CN104542283B - 一种高效的白芷繁种育苗体系 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种高效的白芷繁种育苗体系，选择高产、抗病、早期抽薹率低的白芷品种；经过室内快繁、良种繁育田隔离制种、组培快繁育种与常规留种相结合，第一年进行良种繁育田隔离制种并收获筛选优良种子，同时在室内进行组培快繁，移栽并收获种根；第二年进行商品田种根收获，同时组培苗种根所产种子供收获选用；第三年良种繁育田使用上年收获种根进行繁育种子，组培苗则进行种根收获。本发明组培育种与常规留种相互配合，充分利用组培快繁优势，通过合理安排三步走育种工作可以保障生产用种，改变白芷隔年留种的现状，达到年年供种的目的。本发明更系统化、实用化，可操作性强，在白芷新品种推广示范工作中起到了积极的促进作用。

Description

一种高效的白芷繁种育苗体系

技术领域

本发明涉及植物育苗技术，具体是一种高效的白芷繁种育苗体系。

背景技术

种质资源中良种的优选、优育十分重要，药用植物遗传育种工作直接关系着药材质量的优劣，是十分重要的应用基础研究。当前白芷大田生产中面临以下问题：1生产用种是药农自留种，缺乏优良品种(系)，群体间差异较大，早期抽薹率高；2白芷为伞形科三年生异花授粉植物，主要以种子繁殖，异花授粉常导致种子混杂，早期抽薹率高，同时种子优劣对田间出苗率、产量、品质也有重大影响；3白芷种子寿命仅一年，隔年的白芷种子不发芽，不能用于大田播种，给种质保存带来一定难度；4白芷种子发芽率低，生产用种量大；5白芷“苗栽”容易形成“多叉根”，影响产量和品质，组培苗也不例外。

发明内容

本发明的目的在于提供一种高效的白芷繁种育苗体系，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种高效的白芷繁种育苗体系，

1)优良品种选择：选择高产、抗病、早期抽薹率低的白芷品种；

2)室内快繁：在6月份采集二年生原种种苗叶轴，进行室内组培快繁，88-92天后将组培苗进行炼苗移栽，次年6月份即形成二年生种根；

3)良种繁育田隔离制种：将原种苗圃生产的二年生原种种苗进行大田栽培，并采用生物隔离或物理隔离的方式进行隔离种植；

4)组培快繁育种与常规留种相结合：a第一年进行良种繁育田隔离制种并收获筛选优良种子，同时在室内进行组培快繁，移栽并收获种根；b第二年进行商品田种根收获，同时组培苗种根所产种子供收获选用；c第三年良种繁育田使用上年收获种根进行繁育种子，组培苗则进行种根收获。

作为本发明进一步的方案：白芷品种选择川芷2号。

作为本发明进一步的方案：对叶轴进行室内组培时，诱导叶轴产生愈伤组织的激素配比：MS培养基+6-BA 2mg·L^-1+NAA 1mg·L^-1。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供一种高效的三步走白芷种子繁育体系。本发明的一种高效的白芷种子繁育体系，它的种子生产技术体系——三步走，包括优良品种选择，组培快繁和隔离制种。优良品种的选育解决了白芷现有生产良种短缺的现状；隔离育种保障了种子纯度，可有效防止种子混杂异化；组培育种与常规留种相互配合，充分利用组培快繁优势，通过合理安排三步走育种工作可以保障生产用种，改变白芷隔年留种的现状，达到年年供种的目的。与现有川白芷试管苗再生技术相比具有更系统化，实用化的优点，可操作性强，在白芷新品种推广示范工作中起到了积极的促进作用。

附图说明

图1是本发明的流程图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

本发明实施例中，一种高效的白芷繁种育苗体系，是一种包括优良品种选择在内的三步走、两结合方案，具体如下：

1优良品种选择

选择包括川芷2号在内的优良品种，高产、优质、抗病，早期抽薹率低等。应注意于晴朗的天气田间取材，可利用紫外线来杀灭植物表面细菌，降低污染率，阴雨天不可取材。将取回的外植体以洗衣粉漂洗后流水冲洗30min，置于无菌广口瓶中，在无菌操作台上以75％乙醇消毒30s、升汞消毒15-20min，在以无菌水漂洗，反复数次，置于滤纸上吸水备用。

2组培快繁体系的建立

通过对叶片、叶柄、叶轴等不同外植体进行试验，优选出叶轴作为外植体。试验结果表明，叶柄、叶轴两种外植体能诱导愈伤组织并分化再生植株。而叶片诱导的愈伤组织质脆，角质化，不能分化形成再生植株；叶柄愈伤组织的生长较叶轴相对缓慢。经计算发现叶轴诱导的总愈伤组织率和出芽率均高于叶片和叶柄，故叶轴是川芷2号最适合进行组培快繁的外植体。对含有不同配比激素的MS培养基进行比较研究，将叶片、叶柄、叶轴3个不同外植体进行培养，40天后观察其愈伤组织诱导率和出芽率，如表1所示。

表1不同激素配比对不同外植体愈伤组织诱导率的影响

结果表明诱导率最高为MS培养基+6-BA 2mg·L^-1+NAA 1mg·L^-1，对叶轴的离体组织培养诱导率为75.00％，其次为MS培养基+6-BA 1mg·L^-1+NAA 1mg·l^-1，对叶轴诱导率为60.67％。对出芽率进行统计发现，MS培养基+6-BA 2mg·L^-1+NAA 1mg·L^-1出芽率最高；其次是6-BA 2mg·L^-1+NAA 0.5mg·L^-1。故认为MS培养基+6-BA 2mg·L^-1+NAA 1mg·L^-1是相对适合诱导叶轴产生愈伤组织的激素配比。本试验中各激素配比均能在一周后产生愈伤组织。待无菌苗长至3叶期，至少有一条根达到3cm时，将上述获得完整植株的无菌瓶，室温条件下打开瓶盖添加30-50ml无菌水，每天喷施稀释2000倍MS微量元素2-3次，保持湿度。5天后将苗取出，洗净根部琼脂培养基即刻移栽到浇透水的营养土中，即刻置于光照培养箱内培养，炼苗光照条件2500lx，培养温度25±2℃，每天至少喷施自来水3次，15天后记录存活率，随后移栽到大田中。将已分化不定芽转移至1/2MS+1mg·L^-1NAA的生根培养基中，25天后观察，大部分再生植株都具有刷状短根，生根率为87.5％，再生植株炼苗成活率为100％。生根培养40天后形成大量须根，经过炼苗、移栽，再生植株收获的种子播种到大田后次年5月得到白芷植株和白芷根。

按《中国药典》(2010版)规定，检测白芷根中主要化学成分欧前胡素含量，如表2所示，结果发现利用组培苗所结种子播种次年5月收获的白芷根以及组培苗直接移栽后次年5月采收的根，与常规繁育体系下同期采收的对照根的欧前胡素含量间无显著差异。需要注意的是，在四川地区，可以采取在6月份采集二年生原种种苗叶轴，进行室内组培快繁，约90天后将组培苗进行炼苗移栽，次年又形成新的二年生种苗。

表2越年生白芷根欧前胡素和异欧前胡素含量

注：Z2、Z3为组培苗直接生长一年后植株的根，G1为组培苗所结种子播种大田生长一年后植株的根；大田CK为未经组培，常规繁育体系下白芷种子播种大田生长一年后植株的根。

3良种繁育田隔离制种

将原种苗圃生产的二年生原种种苗进行大田栽培，并采用生物隔离如栽植其他高大作物/树木，物理隔离如隔离带等方式进行隔离种植，防止其他品系种源混杂。也可以采用在白芷主产区较远的地方进行制种生产。

4组培快繁育种与常规留种相结合

请参阅图1，a第一年进行良种繁育田隔离制种并收获筛选优良种子，同时在室内进行组培快繁，移栽并收获种根；b第二年进行商品田种根收获，同时组培苗种根所产种子可供收获选用；c第三年良种繁育田使用上年收获种根进行繁育种子，组培苗则进行种根收获。

本发明运用三步走良种繁育技术体系，优良品种的选择保证了白芷种源质量，快繁体系加快了育种时间，保证了用种量，而规模化隔离育苗受环境影响较小，保证了种源纯度。组培快繁和常规制种相结合即最大限度的利用了快繁体系的优势，又限制了其苗栽的不利因素，使得二者相互配合，相得益彰。改变了白芷隔年留种的局面，达到了年年有种的目的。再生植株炼苗成活率为80％，育苗规模已超过250万株，在白芷新品种推广过程中发挥了积极作用，极大的促进了白芷品种的升级换代。

对于本领域技术人员而言，显然本发明不限于上述示范性实施例的细节，而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下，能够以其他的具体形式实现本发明。因此，无论从哪一点来看，均应将实施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定，因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。

此外，应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，各实施例中的技术方案也可以经适当组合，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (2)

1.一种高效的白芷繁种育苗方法，其特征在于，

1）优良品种选择：选择高产、抗病、早期抽薹率低的白芷品种；

2）室内快繁：在6月份采集二年生原种种苗叶轴，进行室内组培快繁，88-92天后将组培苗进行炼苗移栽，次年6月份即形成二年生种根；对叶轴进行室内组培时，诱导叶轴产生愈伤组织的激素配比：MS培养基+6-BA 2mg•L^-1+NAA 1mg•L^-1；在一周后产生愈伤组织；待无菌苗长至3叶期，至少有一条根达到3cm时，将上述获得完整植株的无菌瓶，室温条件下打开瓶盖添加30-50ml无菌水，每天喷施稀释2000倍MS微量元素2-3次，保持湿度；5天后将苗取出，洗净根部琼脂培养基即刻移栽到浇透水的营养土中，即刻置于光照培养箱内培养，炼苗光照条件2500lx，培养温度25±2℃，每天至少喷施自来水3次，15天后记录存活率，随后移栽到大田中；将已分化不定芽转移至1/2 MS+1mg•L^-1NAA的生根培养基中，25天后观察，大部分再生植株都具有刷状短根；生根培养40天后形成大量须根，经过炼苗、移栽，再生植株收获的种子播种到大田后次年5月得到白芷植株和白芷根；

3）良种繁育田隔离制种：将原种苗圃生产的二年生原种种苗进行大田栽培，并采用生物隔离或物理隔离的方式进行隔离种植；

4）组培快繁育种与常规留种相结合：a第一年进行良种繁育田隔离制种并收获筛选优良种子，同时在室内进行组培快繁，移栽并收获种根；b第二年进行商品田种根收获，同时组培苗种根所产种子供收获选用；c第三年良种繁育田使用上年收获种根进行繁育种子，组培苗则进行种根收获。

2.根据权利要求1所述的高效的白芷繁种育苗方法，其特征在于，所述白芷品种选择川芷2号。