CN104546923A - 一种拟黑多刺蚁提取物及其提取方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物医药领域,具体的说是涉及一种拟黑多刺蚁提取物及其提取方法与应用。本发明所述拟黑多刺蚁提取物的制备方法,采用乙醇提取,石油醚萃取得到。本发明取药昆虫资源丰富,提取制备方法简单易行、原料来源方便易得、可用于拟黑多刺蚁提取物的大量制备;成本低、污染小,利于节能减排条件下的大规模生产,产业化前景十分明确。该拟黑多刺蚁提取物可用于多种目的,从食品、保健品用途到特殊疾病的药物制备用途,使其在预防或治疗抑郁症方面的临床应用具备科学依据。
Description
技术领域
本发明属于天然提取物技术领域,具体涉及一种拟黑多刺蚁提取物及其提取方法与应用。
背景技术
抑郁症又称抑郁障碍,以显著而持久的心境低落为主要临床特征,是心境障碍的主要类型。主要临床表现为情绪低落,运动迟缓,内疚、自责自罪;严重状态下会有轻生、自杀的倾向等症。具有高发病、高致残、高自杀率、高复发和社会负担沉重的特点。近年来,抑郁症的发病率急剧上升,目前在世界致残性疾病中排名第四,预计至2020年,发病率将仅次于缺血性心脏病。而且目前抑郁症的治疗费用昂贵,预计将来的20年,其医疗费用也将名列前茅。抑郁的发病机理复杂,病因尚未阐明,目前普遍接受的是生物胺假说,近年提出的“细胞因子学说”和“神经营养学说”对抑郁症的生理、病理改变有了更深入的认识。因此,寻找广谱、高效、低毒的抗抑郁症药已成为药物研究的热点。
现有技术中,抑郁症的治疗主要是以西药为主,治疗药物主要包括选择性5-HT重摄取抑制剂、选择性NE重摄取抑制剂、多巴胺和去甲肾上腺素重摄取抑制剂、5-羟色胺受体调节剂以及单胺氧化酶抑制剂、非选择性重摄取抑制剂等类型。其中,以帕罗西汀、氟西汀为代表的选择性5-HT重摄取抑制剂临床应用最为广泛。但现有抗抑郁药物尤其是西药存在着毒副作用大、易产生耐药性、依从性差、抗抑郁效果不理想等不足,再加上抗抑郁药物治疗成本昂贵。因此,传统的西药治疗方式已经遭遇显著瓶颈,因此,研制高效、低毒、经济的抗抑郁药物迫在眉睫。
拟黑多刺蚁(Polyrhachis vicina Roger),又称鼎突多刺蚁、俗称黑蚂蚁,是指蚁科(Formicidae)多刺蚁属(Polyrhachis spp.)昆虫,中国南方各省均有分布。拟黑多刺蚁,味咸、酸,性平;归肝、肾经;具补肾益精,通经活络,解毒消肿之功效;主治肾虚头晕耳鸣,失眠多梦,阳痿遗精,风湿痹痛,中风偏瘫,手足麻木,红斑狼疮,毒蛇咬伤等症。拟黑多刺蚁全身含有19种氨基酸,其中包括人体必需的8种氨基酸,蛋白质含量高达40-60%;并含有多种维生素及微量原素,其中多种为人体所需、尤其锌、硒含量最丰富;此外还有特殊的“蚂蚁抗生素”即后胸侧板腺素等特种抗菌素,因此号称为“动物营养宝库”。现有文献资料显示拟黑多刺蚁具丰富的药理活性,但未见有关抗抑郁作用的文献报道。
发明内容
为此,本发明所要解决的技术问题在于提供一种拟黑多刺蚁提取物,并进一步公开了所述提取物的制备方法及其用于制备抗抑郁药物的应用。
为解决上述技术问题,本发明公开了一种提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,该方法为:
取拟黑多刺蚁蚁粉,加入有机溶媒加热回流提取,减压回收所述有机溶媒后;加入有机溶剂萃取;回收所述有机溶剂,干燥即得所述提取物。
进一步的,所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述有机溶媒包括乙醇、石油醚。
所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述乙醇的体积浓度为50-100%。
更进一步的,任一所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述有机溶剂包括石油醚、乙酸乙酯、正丁醇。
任一所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述反应温度为60℃-100℃。
本发明还公开了任一所述方法提取得到的拟黑多刺蚁提取物。
本发明还公开了所述的拟黑多刺蚁提取物在制备预防和治疗抑郁及其相关疾病药物中的用途。
所述的拟黑多刺蚁提取物选择性添加常规辅料,按照常规工艺制成的临床可接受的用于预防和治疗抑郁及其相关疾病的药物制剂。
进一步的,所述的药物制剂,其特征在于,所述制剂包括片剂、胶囊剂、滴丸、颗粒剂、酊剂。
更为进一步的,所述的药物制剂,其特征在于,所述的常规辅料包括淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙、豆油、蜂胶、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-6000、羧甲基纤维素钠、羟丙纤维素或交联聚维酮。
本发明的上述技术方案首次发现拟黑多刺蚁提取物具有明显的抗抑郁活性,具有制备抗抑郁药物或者具有抗抑郁功能的药物的成药潜力,为开发成为抗抑郁药物创新药物提供了新的物质基础,具有潜在巨大的社会效益和经济效益。
本发明的取药昆虫资源丰富,提取制备方法简单易行、原料来源方便易得、可用于拟黑多刺蚁提取物的大量制备;成本低、污染小,利于节能减排条件下的大规模生产,产业化前景十分明确。
实验例
实验例1拟黑多刺蚁提取物对小鼠悬尾实验中不动时间的影响
1、供试品:本实验例中所述拟黑多刺蚁提取物均由实施例1中所述方法提取得到。
2、方法:采用昆明种雄性小鼠,体质量18~22g,每组10只。分别分为对照组、阳性对照药氟西汀组(3.6mg.kg-1)、拟黑多刺蚁提取物高、中、低(8,4,2g药材.kg-1)剂量组(由实施例1所述方法制得)。对照组给予同等体积的含0.3%吐温-80的蒸馏水,各组均连续灌胃(ig)给药10d,末次给药1h后测试。测试方法如下:将单个小鼠尾端(在距尾尖部约2cm处)用医用胶布粘于悬尾箱(30cm*30cm*25cm)上部支架上,使成倒挂状态,头部离箱底约5cm。悬挂时间为6min,统计后4min内累计不动时间(不动状态即小鼠停止挣扎不动或无任何活动)。
3、结果:如表1所示,与对照组比较,拟黑多刺蚁提取物(8,4g药材.kg-1)连续ig给予小鼠10d,均可显著缩短悬尾不动时间,(差异有统计学意义P<0.05)。
表1拟黑多刺蚁提取物对小鼠悬尾实验中不动时间的影响(n=10)
组别 | 剂量/.kg-1 | 不动时间/s |
对照组 | - | 108.00±24.00 |
氟西汀 | 3.6mg | 17.10±16.00** |
拟黑多刺蚁提取物 | 8g生药 | 69.67±52.20* |
4g生药 | 66.33±42.51* | |
2g生药 | 74.42±40.04 |
与对照组比较*P<0.05,**P<0.01
实验例2拟黑多刺蚁提取物对小鼠强迫游泳实验中不动时间的影响
1、供试品:本实验例中所述拟黑多刺蚁提取物均由实施例1中所述方法制备而成
2、方法:采用昆明种雄性小鼠,体质量18~22g,每组10只。分别分为对照组、阳性对照药氟西汀组(3.6mg.kg-1)、拟黑多刺提取物高、中、低(8,4,2g药材.kg-1)剂量组(由实施例1所述方法制得)。对照给予同等体积的含0.3%吐温-80的蒸馏水,各组均连续灌胃(ig)给药10d,末次给药1h后测试。将小鼠单独放人高20cm、直径14cm的圆柱形玻璃缸中,缸内水深10cm,水温(25±2)℃,从小鼠入水后计时6min,记录后4min内游泳累计不动时间(指小鼠在水中停止挣扎,或显示漂浮状态,仅有微小的肢体运动以保持头部浮在水面)。
3、结果:如表2所示,与对照组比较,拟黑多刺蚁提取物(8,4g药材.Kg-1)连续ig给予小鼠10d,均可显著缩短游泳不动时间,差异有统计学意义(P<0.05)。
表2拟黑多刺蚁提取物对小鼠强迫游泳不动时间的影响(n=10)
与对照组比较*P<0.05,**P<0.01
实验例3拟黑多刺蚁提取物对利血平引起的抑郁大鼠的影响
1、仪器与药品:FA1004电子天平(上海精科天平仪器厂);利血平注射液,天津金耀氨基酸有限公司,批号:1203241;盐酸氟西汀胶囊,礼来苏州制药有限公司,批号:1037A;拟黑多刺蚁提取物,由广西中医药研究院药理所提供。
2、动物分组与处理:雄性SD大鼠50只(广西医科大学实验动物中心提供,动物许可证号:SCXK(桂)2009-0002),体重200±20g,喂养适应1周后,按空腹体重分层随机分为5组,每组10只,组间体重水平无明显差异,每周记录体重1次,根据体重给药。对照组大鼠每天腹腔注射生理盐水0.5mL.kg-1,其余各组大鼠每天腹腔注射利血平0.5mL.kg-1造模,连续10天,通过运动抑制观察确定模型成功后,改生理盐水及利血平隔天腹腔注射0.25mL.kg-1维持模型。各组每天分别给予氟西汀1.8mg.kg-1、拟黑多刺蚁提取物高剂量(2.0g生药.kg-1)和低剂量(0.5g生药.kg-1)(所述拟黑多刺蚁提取物均由实施例1所述方法制得)。
3、按以上给药方法处理10天,于实验第10天时记录肛门体温值,记录各组大鼠上睑下垂、运动抑制等情况。上睑下垂观察时,将大鼠放在支架上,观察大鼠眼睑不能睁开1/2的动物只数,计算对抗率,对抗率=(1-上睑下垂大鼠/组内动物总数)×100%;运动抑制观察时,将运物放于直径40cm的圆形白板的中心位置观察30s,观察不同组中大鼠呆在圈内的时间。
4、拟黑多刺蚁提取物对抑郁大鼠快感缺失的影响。
拟黑多刺蚁提取物对抑郁大鼠快感缺失的影响采用糖水消耗实验进行观察。具体操作为:让各组动物任意饮用两种不同的水:其中一瓶为含1%蔗糖的自来水,一瓶为自来水。通过称重量大鼠自来水和蔗糖水饮用量,以蔗糖偏嗜度(Screrse prerenee)[蔗糖偏嗜度(%)=蔗糖水饮用量/(蔗糖水饮用量+自来水饮用量)X 100]作为衡量标准,比较实验前后各组动物蔗糖偏嗜度的变化(糖水消耗反映动物的奖赏反应程度)。
5、实验数据以均数±标准差表示,采用SPSS16.0作统计学处理,两均数比较用t检验,显著性界值P=0.05;计量资料用χ2检验进行统计分析处理,显著性界值P=0.05。
6、实验结果:
(1)拟黑多刺蚁提取物对抑郁症大鼠体重和体温的影响,
在造模前各组大鼠的体重差异无统计学意义;从给药开始至实验结束前,利血平造模各组大鼠体重与对照组相比,如表3所示,体重均下降,差异有统计学意义(P<0.01)。开始给予利血平腹腔注射各组大鼠肛温有所下降,如表3所示,且差异有统计学意义(P<0.01);至实验结束前,拟黑多刺蚁提取物2.0g生药.kg-1剂量组大鼠肛温有所回升,如表3所示,差异有统计学意义(P<0.05)。
表3拟黑多刺蚁提取物对抑郁症大鼠体重和体温的影响(n=10)
与模型组比较*P<0.05,**P<0.01
(2)拟黑多刺蚁提取物对抑郁症大鼠行为学的影响
末次利血平腹腔注射及给药后12小时,对照组大鼠没有眼睑下垂现象;模型组有8只出现眼睑下垂,与空白对照组相比差异有统计学意义(P<0.01);氟西汀组有3只出现眼睑下垂,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01);拟黑多刺蚁提取物高、低剂量组分别有1只、2只出现眼睑下垂,与模型组相比差异有统计学意义(P<0.01)。见表2。末次利血平腹腔注射及给药后1小时后,对照组10只大鼠全部出圈,模型组有5只大鼠出圈,与空白对照组相比,差异有统计学意义(P<0.01);氟西汀组有10只大鼠出圈,与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05);拟黑多刺蚁提取物高、低剂量组都只有6只大鼠出圈,情况基本与模型组相同。圈内保留时间如表4所示。
表4拟黑多刺蚁提取物对抑郁症大鼠行为学的影响(n=10)
组别 | 剂量 | 圈内保留时间 | 对抗率 |
/.kg-1 | /秒 | /% | |
对照组 | - | 5.11±3.89** | 100** |
模型组 | - | 28.10±4.53 | 20.00 |
氟西汀 | 1.8mg | 24.50±7.52 | 70* |
拟黑多刺蚁提取物 | 2.0g生药 | 12.80±11.75** | 90** |
0.5g生药 | 21.20±8.32* | 80** |
与模型组比较*P<0.05,**P<0.01
(3)拟黑多刺蚁提取物对抑郁症大鼠糖水消耗实验的影响
如表5所示,模型组大鼠糖水消耗比例显著低于对照组,给予拟黑多刺蚁提取物(0.5g/kg生药)后,可显著提升动物的糖水消耗比例,提示拟黑多刺蚁具有改善抑郁动物快感缺失的功能。阳性药氟西汀亦表现出良好的改善抑郁动物快感缺失的功效。
表5拟黑多刺蚁提取物对抑郁症大鼠糖水消耗实验的影响(n=10)
与模型组比较*P<0.05
具体实施例方式
实施例1拟黑多刺蚁提取物的制备
取拟黑多刺蚁蚁粉1000g,加入体积浓度为95%的乙醇加热回流提取3次,每次2L,合并提取液,减压回收乙醇得初油。用石油醚(其中石油醚的沸点为60℃-90℃)萃取,回收溶剂后低温干燥,即得所述提取物。
实施例2拟黑多刺蚁提取物的制备
取拟黑多刺蚁蚁粉1000g,加入体积浓度为90%乙醇加热回流提取3次,每次2L,合并提取液,减压回收乙醇得初油。用石油醚(其中石油醚的沸点为60℃-90℃)萃取,回收溶剂后低温干燥,即得所述提取物。
实施例3拟黑多刺蚁提取物的制备
取拟黑多刺蚁蚁粉1000g,加入100%的乙醇加热回流提取2次,每次3L,合并提取液,减压回收乙醇得初油。用石油醚(其中石油醚的沸点为60℃-90℃)萃取,回收溶剂后低温干燥,即得所述提取物。
实施例4拟黑多刺蚁提取物片剂的制备
【处方】
【制备方法】
将所得的拟黑多刺蚁提取物160g、干淀粉混匀,制成颗粒,干燥,压制成1000片,包糖衣。所得的拟黑多刺蚁提取物的糖衣片,每片重380mg,含所得的拟黑多刺蚁提取物重160mg。
实施例5拟黑多刺蚁提取物软胶囊的制备
【处方】
【制备方法】
取20g蜂胶加入到440g豆油中,加热混匀,制得软胶囊基质,将60g所得的拟黑多刺蚁提取物加入到基质中,搅拌均匀,胶体磨研磨,制得软胶囊内容物,按明胶:甘油:水(1:0.4:1)制胶,采用软胶囊机压丸,制得1000粒软胶囊,每粒含所得的拟黑多刺蚁提取物重80mg。
实施例6拟黑多刺蚁提取物滴丸的制备
【处方】
【制备方法】
将所得的拟黑多刺蚁提取物、聚乙二醇-4000搅拌均匀,再加入熔融的聚乙二醇-6000,置水浴上加热至60~65℃,充分搅拌至成透明液体,倾入保温滴制器中,保持温度在65~70℃按每丸重80mg,选用适宜口径的滴头,以每分钟60滴的滴速滴人用冰浴冷却的液体石蜡中,制成1000丸,包糖衣,含所得的拟黑多刺蚁提取物重32mg。
实施例7拟黑多刺蚁提取物颗粒剂的制备
【处方】
【制备方法】
将所得的拟黑多刺蚁提取物480g、干淀粉混匀,制成颗粒,干燥,包薄膜衣,分装1000包。所得的拟黑多刺蚁提取物的颗粒,每包重2.5g,含所得的拟黑多刺蚁提取物重480mg。
实施例8拟黑多刺蚁提取物酊剂的制备
【处方】
实施例1方法所得的拟黑多刺蚁提取物 8g;
56%乙醇 1000mL;
总计 1000mL。
【制备方法】:将所得的拟黑多刺蚁提取物8g,加56%乙醇,溶解或稀释,静置,滤过,即得。所得的拟黑多刺蚁提取物酊剂,每mL含所得的拟黑多刺蚁提取物重8mg
显然,上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例,而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说,在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。
Claims (10)
1.一种提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,该方法为:
取拟黑多刺蚁蚁粉,加入有机溶媒加热回流提取,减压回收所述有机溶媒后;加入有机溶剂萃取;回收所述有机溶剂,干燥即得所述提取物。
2.如权利要求1所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述有机溶媒包括乙醇、石油醚。
3.如权利要求2所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述乙醇的体积浓度为50-100%。
4.如权利要求1-3任一所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述有机溶剂包括石油醚、乙酸乙酯、正丁醇。
5.如权利要求1-3任一所述的提取拟黑多刺蚁有效提取物的方法,其特征在于,所述反应温度为60℃-100℃。
6.根据权利要求1-5任一所述方法提取得到的拟黑多刺蚁提取物。
7.权利要求6所述的拟黑多刺蚁提取物在制备预防和治疗抑郁及其相关疾病药物中的用途。
8.权利要求6所述的拟黑多刺蚁提取物选择性添加常规辅料,按照常规工艺制成的临床可接受的用于预防和治疗抑郁及其相关疾病的药物制剂。
9.如权利要求8所述的药物制剂,其特征在于,所述制剂包括片剂、胶囊剂、滴丸、颗粒剂、酊剂。
10.如权利要求8或9所述的药物制剂,其特征在于,所述的常规辅料包括淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙、豆油、蜂胶、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-6000、羧甲基纤维素钠、羟丙纤维素或交联聚维酮。
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