CN104585165A - 人体器官冷冻保护液 - Google Patents

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Abstract

为了使人体的器官组织细胞在温度下降的过程中,尽量不受到低温产生冰晶的损伤,要求在人体器官降温过程中加入冷冻保护液,使细胞在冷冻中能动性得到改善,但目前使用的冷冻保护液仍会造成细胞在降温过程中45%以上的损坏。本发明属于一种人体器官冷冻保护液,它是由含有下述原料的有效成份,重量百分比为:二甲基亚砜12-18%、乙二醇14-20%、丙三醇8-12%、蔗糖12-15%、聚乙二醇8-12%、聚蔗糖9-15%。本发明能在玻璃化冷冻法实施过程中,大幅减少器官组织细胞在冷冻过程中的损坏。

Description

人体器官冷冻保护液
技术领域
本发明属于一种人体器官冷冻保护液,适用于医学研究领域。
背景技术
目前,玻璃化冷冻技术作为一种快速冷冻细胞或组织的方法,随着辅助生殖技术的发展而受到广泛关注,在国外已将玻璃化冷冻技术扩展应用到了人体器官冷冻的研究当中。该项技术具有冷冻速度快、冻融损伤小,操作简单等优点,能够提高冷冻复苏后的存活率。实践中,人体器官冷冻极为困难,面临不少技术障碍。低温在达到一定的低温时,可以保存人体组织细胞的活力,但是细胞往往会在降温的过程中死亡。因为细胞富含水分,在降温过程中会形成冰晶对人体组织细胞造成损伤。为了使人体的器官组织细胞在温度下降的过程中,尽量不受到低温产生冰晶的损伤,要求在人体器官降温过程中加入冷冻保护液,使细胞在冷冻中能动性得到改善,但目前使用的冷冻保护液仍会造成细胞在降温过程中45%以上的损坏。
发明内容
 为了克服国内现有冷冻剂不能适应人体器官冷冻技术研究的要求,在玻璃化冷冻法中对细胞损伤过大,本发明希望提供一种新型人体器官冷冻保护液,能大幅减少细胞在冷冻过程中的损坏。
本发明含有下述原料的有效成份,重量百分比为:二甲基亚砜12-18%、乙二醇14-20%、丙三醇8-12%、蔗糖12-15%、聚乙二醇8-12%、聚蔗糖9-15%。
本发明最佳方案含有:二甲基亚砜15%、乙二醇15%、丙三醇10%、蔗糖14%、聚乙二醇10%、聚蔗糖11%。
本发明的优点是能在玻璃化冷冻法实施过程中大幅减少器官组织细胞在冷冻过程中的损坏。根据动物试验表明:采用传统的冷冻剂用玻璃化冷冻法冷冻器官组织细胞在36°C时,解冻的能动性为35%-45%,正常细胞存活率在45%-55%,70%以上的冷冻人体细胞为不可逆的损坏。而采用本发明的冷冻剂用玻璃化冷冻法在36°C时,解冻的能动性为78-88%,正常细胞仅减少16%-18%,仅有约18%左右的人体细胞为不可逆的损坏。
采用传统的冷冻剂冷冻人体器官组织细胞进行-196°C液氮中深度低温冷冻后,进行组织学和电镜检查,能恢复成正常细胞的比例不足60%,而采用本发明的冷冻保护液进行-196°C液氮中深度低温冷冻后,进行组织学和电镜检查,能恢复成正常细胞的比例达80%以上。本发明还具有原料易得,配制成本低,能大幅减少细胞在冷冻过程中损坏的优点。
具体实施方案
配方:二甲基亚砜15%、乙二醇15%、丙三醇10%、蔗糖14%、聚乙二醇10%、聚蔗糖11%,余量为常规溶剂,将二甲基亚砜和乙二醇溶于灭菌蒸馏水中,再加入其它余料混均,加入去离子水,用一个当量的氢氧化钠调PH值到7.4,加热致多余水份蒸发后,得本发明人体器官冷冻保护液,装瓶,蒸汽消毒灭菌。
所述的常规溶剂为去离子水、盐酸、氢氧化钠。
总之,本发明具有良好的效果,且还具有成本低,生产程序简单,稳定性好,可推广使用。

Claims (2)

1.一种人体器官冷冻保护液,其特征在于:含有下述原料的有效组份为,重量百分比为:二甲基亚砜12-18%、乙二醇14-20%、丙三醇8-12%、蔗糖12-15%、聚乙二醇8-12%、聚蔗糖9-15%。
2.根据权利要求1所述的人体器官冷冻保护液,其特征在于,含有:二甲基亚砜15%、乙二醇15%、丙三醇10%、蔗糖14%、聚乙二醇10%、聚蔗糖11%。
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PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
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