环丙基-2-氟-1-碘苯，其为澄清的油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.57(dd，J＝8.0，6.9Hz，1H)，6.76(dd，J＝9.4，1.9Hz，1H)，6.64(dd，J＝8.2，1.9Hz，1H)，1.94–1.77(m，1H)，1.09–0.95(m，2H)，0.79–0.56(m，2H)。
步骤E:在高压管中放置4-环丙基-2-氟-1-碘-苯(1.32g，5.04mmol)、硼酸二频哪醇酯(bispinacol ester boronate)(1.53g，6.04mmol)、乙酸钾(1.98g，20.15mmol)、[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(II)(368.5mg，0.50mmol)和N,N-二甲基甲酰胺(35mL)。将该反应混合物用氮气脱气15分钟。将该管密封并将该反应混合物在90℃搅拌16h。将该冷却的反应混合物用乙酸乙酯(75mL)和水(25mL)稀释，然后经硅藻土垫过滤。将该二相层分离并将有机层用水和盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并减压浓缩。将该粗制残余物用快速柱色谱纯化，用0-75％EA/庚烷洗脱，得到859.0mg(65.1％)2-(4-环丙基-2-氟苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷，其为澄清的油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.58(s，1H)，6.83(d，J＝7.7Hz，1H)，6.68(d，J＝10.8Hz，1H)，1.91–1.81(m，1H)，1.33(s，12H)，0.98(dd，J＝8.3，2.0Hz，2H)，0.74–0.66(m，2H)。
实施例34 5-氯-1-乙基-4-硝基-1H-吡唑
根据实施例1的操作，以1-乙基-4-硝基吡唑为起始原料，得到5-氯-1-乙基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(1.3g，74％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(s，1H)，4.26(q，J＝7Hz，2H)，1.50(t，J＝7Hz，3H)。
实施例35 5-氯-1-环丙基甲基-4-硝基-1H-吡唑
根据实施例1的操作，以1-环丙基甲基-4-硝基吡唑为起始原料，得到5-氯-1-环丙基甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色油状物(1.16g，56％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，4.07(d，J＝7Hz，2H)，1.39-1.28(m，1H)，0.66-0.59(m，2H)，0.50-0.40(m，2H)。
实施例36 5-氯-1-环丙基-4-硝基-1H-吡唑
根据实施例1的操作，以1-环丙基-4-硝基吡唑为起始原料，得到5-氯-1-环丙基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(0.23g，63％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.09(s，1H)，3.62-3.54(m，1H)，1.38-1.28(m，2H)，1.25-1.13(m，2H)。
实施例37 5-氯-1-(2,2-二氟乙基)-4-硝基-1H-吡唑
向冷却至-70℃的1-(2,2-二氟乙基)-4-硝基-1H-吡唑(1.0g，5.13mmol)在无水THF(20mL)中的搅拌溶液中滴加六甲基二硅基氨基锂(1M的THF溶液，8.47mL，8.47mmol)溶液。在-70℃搅拌40min后，将该反应混合物温热至-55℃，经20min。再次冷却至-70℃后，缓慢加入六氯乙烷(1.74g，7.34mmol)在THF(10mL)中的溶液并将该反应混合物在-70℃搅拌1.5小时。加入饱和氯化铵水溶液(30mL)，然后加入水(15mL)，并将该混合物用EtOAc(3x 100mL)萃取。将合并的有机层用MgSO4干燥并将该溶剂减压除去。将该残余物通过硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-氯-1-(2,2-二氟乙基)-4-硝基-1H-吡唑，其为灰白色固体(438mg，37％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.24(s，1H)，6.18(tt，J＝54.8，4.2Hz，1H)，4.58(td，J＝12.8，4.2Hz，2H)。
实施例38 5-氯-1-环丙基-4-硝基-1H-吡唑
根据实施例37，将1-环丙基-4-硝基吡唑氯化，得到5-氯-1-环丙基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(0.23g，63％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.09(s，1H)，3.62-3.54(m，1H)，1.38-1.28(m，2H)，1.25-1.13(m，2H)。
实施例39 5-氯-1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑
根据实施例37，将1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑氯化，得到5-氯-1-(4-甲氧基苄基)-4-硝基-1H-吡唑，其为黄色固体(536mg，46％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，7.25(d，J＝8.3Hz，2H)，6.89(d，J＝8.3Hz，2H)，5.30(s，2H)，3.80(s，3H)。
实施例40 5-溴-4-硝基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑
向1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑-5-胺(990mg，6.0mmol)在乙酸(5mL)中的搅拌溶液中滴加乙酸酐(0.57mL，6.0mmol)，并将该混合物在室温搅拌16小时。将更多的乙酸酐(0.57mL，6.0mmol)加至该反应混合物中，将该混合物在冰浴中冷却以滴加发烟硝酸(0.28mL，6mmol)。将该反应混合物在室温搅拌7小时并将溶剂减压除去。将该残余物溶于EtOH(15mL)，并加入浓盐酸(10mL)。将该混合物加热回流16小时。减压浓缩后，将该残余物在DCM(50mL)和5％NaHCO3水溶液(100mL)间分配。将该混合物过滤并将水层用DCM(100mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥并将溶剂减压除去，得到淡橙色固体(540mg)。将该固体(540mg，2.57mmol)溶于溴仿(2.9mL，33mmol)中，并向该溶液中滴加亚硝酸叔丁酯(0.92mL，7.71mmol)。将该反应混合物在室温搅拌15min，然后在145℃加入1.5小时。将该溶剂减压除去并将该残余物用硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-溴-4-硝基-1-(2,2,2-三氟乙基)-1H-吡唑，其为淡黄色固体(536mg，33％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.30(s，1H)，4.86(q，J＝7.8Hz，2H)。
实施例41 5-氯-1-乙基-4-硝基-1H-吡唑
根据中间体5的操作，以1-乙基-4-硝基吡唑为起始原料，得到5-氯-1-乙基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(1.3g，74％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.16(s，1H)，4.26(q，J＝7Hz，2H)，1.50(t，J＝7Hz，3H)。
实施例42 1-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-胺
将4-硝基吡唑(1.13g，10mmol)和K2CO3(3.4g，25mmol)在MeCN(50mL)中的混合物在室温搅拌15min，然后加入3-(溴甲基)-3-甲基环氧丙烷(1.8g，11mmol)。将该反应混合物在室温搅拌18小时，过滤并将滤饼用MeCN洗涤。将该滤液减压浓缩，并将该残余物用硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)梯度纯化，得到1-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)甲基)-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(1.43g，73％)。将溶于MeOH(20mL)中的部分的这种固体(206mg，1.04mmol)用甲酸铵(260mg，4.13mmol)和10％钯碳(50mg)处理。将该混合物在80℃加热1.5小时，冷却，经过滤并将该滤液减压浓缩，得到1-((3-甲基氧杂环丁烷-3-基)甲基)-1H-吡唑-4-胺，其为淡粉色胶状物(160mg，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.15(s，1H)，6.97(s，1H)，4.66(d，J＝6.1Hz，2H)，4.37(d，J＝6.1Hz，2H)，4.19(s，2H)，2.91(s，2H)，1.23(s，3H)。
实施例43 5-氯-1-环丙基甲基-4-硝基-1H-吡唑
根据中间体5的操作，以1-环丙基甲基-4-硝基吡唑为起始原料，得到5-氯-1-环丙基甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色油状物(1.16g，56％)。1H-NMR(400MHz，CDCl3)δ8.17(s，1H)，4.07(d，J＝7Hz，2H)，1.39-1.28(m，1H)，0.66-0.59(m，2H)，0.50-0.40(m，2H)。
实施例44 5-氨基-N-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺
根据中间体1的操作，以3-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-胺为起始原料，得到5-氨基-N-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺，其为灰白色固体(146mg，46％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ8.89(s，1H)，7.74(s，1H)，7.60-7.50(m，3H)，7.28(t，J＝8.6Hz，2H)，3.80(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 370(M+1)。
实施例45 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-(3-甲氧基丙基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺
根据中间体1的操作，经制备型HPLC纯化后，得到5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-(3-甲氧基丙基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺(0.14g，28％，经2步)，其为乳白色固体。1H(400MHz，d6-DMSO)δ9.75(s，1H)，7.97(s，1H)，7.67(s，1H)，7.58-7.52(m，3H)，7.30-7.25(m，2H)，4.09(t，J＝17.0Hz，2H)，3.27(s，3H)，3.23(t，J＝15.4Hz，2H)，1.98-1.93(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 394(M+1)。
实施例46 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺
根据中间体1的操作，经制备型HPLC纯化后，得到5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺(0.17g，43％，经2步)，其为亮棕色固体。1H(400MHz，d6-DMSO)δ9.75(s，1H)，8.03(s，1H)，7.70(s，1H)，7.58-7.52(m，3H)，7.29-7.25(m，2H)，4.40-4.36(m，1H)，3.97-3.93(m，2H)，3.49-3.43(m，2H)，1.97-1.87(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 406(M+1)。
中间体1 4-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-5-基氨基甲酸叔丁酯
将PyBOP(4.08g，7.84mmol)和5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(2.20g，6.16mmol)在DCM(50mL)中的溶液在室温搅拌30min。然后加入5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-胺(737mg，5.60mmol)和DIPEA(1.6mL，9.0mmol)在DCM(50mL)中的溶液，并将该混合物在室温搅拌16小时。将该混合物用DCM(50mL)稀释并用水(3x 50mL)洗涤。将该有机层分离，通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，然后用MeCN研磨，得到4-(5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-5-基氨基甲酸叔丁酯，其为灰白色固体(1.71g，65％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.32(s，1H)，8.73(s，1H)，8.06(s，1H)，7.42-7.33(m，1H)，7.09-7.01(m，2H)，3.87(s，3H)，1.54(s，9H)。
中间体2 5-(3,4-二氢-2H-吡喃-6-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
将5-氯-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(200mg，1.25mmol)、氟化钾二水合物(235mg，2.5mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃-6-硼酸频哪醇酯(394mg，1.88mmol)在THF(3mL)中的混合物通过鼓入氮气脱气15min。加入三(二亚苄基丙酮)二钯/三叔丁基膦四氟硼酸盐混合物(摩尔比：1/1.2，151mg，0.13mmol)并将该混合物进一步脱气10min，之后在85℃微波中加热2小时。加入水(10mL)并将该混合物用EtOAc(3x 5mL)萃取。将合并的有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-5％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(3,4-二氢-2H-吡喃-6-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为黄色固体(215mg，82％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.22(t，J＝3.9Hz，1H)，4.20(t，J＝5.1Hz，2H)，3.88(s，3H)，2.31-2.24(m，2H)，2.05-1.96(m，2H)。
中间体3 2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛
将氮气鼓入3-氯-2-甲基-4-硝基-吡唑(16g，100mmol)、乙烯三氟硼酸钾(18g，134mmol)和碳酸铯(3.7M的水溶液，50mL，190mmol)在DMF(100mL)中的溶液中。加入1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(900mg，1.10mmol)并继续脱气30min。将该反应混合物在110℃加热18小时。加入更多的1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(900mg，1.10mmol)并继续加热24小时。加入更多的1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷复合物(400mg，0.49mmol)并继续加热4小时。将该反应冷却至室温，加入盐水(200mL)和EtOAc(500mL)。将有机层用水(4x 300mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到1-甲基-4-硝基-5-乙烯基-1H-吡唑，其为无色固体(9.1g)。向冷却至-78℃的该固体(9.1g，59mmol)在DCM(400mL)中的溶液鼓入臭氧。当该溶液变成蓝色，停止加入臭氧。将氮气通入该溶液，直至蓝色褪去。将该混合物温热至室温并用氮气吹扫15min。加入无水二甲基二硫醚(5mL)并将该混合物温热至室温。搅拌12小时后，将该溶剂减压除去。加入DCM(150mL)并将该混合物用水(50mL)洗涤。将水层用DCM(3x 100mL)萃取并将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并浓缩，得到2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛，其为橙黄色固体(6.6g，43％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.51(s，1H)，8.11(s，1H)，4.23(s，3H)。
中间体4 1-甲基-5-(5-甲基-6,8-二氧杂螺[2.5]辛-7-基)-4-硝基-吡唑
在0℃，向1-(2-羟基丙基)环丙醇(2.0g，17.2mmol)在DCM(35mL)中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶(5mL，42.9mmol)，然后加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(6mL，32.9mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌18小时。在0℃，加入额外量的2,6-二甲基吡啶(5mL，42.9mmol)和三氟甲磺酸三甲基硅酯(6mL，32.9mmol)。将该混合物搅拌1小时并用饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭。将该混合物用DCM(50mL)萃取并将有机层用0.1M HCl水溶液(2x 15mL)洗涤，并通过相分离柱。向该溶液中加入2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(1.40g，9.03mmol)并将所得溶液冷却至-78℃并加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(4.11mL，22.6mmol)。将该混合物温热至0℃，搅拌3小时，冷却至-78℃并加入额外的三氟甲磺酸三甲基硅酯(4.11mL，22.6mmol)。将该混合物温热至0℃并再搅拌1小时并加入固体碳酸钠(2.5g)。将该反应混合物搅拌10min，然后加入饱和NaHCO3水溶液(100mL)。将有机层用水(100mL)和盐水(100mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到1-甲基-5-(5-甲基-6,8-二氧杂螺[2.5]辛-7-基)-4-硝基-吡唑，其为无色固体(1.0g，44％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(s，1H)，6.59(s，1H)，4.29-4.02(m，4H)，2.33-2.23(m，1H)，1.33(d，J＝6.2Hz，3H)，1.17-1.12(m，1H)，1.02-0.89(m，2H)，0.70-0.52(m，2H)。
中间体5 2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮
在-78℃，向1-甲基-5-(5-甲基-6,8-二氧杂螺[2.5]辛-7-基)-4-硝基-吡唑(1.0g，3.95mmol)在DCM(20mL)中的溶液中滴加四氯化钛(6.6mL，59.3mmol)。加入过程中，该反应混合物变得难以搅拌，因此加入更多的DCM(10mL)。将该棕色浆液温热至0℃并搅拌1小时。小心地加入固体碳酸钠(5g)，然后加入饱和NaHCO3水溶液(100mL)和DCM(100mL)。将该有机层用饱和NaHCO3水溶液(100mL)和盐水(100mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮，其为无色固体(749mg，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.69(dd，J＝11.0，2.4Hz，1H)，4.21-4.14(m，1H)，4.01(s，3H)，3.07-2.97(m，1H)，2.79-2.63(m，3H)，2.19-2.07(m，1H)，2.07-1.91(m，1H)，1.30(d，J＝6.2Hz，3H)。
中间体6 2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇
在氮气下，向冷却至-78℃的2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮(65mg，0.26mmol)在THF(1mL)中的溶液中滴加三仲丁基硼氢化锂(L-selectride)(1M的THF溶液，0.28mL，0.28mmol)溶液。1小时后，将该混合物用MeOH(1mL)淬灭并温热至室温。加入EtOAc(10mL)和盐水(10mL)并将层分离。将该水层用EtOAc(3x 10mL)萃取并将合并的有机层用盐水(10mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇，其为无色固体(54mg，81％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(2s，1H)，5.63-5.59和5.56-5.50(2m，1H)，4.26-4.01(m，5H)，3.88-3.73(m，1H)，2.21-1.72(m，4H)，1.28-1.23(m，3H)，0.99-0.81(m，2H)。
中间体7 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
向5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(530mg，1.49mmol)在MeOH(10mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4M，5mL，20.0mmol)。将该反应混合物在室温搅拌48小时并将该溶剂减压除去，得到5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸，其为盐酸盐。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ7.57-7.45(m，1H)，7.29-7.18(m，2H)，5.30(br s，3H)。
中间体8 5-(1-烯丙氧基戊-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-吡唑
在-78℃，向1-甲基-4-硝基-吡唑(9.7g，76.7mmol)和戊-4-烯醛(10.0g，84.4mmol)在THF(250mL)中的溶液中滴加LiHMDS的THF溶液(1M，192mL，191.7mmol)。将该反应混合物温热至-40℃并搅拌4小时。将该反应用饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭，温热至室温并将该溶剂减压除去。将该残余物溶于EtOAc(100mL)并用水(30mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-30％EtOAc/异己烷)纯化，得到澄清油状物。在氮气下，将该油状物(7.1g，33.6mmol)、碳酸二烯丙酯(14.33g，100.9mmol)和三苯基膦(880mg，3.35mmol)溶于二噁烷(236mL)中，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(780mg，0.84mmol)。将该反应混合物在50℃加热1小时并将该溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(1-烯丙氧基戊-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为黄色油状物(8.35g，43％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，5.90-5.73(m，2H)，5.46(dd，J＝8.8，5.1Hz，1H)，5.29-5.16(m，2H)，5.10-5.00(m，2H)，4.04(s，3H)，3.92(d，J＝5.8Hz，2H)，2.37-2.25(m，1H)，2.22-2.09(m，1H)，2.09-1.96(m，1H)，1.84(dddd，J＝13.7，9.2，6.9，5.1Hz，1H)。
中间体9 1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑
将5-(1-烯丙氧基戊-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(5g，19.92mmol)溶于甲苯(1L)中，并将该混合物脱气30min，然后加入亚苄基-双(三环己基膦)二氯化钌(Benzylidene-bis(tricyclohexylphosphine)dichloro lororuthenium或Bis(tricyclohexylphosphine)benzylidine ruthenium(IV)dichloride)，"Grubbs一代催化剂"CAS No.172222-30-9，Sigma-Aldrich Product No.579726，US6111121，(878mg，0.99mmol)。将该反应混合物进一步脱气20min，然后加热回流2小时，冷却至室温并经过滤。将该滤液减压浓缩。将该残余物溶于EtOAc(200mL)，用1M HCl水溶液(150mL)、水(150mL)、饱和NaHCO3水溶液(2x 150mL)和盐水(150mL)洗涤。将该有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-20％EtOAc/异己烷)纯化，得到1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑，其为澄清的油状物(3.3g，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.99-5.91(m，1H)，5.83-5.76(m，1H)，5.59(dd，J＝9.4，3.0Hz，1H)，4.42(dd，J＝15.8，5.5Hz，1H)，4.24-4.17(m，1H)，4.06(s，3H)，2.58-2.48(m，1H)，2.46-2.36(m，1H)，2.14(ddt，J＝14.1，6.8，3.5Hz，1H)，1.99-1.88(m，1H)。
中间体10 7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3,4-二醇
在0℃，向AD-mixα(1.51g)在叔丁醇(5.4mL)和水(5.5mL)中的溶液中加入1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑(240mg，1.08mmol)在叔丁醇(0.8mL)中的溶液。将该反应混合物在0℃搅拌1小时，然后缓慢加入固体硫代硫酸钠(1.4g)。将该混合物再搅拌1小时并用EtOAc(20mL)稀释。将该水层用EtOAc(4x 15mL)萃取并将有机层合并，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-2.5％MeOH/EtOAc)纯化，得到7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3,4-二醇，其为无色固体(30mg，10％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06-7.98(m，1H)，5.49(dd，J＝8.9，5.7Hz，1H)，4.20(dd，J＝13.7，3.2Hz，1H)，4.16-4.10(m，1H)，4.09(s，3H)，4.04-3.97(m，1H)，3.73(dd，J＝13.7，2.5Hz，1H)，2.53-2.46(m，1H)，2.32(dtd，J＝14.3，8.8，4.9Hz，1H)，2.23(d，J＝5.8Hz，1H)，2.19-2.01(m，2H)，1.84-1.75(m，1H)。
中间体11 1-甲基-5-(5-乙基-6,8-二氧杂螺[2.5]辛-7-基)-4-硝基-吡唑
在氮气下，向(3R)-3-羟基丁酸乙酯(2.5g，18.9mmol)在THF(100mL)中的溶液中加入异丙醇钛(IV)(6.02mL，19.9mmol)在THF(15mL)中的溶液，然后滴加乙基溴化镁的乙醚溶液(3M，30.2mL，90.7mmol)，持续2小时。将该反应混合物再搅拌2小时，之后冷却至0℃并通过缓慢加入饱和氯化铵水溶液(75mL)淬灭。将该溶液过滤并将滤液用DCM(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用盐水(75mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到1-[(2R)-2-羟基丁基]-环丙醇，其为黄色油状物(1.50g)。向冷却至0℃的该油状物(900mg，7.76mmol)在DCM(15mL)中的溶液中加入2,6-二甲基吡啶(2.26mL，19.40mmol)然后加入三氟甲磺酸三甲基硅酯(3.1mL，17.10mmol)。将该反应混合物在0℃搅拌2小时，然后加入额外的2,6-二甲基吡啶(2.26mL，19.40mmol)和三氟甲磺酸三甲基硅酯(3.1mL，17.10mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌18小时。将该混合物冷却至0℃，用0.1M HCl水溶液(15mL)淬灭并用DCM(50mL)萃取。将有机层用0.1M HCl水溶液(2x 15mL)洗涤并通过相分离柱。向该溶液中加入2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(1.90g，7.13mmol)并将所得溶液冷却至-78℃，然后滴加三氟甲磺酸三甲基硅酯(0.64mL，3.56mmol)。将该混合物温热至0℃并搅拌3小时，然后冷却至-78℃并加入额外的三氟甲磺酸三甲基硅酯(1mL，5.49mmol)。在0℃搅拌3小时，重复该操作。将该反应混合物在0℃再搅拌2小时，然后加入固体碳酸钠(2.5g)。将该反应混合物搅拌10min并加入NaHCO3饱和溶液(10mL)。将该有机层用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到1-甲基-5-(5-乙基-6,8-二氧杂螺[2.5]辛-7-基)-4-硝基-吡唑，其为无色固体(655mg，4％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(s，1H)，6.58(s，1H)，4.13(s，3H)，4.00-3.92(m，1H)，2.29(t，J＝12.4Hz，1H)，1.75-1.47(m，3H)，1.00-0.87(m，5H)，0.67-0.53(m，2H)。
中间体12 2-乙基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮
根据中间体5的操作，以1-甲基-5-(5-乙基-6,8-二氧杂螺[2.5]辛-7-基)-4-硝基-吡唑为起始原料，得到2-乙基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮，其为无色固体(240mg，13％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.67(dd，J＝11.0，2.4Hz，1H)，4.02(s，3H)，3.94(dd，J＝10.2，5.2Hz，1H)，3.04(td，J＝13.3，3.3Hz，1H)，2.79-2.63(m，3H)，2.20-2.12(m，1H)，2.05-1.92(m，1H)，1.67-1.57(m，2H)，0.94(t，J＝7.4Hz，3H)。
中间体13 N-(2-乙基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺
向2-乙基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮(120mg，0.45mmol)在THF(3mL)中的溶液中加入(R)-2-甲基丙-2-亚磺酰胺(70mg，0.58mmol)，然后加入乙醇钛(IV)(titanium(IV)ethoxide)(0.30mL，1.12mmol)。将该反应混合物加热回流4小时，然后冷却至室温。在-60℃，将粗制的溶液滴加至硼氢化钠(69mg，1.80mmol)在THF(3mL)中的溶液。将该反应混合物温热至0℃，用MeOH(3mL)和盐水(50mL)淬灭，并在室温搅拌18小时。将该混合物经过滤，用EtOAc(200mL)洗涤。将水层用EtOAc(3x 50mL)萃取，并将合并的有机层用盐水(150mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-10％MeOH/DCM)纯化，得到N-(2-乙基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺，其为非对映异构体混合物(比例为5:2)，其为无色固体(118mg，71％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03和8.02(2s，1H)，5.60-5.51(m，1H)，4.08和4.06(2s，3H)，3.83-3.66(m，2H)，3.62-3.50(m，1H)，3.22和3.15(d，J＝6.2和4.0Hz，1H)，2.11-1.96(m，4H)，1.76(s，1H)，1.63-1.54(m，2H)，1.28-1.15(m，9H)，0.91(td，J＝7.4，2.4Hz，3H)。
中间体14 N-(2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺
根据中间体13的操作，以2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-酮为起始原料，得到N-(2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺，其为灰白色固体(208mg，40％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.63-5.51(m，1H)，4.05(s，3H)，3.86-3.72(m，2H)，3.19-3.11(m，1H)，2.22-1.69(m，6H)，1.29-1.20(m，12H)。
中间体15 3-烯丙氧基-3-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)丙酸
向锌粉(<10μm，10.3g，159mmol)在无水Et2O(120mL)中的混悬液中加入数滴三甲基氯硅烷以引发该反应。然后将该反应混合物加热回流5min并小心地加入数滴1,2-二溴乙烷。滴加2-溴乙酸叔丁酯溶液(18.8mL，127mmol)并将该反应混合物加热回流1小时。在室温，加入2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(77重量％的DMSO溶液，6.4g，31.8mmol)在THF(120mL)中的溶液并继续搅拌150min。将该反应混合物用EtOAc(200mL)和饱和氯化铵/1M HCl(100mL/100mL)稀释并搅拌18小时。将层分离并将水层用EtOAc(3x 200mL)萃取。将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到3-羟基-3-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)丙酸叔丁酯，其为无色固体(6.52g，77％)。向该固体(6.52g，24mmol)在二噁烷(168mL)中的溶液中加入碳酸双烯丙基酯(10.2g，72mmol)。将该反应混合物用氮气脱气30min。将三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(557mg，0.60mmol)和三苯基膦(630mg，2.40mmol)一次性加入并继续脱气15min。将该反应混合物在65℃加热1h并冷却至室温。加入盐水(100mL)和EtOAc(150mL)并将层分离。将水层用EtOAc(3x 150mL)萃取并将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到3-(烯丙氧基)-3-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)丙酸叔丁酯，其为无色固体(7.7g，99％)。向该固体(7.7g，24mmol)在DCM(80mL)中的溶液中加入TFA(40mL)并将该混合物在室温搅拌18小时。冷却至0℃后，小心地加入碳酸钠(5g)、饱和NaHCO3水溶液(100mL)和DCM(200mL)直至停止冒泡。缓慢加入浓HCl，直至该溶液的pH4。将水层用DCM(3x 200mL)萃取并将合并的有机层分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到3-烯丙氧基-3-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)丙酸，其为黄色油状物(4.33g，55％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ11.5-10.3(br s，1H)，8.08(s，1H)，5.90-5.78(m，3H)，5.28-5.18(m，1H)，4.07(s，3H)，4.06-3.96(m，2H)，2.99(dd，J＝16.2，9.3Hz，1H)，2.87(dd，J＝16.2，4.3Hz，1H)。
中间体16 2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3,7-二氢-2H-氧杂环庚-4-酮
在0℃，向3-烯丙氧基-3-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)丙酸(4.33g，17mmol)在DCM(48mL)中的溶液中加入草酰氯(4.37mL，51mmol)，然后小心地加入DMF(0.05mL)以引发该酰化反应。将该反应混合物在室温搅拌3小时并减压浓缩。将该残余物溶于DME(28mL)，加入三丁基乙烯基锡(2.48mL，8.50mmol)并将该混合物用氮气脱气30min。加入反式-苄基(氯)-双(三苯基膦)钯(II)(129mg，0.17mmol)并继续脱气10min。将该反应混合物加热至65℃，持续1小时并冷却至室温。减压浓缩并经硅胶柱色谱纯化(0-100％EtOAc/异己烷)，得到5-(烯丙氧基)-5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-1-烯-3-酮，其为黄色浆液(2.76g，61％)。在35℃，将该浆液(250mg，0.94mmol)在甲苯(90mL)中的溶液用氮气脱气30min。将溶于在甲苯(2mL)的Zhan 1B催化剂(26mg，0.04mmol)加至该反应混合物中，并继续脱气15min。在35℃搅拌1h后，将该反应混合物冷却至室温并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3,7-二氢-2H-氧杂环庚-4-酮，其为无色固体(107mg，30％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，6.44(ddd，J＝12.8，3.4，2.3Hz，1H)，6.15(m，1H)，6.01(dd，J＝11.1，3.4Hz，1H)，4.72(ddd，J＝19.8，3.4，1.7Hz，1H)，4.61(ddd，J＝19.6，2.4Hz，1H)，4.08(s，3H)，3.20-3.12(m，2H)。
中间体17 5-(6-叠氮基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(非对映异构体1)
向2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3,7-二氢-2H-氧杂环庚-4-酮(440mg，0.42mmol)在MeCN(3mL)中的溶液中加入Amberlite IRA 900F树脂(79mg，0.19mmol)和叠氮基三甲基硅烷(1.2mL，9.35mmol)。将该反应混合物在防冲击屏后以65℃加热24小时，冷却至室温并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到纯的6-叠氮基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-酮，以及含有产物和起始原料的混合级分。将这些减压浓缩并以相同反应条件重新反应。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)最终纯化，得到6-叠氮基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-酮，其为无色固体(449mg)。向该固体(449mg，1.60mmol)中加入(50％的THF溶液，5mL)并将该混合物在室温搅拌18小时。加入DCM(50mL)并将该反应混合物冷却至0℃。然后小心地加入饱和NaHCO3水溶液(30mL)。将水层用DCM(3x 30mL)萃取并将合并的有机层用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(6-叠氮基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(非对映异构体1–主要产物)，其为无色固体(264mg，47％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.67-5.58(m，1H)，4.18-3.91(m，3H)，4.08(s，3H)，2.79-2.63(m，1H)，2.63-2.40(m，3H)。
中间体18 5-(6-叠氮基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(非对映异构体2)
根据中间体17的操作，也得到5-(6-叠氮基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(非对映异构体2–次要产物)，其为无色固体(69mg，12％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.73(dd，J＝10.9，4.5Hz，1H)，4.34-4.29(m，1H)，4.01(s，3H)，4.01-3.93(m，1H)，3.53(dd，J＝11.4，11.4Hz，1H)，2.71-2.49(m，4H)。
中间体19 5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑
向1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑(1.00g，4.74mmol)在DCM(25mL)中的溶液中加入m-CPBA(70-75％，1.75g，7.11mmol)并将该反应混合物在室温搅拌18小时。将该反应混合物用DCM(50mL)稀释，用饱和NaHCO3水溶液(50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-30％EtOAc/异己烷)纯化，得到外消旋的5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为无色固体(490mg，43％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.22-7.87(m，1H)，5.07(d，J＝9.9Hz，1H)，4.50(dd，J＝14.5，3.1Hz，1H)，4.05(s，3H)，3.93(d，J＝14.4Hz，1H)，3.35(t，J＝4.5Hz，1H)，3.13(t，J＝3.6Hz，1H)，2.55-2.47(m，1H)，2.31-2.21(m，1H)，2.16-2.04(m，1H)，1.79(dd，J＝14.4，1.8Hz，1H)。
中间体20 N-(4-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯
将5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(220mg，0.92mmol，中间体19)在MeOH/水(6mL/1.2mL)中的溶液用氯化铵(122mg，2.30mmol)和叠氮化钠(299mg，4.60mmol)处理并将该混合物在防冲击屏后，以70℃加热16小时。将该反应混合物用EtOAc(100mL)萃取并将有机层用水(2x 50mL)洗涤，用MgSO4干燥并减压浓缩。将该残余物(500mg，1.77mmol)溶于无水DMF(15mL)中，冷却至0℃，加入氢化钠(60％于矿物油状物中，106mg，2.66mmol)并将该混合物搅拌15min。加入碘甲烷(0.17mL，2.66mmol)并将该反应混合物温热至室温并搅拌16小时。加入水(20mL)并将该混合物用EtOAc(2x 150mL)萃取。将合并的有机层用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-30％EtOAc/异己烷)纯化，得到4-叠氮基-5-甲氧基-1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氮杂环庚烷，其为黄色油状物(280mg)。将该油状物(270mg，0.91mmol)在THF/水(13mL/2.5mL)中的溶液用三苯基膦(263mg，1.00mmol)处理，并将该反应混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该反应混合物减压浓缩。在0℃，将该残余物溶于无水DCM(15mL)中并加入焦碳酸二叔丁酯(238mg，1.09mmol)，然后加入DIPEA(0.66mL，4.55mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌3小时，然后用水(20mL)淬灭并用DCM(100mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，分离出4种非对映异构体。次要级分为N-(4-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯(外消旋体)，其为无色固体(60mg，17％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.58-5.51(m，1H)，4.82(br s，1H)，4.31(dd，J＝12.7，3.0Hz，1H)，4.02(s，3H)，3.87(br s，1H)，3.62-3.48(m，2H)，3.41(s，3H)，2.28-2.09(m，2H)，2.03-1.83(m，2H)，1.47(s，9H)。
中间体21 ((3S,4R,7S)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体20的操作，将分离出的主要级分(290mg)用手性SFC进一步纯化，得到((3S,4R,7S)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为无色固体(101mg，29％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.39(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.75(br s，1H)，4.33(dd，J＝14.2，1.9Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.91-3.83(m，1H)，3.75(dd，J＝14.2，3.2Hz，1H)，3.43(s，3H)，3.39-3.34(m，1H)，2.22-2.12(m，1H)，2.12-2.03(m，1H)，2.03-1.82(m，2H)，1.47(s，9H)。
中间体22 ((3R,4S,7R)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体21的操作，还得到((3R,4S,7R)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为无色固体(101mg，29％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05-7.99(m，1H)，5.39(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.75(br s，1H)，4.33(dd，J＝14.2，1.9Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.90-3.82(m，1H)，3.75(dd，J＝14.2，3.2Hz，1H)，3.43(s，3H)，3.42-3.31(m，1H)，2.22-2.12(m，1H)，2.12-2.03(m，1H)，2.03-1.83(m，2H)，1.62-1.29(m，9H)。
中间体23 N-(3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
将5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(130mg，0.54mmol，中间体19)在MeOH/水(3mL/0.6mL)中的溶液用氯化铵(72mg，1.35mmol)和叠氮化钠(177mg，2.72mmol)处理，并将该混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该反应混合物用EtOAc(100mL)萃取并将有机层用水(3x 20mL)洗涤，用盐水(20mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。向所得残余物(100mg，0.35mmol)在DCM(3mL)中的溶液中加入(50％的THF溶液，0.32mL，0.89mmol)并将该混合物在室温搅拌16小时。将该混合物用DCM(30mL)稀释，在冰/水浴中冷却并通过滴加饱和NaHCO3水溶液(30mL)淬灭。将所得混合物搅拌10min。将有机层分离，用Na2SO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到油状物(90mg)。将该油状物(90mg，0.35mmol)在THF/水(4mL/0.8mL)中的溶液用三苯基膦(92mg，0.35mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该混合物减压浓缩。在0℃，将所得残余物溶于无水DCM(7mL)中并加入焦碳酸二叔丁酯(84mg，0.38mmol)和DIPEA(0.22mL，1.6mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌3小时。加入水(10mL)并将该化合物用DCM(20mL)萃取。将该有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-(3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为对映异构体混合物，其为灰白色固体(70mg，36％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.55-5.49(m，1H)，5.10-4.92(m，2H)，4.36-4.09(m，2H)，4.02(s，3H)，3.97-3.83(m，1H)，2.32-2.18(m，1H)，2.02-1.89(m，2H)，1.83(d，J＝14.0Hz，1H)，1.47(s，9H)。
中间体24 ((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
通过手性SFC进一步纯化N-(3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，得到((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为灰白色固体(52mg)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.55-5.49(m，1H)，5.09-4.91(m，2H)，4.36-4.10(m，2H)，4.01(s，3H)，3.91(ddd，J＝26.6，14.4，2.2Hz，1H)，2.31-2.19(m，1H)，2.02-1.95(m，2H)，1.83(d，J＝13.9Hz，1H)，1.47(s，9H)。
中间体25 ((3S,4S,7R)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体24的操作，还得到((3S,4S,7R)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为灰白色固体(61mg)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.55-5.49(m，1H)，5.10-4.92(m，2H)，4.36-4.09(m，2H)，4.02(s，3H)，3.97-3.83(m，1H)，2.32-2.18(m，1H)，2.02-1.89(m，2H)，1.83(d，J＝14.0Hz，1H)，1.47(s，9H)。
中间体26 5-(4,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-5-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑
将5-(1-烯丙氧基戊-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(7.08g，28.2mmol)溶于DCM(910mL)中，并将该混合物脱气30min，然后加入Grubbs第二代催化剂(1.19g，1.41mmol)。将该反应混合物在40℃加热18小时并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-10％EtOAc/异己烷)纯化，然后用反相制备型HPLC纯化，得到1-甲基-4-硝基-5-(四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑的异构体混合物(66/34)，其为澄清的油状物(2.3g)。向该油状物(2.3g，10.31mmol)在DCM(50mL)中的溶液中加入m-CPBA(70-75％，3.56g，14.40mmol)，并将该反应混合物在室温搅拌4小时。将该反应混合物用DCM(50mL)稀释并将有机层用饱和NaHCO3水溶液(2x 50mL)、水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-30％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(4,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-5-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为无色固体(1.0g，14％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.51-5.44(m，1H)，4.02(s，3H)，3.93(dt，J＝12.7，3.4Hz，1H)，3.62-3.53(m，1H)，3.35-3.27(m，2H)，2.58-2.51(m，1H)，2.41-2.25(m，3H)。
中间体27 5-叠氮基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇
向5-(4,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-5-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(1.04g，4.35mmol)在4:1MeOH:水(30mL)中的溶液中加入氯化铵(0.58g，10.88mmol)和叠氮化钠(1.41g，21.75mmol)。将该混合物在防冲击屏后以70℃加热16小时。将MeOH减压除去并加入EtOAc(20mL)。将有机层用饱和NaHCO3水溶液(20mL)洗涤，通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-叠氮基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇，其为淡黄色胶状物(718mg，58％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.76(dd，J＝9.3，3.2Hz，1H)，4.18-4.10(m，1H)，4.08-4.04(m，4H)，3.91(ddd，J＝9.4，6.6，6.2Hz，1H)，3.79(ddd，J＝12.6，8.6，3.5Hz，1H)，2.44(ddd，J＝15.3，9.4，3.8Hz，1H)，2.37-2.29(m，1H)，2.24(d，J＝3.2Hz，1H)，2.12(ddd，J＝15.3，5.7，3.2Hz，1H)，2.06-1.96(m，1H)。
中间体28 5-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇
根据中间体26的操作，还得到5-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇，其为淡黄色胶状物(285mg，23％产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.64(dd，J＝10.8，1.4Hz，1H)，4.06-3.96(m，4H)，3.95-3.83(m，2H)，3.72(ddd，J＝10.8，9.0，4.9Hz，1H)，2.43(d，J＝2.5Hz，1H)，2.28(ddd，J＝14.1，4.9，1.4Hz，1H)，2.21-2.12(m，2H)，2.09-2.00(m，1H)。
中间体29 N-(5-氟-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
向冷却至0℃的5-叠氮基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇(282mg，1.00mmol)在DCM(6mL)中的溶液中滴加(50％的THF溶液，0.46mL，1.25mmol)。将该混合物温热至室温并搅拌16小时。加入额外的(50％的THF溶液，0.23mL，0.63mmol)并将该混合物在室温搅拌5小时。在冰浴中冷却后，缓慢加入饱和NaHCO3水溶液(10mL)。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。将该残余物用硅胶色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到氟化合物，其为透明胶状物(205mg)。向该胶状物(200mg，0.70mmol)在THF(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入三苯基膦(202mg，0.77mmol)并将该混合物在60℃加热2小时。将该混合物用EtOAc(10mL)稀释并用盐水(2x 5mL)洗涤。将该有机层通过相分离柱并减压浓缩。将该残余物溶于DCM(2mL)和DIPEA(0.24mL，1.40mmol)中，并加入焦碳酸二叔丁酯(183mg，0.84mmol)。将该混合物在室温搅拌2小时。加入水(2mL)并将该混合物用DCM(3x 2mL)萃取。将合并的有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-(5-氟-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为透明胶状物(240mg，66％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.62(dd，J＝11.3，2.3Hz，1H)，5.28-4.79(m，2H)，4.29-4.19(m，1H)，4.15-4.07(m，1H)，4.04(s，3H)，3.77(ddd，J＝12.9，8.1，4.5Hz，1H)，2.41-2.07(m，3H)，2.04(d，J＝10.8Hz，1H)，1.44(s，9H)。
中间体30 N-(5-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在氮气下，向冷却至0℃的5-叠氮基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇(352mg，1.25mmol)在无水THF(6mL)中的溶液中加入氢化钠(60％与矿物油状物中，55mg，1.38mmol)。搅拌20min后，加入碘甲烷(0.09mL，1.38mmol)并将该反应化合物温热至室温并搅拌90min。将该混合物再次冷却至0℃并加入更多的氢化钠(60％于矿物油状物中，55mg，1.38mmol)。搅拌20min后，加入更多的碘甲烷(0.09mL，1.38mmol)并将该反应混合物温热至室温并搅拌5小时。加入水(5mL)并将该混合物用EtOAc(3x 5mL)萃取。将合并的有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到中间体甲基醚，其为澄清胶体(155mg)。将该胶体(154mg，0.52mmol)在THF/水(5mL/1mL)中的溶液用三苯基膦(150mg，0.57mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后以60℃加热2小时。将该混合物用EtOAc(10mL)稀释并用盐水(2x 5mL)洗涤。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。将该残余物溶于无水DCM(2mL)和DIPEA(0.18mL，1.04mmol)中，并加入焦碳酸二叔丁酯(136mg，0.62mmol)。将该反应混合物在室温搅拌3小时。加入水(2mL)并将该混合物用DCM(3x 2mL)萃取。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-(5-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为透明胶状物(190mg，41％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.67(dd，J＝10.5，2.0Hz，1H)，4.96(s，1H)，4.33(s，1H)，4.06(s，3H)，4.02-3.84(m，2H)，3.62(d，J＝5.2Hz，1H)，3.44(s，3H)，2.52(dddd，J＝15.1，9.9，7.5，2.1Hz，1H)，2.20-2.01(m，2H)，1.90-1.78(m，1H)，1.48(s，9H)。
中间体30 2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-酮
向2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(600mg，3.87mmol)在CDCl3(20mL)中的溶液中加入丹尼谢夫斯基双烯(Danishefsky’s diene)(836mg，5.81mmol)和Resolve-AlTMEuFOD(157mg，0.39mmol)。将该反应混合物在80℃的密闭管中加热24小时。加入额外的Resolve-AlTMEuFOD(250mg，0.62mmol)并再继续加热24小时。将该反应混合物减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-2H-吡喃-4(3H)-酮，其为黄色固体(710mg，82％)。在氮气下，将一部分这种固体(300mg，1.35mmol)溶于THF(10mL)中，并冷却至-78℃。滴加三仲丁基硼氢化锂(1M的THF溶液，1.48mL，1.48mmol)溶液，并将该混合物在-78℃搅拌30min。将该混合物用MeOH(2mL)淬灭并温热至室温。加入EtOAc(30mL)和盐水(30mL)，并将层分离。将水层用EtOAc(3x 20mL)萃取，然后将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-酮，其为无色固体(224mg，61％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，5.70(dd，J＝11.8，3.3Hz，1H)，4.49(ddd，J＝11.8，7.5，1.3Hz，1H)，4.15(s，3H)，3.94-3.86(m，1H)，2.83-2.63(m，3H)，2.58-2.50(m，1H)。
中间体31 7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇
在-70℃，向2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-酮(300mg，1.33mmol)在DCM(12mL)中的溶液中滴加三氟化硼乙醚化物(0.75mL，1.73mmol)，然后加入三甲基硅烷化重氮甲烷溶液(2M的己烷溶液，0.87mL，1.73mmol)。将该反应混合物在-70℃搅拌90min，用水(10mL)淬灭，用DCM(12mL)稀释并温热至室温。将该有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-酮，其为无色固体(121mg)及其区域异构体2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-酮(151mg)。在0℃，向7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-酮(121mg，0.51mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中分批加入NaBH4(23mg，0.61mmol)。持续搅拌1小时并将该反应混合物用1M HCl(5mL)和EtOAc(10mL)淬灭。将水层用EtOAc(3x 20mL)萃取并将合并的有机层用盐水(30mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇，其为非对映异构体的1:1混合物，其为无色油状物(85mg，27％，经2步)。该产物直接以非对映异构体的1:1混合物使用而无需进一步纯化。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02和8.01(s，1H)，5.61-5.56和5.54-5.50(m，1H)，4.26-4.14(m，1H)，4.07和4.04(s，3H)，3.90-3.80和3.81-3.63(m，1H)，2.20-1.80(m，8H)。
中间体32 N-[2-(2,6-二氟苯基)-4-[[5-[5,6-二羟基氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯
在0℃，向AD-mixβ(1.25g)在叔丁醇(5.1mL)和水(4.6mL)中的溶液中加入1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑(200mg，0.89mmol)在叔丁醇(1mL)中的溶液。将该反应混合物在0℃搅拌66小时，然后缓慢加入固体硫代硫酸钠(1.4g)。将该混合物进一步搅拌1小时，并用EtOAc(20mL)稀释。将该水层用EtOAc(4x 15mL)萃取并将合并的有机层用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-2.5％MeOH/EtOAc)纯化，得到7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3,4-二醇，其为无色固体。将该二醇在MeOH(18mL)中的溶液通过(全氢模式，65℃，流速：1mL/min，30mm 10％Pd/C筒)。将溶剂减压除去，得到粗制的胺。向这个胺在DCM(10mL)中的溶液中加入5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(348mg，0.98mmol)、PyBOP(694mg，1.3mmol)和DIPEA(0.44mL，2.67mmol)。将该混合物在室温搅拌18小时。将该混合物用EtOAc(20mL)稀释并用盐水(5ml)洗涤。将有机层用MgSO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-10％MeOH/EtOAc)纯化，得到N-[2-(2,6-二氟苯基)-4-[[5-[5,6-二羟基氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯，其为灰白色固体(96mg，23％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.75(s，1H)，8.17-8.14(m，1H)，7.39-7.32(m，1H)，7.09-7.01(m，2H)，6.25(s，1H)，5.12(t，J＝4.5Hz，1H)，4.23(dd，J＝13.7，4.0Hz，1H)，3.87(d，J＝3.9Hz，1H)，3.81-3.66(m，5H)，2.12-2.00(m，3H)，1.70(t，J＝14.4Hz，3H)，1.55(s，9H)。
中间体33 5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑
向1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,7-四氢氧杂环庚三烯-2-基)吡唑(1.0g，4.5mmol)在DCM(18mL)中的溶液中加入分子筛，然后加入NBS(0.80g，4.48mmol)和乙酸(0.26mL，4.48mol)。将该反应混合物在室温搅拌60小时。将该混合物用DCM(30mL)稀释并用水(15mL)、饱和NaHCO3水溶液(15mL)和盐水(15mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到中间体溴乙酸酯，其为区域异构体混合物，其为澄清的油状物(1.17g)。重复该操作，得到更多的产物。向该油状物(1.55g，4.3mmol)在MeOH(60mL)中的溶液中一次性加入K2CO3(2.66g，19.2mmol)。将这个混合物搅拌1小时，然后加入水(50mL)。加入EtOAc(150mL)并将层分离。将有机层用MgSO4干燥并将溶剂减压除去，得到5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]-辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为澄清的油状物(0.86g，61％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.53-5.45(m，1H)，4.53(dd，J＝13.5，5.2Hz，1H)，4.07(s，3H)，3.58-3.48(m，1H)，3.36-3.25(m，2H)，2.55-2.42(m，1H)，2.07-1.87(m，3H)。
中间体34 N-(3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体23的操作，以5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(中间体33)为起始原料，得到N-(3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(290mg，53％，经4步)，其为灰白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.50(dd，J＝9.9，3.8Hz，1H)，4.96-4.73(m，2H)，4.14-3.95(m，3H)，4.03(s，3H)，2.30-2.16(m，3H)，1.95-1.84(m，1H)，1.47(s，9H)。
中间体35 5-(6-甲氧基-3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑
向2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(487mg，3.14mmol)在CDCl3(12mL)中的溶液中加入[(Z)-1-[(E)-2-甲氧基-1-甲基-乙烯基]丙-1-烯氧基]-三甲基-硅烷(944mg，4.71mmol)和Resolve-AlTM EuFOD(127mg，0.31mmol)。将该反应混合物在80℃密闭管中加热18小时。将该反应混合物冷却至室温并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到3,5-二甲基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-2,3-二氢吡喃-4-酮，其为非对映异构体混合物，其为黄色油状物(829mg)。将该油状物(829mg，3.14mmol)和氯化铈(III)七水合物(4.8g，12.56mmol)在MeOH(10mL)中的溶液在室温搅拌15min。冷却至0℃后，分批加入硼氢化钠(143mg，3.8mmol)并将该混合物在0℃搅拌1小时。将该反应用1M HCl水溶液(10mL)淬灭并用EtOAc(50mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。将该残余物溶于MeOH(40mL)中，并用对甲苯磺酸一水合物(87mg)处理。将该混合物加热回流18小时并减压浓缩。将该残余物溶于DCM(30mL)中，并将有机层用NaHCO3水溶液(2x 20mL)洗涤，用盐水(20mL)洗涤，通过相分离柱并减压浓缩，得到5-(6-甲氧基-3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为黄色油状物(558mg，51％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.15-7.98(m，1H)，5.90(d，J＝3.6Hz)和5.78(d，J＝3.2Hz)(1H)，5.72(d，J＝5.6Hz)和5.64(d，J＝10.8Hz)(1H)，4.80和4.76(2s，1H)，4.16和4.06(2s，3H)，3.42和3.40(2s，3H)，2.65-2.58(m，1H)，1.77和1.65(2s，3H)，0.90(d，J＝7.2Hz)和0.83(d，J＝7.2Hz)(3H)。
中间体36 5-(2,6-二甲基-4,7-二氧杂二环[4.1.0]庚-3-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑
向冷却至-78℃的5-(6-甲氧基-3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(100mg，0.38mmol)在DCM(1mL)中的溶液中加入三氟化硼乙醚化物(0.14mL，1.13mmol)和三乙基硅烷(0.36mL)，2.68mmol)。在-78℃搅拌1小时后，将该反应混合物温热至室温并搅拌18小时。加入饱和NaHCO3水溶液(5mL)和DCM(5mL)并将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为黄色油状物。重复该反应，得到更多产物。向冷却至0℃的5-(3,5-二甲基-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(305mg，1.29mmol)在DCM(6.5mL)中的溶液中加入m-CPBA(70-75％，382mg，1.54mmol)并将该混合物在0℃搅拌90min。加入更多的m-CPBA(70-75％，191mg，0.774mmol)并将该混合物缓慢温热至室温，持续6小时。将该混合物经过滤，用DCM(15mL)洗涤，并将该滤液用饱和NaHCO3水溶液(2x 10mL)洗涤。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(2,6-二甲基-4,7-二氧杂二环[4.1.0]庚-3-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为单一非对映异构体，其为灰白色固体(189mg，53％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(s，1H)，5.32-5.28(m，1H)，4.15-4.08(m，1H)，4.06(s，3H)，3.78(d，J＝12.9Hz，1H)，3.30(d，J＝5.6Hz，1H)，2.71-2.61(m，1H)，1.38(s，3H)，0.92(d，J＝7.0Hz，3H)。
中间体37 4-叠氮基-3,5-二甲基-6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-3-醇
根据中间体27的操作，以5-(2,6-二甲基-4,7-二氧杂二环[4.1.0]庚-3-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑为起始原料，得到4-叠氮基-3,5-二甲基-6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-3-醇，其为灰白色固体(140mg，63％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.09(s，1H)，5.74(d，J＝2.9Hz，1H)，4.14(s，2H)，3.79-3.64(m，3H)，3.58(s，1H)，2.58(qdd，J＝7.6，2.9，2.2Hz，1H)，1.81(s，1H)，1.25(s，3H)，1.18(d，J＝7.6Hz，3H)。
中间体38 N-[5-羟基-3,5-二甲基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-基]氨基甲酸叔丁酯
将4-叠氮基-3,5-二甲基-6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-3-醇(140mg，0.47mmol)在THF/水(1mL/0.2mL)中的溶液用三苯基膦(373mg，1.42mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后以65℃加热18小时。加入更多的THF(1mL)以及三甲基膦(1M的甲苯溶液，1mL，1.0mmol)溶液。将该混合物在防冲击屏后以65℃加热3小时。将该溶剂减压除去并将该残余物溶于无水DCM(4mL)。加入焦碳酸二叔丁酯(115mg，0.53mmol)，然后加入DIPEA(0.18mL，1.05mmol)并将该反应混合物在室温搅拌72小时。将该混合物减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-[5-羟基-3,5-二甲基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为灰白色固体(112mg，64％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，5.52(d，J＝2.7Hz，1H)，4.11-4.01(m，6H)，2.67-2.58(m，1H)，2.54(s，1H)，1.61(s，1H)，1.48(s，9H)，1.36(s，3H)，0.98(d，J＝7.2Hz，3H)。
中间体39 2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-醇
根据中间体30的操作，还得到2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-醇，其为非对映异构体混合物，其为黄色胶状物(91mg，12％，经2步)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.06和8.03(2s，1H)，5.88(dd，J＝8.3，6.1Hz)和5.70(dd，J＝11.8，3.2Hz)(1H)，4.49(dd，J＝11.8，7.4Hz)和4.40(s)(1H)，4.15-3.72(m，2H)，4.15和4.09(s，3H)，2.85-2.55(m，1H)，2.03-1.89(m，3H)，1.79-1.66(m，1H)。
中间体40 N-(2-(2,6-二氟苯基)-4-((1-甲基-5-(2-((2,2,2-三氟乙酰基)氨基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基)吡唑-4-基)氨基甲酰基)噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯
向2,2,2-三氟-N-(5-氟-2-羟基-5-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环庚基)乙酰胺(120mg，0.32mmol)在THF(10mL)和MeOH(10mL)中的溶液中加入10％钯碳(12mg)。将该反应混合物在40℃，400psi氢气氛下加热3小时，冷却至室温，经过滤，用甲醇(50mL)洗涤并减压浓缩。除了额外的HCl水溶液(2M，2mL)，使用相同条件重复该操作。向该残余物在DCM(20mL)中的溶液中加入DIPEA(1.00mL，5.74mmol)、5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(123mg，0.46mmol)和PyBOP(409mg，0.78mmol)并将该混合物在室温搅拌16小时。将该反应用水(20mL)淬灭并用DCM(150mL)萃取。将有机层用饱和NaHCO3溶液(30mL)和水(30mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶色谱(80-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-(2-(2,6-二氟苯基)-4-((1-甲基-5-(2-((2,2,2-三氟乙酰基)氨基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基)吡唑-4-基)氨基甲酰基)噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯，其为灰白色固体(58mg，27％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.47(s，1H)，10.39(s，1H)，8.33(s，1H)，7.39-7.33(m，1H)，7.18-7.10(m，2H)，5.91(d，J＝7.7Hz，1H)，4.89-4.83(m，1H)，4.47-4.38(m，1H)，3.86(s，3H)，2.47-2.38(m，1H)，2.27-1.90(m，7H)，1.55(s，9H)。
中间体41 N-[5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体1的操作，以N-(5-氟-2-羟基-5-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环庚基)氨基甲酸叔丁酯为起始原料，得到N-(5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯，其为淡粉色固体(172mg，17％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.47(s，1H)，10.45(s，1H)，8.29(s，1H)，7.35-7.27(m，1H)，7.18-7.08(m，2H)，4.76(br s，1H)，4.29(br s，1H)，4.04(br s，1H)，3.85(s，3H)，2.38-2.33(m，1H)，2.19-1.86(m，7H)，1.55(s，9H)，1.48(s，9H)。
中间体42 N-[5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体1的操作，以N-(5-氟-2-羟基-5-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环庚基)氨基甲酸叔丁酯为起始原料，得到N-(5-[4-((5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-羰基)氨基)-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯，其为淡粉色固体(310mg，31％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.50(br s，1H)，10.48(s，1H)，8.39-8.29(m，2H)，7.60-7.51(m，1H)，7.38-7.31(m，1H)，7.18(dd，J＝11.4，8.3Hz，1H)，4.86(br s，1H)，4.36(br s，1H)，4.07(br s，1H)，3.86(s，3H)，2.43-2.35(m，1H)，2.22-1.92(m，7H)，1.55(s，9H)，1.50(s，9H)。
中间体43 2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)丙二酸1-叔丁酯3-甲酯
在氮气下，将碳酸钾(15.40g，111.42mmol)一次性加至室温搅拌的5-氯-1-甲基-4-硝基-吡唑(6.0g，37.140mmol)和丙二酸叔丁酯甲酯(8.74g，50.139mmol)在无水DMSO(100mL)中的溶液。将该混合物在75℃加热3小时，然后冷却并使其在室温静置过夜。将该混合物倾倒至水(500mL)中，用2N HCl(80ml，PH 5)酸化并用EtOAc(2x 250mL，2x200ml)萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)并将溶剂减压除去。将该残余物用硅胶色谱(0-30％EtOAc/庚烷)纯化，得到2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)丙二酸1-叔丁酯3-甲酯，其为无色固体(10.3g，92.7％)。
中间体44 2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)乙酸甲酯
将2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)丙二酸1-叔丁酯3-甲酯(6.92g，23.1mmol)和甲酸(100mL)的混合物在50℃加热5小时，然后冷却至室温。将甲酸减压除去；将该残余物用盐水稀释并用DCM 3x萃取。将合并的有机物干燥(MgSO4)并将溶剂减压除去。将该残余物用硅胶色谱(0-60％EtOAc/庚烷)纯化，得到2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)乙酸甲酯(4.15g，90％)。
中间体45 2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)戊-4-烯酸甲酯
在0℃，向2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)乙酸甲酯(869mg，4.36mmol)在无水DMF(10mL)中的溶液中加入氢化钠(218mg，5.45mmol，60重量％)，该混合物立即变为深红色。在0℃搅拌15min后，缓慢加入烯丙基溴(0.57mL，6.54mmol)，在0℃搅拌10min，然后在室温搅拌1h。将该反应用水(20mL)淬灭并用EA(200mL，50mL)萃取。将合并的有机层用水(15x3mL)、盐水(10mL)洗涤，干燥(MgSO4)并将溶剂减压除去。将该残余物用硅胶色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)戊-4-烯酸甲酯(713mg，68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.10(s，1H)，5.71–5.54(m，1H)，5.01(d，J＝13.1Hz，2H)，4.43(dd，J＝9.8，5.5Hz，1H)，3.86(s，3H)，3.72(s，3H)，3.14–3.02(m，1H)，2.79–2.62(m，1H)。
中间体46 2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)戊-4-烯-1-醇
在0℃氮气氛下，将DIBAL-H(1.0mol/L)的甲苯(16.03mmol，16mL)溶液加至2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)戊-4-烯酸甲酯(959mg，4.01mmol)在THF(16mL)中的溶液中。将该混合物在0℃搅拌30min。将1N HCl(25mL)溶液在0℃缓慢加至该反应混合物中，然后加入乙酸乙酯(30mL)。分离后，将有机层用饱和NaHCO3溶液(30mL)和盐水(30mL)洗涤。将合并的水层用乙酸乙酯萃取直至水层不含所需产物。将有机层合并，然后干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发，得到亮棕色油状物(610mg)。将该粗产物用硅胶纯化(使用0-100％乙酸乙酯的庚烷溶液)，得到2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)戊-4-烯-1-醇，其为亮黄色固体(676mg，80％)。
中间体47 5-[1-(烯丙氧基甲基)丁-3-烯基]-1-甲基-4-硝基-吡唑
在0℃，向2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)戊-4-烯-1-醇(91mg，0.43)在无水DMF(5mL)中的溶液中加入氢化钠(20mg，0.49mmol，60重量％)。在0℃搅拌15min后，缓慢加入烯丙基溴(79，0.64mmol)，在0℃搅拌10min，然后温热至室温再搅拌2h。将该反应用水(10ml)淬灭并用EA(3x50ml)萃取。将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤并浓缩至干。将该残余物用硅胶色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到5-[1-(烯丙氧基甲基)丁-3-烯基]-1-甲基-4-硝基-吡唑(84mg，78％)。
中间体48 1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,5-四氢氧杂环庚三烯-3-基)吡唑
将1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(亚苄基)(三环己基膦)钌，“Grubb二代催化剂”，CAS注册编号246047-72-3，Sigma-Aldrich产品编号569747，US 6111121，US 7329758(375mg，0.42mmol)在甲苯(15ml)中的溶液加至5-[1-(烯丙氧基甲基)丁-3-烯基]-1-甲基-4-硝基-吡唑(527mg，2.10mmol)在甲苯(115mL)中的溶液中。将所得溶液在120℃加热回流2.5h。冷却至室温后，将该溶剂减压除去并将该残余物用硅胶色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,5-四氢氧杂环庚三烯-3-基)吡唑(133mg，30％)。
中间体49 6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇
在0℃，将硼烷二甲基硫醚复合物(2.0mol/L)在THF(0.91mL，1.82mmol)中的溶液加至1-甲基-4-硝基-5-(2,3,4,5-四氢氧杂环庚三烯-3-基)吡唑(204mg，0.91mmol)在无水THF(8mL)中的溶液中。将该混合物在0℃搅拌15min，然后温热至RT再搅拌2h。加入1M NaOH(1.5mL)和过氧化氢(30重量％的水溶液)(0.8mL)并将该混合物在RT搅拌2h。将该反应用水淬灭并用DCM(2x)和EA(1x)萃取。将合并的有机层用盐水(10ml)洗涤并浓缩至干。将该残余物用硅胶色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇(53mg，24％)。
中间体50 6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮
向6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇(53mg，0.22mmol)在DCM(6mL)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)(192mg，0.44mmol)和碳酸氢钠(93mg，1.10mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜，用水淬灭并用DCM(3x)萃取。将合并的有机层浓缩至干并用硅胶色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮(53mg，定量产率)。
中间体51 N-[6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯
将6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮(53mg，0.23mmol)、乙酸铵(219mg，2.76mmol)、氰基硼氢化钠(38mg，0.57mmol)和数颗4A分子筛溶于甲醇(2mL)中。加入乙酸(35mg，0.57mmol)并将该混合物在RT氮气氛下搅拌3天。将该反应用饱和碳酸氢钠淬灭并用DCM(3x)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO4)并将溶剂减压除去。将该残余物溶于DCM(5mL)和焦碳酸二叔丁酯(63mg，0.69mmol)中，并加入DIPEA(0.067mL，0.38mmol)。将该混合物在室温搅拌过夜，然后用硅胶色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到N-[6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯(53mg，81％)。
中间体52 N-[6-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[6-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯(53mg，0.16mmol)在MeOH(25mL)中的溶液通过(50bar，50℃，流速：1mL/min，30mm 10％Pd/C筒)。将该溶剂减压除去，得到N-[6-(4-氨基-2-甲基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯，其为棕色油状物。向该油状物在DCM(5mL)中的溶液中加入5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(72mg，0.20mmol)、PyBOP(133g，0.25mmol)和DIPEA(0.17mL，0.94mmol)并将该混合物在室温搅拌16小时。将该反应用水淬灭并用EA(3x)萃取。将该有机层合并并将该溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/庚烷)纯化，得到N-[6-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，99％)。
中间体53 N-[4-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体23的操作，以5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(中间体33)为起始原料，得到无法分离的N-[4-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯和N-[3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯的混合物，其为油状物(290mg，53％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.58-5.47(m，1H)，4.96-4.73(m，2H)，4.14-3.93(m，5H)，2.30-2.16(m，3H)，2.04-1.83(m，2H)，1.47(s，9H)。
中间体54 N-[5-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
将deoxo-Fluor溶液(50％的THF溶液，0.576mL，1.56mmol)滴加至5-叠氮基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇(353mg，1.25mmol，中间体27)在DCM(6mL)中的冰冷溶液中。将该混合物温热至室温，同时搅拌16小时，然后在冰浴中冷却并缓慢加入饱和NaHCO3(10mL)溶液。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(5-叠氮基-4-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为透明胶状物。向该胶状物(145mg，0.51mmol)在THF(5mL)和水(1mL)中的溶液中加入三苯基膦(147mg，0.56mmol)并将该混合物在60℃加热2小时。将该混合物用EtOAc(10mL)稀释并用盐水(2x 5mL)洗涤。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。将该残余物溶于DCM(2mL)和DIPEA(0.178mL，1.02mmol)中并加入焦碳酸二叔丁酯(134mg，0.61mmol)。将该混合物在室温搅拌2小时。加入水(2mL)并将该混合物用DCM(3x 2mL)萃取。将合并的有机层通过相分离柱，减压浓缩并将该残余物用硅胶色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-[5-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为透明胶状物(180mg，39％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.54(dd，J＝10.5，4.2Hz，1H)，5.10-4.92(m，2H)，4.21-4.09(m，2H)，4.05(s，3H)，3.74-3.62(m，1H)，2.57-2.38(m，1H)，2.35-2.15(m，2H)，1.91-1.81(m，1H)，1.46(s，9H)。
中间体55 4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮
向5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(2.85g，11.9mmol，中间体19)在MeOH(60mL)和水(11.5mL)中的溶液中加入NH4Cl(1.58g，29.8mmol)，然后加入叠氮化钠(3.87g，59.5mmol)。将该反应混合物在70℃加热18小时，然后将其冷却至室温。将该溶剂减压除去并将该残余物溶于EtOAc(150mL)中。将该有机层用盐水(50mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩，得到呈橙色油状物的叠氮基醇，其为80/20的区域异构体混合物。向该油状物(1.9g，6.7mmol)在DCM(40mL)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(1.8g，4.26mmol)并该混合物在室温搅拌3小时。加入饱和NaHCO3(50mL)水溶液和20％硫代硫酸钠溶液(50mL)并将该反应混合物搅拌30min直至观察到盐全部溶解。将该混合物用DCM(50mL)稀释并将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮，其为油状物(1.05g，86％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，5.38(dd，J＝10.1，2.7Hz，1H)，4.63-4.51(m，2H)，4.30-4.20(m，1H)，4.08(s，3H)，2.29-2.16(m，4H)。
中间体56 N-[3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
向4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮(440mg，1.57mmol，中间体55)在DCM(10mL)中的溶液中加入(50％的THF溶液，1.42mL，3.92mmol)并将该混合物在室温搅拌18小时。加入DCM(20mL)，将该混合物冷却至0℃并小心地加入饱和NaHCO3溶液(20mL)。将水层用DCM(3x 20mL)萃取并将合并的有机层用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-30％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(5-叠氮基-6,6-二氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为油状物(280mg)。将该油状物(280mg，0.93mmol)在THF/水(10mL/1.8mL)中的溶液用三苯基膦(267mg，1.02mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后，以70℃加热18小时。将该反应混合物减压浓缩。将该残余物溶于无水DCM(15mL)中，冷却至0℃并加入焦碳酸二叔丁酯(243mg，1.12mmol)，然后加入DIPEA(0.15mL，1.12mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌72小时。加入水(20mL)并将该混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-35％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-[3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为澄清的油状物(310mg，59％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.48-5.42(m，1H)，5.10-5.01(m，1H)，4.49-4.35(m，2H)，4.04(s，3H)，3.99-3.80(m，1H)，2.17-1.98(m，4H)，1.48(s，9H)。
中间体57 4-叠氮基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇
在氮气下，向冷却至-78℃的4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮(中间体55)(1g，3.57mmol)在无水THF(25mL)中的溶液中加入三仲丁基硼氢化锂(1M的THF溶液，4.3mL，4.3mmol)并将该混合物在-78℃搅拌45min。将该混合物温热至室温并加入水(10mL)。将该溶剂减压除去并将该残余物溶于EtOAc(100mL)中。将有机层用水(40mL)和盐水(40mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到外消旋的4-叠氮基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇(相对的立体化学如上所示)，其为黄色油状物(580mg，58％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.63(dd，J＝10.6，3.5Hz，1H)，4.21-4.14(m，3H)，4.01(s，3H)，3.69-3.58(m，1H)，2.45-2.33(m，1H)，2.27-2.08(m，2H)，2.01-1.84(m，2H)。
中间体58 N-[3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
在氮气下，向4-叠氮基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇(中间体57)(182mg，0.65mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液中分批加入氢化钠(60％分散于矿物油状物中，39mg，0.97mmol)，持续10min。再过45min后，滴加碘甲烷(0.06mL，0.97mmol)并将该混合物在室温搅拌18小时。再加入氢化钠(60％分散于矿物油状物中，39mg，0.97mmol)，然后加入碘甲烷(0.06mL，0.97mmol)并将该混合物在室温搅拌48小时。将该混合物用水(20mL)淬灭并用EtOAc(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(5-叠氮基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为油状物(100mg)。将该油状物(100mg，0.37mmol)在THF/水(5mL/1mL)中的溶液用三苯基膦(97mg，0.37mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该混合物减压浓缩。在0℃，将该残余物溶于无水DCM(3mL)中并加入焦碳酸二叔丁酯(89mg，0.4mmol)和DIPEA(0.18mL，1.02mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌3小时。加入水(10mL)并将该混合物用DCM(20mL)萃取。并将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到外消旋的(3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(相对的立体化学如上所示)，其为澄清的油状物(119mg，47％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.39(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.75(br s，1H)，4.33(dd，J＝14.2，1.9Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.91-3.83(m，1H)，3.75(dd，J＝14.2，3.2Hz，1H)，3.43(s，3H)，3.39-3.34(m，1H)，2.22-2.12(m，1H)，2.12-2.03(m，1H)，2.03-1.82(m，2H)，1.47(s，9H)。
中间体59 1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-4-烯-1-醇
将1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(9.7g，76.7mmol)和4-戊烯醛(10g，84.4mmol)在无水THF(250mL)中的溶液冷却至-78℃并在氮气下搅拌。滴加LiHMDS(1M的THF溶液，192mL，191.7mmol)溶液，持续3小时。将该反应混合物温热至-40℃并搅拌2小时，通过滴加饱和氯化铵溶液(100mL)淬灭，温热至室温并用EtOAc(200mL)稀释。将该有机层用饱和氯化铵溶液(50mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶色谱(0-100％EtOAc/DCM)纯化，然后用硅胶色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-4-烯-1-醇，其为淡黄色油状物(5.75g，36％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06(s，1H)，5.85-5.78(m，1H)，5.32-5.26(m，1H)，5.12-5.04(m，2H)，3.98(s，3H)，3.45(d，J＝8.7Hz，1H)，2.92-2.09(m，3H)，1.90-1.86(m，1H)。
中间体60 5-(5-(碘甲基)四氢呋喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
在氮气下，向1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)戊-4-烯-1-醇(0.84g，3.98mmol，中间体59)在无水THF(25mL)中的搅拌溶液中加入碘(1.52g，5.97mmol)。搅拌5min后，加入Na2CO3(0.63g，5.97mmol)，然后加入三氟甲磺酸银(3.07g，11.94mmol)，该深红色溶液转化成黄色。将该混合物在室温搅拌1小时，用THF(25mL)稀释并经硅藻土过滤。将该黄色固体用THF/DCM洗涤并将该滤液减压浓缩。经硅胶色谱(0-40％EtOAc/DCM)纯化，得到5-(5-(碘甲基)四氢呋喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为淡黄色胶状物(640mg，48％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.91-5.87(m，1H)，4.39-4.35(m，1H)，4.02(s，3H)，3.37-3.30(m，2H)，2.69-2.67(m，1H)，2.45-2.41(m，1H)，2.05-1.89(m，2H)。
中间体61 5-(5-(叠氮基甲基)四氢呋喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
向5-(5-(碘甲基)四氢呋喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(640mg，1.90mmol，中间体60)在无水DMF(10mL)中的溶液中加入叠氮化钠(250mg，3.80mmol)并将该混合物在室温搅拌36小时。将该混合物用EtOAc(25mL)稀释并用水(2x 10mL)和盐水(20mL)洗涤。将有机层通过相分离柱并减压浓缩，得到5-(5-(叠氮基甲基)四氢呋喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为黄色油状物(480mg，100％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，5.84-5.70(m，1H)，4.49-4.45(m，1H)，4.03(s，3H)，3.56-3.39(m，2H)，2.66-2.65(m，1H)，2.29-2.22(m，1H)，2.02-1.92(m，2H)。
中间体62 ((5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯
将5-(5-(叠氮基甲基)四氢呋喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(520mg，2.07mmol，中间体61)在THF/水(20mL/4mL)中的溶液用三苯基膦(600mg，2.28mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后以70℃加热1.5小时。将该混合物冷却至室温并将有机溶剂减压除去。将水层在DCM(40mL)中萃取，并将有机层通过相分离柱并减压浓缩，得到淡黄色油状物。加入溶于DCM(20mL)和DIPEA(0.72mL，4.14mmol)中的该油状物并分两次加入焦碳酸二叔丁酯(540mg，2.48mmol)在DCM(1mL)中的溶液。将该反应混合物在室温搅拌1小时。加入水(10mL)并将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到((5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯，其为无色胶状物(145mg，21％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.80-5.76(m，1H)，4.85(brs，1H)，4.35(br s，1H)，4.01(s，3H)，3.50-3.40(m，1H)，3.25-3.19(m，1H)，2.65-2.55(m，1H)，2.25-2.20(m，1H)，2.00-1.80(m，2H)，1.46(s，9H)。
中间体63 2-叠氮基-5-氟-5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚醇
将5-(4-氟-8-氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(2.75g，10.8mmol，中间体155)在DMF/水(35mL/10mL)中的溶液用氯化铵(1.43g，27.0mmol)和叠氮化钠(3.5g，53.9mmol)处理并将该混合物在防冲击屏后以100℃加热18小时。将该反应混合物用EtOAc(200mL)萃取并将有机层用水(8x30mL)洗涤，用盐水(30mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(30-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-叠氮基-5-氟-5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚醇，其为第二个被洗脱出来的异构体，其为白色固体(2.16g，67％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06和8.05(2s，1H)，4.08和4.06(2s，3H)，3.88-3.78(m，1H)，3.65-3.58(m，1H)，2.87-2.55(m，2H)，2.31-2.21(m，2H)，2.18-2.00(m，3H)，1.98-1.85(m，2H)。
中间体64 N-[5-氟-2-羟基-5-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环庚基]氨基甲酸叔丁酯
将2-叠氮基-5-氟-5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚醇(300mg，1.05mmol，中间体63)在THF/水(15mL/3mL)中的溶液用三苯基膦(290mg，1.11mmol)处理并将该混合物在防冲击屏后以60℃加热18小时。加入盐水(5mL)并将该混合物用EtOAc(2x 50mL)萃取。将有机层合并，用MgSO4干燥并减压浓缩。在氮气下，向所得的油状物在无水DCM(20mL)中的溶液中缓慢加入DIPEA(0.88mL，5.03mmol)，然后加入焦碳酸二叔丁酯(263mg，1.21mmol)在无水DCM(10mL)中的溶液。将该反应混合物在室温搅拌4天。加入水(30mL)并将该混合物用DCM(80mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(40-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-[5-氟-2-羟基-5-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环庚基]氨基甲酸叔丁酯，其为无色油状物(218mg，58％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.06和8.05(2s，1H)，4.86(br s，1H)，4.08和4.06(2s，3H)，3.88-3.79(m，1H)，3.75-3.67(m，2H)，2.77-2.48(m，2H)，2.40-2.30(m，1H)，2.21-1.95(m，3H)，1.95-1.67(m，2H)，1.47(s，9H)。
中间体65 N-[2-溴-4-[[5-[2-(叔丁氧羰基氨基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯
向N-[5-氟-2-羟基-5-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环庚基]氨基甲酸叔丁酯(210mg，0.565mmol，中间体64)在THF(20mL)和MeOH(20mL)中的溶液中加入10％钯碳(20mg)。将该反应混合物在40℃、400psi氢气氛下加热3小时。冷却至室温后，将该混合物经过滤，用MeOH(50mL)洗涤并减压浓缩。向该残余物在DCM(30mL)中的溶液中加入DIPEA(2mL，1.40mmol)、2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸(208mg，0.62mmol，实施例22)和PyBOP(727mg，1.40mmol)，并将该混合物在室温搅拌18小时。加入水(20mL)并将该混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(80-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-[2-溴-4-[[5-[2-(叔丁氧羰基氨基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(120mg，34％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.40(br s，1H)，9.86(br s，1H)，8.12(br s，1H)，4.70-4.63(m，1H)，4.36-4.22(m，1H)，3.97-3.86(m，1H)，3.86(s，3H)，2.40-2.31(m，1H)，2.21-1.93(m，7H)，1.55(s，9H)，1.52(s，9H)。
中间体66 (5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)
向2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(370mg，2.39mmol，中间体3)在甲苯(50mL)中的溶液中加入2-乙基-2-(羟基甲基)丙烷-1,3-二醇(315mg，2.35mmol)，然后加入对甲苯磺酸(20mg，0.10mmol)。将该反应混合物加热回流36小时，同时共沸除去水。将该混合物冷却至室温并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)，其为第一个被洗脱出来的异构体，其为无色固体(244mg，38％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，6.38(s，1H)，4.16(s，3H)，4.02(d，J＝11.5Hz，2H)，3.97(d，J＝5.2Hz，2H)，3.42(d，J＝3.8Hz，2H)，1.90(m，3H)，0.99(t，J＝7.6Hz，3H)。
中间体67 (5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体)
根据中间体66的操作，还得到(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体)，其为第二个被洗脱出来的异构体，其为无色固体(118mg，18％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，6.37(s，1H)，4.13(s，3H)，4.12(d，J＝12.8Hz，2H)，3.98(d，J＝3.9Hz，2H)，3.73(d，J＝11.8Hz，2H)，1.74(br s，1H)，1.31(q，J＝7.7Hz，2H)，0.89(t，J＝7.7Hz，3H)。
中间体68 (2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)
向2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(718mg，4.63mmol，中间体3)在甲苯(100mL)中的溶液中加入2-(羟基甲基)丙烷-1,3-二醇(700mg，6.73mmol)，然后加入对甲苯磺酸(88mg，0.463mmol)。将该反应混合物加热回流18小时，同时共沸除去水。将该混合物冷却至室温并减压浓缩。将该残余物用DCM(50mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(50mL)洗涤。将有机层用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到(2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)，其为第一个被洗脱出来的异构体，其为无色固体(220mg，20％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，6.42(s，1H)，4.34(dd，J＝11.6，4.7Hz，2H)，4.12(s，3H)，3.81(t，J＝11.5Hz，2H)，3.56(t，J＝5.1Hz，2H)，2.53-2.38(m，1H)，1.67(t，J＝4.6Hz，1H)。
中间体69 (2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体)
根据中间体68的操作，还得到(2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体)，其为无色固体(268mg，24％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，6.49(s，1H)，4.28(d，J＝11.9Hz，2H)，4.20(d，J＝3.3Hz，2H)，4.12(s，3H)，4.06(dd，J＝7.8，3.7Hz，2H)，1.82(t，J＝4.9Hz，1H)，1.78-1.71(m，1H)。
中间体70 (5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)
根据中间体68的操作，以2-甲基-2-(羟基甲基)丙烷-1,3-二醇为起始原料，得到(5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇，其为第一个被洗脱出来的异构体，其为无色固体(167mg，13％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，6.38(s，1H)，4.19(s，3H)，4.02(d，J＝11.3Hz，2H)，3.89(d，J＝11.3Hz，2H)，3.43(d，J＝4.5Hz，2H)，1.65-1.40(m，1H)，1.36(s，3H)。
中间体71 (5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体)
根据中间体70的操作，还得到(5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体)，其为第二个被洗脱出来的异构体(480mg，38％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，6.40(s，1H)，4.16-4.06(m，5H)，3.91(s，2H)，3.72(d，J＝11.9Hz，2H)，0.85(s，3H)。未观测到OH。
中间体72 N-[(4R,7S)-3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
将N-[3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体56)进一步经手性SFC纯化，得到N-[(4R)-3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为第二个被洗脱出来的异构体，其为灰白色固体(57mg，47％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.48-5.42(m，1H)，5.06(d，J＝9.5Hz，1H)，4.49-4.38(m，2H)，4.05(s，3H)，3.98-3.82(m，1H)，2.18-2.00(m，4H)，1.48(s，9H)。
中间体73 N-[(4S,7R)-3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体72的操作，还得到N-[(4S,7R)-3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为第一个被洗脱出来的异构体，其为灰白色固体(65mg，53％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.48-5.42(m，1H)，5.05(d，J＝9.2Hz，1H)，4.50-4.36(m，2H)，4.05(s，3H)，3.98-3.84(m，1H)，2.18-2.00(m，4H)，1.48(s，9H)。
中间体74 甲磺酸(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲酯
在0℃，向(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)(610mg，2.25mmol，中间体66)在无水DCM(15mL)中的溶液中加入Et3N(0.45mL，3.38mmol)，然后加入甲磺酰氯(0.21mL，2.70mmol)。将该反应混合物缓慢温热至室温，经1.5小时。将该混合物再次冷却至0℃并用1M HCl水溶液(10mL)和DCM(20mL)稀释。将有机层用饱和NaHCO3水溶液(15mL)和水(15mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到甲磺酸(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲酯，其为白色固体(816mg，定量产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，6.38(s，1H)，4.14(s，3H)，4.05-3.88(m，6H)，3.22-2.92(m，3H)，1.96(q，J＝7.6Hz，2H)，1.03(t，J＝7.6Hz，3H)。
中间体75 2-((5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)异二氢吲哚-1,3-二酮
向甲磺酸(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲酯(816mg，2.25mmol，中间体74)在无水DMSO(10mL)中的溶液中一次性加入邻苯二甲酰亚胺钾(2.1g，11.3mmol)。将该反应混合物在180℃加热5小时，冷却至室温并用EtOAc(50mL)和水(30mL)稀释。将该有机层用水(3x30mL)、2N NaOH(2x 20mL)和水(20mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-((5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)异二氢吲哚-1,3-二酮，其为无色固体(317mg，35％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(s，1H)，7.93-7.88(m，2H)，7.82-7.76(m，2H)，6.31(s，1H)，4.14(s，3H)，4.06(d，J＝11.8Hz，2H)，3.85(d，J＝11.8Hz，2H)，3.51(s，2H)，1.92(q，J＝7.6Hz，2H)，1.14(t，J＝7.6Hz，3H)。
中间体76 N-[7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
将5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(400mg，1.67mmol，中间体19)在MeOH/水(9mL/1.7mL)中的溶液用氯化铵(221mg，4.2mmol)和叠氮化钠(544mg，8.37mmol)处理并将该混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该反应混合物用EtOAc(100mL)萃取并将该有机层用水(3x 20mL)和盐水(20mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。在室温，氮气下，向该残余物(310mg，1.1mmol)在无水DMF(5mL)中的溶液中分批加入氢化钠(60％分散于矿物油状物中，53mg，1.32mmol)，经10min。再经45min后，滴加三氘代碘甲烷(0.21mL，3.3mmol)并将该混合物在室温搅拌18小时。加入更多的氢化钠(60％分散于矿物油状物中，310mg，1.1mmol)，然后加入更多的三氘代碘甲烷(0.21mL，3.3mmol)和该混合物在室温搅拌48小时。加入水(20mL)并将该混合物用EtOAc(3x 20mL)萃取。将合并的有机层用水(20mL)和盐水(20mL)洗涤，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-[5-叠氮基-6-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-2-基]-1-甲基-4-硝基-吡唑，其为油状物(140mg)。将该油状物(140mg，0.47mmol)在THF/水(5mL/0.9mL)中的溶液用三苯基膦(135mg，0.52mmol)处理，并将该反应混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该混合物减压浓缩。在0℃，将所得残余物溶于无水DCM(9mL)并加入焦碳酸二叔丁酯(123mg，0.56mmol)和DIPEA(0.25mL，1.41mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌3小时。加入水(10mL)并将该混合物用DCM(20mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到外消旋的N-[7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(相对的立体化学如上所示)，其为灰白色固体(125mg，28％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.39(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.85-4.67(m，1H)，4.32(dd，J＝14.2，1.9Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.90-3.82(m，1H)，3.75(dd，J＝14.2，3.2Hz，1H)，3.40-3.33(m，1H)，2.20-1.82(m，4H)，1.46(m，9H)。
中间体77 N-[(3R,4S,7R)-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
进一步用手性SFC纯化N-[7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，得到N-[(3R,4S)-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为第一个被洗脱出来的异构体，其为灰白色固体(54mg，43％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，5.39(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.85-4.68(m，1H)，4.32(dd，J＝14.2，1.9Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.90-3.82(m，1H)，3.75(dd，J＝14.0，3.2Hz，1H)，3.40-3.33(m，1H)，2.20-1.83(m，4H)，1.46(s，9H)。
中间体78 N-[(3S,4R,7S)-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体77的操作，还得到N-[(3S,4R,7S)-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为第二个被洗脱出来的异构体，其为灰白色固体(52mg，41％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.39(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.85-4.66(m，1H)，4.33(dd，J＝14.2，1.9Hz，1H)，4.07(s，3H)，3.90-3.83(m，1H)，3.75(dd，J＝14.2，3.2Hz，1H)，3.40-3.33(m，1H)，2.21-1.83(m，4H)，1.47(m，9H)。
中间体79 5-(5-(叠氮基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(反式异构体)
向(5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体)(248mg，1.02mmol，中间体66)在0℃的无水DCM(10mL)中的溶液中加入Et3N(0.20mL，1.53mmol)，然后加入甲磺酰氯(0.10mL，1.22mmol)。将该反应混合物缓慢温热至室温，持续1.5小时。将该混合物再次冷却至0℃并加入1M HCl水溶液(5mL)和DCM(20mL)。将有机层用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和水(10mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到无色油状物。将该油状物溶于DMF(20mL)，并加入叠氮化钠(400mg，6.12mmol)。将该反应混合物在防冲击屏后以140℃加热18小时。将该反应混合物冷却至室温并用水(20mL)和EtOAc(50mL)稀释。将有机层用水(3x 20mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到5-(5-(叠氮基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(300mg，1当量，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，6.36(s，1H)，4.17(s，3H)，3.88(s，4H)，3.20(s，2H)，1.40(s，3H)。
中间体80 N-[(3S,4R,7S)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
向4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇(660mg，2.34mmol，中间体57)在DCM(12mL)中的溶液中加入(50％的THF溶液，2.12mL)并将该混合物在室温搅拌18小时。将该混合物用DCM(22mL)稀释，冷却至0℃并小心地加入饱和NaHCO3水溶液(20mL)。将水层用DCM(3x 20mL)萃取并将合并的有机层用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-30％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(5-叠氮基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为油状物(440mg)。将该油状物(440mg，1.54mmol)在THF/水(15mL/2.8mL)中的溶液用三苯基膦(487mg，1.86mmol)处理并将该反应混合物在防冲击屏后以70℃加热18小时。将该反应混合物减压浓缩。将该残余物溶于无水DCM(15mL)，冷却至0℃并加入焦碳酸二叔丁酯(402mg，1.84mmol)，然后加入DIPEA(0.8mL，4.62mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌18小时。加入水(20mL)并将该混合物用DCM(100mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-35％EtOAc/异己烷)纯化，然后用手性制备型SFC纯化，得到N-[(3S,4R,7S)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(223mg，27％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.37(dd，J＝10.5，3.0Hz，1H)，4.89(br s，1H)，4.61(ddd，J＝49.1，7.7，3.2Hz，1H)，4.44(dd，J＝22.2，15.0Hz，1H)，4.07(s，3H)，3.98-3.80(m，1H)，3.49(d，J＝5.3Hz，1H)，2.15-1.90(m，4H)，1.47(s，9H)。
中间体81 N-[(3R,4S,7R)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体80的操作，还得到N-[(3R,4S,7R)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(247mg，91％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，5.39(dd，J＝10.7，2.9Hz，1H)，4.85(br s，1H)，4.61(ddd，J＝49.3，7.7，3.17Hz，1H)，4.52-4.40(m，1H)，4.07(s，3H)，3.97-3.84(m，1H)，3.49(d，J＝5.3Hz，1H)，2.15-1.88(m，4H)，1.49(s，9H)。
中间体82 5-(5-(叠氮基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(顺式异构体)
根据中间体79的操作，以(5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体，中间体67)为起始原料，得到5-(5-(叠氮基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(519mg，87％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，6.39(s，1H)，4.14(s，3H)，4.04(d，J＝12.0Hz，2H)，3.73(d，J＝12.0Hz，2H)，3.70(s，2H)，0.87(s，3H)。
中间体83 2,2,2-三氟-N-((5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)乙酰胺(顺式异构体)
向5-(5-(叠氮基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(顺式异构体)(519mg，1.84mmol，中间体82)在无水MeOH(25mL)和THF(10mL)中的溶液中加入甲酸铵(300mg，4.76mmol)和10％Pd/C(300mg，0.28mmol)。将该混合物加热回流30min，然后冷却至室温。将该混悬液经硅藻土过滤并将滤饼用EtOAc(200mL)洗涤。将该滤液减压浓缩并将该粗制残余物溶于无水THF(11mL)和DCM(2mL)中，并冷却至0℃。加入Et3N(0.38mL，2.86mmol)，然后加入三氟乙酸酐(0.30mL，2.10mmol)。将该反应混合物缓慢温热至室温，并搅拌18小时。将该混合物再次冷却至0℃并用水(10mL)淬灭并用EtOAc(20mL)萃取。将有机层用盐水(10mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2,2,2-三氟-N-((5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)乙酰胺，其为无色油状物(410mg，63％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.24(s，1H)，6.33(s，1H)，4.17(s，3H)，3.92(d，J＝12.0Hz，2H)，3.75(d，J＝6.8Hz，2H)，3.71(d，J＝12.0Hz，2H)，0.80(s，3H)。
中间体84 2,2,2-三氟-N-((5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)乙酰胺(反式异构体)
向5-(5-(叠氮基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(反式异构体；300mg，1.02mmol，中间体79)在THF(3mL)和水(0.3mL)中的溶液中加入三苯基膦(322mg，1.22mmol)。将该反应混合物在70℃加热1小时。将该混合物冷却至室温并减压浓缩。在0℃，向该粗制残余物在无水THF(10mL)中的溶液中加入Et3N(0.20mL，1.53mmol)，然后加入三氟甲磺酸酐(0.16mL，1.12mmol)。将该反应混合物缓慢温热至室温并搅拌18小时。将该混合物再次冷却至0℃并加入更多的Et3N(0.20mL，1.53mmol)和三氟甲磺酸酐(0.16mL，1.12mmol)。将该反应混合物缓慢温热至室温并搅拌6小时。将该混合物再次冷却至0℃，用水(10mL)淬灭并用DCM(20mL)萃取。将该有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2,2,2-三氟-N-((5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)乙酰胺，其为无色固体(171mg，0.49mmol)。
中间体85 5-(5,6-二甲基-4-((三乙基硅基)氧基)-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
向冷却至0℃的(E)-3-甲基戊-3-烯-2-酮(2.69mL，24.1mmol)在DCM(200mL)中的溶液中加入Et3N(10.5mL，79.5mmol)，然后加入TESOTf(6.0mL，26.5mmol)。将该混合物温热至室温并搅拌18小时。加入饱和NaHCO3水溶液(100mL)和DCM(200mL)。将水层用DCM(3x 200mL)萃取并将合并的有机层用盐水(100mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩，得到(E)-((3-甲基戊-1,3-二烯-2-基)氧基)三乙基硅烷。向2-甲基-4-硝基-吡唑-3-甲醛(1.0g，8mmol，中间体3)在CDCl3(28mL)中的溶液中加入(E)-((3-甲基戊-1,3-二烯-2-基)氧基)三乙基硅烷(1.6g，7.55mmol)，然后加入EuFOD(220mg，0.50mmol)。在压力管中，将该反应混合物在防冲击屏后以65℃加热18小时。将该混合物冷却至室温并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(5,6-二甲基-4-((三乙基硅基)氧基)-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色油状物(2.92g，定量产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.07(s，1H)，5.64(dd，J＝10.9，3.6Hz，1H)，4.33-4.28(m，1H)，4.25-3.94(m，3H)，2.50-2.41(m，1H)，2.31(m，1H)，1.61(s，3H)，1.31(d，J＝6.4Hz，3H)，1.05-0.97(m，6H)，0.73-0.61(m，9H)。
中间体86 3-叠氮基-2,3-二甲基-6-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮
向冷却至-20℃的5-(5,6-二甲基-4-((三乙基硅基)氧基)-3,6-二氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(507mg，1.38mmol，中间体85)在无水MeCN(3.5mL)中的溶液中加入叠氮化钠(404mg，6.22mmol)，然后滴加硝酸铈铵(2.27g，4.15mmol)在CH3CN(10.4mL)中的溶液。将该反应混合物在-20℃搅拌1小时，经1小时缓慢温热至0℃，然后用水(20mL)淬灭并用EtOAc(20mL)萃取。将该有机层用水(10mL)和盐水(10mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到3-叠氮基-2,3-二甲基-6-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮，其为白色固体(187mg，46％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，5.78(dd，J＝12.3，3.2Hz，1H)，4.21(s，3H)，3.73(dd，J＝12.3，6.2Hz，1H)，3.13(dd，J＝14.6，12.3Hz，1H)，2.73(dd，J＝14.6，3.2Hz，1H)，1.44(s，3H)，1.41(d，J＝6.1Hz，3H)。
中间体87 5-(5-叠氮基-4,4-二氟-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
向3-叠氮基-2,3-二甲基-6-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)二氢-2H-吡喃-4(3H)-酮(335mg,1.14mmol，中间体86)在无水DCM(10ml)中的溶液中加入溶液(50％的THF溶液，830mg，1.88mmol)并将该混合物在室温搅拌18小时。加入饱和NaHCO3水溶液(20mL)和DCM(20mL)。将水层用DCM(3x 20mL)萃取并将合并的有机层用盐水(20mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(20％EtOAc/异己烷)纯化，得到5-(5-叠氮基-4,4-二氟-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(其被一些乙烯基氟化物所污染)，其为淡黄色油状物(157mg，44％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，5.69(dd，J＝12.2，2.9Hz，1H)，4.13(s，3H)，3.76(qd，J＝6.3，1.6Hz，1H)，2.59-2.40(m，1H)，2.38-2.28(m，1H)，1.48(s，3H)，1.32(d，J＝6.2Hz，3H)。
中间体88 N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，得到N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯，其为固体(350mg，73％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.34(s，1H)，9.31(s，1H)，7.98(s，1H)，5.15-4.98(m，1H)，4.93(d，J＝9.0Hz，1H)，4.77(d，J＝8.7Hz，1H)，4.39-3.94(m，2H)，3.80(s，3H)，2.12-1.93(m，4H)，1.85(d，J＝11.0Hz，1H)，1.52(s，9H)，1.46(s，9H)。
中间体89 (2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢-2H-吡喃-4-基)氨基甲酸叔丁酯
在0℃，向2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-醇(450mg，1.98mmol，中间体39)在无水DCM(24mL)中的溶液中加入Et3N(0.33mL，2.97mmol)，然后加入MsCl(0.44mL，4.0mmol)。将该反应混合物在0℃搅拌30min，然后在室温搅拌18小时。将该混合物再次冷却至0℃并用饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭。将有机层用0.1M HCl(5mL)洗涤，通过相分离柱并减压浓缩，得到无色油状物。将该油状物溶于DMF(10mL)中并加入叠氮化钠(660mg，10mmol)。将该反应混合物在防冲击屏后，以110℃加热2小时。将该反应混合物冷却至室温，用水(20mL)稀释并用EtOAc(50mL)萃取。将该有机层用水(3x 20mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩，得到无色固体(220mg)。向该固体(220mg，0.87mmol)在THF(2.5mL)和水(0.5mL)中的溶液中加入三苯基膦(344mg，1.31mmol)。将该反应混合物在防冲击屏后以65℃加热4小时。将该混合物再次冷却至室温并减压浓缩。将该残余物溶于DCM(5mL)，用焦碳酸二叔丁酯(287mg，1.31mmol)和DIPEA(0.44mL，2.62mmol)处理，并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该混合物减压浓缩。经硅胶柱色谱(30％EtOAc/异己烷)纯化，得到(2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢-2H-吡喃-4-基)氨基甲酸叔丁酯，其为黄色油状物(155mg，24％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.44(d，J＝11.6Hz，1H)，4.52(s，1H)，4.19(dd，J＝11.9，4.6Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.68-3.60(m，1H)，2.29(d，J＝12.6Hz，1H)，2.03(d，J＝8.4Hz，1H)，1.75(s，1H)，1.61-1.47(m，2H)，1.45(s，9H)。
中间体90 (3S,4R,7S)-4-叠氮基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇
向5-(5,8-二氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(2.7g，11.3mmol，中间体19)在MeOH/水(60mL/15mL)中的溶液中加入氯化铵(1.51g，28.3mmol)和叠氮化钠(3.67g，56.5mmol)。将该混合物在防冲击屏后以70℃加热4小时。将MeOH减压除去并将水性残余物用EtOAc(100mL)萃取。将有机层用NaHCO3水溶液(3x 20mL)洗涤，通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，然后用手性SFC色谱纯化，得到(3S,4R,7S)-4-叠氮基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇，其为第二个被洗脱出来的异构体，其为澄清胶体(1.4g，41％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，5.43-5.37(m，1H)，4.18(dd，J＝13.9，2.1Hz，1H)，4.06(s，3H)，3.97-3.77(m，3H)，2.45(d，J＝3.9Hz，1H)，2.32-2.09(m，2H)，2.10-1.85(m，2H)。
中间体91 (4R,7S)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-
向(3S,4R,7S)-4-叠氮基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-3-醇(1.4g，4.96mmol，中间体90)在DCM(35mL)中的溶液中加入戴斯-马丁高碘烷(2.52g，5.96mmol)并将该混合物在室温搅拌2小时。加入饱和NaHCO3水溶液(60mL)和20％硫代硫酸钠溶液(50mL)并将该反应混合物搅拌30min直至观察到盐全部溶解。将有机层分离，用MgSO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-40％EtOAc/异己烷)纯化，得到(4R,7S)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮，其为灰白色固体(1.1g，82％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.05(s，1H)，5.38(dd，J＝10.2，2.7Hz，1H)，4.62-4.49(m，2H)，4.31-4.22(m，1H)，4.08(s，3H)，2.31-2.17(m，3H)，2.15-2.04(m，1H)。
中间体92 (3R,4R,7S)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇
根据中间体57的操作，以(4R,7S)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-酮为起始原料，得到(3R,4R,7S)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇，其为深橘色油状物(850mg，74％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.68-5.60(m，1H)，4.24-4.14(m，3H)，4.01(s，3H)，3.72-3.58(m，1H)，2.45-2.31(m，1H)，2.30-2.09(m，2H)，2.01-1.81(m，2H)。
中间体93 N-[(3R,4R,7S)-3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体58的操作，以(3R,4R,7S)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇为起始原料，得到N-[(3R,4R,7S)-3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯，其为无色油状物(357mg，32％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(s，1H)，5.60-5.53(m，1H)，5.12-5.02(m，1H)，4.21-4.08(m，2H)，4.01(s，3H)，3.79(dd，J＝13.2，4.4Hz，1H)，3.75-3.70(m，1H)，3.41(s，3H)，2.28-2.07(m，1H)，1.97-1.89(m，2H)，1.80-1.72(m，1H)，1.47(s，9H)。
中间体94 ((3S,4R,7S)-3-羟基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
向(3S,4R,7R)-4-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-醇(中间体90)(1.19g，4.22mmol)在THF(50mL)和水(10mL)中的溶液中加入三苯基膦(1.22g，4.64mmol)并将该混合物在70℃加热24小时。将该混合物用EtOAc(100mL)稀释并用盐水(2x 25mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。将该残余物通过SCX柱，用MeOH洗涤并用3％的7N NH3的MeOH溶液/DCM洗脱，得到油状物。将该油状物溶于DCM(13.5mL)并加入DIPEA(1.08mL，6.21mmol)和焦碳酸二叔丁酯(1.36g，6.21mmol)。将该混合物在室温搅拌3小时，然后减压浓缩。经硅胶色谱(0-60％EtOAc/异己烷)纯化，得到((3S,4R,7S)-3-羟基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(其被一些三苯基膦氧化物污染)，其为澄清胶体(895mg，60％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，5.42-5.36(m，1H)，4.83(d，J＝6.7Hz，1H)，4.22(d，J＝13.4Hz，2H)，4.08(s，3H)，3.86-3.76(m，3H)，2.18-2.07(m，1H)，2.02-1.89(m，3H)，1.47(s，9H)。
中间体95 N-[(3R,4R,7S)-7-[4-[(6-溴-5-氟-吡啶-2-羰基)氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-3-甲氧基-氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯
根据实施例65的操作，以N-[(3R,4R,7S)-3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体93)为起始原料并将2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸替换为6-溴-5-氟-吡啶-2-甲酸(参见US2010/56576A1)，得到N-[(3R,4R,7S)-7-[4-[(6-溴-5-氟-吡啶-2-羰基)氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-3-甲氧基-氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(其被四甲基脲污染)，其为澄清的油状物(169mg，30％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.37(s，1H)，8.26-8.17(m，2H)，7.63-7.55(m，1H)，5.02(br s，1H)，4.96(dd，J＝9.0，3.6Hz，1H)，4.32(dd，J＝13.2，4.4Hz，1H)，4.05-3.94(m，2H)，3.85-3.80(m，1H)，3.78(s，3H)，3.47(s，3H)，2.10-1.91(m，3H)，1.86-1.78(m，1H)，1.45(s，9H)。
中间体96 N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，得到N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯。
中间体97 N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体21)为起始原料，得到N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯。
中间体98 N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体93)为起始原料，得到N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯。
中间体99 ((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸替换成2-溴噻唑-4-甲酸(市售的)，得到((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯。
中间体100 ((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸替换成2-溴噻唑-4-甲酸(市售的)，得到((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯。
中间体101 ((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3R,4R,7S)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体93)为起始原料，并将2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸替换成2-溴噻唑-4-甲酸(市售的)，得到((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯。
中间体102 ((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据中间体65的操作，以((3S,4R,7S)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体21)为起始原料，并将2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸替换成2-溴噻唑-4-甲酸(市售的)，得到((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯。
中间体103 ((3S,4R,7S)-7-(4-(6-溴-5-氟吡啶-2-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯
根据实施例65的操作，以N-[(3S,4R,7S)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将2-溴-5-(叔丁氧羰基氨基)噻唑-4-甲酸替换成6-溴-5-氟-吡啶-2-甲酸(参见US2010/56576A1)，得到((3S,4R,7S)-7-(4-(6-溴-5-氟吡啶-2-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯。
中间体104 2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸
向2-溴噻唑-4-甲酸甲酯(3.27mmol，741mg)在四氢呋喃(15mL)和水(1.5mL)中的溶液中加入2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸(1.8当量，5.88mmol，1160mg)和氟化钾(3.3当量，10.8mmol，627mg)。将该混合物用氮气脱气，然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯(0)(0.2当量，0.654mmol，617mg)和三叔丁基膦(1.0M的甲苯溶液；0.4当量，1.31mmol，1.3mL)并将该反应混合物在100℃微波中加热30分钟。将该反应混合物浓缩并将该残余物用硅胶纯化，用0-50％EtOAc的庚烷溶液洗脱，得到2-(2,6-二氟-4-甲氧基-苯基)噻唑-4-甲酸甲酯(2.40mmol，685mg，74％产率)。
向2-(2,6-二氟-4-甲氧基-苯基)噻唑-4-甲酸甲酯(2.403mmol，685.5mg)在甲醇(15mL)和水(5mL)中的溶液中加入氢氧化锂(1.9当量，4.54mmol，111mg)。将该反应混合物在室温搅拌过夜。将该反应混合物用1N HCl(水溶液)淬灭，然后分配于EtOAc和盐水之间。将该有机层浓缩。将该残余物在高真空中干燥，得到2-(2,6-二氟-4-甲氧基-苯基)噻唑-4-甲酸(650mg，当量)，其为棕色固体。
中间体105 2-(2-氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为2-氟-4-甲氧基苯基硼酸，得到标题化合物。
中间体106 1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙醇
在-78℃，向1-(3,5-二氟苯基)乙醇(10.2mmol，1660mg，市售的)在四氢呋喃(100mL)中的溶液中滴加正丁基锂(2.5mol/L)的己烷(2.4当量，24.4mmol，9.8mL)溶液。将该混合物在-78℃搅拌2小时。加入2-异丙基氧基-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(2.50当量，25.4mmol，5.29mL)并将该反应混合物搅拌过夜，使其温热至室温。将该反应混合物用饱和NaHCO3(水溶液)淬灭并用乙酸乙酯萃取。将有机层用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，过滤并将滤液浓缩，得到所需产物，其可直接使用而无需进一步纯化。
中间体107 2-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙-2-醇
根据中间体106的操作，将1-(3,5-二氟苯基)乙醇替换为2-(3,5-二氟苯基)丙-2-醇(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体108 1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)环丁醇
根据中间体106的操作，将1-(3,5-二氟苯基)乙醇替换为1-(3,5-二氟苯基)环丁醇(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体109 2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙醇(中间体106)，得到标题化合物。
中间体110 2-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)环丁醇(中间体108)，得到标题化合物。
中间体111 2-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为2-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙-2-醇(中间体107)，得到标题化合物。
中间体112 2-(2-(二氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2-(二氟甲基)苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体113 2-(3-氟吡啶-4-基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2，6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(3-氟吡啶-4-基)硼酸，得到标题化合物。
中间体114 2-(2,5-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2,5-二氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体115 2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(5-氯-2-氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体116 2-(2,6-二氟-3-甲基苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2,6-二氟-3-甲基苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体117 (R)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体109的操作，将步骤1中的1-(3,5-二氟苯基)乙醇(中间体106)替换为(R)-1-(3,5-二氟苯基)乙醇(市售的)。
中间体118 (S)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体109的操作，将步骤1中的1-(3,5-二氟苯基)乙醇(中间体106)替换为(S)-1-(3,5-二氟苯基)乙醇(市售来源)。
中间体119 2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2,3-二氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体120 2-(5-乙基-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(5-乙基-2-氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体121 2-(3-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(3-氯-2-氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体122 2-(2-氯-3-氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2-氯-3-氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体123 2-(5-环丙基-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(5-环丙基-2-氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体124 2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2，6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体125 2-(2,6-二氟-4-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷
根据中间体106的操作，将1-(3,5-二氟苯基)乙醇替换为1,3-二氟-5-甲基苯并将丁基锂的当量数降至1.05，得到标题化合物。
中间体126 2-(2,6-二氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为2-(2,6-二氟-4-甲基苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(中间体125)，得到标题化合物。
中间体127 2-(4-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(4-氯-2-氟苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体128 2-(2-氟-6-甲基苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换为(2-氟-6-甲基苯基)硼酸，得到标题化合物。
中间体129 2-(5-溴-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
将5-溴-2-氟-苯甲腈(12.4mmol，2470mg)在吡啶(6.5mL)中的溶液用硫化铵(40重量％的水溶液，1.1当量，13.6mmol，2.32mL)和三乙胺(1.1当量，13.6mmol，1.90mL)处理。将该反应混合物在50℃加热3小时，然后冷却至室温。将该反应混合物在EtOAc和水之间分配。随后将有机物用水(3x)和盐水(3x)洗涤，用MgSO4干燥，然后浓缩。将该残余物用硅胶纯化，用0-50％EtOAc的庚烷溶液洗脱，得到5-溴-2-氟-硫代苯甲酰胺(2.84g，94％产率)。
将5-溴-2-氟-硫代苯甲酰胺(11.8mmol，2840mg)和溴代丙酮酸乙酯(1.05当量，12.4mmol，1.56mL)在乙醇(30mL)中的混合物在80℃加热过夜。将该混合物浓缩并将该残余物用硅胶纯化，用0-20％EtOAc的庚烷溶液洗脱，得到2-(5-溴-2-氟-苯基)噻唑-4-甲酸乙酯(2960mg，76.14％产率)，其为澄清的油状物。
向2-(5-溴-2-氟-苯基)噻唑-4-甲酸乙酯(8.97mmol，2960mg)在甲醇(40mL)和水(10mL)中的溶液中加入氢氧化锂(1.6当量，14.2mmol，347mg)。将该反应混合物在50℃搅拌2小时。将该反应混合物冷却至室温，浓缩，混悬于水中，然后用2N HCl(水溶液)淬灭。收集固体，用水洗涤并在高真空下干燥，得到2-(5-溴-2-氟-苯基)噻唑-4-甲酸(2410mg，89％产率)，其为白色固体。
中间体130 2-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸
根据中间体129的操作，将5-溴-2-氟-苯甲腈替换成6-(三氟甲基)-2-氰基吡啶，得到标题化合物。
中间体131 2-(2-氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体129的操作，将5-溴-2-氟-苯甲腈替换成2-氟-4-甲基苯甲腈，得到标题化合物。
中间体132 5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作，将5-氯-2-氟苯甲酰氯转化成标题化合物。
中间体133 5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2-氟-5-甲基苯基)噻唑-4-甲酸
如实施例1-9的操作，将2-氟-5-甲基苯甲酰氯转化成标题化合物。
中间体134 6-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成2-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)丙-2-醇(中间体107)，并将2-溴噻唑-4-甲酸甲酯替换成6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体135 6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)环丁醇(中间体108)，并将2-溴噻唑-4-甲酸甲酯替换成6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体136 6-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)乙醇(中间体106)，并将2-溴噻唑-4-甲酸甲酯替换成6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体137 6-(2,6-二氟-4-羟基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成(2,6-二氟-4-羟基苯基)硼酸，并将2-溴噻唑-4-甲酸甲酯替换成6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体138 6-(2,6-二氟-4-(1-甲氧基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸
在0℃，向6-[2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基]-5-氟-吡啶-2-甲酸甲酯(1.21mmol，376mg；中间体136)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的溶液中加入氢化钠(60重量％于矿物油状物中，1.5当量，1.81mmol，72.5mg)。将该混合物搅拌2分钟，然后加入碘甲烷(3.0当量，3.62mmol，0.226mL)。将该反应混合物在室温搅拌2天。将该反应混合物用水淬灭并用EtOAc萃取。将有机层用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)并浓缩。将该残余物用硅胶纯化，用0-50％EtOAc的庚烷溶液洗脱，得到6-(2,6-二氟-4-(1-甲氧基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(392mg，63％)。将这个酯用MeOH(15mL)和水(5mL)稀释，并加入氢氧化锂(60mg)。将该混合物在室温搅拌过夜。将该反应通过加入1N HCl(水溶液)淬灭，然后将该混合物用EtOAc稀释并用盐水洗涤。将有机提取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到标题化合物(当量)，其可直接使用而无需纯化。
中间体139 环丙基(3,5-二氟苯基)甲醇
将溶于四氢呋喃(10mL)的3,5-二氟苯甲醛(1.0g，7.0mmol)溶液在冰浴中冷却。缓慢加入环丙基溴化镁(0.5M的THF溶液，1.2当量，8.4mmol)并将该混合物在0℃搅拌60min。将该反应用饱和氯化铵淬灭并用EtOAc萃取两次。将合并的有机提取物用Na2SO4干燥，过滤并浓缩，得到足够纯的标题化合物，其可直接使用。
中间体140 环丙基(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)甲醇
根据中间体106的操作，将1-(3,5-二氟苯基)乙醇替换成环丙基(3,5-二氟苯基)甲醇(中间体139)，得到标题化合物。
中间体141 6-(4-(环丙基(羟基)甲基)-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成环丙基(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)甲醇(中间体141)，并将2-溴噻唑-4-甲酸甲酯替换成6-溴-5-氟吡啶-2-甲酸甲酯(参见US2012/225062)，得到标题化合物。
中间体142 3-(3,5-二氟苯基)四氢呋喃-3-醇
在氮气下，向1-溴-3,5-二氟-苯(4.00g，20.7mmol)在四氢呋喃(70mL)中的溶液中加入镁(6.0当量，124mmol)并将该溶液在85℃加热3小时。将该溶液冷却至室温，并用注射器加入3-氧代四氢呋喃(1当量，20.726mmol)在THF(20mL)中的溶液。将该混合物在室温搅拌3天。将该反应用饱和NaHCO3淬灭，用EtOAc萃取并用盐水洗涤。用CombiFlash(0-100％EtOAc的庚烷溶液)纯化，得到标题化合物(405mg，9.7％)。
中间体143 3-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)四氢呋喃-3-醇
根据中间体106的操作，将1-(3,5-二氟苯基)乙醇替换成3-(3,5-二氟苯基)四氢呋喃-3-醇(中间体142)，得到标题化合物。
中间体144 2-(2,6-二氟-4-(3-羟基四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成3-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)四氢呋喃-3-醇(中间体143)，得到标题化合物。
中间体145 2-(2,6-二氟-4-(四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸
向2-[2,6-二氟-4-(3-羟基四氢呋喃-3-基)苯基]噻唑-4-甲酸甲酯(250mg，0.732mmol，中间体144的前体)在二氯甲烷(1mL)中的溶液中加入三氟乙酸(1mL)，将该混合物在120℃的微波中加热2h。真空浓缩后，用CombiFlash(0-100％EtOAC的庚烷溶液)纯化，得到2-(4-(2,5-二氢呋喃-3-基)-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸甲酯(57mg，24％产率)，其为烯烃异构体混合物。
将这个混合物用30mL MeOH稀释并在H-cube氢化仪中运行(1mL/min，60bar，70deg C)，浓缩后得到，2-(2,6-二氟-4-(四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸甲酯(44mg)。将这个酯用THF(3mL)和水(1.5mL)稀释，并加入LiOH(6.5mg，2.0当量)。在室温搅拌2.5小时后，将该混合物用1N HCl(水溶液)中和，用EtOAc稀释并用盐水洗涤。将有机提取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到标题化合物(42mg，当量)。
中间体146 2-(2,6-二氟-4-羟基苯基)噻唑-4-甲酸甲酯
向2-溴噻唑-4-甲酸甲酯(500mg，2.16mmol)、2,6-二氟-4-羟基苯基硼酸(2当量，767mg)和氟化钾(3.3当量，414mg)在四氢呋喃(10mL)和水(1mL)中的混悬液中加入双(三叔丁基膦)钯(0)(0.1当量，110mg)并将该混合物在微波反应器中加热至120℃，持续15min。真空浓缩后，将该反应混合物用CombiFlash(0-100％EtOAc的庚烷溶液)纯化，得到241mg的标题化合物，其为与2-溴噻唑-4-甲酸甲酯的约1:1混合物，其可直接使用而无需进一步纯化。
中间体147 (R)-2-(2,6-二氟-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)噻唑-4-甲酸
向2-(2,6-二氟-4-羟基-苯基)噻唑-4-甲酸甲酯(207mg，0.763mmol)和(R)-3-羟基四氢呋喃(3当量，206mg)在四氢呋喃(5mL)中的溶液中加入三苯基膦(3当量，600mg)和偶氮二甲酸二异丙基酯(3当量，0.45mL)，将该混合物在室温搅拌2天。将该混合物浓缩并将其分配于EtOAc和水之间。将有机层用饱和NaHCO3、盐水洗涤，用Na2SO4干燥并浓缩。将这个残余物用THF(3mL)和水(1mL)稀释并加入LiOH(36mg)。在室温搅拌2.5小时后，将该反应用1N HCl(水溶液)中和，用EtOAc稀释并用盐水洗涤。将有机提取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩，得到标题化合物，其被三苯基膦氧化物和其他副产物污染，其可直接使用而无需进一步纯化。
中间体148 (S)-2-(2,6-二氟-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体147的操作，将(R)-3-羟基四氢呋喃替换成(S)-3-羟基四氢呋喃，得到标题化合物。
中间体149 1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑
在微波反应瓶中，将4-溴-1-甲基-5-(三氟甲基)吡唑(520mg，2.27mmol，市售的)、双(频那醇合)二硼(1.3当量，749mg)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.05当量，79mg)和乙酸钾(2当量，4445mg)溶于甲苯(15mL)中。将该混合物在微波反应器中加热至150℃，持续10min。冷却至室温后，将该混合物经硅藻土过滤(用EtOAc漂洗)。将该滤液浓缩，得到足够纯的标题化合物，其可直接使用。
中间体150 5-氟-1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑
根据中间体149的操作，将4-溴-1-甲基-5-(三氟甲基)吡唑替换成4-溴-5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑(市售的)，得到标题化合物。
中间体151 2-(2,6-二氟-4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸
根据中间体104的操作，将2,6-二氟-4-甲氧基苯基硼酸替换成3-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氧杂环丁-3-醇(参见US2012/225062)，在酯水解前增加以下氟化步骤，得到标题化合物：将2-(2,6-二氟-4-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸甲酯(50mg)在二氯甲烷(5mL)中的溶液冷却至-78℃，然后加入deoxo-fluor(1.5当量，50重量％的甲苯溶液)。将该混合物缓慢温热至室温，持续30分钟。然后将该反应通过加入饱和NaHCO3(水溶液)淬灭，然后将该混合物用EtOAc稀释并用盐水洗涤。将有机提取物干燥(Na2SO4)并真空浓缩。用CombiFlash(0-100％EtOAc的庚烷溶液)纯化，得到2-(2,6-二氟-4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸甲酯。
中间体152 ((2R*,3S*,4R*,6R*)-6-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-羟基-2,3-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基甲酸叔丁酯(外消旋)
以与((2R*,3S*,4R*,6R*)-6-(3-氨基吡啶-4-基)-3-羟基-2,3-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基甲酸叔丁酯(WO2012/004217)类似的方法制备，将3-硝基-4-吡啶醛替换成1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-甲醛(中间体3)。
中间体153 (Z)-1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚-4-烯醇
在氮气下，向冷却至-78℃的1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(1.5g，11.8mmol)和(Z)-环庚-4-烯酮(1.4g，13.0mmol)在无水THF(30mL)中的溶液中滴加六甲基二硅基氨基锂溶液(1.0M的THF溶液，30mL，29.5mmol)。将该反应混合物温热至-40℃并搅拌90min。加入(开始时滴加)饱和氯化铵水溶液(30mL)并将该混合物温热至室温并用EtOAc(150mL)萃取。将有机层用水(30mL)洗涤，用盐水(20mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(20-25％EtOAc)纯化，得到(Z)-1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚-4-烯醇，其为黄褐色油状物(1.37g，49％)。
中间体154 (Z)-5-(1-氟环庚-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
向(Z)-1-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)环庚-4-烯醇(1.35g，5.70mmol)在无水DCM(60mL)中的溶液中滴加溶液(50％的THF溶液，6.2mL，17.1mmol)并将该反应混合物在室温搅拌90min。将该混合物冷却至0℃并加入饱和NaHCO3水溶液(70mL)，开始时滴加，并用DCM(100mL)萃取。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(15-20％EtOAc/己烷)纯化，得到(Z)-5-(1-氟环庚-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为灰白色固体(615mg，45％)。
中间体155 5-(4-氟-8-氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑
在0℃，向(Z)-5-(1-氟环庚-4-烯基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(900mg，3.77mmol)在DCM(30mL)中的溶液中分批加入间氯过氧苯甲酸(1.0g，4.14mmol)。将该反应混合物温热至室温并搅拌90min，之后将其用饱和碳酸氢钠溶液(30mL)淬灭。将该混合物用DCM(100mL)萃取，用2M NaOH水溶液(2x 50mL)和盐水(30mL)洗涤。将有机层分离，用MgSO4干燥并减压浓缩，得到5-(4-氟-8-氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑，其为无色固体(982mg，当量)，其为2:5比例的非对映异构体。
表1a和1b的式I化合物
实施例101 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(3,6-二氢-2H-吡喃-4-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺101
将(4-((5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯(234mg，0.5mmol)、氟化钾二水合物(155mg，1.65mmol)和3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯(210mg，1.0mmol)在THF(5mL)中的混合物通过鼓入氮气进行脱气，持续15min。加入三(二亚苄基丙酮)二钯/三叔丁基膦四氟硼酸盐混合物(摩尔比：1/1.2，60mg，0.05mmol)并将该混合物进一步脱气10min，之后在110℃微波中加热8小时。加入水(10mL)并将该混合物用EtOAc(3x 5mL)萃取。将合并的有机层通过相分离柱并减压浓缩。将该残余物用硅胶色谱(异己烷，然后用0-5％MeOH/EtOAc)纯化。将所得中间体溶于MeOH(5mL)并用HCl的二噁烷溶液(4M，5mL)处理。将该混合物在室温搅拌16小时并将溶剂减压除去。经制备型HPLC纯化，得到101，其为棕色固体(37mg，17％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.68(s，1H)，8.05(s，1H)，7.38-7.26(m，1H)，7.06-6.97(m，2H)，6.13(s，2H)，6.03-6.00(m，1H)，4.41(d，J＝2.8Hz，1H)，4.39(d，J＝2.8Hz，1H)，3.96(t，J＝5.3Hz，2H)，3.83(s，3H)，2.45-2.41(m，2H)。LCMS(ES+)m/z418(M+1)。
实施例102 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(3,4-二氢-2H-吡喃-6-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺102
根据实施例101的操作，以(4-((5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯和3,4-二氢-2H-吡喃-6-硼酸频哪醇酯为起始原料，得到102，其为白色固体(25mg，8％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.25(s，1H)，8.18(s，1H)，7.34-7.28(m，1H)，7.06-6.98(m，2H)，6.13(s，2H)，5.11(t，J＝3.9Hz，1H)，4.25(t，J＝5.1Hz，2H)，3.89(s，3H)，2.32-2.26(m，2H)，2.03-1.96(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 418(M+1)。
实施例103 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(2-甲氧基四氢吡喃-2-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺103
将(4-((5-氯-1-甲基-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯(234mg，0.5mmol)、氟化钾二水合物(155mg，1.65mmol)和3,4-二氢-2H-吡喃-6-硼酸频哪醇酯(210mg，1.0mmol)在THF(5mL)中的混合物通过鼓入氮气进行脱气，持续15min。然后加入三(二亚苄基丙酮)二钯/三叔丁基膦四氟硼酸盐混合物(摩尔比：1/1.2，60mg，0.05mmol)，并将该混合物进一步脱气10min，然后在85℃微波中加热6小时。加入水(10mL)并将该混合物用EtOAc(3x 5mL)萃取。将合并的有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到白色固体(269mg，0.52mmol)。将其溶于DCM(20mL)和EtOH(10mL)中，并通过(全H2，100℃，流速：1mL/min，30mm 10％Raney Nickel筒)。减压除去溶剂，得到2-(2,6-二氟苯基)-4-(5-(2-乙氧基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基)噻唑-5-基氨基甲酸叔丁酯，其为白色固体(250mg，92％)。将该固体溶于MeOH(5mL)和HCl的二噁烷溶液(4M，5mL)中，并在室温搅拌16小时。经硅胶色谱(0-5％MeOH/DCM)和制备型HPLC纯化，得到103，其为白色固体(31mg，10％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.08(s，1H)，8.34(s，1H)，7.35-7.26(m，1H)，7.05-6.97(m，2H)，6.19(s，2H)，4.03(dd，J＝11.1，4.5Hz，1H)，3.92(s，3H)，3.92-3.78(m，1H)，3.16(s，3H)，2.15-2.05(m，1H)，2.03-1.89(m，1H)，1.92-1.64(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 450(M+1)。
实施例104 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-甲基-5-四氢吡喃-2-基-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺104
在氮气下，将10％钯碳(43mg，0.4mmol)加至5-(3,4-二氢-2H-吡喃-6-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(209mg，1.0mmol)和甲酸铵(465mg，8.0mmol)在MeOH(20mL)中的溶液中，并将该混合物在80℃加热2小时。将该混合物经过滤以除去催化剂，并将所得溶液通过H-Cube(70bar H2，70℃，流速：1mL/min，10％Pt/C筒)。将溶剂减压除去，得到红色胶状物(170mg)。将其溶于DCM(5mL)和DIPEA(0.13mL，0.74mmol)中，将其加至PyBOP(335mg，0.64mmol)和5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(180mg，0.506mmol)在DCM(5mL)中的溶液中，已将该溶液在室温搅拌了30min。将该混合物在室温搅拌16小时，然后用DCM(5mL)稀释并用水(3x 5mL)洗涤。将有机层分离，通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到黄色胶状物(40mg)。将该胶状物溶于HCl的二噁烷溶液(4M，5mL)和MeOH(5mL)并在室温搅拌3小时。将该溶剂减压除去并将该残余物经制备型HPLC纯化，得到104，其为白色固体(15mg，7％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl)δ9.61(s，1H)，8.14(s，1H)，7.34-7.24(m，1H)，7.04-6.96(m，2H)，6.18(s，2H)，4.66-4.56(m，1H)，4.29(dd，J＝11.4，4.2Hz，1H)，3.81(s，3H)，3.59(ddd，J＝12.2，11.4，2.1Hz，1H)，1.98-1.92(m，1H)，1.90-1.71(m，3H)，1.71-1.58(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 420(M+1)。
实施例105 5-氨基-2-(3-氟-2-吡啶基)-N-[5-(2-甲氧基四氢吡喃-2-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺105
将5-(3,4-二氢-2H-吡喃-6-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(209mg，1.0mmol)在MeOH(20mL)中的溶液通过H-Cube(全H2模式，70℃，流速：1mL/min，30mm 10％Pd/C筒)。未发生反应，因而向该溶液中加入10％钯碳(43mg，0.4mmol)和甲酸铵(465mg，8.0mmol)。将该混合物在80℃氮气下加热2小时。将该混合物经过滤，以除去催化剂并将所得溶液通过H-Cube(70bar H2，70℃，流速：1mL/min，10％Pt/C筒)。将溶剂减压除去，得到红色胶状物(170mg)。将该胶状物(170mg，0.48mmol)溶于DCM(5mL)和DIPEA(0.13mL，0.77mmol)中，并将其加至PyBOP(350mg，0.67mmol)和5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(3-氟-2-吡啶基)噻唑-4-甲酸(179mg，0.53mmol)在DCM(5mL)中的溶液中，已将该溶液在室温搅拌了30min。将该混合物在室温搅拌60小时，用DCM(5mL)稀释并用水(3x 5mL)洗涤。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到黄色胶状物。将该胶状物溶于HCl的二噁烷溶液(4M，5mL)和MeOH(5mL)中并在室温搅拌60小时。将该溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到105，其为淡黄色固体(27mg，12％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.01(s，1H)，8.39-8.34(m，2H)，7.50(t，J＝9.5Hz，1H)，7.33-7.20(m，1H)，6.36(s，2H)，4.15(dd，J＝11.1，4.3Hz，1H)，3.95-3.84(m，4H)，3.17(s，3H)，2.11(d，J＝12.9Hz，1H)，2.04-1.66(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 433(M+1)。
实施例106 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(5-((1S,4S,5S)-4-羟基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺106
向5-(4-氟-8-氧杂二环[5.1.0]辛-4-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(100mg，0.39mmol)在THF(25mL)和水(5mL)中的溶液中加入10％钯碳(10mg)。将该混合物在40℃氢气氛(400psi)下加热3小时。将该混合物经过滤，用MeOH(30mL)洗涤并减压浓缩，得到5-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-醇，其为橘色固体(105mg，当量)。将该固体(105mg，0.44mmol)溶于DCM(20mL)，并加入DIPEA(1mL，5.74mmol)，然后加入5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)-噻唑-4-甲酸(161mg，0.45mmol)和PyBOP(535mg，1.03mmol)。将该反应混合物在室温搅拌18小时，然后将其用水(20mL)淬灭，用DCM(100mL)萃取，用MgSO4干燥并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(80-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-(2,6-二氟苯基)-4-(5-(4-羟基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基氨基甲酰基)噻唑-5-基氨基甲酸叔丁酯，其为无色油状物(635mg，54％)。向该油状物(160mg，0.28mmol)在MeOH(5mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4M，3.6mL，14.4mmol)。该反应混合物在室温搅拌18小时。将该溶剂减压除去，然后用制备型HPLC纯化，然后溶于CHCl3/MeOH混合物(10mL)中，并将其通过SCX筒，用3N NH3的MeOH溶液洗脱。将该溶剂减压除去，得到106，其为淡粉色固体(31mg，24％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.08(s，1H)，8.25(s，1H)，7.32-7.26(m，1H)，7.02(t，J＝8.8Hz，2H)，6.12(s，2H)，4.59-4.55(m，1H)，4.12-4.05(m，1H)，3.85(s，3H)，2.42-2.33(m，1H)，2.22-1.89(m，6H)，1.62-1.56(m，1H)，1.50-1.45(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 462(M+1)。
实施例107 5-氨基-N-(5-((1S,4S,5S)-4-氨基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺107
向N-(2-(2,6-二氟苯基)-4-((1-甲基-5-(2-((2,2,2-三氟乙酰基)氨基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基)吡唑-4-基)氨基甲酰基)噻唑-5-基)氨基甲酸叔丁酯(58mg，0.08mmol)在MeOH(2mL)中的溶液中加入HCl的二噁烷溶液(4M，1.1mL，4.42mmol)。将该反应混合物在室温搅拌16小时并减压浓缩，得到米色固体。将该固体溶于MeOH(5mL)和水(5mL)中，并加入碳酸钾(61mg，0.44mmol)。将该反应混合物加热回流3小时，冷却至室温并将MeOH减压除去。将水层用5％MeOH的DCM溶液(2x 25mL)萃取，将合并的有机层用MgSO4干燥并减压浓缩。经制备型HPLC纯化，得到107的甲酸盐，其为白色固体(11mg，27％，经2步)。1H NMR(400MHz，d4-MeOD)δ8.53(s，1H)，8.11(s，1H)，7.47-7.43(m，1H)，7.18(t，J＝8.9Hz，2H)，4.68(s，1H)，3.89(s，3H)，3.52-3.41(m，1H)，2.65-2.52(m，1H)，2.29-2.04(m，5H)，2.00-1.92(m，1H)，1.82-1.76(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 461(M+1)。
实施例108 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(5-((2R,7R)-5-羟基-7-甲基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺108
将2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇(79mg，0.30mmol)在MeOH(20mL)中的溶液通过(全H2，70℃，流速：1mL/min，30mm 20％Pd(OH)2/C筒)。将溶剂减压除去并将该粗制残余物再次溶解于MeOH(1mL)中。加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(94mg，0.37mmol)和DIPEA(0.24mL，1.40mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(0.19mL，50重量％的EtOAc溶液，0.39mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩并将该残余物溶于EtOAc(10mL)中。将有机层用1MNaOH水溶液(3x 10mL)、1M HCl水溶液(2x 10mL)和盐水(10mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶色谱(0-5％7M NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到108，其为白色固体(4mg，3％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.69(d，J＝11.8Hz，1H)，8.16(d，J＝5.6Hz，1H)，7.37-7.30(m，1H)，7.04-6.97(m，2H)，6.15(s，2H)，5.00-4.93(m，1H)，4.17(s，1H)，4.03(dd，J＝8.0，6.9Hz，1H)，3.77(s，3H)，2.11-1.74(m，5H)，1.28(d，J＝3.3Hz，1H)，1.21(dd，J＝9.2，6.3Hz，3H)。未观测到烷基OH。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例109 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(2-羟基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺109
用SFC手性分离106，得到109。1H NMR(400MHz，DMSO)δ10.03(s，1H)，8.00(s，1H)，7.56–7.41(m，3H)，7.28(t，J＝8.9Hz，2H)，4.92(d，J＝4.5Hz，1H)，4.40–4.30(m，1H)，3.77(s，3H)，3.76–3.69(m，1H)，2.49–2.38(m，1H)，2.17–2.08(m，1H)，2.05–1.74(m，4H)，1.71–1.43(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 462(M+1)。
实施例110 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(2-羟基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺110
用SFC手性分离106，得到110。1H NMR(400MHz，DMSO)δ10.03(s，1H)，8.00(s，1H)，7.59–7.41(m，3H)，7.28(t，J＝8.9Hz，2H)，4.92(d，J＝4.4Hz，1H)，4.42–4.29(m，1H)，3.77(s，3H)，3.76–3.66(m，1H)，2.49–2.37(m，1H)，2.17–2.06(m，1H)，2.04–1.75(m，4H)，1.71–1.43(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 462(M+1)。
实施例111 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(5-((5R,6S)-5,6-二羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺111
将7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3,4-二醇(中间体10)(165mg，0.64mmol)在MeOH(13mL)中的溶液通过H-Cube(全H2模式，80℃，流速：1mL/min，30mm 10％Pd/C筒)。将溶剂减压除去。向所得胺在DCM(10mL)中的溶液中加入DIPEA(0.33mL，1.92mmol)、PyBOP(499mg，0.96mmol)和5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)-噻唑-4-甲酸(249mg，0.70mmol)。将该混合物在室温搅拌18小时，用DCM(5mL)稀释并用水(3x 5mL)洗涤。将有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-10％MeOH/EtOAc)纯化，得到粉色固体。将该固体(65mg，0.11mmol)溶于HCl的二噁烷溶液(4M，8.6mL)和MeOH(2mL)并在室温搅拌18小时。将该溶剂减压除去。经制备型HPLC纯化，得到111，其为灰白色固体(28mg，9％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.75(br s，1H)，8.17(s，1H)，7.39-7.32(m，1H)，7.10-7.00(m，2H)，6.25(br s，2H)，5.14-5.10(m，1H)，4.23(dd，J＝13.7，4.0Hz，1H)，3.90-3.85(m，1H)，3.79(s，3H)，3.75-3.56(m，2H)，2.12-2.00(m，3H)，1.76-1.70(m，1H)。未观测到OH质子。LCMS(ES+)m/z 466(M+1)。
实施例112 5-氨基-N-(5-((2R,7R)-5-氨基-7-乙基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺112
将N-(2-乙基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺(118mg，0.31mmol)在MeOH(20mL)中的溶液通过(全H2，60℃，流速：1mL/min，30mm 20％Pd(OH)2/C筒)。将该溶剂减压除去并将该粗制残余物再溶解于MeOH(1mL)中。并加入5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(119mg，0.33mmol)，然后加入DIPEA(0.16mL，0.95mmol)，并将该反应混合物在50℃加热15min。冷却至室温后，滴加丙基膦酸环酐溶液(0.17mL，50重量％的EtOAc溶液，0.34mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该混合物减压浓缩并将该残余物溶于EtOAc(10mL)中，用1M NaOH水溶液(3x 10mL)、1M HCl水溶液(2x 10mL)和盐水(10mL)洗涤。将有机层分离，用Na2SO4干燥，减压浓缩并经硅胶色谱(0-10％7M氨的MeOH溶液/DCM)纯化，得到油状物，其为异构体混合物。将该油状物溶于MeOH(2mL)中，并加入HCl的二噁烷溶液(4M，4.0mmol，1mL)。将该反应混合物在室温搅拌18小时并将该溶剂减压除去。经手性制备型HPLC纯化，得到112，其为白色固体(9mg，5％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.63(s，1H)，8.15(s，1H)，7.34(tt，J＝8.4，6.1Hz，1H)，7.05-6.97(m，2H)，6.16(s，2H)，4.80(dd，J＝8.2，3.9Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.71-3.62(m，1H)，3.39-3.32(m，1H)，2.18-2.09(m，1H)，2.08-1.98(m，1H)，1.93-1.74(m，2H)，1.71-1.57(m，3H)，1.46-1.33(m，3H)，0.81(t，J＝7.4Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 477(M+1)。
实施例113 5-氨基-N-(5-((2R,7R)-5-氨基-7-甲基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺113
根据实施例112的操作，以N-(2-甲基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)-2-甲基-丙-2-亚磺酰胺为起始原料，经硅胶柱色谱(0-10％MeOH/DCM，1％7M NH3的MeOH溶液)和制备型HPLC纯化，得到113，其为灰白色固体(45mg，17％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.60(s，1H)，8.13(s，1H)，7.36-7.29(m，1H)，7.05-6.96(m，2H)，6.17(s，2H)，4.84-4.79和4.71-4.67(m，1H)，4.04-3.96(m，1H)，3.78和3.74(s，3H)，3.40-3.33(m，1H)，2.15-1.51(m，8H)，1.26-1.16(m，3H)。LCMS(ES+)m/z463(M+1)。
实施例114 5-氨基-N-(5-(6-氨基-4,4-二氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺114
向5-(6-叠氮基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(69mg，0.23mmol)在EtOH(2.3mL)中的溶液中加入氯化铵(61mg 1.14mmol)和水(0.23mL)，然后加入铁粉(51mg，0.91mmol)。将该反应混合物在80℃加热6小时，然后再加入相同量的铁和氯化铵。继续加热60min并将该反应混合物冷却至室温。将该粗制浆液用过滤，用DCM(20mL)洗涤。将该溶液通过相分离柱并减压浓缩。将该粗制残余物溶于MeOH(1mL)并加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(94mg，0.37mmol)和DIPEA(0.24mL，1.40mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，0.19mL，0.39mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩并将该残余物溶于EtOAc(10mL)中。将有机层用1M NaOH水溶液(3x 10mL)、1M HCl水溶液(2x 10mL)、盐水(10mL)洗涤，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶色谱(0-5％7M NH3的MeOH溶液/DCM)和制备型HPLC纯化，得到5-氨基-N-(5-(6-叠氮基-4,4-二氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺，其为无色油状物。将这个化合物溶于MeOH(10mL)并通过(全H2，70℃，流速：1mL/min，30mm 10％Pd/C筒)。经硅胶柱色谱(0-10％MeOH/DCM，1％7M NH3的MeOH溶液)纯化，得到114(非对映异构体1)，其为无色固体(2mg，2％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.39(s，1H)，8.07(s，1H)，7.45-7.18(m，1H)，7.05-6.98(m，2H)，6.16(s，2H)，4.97-4.88(m，1H)，4.32-4.23(m，1H)，3.83(s，3H)，3.54-3.42(m，2H)，2.74-2.44(m，3H)，2.36-2.20(m，1H)，1.31-1.14(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例115 5-氨基-N-(5-((1S,4S,5S)-4-氨基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺115
用SFC手性分离外消旋混合物N-[5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯，然后用4N HCl的二噁烷溶液脱保护，得到115，其为单一对映异构体。1H NMR(400MHz，DMSO)δ10.07(s，1H)，8.00(s，1H)，7.57–7.39(m，3H)，7.38–7.22(m，2H)，4.27(dd，J＝7.1，3.4Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.01–2.90(m，1H)，2.44–2.30(m，1H)，2.22–2.07(m，1H)，2.04–1.55(m，5H)，1.44–1.27(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 461(M+1)。
实施例116 5-氨基-N-(5-((1S,4R,5S)-4-氨基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺116
用SFC手性分离外消旋混合物N-[5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯，然后用4N HCl的二噁烷溶液脱保护，得到116，其为单一对映异构体。1H NMR(400MHz，DMSO)δ10.08(s，1H)，8.00(s，1H)，7.57–7.40(m，3H)，7.36–7.24(m，2H)，4.27(dd，J＝7.0，3.4Hz，1H)，3.77(s，3H)，2.93(dd，J＝10.0，5.7Hz，1H)，2.43–2.34(m，1H)，2.20–2.08(m，1H)，2.04–1.50(m，5H)，1.42–1.29(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 461(M+1)。
实施例117 5-氨基-N-(5-((1R,4S,5R)-4-氨基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺117
用SFC手性分离外消旋混合物N-[5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯，然后用4N HCl的二噁烷溶液脱保护，得到117，其为单一对映异构体。1H NMR(400MHz，DMSO)δ10.23(s，1H)，8.18–8.09(m，1H)，7.97(s，1H)，7.51–7.29(m，5H)，4.37(dd，J＝7.0，3.6Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.07–2.96(m，1H)，2.45–2.34(m，1H)，2.23–2.12(m，1H)，2.09–1.97(m，1H)，1.94–1.83(m，2H)，1.80–1.59(m，4H)，1.47–1.30(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 443(M+1)。
实施例118 5-氨基-N-(5-((1R,4R,5R)-4-氨基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺118
用SFC手性分离外消旋混合物N-[5-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-8-氧杂二环[3.2.1]辛-2-基]氨基甲酸叔丁酯，然后用4N HCl的二噁烷溶液脱保护，得到118，其为单一对映异构体。1H NMR(400MHz，DMSO)δ10.23(s，1H)，8.19–8.09(m，1H)，7.97(s，1H)，7.54–7.27(m，5H)，4.37(dd，J＝7.2，3.4Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.09–2.96(m，1H)，2.46–2.36(m，1H)，2.23–2.13(m，1H)，2.12–1.98(m，1H)，1.96–1.82(m，2H)，1.79–1.58(m，3H)，1.45–1.29(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 443(M+1)。
实施例119 5-氨基-N-(5-((5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺119
根据实施例111的操作，以N-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体23)为起始原料，得到119，其为无色固体(7mg，9％，经3步)。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.49(s，1H)，7.87(s，1H)，7.60-7.44(m，3H)，7.32-7.23(m，2H)，5.01-4.83(m，2H)，4.12-3.90(m，2H)，3.72(s，3H)，3.36-3.19(m，1H)，2.22-2.14(m，1H)，1.92-1.57(m，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例120 5-氨基-N-(5-((2R,5R,7R)-5-氨基-7-甲基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺120
用SFC手性分离113，得到120。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.66(s，1H)，7.91(s，1H)，7.61–7.50(m，1H)，7.46(s，2H)，7.26(t，J＝8.5Hz，2H)，5.05–4.94(m，1H)，4.07–3.90(m，1H)，3.70(s，3H)，3.15–3.03(m，1H)，2.23–2.11(m，1H)，1.91–1.64(m，3H)，1.64–1.46(m，3H)，1.05(d，J＝6.3Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例121 5-氨基-N-(5-((2R,5S,7R)-5-氨基-7-甲基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺121
用SFC手性分离113，得到121。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.56(s，1H)，7.90(s，1H)，7.61–7.52(m，1H)，7.48(s，2H)，7.27(t，J＝8.5Hz，2H)，4.99(dd，J＝9.0，2.9Hz，1H)，4.05(dd，J＝11.5，6.5Hz，1H)，3.72(s，3H)，2.09(d，J＝14.1Hz，1H)，1.98–1.51(m，6H)，1.09(d，J＝6.3Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例122 5-氨基-N-[5-(6-氨基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺122
向5-(6-叠氮基-4,4-二氟-氧杂环庚-2-基)-1-甲基-4-硝基-吡唑(264mg，0.87mmol)在EtOH(8.8mL)中的溶液中加入氯化铵(360mg 6.73mmol)、水(0.88mL)和铁粉(51mg，0.91mmol)。将该反应混合物在80℃加热16小时，然后冷却至室温。将该粗制浆液经过滤，用DCM(200mL)洗涤。将该溶液通过相分离柱并减压浓缩。将该残余物溶于异丙醇(10mL)，并加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(255mg，0.92mmol)和DIPEA(0.59mL，3.50mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，0.46mL，0.96mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩。经硅胶色谱(0-5％7M NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，然后经制备型HPLC纯化，得到122(非对映异构体2)，其为无色固体(24mg，6％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.43和9.39(2s，1H)，8.09和8.07(2s，1H)，7.32(tt，J＝8.4，6.1Hz，1H)，7.06-6.96(m，2H)，6.19(s，2H)，4.92和4.81(d，J＝11.4Hz，1H)，4.27和4.08(2dd，J＝12.5，5.2Hz，1H)，3.88(dd，J＝12.5，6.4Hz，1H)，3.83和3.81(2s，3H)，3.46-3.36(m，1H)，2.65-2.46(m，1H)，2.45-2.27(m，2H)，1.25(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例123 5-氨基-N-(5-((5S,6S)-6-氨基-5-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺123
根据实施例111的操作，以N-(4-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体20)为起始原料，得到123的甲酸盐，其为无色固体(9mg，11％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.61(s，1H)，8.23(s，1H)，7.91(s，1H)，7.57-7.48(m，3H)，7.30(t，J＝8.8Hz，2H)，5.13(dd，J＝6.0，3.4Hz，1H)，3.80(dd，J＝12.6，3.8Hz，1H)，3.71(s，3H)，3.18(s，3H)，3.05-2.97(m，1H)，2.93(t，J＝8.6Hz，1H)，2.34(s，1H)，2.07-1.96(m，1H)，1.94-1.82(m，2H)，1.53-1.42(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例125 5-氨基-N-(5-((2R,7R)-5-氨基-7-乙基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺125
根据实施例112的操作，得到另一立体异构体125，其为无色油状物(1.3mg，1％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.73(s，1H)，7.89(s，1H)，7.53-7.44(m，2H)，7.41(s，2H)，7.23-7.14(m，3H)，5.09(t，J＝5.0Hz，1H)，3.62(s，3H)，3.49-3.39(m，1H)，3.09-2.96(m，1H)，2.10-1.96(m，1H)，1.84-1.71(m，2H)，1.68-1.60(m，1H)，1.54-1.35(m，3H)，1.27-1.16(m，1H)，0.66(t，J＝7.3Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 477(M+1)。
实施例126 5-氨基-N-(5-((5R,6S)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺126
根据实施例111的操作，以N-((3S,4R)-3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体21)为起始原料，得到126，其为灰白色固体(33mg，25％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.23(s，1H)，7.77(s，1H)，7.59-7.47(m，3H)，7.31-7.23(m，2H)，4.79(dd，J＝10.9，3.6Hz，1H)，4.04(dd，J＝13.8，3.1Hz，1H)，3.84-3.75(m，1H)，3.75(s，3H)，3.09(s，3H)，3.08-2.94(m，2H)，2.06-1.97(m，1H)，1.84-1.67(m，2H)，1.64-1.55(m，1H)，未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例127 5-氨基-N-(5-((4R,5R)-4-氨基-5-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺127
根据实施例130的操作，还得到127，其为白色固体(5mg，1％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.91(s，1H)，7.96(s，1H)，7.36-7.26(m，1H)，7.05-6.96(m，2H)，6.22(s，2H)，4.89(t，J＝6.1Hz，1H)，4.82-4.76和4.70-4.64(m，1H)，4.13(dq，J＝12.9，4.2Hz，1H)，3.85(s，3H)，3.60-3.47(m，2H)，2.72-2.62(m，1H)，2.33-2.18(m，1H)，2.18-1.97(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例128 5-氨基-N-(5-((5S,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺128
根据实施例111的操作，由N-((3R,4S)-3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体22)，得到128，其为白色固体(28mg，21％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.23(s，1H)，7.77(s，1H)，7.59-7.47(m，3H)，7.31-7.23(m，2H)，4.79(dd，J＝11.0，3.6Hz，1H)，4.04(dd，J＝13.8，3.1Hz，1H)，3.82(dd，J＝13.9，3.4Hz，1H)，3.75(s，3H)，3.09(s，3H)，3.08-2.93(m，2H)，2.07-1.97(m，1H)，1.85-1.69(m，2H)，1.66-1.55(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例129 5-氨基-N-(5-((5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺129
根据实施例111的操作，以N-((3R,4R)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，得到129，其为无色固体(30mg，38％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.49(s，1H)，7.86(s，1H)，7.55-7.48(m，3H)，7.28(t，J＝8.9Hz，2H)，4.98-4.78(m，2H)，4.08-3.93(m，2H)，3.72(s，3H)，3.28-3.20(m，1H)，2.22-1.92(m，3H)，1.91-1.58(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例130 5-氨基-N-(5-((4S,5S)-4-氨基-5-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺130
根据实施例111的操作，以N-(5-氟-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯为起始原料得到130，其为白色固体(13mg，4％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.91(s，1H)，7.96(s，1H)，7.36-7.26(m，1H)，7.05-6.96(m，2H)，6.22(s，2H)，4.89(t，J＝6.1Hz，1H)，4.82-4.76和4.70-4.64(m，1H)，4.13(dq，J＝12.9，4.2Hz，1H)，3.85(s，3H)，3.60-3.47(m，2H)，2.72-2.62(m，1H)，2.33-2.18(m，1H)，2.18-1.97(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例131 5-氨基-N-(5-((5S,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺131
根据实施例111的操作，由N-((3S,4S)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体25)，得到131，其为无色固体(30mg，38％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.49(s，1H)，7.86(s，1H)，7.55-7.48(m，3H)，7.31-7.22(m，2H)，4.95-4.76(m，2H)，4.08-3.91(m，2H)，3.72(s，3H)，3.30-3.22(m，1H)，2.22-1.57(m，6H)。LCMS(ES+)m/z467(M+1)。
实施例134 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-(5-羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺134
根据实施例108的操作，以7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-醇(85mg 0.35mmol)为起始原料，使用Raney Nickel筒，经制备型HPLC纯化，得到134(其为亮粉色固体)和非对映异构体的1/1混合物(15mg，9％，经2步)。1H NMRδ(ppm)(CDCl3)9.72(2s，1H)，8.15(2s，1H)，7.37-7.26(m，1H)，7.06-6.96(m，2H)，6.17(s，2H)，5.01-4.92(m，1H)，4.23-4.15(m，1H)，4.06(dt，J＝12.7，4.6Hz，1H)，4.01-3.62(m，5H)，2.42-2.25(m，1H)，2.17-1.90(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 450(M+1)。
实施例135 5-氨基-N-(5-((2S,4R,5R)-5-氨基-4-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺135
在0℃，向5-叠氮基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-醇(353mg，1.25mmol)在DCM(6mL)中的溶液中加入双(2-甲氧基乙基)氨基三氟化硫，Sigma-Aldrich产品编号494119，CAS号202289-38-1，(50％的THF溶液，0.58mL，1.56mmol)，并将该混合物在室温搅拌16小时。将该混合物在冰/水浴中冷却并通过滴加饱和NaHCO3水溶液(10mL)淬灭。将该有机层通过相分离柱并将溶剂减压除去。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到澄清胶体。将该胶体(145mg，0.51mmol)在THF/水(2.5mL/0.5mL)中的溶液用三苯基膦(147mg，0.56mmol)处理，并将该反应混合物在防冲击屏后以60℃加热2小时。将该混合物用EtOAc(10mL)稀释并用盐水(2x 5mL)洗涤。将该有机层通过相分离柱并减压浓缩。将所得残余物溶于无水DCM(2mL)中，并加入DIPEA(0.18mL，1.02mmol)和焦碳酸二叔丁酯(134mg，0.61mmol)。将该反应混合物在室温搅拌2小时。加入水(2mL)并将该混合物用DCM(3x 2mL)萃取。将该有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-50％EtOAc/异己烷)纯化，得到中间体硝基-吡唑，其为澄清胶体(180mg)。向该胶体(179mg，0.5mmol)溶液中加入10％钯碳(27mg，0.25mmol)和1-甲基-1,4-环己二烯(0.56mL，5.0mmol)。将该混合物在70℃加热1小时。未发生反应，因此将该混合物过滤并向该滤液中加入10％钯碳(27mg，0.25mmol)和甲酸铵(126mg，2.0mmol)。将该混合物在80℃氮气下加热2小时。将该混合物冷却至室温，经过滤并减压浓缩，得到氨基-吡唑，其为淡黄色胶状物(132mg)。将该胶体(131mg，0.40mmol)溶于DCM(2mL)和DIPEA(0.10mL，0.56mmol)并将其加至PyBOP(255mg，0.49mmol)和5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(3-氟-2-吡啶基)噻唑-4-甲酸(131mg，0.37mmol)在DCM(2mL)中的溶液中，已经将该溶液在室温搅拌了30min。将该混合物在室温搅拌16小时，用DCM(10mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(10mL)和水(10mL)洗涤。将该有机层通过相分离柱并减压浓缩。经硅胶色谱(0-3％MeOH/DCM)纯化，得到淡黄色胶体(65mg)。将其进一步经手性制备型HPLC纯化，得到灰白色固体(22mg)。将该固体(22mg，0.033mmol)溶于HCl的二噁烷溶液(4M，5mL)和MeOH(2mL)中，并在室温搅拌16小时。将该溶剂减压除去并将残余物通过SCX筒，用MeOH洗涤并用3％7M NH3的MeOH溶液/DCM洗脱。经硅胶柱色谱(0-5％7M NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到135，其为白色固体(10mg，1％，经6步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.68(s，1H)，8.19(s，1H)，7.35-7.27(m，1H)，7.01(t，J＝8.7Hz，2H)，6.16(s，2H)，5.07-5.02(m，1H)，4.60(dddd，J＝43.2，9.0，6.5，3.8Hz，1H)，4.23(ddd，J＝12.5，7.0，4.4Hz，1H)，3.88-3.74(m，4H)，3.36-3.26(m，1H)，2.46-2.30(m，2H)，2.18-2.07(m，1H)，1.98-1.87(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例136 5-氨基-N-(5-((2S,4R,5R)-5-氨基-4-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺136
根据实施例140的操作，以N-(5-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯为起始原料，得到136，其为灰白色固体(28mg，12％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.76(s，1H)，8.20(s，1H)，7.35-7.26(m，1H)，7.01(t，J＝8.7Hz，2H)，6.16(s，2H)，5.04(dd，J＝6.5，3.7Hz，1H)，4.24-4.16(m，1H)，3.87-3.69(m，4H)，3.34-3.11(m，4H)，3.15-3.08(m，1H)，2.24-2.04(m，3H)，1.94-1.84(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例137 5-氨基-N-(5-((2R,4S,5S)-5-氨基-4-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺137
根据实施例140的操作，还得到137，其为白色固体(10mg，1％，经6步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.68(s，1H)，8.19(s，1H)，7.35-7.27(m，1H)，7.01(t，J＝8.7Hz，2H)，6.16(s，2H)，5.07-5.02(m，1H)，4.60(dddd，J＝43.2，9.0，6.5，3.8Hz，1H)，4.23(ddd，J＝12.5，7.0，4.4Hz，1H)，3.88-3.74(m，4H)，3.36-3.26(m，1H)，2.46-2.30(m，2H)，2.18-2.07(m，1H)，1.98-1.87(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例138 5-氨基-N-(5-((2R,4S,5S)-5-氨基-4-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺138
根据实施例137的操作，还得到138，其为灰白色固体(25mg，10％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.76(s，1H)，8.20(s，1H)，7.35-7.26(m，1H)，7.01(t，J＝8.7Hz，2H)，6.16(s，2H)，5.04(dd，J＝6.5，3.7Hz，1H)，4.24-4.16(m，1H)，3.87-3.69(m，4H)，3.34-3.11(m，4H)，3.15-3.08(m，1H)，2.24-2.04(m，3H)，1.94-1.84(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例139 5-氨基-N-[5-[1-(氨基甲基)-7-氧杂二环[2.2.1]庚-4-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺139
根据实施例106的操作，以N-[[4-氟-1-羟基-4-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)环己基]甲基]氨基甲酸叔丁酯为起始原料，经硅胶柱色谱(5％MeOH/DCM，且MeOH含1％NH3)纯化后，得到139，其为乳白色固体(142mg，22％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.70(s，1H)，8.23(s，1H)，8.12(td，J＝7.7，1.9Hz，1H)，7.39-7.33(m，1H)，7.29-7.19(s，1H)，7.16(dd，J＝11.3，8.3Hz，1H)，6.13(s，2H)，3.90(s，3H)，3.19(s，2H)，2.35-2.26(m，2H)，2.07-1.89(m，4H)，1.78-1.69(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 443(M+1)。
实施例141 5-氨基-N-(5-((4R,5R)-4-氨基-5-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺141
根据实施例130的操作，还得到141，其为白色固体(5mg，1％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.91(s，1H)，7.96(s，1H)，7.36-7.26(m，1H)，7.05-6.96(m，2H)，6.22(s，2H)，4.89(t，J＝6.1Hz，1H)，4.82-4.76和4.70-4.64(m，1H)，4.13(dq，J＝12.9，4.2Hz，1H)，3.85(s，3H)，3.60-3.47(m，2H)，2.72-2.62(m，1H)，2.33-2.18(m，1H)，2.18-1.97(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例142 5-氨基-N-[5-(4-氨基-5-羟基-3,5-二甲基-四氢吡喃-2-基)-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺142
根据实施例112的操作，以N-[5-羟基-3,5-二甲基-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-基]氨基甲酸叔丁酯为起始原料，经制备型HPLC纯化后，得到142，其为灰白色固体(15mg，10％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.84(s，1H)，8.22(s，1H)，7.31(ddd，J＝8.5，6.1，2.3Hz，1H)，7.07-6.97(m，2H)，6.14(s，2H)，5.31(d，J＝3.3Hz，1H)，4.00(d，J＝12.1Hz，1H)，3.83(d，J＝12.1Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.09(s，1H)，1.79-1.72(m，1H)，1.13(s，3H)，1.11(d，J＝7.6Hz，3H)。未观测到烷基NH2和OH。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例143 5-氨基-N-[5-(6-氨基氧杂环庚-3-基)-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺143
将N-[6-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯与4N HCl的二噁烷溶液(5mL)和甲醇(2mL)在室温搅拌3h。将该溶剂减压除去，用饱和NaHCO3碱化并用乙酸乙酯(3x)萃取。将合并的有机层用MgSO4干燥并将溶剂减压除去并将该残余物用制备型HPLC纯化，得到143(24mg，32％)。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.73，9.56(s，1H)，7.83，7.78(s，1H)，7.62–7.42(m，3H)，7.36–7.18(m，2H)，3.96–3.71(m，6H)，3.59(ddd，J＝71.3，12.2，4.1Hz，1H)，3.03–2.91(m，1H)，2.94–2.79(m，1H)，2.10–1.89(m，1H)，1.85-1.68(m，1H)，1.68–1.56(m，1H)，1.54–1.39(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。
实施例144 5-氨基-N-[5-(6-氨基氧杂环庚-3-基)-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺144
用SFC手性分离143，得到144，其为对映异构体混合物。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.56(s，1H)，7.78(s，1H)，7.60–7.52(m，1H)，7.50(s，2H)，7.26(t，J＝8.6Hz，2H)，3.91–3.79(m，2H)，3.77(s，3H)，3.68(dd，J＝12.3，3.8Hz，1H)，3.50(dd，J＝12.2，4.0Hz，1H)，2.97(s，1H)，2.13–2.00(m，1H)，1.81–1.66(m，2H)，1.66–1.53(m，1H)。LCMS(ES+)m/z449(M+1)。
实施例145 5-氨基-N-(5-((5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺145
根据实施例111的操作，以N-(3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体34)为起始原料，得到145的甲酸盐，其为无色固体(5mg，5％，经3步)。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.31(s，1H)，8.20(s，1H)，7.80(s，1H)，7.59-7.50(m，3H)，7.32-7.22(m，2H)，4.93(dd，J＝8.8，4.2Hz，1H)，4.58-4.39(m，1H)，3.90(dd，J＝13.2，3.8Hz，1H)，3.78-3.72(m，1H)，3.75(s，3H)，3.08-2.98(m，1H)，2.17-1.91(m，3H)，1.88-1.78(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例146 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(5-((2S,4R)-4-羟基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺146
根据实施例108的操作，以2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)四氢吡喃-4-醇为起始原料，经手性SFC纯化后，得到146(对映异构体1)，其为灰白色固体(4mg，2％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.59(s，1H)，8.13(s，1H)，7.41-7.14(m，1H)，7.06-6.96(m，2H)，6.15(s，2H)，5.13(dd，J＝11.8，2.5Hz，1H)，4.37-4.34(m，1H)，4.11-4.06(m，2H)，3.82(s，3H)，2.18-2.00(m，2H)，1.92-1.83(m，1H)，1.68-1.60(m，1H)。未观测到OH。LCMS(ES+)m/z 436(M+1)。
实施例147 5-氨基-N-[5-(6-氨基氧杂环庚-3-基)-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺147
用SFC手性分离143，得到147，其为对映异构体混合物。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.74(s，1H)，7.83(s，1H)，7.62–7.51(m，1H)，7.47(s，2H)，7.27(t，J＝8.5Hz，2H)，3.94–3.75(m，3H)，3.73(s，3H)，3.03–2.93(m，1H)，2.93–2.81(m，1H)，2.02–1.90(m，1H)，1.85–1.71(m，1H)，1.71–1.54(m，1H)，1.52–1.39(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。
实施例148 5-氨基-N-[5-[5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺148
根据实施例111的操作，以N-[3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(由中间体53)为起始原料，得到148，其为甲酸盐，固体(3mg，22％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.64(s，1H)，7.94(s，1H)，7.57-7.45(m，4H)，7.29-7.20(m，3H)，5.21-5.16(m，1H)，4.06-4.01(m，1H)，3.82-3.69(m，4H)，2.96(s，1H)，2.21-2.15(m，2H)，2.03-1.74(m，1H)，1.79-1.55(m，1H)，1.42-1.37(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例149 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(5-((2R,4S)-4-羟基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺149
根据实施例146的操作，还得到149(对映异构体2)，其为灰白色固体(4mg，2％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.59(s，1H)，8.13(s，1H)，7.34-7.27(m，1H)，7.05-6.96(m，2H)，6.15(s，2H)，5.14(d，J＝2.5Hz，1H)，5.11(d，J＝2.5Hz，1H)，4.36(s，1H)，4.11-4.07(m，2H)，3.82(s，3H)，2.62(s，1H)，2.19-2.01(m，2H)，1.91-1.85(m，1H)，1.73-1.63(m，1H)。未观测到OH。LCMS(ES+)m/z 436(M+1)。
实施例150 5-氨基-N-[5-[(2S,5R)-5-氨基-4-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺150
根据实施例111的操作，以N-[5-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体54)为起始原料，得到150，其为白色固体(28mg，12％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.52(s，1H)，7.85(s，1H)，7.56-7.48(m，3H)，7.27(t，J＝8.8Hz，2H)，4.99(dd，J＝9.9，3.0Hz，1H)，4.93-4.76(m，1H)，4.08-3.99(m，1H)，3.79-3.67(m，4H)，3.33-3.20(m，1H)，2.31-2.12(m，2H)，1.89-1.83(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例151 5-氨基-N-[5-[(2R,5S)-5-氨基-4-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺151
根据实施例150的操作，还得到151，其为白色固体(24mg，17％)。1HNMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.52(s，1H)，7.85(s，1H)，7.56-7.48(m，3H)，7.27(t，J＝8.8Hz，2H)，4.99(dd，J＝9.9，3.0Hz，1H)，4.93-4.76(m，1H)，4.08-3.99(m，1H)，3.79-3.67(m，4H)，3.33-3.20(m，1H)，2.31-2.12(m，2H)，1.89-1.83(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例152 5-氨基-N-[5-[(5-氨基-6,6-二氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺152
根据实施例111的操作，以N-[3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体56)为起始原料，得到152，其为淡棕色固体(60mg，73％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.28(s，1H)，7.81(s，1H)，7.57-7.48(m，3H)，7.30-7.20(m，2H)，5.06-5.00(m，1H)，4.19-3.98(m，2H)，3.76(s，3H)，2.22-2.14(m，1H)，1.92-1.76(m，4H)。2H被水峰部分掩蔽。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例153 5-氨基-N-[5-[(2R,5S,6S)-6-氨基-5-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺153
在实施例150的Boc脱保护之前，在手性固定相上，用SFC纯化N-[(3S,4S,7R)-7-[4-[[5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-羰基]氨基]-2-甲基-吡唑-3-基]-4-氟-氧杂环庚-3-基]氨基甲酸叔丁酯，得到153，其为金色固体(25mg，59％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.34(s，1H)，7.84(s，1H)，7.62-7.53(m，3H)，7.34-7.26(m，2H)，4.97(dd，J＝8.8，4.2Hz，1H)，4.61-4.44(m，1H)，3.96-3.88(m，1H)，3.86-3.68(m，4H)，3.10-3.01(m，1H)，2.18-1.92(m，3H)，1.93-1.78(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例154 5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺154
根据实施例111的操作，以N-[(3R,4R,7S)-3-甲氧基-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体93)为起始原料，得到154，其为盐酸盐，其为米色固体(33mg，89％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.41(s，1H)，8.06(s，3H)，7.84(s，1H)，7.60-7.48(m，3H)，7.38-7.29(m，2H)，4.97-4.92(m，1H)，4.15(dd，J＝13.4，4.7Hz，1H)，3.93(dd，J＝13.3，5.4Hz，1H)，3.86-3.82(m，1H)，3.80-3.62(m，4H)，3.29(s，3H)，2.13-1.98(m，2H)，1.86-1.73(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例155 5-氨基-N-[5-[5-(氨基甲基)四氢呋喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺155
根据实施例111的操作，以((5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体62)为起始原料，得到155，其为乳白色固体(19mg，90％)。1H NMR(400MHz，d4-MeOD)δ7.95(s，1H)，7.52-7.45(m，1H)，7.20-7.14(m，2H)，5.33-5.29(m，1H)，4.50-4.47(m，1H)，3.85(s，3H)，2.96-2.87(m，2H)，2.54-2.49(m，1H)，2.31-2.25(m，1H)，2.08-2.00(m，1H)，1.91-1.86(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。未观测到可交换的质子。
实施例156 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺156
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到156。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.37(s，1H)，8.56(t，J＝7.7Hz，1H)，7.85(s，1H)，7.79(t，J＝7.3Hz，1H)，7.57(s，2H)，7.49(t，J＝7.9Hz，1H)，4.91–4.82(m，1H)，4.67–4.49(m，1H)，4.42–4.26(m，1H)，4.21–4.00(m，1H)，3.77(s，3H)，2.13–2.01(m，1H)，1.90–1.67(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例157 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(三氟甲氧基)苯基)噻唑-4-甲酰胺157
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-(三氟甲氧基)苯基)硼酸，得到157。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.33(s，1H)，8.40(dd，J＝7.9，2.3Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.54–7.44(m，5H)，4.89–4.80(m，1H)，4.69–4.53(m，1H)，4.41–4.28(m，1H)，4.21–4.02(m，1H)，3.77(s，3H)，3.48–3.38(m，1H)，2.13–2.02(m，1H)，1.91–1.72(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 515(M+1)。
实施例158 5-氨基-N-[5-[4-氨基四氢吡喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺158
根据实施例111的操作，以((5-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)四氢呋喃-2-基)甲基)氨基甲酸叔丁酯(中间体89)为起始原料，得到158，其为白色固体(11mg，5％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.49(s，1H)，8.12(s，1H)，7.34-7.27(m，1H)，7.06-6.96(m，2H)，6.16(s，2H)，4.62(dd，J＝11.6，2.3Hz，1H)，4.31(dd，J＝11.7，4.5Hz，1H)，3.82(s，3H)，3.59(td，J＝12.0，2.1Hz，1H)，3.06-2.96(m，1H)，2.12-1.98(m，1H)，1.89(ddd，J＝13.1，4.4，2.2Hz，1H)，1.71-1.46(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z435(M+1)。
实施例159 5-氨基-N-[5-[(2R,4S)-4-氨基四氢吡喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺159
经手性制备型HPLC纯化实施例158，得到159，其为第一个被洗脱出来的异构体，为甲酸盐，其为白色固体(5mg，13％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)9.53(s，1H)，8.38(s，1H)，7.90(s，1H)，7.55-7.46(m，3H)，7.32-7.23(m，2H)，4.81(dd，J＝11.4，2.3Hz，1H)，4.12(dd，J＝11.7，4.4Hz，1H)，3.76(s，3H)，3.62-3.50(m，1H)，3.19-3.05(m，1H)，2.05(d，J＝12.6Hz，1H)，1.84(d，J＝12.8Hz，1H)，1.51(qd，J＝12.2，4.6Hz，1H)，1.39(q，J＝11.9Hz，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例160 5-氨基-N-[5-[(2S,4R)-4-氨基四氢吡喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺160
根据实施例159的操作，还得到160，其为第二个被洗脱出来的异构体，为甲酸盐，其为白色固体(5mg，13％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.53(s，1H)，8.38(s，1H)，7.90(s，1H)，7.55-7.46(m，3H)，7.32-7.23(m，2H)，4.81(dd，J＝11.4，2.3Hz，1H)，4.12(dd，J＝11.7，4.4Hz，1H)，3.76(s，3H)，3.62-3.50(m，1H)，3.19-3.05(m，1H)，2.05(d，J＝12.6Hz，1H)，1.84(d，J＝12.8Hz，1H)，1.51(qd，J＝12.2，4.6Hz，1H)，1.39(q，J＝11.9Hz，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例161 5-氨基-N-[5-[2-氨基-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(3-氟-4-吡啶基)噻唑-4-甲酰胺161
将N-[2-溴-4-[[5-[2-(叔丁氧羰基氨基)-8-氧杂二环[3.2.1]辛-5-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(110mg，0.175mmol，中间体65)在无水二噁烷(15mL)中的溶液用3-氟-4-(三丁基甲锡烷基)-吡啶(0.053mL，0.246mmol)、氯化锂(22mg，0.526mmol)、碘化亚铜(I)(10mg，0.053mmol)和四(三苯基膦)钯(0)(12mg，0.011mmol)处理。向该混合物中鼓入氮气10min并将该混合物在120℃微波照射下加热90min。加入水(20mL)并将该混合物用EtOAc(60mL)萃取。将该有机层用盐水(20mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶色谱(75％EtOAc/异己烷)纯化，得到所需中间体，其为桃红色固体(59mg)。将该固体混悬于MeOH(3mL)，用HCl的二噁烷溶液(4M，2.2mL，9.18mmol)处理并在室温搅拌18小时。加入更多的HCl的二噁烷溶液(4M，1.1mL，4.59mmol)并将该混合物搅拌6小时。将溶剂减压除去并将该残余物通过SCX柱，用MeOH洗涤并用3N NH3的MeOH溶液洗脱。经硅胶色谱(5％MeOH/CH2Cl2，且MeOH含1％7N NH3)进一步纯化，得到161，其为黄色固体(26mg，32％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.26(s，1H)，8.57(d，J＝2.6Hz，1H)，8.45(d，J＝5.1Hz，1H)，8.24(s，1H)，8.03-7.97(m，1H)，6.28(s，2H)，4.51-4.44(s，1H)，3.86(s，3H)，3.31-3.23(m，1H)，2.40-2.33(m，1H)，2.21-2.05(m，3H)，1.98-1.86(m，3H)，1.67-1.29(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 444(M+1)。
实施例162 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-[5-乙基-5-(羟基甲基)-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺162
根据实施例111的操作，以(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体，中间体66)为起始原料，得到162，其为无色固体(25mg，12％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.76(s，1H)，8.24(s，1H)，7.32-7.30(m，1H)，7.04-6.97(m，2H)，6.15(s，2H)，5.72(s，1H)，4.07(d，J＝11.3Hz，2H)，3.91(d，J＝11.3Hz，2H)，3.85(s，3H)，3.44(d，J＝4.9Hz，2H)，1.81(q，J＝7.6Hz，1H)，1.27(t，J＝5.0Hz，2H)，0.83(t，J＝7.6Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 480(M+1)。
实施例163 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-[5-乙基-5-(羟基甲基)-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺163
根据实施例111的操作，以(5-乙基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体，中间体67)为起始原料，得到163，其为无色固体(42mg，10％，经2步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.78(s，1H)，8.24(s，1H)，7.36-7.28(m，1H)，7.07-6.97(m，2H)，6.18(s，2H)，5.73(s，1H)，4.19(d，J＝11.5Hz，2H)，3.93(d，J＝5.7Hz，2H)，3.84(s，3H)，3.66(d，J＝11.6Hz，2H)，1.73(t，J＝5.8Hz，1H)，1.28(q，J＝7.6Hz，2H)，0.92-0.83(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 480(M+1)。
实施例164 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-[5-(羟基甲基)-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺164
根据实施例111的操作，以(2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(反式异构体，中间体68)为起始原料，得到164，其为91/9比例的反式/顺式异构体，其为无色固体(79mg，19％，经2步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.73(s，1H)，7.99(s，1H)，7.54-7.46(m，3H)，7.32-7.22(m，2H)，5.89(s，1H)，4.67(t，J＝5.2Hz，1H)，4.21(dd，J＝11.2，4.6Hz，2H)，3.80-3.70(m，5H)，3.35-3.30(m，2H)，2.28-2.16(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例165 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-[5-(羟基甲基)-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺165
根据实施例111的操作，以(2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体，中间体69)为起始原料，得到164，其为86/14比例的48的顺式/反式异构体，其为无色固体(45mg，9％，经2步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.63(s，1H)，7.98(s，1H)，7.56-7.47(m，3H)，7.31-7.22(m，2H)，5.97(s，1H)，4.62(t，J＝5.1Hz，1H)，4.12(s，4H)，3.90-3.60(m，3H)，3.67(dd，J＝7.8，5.1Hz，2H)，1.57(t，J＝7.8Hz，1H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例166 5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-[5-[5-(羟基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺166
根据实施例111的操作，以(5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(顺式异构体，中间体71)为起始原料，得到166，其为无色固体(83mg，10％，经2步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.65(s，1H)，7.98(s，1H)，7.57-7.46(m，3H)，7.33-7.25(m，2H)，5.90(s，1H)，4.61(t，J＝5.2Hz，1H)，3.96(d，J＝11.2Hz，2H)，3.77(s，3H)，3.68(d，J＝11.2Hz，2H)，3.53(d，J＝5.2Hz，2H)，0.70(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 466(M+1)。
实施例167 5-氨基-N-[5-[5-(氨基甲基)-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺167
向(2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲醇(360mg，1.48mmol，中间体68)在无水THF(12mL)中的溶液中加入聚合物支载三苯基膦(约3mmol/g，1.5g，4.44mmol)和邻苯二甲酰胺(326mg，2.22mmol)，然后加入偶氮二甲酸二异丙酯(450mg，2.22mmol)。将该反应混合物在室温搅拌18小时，然后在35℃加热4小时。将该反应混合物过滤并将该滤液用DCM(50mL)稀释并用饱和NaHCO3水溶液(25mL)洗涤。将有机层用水(25mL)和盐水(25mL)洗涤，分离，用Na2SO4干燥并减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-100％EtOAc/异己烷)纯化，得到2-((2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)异二氢吲哚-1,3-二酮，其为无色固体(226mg)，其被偶氮二甲酸二异丙基酯副产物污染。向该固体(165mg，0.44mmol)在MeOH(150mL)和THF(20mL)中的混悬液中加入甲酸铵(300mg，mmol)和10％Pd/C(300mg)。将该混合物加热回流2小时。将该混合物快速热过滤并将滤饼用DCM(50mL)和EtOAC(50mL)洗涤。将该滤液减压浓缩并将该粗制残余物溶于IPA(5mL)，然后加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(134mg，0.46mmol)和DIPEA(0.31mL，1.76mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，0.33mL，0.48mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该混合物减压浓缩并用硅胶色谱(0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到油状物。将该油状物溶于EtOH(1mL)，加入肼(1mL)并将该混合物加热回流16小时。将该溶剂减压除去并将该残余物溶于MeOH并通过SCX柱，用0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM洗脱。经制备型HPLC纯化，得到167，其为无色固体(4mg，1％，经4步)。1H NMR(400MHz，CDCl)δ9.82(s，1H)，8.25(s，1H)，7.36-7.29(m，1H)，7.07-6.99(m，2H)，6.18(s，2H)，5.74(s，1H)，4.46(dd，J＝11.4，4.5Hz，2H)，3.88(s，3H)，3.67(t，J＝11.3Hz，2H)，2.64(d，J＝6.7Hz，2H)，2.41-2.32(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 451(M+1)。
实施例168 5-氨基-N-[5-[(2S,5R)-5-氨基-6,6-二氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺168
根据实施例111的操作，以N-[(4R,7S)-3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体72)为起始原料，得到168，其为盐酸盐，其为淡棕色固体(57mg，79％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.22(s，1H)，8.78-8.64(m，3H)，7.79(s，1H)，7.59-7.48(m，2H)，7.34-7.25(m，3H)，5.10-5.04(m，1H)，4.53-4.07(m，2H)，3.97-3.77(m，1H)，3.79(s，3H)，2.26-1.94(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例169 5-氨基-N-[5-[(2R,5S)-5-氨基-6,6-二氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺169
根据实施例111的操作，以N-[(4S,7R)-3,3-二氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体73)为起始原料，得到168，其为盐酸盐，为淡棕色固体(13mg，16％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.22(s，1H)，8.69(s，3H)，7.79(s，1H)，7.59-7.48(m，2H)，7.34-7.25(m，3H)，5.06(d，J＝10.9Hz，1H)，4.48-4.36(m，1H)，4.47-3.72(m，2H)，3.79(s，3H)，2.27-2.17(m，1H)，2.14-1.93(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例170 5-氨基-N-[5-[4-氨基-5-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺170
根据实施例111的操作，以N-(5-氟-2-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体29)为起始原料，得到170，其为粉色固体(8mg，100％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.71(s，1H)，7.96(s，1H)，7.57-7.49(m，3H)，7.31-7.22(m，2H)，5.22(t，J＝4.5Hz，1H)，4.46-4.28(m，1H)，3.97-3.90(m，1H)，3.75-3.60(m，4H)，3.06(q，J＝8.4Hz，1H)，2.16-1.99(m，5H)，1.85(d，J＝15.6Hz，1H)。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例171 5-氨基-N-[5-[(2R,5R)-5-(氨基甲基)四氢呋喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺171
用手性SFC纯化5-氨基-N-[5-[5-(氨基甲基)四氢呋喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺，实施例157)，得到171，其为灰白色固体(34mg)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.40(s，1H)，7.88(s，1H)，7.57-7.50(m，3H)，7.31-7.25(m，2H)，5.23-5.20(m，1H)，4.30-4.27(m，1H)，3.75(s，3H)，2.71-2.70(m，2H)，2.42-2.41(m，1H)，2.10-2.07(m，1H)，1.87-1.79(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例172 5-氨基-N-[5-[(2S,5S)-5-(氨基甲基)四氢呋喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺172
根据实施例171的操作，还得到172，其为灰白色固体(33mg)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.42(s，1H)，7.88(s，1H)，7.57-7.50(m，3H)，7.31-7.25(m，2H)，5.24-5.20(m，1H)，4.29-4.25(m，1H)，3.74(s，3H)，2.69-2.68(m，2H)，2.42-2.41(m，1H)，2.08-2.04(m，1H)，1.88-1.80(m，2H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例173 5-氨基-N-[5-[5-(氨基甲基)-5-乙基-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺173
向2-((2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)异二氢吲哚-1,3-二酮(317mg，0.793mmol，中间体75)在MeOH(10mL)和THF(10mL)中的溶液中加入甲酸铵(300mg，4.76mmol)和10％Pd/C(300mg，0.28mmol)并将该混合物加热回流2小时。将该混合物快速热过滤并将滤饼用DCM(50mL)和EtOAC(50mL)洗涤。将该溶剂减压除去并将该粗制残余物溶于EtOAc(10mL)，加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(170mg，0.66mmol)和N-甲基吗啉(0.4mL，1.89mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，0.32mL，0.695mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该溶剂减压除去并将该残余物经硅胶色谱(0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到无色固体。向该固体在EtOH(2mL)中的溶液中加入水合肼(64-65％溶液，2mL)，并将该混合物在70℃加热16小时。减压浓缩后，将MeOH加至该残余物中，并将固体过滤掉。将该滤液减压浓缩。经K-NH柱(0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，然后用制备型HPLC纯化，得到173，其为无色固体(18mg，17％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.78(s，1H)，8.26(s，1H)，7.36-7.29(m，1H)，7.06-6.99(m，2H)，6.18(s，2H)，5.73(s，1H)，4.11(d，J＝11.2Hz，2H)，3.87(s，3H)，3.78(d，J＝11.2Hz，2H)，2.53(s，2H)，1.83(q，J＝7.6Hz，2H)，0.84(t，J＝7.6Hz，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例174 5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺174
根据实施例111的操作，以N-[(3S,4R,7S)-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体78)为起始原料，得到170，其为淡棕色固体(32mg，79％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.22(s，1H)，8.34(s，1H)，7.77(s，1H)，7.58-7.49(m，2H)，7.33-7.24(m，2H)，4.82-4.77(m，1H)，4.08(dd，J＝13.9，3.1Hz，1H)，3.86(dd，J＝13.9，3.7Hz，1H)，3.76(s，3H)，3.20-3.15(m，1H)，3.12-3.04(m，1H)，2.09-2.01(m，1H)，1.85-1.66(m，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 482(M+1)。
实施例175 5-氨基-N-[5-[5-(氨基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺175
将2,2,2-三氟-N-((5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)乙酰胺(171mg，0.49mmol，中间体84)溶于MeOH(30mL)，并加入甲酸铵(170mg，2.69mmol)和10％Pd/C(140mg，0.13mmol)。将该混合物加热回流18小时，然后将其冷却至室温。将该混悬液过滤，并将滤饼用EtOAc(100mL)洗涤，并将滤液减压浓缩。将该粗制残余物溶于EtOAc(10mL)中，然后加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(131mg，0.51mmol)，然后加入N-甲基吗啉(0.11mL，1.46mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，338mg，0.53mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩并经硅胶色谱(0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-甲基-5-(5-甲基-5-((2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基)-1,3-二噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺，其为白色固体(102mg，18％，经3步)。将5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-甲基-5-(5-甲基-5-((2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基)-1,3-二噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺(101mg，0.18mmol)在MeOH(6mL)和饱和K2CO3水溶液(0.6mL)中的混合物在100℃微波中加热1小时。将该反应混合物冷却至室温，减压浓缩并用硅胶色谱(0-20％MeOH/DCM)纯化，得到175，其为白色固体(4mg，5％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.80(s，1H)，8.24(s，1H)，7.34-7.27(m，1H)，7.05-6.97(m，2H)，6.15(s，2H)，5.70(s，1H)，3.98-3.91(m，2H)，3.86(s，3H)，3.80(d，J＝11.0Hz，2H)，2.54(s，2H)，1.26(s，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 465(M+1)。
实施例176 5-氨基-N-[5-[(2R,5S,6R)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺176
根据实施例111的操作，以N-[(3S,4R,7S)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体81)为起始原料，得到176，其为米色固体(17mg，11％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.29(s，1H)，7.80(s，1H)，7.56-7.46(m，3H)，7.29-7.19(m，2H)，4.78(dd，J＝10.90，3.48Hz，1H)，4.44-4.26(m，1H)，4.21-3.91(m，2H)，3.76(s，3H)，3.40-3.15(m，1H)，2.08-2.00(m，1H)，1.88-1.60(m，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例177 5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺177
根据实施例111的操作，以N-[(3R,4S,7R)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，得到177，其为米色固体(37mg，19％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.29(s，1H)，7.80(s，1H)，7.56-7.46(m，3H)，7.29-7.19(m，2H)，4.78(dd，J＝10.87，3.53Hz，1H)，4.44-4.26(m，1H)，4.20-3.89(m，2H)，3.77(s，3H)，3.40-3.15(m，1H)，2.10-1.60(m，6H)。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例178 5-氨基-N-[5-[5-(氨基甲基)-5-甲基-1,3-二噁烷-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺178
向2,2,2-三氟-N-((5-甲基-2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)-1,3-二噁烷-5-基)甲基)乙酰胺(410mg，1.16mmol，中间体83)在MeOH(20mL)中的溶液中加入甲酸铵(400mg，6.34mmol)和10％Pd/C(400mg)。将该混合物加热回流5小时，然后冷却至室温。将该混悬液过滤并将该滤液减压浓缩。将该残余物溶于IPA(10mL)中，然后加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(312mg，1.22mmol)和DIPEA(0.62mL，3.47mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，0.61mL，1.28mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。加入饱和NaHCO3水溶液(10mL)和DCM(20mL)。将该有机层用1N HCl(10mL)洗涤，分离，用MgSO4干燥并减压浓缩。经硅胶色谱(0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)-N-(1-甲基-5-(5-甲基-5-((2,2,2-三氟乙酰胺基)甲基)-1,3-二噁烷-2-基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺，其为油状物。向该油状物在IPA(2mL)、THF(2mL)和水(1mL)中的溶液中加入K2CO3(31mg，0.22mmol)并将该混合物在50℃加热18小时。加入更多的K2CO3(300mg，2.2mmol)并将该混合物在120℃微波中加热2.5小时。将该反应混合物冷却至室温，过滤，用EtOAc(20mL)洗涤并将该滤液减压浓缩。将该残余物通过SCX柱，用0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM洗脱，和用制备型HPLC纯化，得到178，其为无色固体(1mg，0.2％，经3步)。1H NMR(400MHz，d4-MeOD)δ8.45(s，2H)，8.01(s，1H)，7.39-7.32(m，1H)，7.06(t，J＝8.8Hz，2H)，5.82(s，1H)，3.98(d，J＝11.6Hz，2H)，3.74-3.65(m，5H)，2.86(s，2H)，0.69(s，3H)。LCMS(ES+)m/z465(M+1)。
实施例179 5-氨基-N-[5-[5-氨基-4,4-二氟-5,6-二甲基-四氢吡喃-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺179
将5-(5-叠氮基-4,4-二氟-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(152mg，0.481mmol，中间体87)在THF/水(5mL/0.5mL)中的溶液用三苯基膦(190mg，0.72mmol)处理并将该混合物在防冲击屏后以65℃加热18小时。将该混合物减压浓缩，得到无色油状物(74mg)。将该油状物(74mg，0.255mmol)在MeOH(20mL)中的溶液通过(全H2，85℃，流速：1mL/min，30mm RaNi筒)。将该溶剂减压除去并将该残余物溶于EtOAc(1mL)中。加入5-氨基-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(69mg，0.268mmol)和N-甲基吗啉(0.08mL，0.765mmol)。滴加丙基膦酸环酐溶液(50重量％的EtOAc溶液，0.1mL，0.281mmol)并将该反应混合物在室温搅拌16小时。将该反应混合物减压浓缩并用硅胶色谱(0-5％7N NH3的MeOH溶液/DCM)纯化，得到179，其为无色固体(33mg，13％，经3步)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.13(s，1H)，8.00(s，1H)，7.40-7.31(m，1H)，7.06-6.96(m，2H)，6.16(s，2H)，4.87(dd，J＝12.1，2.7Hz，1H)，3.84(s，3H)，3.77-3.71(m，1H)，2.68-2.50(m，1H)，2.18-2.08(m，1H)，1.34(s，2H)，1.22(d，J＝6.4Hz，3H)，1.08(d，J＝1.8Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 499(M+1)。
实施例180 5-氨基-N-[5-[(2R,5S,6R)-5-氨基-6-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺180
根据实施例111的操作，以N-[(3R,4S)-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)-3-(三氘代甲氧基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体77)为起始原料，得到180，其为固体(15mg，22％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.24(s，1H)，7.77(s，1H)，7.57-7.48(m，3H)，7.31-7.23(m，2H)，4.79(dd，J＝10.8，3.6Hz，1H)，4.02(dd，J＝13.8，3.0Hz，1H)，3.80(dd，J＝13.8，3.1Hz，1H)，3.75(s，3H)，3.01-2.93(m，2H)，2.00(s，1H)，1.83-1.54(m，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 482(M+1)。
实施例181 5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺181
根据实施例111的操作，以N-[(3S,4R,7S)-3-氟-7-(2-甲基-4-硝基-吡唑-3-基)氧杂环庚-4-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(实施例25)，得到181，其为盐酸盐，为淡粉色固体(30mg，38％，经3步)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.42(s，1H)，8.54-8.41(m，4H)，7.96-7.89(m，1H)，7.67(s，1H)，7.50-7.39(m，3H)，5.28(m，1H)，4.84(d，J＝10.4Hz，1H)，4.33-4.17(m，1H)，4.11-3.99(m，1H)，3.78(s，3H)，3.74-3.52(m，1H)，2.16-1.81(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例182 5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(3-氟-4-吡啶基)噻唑-4-甲酰胺182
将N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(100mg，0.16mmol，中间体88)、3-氟-4-三-正-丁基甲锡烷基吡啶(93mg，0.24mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(9.3mg，0.008mmol)、碘化亚铜(I)(9mg，0.047mmol)和氯化锂(21mg，0.48mmol)在二噁烷(1.5mL)中的混合物通过鼓入氮气脱气，持续5min。将该混合物在135℃微波照射下加热45min。冷却至室温后，加入更多的3-氟-4-三-正-丁基甲锡烷基吡啶(93mg，0.24mmol)、四(三苯基膦)钯(0)(9.3mg，0.008mmol)、碘化亚铜(I)(9mg，0.047mmol)和氯化锂(21mg，0.48mmol)并将该混合物通过鼓入氮气脱气5min。将该混合物在135℃加热45min，冷却至室温，用硅藻土过滤并将该滤液减压浓缩。经硅胶柱色谱(0-80％EtOAc/异己烷)纯化，得到N-[4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]-2-(3-氟-4-吡啶基)噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯，其为淡棕色固体。将该固体在HCl(4.0M的二噁烷溶液，3mL)和MeOH(0.5mL)溶液中室温搅拌18小时。将该溶剂减压除去。经制备型HPLC纯化，得到182，其为甲酸盐，为淡粉色固体(26mg，33％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.27(s，1H)，8.43(d，J＝2.8Hz，1H)，8.28-8.23(m，1H)，8.00(s，1H)，7.78-7.72(m，1H)，7.47(s，1H)，7.42(br s，2H)，4.78-4.58(m，2H)，3.99-3.85(m，1H)，3.79-3.67(m，1H)，3.49(s，3H)，3.17-3.02(m，1H)，1.90-1.80(m，1H)，1.67-1.51(m，2H)，1.41(d，J＝13.1Hz，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 450(M+1)。
实施例183 5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺183
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-甲氧基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体93)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(实施例7)，得到183，其为盐酸盐，为深橙红色固体(68mg，45％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.47(s，1H)，8.18-8.09(m，5H)，7.74(s，1H)，7.52-7.36(m，4H)，4.96(dd，J＝9.9，2.8Hz，1H)，4.19(dd，J＝13.6，5.0Hz，1H)，4.00(dd，J＝13.6，5.3Hz，1H)，3.86(d，J＝4.5Hz，1H)，3.78(s，3H)，3.62-3.49(m，1H)，3.33(s，3H)，2.14-1.97(m，2H)，1.98-1.74(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 461(M+1)。
实施例184 5-氨基-N-(5-((2R,5S,6R)-5-氨基-4,4-二氟-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺184
将5-氨基-N-(5-(5-氨基-4,4-二氟-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺(实施例179)用手性制备型HPLC进一步纯化，得到184，其为第一个被洗脱出来的对映异构体，其为无色固体(15mg，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.13(s，1H)，8.00(s，1H)，7.35(d，J＝7.81Hz，1H)，7.04-6.97(m，2H)，6.15(s，2H)，4.87(dd，J＝12.1，2.7Hz，1H)，3.84(s，3H)，3.76-3.69(m，1H)，2.66-2.52(m，1H)，2.18-2.08(m，1H)，1.22(d，J＝6.4Hz，3H)，1.08(d，J＝1.8Hz，3H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 499(M+1)。
实施例185 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-4,4-二氟-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺185
根据实施例184的操作，还得到185，其为第二个被洗脱出来的对映异构体，其为无色固体(15mg，50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ9.13(s，1H)，8.00(s，1H)，7.41-7.31(m，1H)，7.05-6.95(m，2H)，6.16(s，2H)，4.87(dd，J＝12.1，2.6Hz，1H)，3.84(s，3H)，3.77-3.71(m，1H)，2.69-2.51(m，1H)，2.18-2.08(m，1H)，1.34(s，2H)，1.23(t，J＝8.2Hz，3H)，1.08(d，J＝1.8Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 499(M+1)。
实施例186 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺186
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(实施例7)，得到186，其为盐酸盐，其为白色固体(38mg，71％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ9.47(s，1H)，8.60-8.40(m，3H)，8.19-8.13(m，1H)，7.71(s，1H)，7.49-7.35(m，3H)，5.40-5.23(m，1H)，4.87(d，J＝10.5Hz，1H)，4.28(ddd，J＝32.0，14.5，4.7Hz，1H)，4.07(ddd，J＝23.4，14.5，2.8Hz，1H)，3.80(s，3H)，3.78-3.60(m，1H)，2.19-1.82(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。未观测到烷基NH2。
实施例187 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺187
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见WO2010/56576)，得到187，其为白色固体(22mg，26％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.40(s，1H)，8.31(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.21(s，1H)，7.71-7.63(m，1H)，6.64(d，J＝10.1Hz，2H)，4.84-4.73(m，2H)，4.07-3.89(m，3H)，3.87(s，3H)，3.77(s，3H)，3.41(dd，J＝23.1，9.5Hz，1H)，2.67(br s，1H)，2.15-2.08(m，1H)，2.08-1.94(m，1H)，1.95-1.84(m，1H)，1.85-1.73(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 494(M+1)。
实施例188 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺188
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到188，其为白色固体(12mg，27％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.24(s，1H)，8.25(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，8.17-8.09(m，1H)，7.85(s，1H)，7.40-7.00(br s，2H)，7.20(d，J＝11.6Hz，2H)，5.30(d，J＝48Hz，1H)，4.92-4.86(m，2H)，4.11-4.00(m，2H)，3.92-3.84(m，2H)，3.75(s，3H)，3.62-3.50(m，3H)，2.07(m，4H)，1.95-1.70(m，2H)，1.68-1.55(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 564(M+1)。
实施例189 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺189
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到189，其为白色固体(19mg，50％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.45(s，1H)，8.26(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，8.19-8.09(m，1H)，7.95(s，1H)，7.03(d，J＝10.5Hz，2H)，4.95(dd，J＝8.3，3.6Hz，1H)，4.69(s，1H)，4.57(s，1H)，4.24(t，J＝4.2Hz，2H)，3.98-3.78(m，2H)，3.73(s，3H)，3.70(t，J＝4.2Hz，2H)，3.30(s，3H)，3.15(m，1H)，2.20-2.11(m，1H)，1.89-1.72(m，2H)，1.72-1.62(m，1H)，1.59-1.50(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例190 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-羟基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺190
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(4-(2-((叔丁基二甲基硅基)氧基)乙氧基)-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到190，其为白色固体(29mg，62％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.59(s，1H)，8.40(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，8.27(dd，J＝8.6，8.6Hz，1H)，8.10(s，1H)，7.15(d，J＝10.5Hz，2H)，5.09(dd，J＝8.4，3.6Hz，1H)，4.86-4.83(d，J＝48Hz，1H)，4.28(t，J＝4.8Hz，2H)，4.12-3.92(m，2H)，3.92-3.86(m，5H)，3.70-3.38(br s，1H)，3.36-3.24(m，1H)，2.33-2.25(m，1H)，2.02-1.87(m，1H)，1.87-1.75(m，1H)，1.75-1.63(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 524(M+1)。
实施例191 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺191
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-羟基-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体94)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到191，其为白色固体(73mg，71％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ10.22(s，1H)，8.25(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.12(t，J＝8.9Hz，1H)，7.82(s，1H)，6.97(d，J＝10.2Hz，2H)，4.79(dd，J＝10.8，3.4Hz，2H)，4.26-4.20(m，2H)，3.90-3.67(m，4H)，3.73-3.67(m，2H)，3.63(dd，J＝12.8，5.8Hz，1H)，3.62-3.02(m，3H)，2.73-2.64(m，1H)，2.00-1.92(m，1H)，1.92-1.79(m，1H)，1.79-1.72(m，1H)，1.55-1.42(m，1H)。未观测到烷基NH2。LCMS(ES+)m/z 536(M+1)。
实施例192 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺192
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到192。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.26(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.11(t，J＝8.9Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.01–6.91(m，2H)，4.82(dd，J＝10.3，3.8Hz，1H)，4.32–4.12(m，3H)，4.05–3.85(m，2H)，3.75(s，3H)，3.74–3.65(m，2H)，3.32(s，3H)，3.06(dd，J＝16.5，7.8Hz，1H)，2.10–2.02(m，1H)，1.82–1.57(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例193 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺193
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到193。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.30(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.23–8.12(m，1H)，7.90(s，1H)，7.49(d，J＝9.7Hz，2H)，4.81(t，J＝5.7Hz，3H)，4.73(dd，J＝7.0，1.4Hz，2H)，4.41–4.17(m，1H)，4.10–3.87(m，2H)，3.76(s，3H)，3.19–3.09(m，1H)，2.11–2.02(m，1H)，1.69(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 536(M+1)。
实施例194 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺194
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到194。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.22(s，1H)，8.32(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.18(t，J＝8.9Hz，1H)，7.93(s，1H)，7.54(d，J＝8.8Hz，2H)，5.02(s，2H)，4.97(s，2H)，4.82(dd，J＝10.3，3.7Hz，1H)，4.31–4.05(m，1H)，4.07–3.84(m，2H)，3.75(s，3H)，3.09–2.95(m，1H)，2.10–1.99(m，1H)，1.80–1.57(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例195 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺195
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225061)，得到195。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.30(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.15(t，J＝8.9Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.72–7.59(m，1H)，7.30(t，J＝8.4Hz，2H)，4.86–4.78(m，1H)，4.31–4.05(m，1H)，4.02–3.83(m，2H)，3.75(s，3H)，3.11–2.97(m，1H)，2.11–2.00(m，1H)，1.82–1.50(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例196 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺196
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(4-羟基四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到196。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.19(s，1H)，8.29(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.23–8.10(m，1H)，7.88(s，1H)，7.49–7.35(m，2H)，4.85–4.76(m，1H)，4.39–4.11(m，1H)，4.07–3.68(m，9H)，3.17–3.03(m，1H)，2.11–1.99(m，3H)，1.84–1.51(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 564(M+1)。
实施例197 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺197
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-((四氢-2H-吡喃-4-基)氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到197。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.19(s，1H)，8.25(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.11(t，J＝8.9Hz，1H)，7.91(s，1H)，6.99(d，J＝10.2Hz，2H)，4.82(dd，J＝10.4，3.7Hz，1H)，4.77–4.66(m，1H)，4.21(ddd，J＝49.1，7.8，2.9Hz，1H)，4.10–3.90(m，2H)，3.90–3.80(m，2H)，3.75(s，3H)，3.51(ddd，J＝12.0，9.4，2.8Hz，2H)，3.14–3.01(m，1H)，2.10–1.97(m，3H)，1.85–1.55(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 564(M+1)。
实施例198 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺198
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到198。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.19(s，1H)，8.29(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.14(t，J＝8.8Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.35(d，J＝9.5Hz，2H)，5.89(br，1H)，4.80(dd，J＝10.5，3.7Hz，1H)，4.32–4.07(m，1H)，4.07–3.84(m，2H)，3.75(s，3H)，3.11–3.00(m，1H)，2.50–2.39(m，2H)，2.38–2.26(m，2H)，2.09–1.88(m，2H)，1.84–1.68(m，2H)，1.67–1.57(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 534(M+1)。
实施例199 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(甲氧基甲基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺199
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(甲氧基甲基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到199。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.29(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.15(t，J＝8.8Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.24(d，J＝9.0Hz，2H)，4.81(dd，J＝10.3，3.7Hz，1H)，4.53(s，2H)，4.31–4.07(m，1H)，4.02–3.83(m，2H)，3.75(s，3H)，3.36(s，3H)，3.11–2.98(m，1H)，2.10–2.00(m，1H)，1.82–1.57(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 508(M+1)。
实施例200 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺200
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到200。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.28(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.14(t，J＝8.9Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.34(d，J＝9.8Hz，2H)，5.36(br，1H)，4.80(dd，J＝10.4，3.7Hz，1H)，4.37–4.06(m，1H)，4.02–3.87(m，2H)，3.75(s，3H)，3.13–3.00(m，1H)，2.10–1.99(m，1H)，1.85–1.57(m，3H)，1.47(s，6H)。LCMS(ES+)m/z 522(M+1)。
实施例201 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺201
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到201。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.26(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.11(t，J＝8.9Hz，1H)，7.90(s，1H)，6.94(d，J＝10.2Hz，2H)，4.82(dd，J＝10.4，3.7Hz，1H)，4.40–4.14(m，1H)，4.08–3.91(m，2H)，3.86(s，3H)，3.76(s，3H)，3.18–3.04(m，1H)，2.12–2.02(m，1H)，1.83–1.60(m，3H)。LCMS(ES+)m/z494(M+1)。
实施例202 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(3-甲氧基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺202
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(3-甲氧基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到202。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.24(s，1H)，8.32(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.17(t，J＝8.9Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.42(d，J＝9.3Hz，2H)，4.87–4.75(m，5H)，4.17(ddt，J＝49.0，6.1，2.6Hz，1H)，4.03–3.84(m，2H)，3.75(s，3H)，3.14(s，3H)，3.12–2.98(m，1H)，2.11–2.00(m，1H)，1.80–1.57(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 550(M+1)。
实施例203 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(3-甲氧基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺203
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(3-甲氧基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见WO2012/225062)，得到203。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.43(s，1H)，8.31(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.19(t，J＝8.9Hz，1H)，7.95(s，1H)，7.49(d，J＝9.3Hz，2H)，4.96(dd，J＝8.1，4.0Hz，1H)，4.81(d，J＝1.7Hz，4H)，4.65–4.37(m，1H)，3.97–3.73(m，2H)，3.72(s，3H)，3.41–3.25(m，2H)，3.15(s，3H)，3.12–2.99(m，1H)，2.22–2.12(m，1H)，1.81–1.71(m，1H)，1.70–1.60(m，1H)，1.57–1.52(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 550(M+1)。
实施例204 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺204
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到204。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.17(s，1H)，8.27(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.13(t，J＝8.9Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.09(d，J＝9.8Hz，2H)，6.26(s，1H)，4.81(dd，J＝10.5，3.7Hz，1H)，4.34–4.09(m，1H)，4.07–3.84(m，2H)，3.75(s，3H)，3.12–2.99(m，1H)，2.11–1.99(m，1H)，1.83–1.53(m，5H)，1.27–1.08(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 520(M+1)。
实施例205 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-丙酰基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺205
标题化合物205可在形成实施例204的过程中以第二产物进行制备并且在最终的HPLC纯化过程中进行分离。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.23(s，1H)，8.34(dd，J＝8.7，4.1Hz，1H)，8.20(t，J＝8.9Hz，1H)，7.93(s，1H)，7.84(d，J＝8.6Hz，2H)，4.81(ddd，J＝10.8，6.7，3.7Hz，1H)，4.31–4.05(m，1H)，4.05–3.82(m，2H)，3.76(s，3H)，3.13(q，J＝7.1Hz，2H)，3.07–2.97(m，1H)，2.10–2.01(m，1H)，1.79–1.56(m，3H)，1.54(br，2H)，1.12(t，J＝7.1Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 520(M+1)。
实施例206 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺206
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(4-氟四氢-2H-吡喃-4-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到206。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.22(s，1H)，8.30(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.17(t，J＝8.9Hz，1H)，7.92(s，1H)，7.41(d，J＝9.2Hz，2H)，4.81(dd，J＝10.3，3.8Hz，1H)，4.17(ddd，J＝49.1，5.9，3.1Hz，1H)，4.02–3.96(m，1H)，3.96–3.84(m，3H)，3.75(s，3H)，3.74–3.64(m，2H)，3.09–2.99(m，1H)，2.33–2.13(m，2H)，2.10–1.99(m，1H)，1.93–1.80(m，2H)，1.80–1.52(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 566(M+1)。
实施例207 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺207
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体136)，得到207。以非对映异构体混合物分离出该产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.19(s，1H)，8.28(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.14(t，J＝8.9Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.24(d，J＝8.9Hz，2H)，5.51(br，1H)，4.87–4.76(m，2H)，4.36–4.08(m，1H)，4.03–3.84(m，2H)，3.75(s，3H)，3.10–3.00(m，1H)，2.10–2.00(m，1H)，1.85–1.68(m，1H)，1.67–1.57(m，2H)，1.37(d，J＝6.4Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 508(M+1)。
实施例208 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-羟基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺208
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-羟基苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体137)，得到208。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.18(s，1H)，8.23(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.08(t，J＝8.8Hz，1H)，7.91(s，1H)，6.62(d，J＝10.1Hz，2H)，4.81(dd，J＝10.4，3.6Hz，1H)，4.39–4.14(m，1H)，4.10–3.87(m，2H)，3.75(s，3H)，3.16–3.03(m，1H)，2.10–1.99(m，1H)，1.82–1.56(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 480(M+1)。
实施例209 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-羟基乙氧基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺209
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(4-(2-((叔丁基二甲基硅基)氧基)乙氧基)-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到209。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.20(s，1H)，8.26(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.11(t，J＝8.9Hz，1H)，7.92(s，1H)，6.93(d，J＝10.2Hz，2H)，4.98(br，1H)，4.82(dd，J＝10.3，3.7Hz，1H)，4.24(ddt，J＝49.2，6.1，2.6Hz，1H)，4.11(t，J＝4.8Hz，2H)，4.07–3.84(m，2H)，3.80-3.69(m，5H)，3.15–3.01(m，1H)，2.12–2.01(m，1H)，1.83–1.58(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 524(M+1)。
实施例210 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺210
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体136)，得到210。以非对映异构体混合物分离出该产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.45(s，1H)，8.34–8.24(m，1H)，8.16(t，J＝8.9Hz，1H)，7.91(s，1H)，7.38–7.28(m，2H)，4.94–4.79(m，2H)，4.76–4.49(m，1H)，4.02–3.77(m，2H)，3.73(s，3H)，3.20–3.04(m，1H)，2.16–2.04(m，1H)，1.91–1.77(m，1H)，1.74–1.55(m，2H)，1.39(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 508(M+1)。
实施例211 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1-甲氧基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺211
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(1-甲氧基乙基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体138)，得到211。以非对映异构体混合物分离出该产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.43(s，1H)，8.29(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.17(t，J＝8.9Hz，1H)，7.94(s，1H)，7.35–7.26(m，2H)，4.95(dd，J＝8.3，3.9Hz，1H)，4.67–4.38(m，2H)，3.99–3.75(m，2H)，3.72(s，3H)，3.23(s，3H)，3.17–3.04(m，1H)，2.21–2.10(m，1H)，1.82–1.74(m，1H)，1.71–1.60(m，1H)，1.62–1.50(m，1H)，1.39(d，J＝6.4Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 522(M+1)。
实施例212 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1,2,3-三羟基丙-2-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺212
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到212。在酸的脱保护过程中发生环氧丙烷水解。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.54(s，1H)，8.26(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，8.16(t，J＝8.8Hz，1H)，7.92(s，1H)，7.44–7.36(m，2H)，4.84(d，J＝9.5Hz，1H)，4.76–4.50(m，1H)，3.88(d，J＝4.5Hz，1H)，3.82(d，J＝4.4Hz，1H)，3.72(s，3H)，3.67(d，J＝11.7Hz，1H)，3.57(dd，J＝11.1，5.4Hz，2H)，2.96(dd，J＝26.7，10.0Hz，1H)，2.04–1.95(m，1H)，1.90–1.82(m，1H)，1.73–1.62(m，1H)，1.61–1.53(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 554(M+1)。
实施例213 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(4-(环丙基(甲氧基)甲基)-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺213
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(4-(环丙基(甲氧基)甲基)-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体141)，得到213。以非对映异构体混合物分离出该产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.22(d，J＝4.5Hz，1H)，8.30(dd，J＝8.6，4.0Hz，1H)，8.15(t，J＝8.8Hz，1H)，7.91(d，J＝1.3Hz，1H)，7.26(d，J＝9.2Hz，2H)，4.82(ddd，J＝10.3，3.9，1.5Hz，1H)，4.30–4.04(m，1H)，4.06–3.83(m，2H)，3.75(s，3H)，3.71(d，J＝8.0Hz，1H)，3.24(s，3H)，3.14–3.00(m，1H)，2.04(s，1H)，1.81–1.56(m，5H)，1.16–1.02(m，1H)，0.66–0.33(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 548(M+1)。
实施例214 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(4-(1,3-二羟基丙-2-基)-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺214
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(氧杂环丁烷-3-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225062)，得到214。在酸的脱保护过程中发生环氧丙烷水解。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.11(s，1H)，8.28(dd，J＝8.7，4.0Hz，1H)，8.14(t，J＝8.8Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.20(d，J＝9.7Hz，2H)，4.90–4.76(m，1H)，4.77–4.54(m，1H)，4.23–3.94(m，2H)，3.80(s，3H)，3.77–3.61(m，4H)，3.55–3.38(m，1H)，3.01–2.92(m，1H)，2.20–2.03(m，1H)，2.00–1.70(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例215 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(3-羟基四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺215
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-(3-羟基四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体144)，得到215。以非对映异构体混合物分离出该产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.85(s，1H)，8.62(s，1H)，7.81(s，1H)，7.43(d，J＝10.3Hz，2H)，5.81(s，1H)，4.81(dd，J＝10.8，3.7Hz，1H)，4.44–4.24(m，1H)，4.24–4.08(m，1H)，4.09–3.90(m，3H)，3.79(d，J＝8.1Hz，5H)，3.34–3.16(m，2H)，2.54–2.49(m，1H)，2.39–2.27(m，1H)，2.21–2.01(m，2H)，1.88–1.76(m，1H)，1.72–1.62(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例216 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺216
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-(四氢呋喃-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体145)，得到216。以非对映异构体混合物分离出该产物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.85(s，1H)，8.61(s，1H)，7.80(s，1H)，7.27(d，J＝10.0Hz，2H)，4.81(dd，J＝10.8，3.7Hz，1H)，4.46–4.22(m，1H)，4.24–4.09(m，1H)，4.08–3.89(m，3H)，3.86–3.75(m，4H)，3.63(dd，J＝8.4，6.9Hz，1H)，3.58–3.45(m，1H)，3.34–3.16(m，3H)，2.42–2.29(m，1H)，2.11–1.91(m，2H)，1.87–1.79(m，1H)，1.72–1.62(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 522(M+1)。
实施例217 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(((R)-四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)噻唑-4-甲酰胺217
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成(R)-2-(2,6-二氟-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体147)，得到217。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.84(s，1H)，8.56(s，1H)，7.80(s，1H)，7.44(s，3H)，7.06–6.95(m，2H)，5.18(td，J＝4.6，2.4Hz，1H)，4.95–4.59(m，2H)，4.37–4.04(m，2H)，3.95–3.72(m，8H)，3.55(dt，J＝17.6，8.8Hz，1H)，2.38–2.24(m，1H)，2.13(d，J＝11.6Hz，1H)，2.06–1.80(m，5H)。LCMS(ES+)m/z538(M+1)。
实施例218 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(((S)-四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)噻唑-4-甲酰胺218
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成(S)-2-(2,6-二氟-4-((四氢呋喃-3-基)氧基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体148)，得到218。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.86(s，1H)，8.55(s，1H)，7.80(s，1H)，7.02–6.92(m，2H)，5.19(dd，J＝6.2，4.2Hz，1H)，4.80(dd，J＝10.8，3.6Hz，1H)，4.46–4.07(m，2H)，4.08–3.72(m，8H)，3.30–3.14(m，1H)，2.36–2.22(m，1H)，2.02(ddd，J＝19.6，14.6，9.1Hz，2H)，1.81(ddd，J＝14.3，10.2，4.9Hz，1H)，1.68(s，4H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例219 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺219
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3-二氟苯基)硼酸，得到219。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.60(s，1H)，7.90–7.82(m，2H)，7.56–7.42(m，3H)，7.38–7.30(m，1H)，5.07(t，J＝5.7Hz，1H)，3.98–3.90(m，1H)，3.88–3.80(m，1H)，3.71(s，3H)，3.50–3.45(m，1H)，3.14(d，J＝1.5Hz，3H)，2.36–2.31(m，2H)，1.76–1.71(m，1H)，1.63–1.58(m，4H)，1.50–1.45(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例220 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺220
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到220。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.39(s，1H)，7.93–7.86(m，2H)，7.81–7.63(m，3H)，7.44(s，2H)，5.04(t，J＝5.1Hz，1H)，3.73–3.57(m，5H)，3.29–3.15(m，2H)，2.74(s，3H)，2.48–2.35(m，1H)，1.65–1.47(m，3H)，1.41(br，2H)。LCMS(ES+)m/z 511(M+1)。
实施例221 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺221
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体101)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,6-二氟苯基)硼酸，得到221。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.11(s，1H)，8.65(s，1H)，7.92(s，1H)，7.74–7.62(m，1H)，7.38(t，J＝8.8Hz，2H)，5.08(t，J＝5.7Hz，1H)，3.93–3.75(m，2H)，3.72(s，3H)，3.52–3.44(m，1H)，3.03(s，3H)，2.44–2.32(m，1H)，1.81–1.53(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例222 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,5-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺222
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(6-溴-5-氟吡啶-2-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体103)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,5-二氟苯基)硼酸，得到222。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.17(s，1H)，8.21(dd，J＝8.6，3.7Hz，1H)，8.09(dd，J＝11.0，8.6Hz，1H)，7.85–7.75(m，3H)，7.43(tt，J＝9.2，2.4Hz，1H)，4.83(dd，J＝10.3，3.8Hz，1H)，4.46–4.21(m，1H)，4.20–3.89(m，2H)，3.80(s，3H)，3.18–3.04(m，1H)，2.16–2.04(m，1H)，1.94–1.79(m，1H)，1.75–1.55(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例223 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,3-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺223
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(6-溴-5-氟吡啶-2-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体103)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3-二氟苯基)硼酸，得到223。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.17(s，1H)，8.27(dd，J＝8.7，3.9Hz，1H)，8.12(t，J＝9.1Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.69–7.52(m，2H)，7.47–7.37(m，1H)，4.84(dd，J＝10.3，3.7Hz，1H)，4.39–4.16(m，1H)，4.12–3.86(m，2H)，3.76(s，3H)，3.15–3.02(m，1H)，2.12–2.01(m，1H)，1.84–1.70(m，1H)，1.70–1.56(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例224 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(3-羟基氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺224
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成3-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)氧杂环丁-3-醇(参见US2012/225062)，得到224。LCMS(ES+)m/z 524(M+1)。
实施例225 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丙基)苯基)噻唑-4-甲酰胺225
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成1-(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)环丙醇(参见US2012/225062)，得到225。LCMS(ES+)m/z 508(M+1)。
实施例226 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-5-氟-6-(2-氟-4-甲氧基苯基)吡啶-2-甲酰胺226
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(6-溴-5-氟吡啶-2-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体103)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-4-甲氧基苯基)硼酸，得到226。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.12(s，1H)，8.18(dd，J＝8.6，3.8Hz，1H)，8.03(dd，J＝9.6，8.6Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.69(t，J＝8.8Hz，1H)，7.04–6.95(m，2H)，4.83(dd，J＝10.5，3.7Hz，1H)，4.32(ddt，J＝48.7，6.0，2.6Hz，1H)，4.16–3.89(m，2H)，3.86(s，3H)，3.77(s，3H)，3.20–3.06(m，1H)，2.13–2.01(m，1H)，1.88–1.74(m，1H)，1.73–1.56(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 476(M+1)。
实施例227 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2-氯-3-氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺227
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(6-溴-5-氟吡啶-2-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体103)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-3-氟苯基)硼酸，得到227。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.18(s，1H)，8.28(dd，J＝8.6，3.9Hz，1H)，8.12(t，J＝8.9Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.64–7.45(m，3H)，4.81(dd，J＝10.3，3.8Hz，1H)，4.20(ddt，J＝49.1，5.7，2.7Hz，1H)，4.05–3.80(m，2H)，3.75(s，3H)，3.09–2.95(m，1H)，2.10–1.99(m，1H)，1.82–1.64(m，1H)，1.66–1.56(m，2H)，1.53(br，2H)。LCMS(ES+)m/z 480(M+1)。
实施例228 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-(2-羟基-2-甲基丙基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺228
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成2-甲基-1-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑-1-基)丙-2-醇(参见US2011/76291)，得到228。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.32(s，1H)，8.22(s，1H)，8.04(s，1H)，7.88(s，1H)，4.88(dd，J＝10.0，3.9Hz，1H)，4.69–4.42(m，1H)，4.39–4.24(m，1H)，4.17–3.95(m，4H)，3.77(s，3H)，2.15–2.05(m，1H)，1.89–1.68(m，3H)，1.10(d，J＝4.4Hz，6H)。LCMS(ES+)m/z 478(M+1)。
实施例229 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺229
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)硼酸，得到229。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.63(s，1H)，7.78(s，1H)，7.40(td，J＝9.3，5.1Hz，1H)，7.27(td，J＝9.5，1.9Hz，1H)，4.81(dd，J＝10.9，3.6Hz，1H)，4.37(d，J＝47.9Hz，1H)，4.24–4.10(m，1H)，4.10–3.92(m，1H)，3.90(s，3H)，3.78(s，3H)，3.29–3.19(m，1H)，2.11–2.01(m，1H)，1.87–1.77(m，1H)，1.75–1.66(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 482(M+1)。
实施例230 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺230
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,6-三氟苯基)硼酸，得到230。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.00(s，1H)，8.68(s，1H)，7.85(s，1H)，7.75(qd，J＝9.4，4.9Hz，1H)，7.43(tdd，J＝9.7，4.0，2.1Hz，1H)，5.09–4.78(m，2H)，4.19–3.91(m，2H)，3.75(s，3H)，3.44–3.30(m，1H)，2.24–2.12(m，1H)，1.93–1.65(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 470(M+1)。
实施例231 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-甲基吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺231
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-甲基吡啶-2-基)硼酸，得到231。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.51(s，1H)，8.53(dd，J＝4.7，1.5Hz，1H)，8.47(s，1H)，7.91–7.83(m，1H)，7.81(s，1H)，7.45(dd，J＝7.7，4.6Hz，1H)，4.84(dd，J＝10.7，3.6Hz，1H)，4.53–4.30(m，1H)，4.25–3.94(m，2H)，3.79(s，3H)，3.29–3.12(m，1H)，2.85(s，3H)，2.51(s，1H)，2.13–2.02(m，1H)，1.94–1.79(m，1H)，1.76–1.62(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 431(M+1)。
实施例232 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-甲氧基吡啶-3-基)噻唑-4-甲酰胺232
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-甲氧基吡啶-3-基)硼酸，得到232。LCMS(ES+)m/z 447(M+1)。
实施例233 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氧代-1,2-二氢吡啶-3-基)噻唑-4-甲酰胺233
标题化合物在合成实施例232的过程中作为第二产物分离出来。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.72(dd，J＝7.1，2.1Hz，1H)，8.30(s，1H)，7.91(s，1H)，7.70(dd，J＝6.3，2.1Hz，1H)，6.49(t，J＝6.7Hz，1H)，4.87(dd，J＝10.4，3.6Hz，1H)，4.50(ddd，J＝49.4，7.1，2.9Hz，1H)，4.40–4.25(m，1H)，4.20–3.94(m，1H)，3.78(s，3H)，3.40–3.29(m，1H)，2.13–2.00(m，1H)，1.90–1.65(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 433(M+1)。
实施例234 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺234
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3,5-二甲基异噁唑-4-基)硼酸，得到234。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.57(s，1H)，8.47(s，1H)，7.78(s，1H)，4.82(dd，J＝10.8，3.6Hz，1H)，4.56–4.32(m，1H)，4.25–3.93(m，2H)，3.79(s，3H)，3.27–3.13(m，1H)，2.74(s，3H)，2.53(s，3H)，2.13–2.01(m，1H)，1.93–1.78(m，1H)，1.77–1.64(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例235 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-环丙基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺235
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成1-环丙基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑，得到235。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.75(s，1H)，8.44(s，1H)，8.22(s，1H)，8.03(s，1H)，7.90(s，1H)，4.92–4.83(m，1H)，4.59–4.40(m，1H)，4.32(dd，J＝22.2，15.0Hz，1H)，4.19–3.93(m，1H)，3.80(dd，J＝7.4，3.7Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.38–3.31(m，1H)，2.12–2.03(m，1H)，1.87–1.66(m，5H)，1.17–0.96(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 446(M+1)。
实施例236 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,5-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺236
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,5-三氟苯基)硼酸，得到236。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.92(s，1H)，8.63(s，1H)，8.14–8.04(m，1H)，7.83–7.71(m，2H)，4.85(dd，J＝10.7，3.5Hz，1H)，4.71–4.46(m，1H)，4.36–4.22(m，1H)，4.20–3.94(m，1H)，3.81(s，3H)，3.45–3.31(m，1H)，2.16–2.07(m，1H)，1.98–1.76(m，3H)。LCMS(ES+)m/z470(M+1)。
实施例237 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氟吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺237
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-氟吡啶-2-基)硼酸，得到237。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例238 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-5-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺238
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-5-甲基苯基)硼酸，得到238。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.86(s，1H)，8.52(s，1H)，8.22(dd，J＝7.3，2.2Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.43–7.29(m，2H)，4.89(dd，J＝10.1，3.9Hz，1H)，4.57–4.37(m，1H)，4.35–4.20(m，1H)，4.17–3.94(m，1H)，3.79(s，3H)，3.29–3.17(m，1H)，2.40(s，3H)，2.19–2.07(m，1H)，1.92–1.77(m，1H)，1.76–1.66(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 448(M+1)。
实施例239 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氟吡啶-3-基)噻唑-4-甲酰胺239
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(5-氟吡啶-3-基)硼酸，得到239。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，9.15(t，J＝1.7Hz，1H)，8.74(d，J＝2.7Hz，1H)，8.55(s，1H)，8.37(dt，J＝9.5，2.3Hz，1H)，7.84(s，1H)，4.87(dd，J＝10.5，3.9Hz，1H)，4.58–4.36(m，1H)，4.34–4.20(m，1H)，4.16–3.92(m，1H)，3.79(s，3H)，3.37–3.23(m，2H)，2.15–2.05(m，1H)，1.91–1.67(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例240 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氟吡啶-4-基)噻唑-4-甲酰胺240
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-氟吡啶-4-基)硼酸，得到240。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.09(s，1H)，8.87(d，J＝2.4Hz，1H)，8.73–8.64(m，2H)，8.23(dd，J＝6.4，5.0Hz，1H)，7.78(s，1H)，5.04–4.77(m，2H)，4.25–4.09(m，1H)，4.06–3.92(m，1H)，3.78(s，3H)，3.27–3.20(m，1H)，2.19–2.08(m，1H)，1.91–1.76(m，3H)，1.69–1.59(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例241 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺241
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸，得到241。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.63(s，1H)，8.28(s，1H)，8.24(s，1H)，7.84(s，1H)，4.95–4.83(m，1H)，4.83–4.62(m，1H)，4.42–4.28(m，1H)，4.24–4.05(m，1H)，3.83(s，3H)，3.78(s，3H)，3.48(dd，J＝17.3，8.4Hz，1H)，2.47(s，3H)，2.15–2.06(m，1H)，1.87(d，J＝14.4Hz，4H)。LCMS(ES+)m/z 434(M+1)。
实施例242 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺242
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成1,5-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑，得到242。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.61(s，1H)，8.24(s，1H)，7.95(s，1H)，7.83(s，1H)，4.84(dd，J＝10.6，3.8Hz，1H)，4.55–4.32(m，1H)，4.28–4.14(m，1H)，4.13–3.94(m，1H)，3.81(s，3H)，3.78(s，3H)，3.29–3.16(m，1H)，2.61(s，3H)，2.12–2.02(m，1H)，1.91–1.78(m，1H)，1.75–1.64(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 434(M+1)。
实施例243 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺243
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,6-三氟苯基)硼酸，得到243。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.93(s，1H)，8.67(s，1H)，7.83(s，1H)，7.73(qd，J＝9.5，5.0Hz，1H)，7.38(tdd，J＝9.5，3.9，2.1Hz，1H)，4.83(dd，J＝10.7，3.6Hz，1H)，4.45–4.23(m，1H)，4.17(ddd，J＝21.9，15.0，1.8Hz，1H)，4.08–3.89(m，1H)，3.77(s，3H)，3.29–3.13(m，1H)，2.12–2.01(m，1H)，1.87–1.72(m，1H)，1.72–1.60(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 470(M+1)。
实施例244 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3,5-二甲基异噁唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺244
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3,5-二甲基异噁唑-4-基)硼酸，得到244。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.63(s，1H)，8.47(s，1H)，7.83(s，1H)，5.01(d，J＝50.4Hz，1H)，4.84(d，J＝10.2Hz，1H)，4.24–4.06(m，1H)，4.06–3.88(m，1H)，3.78(s，3H)，3.45–3.31(m，1H)，2.77(s，3H)，2.56(s，3H)，2.09–1.84(m，3H)，1.76–1.68(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例245 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺245
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3-二氟苯基)硼酸，得到245。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.04(s，1H)，8.59(s，1H)，8.15–8.06(m，1H)，7.77(s，1H)，7.72–7.60(m，1H)，7.51–7.41(m，1H)，5.12–4.82(m，2H)，4.26–4.10(m，1H)，4.07–3.93(m，1H)，3.78(s，3H)，3.44–3.30(m，1H)，2.15(ddd，J＝11.7，6.2，3.5Hz，1H)，1.97–1.79(m，2H)，1.69(d，J＝13.1Hz，1H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例246 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氟吡啶-3-基)噻唑-4-甲酰胺246
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(5-氟吡啶-3-基)硼酸，得到246。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.01(s，1H)，9.13(t，J＝1.7Hz，1H)，8.76(d，J＝2.8Hz，1H)，8.55(s，1H)，8.40–8.32(m，1H)，7.72(s，1H)，5.05–4.73(m，2H)，4.21–4.05(m，1H)，4.05–3.91(m，1H)，3.79(s，3H)，3.29–3.24(m，1H)，2.21–2.10(m，1H)，1.94–1.77(m，2H)，1.71–1.61(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例247 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3,5-二氟吡啶-4-基)噻唑-4-甲酰胺247
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3,5-二氟吡啶-4-基)硼酸，得到247。LCMS(ES+)m/z 453(M+1)。
实施例248 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺248
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-氯-2-氟苯基)硼酸，得到248。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.10(s，1H)，8.59(s，1H)，8.30–8.21(m，1H)，7.86–7.77(m，2H)，7.52–7.43(m，1H)，5.05–4.77(m，2H)，4.16(ddd，J＝24.7，13.6，4.7Hz，1H)，3.99(ddd，J＝17.9，13.5，4.8Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.27–3.22(m，1H)，2.18–2.09(m，1H)，1.88–1.78(m，2H)，1.71–1.60(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例249 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3'-氯-2,2'-二氟-[1,1'-联苯]-3-基)噻唑-4-甲酰胺249
标题化合物在合成实施例248的过程中作为第二产物分离出来。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.13(s，1H)，8.58(s，1H)，8.47–8.38(m，1H)，7.84–7.67(m，3H)，7.64–7.52(m，2H)，7.42(t，J＝7.9Hz，1H)，5.04–4.75(m，2H)，4.26–4.10(m，1H)，4.08–3.94(m，1H)，3.78(s，3H)，3.28–3.23(m，1H)，2.20–2.10(m，1H)，1.87–1.78(m，2H)，1.71–1.61(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 562(M+1)。
实施例250 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-3-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺250
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-3-氟苯基)硼酸，得到250。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.08(s，1H)，8.62(s，1H)，8.19–8.11(m，1H)，7.81(s，1H)，7.70–7.57(m，2H)，5.02–4.71(m，2H)，4.18–3.90(m，2H)，3.77(s，3H)，3.34–3.18(m，1H)，2.20–2.10(m，1H)，1.86–1.72(m，2H)，1.68–1.59(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例251 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2'-氯-3',6-二氟-[1,1'-联苯]-2-基)噻唑-4-甲酰胺251
标题化合物在合成实施例250过程中作为第二产物分离出来。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.95(s，1H)，8.31(s，1H)，8.26–8.18(m，1H)，7.80–7.53(m，6H)，7.42–7.33(m，1H)，5.02–4.77(m，2H)，4.25–4.06(m，1H)，4.05–3.92(m，1H)，3.77(s，3H)，3.25(s，1H)，2.14(s，1H)，1.91–1.55(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 562(M+1)。
实施例252 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺252
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(1-甲基-3-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)硼酸，得到252。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.64(s，1H)，8.63(s，1H)，8.42(s，1H)，7.88(s，1H)，4.98–4.72(m，2H)，4.22–4.03(m，1H)，4.00(s，3H)，3.97–3.88(m，1H)，3.75(s，3H)，3.30–3.17(m，1H)，2.14–2.03(m，1H)，1.92–1.68(m，3H)，1.66–1.57(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 488(M+1)。
实施例253 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-环丙基-1-甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺253
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体100)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成3-环丙基-1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑，得到253。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.76(s，1H)，8.27(s，1H)，8.20(s，1H)，7.81(s，1H)，5.02–4.76(m，2H)，4.16–3.90(m，2H)，3.80(s，3H)，3.76(s，3H)，3.29–3.16(m，1H)，2.41–2.30(m，1H)，2.18–2.09(m，1H)，1.86–1.74(m，2H)，1.66–1.58(m，1H)，1.02–0.90(m，2H)，0.89–0.80(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 460(M+1)。
实施例254 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺254
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸，得到254。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.15(s，1H)，7.84(s，1H)，7.65(s，1H)，7.25(s，2H)，5.00–4.73(m，2H)，4.16–3.89(m，2H)，3.78(s，3H)，3.72(s，3H)，3.22(dd，J＝25.0，9.5Hz，1H)，2.56(s，3H)，2.10–2.01(m，1H)，1.90–1.71(m，3H)，1.66–1.58(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。
实施例255 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺255
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸，得到255。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.15(s，1H)，7.84(s，1H)，7.65(s，1H)，7.25(s，2H)，4.96–4.76(m，2H)，4.16–3.89(m，2H)，3.79(s，3H)，3.72(s，3H)，3.29–3.15(m，1H)，2.56(s，3H)，2.11–2.00(m，1H)，1.90–1.71(m，4H)，1.66–1.58(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。
实施例256 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺256
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(1-异丙基-1H-吡唑-4-基)硼酸，得到256。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.37(s，1H)，8.15(s，1H)，7.83(s，1H)，7.77(s，1H)，7.25(s，2H)，5.12–4.80(m，2H)，4.60–4.45(m，1H)，4.18–3.95(m，2H)，3.72(s，3H)，3.38–3.26(m，1H)，2.33–2.22(m，1H)，1.83–1.56(m，5H)，1.44(d，J＝6.7Hz，6H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例257 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺257
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(1,5-二甲基-1H-吡唑-4-基)硼酸，得到257。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.01(s，1H)，7.80(s，1H)，7.72(s，1H)，7.25(s，2H)，4.79(dd，J＝10.7，3.6Hz，1H)，4.41(ddd，J＝49.5，4.9，2.7Hz，1H)，4.26–3.94(m，2H)，3.76(d，J＝5.4Hz，6H)，3.30–3.16(m，1H)，2.52(s，3H)，2.04(dq，J＝11.8，4.1Hz，1H)，1.81(dd，J＝13.6，10.0Hz，1H)，1.73–1.64(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。
实施例258 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺258
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体101)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,6-三氟苯基)硼酸，得到258。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.15(s，1H)，8.69(s，1H)，7.95(s，1H)，7.77(qd，J＝9.4，4.9Hz，1H)，7.49–7.38(m，1H)，5.12(t，J＝5.6Hz，1H)，3.91–3.76(m，2H)，3.71(s，3H)，3.46–3.36(m，1H)，3.32–3.21(m，1H)，3.01(s，3H)，2.49–2.36(m，1H)，1.73–1.49(m，3H)，1.41(br，2H)。LCMS(ES+)m/z 482(M+1)。
实施例259 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺259
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-4-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到259。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.54(s，1H)，8.31(q，J＝9.1，8.5Hz，1H)，7.93–7.84(m，1H)，7.83–7.71(m，2H)，7.61(s，2H)，5.17–4.82(m，2H)，4.31–4.14(m，1H)，4.08–3.93(m，1H)，3.77(s，3H)，3.51–3.37(m，1H)，2.19–2.05(m，1H)，1.98–1.81(m，2H)，1.75–1.67(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例260 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺260
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,6-三氟苯基)硼酸，得到260。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.47(s，1H)，7.85(s，1H)，7.65–7.52(m，3H)，7.39–7.27(m，1H)，5.03–4.83(m，2H)，4.16–3.90(m，2H)，3.73(s，3H)，3.39(dd，J＝7.1，4.6Hz，1H)，2.18(ddd，J＝15.1，6.7，3.5Hz，1H)，1.87(dt，J＝14.1，10.3Hz，1H)，1.69(dtd，J＝18.1，13.8，11.5，7.4Hz，2H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例261 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,5-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺261
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,5-三氟苯基)硼酸，得到261。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.52(s，1H)，7.80(d，J＝9.1Hz，1H)，7.67(s，1H)，7.60(d，J＝9.5Hz，3H)，5.05–4.71(m，2H)，4.20–3.90(m，2H)，3.77(s，3H)，3.31–3.26(m，1H)，2.19–2.09(m，1H)，1.91–1.78(m，2H)，1.69–1.64(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例262 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺262
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,6-三氟苯基)硼酸，得到262。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.60(s，1H)，7.91(s，1H)，7.66–7.53(m，3H)，7.37–7.26(m，1H)，5.08(t，J＝5.6Hz，1H)，3.92–3.71(m，2H)，3.69(s，3H)，3.46–3.33(m，1H)，3.33–3.21(m，1H)，3.02(s，3H)，2.47–2.35(m，1H)，1.76–1.63(m，1H)，1.62–1.50(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 497(M+1)。
实施例263 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,5-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺263
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,5-三氟苯基)硼酸，得到263。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.51(s，1H)，7.88–7.79(m，1H)，7.68–7.54(m，4H)，4.96(dd，J＝8.7，3.5Hz，1H)，4.06(dd，J＝13.1，4.2Hz，1H)，3.92(dd，J＝13.2，6.0Hz，1H)，3.77(s，3H)，3.70–3.64(m，1H)，3.46–3.41(m，1H)，3.27(s，3H)，2.18–2.10(m，1H)，1.94–1.82(m，2H)，1.75–1.67(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 497(M+1)。
实施例264 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-5-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺264
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-5-甲基苯基)硼酸，得到264。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.64(s，1H)，7.92–7.82(m，2H)，7.44(br，2H)，7.29–7.19(m，2H)，5.12(t，J＝5.4Hz，1H)，3.97–3.88(m，2H)，3.71(s，3H)，3.53–3.44(m，1H)，3.34–3.23(m，1H)，3.04(s，3H)，2.37(s，3H)，1.78–1.50(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 475(M+1)。
实施例265 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺265
根据实施例101的操作，以((3R,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体101)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)硼酸，得到265。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.12(s，1H)，8.56(s，1H)，7.94(s，1H)，7.08–6.97(m，2H)，5.11(t，J＝5.5Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.84–3.75(m，1H)，3.71(s，3H)，3.47–3.38(m，1H)，3.31–3.22(m，1H)，3.04(s，3H)，2.49–2.36(m，1H)，1.75–1.49(m，3H)，1.41(br，2H)。LCMS(ES+)m/z 494(M+1)。
实施例266 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(三氟甲氧基)苯基)噻唑-4-甲酰胺266
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-(三氟甲氧基)苯基)硼酸，得到266。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.50(s，1H)，8.28–8.20(m，1H)，7.78(s，1H)，7.57–7.43(m，6H)，5.00–4.77(m，2H)，4.22–4.06(m，1H)，4.06–3.92(m，1H)，3.75(s，3H)，3.29–3.21(m，1H)，2.18–2.09(m，1H)，1.95–1.54(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 515(M+1)。
实施例267 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺267
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到267。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.25(s，1H)，7.87–7.76(m，2H)，7.66–7.50(m，2H)，7.44(s，2H)，4.90(dd，J＝7.6，3.8Hz，1H)，4.82–4.50(m，1H)，3.95–3.75(m，2H)，3.70(s，3H)，3.13(dd，J＝21.1，8.4Hz，1H)，2.22–2.11(m，1H)，1.79–1.51(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例268 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺268
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-3-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到268。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.53(s，1H)，8.38(t，J＝7.5Hz，1H)，7.90–7.75(m，2H)，7.62–7.50(m，3H)，5.05–4.71(m，2H)，4.22–4.06(m，1H)，4.05–3.92(m，1H)，3.75(s，3H)，3.34–3.21(m，1H)，2.18–2.10(m，1H)，1.88–1.72(m，4H)，1.69–1.60(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例269 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺269
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-6-甲基苯基)硼酸，得到269。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.44(s，1H)，7.88(s，1H)，7.48–7.33(m，3H)，7.25–7.13(m，2H)，5.05(t，J＝5.3Hz，1H)，3.77–3.63(m，5H)，3.34–3.25(m，1H)，3.26–3.17(m，1H)，2.83(s，3H)，2.44(s，3H)，1.68–1.50(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 475(M+1)。
实施例270 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺270
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到270。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.18(s，1H)，7.88(t，J＝8.7Hz，1H)，7.83(s，1H)，7.77(dd，J＝6.5，1.5Hz，2H)，7.72–7.62(m，1H)，7.46(s，2H)，4.87(dd，J＝8.5，3.4Hz，1H)，4.82–4.60(m，1H)，3.97–3.83(m，2H)，3.71(s，3H)，3.17(ddt，J＝23.0，9.2，2.5Hz，1H)，2.15–2.04(m，1H)，1.86–1.54(m，4H)。LCMS(ES+)m/z499(M+1)。
实施例271 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(环戊-1-烯-1-基)噻唑-4-甲酰胺271
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成2-(环戊-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷，得到271。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.25(s，1H)，7.80(s，1H)，7.35(br，J＝8.5Hz，2H)，6.21–6.14(m，1H)，5.22–4.76(m，2H)，4.22–3.94(m，2H)，3.71(s，3H)，3.53–3.40(m，1H)，2.76–2.66(m，2H)，2.22–2.10(m，1H)，2.02–1.87(m，3H)，1.84–1.67(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 421(M+1)。
实施例272 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-环戊基噻唑-4-甲酰胺272
向5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(环戊-1-烯-1-基)噻唑-4-甲酰胺(实施例271)的甲醇溶液中加入10％钯碳并将该混合物在氢气氛下搅拌过夜。然后将该混合物经Celite过滤并真空浓缩。HPLC纯化得到272。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.26(s，1H)，7.77(s，1H)，7.05(s，2H)，5.17–4.78(m，2H)，4.17–3.92(m，2H)，3.71(s，3H)，3.47–3.34(m，1H)，3.27–3.15(m，1H)，2.23–2.11(m，1H)，2.11–1.95(m，2H)，1.94–1.83(m，1H)，1.82–1.57(m，9H)。LCMS(ES+)m/z 423(M+1)。
实施例273 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺273
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-6-甲基苯基)硼酸，得到273。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.19(s，1H)，7.74(s，1H)，7.45–7.33(m，3H)，7.26–7.14(m，2H)，5.02–4.77(m，2H)，4.10–3.85(m，2H)，3.75(s，3H)，3.37(s，3H)，2.15–2.04(m，1H)，1.98–1.75(m，2H)，1.72–1.63(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例274 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-5-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺274
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-5-甲基苯基)硼酸，得到274。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.51(s，1H)，7.90(d，J＝7.4Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.41(br，2H)，7.24(d，J＝8.8Hz，2H)，5.09–4.68(m，2H)，4.22–3.97(m，2H)，3.74(s，3H)，2.36(s，3H)，2.23–2.12(m，1H)，1.88–1.73(m，2H)，1.68–1.63(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例275 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4-(环丙基(羟基)甲基)-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺275
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成环丙基(3,5-二氟-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯基)甲醇(中间体140)，得到275，其作为非对映异构体混合物被分离。LCMS(ES+)m/z 522(M+1)。
实施例276 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4-(环丙基(甲氧基)甲基)-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺276
标题化合物作为在合成实施例275过程中形成的第二化合物分离出来。LCMS(ES+)m/z 536(M+1)。
实施例277 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺277
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3-二氟-6-甲氧基苯基)硼酸，得到277。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.42(s，1H)，7.84(s，1H)，7.47(t，J＝9.4Hz，1H)，7.39(s，2H)，7.01(ddd，J＝9.4，4.0，1.9Hz，1H)，5.02–4.76(m，2H)，4.18–3.93(m，2H)，3.92(s，3H)，3.72(s，3H)，2.23–2.13(m，1H)，1.90–1.60(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 497(M+1)。
实施例278 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺278
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到278。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.19(s，1H)，7.85–7.69(m，4H)，7.47(s，2H)，5.03–4.74(m，2H)，4.00–3.86(m，2H)，3.74(s，3H)，2.13(ddt，J＝14.4，6.1，2.8Hz，1H)，2.01–1.61(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例279 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺279
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到279。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.41(s，1H)，7.90(s，1H)，7.84–7.68(m，3H)，7.47(s，2H)，5.03(t，J＝5.2Hz，1H)，3.71–3.52(m，5H)，3.29–3.13(m，2H)，2.72(s，3H)，2.48–2.40(m，1H)，1.63–1.47(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 529(M+1)。
实施例280 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-6-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺280
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-6-氟苯基)硼酸，得到280。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.51(s，1H)，7.89(s，1H)，7.61–7.46(m，4H)，7.40(ddd，J＝9.6，8.2，1.4Hz，1H)，5.06(t，J＝5.2Hz，1H)，3.68(d，J＝2.8Hz，5H)，3.33–3.17(m，2H)，2.82(s，3H)，1.66–1.49(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 495(M+1)。
实施例281 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺281
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体98)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-5-氟苯基)硼酸，得到281。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.62(s，1H)，8.12(dd，J＝6.4，2.7Hz，1H)，7.79(s，1H)，7.55–7.39(m，4H)，5.07(dd，J＝7.0，4.5Hz，1H)，3.99–3.84(m，2H)，3.72(s，3H)，3.52–3.43(m，1H)，3.33–3.24(m，1H)，3.15(s，3H)，2.33–2.22(m，1H)，1.82–1.52(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 495(M+1)。
实施例282 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺282
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑(中间体149)，得到282。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.10(s，1H)，8.00(s，1H)，7.78(s，1H)，7.41(s，2H)，4.78(dd，J＝10.8，3.6Hz，1H)，4.54–4.27(m，1H)，4.24–4.10(m，1H)，4.04(s，3H)，3.95(dd，J＝14.9，3.4Hz，1H)，3.76(s，3H)，3.29–3.14(m，1H)，2.10–1.98(m，1H)，1.85–1.76(m，3H)，1.73–1.63(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 503(M+1)。
实施例283 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1-甲基-5-(三氟甲基)-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺283
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6R)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体88)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成1-甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-5-(三氟甲基)-1H-吡唑(中间体149)，得到283。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.76(s，1H)，8.49(s，1H)，8.16(s，1H)，7.85(s，1H)，4.99–4.67(m，2H)，4.10(s，3H)，4.08–3.85(m，2H)，3.75(s，3H)，3.30–3.16(m，1H)，2.16–2.05(m，1H)，1.90–1.67(m，2H)，1.66–1.58(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 488(M+1)。
实施例284 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-6-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺284
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-6-氟苯基)硼酸，得到284。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.66(s，1H)，7.72(s，1H)，7.64(td，J＝8.3，6.0Hz，1H)，7.58–7.51(m，1H)，7.50–7.40(m，1H)，4.77(dd，J＝10.9，3.7Hz，1H)，4.38–4.17(m，1H)，4.17–4.03(m，1H)，4.02–3.83(m，1H)，3.78(s，3H)，3.23–3.09(m，1H)，2.10–1.98(m，1H)，1.91–1.76(m，1H)，1.70–1.56(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例285 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-乙氧基-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺285
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-乙氧基-2,6-二氟苯基)硼酸，得到285。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.63(s，1H)，7.79(s，1H)，7.39(td，J＝9.3，5.2Hz，1H)，7.24(td，J＝9.6，1.9Hz，1H)，4.80(dd，J＝11.0，3.6Hz，1H)，4.49–4.25(m，1H)，4.16(q，J＝6.9Hz，3H)，4.08–3.90(m，1H)，3.78(s，3H)，3.29–3.18(m，1H)，2.10–2.02(m，1H)，1.91–1.77(m，1H)，1.74–1.64(m，2H)，1.36(t，J＝6.9Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 496(M+1)。
实施例286 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氟-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-基)噻唑-4-甲酰胺286
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成5-氟-1,3-二甲基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1H-吡唑(中间体150)，得到286。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.56(s，1H)，8.33(s，1H)，7.81(s，1H)，4.82(dd，J＝10.7，3.6Hz，1H)，4.39(ddt，J＝49.2，6.4，2.8Hz，1H)，4.24–3.94(m，2H)，3.78(s，3H)，3.72(s，3H)，3.25–3.12(m，1H)，2.54(s，3H)，2.12–2.01(m，1H)，1.92–1.56(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例287 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺287
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体105)，得到287。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.04(s，1H)，8.42(d，J＝4.3Hz，1H)，8.21(t，J＝8.9Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.15–7.00(m，2H)，5.00–4.80(m，2H)，4.22–3.92(m，2H)，3.88(s，3H)，3.77(s，3H)，2.20–2.09(m，1H)，1.90–1.75(m，2H)，1.65(d，J＝15.7Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例288 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺288
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体104)，得到288。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.01(s，1H)，8.54(s，1H)，7.88(s，1H)，7.05–6.98(m，2H)，4.99–4.81(m，2H)，4.16–3.94(m，2H)，3.88(s，3H)，3.73(s，3H)，2.20–2.11(m，1H)，1.92–1.67(m，2H)，1.62(d，J＝14.4Hz，1H)。LCMS(ES+)m/z 482(M+1)。
实施例289 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺289
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体134)，得到289。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.45(s，1H)，8.31–8.24(m，1H)，8.21–8.09(m，1H)，7.92(s，1H)，7.40(d，J＝10.5Hz，2H)，4.91(dd，J＝8.8，3.5Hz，1H)，3.91–3.79(m，2H)，3.72(s，3H)，3.08(dd，J＝23.4，9.4Hz，1H)，2.16–2.06(m，1H)，1.87–1.74(m，1H)，1.71–1.53(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 522(M+1)。
实施例290 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺290
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(中间体135)，得到290。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.44(s，1H)，8.31–8.23(m，1H)，8.23–8.13(m，2H)，7.91(s，1H)，7.42(dd，J＝9.6，3.6Hz，2H)，4.90(dd，J＝9.2，3.5Hz，1H)，4.67(d，J＝5.4Hz，1H)，3.92–3.81(m，2H)，3.76–3.70(m，3H)，3.11(dd，J＝23.9，9.5Hz，1H)，2.32(q，J＝9.9Hz，2H)，2.14–2.05(m，1H)，2.03–1.91(m，1H)，1.88–1.54(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 534(M+1)。
实施例291 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺291
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体132)，得到291。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.41(s，1H)，8.29(dd，J＝6.5，2.7Hz，1H)，7.73(bs，1H)，7.51(s，2H)，7.48–7.36(m，2H)，7.08–6.53(m，1H)，4.85(dd，J＝9.9，4.1Hz，1H)，4.51–4.31(m，1H)，4.29–3.93(m，2H)，3.78(s，3H)，2.18–2.07(m，1H)，1.93–1.79(m，1H)，1.78–1.62(m，3H)。LCMS(ES+)m/z483(M+1)。
实施例292 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-5-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺292
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2-氟-5-甲基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体133)，得到292。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.29(s，1H)，8.03(d，J＝7.1Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.44(s，2H)，7.26–7.17(m，2H)，4.86(dd，J＝10.2，3.8Hz，1H)，4.54–4.36(m，1H)，4.34–4.18(m，1H)，4.15–3.96(m，1H)，3.77(s，3H)，2.35(s，3H)，2.14–2.03(m，1H)，1.88–1.65(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例293 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺293
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体105)，得到293。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.86(s，1H)，9.10(s，1H)，8.44–8.34(m，2H)，7.88(d，J＝1.0Hz，1H)，7.14–7.05(m，1H)，7.02–6.91(m，3H)，6.67–6.58(m，2H)，4.87(dd，J＝10.5，3.6Hz，1H)，4.58–4.39(m，1H)，4.38–4.23(m，1H)，4.18–3.99(m，1H)，3.87(s，3H)，3.78(s，3H)，2.13–2.02(m，1H)，1.88–1.67(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例294 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酰胺294
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体109)，得到294，其为非对映异构体混合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.61(s，1H)，7.81(s，1H)，7.31–7.24(m，2H)，5.57(d，J＝4.5Hz，1H)，4.86–4.75(m，2H)，4.41–4.23(m，1H)，4.23–3.92(m，2H)，3.78(s，3H)，3.26–3.15(m，1H)，2.11–2.01(m，1H)，1.87–1.76(m，1H)，1.74–1.59(m，4H)，1.35(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 496(M+1)。
实施例295 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)噻唑-4-甲酰胺295
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-(1-羟基环丁基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体110)，得到295。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.62(s，1H)，7.80(s，1H)，7.44–7.35(m，2H)，7.01–6.57(m，1H)，5.95(s，1H)，4.82(dd，J＝10.9，3.5Hz，1H)，4.42(d，J＝46.7Hz，1H)，4.27–3.93(m，2H)，3.78(s，3H)，2.46–2.38(m，2H)，2.36–2.26(m，2H)，2.11–1.92(m，2H)，1.87–1.67(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 522(M+1)。
实施例296 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺296
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体104)，得到296。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.55(s，1H)，7.80(s，1H)，7.02–6.94(m，2H)，4.80(dd，J＝10.8，3.6Hz，1H)，4.41–4.25(m，1H)，4.22–3.91(m，2H)，3.87(s，3H)，3.77(s，3H)，3.26–3.15(m，1H)，2.11–2.01(m，1H)，1.88–1.75(m，1H)，1.67(q，J＝9.0，7.7Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 482(M+1)。
实施例297 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺297
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-(2-羟基丙-2-基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体111)，得到297。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.86(s，1H)，8.61(s，1H)，7.80(s，1H)，7.41–7.31(m，2H)，5.43(s，1H)，4.80(dd，J＝10.9，3.6Hz，1H)，4.23–4.10(m，1H)，4.08–3.90(m，1H)，3.78(s，3H)，3.26–3.15(m，1H)，2.10–2.01(m，1H)，1.88–1.76(m，1H)，1.74–1.60(m，4H)，1.46(s，6H)。LCMS(ES+)m/z 510(M+1)。
实施例298 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(二氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺298
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-(二氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体112)，得到298。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.70(s，1H)，8.54(s，1H)，8.11–7.80(m，3H)，7.76–7.67(m，3H)，4.78(dd，J＝10.8，3.8Hz，1H)，4.48–4.29(m，1H)，4.20–3.89(m，2H)，3.81(s，3H)，2.11–2.02(m，1H)，1.98–1.86(m，1H)，1.74–1.64(m，2H)。LCMS(ES+)m/z466(M+1)。
实施例299 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-溴-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺299
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(5-溴-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体129)，得到299。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.02(s，1H)，8.65(dd，J＝6.6，2.6Hz，1H)，8.57(s，1H)，7.81–7.74(m，1H)，7.71(s，1H)，7.48(dd，J＝11.0，8.9Hz，1H)，4.86(dd，J＝10.0，3.9Hz，1H)，4.59–4.42(m，1H)，4.31–3.97(m，2H)，3.82(s，3H)，2.21–2.10(m，1H)，1.96–1.84(m，1H)，1.81–1.67(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 512(M+1)。
实施例300 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氟吡啶-4-基)噻唑-4-甲酰胺300
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(3-氟吡啶-4-基)噻唑-4-甲酸(中间体113)，得到300。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.97(s，1H)，8.86(d，J＝2.4Hz，1H)，8.72(s，1H)，8.66(dd，J＝5.0，1.2Hz，1H)，8.36(dd，J＝6.5，5.0Hz，1H)，7.84(s，1H)，7.59(s，2H)，4.98–4.79(m，2H)，4.43(dd，J＝23.7，15.4Hz，1H)，4.27–4.09(m，1H)，3.81(s，3H)，3.68–3.54(m，1H)，2.19–2.10(m，1H)，2.03–1.83(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 435(M+1)。
实施例301 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,5-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺301
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,5-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体114)，得到301。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.58(s，1H)，8.27–8.20(m，1H)，7.79(s，1H)，7.59–7.52(m，1H)，7.51–7.42(m，1H)，4.85(dd，J＝10.6，3.8Hz，1H)，4.51–4.35(m，1H)，4.31–4.18(m，1H)，4.13–3.95(m，1H)，3.80(s，3H)，3.27–3.19(m，1H)，2.14–2.05(m，1H)，1.98(s，1H)，1.92–1.82(m，1H)，1.76–1.66(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例302 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺302
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(5-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体115)，得到302。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.01(s，1H)，8.58(s，1H)，8.52(dd，J＝6.4，2.7Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.69–7.62(m，1H)，7.55(dd，J＝10.8，8.9Hz，1H)，4.85(dd，J＝10.3，3.9Hz，1H)，4.60–4.44(m，1H)，4.32–4.20(m，1H)，4.13–3.98(m，1H)，3.82(s，3H)，2.19–2.10(m，1H)，1.96–1.83(m，1H)，1.80–1.69(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例303 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-3-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺303
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-3-甲基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体116)，得到303。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.92(s，1H)，8.63(s，1H)，7.80(s，1H)，7.57–7.48(m，1H)，7.29–7.19(m，1H)，4.83(dd，J＝10.4，3.7Hz，1H)，4.54(dd，J＝50.8，6.9Hz，1H)，4.30–4.17(m，1H)，4.15–3.97(m，1H)，3.78(s，3H)，2.30(s，3H)，2.13–2.04(m，1H)，1.89–1.72(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 466(M+1)。
实施例304 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-((R)-1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酰胺304
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成(R)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体117)，得到304。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.84(s，1H)，8.61(s，1H)，7.80(s，1H)，7.29(d，J＝10.1Hz，2H)，5.56(s，1H)，4.86–4.77(m，2H)，4.67–4.47(m，1H)，4.30–3.97(m，2H)，3.79(s，3H)，2.14–2.05(m，1H)，1.93–1.75(m，3H)，1.37(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 496(M+1)。
实施例305 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-((S)-1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酰胺305
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成(S)-2-(2,6-二氟-4-(1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体118)，得到305。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.84(s，1H)，8.61(s，1H)，7.80(s，1H)，7.30(d，J＝10.1Hz，2H)，5.56(s，1H)，4.87–4.77(m，2H)，4.68–4.49(m，1H)，4.29–3.99(m，2H)，3.79(s，3H)，2.15–2.05(m，1H)，1.92–1.73(m，3H)，1.37(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 496(M+1)。
实施例306 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺306
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体119)，得到306。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.59(s，1H)，8.28–8.21(m，1H)，7.87(s，1H)，7.68–7.58(m，1H)，7.44–7.36(m，1H)，4.88(dd，J＝10.5，3.5Hz，1H)，4.67–4.49(m，1H)，4.41–4.29(m，1H)，4.20–4.03(m，2H)，3.79(s，3H)，3.45–3.35(m，1H)，2.15–2.05(m，1H)，1.91–1.73(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例307 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-乙基-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺307
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(5-乙基-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体120)，得到307。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.85(s，1H)，8.52(s，1H)，8.23(dd，J＝7.3，2.3Hz，1H)，7.81(s，1H)，7.46–7.32(m，2H)，4.88(dd，J＝10.2，4.0Hz，1H)，4.51–4.33(m，1H)，4.30–4.17(m，1H)，4.15–3.95(m，1H)，3.80(s，3H)，2.71(q，J＝7.6Hz，2H)，2.19–2.08(m，1H)，1.91–1.79(m，2H)，1.79–1.63(m，2H)，1.23(t，J＝7.6Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 462(M+1)。
实施例308 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺308
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(3-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体121)，得到308。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.59(s，1H)，8.44–8.39(m，1H)，7.87(s，1H)，7.81–7.76(m，1H)，7.45–7.39(m，1H)，4.88(dd，J＝10.4，3.5Hz，1H)，4.63–4.47(m，1H)，4.40–4.27(m，1H)，4.20–4.03(m，1H)，3.79(s，3H)，3.43–3.37(m，1H)，2.15–2.06(m，1H)，1.91–1.70(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例309 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-3-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺309
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氯-3-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体122)，得到309。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.62(s，1H)，8.33–8.27(m，1H)，7.85(s，1H)，7.64–7.53(m，2H)，4.86(dd，J＝10.7，3.7Hz，1H)，4.54–4.34(m，1H)，4.27(ddd，J＝22.1，15.0，1.5Hz，1H)，4.05(ddd，J＝39.0，15.0，3.3Hz，1H)，3.79(s，3H)，2.13–2.03(m，1H)，1.89–1.79(m，1H)，1.75–1.68(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例310 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-环丙基-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺310
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(5-环丙基-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体123)，得到310。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.86(s，1H)，8.51(s，1H)，8.16(dd，J＝7.2，2.4Hz，1H)，7.76(s，1H)，7.33(dd，J＝11.2，8.6Hz，1H)，7.28–7.20(m，1H)，4.86(dd，J＝10.2，4.0Hz，1H)，4.29–4.16(m，1H)，4.12–3.94(m，1H)，3.81(s，3H)，3.26–3.15(m，1H)，2.18–2.04(m，2H)，1.96–1.82(m，1H)，1.80–1.61(m，4H)，1.04–0.94(m，2H)，0.80–0.71(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 474(M+1)。
实施例311 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺311
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体124)，得到311。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.75(s，1H)，8.58(s，1H)，7.97–7.93(m，1H)，7.89–7.75(m，4H)，4.78(dd，J＝10.9，3.7Hz，1H)，4.37–4.19(m，1H)，4.14–4.02(m，1H)，4.02–3.84(m，1H)，3.78(s，3H)，3.20–3.08(m，1H)，2.08–1.99(m，1H)，1.88–1.76(m，1H)，1.71–1.59(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 484(M+1)。
实施例312 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺312
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体126)，得到312。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.86(s，1H)，8.59(s，1H)，7.81(s，1H)，7.18(dd，J＝10.3，1.2Hz，2H)，4.81(dd，J＝10.8，3.6Hz，1H)，4.43–4.27(m，1H)，4.23–4.11(m，1H)，4.08–3.90(m，1H)，3.78(s，3H)，3.24–3.17(m，1H)，2.41(s，3H)，2.11–2.02(m，1H)，1.99–1.76(m，3H)，1.73–1.62(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 466(M+1)。
实施例313 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺313
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(4-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(中间体127)，得到313。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.55(s，1H)，8.47(t，J＝8.4Hz，1H)，7.88(s，1H)，7.75(dd，J＝11.3，2.0Hz，1H)，7.48(dd，J＝8.6，2.0Hz，1H)，4.88(dd，J＝10.3，3.5Hz，1H)，4.64–4.46(m，1H)，4.40–4.28(m，1H)，4.20–3.99(m，1H)，3.79(s，3H)，3.41–3.32(m，1H)，2.14–2.03(m，1H)，1.90–1.67(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 468(M+1)。
实施例314 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺314
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸(中间体130)，得到314。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.84(s，1H)，9.11(s，1H)，9.04(dd，J＝5.1，0.9Hz，1H)，8.66(s，1H)，7.98(d，J＝5.2Hz，1H)，7.80(s，1H)，4.80(dd，J＝10.7，3.8Hz，1H)，4.35–4.17(m，1H)，4.14–4.03(m，1H)，4.02–3.85(m，1H)，3.78(s，3H)，3.19–3.09(m，1H)，2.10–2.01(m，1H)，1.88–1.76(m，1H)，1.71–1.54(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例315 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺315
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氟-6-甲基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体128)，得到315。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.60(s，1H)，7.73(s，1H)，7.56–7.38(m，1H)，7.24(dd，J＝10.0，8.0Hz，2H)，4.79(dd，J＝11.1，3.6Hz，1H)，4.52–4.27(m，1H)，4.22–3.87(m，2H)，3.79(s，3H)，2.42(s，3H)，2.10–2.01(m，1H)，1.93–1.80(m，1H)，1.71(td，J＝8.5，7.7，3.1Hz，2H)。LCMS(ES+)m/z 448(M+1)。
实施例316 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺316
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酸(中间体131)，得到316。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.48(s，1H)，8.36(t，J＝8.1Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.34–7.18(m，2H)，4.87(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.57–4.39(m，1H)，4.38–4.25(m，1H)，4.19–4.01(m，1H)，3.78(s，3H)，2.40(s，3H)，2.12–2.03(m，1H)，1.88–1.78(m，1H)，1.77–1.66(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 448(M+1)。
实施例317 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺317
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(实施例7)，得到317。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.34(s，1H)，8.30(td，J＝7.9，1.8Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.48–7.26(m，5H)，7.02–6.56(m，1H)，4.84(dd，J＝10.6，3.5Hz，1H)，4.58–4.39(m，1H)，4.36–4.22(m，1H)，4.20–3.98(m，1H)，3.76(s，3H)，2.09–1.91(m，2H)，1.87–1.67(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 449(M+1)。
实施例318 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺318
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(参见Bioorg.Med.Chem.Lett.2010，20，1758)，得到318。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.08(s，1H)，8.53(s，1H)，8.35–8.28(m，1H)，7.81(s，1H)，7.66–7.58(m，1H)，7.53–7.41(m，2H)，5.02–4.81(m，2H)，4.24–4.09(m，1H)，4.09–3.92(m，1H)，3.77(s，3H)，2.20–2.09(m，1H)，2.07–1.92(m，1H)，1.87–1.74(m，2H)，1.66(d，J＝13.1Hz，1H)。LCMS(ES+)m/z 434(M+1)。
实施例319 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺319
根据实施例111的操作，以((3R,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体24)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(参见US2012/225061)，得到319。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ10.02(s，1H)，8.63(s，1H)，7.86(s，1H)，7.74–7.59(m，1H)，7.38(t，J＝8.9Hz，2H)，5.03–4.81(m，2H)，4.19–3.88(m，2H)，3.75(s，2H)，2.24–2.10(m，1H)，1.93–1.81(m，1H)，1.82–1.70(m，1H)，1.65(d，J＝14.0Hz，1H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例320 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-苯基噻唑-4-甲酰胺320
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-苯基噻唑-4-甲酸(实施例6)，得到320。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.29(s，1H)，7.89–7.81(m，2H)，7.50–7.34(m，4H)，7.01–6.59(m，1H)，4.83(dd，J＝10.7，3.5Hz，1H)，4.57–4.39(m，1H)，4.37–3.99(m，2H)，3.80–3.70(m，3H)，2.04(d，J＝13.7Hz，1H)，2.00–1.66(m，4H)。LCMS(ES+)m/z431(M+1)。
实施例321 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺321
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(参见US2012/225061)，得到321。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.94–9.85(m，1H)，8.63(d，J＝1.2Hz，1H)，7.81(d，J＝1.1Hz，1H)，7.69–7.60(m，1H)，7.33(t，J＝8.7Hz，2H)，4.81(dd，J＝10.9，3.5Hz，1H)，4.44–4.24(m，1H)，4.23–4.10(m，1H)，3.99(ddd，J＝37.2，14.8，3.5Hz，1H)，3.77(s，3H)，2.11–2.02(m，1H)，1.90–1.76(m，1H)，1.75–1.63(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例322 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺322
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2-氟苯基)噻唑-4-甲酸(参见Bioorg.Med.Chem.Lett.2010，20，1758)，得到322。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.90(s，1H)，8.53(s，1H)，8.52–8.44(m，1H)，7.89(s，1H)，7.63–7.56(m，1H)，7.51–7.37(m，2H)，4.88(dd，J＝10.6，3.6Hz，1H)，4.57–4.39(m，1H)，4.38–4.25(m，1H)，4.20–3.99(m，1H)，3.79(s，3H)，2.13–2.05(m，1H)，1.90–1.78(m，1H)，1.75(d，J＝9.6Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 434(M+1)。
实施例323 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺323
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酸(实施例19)，得到323。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.05(s，1H)，7.87(d，J＝7.8Hz，1H)，7.81–7.73(m，3H)，7.70–7.64(m，1H)，7.43(s，2H)，4.74(dd，J＝11.0，3.4Hz，1H)，4.50–4.30(m，1H)，4.19–3.89(m，2H)，3.76(s，3H)，2.06–1.97(m，1H)，1.91–1.79(m，1H)，1.76–1.66(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 499(M+1)。
实施例324 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺324
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,3-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(实施例25)，得到324。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.34(s，1H)，8.07(dd，J＝8.3，6.5Hz，1H)，7.87(s，1H)，7.52(s，2H)，7.48–7.38(m，1H)，7.31–7.22(m，1H)，4.87–4.80(m，1H)，4.56–4.38(m，1H)，4.36–4.23(m，1H)，4.16–3.99(m，1H)，3.76(s，3H)，2.09–2.01(m，1H)，1.87–1.66(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 467(M+1)。
实施例325 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,4-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺325
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,4-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(参见US2008/76771)，得到325。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.89(s，1H)，8.56–8.46(m，2H)，7.88(s，1H)，7.59–7.50(m，1H)，7.32–7.24(m，1H)，4.87(dd，J＝10.4，3.5Hz，1H)，4.57–4.38(m，1H)，4.38–4.23(m，1H)，4.18–3.98(m，1H)，3.78(s，3H)，2.14–2.02(m，1H)，1.88–1.66(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 452(M+1)。
实施例326 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺326
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸(参见Tetrahedron 2011，67，267)，得到326。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.70–8.65(m，1H)，8.50(s，1H)，8.35–8.30(m，1H)，8.04–7.97(m，1H)，7.87(s，1H)，7.59–7.53(m，1H)，4.94–4.88(m，1H)，4.84–4.67(m，1H)，4.48–4.34(m，1H)，4.24–4.07(m，1H)，3.80(s，3H)，3.60–3.47(m，1H)，2.17–2.09(m，1H)，1.96–1.78(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 417(M+1)。
实施例327 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-苯基噻唑-4-甲酰胺327
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(吡啶-2-基)噻唑-4-甲酸(参见J.Med.Chem.(2005)，48:2584)，得到327。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.41(s，1H)，8.14–8.06(m，2H)，7.88(s，1H)，7.57–7.50(m，3H)，4.88(dd，J＝10.5，3.6Hz，1H)，4.64–4.46(m，1H)，4.40–4.27(m，1H)，4.21–4.01(m，1H)，3.79(s，3H)，3.45–3.35(m，1H)，2.14–2.06(m，1H)，1.91–1.70(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 416(M+1)。
实施例328 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-6-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺328
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-6-氟苯基)硼酸，得到328。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.26(s，1H)，7.69(s，1H)，7.58–7.51(m，1H)，7.49–7.45(m，1H)，7.40–7.33(m，1H)，7.00–6.60(m，2H)，4.74(dd，J＝11.1，3.6Hz，1H)，4.41–4.23(m，1H)，4.16–3.86(m，2H)，3.76(s，3H)，2.07–1.97(m，1H)，1.89–1.77(m，1H)，1.69(d，J＝9.1Hz，2H)。LCMS(ES+)m/z 483(M+1)。
实施例329 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-6-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺329
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-6-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到329。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.38(s，1H)，8.59–8.53(m，1H)，7.99–7.96(m，1H)，7.85(s，1H)，7.75–7.70(m，1H)，7.61(s，2H)，4.85(dd，J＝10.4，3.6Hz，1H)，4.57–4.39(m，1H)，4.37–4.24(m，1H)，4.16–3.97(m，2H)，3.76(s，3H)，2.11–2.03(m，1H)，1.89–1.67(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 433(M+1)。
实施例330 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺330
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-6-甲基苯基)硼酸，得到330。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.13(s，1H)，7.72(s，1H)，7.43–7.32(m，3H)，7.21–7.11(m，2H)，4.74(dd，J＝11.0，3.6Hz，1H)，4.40–4.17(m，2H)，4.16–4.03(m，1H)，4.03–3.85(m，1H)，3.76(s，3H)，3.20–3.09(m，1H)，2.46(s，3H)，2.06–1.97(m，1H)，1.89–1.77(m，1H)，1.70–1.58(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 463(M+1)。
实施例331 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺331
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氟-6-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到331。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.18(s，1H)，7.81–7.68(m，3H)，7.42(s，2H)，4.78–4.68(m，1H)，4.45–4.26(m，1H)，4.14–3.86(m，2H)，3.76(s，3H)，2.07–1.97(m，1H)，1.88–1.76(m，1H)，1.76–1.65(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例332 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺332
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,3,6-三氟苯基)硼酸，得到332。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.32(s，1H)，7.81(s，1H)，7.63–7.51(m，3H)，7.31–7.23(m，1H)，4.79(dd，J＝10.7，3.5Hz，1H)，4.46–4.29(m，2H)，4.24–4.11(m，1H)，4.09–3.92(m，1H)，3.75(s，3H)，2.08–2.00(m，1H)，1.84–1.75(m，1H)，1.74–1.66(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 485(M+1)。
实施例333 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(环戊-1-烯-1-基)噻唑-4-甲酰胺333
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成2-(环戊-1-烯-1-基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷，得到333。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.09(s，1H)，7.85(s，1H)，7.34(s，2H)，6.20–6.15(m，1H)，4.80(dd，J＝10.4，3.7Hz，1H)，4.50–4.29(m，1H)，4.27–4.16(m，1H)，4.12–3.95(m，1H)，3.74(s，3H)，2.79–2.69(m，2H)，2.07–1.99(m，1H)，1.97–1.86(m，2H)，1.81–1.66(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 421(M+1)。
实施例334 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-环戊基噻唑-4-甲酰胺334
向5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(环戊-1-烯-1-基)噻唑-4-甲酰胺(实施例333)的甲醇溶液中加入10％钯碳并将该混合物在氢气氛下搅拌过夜。过滤并真空浓缩后，用HPLC纯化，得到标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.13(s，1H)，7.79(s，1H)，7.05(s，2H)，4.83–4.74(m，1H)，4.48–4.30(m，1H)，4.26–4.12(m，1H)，4.11–3.91(m，1H)，3.74(s，3H)，2.07–1.97(m，3H)，1.88–1.52(m，11H)。LCMS(ES+)m/z 423(M+1)。
实施例335 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-(二氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺335
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-(二氟甲基)苯基)硼酸，得到335。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.05(s，1H)，8.09–7.80(m，1H)，7.77(d，J＝7.6Hz，1H)，7.71–7.66(m，2H)，7.65–7.59(m，1H)，7.59–7.50(m，3H)，4.75(dd，J＝10.6，3.8Hz，1H)，4.42–4.26(m，1H)，4.19–4.07(m，1H)，4.04–3.87(m，1H)，3.79(s，3H)，3.21–3.08(m，1H)，2.08–1.99(m，1H)，1.97–1.85(m，1H)，1.74–1.58(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 481(M+1)。
实施例336 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)噻唑-4-甲酰胺336
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-氟-2-(三氟甲基)苯基)硼酸，得到336。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.13(s，1H)，7.85–7.77(m，1H)，7.72(s，1H)，7.66–7.57(m，1H)，7.54(d，J＝7.8Hz，1H)，7.44(s，2H)，4.81–4.73(m，1H)，4.63–4.44(m，1H)，4.22–4.10(m，1H)，4.08–3.91(m，1H)，3.76(s，3H)，2.10–2.00(m，1H)，1.90–1.73(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 517(M+1)。
实施例337 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氯-3-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺337
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2-氯-3-氟苯基)硼酸，得到337。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.32(s，1H)，8.20–8.12(m，1H)，7.84(s，1H)，7.52(s，2H)，7.50–7.39(m，2H)，4.82(dd，J＝10.7，3.6Hz，1H)，4.53–4.36(m，1H)，4.33–4.20(m，1H)，4.14–3.98(m，1H)，3.76(s，3H)，2.09–2.01(m，1H)，1.88–1.66(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 483(M+1)。
实施例338 5-氨基-N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氯-2-氟苯基)噻唑-4-甲酰胺338
根据实施例101的操作，以N-[2-溴-4-[[5-[(2S,5R,6S)-5-(叔丁氧羰基氨基)-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]氨基甲酰基]噻唑-5-基]氨基甲酸叔丁酯(中间体95)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-氯-2-氟苯基)硼酸，得到338。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.34(s，1H)，8.47–8.06(m，1H)，7.86(s，1H)，7.66–7.55(m，1H)，7.52(s，2H)，7.30(t，J＝8.1Hz，1H)，4.83(dd，J＝10.5，3.6Hz，1H)，4.58–4.37(m，1H)，4.36–4.22(m，1H)，4.18–3.97(m，1H)，3.76(s，3H)，2.10–2.00(m，1H)，1.89–1.60(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 483(M+1)。
实施例339 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(3-甲氧基氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺339
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-氟氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体99)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成2-(2,6-二氟-4-(3-甲氧基氧杂环丁烷-3-基)苯基)-4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(US2012/225062)，得到339。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.91(s，1H)，8.65(s，1H)，7.88(s，1H)，7.46-7.44(m，2H)，4.82-4.79(m，5H)，4.37-3.93(m，3H)，3.78(s，3H)，3.24-3.17(m，1H)，3.12(s，3H)，2.07-1.67(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 538(M+1)。
实施例340 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺340
根据实施例111的操作，以((3S,4R,7S)-3-氟-7-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体80)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟-4-(3-氟氧杂环丁烷-3-基)苯基)噻唑-4-甲酸(中间体151)，得到340。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.81(s，1H)，8.38(s，1H)，8.16(s，1H)，7.36-7.34(m，2H)，5.21-5.16(m，2H)，4.86-4.81(m，2H)，4.63-4.45(m，3H)，4.05-3.86(m，1H)，3.85(s，3H)，3.52-3.49(m，1H)，2.10-2.05(m，2H)，1.85-1.72(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 526(M+1)。
实施例341 N-(5-((2R,4R,5S,6R)-4-氨基-5-羟基-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺341
根据实施例111的操作(硝基还原的步骤不是必需的)，以((2R*,3S*,4R*,6R*)-6-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-羟基-2,3-二甲基四氢-2H-吡喃-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体152)为起始原料，并将5-((叔丁氧羰基)氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(参见US2012/225061)并分离对映异构体，然后进行Boc脱保护(SFC；Chiralpak IC)，得到341。注意：绝对立体化学是主观的。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.75(s，1H)，8.36(s，1H)，8.14(s，1H)，7.46-7.43(m，1H)，7.07-7.04(m，2H)，4.82-4.79(d，1H)，3.79(s，3H)，3.47-3.45(d，1H)，2.99-2.98(s，1H)，2.09-2.05(m，1H)，1.92-1.81(m，4H)，1.50-1.10(m，3H)，1.09(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例342 N-(5-((2S,4S,5R,6S)-4-氨基-5-羟基-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺342
根据实施例341的操作，还得到342(绝对立体化学是主观的)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.76(s，1H)，8.36(s，1H)，8.15(s，1H)，7.46-7.43(m，1H)，7.07-7.04(m，2H)，4.82-4.79(d，1H)，3.80(s，3H)，3.47-3.45(d，1H)，2.96-2.95(s，1H)，2.08-2.05(m，1H)，1.81-1.74(m，4H)，1.54-1.52(m，3H)，1.02(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 464(M+1)。
实施例343 N-(5-((2R,4R,5S,6R)-4-氨基-5-羟基-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺343
根据实施例341的操作，将2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酸(参见US2012/225061)并分离对映异构体，然后进行Boc脱保护(SFC；Chiralpak IC)，得到343。注意：绝对立体化学是主观的。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.10(s，1H)，8.43-8.40(m，1H)，8.27(s，1H)，7.72-7.69(m，1H)，7.51-7.47(m，1H)，7.07-7.04(m，2H)，4.78-4.75(m，1H)，3.79-3.78(m，3H)，3.37-3.34(m，1H)，2.81-2.79(m，1H)，2.00-1.94(m，1H)，1.64-1.55(m，4H)，0.94-0.93(m，3H)，0.79(s，3H)。LCMS(ES+)m/z476(M+1)。
实施例344 N-(5-((2S,4S,5R,6S)-4-氨基-5-羟基-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺344
根据实施例343的操作，还得到344(绝对立体化学是主观的)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.09(s，1H)，8.42-8.40(m，1H)，8.26(s，1H)，7.72-7.69(m，1H)，7.49-7.47(m，1H)，7.07-7.04(m，2H)，4.78-4.76(m，1H)，3.79(s，3H)，3.37-3.36(m，1H)，2.83-2.81(m，1H)，1.98-1.95(m，1H)，1.65-1.57(m，4H)，0.94-0.93(m，3H)，0.80(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 476(M+1)。
实施例345 5-氨基-N-(5-((2R,4R,5S,6R)-4-氨基-5-羟基-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺345
根据实施例341的操作，将2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸替换成5-(叔丁氧羰基氨基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酸(实施例8)并分离对映异构体，然后进行Boc脱保护(SFC；Chiralpak AD-H)，得到345。注意：绝对立体化学是主观的。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.39(s，1H)，7.90-7.89(m，1H)，7.60-7.55(m，1H)，7.47(s，2H)，7.27-7.24(m，2H)，4.89-4.86(m，1H)，4.37(s，1H)，3.76(s，3H)，2.74-2.72(m，1H)，1.86-1.83(m，1H)，1.46-1.44(m，1H)，1.36-1.28(m，1H)，1.02(d，J＝7Hz，3H)，0.80(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例346 5-氨基-N-(5-((2S,4S,5R,6S)-4-氨基-5-羟基-5,6-二甲基四氢-2H-吡喃-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺346
根据实施例345的操作，还得到346(绝对立体化学是主观的)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.39(s，1H)，7.90-7.89(m，1H)，7.60-7.55(m，1H)，7.47(s，2H)，7.27-7.24(m，2H)，4.89-4.86(m，1H)，4.37(s，1H)，3.76(s，3H)，2.74-2.72(m，1H)，1.86-1.83(m，1H)，1.46-1.44(m，1H)，1.36-1.28(m，1H)，1.02(d，J＝7Hz，3H)，0.80(s，3H)。LCMS(ES+)m/z 479(M+1)。
实施例347 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺347
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体102)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(2,6-二氟苯基)硼酸，得到347。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ10.13(s，1H)，8.65(s，1H)，7.94(s，1H)，7.69-7.65(m，1H)，7.40-7.36(m，2H)，5.11-5.09(m，1H)，3.85-3.79(m，2H)，3.72(s，3H)，3.57(s，2H)，3.46-3.43(m，1H)，3.30(s，1H)，3.01(s，3H)，2.43-2.37(m，1H)，1.74-1.58(m，3H)。LCMS(ES+)m/z464(M+1)。
实施例348 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-甲基吡啶-2-基)噻唑-4-甲酰胺348
根据实施例101的操作，以((3S,4R,7S)-7-(4-(2-溴噻唑-4-甲酰胺基)-1-甲基-1H-吡唑-5-基)-3-甲氧基氧杂环庚-4-基)氨基甲酸叔丁酯(中间体102)为起始原料，并将3,6-二氢-2H-吡喃-4-硼酸频哪醇酯替换成(3-甲基吡啶-2-基)硼酸，得到348。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.67(s，1H)，8.52-8.51(m，1H)，8.27(s，1H)，8.23(s，1H)，7.67-7.65(m，1H)，7.29-7.26(m，1H)，5.03-5.00(m，1H)，4.04-3.93(m，2H)，3.78(s，3H)，3.56-3.54(m，1H)，3.38-3.36(m，1H)，3.33(s，3H)，2.88(s，3H)，2.61(s，2H)，2.13-2.09(m，1H)，1.98-1.70(m，2H)，1.68-1.56(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 443(M+1)。
实施例349 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-氯-5-氟吡啶-4-基)噻唑-4-甲酰胺349
根据实施例101的操作，制备349。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.83(s，1H)，8.63(s，1H)，8.56(s，1H)，8.14(s，1H)，4.57(m，1H)，4.26(m，2H)，3.88(m，1H)，3.85(s，3H)，3.42(m，1H)，1.99(m，2H)，1.79(m，1H)，1.69(m，1H)，1.56(s，2H)。LCMS(ES+)m/z 469.1(M+1)。
实施例350 N-(5-((2S,5R,6R)-5-氨基-6-羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺350
根据实施例101的操作，制备350。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ10.05(s，1H)，8.63(s，1H)，7.90(s，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.38-7.35(m，2H)，5.03-5.00(m，1H)，4.79(bs，1H)，3.96-3.93(m，1H)，3.88-3.87(m，1H)，3.73(s，3H)，3.63-3.59(m，1H)，3.13-3.11(m，1H)，2.22-2.18(m，1H)，1.83-1.81(m，1H)，1.64-1.58(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 450.1(M+1)。
实施例351 N-(5-((2R,5S,6S)-5-氨基-6-羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺351
根据实施例101的操作，制备351。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ10.07(s，1H)，8.63(s，1H)，7.90(s，1H)，7.68-7.65(m，1H)，7.38-7.35(m，2H)，5.04-5.01(m，1H)，4.71(bs，1H)，3.94-3.90(m，1H)，3.85-3.84(m，1H)，3.73(s，3H)，3.63-3.59(m，1H)，3.10-3.08(m，1H)，2.24-2.20(m，1H)，1.80-1.58(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 450.1(M+1)。
实施例352 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺352
根据实施例101的操作，制备352。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.64(s，1H)，7.73-7.34(m，4H)，4.82-4.79(d，2H)，3.84-3.75(m，6H)，2.81-2.77(s，1H)，2.05-1.51(m，6H)。LCMS(ES+)m/z 450.1(M+1)。
实施例353 N-(5-((2R,5S,6R)-5-氨基-6-羟基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺353
根据实施例101的操作，制备353。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.64(s，1H)，7.74-7.34(m，4H)，4.82-4.74(m，2H)，3.84-3.76(m，6H)，2.80-2.76(s，1H)，2.05-1.48(m，6H)。LCMS(ES+)m/z 450.1(M+1)。
实施例354 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4-(二甲基氨基甲酰基)-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺354
根据实施例101的操作，制备354。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.81(s，1H)，8.36(s，1H)，8.14(s，1H)，7.14(d，J＝8.5Hz，2H)，4.59-4.55(m，1H)，4.49–4.32(m，2H)，4.02–3.92(m，1H)，3.82(s，3H)，3.53-3.46(m，1H)，2.11–1.99(m，2H)，1.89–1.81(m，1H)，1.32-1.26(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 523.2(M+1)。
实施例355 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-甲基苯基)噻唑-4-甲酰胺355
根据实施例101的操作，制备355。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.04(s，1H)，8.30(s，1H)，8.22(s，1H)，6.92(d，J＝8Hz，2H)，4.99-4.97(m，1H)，4.15(dd，J＝3.2Hz，10.4Hz，1H)，3.94(dd，J＝6.4Hz，4Hz，1H)，3.76(s，3H),3.74-3.72(m，1H)，3.62-3.54(m，1H)，3.32(s，3H)，2.39(s，3H)，1.90–1.87(m，1H)，1.87–1.85(m，1H)，1.75–1.67(m，2H),1.65-1.57(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 478.1(M+1)。
实施例356 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-5-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺356
根据实施例101的操作，制备356。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.54(s，1H)，7.97-7.95(m，1H),7.72(s，1H),7.43-7.39(m,1H),7.18-7.15(m,1H)4.83–4.81(dd，J＝8.0，2.8Hz，1H)，4.44–4.33(dm,，J＝38.8Hz，1H)，4.22–3.95(m，2H)，3.87(s，3H),3.83(s,3H),3.25-3.19(m,1H)，2.13–2.10(m，1H)，1.94–1.66(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 464.1(M+1)。
实施例357 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺357
根据实施例101的操作，制备357。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.65(s，1H)，8.16(s，2H)，7.68(d，J＝9.0Hz，1H)，7.50(t，J＝2.2Hz，1H)，7.39(t，J＝7.5Hz，1H)，7.02-7.00(m，1H)，4.63-4.41(m，3H)，4.05-3.95(m，1H)，3.89(s，3H)，3.83(s，3H)，3.65-3.58(m，1H)，2.10–2.07(m，2H)，1.88–1.72(m，2H)，1.32-1.26(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 446.2(M+1)。
实施例358 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4-环丙基-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺358
根据实施例101的操作，制备358。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.68(s，1H)，8.29(s，1H)，8.09(s，1H)，6.75(d，J＝10.1Hz，2H)，4.70–4.52(m，1H)，4.50–4.28(m，2H)，3.97(ddd，J＝33.0，14.6，4.2Hz，1H)，3.83(s，3H)，3.49(dt，J＝17.0，8.6Hz，1H)，2.07(dd，J＝10.9，6.4Hz，3H)，1.99–1.64(m，4H)，1.35–0.98(m，2H)，0.92–0.68(m，2H)。LCMS(ES+)m/z492.2(M+1)。
实施例359 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(4-氯-2-氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺359
根据实施例101的操作，制备359。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ10.16(s，1H)，8.26-8.23(m，1H)，8.12-8.08(m，1H)，7.89(s，1H)，7.80-7.77(m，1H)，7.66-7.64(m，1H)，7.52-7.50(m，1H)，4.84-4.82(m，1H)，4.34-3.93(m，3H)，3.76(s，3H)，3.10-3.07(m，1H)，2.08-2.05(m，1H)，1.79-1.63(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 480.1(M+1)。
实施例360 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟-3-甲基磺酰基-苯基)噻唑-4-甲酰胺360
根据实施例101的操作，制备360。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.95(s，1H)，8.71(s，1H)，8.09(ddd，J＝9.2，8.0，5.9Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.60(t，J＝9.3Hz，1H)，4.83(dd，J＝10.5，3.8Hz，1H)，4.39–4.24(m，1H)，4.22–4.10(m，1H)，4.05–3.89(m，1H)，3.77(s，3H)，3.40(s，3H)，2.12–2.02(m，1H)，1.86–1.74(m，2H)，1.72–1.64(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 530.11(M+1)。
实施例361 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2-氟-3-甲基-苯基)噻唑-4-甲酰胺361
根据实施例101的操作，制备361。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.52(s，1H)，8.29(t，J＝7.7Hz，1H)，7.89(s，1H)，7.46(t，J＝7.4Hz，1H)，7.28(t，J＝7.7Hz，1H)，4.87(dd，J＝10.7，3.6Hz，1H)，4.60–4.37(m，1H)，4.31(dd，J＝22.4，14.9Hz，1H)，4.20–3.95(m，1H)，3.78(s，3H)，3.39–3.29(m，1H)，2.36(d，J＝2.2Hz，3H)，2.14–2.03(m，1H)，1.91–1.68(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 448.2(M+1)。
实施例362 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2-氟-3-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺362
根据实施例101的操作，制备362。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.79(s，1H)，8.28(s，1H)，8.22(s，1H)，8.01-7.99(m，1H)，7.22-7.19(m，1H)，7.08-7.04(m，1H)，4.64-4.55(m，3H)，4.20-3.97(m，1H)，3.95(s，3H)，3.82(s，3H)，3.64-3.60(m，1H)，2.09-2.05(m，2H)，1.83-1.77(m，2H)，1.55(s，2H)。LCMS(ES+)m/z 464.1(M+1)。
实施例363 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(3-环丙基-2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺363
根据实施例101的操作，制备363。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.69(s，1H)，8.31(s，1H)，8.10(s，1H)，7.07–6.86(m，2H)，4.66–4.53(m，1H)，4.42(dd，J＝13.6，6.7Hz，1H)，3.97(ddd，J＝32.6，14.6，4.1Hz，1H)，3.83(s，3H)，3.50(dt，J＝18.0，9.0Hz，1H)，2.19–2.00(m，3H)，1.84(m，1H)，1.78–1.63(m，1H)，1.07–0.96(m，2H)，0.73(q，J＝5.2Hz，2H)。LCMS(ES+)m/z 492.2(M+1)。
实施例364 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,4,6-三氟苯基)噻唑-4-甲酰胺364
根据实施例101的操作，制备364。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.92(s，1H)，8.63(s，1H)，7.81(s，1H)，7.48–7.45(t，J＝7.2Hz，2H)，4.82–4.79(m，1H)，4.37–4.27(m，1H)，4.20–4.12(m，1H)，4.03–3.92(m，1H)，3.77(s，3H)，3.21–3.19(m，1H)，2.07–2.03(m，1H)，1.80–1.67(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 470.1(M+1)。
实施例365 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟-4-((S)-1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酰胺365
根据实施例101的操作，制备365。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.89(s，1H)，8.56(s，1H)，8.28–8.18(m，1H)，7.90(s，1H)，7.52–7.46(m，1H)，5.63–5.50(m，1H)，5.10–5.00(m，1H)，4.89(dd，J＝10.4，3.7Hz，1H)，4.58–4.41(m，1H)，4.39–4.26(m，1H)，4.18–4.00(m，1H)，3.78(s，3H)，2.13–2.04(m，1H)，1.89–1.68(m，5H)，1.39(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 496.2(M+1)。注意：苄型羟基的立体化学是主观指定的。
实施例366 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,3-二氟-4-((R)-1-羟基乙基)苯基)噻唑-4-甲酰胺366
根据实施例101的操作，制备366。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.88(s，1H)，8.56(s，1H)，8.23(t，J＝7.7Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.54–7.45(m，1H)，5.58(d，J＝4.6Hz，1H)，5.10–5.00(m，1H)，4.89(dd，J＝10.5，3.7Hz，1H)，4.60–4.41(m，1H)，4.39–4.24(m，1H)，4.19–3.99(m，1H)，3.78(s，3H)，2.14–2.03(m，1H)，1.89–1.67(m，5H)，1.39(d，J＝6.5Hz，3H)。LCMS(ES+)m/z 496.2(M+1)。注意：苄型羟基的立体化学是主观指定的。
实施例367 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-异丁酰基苯基)噻唑-4-甲酰胺367
根据实施例101的操作，制备367。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.81(s，1H)，8.39(s，1H)，8.15(s，1H)，7.62(d，J＝9.0Hz，1H)，4.61-4.33(m，3H)，4.06-3.93(m，1H)，3.82(s，3H)，3.51-3.44(s，2H)，2.10–1.99(m，2H)，1.85–1.85(m，1H)，1.76-1.70(m，1H)，1.26(d，J＝7.0Hz，6H)。LCMS(ES+)m/z 522.2(M+1)。
实施例368 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-甲氧基氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-3-甲氧基苯基)噻唑-4-甲酰胺368
根据实施例101的操作，制备368。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：10.13(s，1H)，8.65(s，1H)，7.95(s，1H)，7.44-7.41(m，1H)，7.33-7.30(m，1H)，5,11(t，1H)，3.91(s，3H)，3.86-3.83(m，1H)，3.78-3.74(m，1H)，3.21(s，3H)，3.43-3.41(m，1H)，3.30-3.29(m，1H)，3.02(s，3H)，2.46-2.41(m，1H)，1.71-1.52(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 494.2(M+1)。
实施例369 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2-氟-6-甲基-苯基)-5-甲基-噻唑-4-甲酰胺369
根据实施例101的操作，制备369。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.75–9.64(s，1H)，7.80–7.75(s，1H)，7.49–7.38(m，1H)，7.26–7.16(m，2H)，4.82–4.74(dd，J＝10.9，3.5Hz，1H)，4.41–4.23(m，1H)，4.17–4.04(m，1H)，4.03–3.86(ddd，J＝37.7，15.0，3.4Hz，1H)，3.79–3.74(s，3H)，3.23–3.07(m，1H)，2.88–2.83(s，3H)，2.43–2.39(s，3H)，2.10–1.96(m，1H)，1.91–1.75(d，J＝11.7Hz，1H)，1.73–1.62(s，2H)。LCMS(ES+)m/z462.2(M+1)。
实施例370 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)-5-甲基-噻唑-4-甲酰胺370
根据实施例101的操作，制备370。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.91–9.85(s，1H)，7.88–7.83(s，1H)，7.67–7.57(tt，J＝8.4，6.4Hz，1H)，7.36–7.25(m，2H)，4.85–4.78(dd，J＝10.7，3.5Hz，1H)，4.51–4.31(m，1H)，4.25–4.11(m，1H)，4.10–3.93(ddd，J＝37.0，14.9，3.6Hz，1H)，3.79–3.72(s，3H)，3.35–3.23(m，1H)，2.88–2.83(s，3H)，2.11–2.00(m，1H)，1.87–1.66(m，3H)。LCMS(ES+)m/z 466.2(M+1)。
实施例371 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-((S)-四氢呋喃-2-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺371
根据实施例101的操作，制备371。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.71(s，1H)，8.33(s，1H)，8.11(s，1H)，7.08(d，J＝3.0Hz，2H)，4.97-4.95(m，1H)，4.61-4.44(m，3H)，4.14-3.98(m，3H)，3.88(s，3H)，3.52-3.50(m，1H)，2.43-2.40(m，1H)，2.12-1.80(m，7H)，1.27-1.23(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 522.2(M+1)。注意：苄型THF的立体化学是主观指定的。
实施例372 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4,5-二甲基-1H-吡唑-3-基)噻唑-4-甲酰胺372
根据实施例101的操作，制备372。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.87(s，1H)，9.48(s，1H)，8.27(s，1H)，7.81(s，1H)，4.84–4.81(dd，J＝8.4，3.2，1H)，，4.46–4.33(dm，J＝44.0Hz，1H)，4.19–3.99(m，2H)，3.79(s，3H)，3.25-3.14(m,1H)，2.33(s,3H)，2.23(s,3H)，2.10–2.06(m,1H)，1.91–1.62(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 434.2(M+1)。
实施例373 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(6,6-二甲基-4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-基)噻唑-4-甲酰胺373
根据实施例101的操作，制备373。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：12.84(s，1H)，9.46(s，1H)，8.26(s，1H)，7.80(s，1H)，4.83(dd，J＝4.0，11.0Hz，1H)，4.44-4.18(m，1H)，4.11-4.00(m，2H)，3.79(s，3H)，3.23-3.15(m，1H)，2.94-2.78(m，2H)，2.43(s，2H)，2.11-2.06(m，1H)，1.90-1.82(m，1H)，1.77-1.73(m，4H)，1.58-1.57(m，2H)，1.01(s，6H)。LCMS(ES+)m/z488.2(M+1)。
实施例374 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-3-基)噻唑-4-甲酰胺374
根据实施例101的操作，制备374。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ12.89(s，1H)，9.45(s，1H)，8.25(s，1H)，7.77(s，1H)，4.82-4.77(m，1H)，4.44-4.01(m，4H)，3.78(s，3H)，3.19-3.16(m，1H)，2.92-2.78(m，2H)，2.63(s，2H)，2.08-1.88(m，4H)，1.87-1.76(m，4H)，1.30(s，1H)。LCMS(ES+)m/z 460.2(M+1)。
实施例375 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-6-(4-氯-2,6-二氟苯基)-5-氟吡啶-2-甲酰胺375
根据实施例101的操作，制备375。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.24(s，1H)，8.34-8.31(m，1H)，8.20-8.17(m，1H)，7.95(s，1H)，7.62(d，J＝7.5Hz，2H)，4.86–4.84(m，1H)，4.29–4.16(m，1H)，4.05-3.88(m，2H)，3.76(s，3H)，3.08–3.02(m，1H)，2.09–2.05(m，1H)，1.75–1.64(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 498.1(M+1)。
实施例376 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-[3-(二甲基氨基甲酰基)-2,6-二氟-苯基]噻唑-4-甲酰胺376
根据实施例101的操作，制备376。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.92–9.84(s，1H)，8.69–8.63(s，1H)，7.81–7.77(s，1H)，7.70–7.60(td，J＝8.1，6.3Hz，1H)，7.46–7.37(t，J＝9.2Hz，1H)，4.87–4.78(dd，J＝10.8，3.4Hz，1H)，4.59–4.37(dd，J＝51.8，6.8Hz，1H)，4.28–4.13(m，1H)，4.13–3.94(ddd，J＝37.2，15.0，3.5Hz，1H)，3.85–3.74(s，3H)，3.06–2.99(s，3H)，2.94–2.86(s，3H)，2.14–2.02(m，1H)，1.95–1.67(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 523.2(M+1)。
实施例377 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-[3-(二氟甲基)-2,6-二氟-苯基]噻唑-4-甲酰胺377
根据实施例101的操作，制备377。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.98–9.92(s，1H)，8.69–8.66(s，1H)，7.95–7.85(q，J＝7.6Hz，1H)，7.84–7.80(s，1H)，7.55–7.43(dd，J＝17.7，8.6Hz，1H)，7.41–7.13(m，1H)，4.89–4.79(d，J＝9.3Hz，1H)，4.54–4.34(d，J＝49.6Hz，1H)，4.32–3.92(m，2H)，3.82–3.76(s，3H)，2.15–2.01(d，J＝13.0Hz，1H)，1.93–1.65(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 502.1(M+1)。
实施例378 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-[3-(二氟甲基)-2-氟-6-甲氧基-苯基]噻唑-4-甲酰胺378
根据实施例101的操作，制备378。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.93–9.88(s，1H)，8.61–8.57(d，J＝1.5Hz，1H)，7.83–7.75(t，J＝8.5Hz，1H)，7.75–7.70(s，1H)，7.37–6.90(m，4H)，4.90–4.66(m，2H)，4.42–4.27(dd，J＝23.5，14.9Hz，1H)，4.22–4.03(dd，J＝37.7，15.6Hz，1H)，4.02–3.96(s，3H)，3.83–3.78(s，3H)，3.64–3.49(s，1H)，2.22–2.09(d，J＝11.9Hz，1H)，2.00–1.75(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 514.1(M+1)。
实施例379 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(1H-吡唑-3-基)噻唑-4-甲酰胺379
根据实施例101的操作，制备379。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.78(s，1H)，8.29(s，1H)，7.95–7.87(m，2H)，6.96(d，J＝2.4Hz，1H)，4.88(dd，J＝10.4，3.8Hz，1H)，4.59–4.38(m，1H)，4.37–4.23(m，1H)，4.19–3.95(m，1H)，3.77(s，3H)，3.39–3.25(m，1H)，2.50(ddd，J＝23.7，3.8，1.9Hz，1H)，2.13–2.03(m，1H)，1.89–1.69(m，4H)。LCMS(ES+)m/z 406.2(M+1)。
实施例380 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟-4-((R)-四氢呋喃-2-基)苯基)噻唑-4-甲酰胺380
根据实施例101的操作，制备380。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ9.71(s，1H)，8.33(s，1H)，8.12(s，1H)，7.08(d，J＝9.5Hz，2H)，4.98-4.95(m，1H)，4.61-4.44(m，3H)，4.14-3.98(m，3H)，3.85(s，3H)，3.55-3.48(m，1H)，2.44-2.40(m，1H)，2.11-1.73(m，8H)，1.28-1.26(m，1H)。LCMS(ES+)m/z 522.2(M+1)。注意：苄型THF的立体化学是主观指定的。
实施例381 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吲唑-3-基)噻唑-4-甲酰胺381
根据实施例101的操作，制备381。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ10.64(s，1H)，9.38(s，1H)，8.47-8.45(m，1H)，8.22(s，1H)，8.06(s，1H)，7.56-7.54(m，1H)，7.50-7.47(m，1H)，7.38-7.26(m，1H)，4.68-4.65(m，1H)，4.47-4.40(m，2H)，4.09-4.02(m，1H)，3.88(s，3H)，3.48-3.47(m，1H)，2.17-2.13(m，2H)，1.90-1.89(m，1H)，1.72-1.70(m，1H)，1.59(s，2H)。LCMS(ES+)m/z456.1(M+1)。
实施例382 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-[2-氟-6-(羟基甲基)苯基]噻唑-4-甲酰胺382
根据实施例101的操作，制备382。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.77(s，1H)，8.60(s，1H)，7.71(s，1H)，7.63–7.52(m，2H)，7.36–7.27(m，1H)，4.79(dd，J＝11.0，3.6Hz，1H)，4.71(d，J＝3.3Hz，2H)，4.40(dd，J＝49.4，6.9Hz，1H)，4.23–4.11(m，1H)，4.05–3.89(m，1H)，3.80(s，3H)，3.26–3.19(m，1H)，2.11–2.03(m，1H)，1.96–1.84(m，1H)，1.76–1.66(m，2H)。LCMS(ES+)m/z 464.2(M+1)。
实施例383 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(3-吡啶基)噻唑-4-甲酰胺383
根据实施例101的操作，制备383。LCMS(ES+)m/z 417.1(M+1)。
实施例384 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2-异丙基氧基-3-吡啶基)噻唑-4-甲酰胺384
根据实施例101的操作，制备384。1H NMR(400MHz，DMSO)δ9.91–9.87(s，1H)，8.85–8.77(dd，J＝7.6，2.0Hz，1H)，8.48–8.45(s，1H)，8.36–8.30(dd，J＝4.8，1.9Hz，1H)，7.91–7.87(s，1H)，7.20–7.13(dd，J＝7.7，4.8Hz，1H)，5.57–5.49(m，1H)，4.91–4.83(dd，J＝10.5，3.6Hz，1H)，4.58–4.39(m，1H)，4.39–4.25(dd，J＝22.6，15.0Hz，1H)，4.19–4.00(ddd，J＝39.7，15.1，3.4Hz，1H)，3.80–3.76(s，3H)，3.35–3.27(m，1H)，2.13–2.03(m，1H)，1.92–1.67(m，3H)，1.51–1.42(d，J＝6.2Hz，6H)。LCMS(ES+)m/z 475.2(M+1)。
实施例385 N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-[6-(二甲基氨基)-3-吡啶基]噻唑-4-甲酰胺385
根据实施例101的操作，制备385。LCMS(ES+)m/z 460.2(M+1)。
实施例386 2-(6-乙酰胺基-3-吡啶基)-N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]噻唑-4-甲酰胺386
根据实施例101的操作，制备386。LCMS(ES+)m/z 474.2(M+1)。
实施例387 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5-氟-1-甲基-2-氧代-1,2-二氢吡啶-4-基)噻唑-4-甲酰胺387
根据实施例101的操作，制备387。1H NMR(400MHz，CDCl3-d)δ9.73(s，1H)，8.41(s，1H)，8.26(s，1H)，7.51(d，J＝5.6Hz,1H)，7.38(d，J＝4.8Hz,1H)，4.48-4.67(m，3H)，3.90–4.01(m，1H)，3.83(s，3H)，3.66-3.74(m，1H)，3.55(s，3H)，2.10-2.14(m，2H)，1.83-1.89。LCMS(ES+)m/z 465.1(M+1)。
实施例388 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(1H-吡唑-1-基)噻唑-4-甲酰胺388
根据实施例101的操作，制备388。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.72(s，1H)，8.56(s，1H)，8.17(s,1H)7.89-7.93(d，2H)，6.71-6.72(t，1H)，4.89-4.91(m，1H)，4.00-4.56(m，3H)，3.78(s，3H)，2.36-2.36(s，1H)，2.08-2.12(m，1H)，1.68-1.82(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 406.1(M+1)。
实施例389 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4,5,6,7-四氢-1H-吲唑-1-基)噻唑-4-甲酰胺389
根据实施例101的操作，制备389。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.36(s，1H)，8.10(s，1H)，7.76(s，1H)，7.64(s，1H)，4.82(dd，J＝10.5，6.5Hz，1H)，4.45-4.34(m，1H)，4.15-4.00(m，2H)，3.78(s，3H)，3.24-3.09(m，3H)，2.09-2.05(m，1H)，1.88-1.80(m，3H)，1.72-1.65(m，6H)。LCMS(ES+)m/z 460.2(M+1)。
实施例390 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(4,5,6,7-四氢-2H-吲唑-2-基)噻唑-4-甲酰胺390
根据实施例101的操作，制备390。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ9.69(s，1H)，8.22(s，1H)，8.07(s，1H)，7.88(s，1H)，4.8(dd，J＝10.0，6.5Hz，1H)，4。56-4.44(m，1H)，4.33(dd，J＝22.5，7.0Hz，1H)，4.13-4.01(m，1)，3.77(s，3H)，3.28-3.27(m，2H)，2.67-2.65(m，2H)，2.57(s，2H)，2.10-2.05(m，1H)，1.89-1.70(m，8H)。LCMS(ES+)m/z 460.2(M+1)。
实施例391 N-(5-((2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟氧杂环庚-2-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(5,7-二氟-2,3-二氢苯并呋喃-6-基)噻唑-4-甲酰胺391
根据实施例101的操作，制备391。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ9.87(s，1H)，8.63(s，1H)，7.76(s，1H)，7.31-7.29(d，J＝7.2Hz，1H)，4.87–4.71(m，4H)，，4.33–4.11(m，2H)，3.81(s，3H)，3.58-3.55(m,1H)，3.04-3.01(m，2H)，2.16–2.14(m，1H)，1.96–1.73(m，5H)。LCMS(ES+)m/z 494.1(M+1)。
实施例901 Pim激酶结合活性
生成PIM-1、-2和-3酶作为在细菌中表达的融合蛋白，并通过IMAC柱色谱纯化(Sun,X.,Chiu,J.F.,and He,Q.Y.(2005)Expert Rev.Proteomics,2:649-657)。荧光标记的Pim-特异性肽底物由American Peptide Company(Sunnyvale,CA)定制合成。反应缓冲液含有10mM HEPES,pH 7.2,10mMMgCl2,0.01％Tween 20,2mM DTT。终止缓冲液含有190mM HEPES,pH 7.2,0.015％Brij-35,0.2％包被试剂3(Coating Reagent 3)(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA),20mM EDTA。分离缓冲液含有100mM HEPES,pH 7.2,0.015％Brij-35,0.1％包被试剂3,1:200包被试剂8(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA),10mM EDTA和5％DMSO。
PIM反应在384孔板中以10μL/孔的最终体积实施。标准酶反应，通过将5μL 2X ATP和测试化合物添加至在缓冲液中的5μL的2X酶和FAM-肽(含有20pM PIM1、50pM PIM2或55pM PIM3、1μM FAM-肽和10μM ATP)中启动。于室温温育90分钟后，磷酸化反应通过添加10μL终止缓冲液而停止。在各独立反应中的产物和底物于12-吸管的微流控芯片(Caliper LifeSciences,Hopkinton,MA)(在Caliper(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA)上运行)上分离。分离的产物和底物通过使用Caliper’sOptimizer软件(Hopkinton,MA)选择电压和压力进行优化。分离条件使用-500V的下游电压、-2150V的上游电压和-1.2psi的筛选压力。产物和底物荧光团在488nm激发并在530nm检测。底物转化率使用HTS Well Analyzer软件(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA)由电泳图计算。计算测试化合物的Ki值。示例性化合物的代表性PIM1LC3K Ki(单位：微摩尔)参见表1。
实施例902 体外细胞增殖效力测试
BaF3亲本系从DSMZ库获得。生成以PIM1或PIM2转染的BaF3系。小鼠IL-3购自R&D Systems。G418购自Clontech。BaF3亲本系的媒介含有RPMI、10％FBS、2mM L-谷氨酰胺、2ng/mL mIL-3。BaF3PIM1&2系的媒介含有RPMI、10％FBS、2mM L-谷氨酰胺、250μg/mL。MM1.S(多发性骨髓瘤细胞)系的媒介含有RPMI、10％FBS、2mM L-谷氨酰胺。
BaF3、鼠白介素-3依赖性前-B细胞系、亲本细胞、BaF3PIM1细胞、BaF3PIM2细胞和MM1.S(多发性骨髓瘤)细胞在384孔板中分别以2k/孔、5k/孔、5k/孔和10k/孔接种，45μL/孔。以5μL/孔加入测试化合物。将BaF3细胞(亲本和转染的)温育过夜，同时MM1.S细胞于37℃、5％CO2温育72小时。以50μL/孔添加CELL TITER试剂(Promega)，各板温育30分钟，且在HT Analyst上读取它们的发光读数。计算测试化合物的IC50/EC50值。
本发明的代表性化合物如上所述进行测试并且发现它们显示如下表2a、2b和2c中所示的Ki/IC50/EC50(单位：微摩尔)。
表2a
表2b
表2c
实施例903 hERG测试
hERG测试(2-pt)按如下进行：
根据本研究机构的标准操作(ChanTest，Cleveland，OH)，通过选择本发明化合物来评估hERG(人Ether-à-go-go-相关基因)钾通道电流抑制的体外潜力。简而言之，加入测试品后，在自动化PatchXpress 7000A系统(MolecularDevices，Sunnyvale，CA)上，在1和10mM评估表达hERG的HEK-293细胞(n＝2/浓度)，持续5分钟。hERG测试(2-pt)数据表示为最大电流的百分比。
hERG测试(IC50)按如下进行：
根据本研究机构的标准操作(ChanTest，Cleveland，OH)来评估hERG(人Ether-à-go-go-相关基因)钾通道电流抑制的体外潜力。简而言之，加入测试品后，使用自动化PatchXpress 7000A系统(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)来确定表达hERG的HEK-293细胞(n＝2/浓度)的hERG抑制(最大百分比)，持续5分钟。基于hERG抑制，在0.01，0.1，1，10，30和100μM的测试品浓度计算IC50值。
测定一些本发明化合物的hERG IC50和IC20值并与化合物5-氨基-N-(5-((4R,5R)-4-氨基-5-氟氮杂环庚烷-1-基)-1-甲基-1H-吡唑-4-基)-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺相比较，该化合物为其中相应的R2为N-连接的杂环基或C-连接的碳环基部分的一系列PIM抑制剂中的No.139(US2013/0079321)。US 2013/0079321的这个化合物No.139的IC50/20值分别为2.7和0.7微摩尔(μM)。相比较，本发明表1b中的化合物No.154，5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6R)-5-氨基-6-甲氧基-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺的IC50/20值分别为9.1和1.6微摩尔。本发明表1b中的化合物No.177，5-氨基-N-[5-[(2S,5R,6S)-5-氨基-6-氟-氧杂环庚-2-基]-1-甲基-吡唑-4-基]-2-(2,6-二氟苯基)噻唑-4-甲酰胺的IC50/20值分别为16和3.9微摩尔。这个hERG数据意味着本发明化合物表现出对QTc间期延长降低的易感性。过分延长的QTc间期可能会导致严重的室性心律失常和猝死(DeBruin，M.L等人，(2005)European Heart Journal，26:590-597；Redfern，W.S.等人，(2003)Cardiovascular Research，58:32-45)。
当用于本说明书和所附权利要求书中时，词语“包括”、“包含”、“含有”和“含”意在指明存在所述特征、整数、组成或步骤，但是它们并不排除存在或添加一个或多个其他特征、整数、组成、步骤或基团。
尽管出于理解清楚性的目的，通过解释和实施例的方式已经详细描述了前述发明，说明和实施例不应当理解为限制发明的范围。所有在本申请中引用的专利和科学文献的公开内容明确地以其整体引入作为参考。

Claims (30)

1.选自式I的化合物：
及其立体异构体、几何异构体、互变异构体或药学上可接受的盐，其中：
R1选自H、C1-C12烷基、C2-C12烯基、C2-C12炔基、C6-C20芳基、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C1-C20杂芳基和-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)；
R2选自以下结构：
其中波浪线表示连接位点；
R3独立地选自F、Cl、Br、I、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-C(CH3)3、-CH2CH(CH3)2、-CH＝CH2、-CH＝C(CH3)2、＝CH2、-CH2F、-CHF2、-CF3、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2、-CH2NHCH3、-CH2CH2NH2、-CH2CHCH2NH2、-CH2CH(CH3)NH2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH(CH3)2、-C(CH3)2CH2OH、-CH2CH2SO2CH3、-CN、-CO2H、-COCH3、-COCH2NH2、CO2CH3、-CO2C(CH3)3、-COCH(OH)CH3、-CONH2、-CONHCH3、-CON(CH3)2、-C(CH3)2CONH2、-NO2、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCH2CHF2、-NHCH2CF3、-NHCH2CH2OH、-NHCOCH3、-N(CH3)COCH3、-NHC(O)OCH2CH3、-NHC(O)OCH2Cl3、-NHC(O)OC6H5、-NHS(O)2CH3、-N(CH3)C(CH3)2CONH2、-N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3、＝O、-OH、-OCH3、-OCHF2、-OCH2F、-OCH2CH3、-OCH(CH3)2、-OCH2CH(CH3)2、-OC(CH3)3、-S(O)2N(CH3)2、-SCH3、-CH2OCH3、-S(O)2CH3、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环丁烷基、氧杂环丁烷-3-基甲基氨基、(3-甲基氧杂环丁烷-3-基)甲基氨基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、(哌啶-4-基)乙基)、吡喃基、(哌啶-4-基甲基)、吗啉代甲基和吗啉代；
或者其中两个孪位R3基团形成螺环，其选自环丙基、环丁基、环戊基、环己基、吡咯烷基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环丁烷基、吡咯烷基、哌嗪基或哌啶基环，其中所述螺环任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：-F、-OH、＝O、-CH3、-NH2、-CH2F、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2和-CF3；
或者其中两个邻位R3基团形成五-元或六-元杂环基稠和环，其中所述杂环基稠和环任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：-F、-OH、＝O、-CH3、-NH2、-CH2F、-CH2OH、-CH2OCH3、-CH2NH2和-CF3；
n为0、1、2、3、4、5或6；
X选自以下结构：
其中波浪线表示连接位点；
R4独立地为H、F、-CH3或-NH2；和
R5选自H、Cl、Br、C1-C12烷基、-O-(C1-C12烷基)、-(C1-C12亚烷基)-(C3-C12碳环基)、-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)、-(C2-C8亚烯基)-(C3-C12碳环基)、-(C2-C8亚烯基)-(C2-C20杂环基)、C6-C20芳基、-(C6-C20亚芳基)-(C2-C20杂环基)、-(C6-C20亚芳基)-(C6-C20亚芳基)、-(C6-C20亚芳基)-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)、-(C6-C20亚芳基)-O-(C2-C20杂环基)、-(C6-C20亚芳基)-O-(C1-C12烷基)、C3-C12碳环基、C2-C20杂环基、C1-C20杂芳基、-(C1-C20杂芳基)-(C2-C20杂环基)和-(C1-C20杂芳基)-(C1-C12烷基)；其中烷基、烯基、炔基、亚烷基、碳环基、杂环基、芳基和杂芳基任选被一个或多个独立地选自以下的基团所取代：F、Cl、Br、I、-CH3、-CH2CH3、-CH(CH3)2、-CH2CH(CH3)2、-CH2NH2、-CH2CH2NH2、-CH2CHCH2NH2、-CH2CH(CH3)NH2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH(CH2OH)2、-C(CH2OH)3、-CH(CH3)OH、-C(CH3)2OH、-CH(OH)CH(CH3)2、-C(CH3)2CH2OH、-CH2CH2SO2CH3、-CN、-CF3、-CHF2、-CH2F、-CO2H、-COCH3、-COCH(CH3)2、-CO2CH3、-CO2C(CH3)3、-COCH(OH)CH3、-CONH2、-CONHCH3、-CON(CH3)2、-C(CH3)2CONH2、-NO2、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCOCH3、-N(CH3)COCH3、-NHS(O)2CH3、-N(CH3)C(CH3)2CONH2、-N(CH3)CH2CH2S(O)2CH3、＝O、-OH、-OCH3、-OCF3、-OCH(CH3)2、-S(O)2N(CH3)2、-SCH3、-CH2OCH3、-S(O)2CH3、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、氮杂环丁烷基、氮杂环庚烷基、氧杂环丁烷基、苯基、吡咯烷基、哌嗪基、哌啶基、(哌啶-4-基)乙基)、吡喃基、(哌啶-4-基甲基)、吗啉代甲基和吗啉代。
2.权利要求1的化合物，其中R1为H。
3.权利要求1的化合物，其中R1为C1-C12烷基或C3-C12碳环基。
4.权利要求3的化合物，其中R1选自-CH3、-CH2CH3、-CH2CHF2和-CH2CF3。
5.权利要求1的化合物，其中R1为-(C1-C12亚烷基)-(C2-C20杂环基)。
6.权利要求5的化合物，其中R1为氧杂环丁烷-3-基甲基。
7.权利要求5的化合物，其中R2具有以下结构：
8.权利要求1的化合物，其中R3独立地选自F、Cl、-OH、-CH3、-CH2CH3、-CF3、-NH2、-NHCH3、-N(CH3)2、-NHCH2CHF2、-NHCH2CF3、-CH2NHCH3和-OCH3；和n为1、2或3。
9.权利要求1的化合物，其中R4为-NH2。
10.权利要求1的化合物，其中R4为H。
11.权利要求1的化合物，其中R5为C6-C20芳基。
12.权利要求11的化合物，其中R5为被一个或多个F取代的苯基。
13.权利要求1的化合物，其具有式Ia的结构：
14.权利要求1的化合物，其具有式Ib的结构：
15.权利要求1的化合物，其具有式Ic的结构：
16.权利要求1的化合物，其具有式Id的结构：
17.权利要求1的化合物，其选自表1a。
18.权利要求1的化合物，其选自表1b。
19.权利要求1的化合物，其选自表1c。
20.药物组合物，其包含权利要求1-19中任一项的化合物和药学上可接受的载体、助流剂、稀释剂或赋形剂。
21.权利要求20的药物组合物，还包含化疗剂。
22.权利要求20的药物组合物，其用于治疗选自以下的疾病或障碍：癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病，以及由Pim激酶介导的疾病或障碍。
23.治疗疾病或障碍的方法，该方法包括向患有以下疾病或障碍的患者给药治疗有效量的权利要求20的药物组合物：癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病，以及由Pim激酶介导的疾病或障碍。
24.权利要求23的方法，其中所述疾病或障碍为选自以下的癌症：多发性骨髓瘤、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成胶状物细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞肺癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝脏和胆道癌、肾癌、胰腺癌、髓性障碍、淋巴瘤、毛细胞癌、口腔癌、鼻咽癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经系统癌、霍奇金癌、白血病、支气管癌、甲状腺癌、肝和肝内胆管癌、肝细胞癌、胃癌、神经胶状物瘤/成胶状物细胞瘤、子宫内膜癌、黑色素瘤、肾癌和肾盂癌、膀胱癌、子宫体癌、宫颈癌、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、淋巴细胞白血病、髓性白血病、口腔癌和咽癌、非霍奇金淋巴瘤、黑色素瘤和绒毛状结肠腺瘤。
25.权利要求24的方法，其进一步包括给药选自以下的额外治疗剂：化疗剂、抗炎剂、免疫调节剂、神经营养因子、心血管疾病的治疗剂、肝病治疗剂、抗病毒剂、血液疾病的治疗剂、糖尿病的治疗剂和免疫缺陷病的治疗剂。
26.权利要求1-19中任一项的化合物在制备用于治疗以下疾病的药物中的用途：癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病，其中所述药物介导Pim激酶。
27.用于治疗由Pim激酶介导的病症的试剂盒，其包含：
a)权利要求20的药物组合物；和
b)使用说明书。
28.权利要求1-19中任一项的化合物，其用于治疗癌症、免疫疾病、心血管疾病、病毒感染、炎症、代谢/内分泌功能紊乱和神经疾病，以及由Pim激酶介导的疾病或障碍。
29.权利要求1-19中任一项的化合物，其用于治疗选自以下的癌症：多发性骨髓瘤、乳腺癌、卵巢癌、宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、生殖泌尿道癌、食道癌、喉癌、成胶状物细胞瘤、神经母细胞瘤、胃癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、肺癌、表皮样癌、大细胞癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、小细胞肺癌、肺腺癌、骨癌、结肠癌、腺瘤、胰腺癌、腺癌、甲状腺癌、滤泡状癌、未分化癌、乳头状癌、精原细胞瘤、黑色素瘤、肉瘤、膀胱癌、肝脏和胆道癌、肾癌、胰腺癌、髓性障碍、淋巴瘤、毛细胞癌、口腔癌、鼻咽癌、咽癌、唇癌、舌癌、口癌、小肠癌、结肠-直肠癌、大肠癌、直肠癌、脑和中枢神经系统癌、霍奇金癌、白血病、支气管癌、甲状腺癌、肝和肝内胆管癌、肝细胞癌、胃癌、神经胶状物瘤/成胶状物细胞瘤、子宫内膜癌、黑色素瘤、肾癌和肾盂癌、膀胱癌、子宫体癌、宫颈癌、急性髓性白血病、慢性髓性白血病、淋巴细胞白血病、髓性白血病、口腔癌和咽癌、非霍奇金淋巴瘤、黑色素瘤和绒毛状结肠腺瘤。
30.如本文所描述的发明。
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