CN111454378B - 一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于铁皮石斛加工技术领域，公开了一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法包括将铁皮石斛进行平摊晾晒；铁皮石斛进行低温胁迫处理；进行减压处理；逐级升温；进行铁皮石斛多糖的提取、纯化；对铁皮石斛多糖提取量进行测定。本发明对采收后的铁皮石斛鲜条进行低温胁迫处理，不需要在铁皮石斛的栽培阶段进行生长调控，能够减小生产成本，并且能够实现已生产铁皮石斛的利用率；对铁皮石斛进行低温胁迫处理后进行铁皮石斛多糖的提取与纯化，能够实现铁皮石斛多糖提取量的增加，实现对铁皮石斛的充分提取。
Description
技术领域
本发明属于铁皮石斛加工技术领域，尤其涉及一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法。
背景技术
目前：铁皮石斛是我国传统名贵中草药，已有2000多年的药用历史，其主要化学成分包括生物碱类、多糖类、多酚类等，其中多糖是铁皮石斛中最有效的成分之一，药理研究表面，铁皮石斛多糖具有较强的抗衰老、抗氧化、抗肿瘤和增强机体免疫力等药理活性。随着近年来人们保健意识的增强，铁皮石斛多糖的需求量在不断增加，市场需求量旺盛，供不应求，需进一步改进铁皮石斛多糖提取技术，增加提取量。目前铁皮石斛中多糖含量低，对铁皮石斛多糖含量增加的方法局限于栽培技术改变，普通栽培得到的铁皮石斛浪费严重。
通过上述分析，现有技术存在的问题及缺陷为：目前铁皮石斛中多糖含量低，对铁皮石斛多糖含量增加的方法局限于栽培技术改变，普通栽培得到的铁皮石斛浪费严重。
发明内容
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法。
本发明是这样实现的，一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法包括以下步骤：
步骤一，将采摘得到的新鲜铁皮石斛进行平摊，置于阴凉、通风环境进行晾晒；
步骤二，将晾晒后的铁皮石斛置于变温箱中，急速降温至2-8℃，进行8-12小时低温胁迫处理；
步骤三，低温胁迫处理结束后，保持2-8℃温度继续低温胁迫处理，同时进行对变温箱进行减压，处理时间为3小时；
步骤四，对变温箱逐级升温，直至温度升高至24-26℃时停止；
步骤五，进行铁皮石斛多糖的提取；
步骤六，对提取的铁皮石斛多糖进行纯化；
步骤七，对铁皮石斛多糖提取量进行测定。
进一步，步骤一中，所述晾晒的温度为15-32℃，晾晒时间为2-3天，晾晒中每隔10小时进行一次翻面。
进一步，步骤二中，所述急速降温的速率为6℃/分钟。
进一步，步骤三中，所述对变温箱进行减压具体为缩减压力为4.6-5.0kPa。
进一步，步骤四中，所述逐级升温具体包括：每6-8小时进行一次升温，每次温度升高4℃。
进一步，步骤五中，所述进行铁皮石斛多糖的提取包括以下步骤：
(1)将步骤四处理后的铁皮石斛进行干燥后粉碎，过60-80目筛，得到铁皮石斛粉末；
(2)将铁皮石斛粉末使用95％的乙醇进行回流提取，回收乙醇后得到铁皮石斛浸提液；
(3)在回流提取后的铁皮石斛固态物质中添加蒸馏水，进行煎煮，过滤得到滤液；再次煎煮得到滤液，合并两次滤液；
(4)将滤液进行减压浓缩得到浓缩液，向浓缩液中添加75％的乙醇，搅拌均匀后进行离心，去除上清液，收集沉淀物；
(5)进行沉淀物的缓慢加热，去除沉淀物中乙醇，得到铁皮石斛多糖。
进一步，所述进行煎煮具体为：升温至60℃加热10min，水开后120℃加热30min，然后降温至50℃加热1h。
进一步，所述将滤液进行减压浓缩具体为：压力为2.8-3.2kPa，滤液温度为60℃，浓缩时间为20min。
进一步，步骤六中，所述对提取的铁皮石斛多糖进行纯化包括以下步骤：
1)将铁皮石斛多糖加入水中，进行搅拌至溶解，得到铁皮石斛多糖溶液；
2)在铁皮石斛多糖溶液中添加耐热型α-淀粉酶；
3)静置3小时后降温至-60℃，溶液完全结块成冰后取出，室温下融化；
4)将融化的溶液进行离心，收集上清液；
5)对上清液进行超微膜过滤，干燥，得到纯化的铁皮石斛多糖。
进一步，所述耐热型α-淀粉酶的活力浓度至6000U/L。
结合上述的所有技术方案，本发明所具备的优点及积极效果为：本发明对采收后的铁皮石斛鲜条进行低温胁迫处理，不需要在铁皮石斛的栽培阶段进行生长调控，能够减小生产成本，并且能够实现已生产铁皮石斛的利用率。对采收后的铁皮石斛鲜条进行低温胁迫处理，能够显著提高铁皮石斛中多糖的含量，提高铁皮石斛的品质。本发明对铁皮石斛进行低温胁迫处理后进行铁皮石斛多糖的提取与纯化，能够实现铁皮石斛多糖提取量的增加，实现对铁皮石斛的充分提取。
附图说明
为了更清楚地说明本申请实施例的技术方案，下面将对本申请实施例中所需要使用的附图做简单的介绍，显而易见地，下面所描述的附图仅仅是本申请的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例提供的利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法的流程图。
图2是本发明实施例提供的进行铁皮石斛多糖的提取的流程图。
图3是本发明实施例提供的对提取的铁皮石斛多糖进行纯化的流程图。
图4是本发明实施例提供的铁皮石斛多糖含量的对比图。
图5是本发明实施例提供的铁皮石斛DPPH自由基清除率以及总抗氧活力的对比图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
针对现有技术存在的问题，本发明提供了一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，下面结合附图对本发明作详细的描述。
如图1所示，本发明实施例提供的利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法包括以下步骤：
S101，将采摘得到的新鲜铁皮石斛进行平摊，置于阴凉、通风环境进行晾晒；
S102，将晾晒后的铁皮石斛置于变温箱中，急速降温至2-8℃，进行8-12小时低温胁迫处理；
S103，低温胁迫处理结束后，保持2-8℃温度继续低温胁迫处理，同时进行对变温箱进行减压，处理时间为3小时；
S104，对变温箱逐级升温，直至温度升高至24-26℃时停止；
S105，进行铁皮石斛多糖的提取；
S106，对提取的铁皮石斛多糖进行纯化；
S107，对铁皮石斛多糖提取量进行测定。
步骤S101中，本发明实施例提供的晾晒的温度为15-32℃，晾晒时间为2-3天，晾晒中每隔10小时进行一次翻面。
步骤S102中，本发明实施例提供的急速降温的速率为6℃/分钟。
步骤S103中，本发明实施例提供的对变温箱进行减压具体为缩减压力为4.6-5.0kPa。
步骤S104中，本发明实施例提供的逐级升温具体包括：每6-8小时进行一次升温，每次温度升高4℃。
如图2所示，步骤S105中，本发明实施例提供的进行铁皮石斛多糖的提取包括以下步骤：
S201，将S104处理后的铁皮石斛进行干燥后粉碎，过60-80目筛，得到铁皮石斛粉末；
S202，将铁皮石斛粉末使用95％的乙醇进行回流提取，回收乙醇后得到铁皮石斛浸提液；
S203，在回流提取后的铁皮石斛固态物质中添加蒸馏水，进行煎煮，过滤得到滤液；再次煎煮得到滤液，合并两次滤液；
S204，将滤液进行减压浓缩得到浓缩液，向浓缩液中添加75％的乙醇，搅拌均匀后进行离心，去除上清液，收集沉淀物；
S205，进行沉淀物的缓慢加热，去除沉淀物中乙醇，得到铁皮石斛多糖。
本发明实施例提供的进行煎煮具体为：升温至60℃加热10min，水开后120℃加热30min，然后降温至50℃加热1h。
本发明实施例提供的将滤液进行减压浓缩具体为：压力为2.8-3.2kPa，滤液温度为60℃，浓缩时间为20min。
如图3所示，步骤S106中，本发明实施例提供的对提取的铁皮石斛多糖进行纯化包括以下步骤：
S301，将铁皮石斛多糖加入水中，进行搅拌至溶解，得到铁皮石斛多糖溶液；
S302，在铁皮石斛多糖溶液中添加耐热型α-淀粉酶；
S303，静置3小时后降温至-60℃，溶液完全结块成冰后取出，室温下融化；
S304，将融化的溶液进行离心，收集上清液；
S305，对上清液进行超微膜过滤，干燥，得到纯化的铁皮石斛多糖。
本发明实施例提供的耐热型α-淀粉酶的活力浓度至6000U/L。
下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步的描述。
实施例1：
将铁皮石斛进行干燥后粉碎，过60-80目筛，得到铁皮石斛粉末；将铁皮石斛粉末使用95％的乙醇进行回流提取，回收乙醇后得到铁皮石斛浸提液；在回流提取后的铁皮石斛固态物质中添加蒸馏水，进行煎煮，过滤得到滤液；再次煎煮得到滤液，合并两次滤液；将滤液进行减压浓缩得到浓缩液，向浓缩液中添加75％的乙醇，搅拌均匀后进行离心，去除上清液，收集沉淀物；进行沉淀物的缓慢加热，去除沉淀物中乙醇，得到铁皮石斛多糖。
实施例2：
将铁皮石斛进行干燥后粉碎，过60-80目筛，得到铁皮石斛粉末；将铁皮石斛粉末使用95％的乙醇进行回流提取，回收乙醇后得到铁皮石斛浸提液；在回流提取后的铁皮石斛固态物质中添加蒸馏水，进行煎煮，过滤得到滤液；再次煎煮得到滤液，合并两次滤液；将滤液进行减压浓缩得到浓缩液，向浓缩液中添加75％的乙醇，搅拌均匀后进行离心，去除上清液，收集沉淀物；进行沉淀物的缓慢加热，去除沉淀物中乙醇，得到铁皮石斛多糖。
将铁皮石斛多糖加入水中，进行搅拌至溶解，得到铁皮石斛多糖溶液；在铁皮石斛多糖溶液中添加耐热型α-淀粉酶；静置3小时后降温至-60℃，溶液完全结块成冰后取出，室温下融化；将融化的溶液进行离心，收集上清液；对上清液进行超微膜过滤，干燥，得到纯化的铁皮石斛多糖。
实施例3：
将采摘得到的新鲜铁皮石斛进行平摊，置于阴凉、通风环境进行晾晒；将晾晒后的铁皮石斛置于变温箱中，急速降温至2-8℃，进行8-12小时低温胁迫处理；低温胁迫处理结束后，保持2-8℃温度继续低温胁迫处理，同时进行对变温箱进行减压，处理时间为3小时；对变温箱逐级升温，直至温度升高至24-26℃时停止。
将铁皮石斛进行干燥后粉碎，过60-80目筛，得到铁皮石斛粉末；将铁皮石斛粉末使用95％的乙醇进行回流提取，回收乙醇后得到铁皮石斛浸提液；在回流提取后的铁皮石斛固态物质中添加蒸馏水，进行煎煮，过滤得到滤液；再次煎煮得到滤液，合并两次滤液；将滤液进行减压浓缩得到浓缩液，向浓缩液中添加75％的乙醇，搅拌均匀后进行离心，去除上清液，收集沉淀物；进行沉淀物的缓慢加热，去除沉淀物中乙醇，得到铁皮石斛多糖。
将铁皮石斛多糖加入水中，进行搅拌至溶解，得到铁皮石斛多糖溶液；在铁皮石斛多糖溶液中添加耐热型α-淀粉酶；静置3小时后降温至-60℃，溶液完全结块成冰后取出，室温下融化；将融化的溶液进行离心，收集上清液；对上清液进行超微膜过滤，干燥，得到纯化的铁皮石斛多糖。
实施例4：
分别对实施例1、实施例2、实施例3得到的铁皮石斛多糖含量进行测定，测定结果图如图4所示；分别对实施例1、实施例2、实施例3得到的铁皮石斛DPPH自由基清除率以及总抗氧活力进行计算，计算结果图如图5所示。
在本发明的描述中，除非另有说明，“多个”的含义是两个或两个以上；术语“上”、“下”、“左”、“右”、“内”、“外”、“前端”、“后端”、“头部”、“尾部”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。此外，术语“第一”、“第二”、“第三”等仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性。
以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，凡在本发明的精神和原则之内所作的任何修改、等同替换和改进等，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (6)
1.一种利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，其特征在于，所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法包括以下步骤：
步骤一，将采摘得到的新鲜铁皮石斛进行平摊，置于阴凉、通风环境进行晾晒；
步骤二，将晾晒后的铁皮石斛置于变温箱中，急速降温至2-8℃，进行8-12小时低温胁迫处理；
步骤三，低温胁迫处理结束后，保持2-8℃温度继续低温胁迫处理，同时进行对变温箱进行减压，处理时间为3小时；
步骤四，对变温箱逐级升温，直至温度升高至24-26℃时停止；
步骤五，进行铁皮石斛多糖的提取；
步骤六，对提取的铁皮石斛多糖进行纯化；
步骤七，对铁皮石斛多糖提取量进行测定；
步骤一中，所述晾晒的温度为15-32℃，晾晒时间为2-3天，晾晒中每隔10小时进行一次翻面；
步骤二中，所述急速降温的速率为6℃/分钟；
步骤三中，所述对变温箱进行减压具体为缩减压力为4.6-5.0kPa；
步骤四中，所述逐级升温具体包括：每6-8小时进行一次升温，每次温度升高4℃。
2.如权利要求1所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，其特征在于，步骤五中，所述进行铁皮石斛多糖的提取包括以下步骤：
(1)将步骤四处理后的铁皮石斛进行干燥后粉碎，过60-80目筛，得到铁皮石斛粉末；
(2)将铁皮石斛粉末使用95％的乙醇进行回流提取，回收乙醇后得到铁皮石斛浸提液；
(3)在回流提取后的铁皮石斛固态物质中添加蒸馏水，进行煎煮，过滤得到滤液；再次煎煮得到滤液，合并两次滤液；
(4)将滤液进行减压浓缩得到浓缩液，向浓缩液中添加75％的乙醇，搅拌均匀后进行离心，去除上清液，收集沉淀物；
(5)进行沉淀物的缓慢加热，去除沉淀物中乙醇，得到铁皮石斛多糖。
3.如权利要求2所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，其特征在于，所述进行煎煮具体为：升温至60℃加热10min，水开后120℃加热30min，然后降温至50℃加热1h。
4.如权利要求2所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，其特征在于，所述将滤液进行减压浓缩具体为：压力为2.8-3.2kPa，滤液温度为60℃，浓缩时间为20min。
5.如权利要求1所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，其特征在于，步骤六中，所述对提取的铁皮石斛多糖进行纯化包括以下步骤：
1)将铁皮石斛多糖加入水中，进行搅拌至溶解，得到铁皮石斛多糖溶液；
2)在铁皮石斛多糖溶液中添加耐热型α-淀粉酶；
3)静置3小时后降温至-60℃，溶液完全结块成冰后取出，室温下融化；
4)将融化的溶液进行离心，收集上清液；
5)对上清液进行超微膜过滤，干燥，得到纯化的铁皮石斛多糖。
6.如权利要求5所述利用低温胁迫作用提高铁皮石斛多糖提取量的方法，其特征在于，所述耐热型α-淀粉酶的活力浓度至6000U/L。
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