CN107029009A - 一种鸡血藤的提取物的制备方法及应用 - Google Patents

一种鸡血藤的提取物的制备方法及应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种鸡血藤的提取物的制备方法及应用，具体制备方法为：取鸡血藤粗粉，加入溶媒加热提取，减压浓缩到一定浓度后；加入有机溶剂沉淀；过滤，取滤液减压浓缩，干燥即得。本发明取药资源丰富，提取制备方法简单易行、原料来源方便易得、可用于鸡血藤提取物的大量制备；成本低、污染小，利于节能减排条件下的大规模生产，产业化前景十分明确。该鸡血藤提取物可用于多种目的，从食品、保健品用途到特殊疾病的药物制备用途，使其在预防或治疗抑郁症方面的临床应用具备科学依据。

Description

一种鸡血藤的提取物的制备方法及应用
技术领域
本发明属于天然提取物技术领域，具体涉及一种鸡血藤的提取物的制备方法及应用。
背景技术
抑郁症(Depression)是一种情感性精神障碍类疾病，其主要临床特征表现为显著而持续的情绪消极、兴趣缺失、无快感体验、睡眠障碍、反复自杀念头等。并常伴随认知、精神和运动障碍。具有发病率高，致残率高，复发率高等特点，严重危害人类健康。世界卫生组织统计结果发现，近年来抑郁症发病率逐年上升，大约五分之一的人存在不同程度的抑郁症状，其中约三分之一的人患有重症抑郁，预计到2020年抑郁症可能成为仅次于心脏病的人类第二大疾病。然而目前临床应用的抗抑郁药多存在有效率低（约65%），起效延迟，不同程度毒副反应，耐药性且易复发等缺陷，因此更加安全有效的抗抑郁药的研制己成为各国专家关注的热点。
现有技术中，抑郁症的治疗主要是以西药为主，治疗药物主要包括选择性5-HT重摄取抑制剂、选择性NE重摄取抑制剂、多巴胺和去甲肾上腺素重摄取抑制剂、5 -羟色胺受体调节剂以及单胺氧化酶抑制剂、非选择性重摄取抑制剂等类型。其中，以帕罗西汀、氟西汀为代表的选择性5-HT重摄取抑制剂临床应用最为广泛。但现有抗抑郁药物尤其是西药存在着毒副作用大、易产生耐药性、依从性差、抗抑郁效果不理想等不足，再加上抗抑郁药物治疗成本昂贵，传统的西药治疗方式已经遭遇显著瓶颈。从丰富的中草药中寻找安全有效的抗抑郁药可能是一个新的途径。
鸡血藤系豆科植物密花豆Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤茎，其性温，味苦、甘，归肝、肾经，具有活血补血，调经止痛，舒筋活络之功效。鸡血藤中的化合物结构类型主要有黄酮类、萜类、甾醇类、蒽醌类、内酯类、苷类及其他类型化合物。现代药理学研究证明，鸡血藤还具有抗肿瘤、抗病毒、免疫调节、对酪氨酸酶双向调节、抗炎、抗氧化、镇静催眠等作用，同时，鸡血藤还被拿来与其它中药材配伍防治抑郁症，其它配伍药材常见有：将茯神、五味子、鸡骨草、淡竹叶、洋槐花、龙胆、仙鹤草、红花、甘草、杜仲、玫瑰花、白芍、党参、龟甲、虎杖、当归、枸杞子、麦冬、黄芪、五味子、薏米、沙参、麦芽等等。但“是药三分毒”，多种中药材配伍制成抗抑郁药物后，虽然解决了西药治病的弊端，但中药成分复杂，而且需要长期服用，对人体的副作用也不容忽视。因此研究中药的抗抑郁机理，更合理、有效、更进一步的开发中药资源显得尤为重要。
发明内容
本发明的目的在于针对上述技术不足，提供一种鸡血藤的提取物的制备方法及应用，以此探索鸡血藤提取物在抗抑郁症效果，为进一步开发鸡血藤的药用价值、资源利用和临床应用提供科学依据。
本发明的技术内容是这样实现的：
本发明鸡血藤提取物的制备方法，具体为：取鸡血藤粗粉，加入8-12倍重量的溶媒，加热提取3次，合并提取液，减压浓缩到一定浓度后；加入溶剂，置于4℃下沉淀12h；过滤，取滤液减压浓缩，干燥即得鸡血藤提取物。
进一步的，所述溶媒为体积分数50-100%的乙醇或温度为60-90℃的水；所述溶剂为乙醇、乙酸乙酯、正丁醇或温度为60-90℃的水中的任意一种；所述加热提取温度为60-100℃。
本发明还公开了所述方法制备的鸡血藤提取物。以及所述的鸡血藤提取物在制备预防和治疗抑郁及其相关疾病药物中的用途。
所述的鸡血藤提取物选择性添加常规辅料，按照常规工艺制成的临床可接受的用于预防和治疗抑郁及其相关疾病的药物制剂。
进一步的，所述提取物经过添加常规辅料，制成注射剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、滴丸或酊剂。
更进一步的，所述常规辅料包括淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙、豆油、蜂胶、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-6000、羧甲基纤维素钠、羟丙纤维素或交联聚维酮。
本发明的技术方案相对于传统技术有如下明显的进步和优点：
本技术方案发现鸡血藤提取物具有明显的抗抑郁活性，具有制备抗抑郁药物或者具有抗抑郁功能的药物的成药潜力，为开发成为抗抑郁药物创新药物提供了新的物质基础，具有潜在巨大的社会效益和经济效益。
本发明的取药资源丰富，提取制备方法简单易行、原料来源方便易得、可用于鸡血藤提取物的大量制备；成本低、污染小，利于节能减排条件下的大规模生产，产业化前景十分明确。
附图说明
图1为本发明给小鼠灌胃给药实验设计图。
具体实施例方式
实施例1 鸡血藤提取物的制备
取鸡血藤药材粗粉1000g，加入体积分数为50%的乙醇加热提取3次，每次8L，合并提取液，减压浓缩到一定浓度后；加入体积分数为85%的乙醇，放置于4℃沉淀12h，过滤取滤液，经减压浓缩，低温干燥即得所述提取物。
实施例2 鸡血藤提取物的制备
取鸡血藤药材粗粉1000g，加入体积分数为80%的乙醇加热提取3次，每次10L，合并提取液，减压浓缩到一定浓度后，加入体积分数为65%的乙醇，放置于4℃沉淀12h，过滤取滤液，经减压浓缩，干燥即得所述提取物。
实施例3 鸡血藤提取物的制备
取鸡血藤药材粗粉1000g，加入体积分数为100%的乙醇加热提取3次，每次12L，合并提取液，减压浓缩到一定浓度后；加入乙酸乙酯，放置于4℃沉淀12h，过滤取滤液，经减压浓缩，干燥即得所述提取物。
实施例4 鸡血藤提取物的制备
取鸡血藤药材粗粉1000g，加入温度60-90℃的去离子水，加热提取3次，每次10L，合并提取液，减压浓缩到一定浓度后；加入体积分数正丁醇，放置于4℃沉淀12h，过滤取滤液，经减压浓缩，低温干燥即得所述提取物。
实施例5 鸡血藤提取物片剂的制备
【处方】
实施例1方法所得的鸡血藤提取物 160 g；
干淀粉 210 g；
羧甲基纤维素钠 5 g；
滑石粉 5 g ；
总计 380 g。
【制备方法】
将所得的鸡血藤提取物160 g、干淀粉混匀，制成颗粒，干燥，压制成1000片，包糖衣。所得的鸡血藤提取物的糖衣片，每片重380 mg，含所得的鸡血藤提取物重160 mg。
实施例6 鸡血藤提取物软胶囊的制备
【处方】
实施例2方法所得的鸡血藤提取物 80 g；
油 440 g；
蜂胶 20 g ；
总计 540 g。
【制备方法】
取20 g蜂胶加入到440 g豆油中，加热混匀，制得软胶囊基质，将 60g所得的鸡血藤提取物加入到基质中，搅拌均匀，胶体磨研磨，制得软胶囊内容物，按明胶：甘油：水（1：0.4：1）制胶，采用软胶囊机压丸，制得1000粒软胶囊，每粒含所得的鸡血藤提取物重80 mg。
实施例7 鸡血藤提取物滴丸的制备
【处方】
实施例3方法所得的鸡血藤提取物 32 g；
聚乙二醇-4000 6 g；
聚乙二醇-6000 42 g ；
总计 80 g。
【制备方法】
将所得的鸡血藤提取物、聚乙二醇-4000搅拌均匀，再加入熔融的聚乙二醇-6000，置水浴上加热至60 ~65 ℃,充分搅拌至成透明液体，倾入保温滴制器中，保持温度在65 ~70 ℃按每丸重80 mg，选用适宜口径的滴头，以每分钟60滴的滴速滴人用冰浴冷却的液体石蜡中，制成1000丸，包糖衣，含所得的鸡血藤提取物重32 mg。
实施例8 鸡血藤提取物颗粒剂的制备
【处方】
实施例4方法所得的鸡血藤提取物 480 g；
干淀粉 2000 g；
羧甲基纤维素钠 10 g；
滑石粉 10 g ；
总计 2500 g。
【制备方法】
将所得的鸡血藤提取物480 g、干淀粉混匀，制成颗粒，干燥，包薄膜衣，分装1000包。所得的鸡血藤提取物的颗粒，每包重2.5g，含所得的鸡血藤提取物重480 mg。
实施例9 鸡血藤提取物酊剂的制备
【处方】
实施例1方法所得的鸡血藤提取物 8g；
75%乙醇 1000 mL；
总计 1000 mL。
【制备方法】：将所得的鸡血藤提取物8 g，加75%乙醇,溶解或稀释,静置，滤过，即得。所得的鸡血藤提取物酊剂，每mL含所得的鸡血藤提取物重8 mg。
实施例10 鸡血藤提取物注射剂的制备
【处方】
实施例2方法所得的鸡血藤提取物 10g；
75%乙醇 200 mL；
去离子水 800mL；
总计 1000 mL。
【制备方法】：将所得的鸡血藤提取物8 g，加75%乙醇,溶解或稀释,静置，滤过，加去离子水补足1000mL即得。所得的鸡血藤提取物注射剂，每mL含所得的鸡血藤提取物重10mg。
实验例11 鸡血藤提取物对小鼠悬尾实验中不动时间的影响
1、供试品：本实验例中所述鸡血藤提取物均由实施例1中所述方法提取得到。
2、方法：采用昆明种雄性小鼠，体质量18～22 g，每组10只。分别分为对照组、阳性对照药氟西汀组（3.6 mg.kg-1）、鸡血藤提取物高、中、低(8，4，2 g药材. kg-1)剂量组（由实施例1所述方法制得）。对照组给予同等体积的含0.3 %吐温-80的蒸馏水，各组均连续灌胃(ig)给药10 d，末次给药1 h后测试。测试方法如下：将单个小鼠尾端(在距尾尖部约2cm处)用医用胶布粘于悬尾箱(30cm*30cm*25 cm)上部支架上，使成倒挂状态，头部离箱底约5cm。悬挂时间为6 min，统计后4 min内累计不动时间(不动状态即小鼠停止挣扎不动或无任何活动)。
3、结果：如表1所示，与对照组比较，鸡血藤提取物(8，4,2g药材. kg-1)连续ig给予小鼠10 d，均可显著缩短悬尾不动时间，(差异有统计学意义P<0.05)。
实验例12 鸡血藤提取物对小鼠强迫游泳实验中不动时间的影响
1、供试品：本实验例中所述鸡血藤提取物均由实施例1中所述方法制备而成。
2、方法：采用昆明种雄性小鼠，体质量18～22 g，每组10只。分别分为对照组、阳性对照药氟西汀组（3.6 mg.kg-1）、鸡血藤提取物高、中、低(8，4，2 g药材. kg-1)剂量组（由实施例1所述方法制得）。对照给予同等体积的含0.3 %吐温-80的蒸馏水，各组均连续灌胃(ig)给药10 d，末次给药1 h后测试。将小鼠单独放人高20 cm、直径14 cm的圆柱形玻璃缸中，缸内水深10 cm，水温(25±2)℃ ，从小鼠入水后计时6 min，记录后4 min内游泳累计不动时间(指小鼠在水中停止挣扎，或显示漂浮状态，仅有微小的肢体运动以保持头部浮在水面)。
3、结果：如表2所示，与对照组比较，鸡血藤提取物(8，4，2g药材. Kg-1)连续ig给予小鼠10 d，均可显著缩短游泳不动时间，差异有统计学意义(P<0．05)。
实验例13鸡血藤提取物对去卵巢结合慢性不可预见性温和刺激的雌性抑郁大鼠的影响
1、仪器与药品 ：FA1004电子天平（上海精科天平仪器厂）；盐酸氟西汀胶囊，礼来苏州制药有限公司，批号：5545AA；鸡血藤提取物，由广西中医药研究院药理所提供。
2、动物分组与处理 ：雌性SD大鼠60只（广西医科大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK(桂)2014-0002），体重200±20g，喂养适应1周后，按空腹体重分层随机分为5组，每组12只，即：对照组、模型组、氟西汀（1.8 mg.kg-1）、鸡血藤提取物高剂量（4 g生药.kg-1）和低剂量（1 g生药.kg-1）（所述鸡血藤提取物均由实施例1所述方法制得）。除对照组行假手术外，其余各组均通过手术摘除双侧卵巢。术后肌肉注射抗生素，连续3天。术后14天，各组开始给药，对照组和模型组给等容量的双蒸水。同时，除对照组外，其余各组均接受慢性不可预见性温和刺激（CUMS）。刺激包括以下：
①禁食24h，②禁水24h，③噪音1h，④倾斜45°12h，⑤冰水游泳 6min，⑥通宵照明12h，⑦夹尾1min，⑧拥挤12h，⑨束缚4h，⑩湿垫料12h。每天随机选择2 种刺激，共28 天。造模之后进行行为学检测，实验设计如图1所示。每隔7天早晨测动物体重，并记录结果。
3、鸡血藤提取物对抑郁大鼠强迫游泳的影响
正式实验前24 h 进行预游泳实验，将大鼠置于直径50cm，水深30 cm，水温(25±2)℃的圆桶中游泳15 min。实验当天，给药1 h后，将大鼠放入与预实验环境相同的圆桶中，观察5 min，记录各组在整个5min 内的不动时间。不动状态为：大鼠在水中停止挣扎，或呈漂浮状态，仅有细小的肢体运动以保持头部浮在水面的状态。
4、鸡血藤提取物对抑郁大鼠体重、子宫重、及子宫系数的影响
给药第30天，将所用动物麻醉后，取子宫称重。计算子宫系数[子宫系数(％) = 子宫重量/大鼠体重 X 100]。
5、实验数据以均数±标准差（±s）表示，采用SPSS16.0作统计学处理，两均数比较用t检验，显著性界值P=0.05；计量资料用χ2检验进行统计分析处理，显著性界值P=0.05。
6、实验结果：
（1）鸡血藤提取物对抑郁症大鼠强迫游泳实验的影响
如表3所示，模型组大鼠游泳不动时间明显增加，而鸡血藤提取物（4g药材. Kg-1）能显著缩短游泳不动时间,与模型组比较差异有统计学意义（P<0.05或者P<0.01）。
（2）鸡血藤提取物对抑郁症大鼠体重、子宫重、及子宫系数的影响
如表4所示，各组大鼠体重在给药前（0d）和给药30天（30d）差异均没有统计学意义。模型组子宫重和子宫系数均比对照组低，差异有统计学意义（P<0.05或者P<0.01）；各给药组对子宫重和子宫系数都没有明显影响（P＞0.05）。

Claims (8)

1.一种鸡血藤提取物的制备方法，其特征在于：所述方法具体为：取鸡血藤粗粉，加入8-12倍重量的溶媒，加热提取3次，合并提取液，减压浓缩到一定浓度后；加入溶剂，置于4℃下沉淀12h；过滤，取滤液减压浓缩，干燥即得鸡血藤提取物。
2.根据权利要求1所述的鸡血藤提取物的制备方法，其特征在于：所述溶媒为体积分数50-100%的乙醇或温度为60-90℃的水。
3.根据权利要求1所述的鸡血藤提取物的制备方法，其特征在于：所述溶剂为乙醇、乙酸乙酯、正丁醇或温度为60-90℃的水中的任意一种。
4.根据权利要求1所述的鸡血藤提取物的制备方法，其特征在于：所述加热提取温度为60-100℃。
5.权利要求1-4任一项所述制备方法得到的鸡血藤提取物。
6.权利要求5所述的鸡血藤提取物，在制备预防和治疗抑郁症药物中的应用。
7.根据权利要求5所述的鸡血藤提取物，其特征在于：所述提取物经过添加常规辅料，制成注射剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、滴丸或酊剂。
8.根据权利要求7所述的鸡血藤提取物，其特征在于：所述常规辅料包括淀粉、乳糖、微晶纤维素、糊精、磷酸钙、豆油、蜂胶、聚乙二醇-4000、聚乙二醇-6000、羧甲基纤维素钠、羟丙纤维素或交联聚维酮。
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