CN104543613B - 一种桑叶蛋白粉的制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明属于食品技术领域，具体涉及一种桑叶蛋白粉的制备方法。其制备方法包括如下步骤：原料预处理、超微粉碎、挤压膨化、酶解提取、碱溶蛋白、酸沉蛋白、酶解增溶、干燥得到高溶解性的桑叶蛋白粉。本工艺采用超微粉碎结合挤压膨化并辅酶解破壁及酶解增溶，不仅提高蛋白质提取率，而且使得蛋白质的溶解性大大提高，蛋白质提取率达到70％以上，获得桑叶蛋白粉蛋白质含量达到75％以上，蛋白质溶解性好，氮溶指数(NSI)达到90％以上。本发明工艺所获的桑叶蛋白粉感官品质好、蛋白含量高，溶解性好，可作为功能性食品原料。

Description

一种桑叶蛋白粉的制备方法
技术领域
本发明属于食品技术领域，具体涉及一种桑叶蛋白粉的制备方法。
背景技术
叶蛋白是以绿色植物的叶为原料，经蛋白溶解，沉淀，干燥而制备的蛋白质浓缩物。叶蛋白来源广泛、营养丰富、不含动物胆固醇，具有防病治病，防衰老等多种生理功能，是一种具有高度开发价值的新型蛋白质资源。
桑叶为桑科属的树叶，是卫生部公布的药食同源、可用于保健食品的植物材料之一。桑叶氨基酸种类齐全，而且必须氨基酸和半必须氨基酸含量较高，是一种优质的蛋白质资源。传统上桑叶仅用于养蚕，由于桑蚕生产数量有限，而且具有一定的季节性，故探索桑叶的其他方面的应用就更显紧迫，以实现桑叶的综合利用。
目前对叶蛋白的研究对象大多集中在苜蓿，而对桑叶蛋白的提取研究鲜有报道。提取方法大多为加热絮凝法、酸法、碱法、有机溶剂法、酶法和发酵酸法等。但目前各种方法提取的叶蛋白的蛋白质含量不高、溶解性较差。综合各种方法的优缺点，本发明提出一种提取桑叶蛋白的新工艺。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种提取率高、溶解性好的桑叶蛋白粉的制备方法。
为了解决上述技术问题，本发明提供一种酶法辅助碱溶酸沉法提取桑叶蛋白，具体包括以下步骤：
(1)原料预处理：采集新鲜的桑叶，去除桑叶中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子；将选好的桑叶经清洗、阴干后粗粉粹，得到桑叶粉；
(2)超微粉碎：桑叶粉经过超微粉碎至200-300目，得到桑叶微粉；
(3)挤压膨化：调整桑叶微粉水分含量至9-12％，在挤压温度60-80℃、螺杆转速200-300rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；
(4)酶解提取：将膨化后的桑叶粉移入提取罐中，加入30-150U/g桑叶粉纤维素酶，按1∶5-10的料液质量比用pH值为5.5的酸性水溶液在50℃下提取30-90分钟后，得到提取液；
(5)碱溶蛋白：将上述步骤(4)中提取液调节pH值为8，静置30-120min，然后用过滤机过滤，得到滤液；
(6)酸沉蛋白：将上述步骤(5)中滤液调节pH值为3，沉淀30-90min后，再在5000r/min离心10-20min，得到叶蛋白粗提取物；
(7)酶解增溶：将上述步骤(6)中叶蛋白粗提取物加去离子水调整蛋白质含量为15-40g/L，调pH为8.0-8.6，加碱性蛋白酶120000-400000U/L，50-65℃酶解90-180分钟，90-95℃灭酶15-25分钟；得到酶解液；
(8)干燥：将上述步骤(7)中酶解液冷冻干燥得到桑叶蛋白粉。
本发明步骤(4)中用HCl或醋酸水溶液调pH值为5.5；步骤(5)中用1mol/L的NaOH调节pH值为8；步骤(6)中用1mol/L的HCl调节pH为3。
本发明步骤(3)中双螺杆挤压膨化时桑叶微粉水分含量为10％，挤压温度为65℃、螺杆转速为240rpm；调节步骤(4)纤维素酶解pH值为5.5，桑叶粉纤维素酶浓度为60U/g。
本发明的有益效果如下：
本工艺采用超微粉碎结合挤压膨化并辅酶解破壁及酶解增溶，不仅提高蛋白质提取率，而且使得蛋白质的溶解性大大提高。蛋白质提取率达到70％以上，获得桑叶蛋白粉蛋白质含量达到75％以上，蛋白质溶解性好，氮溶指数(NSI)达到90％以上。
具体实施方式
下述实施方式旨在举例说明本发明可为本领域专业技术人员实现或使用，对下述实施方式进行修改对本领域的专业技术人员来说将是显而易见的，故本发明包括但不限于下述实施方式，任何符合本权利要求书或说明书描述，符合与本文所公开的原理和新颖性、创造性特点的方法、工艺、产品，均落入本发明的保护范围之内。
实施例1
一种桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料预处理：采集新鲜的桑叶，去除桑叶中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子；将选好的桑叶经清洗、阴干后粗粉粹，得到桑叶粉；
(2)超微粉碎：桑叶粉经过超微粉碎至200目，得到桑叶微粉；
(3)挤压膨化：调整桑叶微粉水分含量至12％，在挤压温度80℃、螺杆转速300rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；
(4)酶解提取：将膨化后的桑叶粉移入提取罐中，加入100U/g桑叶粉纤维素酶，按1∶10的料液质量比用pH值为5.5的酸性水溶液在50℃下提取40分钟后，得到提取液；
(5)碱溶蛋白：将上述步骤(4)中提取液调节pH值为8，静置60min，然后用过滤机过滤，得到滤液；
(6)酸沉蛋白：将上述步骤(5)中滤液调节pH值为3，沉淀60min后，再在5000r/min离心10min，得到叶蛋白粗提取物；
(7)酶解增溶：将上述步骤(6)中叶蛋白粗提取物加去离子水调整蛋白质含量为20g/L，调pH为8.2，加碱性蛋白酶280000U/L，55℃酶解120分钟，90℃灭酶20分钟；得到酶解液；
(8)干燥：将上述步骤(7)中酶解液冷冻干燥得到桑叶蛋白粉。
实施例2
一种桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料预处理：采集新鲜的桑叶，去除桑叶中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子；将选好的桑叶经清洗、阴干后粗粉粹，得到桑叶粉；
(2)超微粉碎：桑叶粉经过超微粉碎至300目，得到桑叶微粉；
(3)挤压膨化：调整桑叶微粉水分含量至10％，在挤压温度70℃、螺杆转速200rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；
(4)酶解提取：将膨化后的桑叶粉移入提取罐中，加入40U/g桑叶粉纤维素酶，按1∶5的料液质量比用pH值为5.5的酸性水溶液在50℃下提取90分钟后，得到提取液；
(5)碱溶蛋白：将上述步骤(4)中提取液调节pH值为8，静置60min，然后用过滤机过滤，得到滤液；
(6)酸沉蛋白：将上述步骤(5)中滤液调节pH值为3，沉淀30min后，再在5000r/min离心20min，得到叶蛋白粗提取物；
(7)酶解增溶：将上述步骤(6)中叶蛋白粗提取物加去离子水调整蛋白质含量为15g/L，调pH为8.6，加碱性蛋白酶180000U/L，65℃酶解90分钟，95℃灭酶15分钟；得到酶解液；
(8)干燥：将上述步骤(7)中酶解液冷冻干燥得到桑叶蛋白粉。
实施例3
一种桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料预处理：采集新鲜的桑叶，去除桑叶中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子；将选好的桑叶经清洗、阴干后粗粉粹，得到桑叶粉；
(2)超微粉碎：桑叶粉经过超微粉碎至200目，得到桑叶微粉；
(3)挤压膨化：调整桑叶微粉水分含量至12％，在挤压温度80℃、螺杆转速250rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；
(4)酶解提取：将膨化后的桑叶粉移入提取罐中，加入30U/g桑叶粉纤维素酶，按1∶7的料液质量比用pH值为5.5的酸性水溶液在50℃下提取30分钟后，得到提取液；
(5)碱溶蛋白：将上述步骤(4)中提取液调节pH值为8，静置120min，然后用过滤机过滤，得到滤液；
(6)酸沉蛋白：将上述步骤(5)中滤液调节pH值为3，沉淀90min后，再在5000r/min离心15min，得到叶蛋白粗提取物；
(7)酶解增溶：将上述步骤(6)中叶蛋白粗提取物加去离子水调整蛋白质含量为40g/L，调pH为8.0，加碱性蛋白酶400000U/L，50℃酶解180分钟，90℃灭酶15分钟；得到酶解液；
(8)干燥：将上述步骤(7)中酶解液冷冻干燥得到桑叶蛋白粉。
实施例4
一种桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料预处理：采集新鲜的桑叶，去除桑叶中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子；将选好的桑叶经清洗、阴干后粗粉粹，得到桑叶粉；
(2)超微粉碎：桑叶粉经过超微粉碎至200目，得到桑叶微粉；
(3)挤压膨化：调整桑叶微粉水分含量至11％，在挤压温度80℃、螺杆转速300rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；
(4)酶解提取：将膨化后的桑叶粉移入提取罐中，加入150U/g桑叶粉纤维素酶，按1∶9的料液质量比用pH值为5.5的酸性水溶液在50℃下提取30分钟后，得到提取液；
(5)碱溶蛋白：将上述步骤(4)中提取液调节pH值为8，静置30min，然后用过滤机过滤，得到滤液；
(6)酸沉蛋白：将上述步骤(5)中滤液调节pH值为3，沉淀30min后，再在5000r/min离心18min，得到叶蛋白粗提取物；
(7)酶解增溶：将上述步骤(6)中叶蛋白粗提取物加去离子水调整蛋白质含量为30g/L，调pH为8.4，加碱性蛋白酶120000U/L，65℃酶解180分钟，95℃灭酶25分钟；得到酶解液；
(8)干燥：将上述步骤(7)中酶解液冷冻干燥得到桑叶蛋白粉。

Claims (3)

1.一种桑叶蛋白粉的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)原料预处理：采集新鲜的桑叶，去除桑叶中枯萎、变黄、腐烂和有病虫害的叶子；将选好的桑叶经清洗、阴干后粗粉粹，得到桑叶粉；
(2)超微粉碎：桑叶粉经过超微粉碎至200-300目，得到桑叶微粉；
(3)挤压膨化：调整桑叶微粉水分含量至9-12％，在挤压温度60-80℃、螺杆转速200-300rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；
(4)酶解提取：将膨化后的桑叶粉移入提取罐中，加入30-150U/g桑叶粉纤维素酶，按1∶5-10的料液质量比用pH值为5.5的酸性水溶液在50℃下提取30-90分钟后，得到提取液；
(5)碱溶蛋白：将上述步骤(4)中提取液调节pH值为8，静置30-120min，然后用过滤机过滤，得到滤液；
(6)酸沉蛋白：将上述步骤(5)中滤液调节pH值为3，沉淀30-90min后，再在5000r/min离心10-20min，得到叶蛋白粗提取物；
(7)酶解增溶：将上述步骤(6)中叶蛋白粗提取物加去离子水调整蛋白质含量为15-40g/L，调pH为8.0-8.6，加碱性蛋白酶120000-400000U/L，50-65℃酶解90-180分钟，90-95℃灭酶15-25分钟；得到酶解液；
(8)干燥：将上述步骤(7)中酶解液冷冻干燥得到桑叶蛋白粉。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤(3)中双螺杆挤压膨化时桑叶微粉水分含量为10％，挤压温度为65℃、螺杆转速为240rpm；或桑叶微粉水分含量至12％，在挤压温度80℃、螺杆转速300rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；或桑叶微粉水分含量至10％，在挤压温度70℃、螺杆转速200rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；或桑叶微粉水分含量至12％，在挤压温度80℃、螺杆转速250rpm条件下采用双螺杆挤压膨化；或桑叶微粉水分含量至11％，在挤压温度80℃、螺杆转速300rpm条件下采用双螺杆挤压膨化。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：调节步骤(4)纤维素酶解pH值为5.5，桑叶粉纤维素酶浓度为60U/g；或纤维素酶解pH值为5.5，桑叶粉纤维素酶浓度为100U/g；或纤维素酶解pH值为5.5，桑叶粉纤维素酶浓度为40U/g；或纤维素酶解pH值为5.5，桑叶粉纤维素酶浓度为30U/g；或纤维素酶解pH值为5.5，桑叶粉纤维素酶浓度为150U/g。
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