CN104489698A - 一种组合物、用途及保健品 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种组合物、用途及保健品。该组合用药对比单独用药，均能明显缓解急性酒精性肝损伤。通过服用水飞蓟片，酒精性肝损伤可逐渐消减。说明本发明提供的片剂有效预防和/或治疗酒精性肝病。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，具体涉及一种组合物、用途及保健品。
背景技术
酒精滥用和酒精依赖已成为当今世界日益严重的公共卫生问题，严重威胁着人们的健康。中毒饮酒者中80％以上有不同程度的脂肪变，10％-35％可发展成酒精性肝炎，10％-20％可发展成肝硬化。有资料显示，美国酒精性肝病死亡居第10位，我国近年来由酒精所致的肝损害亦呈逐年上升趋势，在所有肝病中比例在1996年已达21.3％，酒精已成为及病毒性肝炎后导致肝损害的主要病因。因此，酒精性肝病的防治已经成为重要的医疗课题。
酒精性肝病(aleoholie liver disease)表现多样，初期通常表现为脂肪肝，进而可发展成酒精性肝炎、酒精性肝纤维化和酒精性肝硬化。在严重酗酒时可诱发广泛肝细胞坏死甚或肝功能衰竭。酒精性肝病是西方国家最常见的肝病，在我国发病率有增多的趋势。
发病机理：进入体内的酒精90％在肝脏代谢，它能影响脂肪代谢的各个环节，最终导致肝内脂肪堆积。可能与下列因素有关：①酒精对肝脏有直接损害作用，其损伤机理是酒精在肝细胞内代谢而引起。进入肝细胞的酒精，在乙醇脱氢酶和微粒体乙醇氧化酶系的作用下转变为乙醛，再转变为乙酸，还原性辅酶Ⅰ(NADH)与反应性辅酶Ⅰ(NAD)比值的升高可抑制线粒体三羧酸循环，使肝内脂肪酸代谢发生障碍，氧化减弱，使中性脂肪堆积于肝细胞中。另外，NADH的增多又促进脂肪酸的合成，从而使脂肪在肝细胞中堆积而发生脂肪变性，最终导致脂肪肝形成。②大量饮酒使体内氧化磷酸化和脂肪酸β氧化受损，使血液和肝细胞内游离脂肪酸增加。③酒精有特异性增加胆碱需要量的作用，而胆碱是合成磷脂的原料之一，而磷脂又是合成脂蛋白的重要原料，故磷脂的不足影响了脂蛋白的合成，从而影响了脂肪从肝中顺利运出而形成脂肪肝。④大剂量乙醇刺激肾上腺及垂体肾上腺轴，从而增加脂肪组织分解率，源于此的脂肪酸又被肝脏摄取，使肝内甘油三酯合成率增加并堆积，又因极低密度脂蛋白(VLDL)缺乏载脂蛋白使其分泌有障碍，而产生脂肪肝。⑤长期饮酒可诱导肝微粒体中细胞色素P450的活性，其活性增加可加重乙醇及其代谢物对肝脏的毒性作用，使肝脏内皮细胞窗孔变多变大，结果导致富含甘油三酯的乳糜微粒及其大的残骸被肝细胞引入，肝细胞摄取脂肪增多，促进了脂肪肝形成。⑥免疫机制。既有细胞免疫改变也有体液免疫改变，引起细胞、组织的炎症、溶解和坏死。酒精作为一种半抗原与抗体形成复合物，引起自身免疫反应。
综上所述，酒精性肝病的发病机制比较复杂，包括酒精代谢产物的损伤、炎症反应、缺氧、营养机制、凋亡等，其中炎症反应包括细胞因子、Kuffer细胞、内毒素反应和免疫反应等。随着实验技术的发展及认识水平的深入，关于酒精性肝病的发病机制有了很多进展，内毒素介导的Kuffer细胞活化在细胞因子介导的炎症变化中有重要作用。乙醇代谢产物乙醛可损害各种细胞器和酶的结构功能，抑制蛋白酶体的活性，降低蛋白酶体对乙醛加合物蛋白的水解作用。干细胞脂肪沉积主要是氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸/还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸比例失调的结果，氧化的结果。
因此，提供一种防治酒精性肝病的组合物及制剂具有现实意义。
发明内容
有鉴于此，本发明提供一种组合物、用途及保健品。该组合用药对比单独用药，均能明显缓解急性酒精性肝损伤。通过服用水飞蓟片，酒精性肝损伤可逐渐消减。说明本发明提供的片剂有效预防和/或治疗酒精性肝病。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：
本发明提供了一种组合物，包括壳寡糖、葛根、水飞蓟、Vc和泛酸钙。
在本发明的一些实施例中，以重量份计，包括壳寡糖50-600份、葛根100-850份、水飞蓟50-350份、Vc 10-150份和泛酸钙1-30份。
在本发明的另一些实施例中，以重量份计，包括壳寡糖500份、葛根800份、水飞蓟300份、Vc 100份和泛酸钙20份。
在本发明的一些实施例中，葛根选用葛根提取物。
在本发明的另一些实施例中，水飞蓟选用水飞蓟提取物。
在本发明的一些实施例中，葛根提取物为葛根水提物。在本发明的另一些实施例中，葛根提取物购自宁波立华制药有限公司。
在本发明的一些实施例中，水飞蓟提取物为葛根水提物。在本发明的另一些实施例中，水飞蓟提取物购自意迪那生物技术有限公司。
本发明还提供了上述的组合物在制备预防和/或治疗酒精性肝病的药物、保健品或食品中的应用。
本发明提供了一种预防和/或治疗酒精性肝病的保健品，包括上述的组合物和药学上可接受的辅料。
在本发明的一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的保健品的剂型为口服制剂。
在本发明的一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的保健品的所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、粉剂或口服液体剂。
在本发明的一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的保健品的所述辅料包括粘合剂、崩解剂、改善可压性剂、润滑剂、助流剂、薄膜包衣剂、甜味剂、填充剂中的一种或两者以上的混合物。
在本发明的另一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的片剂的所述辅料包括微晶纤维素、磷酸氢钙、交联羧甲基纤维素钠、二氧化硅、硬脂酸镁、薄膜包衣剂。
在本发明的一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的保健品为片剂，以重量份计，所述辅料包括微晶纤维素100-300份、交联羧甲基纤维素钠20-50份、磷酸氢钙50-300份、硬脂酸镁5-20份、二氧化硅5-20份、薄膜包衣剂5-40份。
在本发明的一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的保健品，以重量份计，其为粉剂，以重量份计，所述辅料包括麦芽糖醇400-800份、抗性糊精1500-2500份、甜菊糖苷20-60份。
在本发明的一些实施例中，本发明提供的预防和/或治疗酒精性肝病的保健品为胶囊剂，以重量份计，所述辅料包括预胶化淀粉100-250份、硬脂酸镁1-10份、二氧化硅8-20份。
本发明还提供了保健品的制备方法，具体的是一种片剂的制备方法，包括如下步骤：
配方：
工艺简述：
称取配方量的壳寡糖、葛根、水飞蓟、VC、泛酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、硬脂酸镁、二氧化硅，将配方量的原辅料投入混合机中混合20-30分钟。
用压片机将上述混合料进行压片，0.8g/片，得到素片。
称取配方量包衣剂，配置成适宜的固形物含量，在配桨锅中搅拌30-45分钟；搅拌完成后，对素片进行包衣，至片面基本成膜、颜色一致。
本发明还提供了保健品的制备方法，具体的是一种粉剂的制备方法，包括如下步骤：
配方
工艺简述：
1.原辅料处理：壳寡糖、葛根、水飞蓟、VC、泛酸钙，目视检查物料，有结块时过40目筛，称取处方量，备用；麦芽糖醇、抗性糊精、甜菊糖苷，称取处方量，备用。
2.总混：先将甜菊糖苷与抗性糊精混合10分钟，至颜色均匀后，再加入壳寡糖、葛根、水飞蓟、VC、泛酸钙混合30分钟至完全均匀后出料。
3.分装：按要求调整好设备，再将60mm空白铝箔膜准确安装于颗粒包装机上，待空机调试完毕后下料进行包装，至装量、外型符合要求才正式分装，净重量控制在每袋4克，每袋装量差异±4.5％，每10分钟检查一次装量差异，随时抽检外观和密封性。密封性用密封试验仪进行检测，真空度应小于或等于-60kpa，测试时间应该大于或等于3分钟。外袋上不得有粉粘结，不得有泄漏。
本发明还提供了保健品的制备方法，具体的是一种胶囊剂的制备方法，包括如下步骤：
配方
工艺简述：
1.备料、总混：先将配方量的二氧化硅、硬脂酸镁，与预胶化淀粉预混，
将预混好的料与壳寡糖、葛根、水飞蓟、VC、泛酸钙投入三维混合机中
总混30min均匀为止。
2.填充：混合好的物料在全自动填充剂上填充，装量0.5g/粒。
本发明提供了一种药物组合物，包括壳寡糖、葛根、水飞蓟、Vc和泛酸钙。组合用药对比单独用药，均能明显缓解急性酒精性肝损伤。组合用药对急性酒精性肝损伤有明显的保护作用，可减轻酒精对肝脏的脂质过氧化损伤，降低血清转氨酶活性，改善肝脏的病理组织变化。其作用机制可能是通过对抗氧化应激，减轻酒精对肝细胞的直接损害作用，从而起到保护肝细胞，改善肝功能的作用。其中组合1效果尤其显著。与服用前相比，肝功能(ALT，AST)达到正常水平，证明通过服用水飞蓟片及戒酒，酒精性肝损伤可逐渐消减。说明本发明提供的片剂有效预防和/或治疗酒精性肝病。
具体实施方式
本发明公开了一种组合物、用途及保健品，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。
本发明提供的一种组合物、用途及保健品中所用原药及辅料均可由市场购得。葛根提取物购自宁波立华制药有限公司。水飞蓟提取物购自意迪那生物技术有限公司。
下面结合实施例，进一步阐述本发明：
实施例1 动物实验数据——对大鼠急性酒精性肝损伤的保护作用
主要原料剂量保护：
选择SPF级SD大鼠，雄性，体重180-220g，标准环境适应性饲养1周，给予正常饮食。将每批动物按体重随机分为11组，包括正常对照组、模型对照组、单药组和试验组(表1)，每组8只。各组每日灌胃前禁食6h，除正常组等量以生理盐水灌胃外，其余各组均以乙醇灌胃，5g/kg，连续5d(1次/d)，单药各组、试验各组在乙醇灌胃1h后再按表1给予不同成分灌胃，在末次乙醇灌胃并禁食6h后将全部大鼠麻醉并处死，腹主动脉取血测定大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)水平。取肝右叶约1g肝组织液氮下保存，并制10％肝匀浆测定SOD、MDA。取肝左叶相同部位，用10％中性甲醛固定，石蜡包埋，HE染色后于光学显微镜下观察肝组织病理学改变，并依据酒精性肝病诊疗指南，评估肝脏的脂肪变性程度。采用SPSS11.5统计软件处理，试验数据用x±s表示，计量资料采用单因素方差分析，两组间比较采用LSD方法检验。等级资料差异性测定采用秩和检验进行统计学处理。
表1 试验组设置
1、对酒精性肝损伤大鼠血清ALT、AST、TC、TG水平的影响
结果见表2。
表2 不同单药组、试验组对大鼠血清ALT、AST、TC、TG水平的影响(n＝8，x±s)
注：与正常对照组比较：▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；与模型对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01
与正常对照组比较，模型对照组血清中ALT、AST活性明显增高(P＜0.05)，TC、TG增高不明显。与模型对照组比较，试验各组、单药各组均使ALT活性显著降低P＜0.05)，试验各组降低ALT活性效果优于单药各组。组合1、6、7AST活性显著性降低P＜0.05)。降低血清ALT、AST的活性，说明药物对大鼠急性酒精性肝损伤有保护作用。各组对TC、TG无明显影响。
2、对酒精性肝损伤大鼠肝匀浆MDA、SOD含量的影响
与正常对照组比较，模型对照组肝组织匀浆中MDA含量显著增高(P＜0.05)；与模型对照组比较，试验各组均使肝组织匀浆中MDA含量降低，SOD活性升高。其中，组合1能显著提高(P＜0.05)大鼠肝组织中抗氧化酶SOD的活性，降低脂质过氧化物产物MDA的含量。说明组合1的保护作用可能与增强机体清除自由基，防止脂质过氧化有关。见表3。
表3 不同单药组、试验组对大鼠肝匀浆MDA、SOD含量的的影响(n＝8，x±s)
注：与正常对照组比较：▲P＜0.05，▲▲P＜0.01；与模型对照组比较：*P＜0.05，**P＜0.01
3、对酒精性肝损伤大鼠肝脏病理组织学变化的影响
肉眼观察可见正常对照组大鼠肝脏色泽正常，肝被膜有光泽,腹腔肠管间无粘连。模型对照组大鼠肝脏色泽略变黄，腹腔肠管间可有肠管轻度粘连。单药各组大鼠肝脏肉眼观察与模型对照组比较无明显差异。与模型对照组比较，试验各组肝细胞肿胀显著减轻，脂肪变性、炎症细胞浸润及坏死程度均降低，肝组织病理变化程度明显减轻。
4、结果综述
组合用药对比单独用药，均能明显缓解急性酒精性肝损伤。组合用药对急性酒精性肝损伤有明显的保护作用，可减轻酒精对肝脏的脂质过氧化损伤，降低血清转氨酶活性，改善肝脏的病理组织变化。其作用机制可能是通过对抗氧化应激，减轻酒精对肝细胞的直接损害作用，从而起到保护肝细胞，改善肝功能的作用。其中组合1效果尤其显著。
实施例2 片剂的制备
称取配方量的壳寡糖、葛根或葛根提取物、水飞蓟或水飞蓟提取物、VC、泛酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、磷酸氢钙、硬脂酸镁、二氧化硅，将配方量的原辅料投入混合机中混合20-30分钟。
用压片机将上述混合料进行压片，1g/片，得到素片。
称取配方量包衣剂，配置成适宜的固形物含量，在配桨锅中搅拌30-45分钟；搅拌完成后，对素片进行包衣，至片面基本成膜、颜色一致。
实施例3 粉剂的制备
1.原辅料处理：壳寡糖、葛根或葛根提取物、水飞蓟或水飞蓟提取物、VC、泛酸钙，目视检查物料，有结块时过40目筛，称取处方量，备用；麦芽糖醇、抗性糊精、甜菊糖苷，称取处方量，备用。
2.总混：先将甜菊糖苷与抗性糊精混合10分钟，至颜色均匀后，再加入壳寡糖、葛根或葛根提取物、水飞蓟或水飞蓟提取物、VC、泛酸钙混合30分钟至完全均匀后出料。
3.分装：按要求调整好设备，再将60mm空白铝箔膜准确安装于颗粒包装机上，待空机调试完毕后下料进行包装，至装量、外型符合要求才正式分装，净重量控制在每袋4克，每袋装量差异±4.5％，每10分钟检查一次装量差异，随时抽检外观和密封性。密封性用密封试验仪进行检测，真空度应小于或等于-60kpa，测试时间应该大于或等于3分钟。外袋上不得有粉粘结，不得有泄漏。
实施例4 胶囊剂的制备
3.备料、总混：先将配方量的二氧化硅、硬脂酸镁，与预胶化淀粉预混，将预混好的料与壳寡糖、葛根或葛根提取物、水飞蓟或水飞蓟提取物、VC、泛酸钙投入三维混合机中总混30min均匀为止。
4.填充：混合好的物料在全自动填充剂上填充，装量0.5g/粒。
实施例5 片剂的制备
主药：根据实施例2配方制备；
辅料：
称取配方量的壳寡糖、葛根或葛根提取物、水飞蓟或水飞蓟提取物、VC、泛酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、磷酸氢钙、硬脂酸镁、二氧化硅，将配方量的原辅料投入混合机中混合20-30分钟。
用压片机将上述混合料进行压片，1g/片，得到素片。
称取配方量包衣剂，配置成适宜的固形物含量，在配桨锅中搅拌30-45分钟；搅拌完成后，对素片进行包衣，至片面基本成膜、颜色一致。
实施例6 片剂的制备
主药：根据实施例3配方制备；
辅料：
称取配方量的壳寡糖、葛根或葛根提取物、水飞蓟或水飞蓟提取物、VC、泛酸钙、微晶纤维素、交联羧甲基纤维素钠、磷酸氢钙、硬脂酸镁、二氧化硅，将配方量的原辅料投入混合机中混合20-30分钟。
用压片机将上述混合料进行压片，1g/片，得到素片。称取配方量包衣剂，配置成适宜的固形物含量，在配桨锅中搅拌30-45分钟；搅拌完成后，对素片进行包衣，至片面基本成膜、颜色一致。
实施例7 临床实验数据
参照《酒精性肝病诊断标准(草案)》，酒精性脂肪肝病例入选标准如下：饮酒时间5年以上，每日饮酒量平均大于40g酒精量；体检数据显示肝功能损伤(ALT＞41U/L，AST＞45U/L)。入选受试者4人，男性，平均年龄38岁。受试期间给予实施例2制备的水飞蓟片口服，每日1次，每次4片，连续服用3个月。治疗期间嘱受试者绝对禁酒，服用完毕后复查一次肝功能(ALT，AST)。
疗效判断标准为：①不适症状消失；②肝功能恢复正常。服用效果如表4所示：
表4 4名受试者服用前后肝功能变化比较
| 组别 | 受试人数 | AST(U/L) | ALT(U/L) |
| 服用前 | 4 | 125.4±53.5 | 107±46.2 |
| 服用后 | 4 | 43.7±11.5* | 40.5±10.2* |
注：服用前后对比，*P＜0.01
通过表4可以看出，与服用前相比，肝功能(ALT，AST)达到正常水平，证明通过服用水飞蓟片及戒酒，酒精性肝损伤可逐渐消减。
取实施例3-6制备的片剂进行上述临床试验，其他条件均不变，药效试验结果与实施例2制备的片剂相近，说明本发明提供的片剂有效预防和/或治疗酒精性肝病。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种组合物，其特征在于，包括壳寡糖、葛根、水飞蓟、Vc和泛酸钙。
2.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，以重量份计，包括壳寡糖50-600份、葛根100-850份、水飞蓟50-350份、Vc 10-150份和泛酸钙1-30份。
3.根据权利要求1所述的组合物，其特征在于，以重量份计，包括壳寡糖500份、葛根800份、水飞蓟300份、Vc 100份和泛酸钙20份。
4.根据权利要求1至3任一项所述的组合物在制备预防和/或治疗酒精性肝病的保健品或食品中的应用。
5.一种预防和/或治疗酒精性肝病的保健品，其特征在于，包括如权利要求1至3任一项所述的组合物和药学上可接受的辅料。
6.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于，其剂型为口服制剂；
所述口服制剂为片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、粉剂或口服液体剂。
7.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于，所述辅料包括粘合剂、崩解剂、改善可压性剂、润滑剂、助流剂、薄膜包衣剂、甜味剂、填充剂、中的一种或两者以上的混合物。
8.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于，其为片剂，以重量份计，所述辅料包括微晶纤维素100-300份、交联羧甲基纤维素钠20-50份、磷酸氢钙50-300份、硬脂酸镁5-20份、二氧化硅5-20份、薄膜包衣剂5-40份。
9.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于，以重量份计，其为粉剂，以重量份计，所述辅料包括麦芽糖醇400-800份、抗性糊精1500-2500份、甜菊糖苷20-60份。
10.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于，以重量份计，其为胶囊剂，以重量份计，所述辅料包括预胶化淀粉100-250份、硬脂酸镁1-10份、二氧化硅8-20份。
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