CN104470895A - N-[3-(2-羧基乙基)苯基]哌啶-1-基乙酰胺衍生物及其作为可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂的用途 - Google Patents

Abstract

本申请涉及新的式（I）的取代的2-(哌啶-1-基)乙酰胺衍生物，其中A代表式（I-a）或（I-b）的任选被取代或稠合的哌啶环，涉及它们的制备方法，它们用于治疗和/或预防疾病的用途，及其用于制造治疗和/或预防疾病的药物的用途，特别是用于治疗和/或预防心血管疾病。

Description

N-[3-(2-羧基乙基)苯基]哌啶-1-基乙酰胺衍生物及其作为可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂的用途

本申请涉及新的取代的2-(哌啶-1-基)乙酰胺衍生物，它们的制备方法，它们用于治疗和/或预防疾病的用途，及其用于制造治疗和/或预防疾病的药物的用途，特别是用于治疗和/或预防心血管疾病。

哺乳动物细胞中最重要的细胞传递系统之一是环磷酸鸟苷(cGMP)。其与由内皮释放并传输激素和机械信号的一氧化氮(NO)一起形成NO/cGMP体系。鸟苷酸环化酶催化由鸟苷三磷酸(GTP)生成cGMP的生物合成。迄今已知的该类的代表可以按照结构特征和按照配体的类型分为两组：可以由钠尿肽激发的粒状鸟苷酸环化酶，以及可以由NO激发的可溶性鸟苷酸环化酶。可溶性鸟苷酸环化酶由两个亚单元组成并且每个异二聚体含有一个血红素，其是调节中心的一部分。后者是活化机理的中心环节。NO能够结合至血红素的铁原子并因此显著增加酶的活性。相反，不含血红素的制剂不能由NO激发。一氧化碳(CO)也能够攻击血红素的中心铁原子，其中由CO带来的激发作用明显地小于NO。

通过形成cGMP以及由此产生磷酸二酯酶、离子通道和蛋白质激酶的调节，鸟苷酸环化酶在多种生理学过程中起到关键作用，特别是在平滑肌细胞的舒张和增生、血小板凝集和-粘连以及神经元的信号传送中，和在由上述过程的紊乱所引起的病症中。在病理生理学条件下会抑制NO/cGMP系统，这可导致例如高血压、血小板活化、增加的细胞增殖、内皮机能障碍、动脉粥样硬化、心绞痛、心力衰竭、血栓形成、中风和心肌梗死。

在生物体中影响cGMP信号通道的、目的在于不依赖于NO治疗此类疾病的可能性因为其可预期的高效率和小的副作用是一种大有希望的方法。

迄今仅使用其作用基于NO的化合物如有机硝酸盐用于治疗性激发可溶性鸟苷酸环化酶。NO由生物转化产生并通过攻击血红素的铁-中心原子而活化可溶性鸟苷酸环化酶。除副作用之外，耐受性的发展也是该治疗方法的关键缺点之一[O.V.Evgenov等，Nature 　 Rev.Drug 　 Disc. 5（2006），755]。

近年来已经鉴别出直接刺激可溶性鸟苷酸环化酶的物质，即没有预先释放NO。吲唑衍生物YC-1是第一种被描述的NO-非依赖性的但是血红素-依赖性的sGC刺激剂[Evgenov等，出处同上]。基于YC-1，发现了比YC-1具有更高潜力并且没有显示相关的磷酸二酯酶（PDE）抑制的其它物质。这导致吡唑并嘧啶衍生物BAY 41-2272、BAY 41-8543和BAY 63-2521的识别。这些化合物与最近公开的结构上不同的物质CMF-1571和A-350619一起形成一类新的sGC刺激剂[ Evgenov等，出处同上]。该类物质的共同特征是，NO非依赖性和对含血红素的sGC的选择性活化。另外，与NO结合的sGC刺激剂对基于亚硝酰-血红素-复合物的稳定化的sGC-活化具有协同效应。sGC刺激剂对sGC的精确结合部位至今仍然是有争议的。如果从可溶性鸟苷酸环化酶除去血红素基团，该酶仍旧显示出可检测的催化基本活性，即在此之后仍如之前般形成cGMP。不含血红素的酶的剩余催化基本活性不能被任何一种以上提到的刺激剂刺激[Evgenov等，出处同上]。

另外，NO-非依赖性的且血红素-非依赖性的sGC活化剂，以BAY 58-2667作为这类的原型，已被鉴别出。这些物质的共同的特征是，与NO结合，它们仅仅对酶活化具有累加效应，并且被氧化的或者不含血红素的酶的活化显著高于含血红素的酶的活化[Evgenov等，出处同上；J.P.Stasch等，Br.J.Pharmacol. 136（2002），773；J.P.Stasch等，J.Clin.Invest. 116（2006），2552]。光谱研究可表明，BAY 58-2667会置换氧化的血红素基团，由于铁-组氨酸-键的减弱，其仅仅弱连接到sGC上。还已经证实，特征性的sGC血红素结合基序Tyr-x-Ser-x-Arg对于血红素基团的带负电荷的丙酸的相互作用和对于BAY 58-2667的作用而言都是绝对必需的。在该背景下认为，BAY 58-2667在sGC上的结合部位与血红素基团的结合部位是相同的[J.P.Stasch等，J.Clin.Invest. 116（2006），2552]。

在本发明中描述的化合物现在同样能够活化可溶性鸟苷酸环化酶的不含血红素的形式。这也被下述事实证实：这些新的活化剂一方面与NO一起未显示出对含血红素的酶的协同作用，而另一方面它们的作用不能被可溶性鸟苷酸环化酶的血红素依赖性抑制剂1H-1,2,4-噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮（ODQ）阻滞，而是甚至被该抑制剂加强[参见O.V.Evgenov等，Nature 　 Rev.Drug 　 Disc. 5（2006），755；J.P.Stasch等，J.Clin.Invest. 116（2006），2552]。

因此，本发明的目的是提供新的化合物，其以上面描述的方式作为可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂起作用，并且可以因此特别用于治疗和用于预防心血管疾病。

WO 94/12181-A1公开了作为纤维蛋白原-受体拮抗剂的取代的芳基化合物，其用于预防血栓形成和栓塞，EP 0 638 553-A1中描述了作为抗血栓形成活性物质的具有末端羧基的羧酰胺。由WO 02/36553-A2已知作为细胞粘附抑制剂的取代的苯基烷烃羧酸。WO 2006/066948-A1中描述了具有抗炎作用的哌啶衍生物。EP 1 939 189-A1中要求保护具有PPAR-激动活性的多环化合物，其用于治疗脂类代谢疾病。WO 2011/051165-A1中公开了用作可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂的苯基乙酰氨基-取代的3-苯基丙酸。

本发明提供了通式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物

其中

R^1A和R^1B彼此独立地代表氢、甲基、乙基或正丙基

或者

彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

R^2A代表氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、甲氧基、乙氧基或环丙基氧基，

R^2B代表氢或甲基，

或者

R^2A和R^2B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

R³代表氢、氟、氯、甲基、三氟甲基或乙基，

R^4A和R^4B彼此独立地代表甲基、三氟甲基或乙基

或者

彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环、环丁基环或环戊基环，所述环可以被氟取代最多2次

且

A代表下式的任选被取代的或稠合的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、(C₁-C₄)-烷基、环丙基、环丁基、甲氧基、乙氧基或苯基，其中(C₁-C₄)-烷其本身可以被氟取代最多3次，

R^5B代表氢或甲基，

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

且

R⁶代表氢、氟、氯、甲基或三氟甲基。

根据本发明的化合物是式(I)化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，在下文中提到的式的被式(I)包括的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，以及被式(I)包括的在下文中作为实施方案实施例提到的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，只要被式(I)包括的在下文中提到的化合物还不是盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物。

作为盐，在本发明范围中优选的是根据本发明的化合物的生理学上可接受的盐。也包括尽管自身不适合药学应用，但是仍可以用于例如分离、纯化或贮存根据本发明的化合物的盐。

本发明的化合物的生理上可接受的盐包括无机酸、羧酸和磺酸的酸加成盐，例如盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘二磺酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸、乳酸、酒石酸、苹果酸、柠檬酸、富马酸、马来酸和苯甲酸的盐。

根据本发明的化合物的生理学上可接受的盐也包括常规碱的盐，例如且优选地，碱金属盐（例如钠盐和钾盐）、碱土金属盐（例如钙盐和镁盐）和铵盐，该铵盐衍生自氨或具有1-16个C-原子的有机胺，例如且优选地，乙胺、二乙胺、三乙胺、N,N-二异丙基乙胺、单乙醇胺、二乙醇胺、三乙醇胺、二甲氨基乙醇、二乙氨基乙醇、普鲁卡因、二环己胺、二苄胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、精氨酸、赖氨酸和1,2-乙二胺。

在本发明范围内，作为溶剂合物是指根据本发明的化合物的这样的形式：其以固态或液态通过与溶剂分子配位形成配合物。水合物是溶剂合物的一种具体形式，其中所述配位作用与水进行。在本发明范围内优选水合物作为溶剂化物。

取决于它们的结构，根据本发明的化合物可以以不同的立体异构形式存在，即以构型异构体的形式存在，或也可能作为构象异构体（对映异构体和/或非对映异构体，包括在阻转异构体的情况下的那些）存在。本发明因此包括对映异构体和非对映异构体和它们各自的混合物。以已知的方式，可以从这样的对映异构体和/或非对映异构体的混合物中分离出立体异构一致的组分；为此优选使用色谱法，尤其是在非手性或手性相上的HPLC色谱法。

如果根据本发明的化合物能够以互变异构形式存在，则本发明包括所有的互变异构形式。

本发明也包括根据本发明的化合物的所有合适的同位素变体。根据本发明的化合物的同位素变体在这里理解为是指这样的化合物：其中在根据本发明的化合物内至少一个原子已经被替换为相同原子序数的另一原子，但是所述另一原子的原子质量不同于在自然界中通常存在或优势存在的原子质量。可以掺入根据本发明的化合物中的同位素的例子是：氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯、溴和碘的同位素，诸如²H（氘）、³H（氚）、¹³C、¹⁴C、¹⁵N、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³³S、³⁴S、³⁵S、³⁶S、¹⁸F、³⁶Cl、⁸²Br、¹²³I、¹²⁴I、¹²⁹I和¹³¹I。根据本发明的化合物的某些同位素变体（如特别是其中已经掺入一种或多种放射性同位素的那些）可能是有用的，例如，用于检查在体内的作用机理或活性物质在体内的分布；由于比较而言容易的可制备性和可检测性，用³H-或¹⁴C-同位素标记的特殊化合物适用于该目的。另外，由于化合物的更大代谢稳定性，同位素（例如氘）的掺入可以导致一定的治疗益处，例如体内半衰期的延长或必需的活性剂量的降低；因此，根据本发明的化合物的这种改性也可以任选构成本发明的优选实施方案。通过本领域技术人员已知的通用方法，例如根据在下面描述的方法和在工作实施例中描述的方法，通过使用各自的反应试剂和/或起始化合物的相应的同位素改性，可以制备根据本发明的化合物的同位素变体。

此外，本发明还包括根据本发明的化合物的前药。术语“前药”在这里表示这样的化合物：其本身可以是生物学上有活性的或无活性的，但是在它们在身体内的停留时间期间，其经例如代谢或水解途径被转化成根据本发明的化合物。

本发明特别地包含根据本发明的式(I)羧酸的可水解的酯衍生物作为前体。这理解为这样的酯，其可以在生理性介质中，在后面描述的生物试验条件下和特别是在活体内，通过酶或者化学途径水解成游离的羧酸，作为主要生物活性的化合物。(C₁-C₄)-烷基酯，其中烷基基团可以是直链或者支链的，优选作为这样的酯。特别优选甲酯、乙酯或者叔丁酯。

在本发明范围内，除非另外指出，所述取代基具有下述含义：

在本发明范围内，(C₁-C₄)-烷基代表具有1-4个碳原子的直链的或支链的烷基残基。示例性且优选地可以提及：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。

在本发明范围内，对于所有多次出现的残基，其意义都彼此独立。如果在根据本发明的化合物中的残基被取代，则除非另有说明，所述残基可以被单取代或多取代。优选用1个或2个或3个相同或不同的取代基进行的取代。特别优选用1个或2个相同或不同的取代基进行的取代。

在本发明范围内优选的是式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^1A代表氢或甲基，

R^1B代表氢，

或者

R^1A和R^1B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

R^2A代表氢、甲基、乙基、异丙基或环丙基，

R^2B代表氢，

或者

R^2A和R^2B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

R³代表氟、氯或甲基，

R^4A代表甲基，

R^4B代表三氟甲基，

或者

R^4A和R^4B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环戊基环，所述环可以被氟取代最多2次，

且

A代表下式的任选被取代的或稠合的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、甲基、三氟甲基、乙基、异丙基或环丙基，

R^5B代表氢

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

且

R⁶代表氢或氟。

本发明的一个特别的实施方案包含式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^1A、R^1B、R^2A和R^2B各自代表氢。

本发明的另一个特别的实施方案包含式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^1A代表甲基，

R^1B代表氢，

或者

R^1A和R^1B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

且

R^2A和R^2B各自代表氢。

本发明的另一个特别的实施方案包含式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^2A代表甲基，

且

R^1A、R^1B和R^2B各自代表氢。

本发明的另一个特别的实施方案包含式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^4A代表甲基，

且

R^4B代表三氟甲基。

本发明的另一个特别的实施方案包含式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^4A和R^4B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环戊基环。

本发明的另一个特别的实施方案包含式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

A代表下式的任选被取代的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、甲基、三氟甲基、乙基或环丙基，

R^5B代表氢，

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环。

在本发明范围内，特别优选的是式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^1A代表氢或甲基，

R^1B代表氢，

或者

R^1A和R^1B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

R^2A代表氢或甲基，

R^2B代表氢，

R³代表氟或氯，

R^4A代表甲基，

R^4B代表三氟甲基，

且

A代表下式的任选被取代的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、甲基、三氟甲基或乙基，

R^5B代表氢，

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环。

不依赖于各自指明的残基组合，在各自的残基组合或者优选的残基组合中具体指明的残基定义任意被其它组合的残基-定义替换。非常特别优选两个或多个上述优选范围的组合。

本发明此外提供了用于制备根据本发明的式(I)化合物的方法，其特征在于，在惰性溶剂中在碱存在下借助于缩合剂，使式(II)的受保护的α-氨基羧酸

其中R^4A和R^4B具有上面给出的含义

且

PG¹代表合适的氨基保护基团例如，烯丙氧基羰基(Alloc)、苄氧基羰基(Z)、叔丁氧基羰基(Boc)或9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)，

与式(III)的胺偶联

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B和R³具有上面给出的含义

且

T¹代表(C₁-C₄)-烷基或苄基，

得到式(IV)的羧酰胺

其中PG¹、R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B和T¹具有上面给出的含义，

然后，通过解离保护基团PG¹，释放胺化合物(V)

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B和T¹具有上面给出的含义，

然后使其在合适的还原剂存在下与式(VI)的二醛反应

其中R^5A和R^5B具有上面给出的含义

得到2种环化产物(VII)和(VIII)的混合物(具有改变的比例)

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B、R^5A、R^5B和T¹具有上面给出的含义，

然后在三氟乙酸中用过量的三乙基硅烷处理该混合物，以使“错误的”环化产物(VIII)也转化成期望的目标化合物(VII)，并且最后通过碱性或酸性溶剂解，或在T¹代表苄基的情况下也通过氢解，解离酯残基T¹，得到式(I-A)的羧酸

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B、R^5A和R^5B具有上面给出的含义

并且将如此得到的本发明的式(I-A)的化合物任选地通过常规方法分离成它们的对映异构体和/或非对映异构体，和/或用适当的(i)溶剂和/或(ii)酸或碱转化成其溶剂合物、盐和/或所述盐的溶剂合物。

用于方法步骤(II)+(III)→(IV)[酰胺-偶联]的惰性溶剂是，例如，醚诸如乙醚、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、1,2-二甲氧基乙烷、双-(2-甲氧基乙基)醚、四氢呋喃或1,4-二噁烷，烃诸如苯、甲苯、二甲苯、戊烷、己烷、庚烷、环己烷或石油馏分，卤代烃诸如二氯甲烷、三氯甲烷、四氯化碳、1,2-二氯乙烷、三氯乙烯或氯苯，或偶极非质子溶剂诸如丙酮、乙腈,乙酸乙酯、吡啶、N,N-二甲基甲酰胺(DMF)、N,N-二甲基乙酰胺(DMA)、二甲亚砜(DMSO)、N-甲基吡咯烷酮(NMP)或N,N'-二甲基丙烯脲(DMPU)。也可以使用这些溶剂的混合物。优选使用二甲基甲酰胺或二甲基甲酰胺和吡啶的混合物。

对于该偶联反应，作为缩合剂合适的是例如碳二亚胺类诸如N,N'-二乙基-、N,N'-二丙基-、N,N'-二异丙基-、N,N'-二环己基碳二亚胺(DCC)或N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐(EDC)，光气衍生物诸如N,N'-羰二咪唑(CDI)或氯甲酸异丁酯，1,2-噁唑鎓化合物诸如2-乙基-5-苯基-1,2-噁唑鎓-3-硫酸盐或2-叔丁基-5-甲基异噁唑鎓高氯酸盐，酰氨基化合物诸如2-乙氧基-1-乙氧基羰基-1,2-二氢喹啉，α-氯烯胺诸如1-氯-2-甲基-1-二甲基氨基-1-丙烯，磷化合物诸如丙烷膦酸酐、氰基膦酸二乙酯、双-(2-氧代-3-噁唑烷基)磷酰氯、苯并三唑-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸盐或苯并三唑-1-基氧基三(吡咯烷子基（pyrrolidino）)鏻六氟磷酸盐(PyBOP)，或脲鎓化合物诸如O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TBTU)、O-(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HBTU)、2-(2-氧代-1-(2H)-吡啶基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TPTU)、O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)或O-(1H-6-氯苯并三唑-1-基)-1,1,3,3-四甲基脲鎓四氟硼酸盐(TCTU)，其任选地与其它助剂相组合，所述助剂如1-羟基苯并三唑(HOBt)或N-羟基琥珀酰亚胺(HOSu)，以及作为碱，合适的是碱金属碳酸盐，例如碳酸钠或碳酸钾，或叔胺碱诸如三乙胺、N-甲基吗啉、N-甲基哌啶、N,N-二异丙基乙胺、吡啶或4-N,N-二甲基氨基吡啶(DMAP)。优选使用与吡啶组合的O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐(HATU)。

反应(II) + (III)→(IV)通常在0℃到+60℃、优选+10℃到+40℃的温度范围进行。

化合物(II)中的合适的保护基团PG¹是常规氨基保护基团，例如，烯丙氧基羰基(Alloc)、苄氧基羰基(Z)、叔丁氧基羰基(Boc)或9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)，其中如此选择保护基团PG¹，使得在方法步骤(IV)→(V)中将其解离的条件与化合物(III)采用的各个酯残基T¹相容[参见，例如，T.W. Greene和P.G.M. Wuts, Protective 　 Groups 　 in 　 Organic 　 Synthesis, Wiley, New York, 1999]。优选使用烯丙氧基羰基或苄氧基羰基。烯丙氧基羰基的解离优选借助双甲酮(5,5-二甲基环己烷-1,3-二酮)在四(三苯基膦)钯(0)催化剂存在下进行，而苄氧基羰基通常通过氢化(氢解)在5-10%的活性炭载钯存在下解离。

适合用于方法步骤(V) + (VI)→(VII) [+ (VIII)]的还原剂是常规碱金属硼氢化物诸如硼氢化锂、硼氢化钠或硼氢化钾、氰基硼氢化钠或三乙酰氧基硼氢化钠。优选使用氰基硼氢化钠。所述反应通常在酸/碱混合物（例如，盐酸和三乙胺）存在下在醇溶剂（诸如甲醇、乙醇或异丙醇）中进行。取决于各自采用的组分的反应性，所述反应通常在-20℃至+60℃的温度范围进行。

在硼氢化物介导的胺(V)与二醛(VI)的反应过程中以不同比例形成的式(VIII)的“错误的”环化产物通过随后用三乙基硅烷在作为溶剂的三氟乙酸中还原，同样可以转化成期望的式(VII)的环化产物[参见, 例如，D.N. Kursanov等人 ,Synthesis 1974, 633-651; U. Rosentreter, Synthesis 1985, 210-212]，由此可实现更高的(VII)的收率。该转化同样可以任选地在预先分离2种环化产物(VII)和(VIII)之后进行，或者可以使用过量的三乙基硅烷，直接用得自环化反应的经纯化的产物混合物进行。

在方法步骤(VII)→(I-A)中酯基T¹的解离根据常规方法通过在惰性溶剂中用酸或者碱处理酯进行，其中在后面的方案中将首先形成的盐通过随后用酸处理转化成游离的羧酸。在叔-丁酯的情况下，所述酯裂解优选用酸进行。苄酯优选通过氢化(氢解)在合适的催化剂（例如，活性炭载钯）存在下解离。

对于这些反应合适的惰性溶剂是水或者对于酯裂解常用的有机溶剂。这些优选包括醇，诸如甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇或叔丁醇，或者醚，诸如乙醚、四氢呋喃、1,4-二噁烷或1,2-二甲氧基乙烷，或者其它的溶剂，诸如丙酮、乙酸、二氯甲烷、N,N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜。也可以使用这些溶剂的混合物。在碱性酯水解的情况中，优选使用水与二噁烷、四氢呋喃、甲醇和/或乙醇的混合物。在与三氟乙酸反应的情况中，优选使用二氯甲烷，和在与氯化氢反应的情况中，优选使用四氢呋喃、乙醚、二噁烷、乙酸和/或水。

合适的碱是通常的无机碱。这些特别地包括碱金属-或者碱土金属氢氧化物，例如氢氧化锂、氢氧化钠、氢氧化钾或者氢氧化钡，或者碱金属-或碱土金属碳酸盐，例如碳酸钠、碳酸钾或者碳酸钙。优选氢氧化锂、氢氧化钠或者氢氧化钾。

对于酯裂解合适的酸通常是硫酸、氯化氢/盐酸、溴化氢/氢溴酸、磷酸、乙酸、三氟乙酸、甲苯磺酸、甲磺酸或者三氟甲磺酸或者其混合物，任选地添加水。在叔丁酯的情况中优选氯化氢或者三氟乙酸，而在甲酯或乙酯的情况中优选盐酸或硫酸。

所述酯裂解通常在-20℃到+100℃、优选在0℃到+60℃的温度范围进行。

如果(VII)或(VIII)中的酯基T¹代表叔丁基，在上述的用三乙基硅烷和三氟乙酸处理(VIII)或(VII)和(VIII)的混合物的条件下同时解离该酯基，从而在此直接得到根据本发明的式(I-A)的化合物。

也可以任选如下制备根据本发明的式(I)的化合物：在惰性溶剂中在碱存在下，用式(X)的化合物

其中R^5A和R^5B具有上面给出的含义

且

X代表合适的离去基团例如，氯、溴、碘、甲磺酸酯、甲苯磺酸酯或三氟甲基磺酸酯，

烷基化式(IX)的α-氨基羧酸

其中R^4A和R^4B具有上面给出的含义

得到式(XI)的化合物

其中R^4A、R^4B、R^5A和R^5B具有上面给出的含义，

然后将其在惰性溶剂中在碱存在下借助于缩合剂与式(III)的胺偶联

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B和R³具有上面给出的含义

且

T¹代表(C₁-C₄)-烷基或苄基，

得到式(VII)的羧酰胺

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B、R^5A、R^5B和T¹具有上面给出的含义，

然后如上所述解离酯残基T¹，得到式(I-A)的羧酸

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B、R^5A和R^5B具有上面给出的含义。

优选地在水中或在水与水可混溶的有机溶剂（诸如甲醇、乙醇、四氢呋喃、1,4-二噁烷、1,2-二甲氧基乙烷、乙腈、N,N-二甲基甲酰胺或二甲亚砜）的混合物中进行烷基化反应(IX) + (X)→(XI)。合适的碱尤其是碱金属氢氧化物例如，氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾，或碱金属或碱土金属碳酸盐诸如碳酸锂、碳酸钠、碳酸钾、碳酸钙或碳酸铯。优选使用氢氧化钠或氢氧化钾。所述反应通常在+50℃至+150℃，优选在+80℃至+120℃的温度范围内进行。

在与上面关于反应(II) + (III)→(IV)所述的那些条件类似的条件下，进行偶联反应(XI) + (III)→(VII)。

还可以如下制备根据本发明的式(I)的化合物，其中R^4A和R^4B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丁基-环或环戊基-环：在碱存在下，使式(XII)的环烯基硼酸或-硼酸酯

其中

n代表数字0或1

且

R⁷代表氢或(C₁-C₄)-烷基，或2个残基R⁷彼此连接且一起形成-(CH₂)₂-、-C(CH₃)₂-C(CH₃)₂-、-(CH₂)₃-或-CH₂-C(CH₃)₂-CH₂- 桥

与乙醛酸[OHC-COOH]和式(XIII)的哌啶衍生物反应

其中R^5A和R^5B具有上面给出的含义，

得到式(XIV)的α-哌啶子基羧酸

其中n、R^5A和R^5B具有上面给出的含义，

然后将其在惰性溶剂中在碱存在下借助于缩合剂与式(III)的胺偶联

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B和R³具有上面给出的含义

且

T¹代表(C₁-C₄)-烷基或苄基，

得到式(XV)的羧酰胺

其中n、R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^5A、R^5B和T¹具有上面给出的含义，

然后在合适的钯-或铂-催化剂存在下氢化，得到式(XVI)的化合物

其中n、R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^5A、R^5B和T¹具有上面给出的含义，

最后通过碱性或酸性溶剂解解离酯残基T¹，得到式(I-B)的羧酸

其中n、R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^5A和R^5B具有上面给出的含义。

根据文献中描述的方法[参见N.A. Petasis和I.A. Zavialov, J. 　 Am. 　 Chem. 　 Soc. 　 119, 445-446 (1997)]地，由环烯基硼酸酯(XII)、乙醛酸和哌啶衍生物(XIII)起始制备α-哌啶子基羧酸(XIV)。在这里，叔胺碱（例如，三乙胺或N,N-二异丙基乙胺）的添加是有利的。

通常在静止的氢气氛下在标准压力或略微升高的压力下进行氢化(XV)→(XVI)。合适的催化剂尤其是在活性炭(作为载体材料)上的钯或铂或者氧化铂(IV)。在常规用于这类目的的惰性溶剂（例如，甲醇、乙醇、四氢呋喃或乙酸乙酯）中进行该反应。

如果在(XV)中的酯基T¹代表苄基，则在氢化条件下也同时解离该酯基，从而在这里直接得到根据本发明的式(I-B)的化合物。

在与上面关于反应(II) + (III)→(IV)和(VII)→(I-A)所述的那些条件类似的条件下，进行偶联反应(XIV) + (III)→(XV)和酯裂解(XVI)→(I-B)。

通过在上述的反应顺序中采用式(XVII)的1,2,3,4-四氢异喹啉替代哌啶衍生物(XIII)

其中R⁶具有上面给出的含义

可以以类似的方式制备根据本发明的式(I-C)的化合物

其中n、R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³和R⁶具有上面给出的含义。

通过上述方法可以制备的式(I-A)、(I-B)和(I-C)的化合物分别是根据本发明的通式(I)的化合物的子集。

式(IX)的α-氨基羧酸中间体

其中R^4A和R^4B具有上面给出的含义

部分商购可得或其本身描述在文献中，或它们可以通过已知方法制备，例如通过在惰性溶剂中借助于碱将式(XVIII)的β,β-二取代的羧酸酯在α-位去质子化，

其中R^4A和R^4B具有上面给出的含义

且

T²代表(C₁-C₄)-烷基或苄基，

转化成相应的甲硅烷基烯醇酯(乙烯酮缩醛)，然后用N-溴琥珀酰亚胺溴化，得到式(XIX)的α-溴衍生物

其中R^4A、R^4B和T²具有上面给出的含义，

随后与叠氮化钠反应，得到式(XX)的化合物

其中R^4A、R^4B和T²具有上面给出的含义，

通过催化氢化将其还原成式(XXI)的α-氨基酸酯

其中R^4A、R^4B和T²具有上面给出的含义，

最后通过碱性或酸性溶剂解解离酯残基T²，或在T²代表苄基的情况下也通过氢解解离，得到α-氨基羧酸(IX)。

通过在α-氨基羧酸(IX)的阶段或相应的酯(XXI)的阶段引入相关的保护基团PG¹ (随后解离T²残基)，可以以简单的方式得到式(II)的受保护的α-氨基羧酸中间体

其中R^4A和R^4B具有上面给出的含义

且

PG¹代表氨基保护基团，例如烯丙氧基羰基(Alloc)、苄氧基羰基(Z)、叔丁氧基羰基(Boc)或9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)。

非亲核的强碱，例如，叔丁醇钠或叔丁醇钾、氢化钠或氢化钾、二异丙基氨基锂或双(三甲基甲硅烷基)氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基钠或双(三甲基甲硅烷基)氨基钾，适合用于羧酸酯(XVIII)的α-去质子化；优选使用二异丙基氨基锂。作为惰性溶剂通常使用醚诸如乙醚、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷或双-(2-甲氧基乙基)醚。

在通过加入三甲基甲硅烷基氯将去质子化的酯原位转化成甲硅烷基烯醇酯以后，优选地借助N-溴琥珀酰亚胺(NBS)溴化成(XIX)。反应顺序有利地作为一锅法进行，且通常发生在-80℃至+25℃的温度范围。

通过标准方法，例如通过在偶极非质子溶剂（诸如N,N-二甲基甲酰胺）中用叠氮化钠处理，进行取代反应以产生叠氮化物化合物(XX)。随后的生成α-氨基酸酯(XXI)的还原优选通过氢化在活性炭载钯催化剂存在下在醇溶剂（诸如甲醇或乙醇）中进行。

以与上面关于酯残基T¹所述的方式类似的方式，进行在方法步骤(XXI)→(IX)中的酯基T²的解离。在这里，在(XX)中的酯基T²代表苄基的情况中，在氢化(XX)→(XXI)的条件下也同时解离该酯基，从而直接得到目标化合物(IX)。

通过通用的常规方法在α-氨基羧酸(IX)或相应的酯(XXI)的阶段引入保护基团PG¹[参见，例如，T.W. Greene和P.G.M. Wuts, Protective 　 Groups 　 in 　 Organic 　 Synthesis, Wiley, New York, 1999]。

取决于它们的取代型式，可以如下制备式(III)的中间体：例如，

[A-1] 在惰性溶剂中，在碱诱导的烯化反应中，使式(XXII)的膦酰基乙酸酯

其中R^1A和T¹具有上面给出的含义

且

R⁸代表(C₁-C₄)-烷基

与式(XXIII)的3-硝基苯甲酰基化合物反应

其中R^2A和R³具有上面给出的含义

得到式(XXIV)的化合物

其中R^1A、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

然后将其在合适的钯-或铂-催化剂存在下氢化，得到式(III-A)的3-(3-氨基苯基)丙酸酯

其中R^1A、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

或者

[A-2] 在惰性溶剂中，在碱诱导的烯化反应中，使式(XXII)的膦酰基乙酸酯

其中R^1A和T¹具有上面给出的含义

且

R⁸代表(C₁-C₄)-烷基

与式(XXV)的受保护的3-氨基苯甲酰基化合物反应

其中R^2A和R³具有上面给出的含义

且

PG²代表作为惰性氨基保护基团的苄基或4-甲氧基苄基，

得到式(XXVI)的化合物

其中PG²、R^1A、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

然后(i)在甲醇中用镁还原，得到式(XXVII)的化合物

其中PG²、R^1A、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

然后通过常规方法通过氢解解离氨基保护基团PG²，或以氧化路径得到式(III-A)的3-(3-氨基苯基)丙酸酯

其中R^1A、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

或者(ii)以一步法通过在合适的钯-或铂-催化剂存在下氢化，将式(XXVI)的化合物转化成式(III-A)的3-(3-氨基苯基)丙酸酯，

或者

[B] 在惰性溶剂中在钯催化下将式(XXVIII)的丙烯酸酯衍生物

其中R^1A、R^2A和T¹具有上面给出的含义，

与式(XXIX)的3-氨基-或3-硝基溴苯偶联

其中R³具有上面给出的含义

且

R⁹代表氨基或硝基，

得到式(XXX)的化合物

其中R^1A、R^2A、R³、R⁹和T¹具有上面给出的含义，

然后将其在合适的钯-或铂-催化剂存在下用氢还原，或在R⁹代表氨基的情况下，替代性地用镁在甲醇中还原，得到式(III-A)的3-(3-氨基苯基)丙酸酯

其中R^1A、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

或者

[C] 将式(XXXI)的羧酸酯

其中R^1A、R^1B和T¹具有上面给出的含义，

在惰性溶剂中，在用式(XXXII)的3-溴苄基化合物α-去质子化以后，

其中R^2A和R³具有上面给出的含义

且

Y代表合适的离去基团诸如氯、溴、碘、甲磺酸酯、三氟甲基磺酸酯或甲苯磺酸酯，

烷基化生成式(XXXIII)的化合物

其中R^1A、R^1B、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

随后在碱和钯催化剂存在下与苄胺反应，得到式(XXXIV)的化合物

其中R^1A、R^1B、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

然后通过氢解除去N-苄基，得到式(III-B)的3-(3-氨基苯基)丙酸酯

其中R^1A、R^1B、R^2A、R³和T¹具有上面给出的含义，

或者

[D] 在惰性溶剂中，使式(XXXV)的丙烯酸酯

其中R^1A、R^2A、R^2B和T¹具有上面给出的含义，

(i)在铑(I)催化下与式(XXXVI)的苯基硼酸反应

其中R³具有上面给出的含义

且

PG²代表作为惰性氨基保护基团的苄基或4-甲氧基苄基，

或(ii)在铜(I)催化下与式(XXXVII)的苯基镁化合物反应

其中PG²和R³具有上面给出的含义

且

Hal代表氯或溴，

得到式(XXXVIII)的化合物

其中PG²、R^1A、R^2A、R^2B、R³和T¹具有上面给出的含义，

然后通过常规方法通过氢解除去氨基保护基团PG²，或以氧化途径得到式(III-C)的3-(3-氨基苯基)丙酸酯

其中R^1A、R^2A、R^2B、R³和T¹具有上面给出的含义。

非亲核的强碱，例如，氢化钠或氢化钾、双(三甲基甲硅烷基)氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基钠或双(三甲基甲硅烷基)氨基钾或二异丙基氨基锂，特别适合用在于烯化反应(XXII) + (XXIII)→(XXIV)和(XXII) + (XXV)→(XXVI) [Horner-Wittig反应]中使膦酰基酯(XXII)去质子化；优选使用氢化钠。作为惰性溶剂，在该反应中优选使用醚诸如乙醚、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷或双-(2-甲氧基乙基)醚，任选地作为与N,N-二甲基甲酰胺、二甲亚砜或烃（诸如戊烷、己烷或庚烷）的混合物。所述反应通常在-20℃至+40℃的温度范围进行。

在方法步骤(XXIV)→(III-A)、(XXVI)→(III-A)和(XXX)→(III-A)中的氢化通常在静止氢气氛下在标准压力或升高的压力下进行。在这里，优选的催化剂是在活性炭(作为载体材料)上的钯或铂。经常根据相同规程通过氢解进行在转化(XXVII)→(III-A)、(XXXIV)→(III-B)和(XXXVIII)→(III-C)中的氨基保护基团的解离；在(XXVII)或(XXXVIII)中的PG²代表4-甲氧基苄基的情况中，这也可以可替换地以氧化路径实现，例如借助于2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌(DDQ)或硝酸铈(IV)铵。

用于反应(XXVIII) + (XXIX)→(XXX) [Heck反应]的钯催化剂优选地是乙酸钯(II)或三(二亚苄基丙酮)二钯(0)，在每种情况下，与膦配体（例如，三叔丁基膦、三苯基膦或三-2-甲苯基膦）组合。

非亲核的强碱，例如，叔丁醇钠或叔丁醇钾、氢化钠或氢化钾、二异丙基氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基锂、双(三甲基甲硅烷基)氨基钠或双(三甲基甲硅烷基)氨基钾或正-、仲-或叔-丁基锂，特别适合用于在烷基化反应(XXXI) + (XXXII)→(XXXIII)中的羧酸酯(XXXI)的α-去质子化；优选使用二异丙基氨基锂或正丁基锂。作为惰性溶剂，在该反应中优选使用醚诸如乙醚、二异丙基醚、甲基叔丁基醚、四氢呋喃、1,2-二甲氧基乙烷或双-(2-甲氧基乙基)醚，任选地作为与N,N-二甲基甲酰胺或烃（诸如戊烷、己烷或庚烷）的混合物。所述反应经常在-80℃至+25℃的温度范围进行。

对于转化(XXXIII)→(XXXIV) [使用苄胺的Buchwald-Hartwig-偶联]，优选使用三(二亚苄基丙酮)二钯(0)作为催化剂，其与作为膦配体的(±)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-二萘基和作为碱的叔丁醇钠或叔丁醇钾组合[参见, 例如，J. P. Wolfe和S. L. Buchwald, Organic 　 Syntheses, Coll. 第10卷, 423 (2004), 第78卷, 23 (2002)]。

根据文献中描述的方法进行偶联反应(XXXV) + (XXXVI)→(XXXVIII)和(XXXV) + (XXXVII)→(XXXVIII)[参见，例如，N. Miyaura等人 ,　Organometallics　16, 4229 (1997); T. Hayashi, Synlett, Special Issue 2001, 879-887; P. Knochel等人 ,　Tetrahedron　56, 2727-2731 (2000), Angew. 　 Chem.　120, 6907-6911 (2008)]。

上述反应可以在常压下、在升压下或者在减压下(例如在0.5到5巴的范围)进行；通常，所述反应各自在常压下进行。

取决于目的性，任选可以将根据本发明的化合物分离成相应的对映异构体和/或非对映异构体，甚至在化合物(II)、(III)、(IV)、(V)、(VII)、(IX)、(XI)、(XIV)、(XV)、(XVI)、(XXI)、(XXVII)、(XXXIII)、(XXXIV)和/或(XXXVIII)的阶段就已经进行，其然后以分离的形式根据以上描述的方法顺序进一步反应。这样的立体异构体的分离可以根据本领域技术人员已知的常规方法进行。在本发明范围内，优选使用在非手性或者手性分离相上的色谱法；在羧酸作为中间产物或者最终产物的情况中，或者也可以经由非对映异构体盐进行分离。

式(VI)、(X)、(XII)、(XIII)、(XVII)、(XVIII)、(XXII)、(XXIII)、(XXV)、(XXVIII)、(XXIX)、(XXXI)、(XXXII)、(XXXV)、(XXXVI)和(XXXVII)的化合物是商购可得的或者其本身记载在文献中，或者它们可以以对本领域技术人员而言显而易见的方式类似于文献中公开的方法来制备。制备起始原料的大量详细步骤和参考文献还可以在实验部分中在关于起始原料和中间体的制备的章节中找到。

根据本发明的化合物的制备可以通过以下反应路线图示例性阐明：

路线图 1

[Bn = 苄基]。

路线图 2a

[R = 乙基或叔丁基]。

路线图 2b

[PMB = 4-甲氧基苄基]。

路线图 3

[Bn = 苄基]。

路线图 4

[PMB = 4-甲氧基苄基; R = 甲基或苄基]。

路线图 5

。

路线图 6

。

路线图 7

。

路线图 8

[PG = 氨基保护基团，例如烯丙氧基羰基(Alloc)或苄氧基羰基(Z)]。

路线图 9

[PG = 氨基保护基团，例如烯丙氧基羰基(Alloc)或苄氧基羰基(Z)；R = 乙基或叔丁基]。

根据本发明的化合物具有有价值的药理学性质并且可以用于预防和治疗人和动物的疾病。

根据本发明的化合物是有效的可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂。它们导致血管舒张，抑制血小板凝集并降低血压和增加冠状动脉血流量。这些效果通过可溶性鸟苷酸环化酶的直接的非血红素依赖性的活化和细胞内cGMP的增加介导。

此外，根据本发明的化合物具有有利的药代动力学性质，特别是在它们的生物利用度和/或在静脉内或口服给药以后的作用持续时间方面。

根据本发明的化合物特别适合用于治疗和/或预防心血管、肺、血栓栓塞和纤维化方面的疾病。

因此，根据本发明的化合物可以在药物中使用，所述药物用于治疗和/或预防下述疾病：心血管病症，例如高血压(血压升高)、心力衰竭、冠心病、稳定型和不稳定型心绞痛、肺动脉高血压(PAH)和其它形式的肺性高血压(PH)、肾高血压、周围和心血管疾病、心律失常、房性和室性心律失常及传导紊乱，例如，I-III度房室性传导阻滞、室上性快速型心律失常、心房颤动、心房扑动、心室颤动、心室扑动、室性快速型心律失常、尖端扭转型室性心动过速、房性和室性期外收缩、AV-交界区性期外收缩、病态窦房结综合征、晕厥、AV-结节折返性心动过速、沃-帕-怀综合征、急性冠状动脉综合征(ACS)、自身免疫性心脏疾病(心包炎、心内膜炎、心瓣膜炎(Valvolitis)、主动脉炎、心肌病)、拳击者心肌病、动脉瘤、休克如心源性休克、脓毒性休克和过敏性休克，此外，用于治疗和/或预防下述疾病：血栓栓塞疾病和缺血症如心肌缺血、心肌梗塞、脑中风、心脏肥大、暂时性和缺血性发作、先兆子痫、炎症性心血管病症、冠状动脉和外周动脉痉挛、水肿形成例如肺水肿、脑水肿、肾水肿或心力衰竭引起的水肿、周围循环紊乱、再灌注损伤、动脉和静脉血栓形成、微白蛋白尿、心肌机能不全、内皮功能障碍、微血管和大血管损伤(脉管炎)，以及用于防止再狭窄，例如在血栓溶解疗法、经皮腔内血管成形术(PTA)、经皮腔内冠状动脉血管成形术(PTCA)、心脏移植和旁路手术以后。

在本发明的范围内，术语心力衰竭包括急性和慢性的心力衰竭表现形式，也包括特殊或相关的疾病形式，如急性代偿失调性心力衰竭、右心衰竭、左心衰竭、整体衰竭、缺血性心肌病、扩张型心肌病、肥厚型心肌病、特发性心肌病、先天性心脏缺损、心脏瓣膜缺损、心脏瓣膜缺损伴随的心力衰竭、二尖瓣狭窄、二尖瓣关闭不全、主动脉瓣狭窄、主动脉瓣关闭不全、三尖瓣狭窄、三尖瓣关闭不全、肺动脉瓣狭窄、肺动脉瓣关闭不全、组合性心脏瓣膜缺损、心肌炎症(心肌炎)、慢性心肌炎、急性心肌炎、病毒性心肌炎、糖尿病性心力衰竭、酒精中毒性心肌病、心脏贮积性疾病（kardiale Speichererkrankungen）、以及舒张性和收缩性心力衰竭。

此外，根据本发明的化合物也可以用于治疗和/或预防动脉硬化、脂类代谢紊乱、低脂蛋白血症、血脂异常（Dyslipidämien）、高甘油三酯血症、高脂血症、复合高脂血症、高胆固醇血症、无β脂蛋白血症、谷固醇血症、黄瘤病、丹吉尔病、肥胖症（肥胖）、脂肪过多症（多脂症）和代谢综合征。

此外，根据本发明的化合物可以用于治疗和/或预防原发性和继发性雷诺现象、微循环紊乱、跛行、耳鸣、周围和自主神经病、糖尿病性微血管病、糖尿病性视网膜病、四肢糖尿病性溃疡、坏疽、CREST-综合征、红斑病(Erythematose)、甲癣和风湿病。

此外，根据本发明的化合物可以用于防止缺血-和/或再灌注-造成的器官或者组织损害，和作为人或者动物来源的器官、器官部分、组织或者组织部分的灌注和保存溶液的添加剂，特别是用于外科手术或者在移植医学领域。

此外，根据本发明的化合物适合用于治疗和/或预防肾疾病，特别是肾机能不全和肾衰竭。在本发明范围内，术语肾机能不全和肾衰竭包含其急性和慢性表现形式，和潜在的或者相关的肾疾病，如肾灌注不足、透析时低血压、梗阻性尿路病、肾小球病、肾小球肾炎、急性肾小球肾炎、肾小球硬化症、小管间质性疾病、肾病诸如原发性和先天性肾病、肾炎、免疫学肾疾病、例如肾移植排斥和免疫复合物诱发的肾病、毒性物质诱发的肾病、造影剂诱发的肾病、糖尿病性和非糖尿病性肾病、肾盂肾炎、肾囊肿、肾硬化、高血压性肾硬化和肾病综合征，所述疾病在诊断上例如可具有如下特征：异常减少的肌酸酐和/或水排泄，异常增高的尿、氮、钾和/或肌酸酐的血浓度、改变的肾酶活性，例如谷氨酰合成酶、改变的尿渗透性或尿量、增加的微白蛋白尿、大蛋白尿、肾小球和微动脉上的损伤、肾小管扩张、高磷酸酯酶血症和/或透析需要。本发明还包括本发明的化合物用于治疗和/或预防肾机能不全后遗症的用途，例如高血压、肺水肿、心力衰竭、尿毒症、贫血、电解质紊乱(例如高钙血症、低钠血症)以及骨-和碳水化合物-代谢中的紊乱。

另外，根据本发明的化合物适合用于治疗和/或预防泌尿生殖系统的疾病，例如，良性前列腺综合征(BPS)、良性前列腺增生(BPH)、良性前列腺肥大(BPE)、膀胱出口梗阻(BOO)、下泌尿道综合征(LUTS)、神经源性的膀胱过度活动症(OAB)，失禁例如，混合性失禁、急迫性失禁、压迫性失禁或溢出性失禁(MUI、UUI、SUI、OUI)、骨盆痛以及勃起功能障碍和女性性功能障碍。

根据本发明的化合物也适合用于治疗和/或预防哮喘疾病、慢性阻塞性呼吸道疾病(COPD)、急性呼吸道综合征(ARDS)和急性肺损伤(ALI)、α-1-抗胰蛋白酶缺乏(AATD)、肺纤维化、肺气肿(例如由于香烟烟气诱发的肺气肿)和囊性纤维化(CF)，以及肺动脉高血压(PAH)和其它形式的肺性高血压(PH)，包括与左心疾病、HIV、镰状细胞贫血、血栓栓塞、结节病、COPD或肺纤维化-相关的肺性高血压。

本发明描述的化合物还为用于控制特征在于NO/cGMP系统紊乱的中枢神经系统疾病的活性物质。它们特别适合在认知缺损后用于改善知觉、注意力、学习能力或记忆力，所述认知缺损如特别是伴随着状况/疾病/综合征发生的那些，如“轻度认知缺损”、伴随年老而来的学习-和记忆力减退、伴随年老而来的记忆丧失、血管性痴呆、颅脑创伤、中风、中风后发生的痴呆(“中风后痴呆”)、创伤后颅脑创伤、一般性注意集中障碍、儿童学习和记忆力问题方面的注意集中障碍、阿尔茨海默病、路易体痴呆、额叶退化痴呆包括皮克斯综合症、帕金森病、渐进性核麻痹、皮质基底节变性痴呆、肌萎缩侧索硬化症(ALS)、亨廷顿病、脱髓鞘作用、多发性硬化症、丘脑退化、克-雅病痴呆、HIV痴呆、伴有痴呆的精神分裂或柯萨可夫精神病。它们也适合用于治疗和/或预防中枢神经系统的疾病如焦虑状态、紧张状态和抑郁状态、中枢神经引起的性功能障碍和睡眠紊乱以及用于调节食物、兴奋剂和上瘾性物质摄取的病理紊乱。

根据本发明的化合物另外还适合用于调节脑血流量并且是用于防治偏头疼的非常有效的药剂。它们也适合用于预防和防治大脑梗死(大脑中风)后遗症如中风、大脑缺血和颅脑创伤。根据本发明的化合物同样可用于防治疼痛状态。

另外，根据本发明的化合物具有抗炎作用，并因此可作为抗炎剂用于治疗和/或预防脓毒症(SIRS)、多器官功能衰竭(MODS、MOF)、肾脏的炎症性疾病、慢性肠炎症(IBD、克罗恩氏病、溃疡性结肠炎)、胰腺炎、腹膜炎、类风湿性疾病、炎症性皮肤病和炎症性眼病。

根据本发明的化合物还适合用于治疗和/或预防内脏器官例如肺、心、肾、骨髓并特别是肝的纤维化疾病，以及皮肤纤维化和眼的纤维化疾病。在本发明的范围内，术语纤维化疾病特别包括下面的疾病：肝纤维化、肝硬化、肺纤维化、心内膜心肌纤维化、肾病、肾小球肾炎、间质性肾纤维化、糖尿病引起的纤维化损害、骨髓纤维化和类似的纤维化疾病、硬皮病、硬斑病、瘢痕疙瘩、肥厚型疤痕、痣、糖尿病性视网膜病变、增殖性玻璃体视网膜病变和结缔组织疾病(例如结节病)。根据本发明的化合物还可以用于促进伤口愈合，用于防治手术后瘢痕形成（例如在青光眼手术后），和在美容上用于老化中的或角质化的皮肤。

由于它们的活性谱，根据本发明的化合物特别适于治疗和/或预防心血管疾病，诸如心力衰竭、心绞痛、高血压和肺性高血压，以及血栓栓塞性疾病、缺血、血管疾病、微循环紊乱、肾机能不全、纤维化疾病和动脉硬化。

本发明另外提供了根据本发明的化合物用于治疗和/或预防疾病、特别是上述疾病的应用。

本发明另外提供了根据本发明的化合物用于制备用于治疗和/或预防疾病、特别是上述疾病的药物的应用。

本发明另外提供了根据本发明的化合物在治疗和/或预防疾病、特别是上述疾病的方法中的应用。

本发明另外提供了使用有效量的至少一种根据本发明的化合物用于治疗和/或预防疾病、特别是上述疾病的方法。

根据本发明的化合物可单独使用，或者在需要时与其它活性物质结合使用。本发明进一步提供尤其是用于治疗和/或预防上述疾病的药物，所述药物包含至少一种根据本发明的化合物和一种或多种另外的活性物质。作为适合的组合活性物质示例性并优选地可提及：

●有机硝酸盐/酯和NO-供体，例如硝普钠、硝化甘油、单硝酸异山梨酯、二硝酸异山梨酯、吗多明或SIN-1、和吸入性NO；

●抑制环磷酸鸟苷(cGMP)分裂的化合物，例如，磷酸二酯酶(PDE)1, 2和/或5抑制剂，特别是PDE 5抑制剂如西地那非, 伐地那非和他达拉非；

●NO-非依赖性的、但是血红素-依赖性的鸟苷酸环化酶刺激剂，诸如尤其是利奥西呱（Riociguat）以及在WO 00/06568、WO 00/06569、WO 02/42301和WO 03/095451中描述的化合物；

●起抗血栓形成作用的试剂，例如并优选选自血小板凝集抑制剂、抗凝血剂或致纤溶（profibrinolytischen）物质；

●降低血压的活性物质，例如并优选选自：钙拮抗剂、血管紧张素AII-拮抗剂、ACE-抑制剂、内皮素-拮抗剂、肾素抑制剂、α-受体阻滞剂、β-受体-阻滞剂、盐皮质激素-受体-拮抗剂和利尿剂；和/或

●改变脂类代谢的活性物质，例如并优选选自甲状腺受体-激动剂，胆固醇合成-抑制剂例如并优选HMG-CoA-还原酶-抑制剂或角鲨烯合成-抑制剂，ACAT-抑制剂、CETP-抑制剂、MTP-抑制剂、PPAR-α-、PPAR-γ-和/或PPAR-δ-激动剂、胆固醇-吸收抑制剂、脂肪酶-抑制剂、多聚胆汁酸-吸附剂、胆汁酸-重吸收抑制剂和脂蛋白（a）拮抗剂。

起抗血栓形成作用的试剂优选指的是选自血小板凝集抑制剂、抗凝血剂或致纤溶物质的化合物。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与血小板凝集抑制剂联合施用，所述凝血细胞聚集抑制剂例如且优选是阿司匹林、氯吡格雷、噻氯匹定或双嘧达莫。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与凝血酶抑制剂联合施用，所述凝血酶抑制剂例如且优选是希美加群、美拉加群、达比加群、比伐卢定或克赛。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与GPIIb/IIIa-拮抗剂联合施用，所述GPIIb/IIIa-拮抗剂例如且优选是替罗非班或阿昔单抗。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与因子Xa-抑制剂联合施用，所述因子Xa-抑制剂例如且优选是利伐沙班、阿派沙班、非德沙班（Fidexaban）、雷扎沙班、磺达肝素、依达肝素（Idra­pa­rinux）、DU-176b、PMD-3112、YM-150、KFA-1982、EMD-503982、MCM-17、MLN-1021、DX 9065a、DPC 906、JTV 803、SSR-126512或SSR-128428。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与肝素或低分子量（LMW）-肝素-衍生物联合施用。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与维生素K-拮抗剂联合施用，所述维生素K-拮抗剂例如且优选是香豆素。

降低血压的活性物质优选地理解为是指选自下述的化合物：钙-拮抗剂、血管紧张素AII-拮抗剂、ACE-抑制剂、内皮素-拮抗剂、肾素-抑制剂、α-受体-阻滞剂、β-受体-阻滞剂、盐皮质激素-受体-拮抗剂和利尿剂。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与钙-拮抗剂联合施用，所述钙-拮抗剂例如且优选是硝苯地平、氨氯地平、维拉帕米或地尔硫。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与α-1-受体-阻滞剂联合施用，所述α-1-受体阻滞剂例如且优选是哌唑嗪。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与β-受体-阻滞剂联合施用，所述β-受体-阻滞剂例如且优选是普萘洛尔、阿替洛尔、噻吗洛尔、吲哚洛尔、阿普洛尔（Alprenolol）、氧烯洛尔、喷布洛尔、布拉洛尔、美替洛尔、纳多洛尔、甲吲洛尔、卡拉洛尔(Carazalol)、索他洛尔、美托洛尔、倍他洛尔、塞利洛尔、比索洛尔、卡替洛尔、艾司洛尔、拉贝洛尔、卡维地洛、阿达洛尔、兰地洛尔、奈必洛尔、依泮洛尔或布新洛尔。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与血管紧张素AII-拮抗剂联合施用，所述血管紧张素AII-拮抗剂例如且优选是氯沙坦、坎地沙坦、缬沙坦、替米沙坦或恩布沙坦。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与ACE-抑制剂联合施用，所述ACE-抑制剂例如且优选是依那普利、卡托普利、赖诺普利、雷米普利、地拉普利、福辛普利、喹那普利（Quinopril）、培哚普利或川多普利（Trandopril）。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与内皮素-拮抗剂联合施用，所述内皮素-拮抗剂例如且优选是波生坦、达卢生坦、安倍生坦或西他生坦（Sitaxsentan）。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与肾素-抑制剂联合施用，所述肾素-抑制剂例如且优选是阿利吉仑、SPP-600或SPP-800。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与盐皮质激素-受体-拮抗剂联合施用，所述盐皮质激素-受体-拮抗剂例如且优选是螺内酯或依普利酮。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与利尿剂联合施用，所述利尿剂例如且优选是呋塞米、布美他尼、托拉塞米、苄氟噻嗪、氯噻嗪、氢氯噻嗪、氢氟噻嗪、甲氯噻嗪、泊利噻嗪、三氯噻嗪、氯噻酮、吲达帕胺、美托拉宗、喹乙宗（Quin­eth­azon）、乙酰唑胺、双氯非那胺、醋甲唑胺、甘油、异山梨醇、甘露醇、阿米洛利或氨苯蝶啶。

改变脂类代谢的药剂优选理解为是指选自下述的化合物：CETP-抑制剂、甲状腺受体-激动剂、胆固醇合成-抑制剂如HMG-CoA-还原酶-或角鲨烯合成-抑制剂、ACAT-抑制剂、MTP-抑制剂、PPAR-α-、PPAR-γ-和/或PPAR-δ-激动剂、胆固醇-吸收抑制剂、聚合的胆汁酸吸附剂、胆汁酸-重吸收抑制剂、脂肪酶-抑制剂和脂蛋白(a)-拮抗剂。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与CETP-抑制剂联合施用，所述CETP-抑制剂例如且优选是托彻普(CP-529 414)、JJT-705或CETP-疫苗(Avant)。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与甲状腺受体-激动剂联合施用，所述甲状腺受体-激动剂例如且优选是D-甲状腺素、3,5,3'-三碘甲状腺原氨酸(T3)、CGS 23425或阿昔替罗(CGS 26214)。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与选自他汀类的HMG-CoA-还原酶-抑制剂联合施用，所述HMG-CoA-还原酶-抑制剂例如且优选是洛伐他汀、辛伐他汀、普伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、罗舒伐他汀或匹伐他汀。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与角鲨烯合成-抑制剂联合施用，所述角鲨烯合成-抑制剂例如且优选是BMS-188494或TAK-475。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与ACAT-抑制剂联合施用，所述ACAT-抑制剂例如且优选是阿伐麦布、甲亚油脂酰胺、帕替麦布、Eflucimibe或SMP-797。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与MTP-抑制剂联合施用，所述MTP-抑制剂例如且优选是英普他派（Implitapide）、BMS-201038、R-103757或JTT-130。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与PPAR-γ-激动剂联合施用，所述PPAR-γ-激动剂例如且优选是吡格列酮或罗格列酮。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与PPAR-δ-激动剂联合施用，所述PPAR-δ-激动剂例如且优选是GW-501516或BAY 68-5042。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与胆固醇-吸收抑制剂联合施用，所述胆固醇-吸收抑制剂例如且优选是依折麦布、替奎安或帕马苷。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与脂肪酶-抑制剂联合施用，所述脂肪酶-抑制剂例如且优选是奥利司他。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与聚合的胆汁酸吸附剂联合施用，所述吸附剂例如且优选是考来烯胺、考来替泊、Colesolvam、考来胶或Colestimide。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与胆汁酸-重吸收抑制剂联合施用，所述胆汁酸-重吸收抑制剂例如且优选是ASBT (= IBAT)-抑制剂，例如AZD-7806、S-8921、AK-105、BARI-1741、SC-435或SC-635。

在本发明的一个优选实施方案中，根据本发明的化合物与脂蛋白(a)-拮抗剂联合施用，所述脂蛋白(a)-拮抗剂例如且优选是吉卡宾（Gemcabene）钙(CI-1027)或烟酸。

本发明进一步的主题是包含至少一种根据本发明的化合物、通常连同一种或多种惰性、无毒、药物上适合的赋形剂的药物，及其用于上面所述目的用途。

根据本发明的化合物可全身和/或局部作用。为此目的，它们可以以适合的方式给药，例如口服给药、肠胃外给药、经肺给药、经鼻给药、舌下给药、经舌给药、经颊给药、直肠给药、真皮给药、经皮给药、结膜给药、耳道给药或作为植入物或支架给药。

对于这些给药途径，根据本发明的化合物可以适合的给药方式给药。

就口服给药而言，这样的给药形式是合适的：所述给药形式根据现有技术起作用的，快速地和/或以受限制地释放根据本发明的化合物，其含有结晶形式和/或无定形化形式和/或溶解形式的根据本发明的化合物，例如片剂（无包衣的或包衣的片剂，例如具有胃液抗性的或延迟溶解的或不溶性的包衣，所述包衣剂控制根据本发明的化合物的释放）、在口腔中快速崩解的片剂或膜/淀粉纸、膜/冻干粉剂、胶囊剂（例如硬或软明胶胶囊剂）、糖衣药丸、颗粒、丸剂、散剂、乳剂、混悬液、气雾剂或溶液。

绕开吸收步骤（例如通过静脉内的、动脉内的、心内的、椎管内或腰椎内的给药），或包括吸收（例如通过肌肉内的、皮下的、皮内的、经皮的或腹膜内的给药），可以实现肠胃外给药。适合肠胃外给药的给药形式包括以溶液、混悬液、乳剂、冻干粉剂或无菌粉末形式的注射制剂和输注制剂。

就其它给药途径而言，合适的是，例如吸入药形式（尤其是粉末吸入器和喷雾器）、滴鼻剂、-溶液或-喷剂、用于舌、舌下或经颊给药的片剂、膜剂/淀粉纸剂或胶囊剂、栓剂、耳-或眼用制剂、阴道胶囊剂、水性混悬液（洗剂、振摇混合物）、亲脂混悬液、软膏剂、乳膏剂、透皮治疗体系（例如膏药）、乳状液、糊剂、泡沫、扑粉、植入物或支架。

优选口服和肠胃外给药，尤其是口服和静脉内给药。

可以将根据本发明的化合物转化成所述的给药形式。这可以以本身已知的方式，通过与惰性的、无毒的、药学上合适的赋形剂相混合来实现。这些赋形剂尤其包括载体物质（例如微晶纤维素、乳糖、甘露醇）、溶剂（例如液体聚乙二醇）、乳化剂和分散剂或润湿剂（例如十二烷基硫酸钠、聚氧山梨醇酐油酸酯）、粘合剂（例如聚乙烯吡咯烷酮）、合成的和天然的聚合物（例如白蛋白）、稳定剂（例如抗氧化剂例如抗坏血酸）、着色剂（例如无机颜料例如铁氧化物）以及口味-和/或气味矫正剂。

一般而言，已经证实有利的是，在肠胃外给药时施用约0.001-1mg/kg、优选大约0.01-0.5 mg/kg体重的量实现了有效的结果。在口服给药的情况下，所述剂量为大约0.01-100 mg/kg，优选大约0.01- 20 mg/kg和非常特别优选0.1-10 mg/kg体重。

尽管如此，有时可能会需要偏离所述量，即取决于体重、给药途径、个体对活性物质的应答、制剂的类型和进行给药的时间或间隔。因而，在有些情况下，少于前述最少量可能足以应付，而在另一些情况下，必须超过所述上限。在施用更大量的情况下，可能适当的是，将这些量分成在一天中多次的单独给药。

下面的工作实施例说明了本发明。本发明不限于所述实施例。

除非另有说明，在下述的实验和实施例中所述的百分比数据是重量百分比，份数是重量份数。液体/液体溶液的溶剂比、稀释比和浓度数据各基于体积计。

A. 实施例

缩写和首字母简略词:

abs. 绝对

Ac 乙酰基

Alloc 烯丙氧基羰基

aq. 水性的, 水溶液

ATP 腺苷-5'-三磷酸

Bn 苄基

Boc 叔丁氧基羰基

Brij^® 聚乙二醇十二烷基醚

BSA 牛血清白蛋白

Bsp. 实施例

Bu 丁基

c 浓度

ca. 大约

cat. 催化

CI 化学电离(MS中)

d 天

TLC 薄层色谱法

DCI 直接化学电离(MS中)

DDQ 2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌

de 非对映异构体过量

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲亚砜

d. Th. 理论值的

DTT 二硫苏糖醇

ee 对映体过量

EI 电子碰撞电离(MS中)

ent 对映异构纯的, 对映异构体

eq. 当量

ESI 电喷射电离(MS中)

Et 乙基

Fmoc 9-芴基甲氧基羰基

GC 气相色谱法

ges. 饱和的

GTP 鸟苷-5'-三磷酸

h 小时

HATU O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐

HOAc 乙酸

HOSu N-羟基琥珀酰亚胺

HPLC 高压-，高效液相色谱法

iPr 异丙基

konz. 浓缩的

LC-MS 液相色谱法-质谱法联用

LDA 二异丙基氨基锂

Me 甲基

min 分钟

MS 质谱法

NBS N-溴琥珀酰亚胺

NMR 核磁共振光谱法

p 对

Pd/C 活性炭载钯

Ph 苯基

PMB 对甲氧基苄基(4-甲氧基苄基)

Pr 丙基

rac 外消旋的，外消旋体

R_f 保留指数(在DC中)

RP 反相(反相，在HPLC中)

RT 室温

R_t 保留时间(在HPLC或GC中)

s.o. 参见上文

tBu 叔丁基

TEA 三乙醇胺

TFA 三氟乙酸

THF 四氢呋喃

TMS 三甲基甲硅烷基

UV 紫外光谱法

v/v (溶液的)体积对体积比

Z 苄氧基羰基

zus. 一起。

GC-MS-和LC-MS-方法：

方法 1 (GC-MS) ：

仪器：Micromass GCT, GC 6890；柱：Restek RTX-35, 15 m x 200µm x 0.33µm；恒定氦流速：0.88 ml/min；恒温箱：70℃；入口: 250℃；梯度：70℃, 30℃/min→310℃(保持3 min)。

方法 2 (LC-MS) ：

仪器：Waters Acquity SQD UPLC System；柱：Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8µ, 50 mm x 1 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.25 ml 99%的甲酸, 洗脱液B: 1 l乙腈+ 0.25 ml 99%的甲酸；梯度：0.0 min 90%A→1.2 min 5%A→2.0 min 5%A；流速：0.40 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210-400 nm。

方法 3 (LC-MS) ：

仪器：带有水UPLC Acquity的Micromass Quattro Premier ；柱：Thermo Hypersil GOLD 1.9µ, 50 mm x 1 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50%的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50%的甲酸；梯度：0.0 min 90%A→0.1 min 90%A→1.5 min 10%A→2.2 min 10%A；流速：0.33 ml/min；恒温箱：50℃；紫外检测：210 nm。

方法 4 (LC-MS) ：

MS仪器类型: Waters ZQ; HPLC仪器类型: Agilent 1100系列; UV DAD；柱：Thermo Hypersil GOLD 3µ, 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50%的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50%的甲酸；梯度：0.0 min 100%A→3.0 min 10%A→4.0 min 10%A→4.1 min 100%A (流速2.5 ml/min)；恒温箱：55℃；流速：2 ml/min；紫外检测：210 nm。

方法 5 (LC-MS) ：

MS仪器类型: Waters Micromass Quattro Micro; HPLC仪器类型: Agilent 1100系列；柱：Thermo Hypersil GOLD 3µ, 20 mm x 4 mm；洗脱液A：1 l水+ 0.5 ml 50%的甲酸，洗脱液B：1 l乙腈+ 0.5 ml 50%的甲酸；梯度：0.0 min 100%A→3.0 min 10%A→4.0 min 10%A→4.01 min 100%A (流速2.5 ml/min)→5.00 min 100%A；恒温箱：50℃；流速：2 ml/min；紫外检测：210 nm。

起始原料和中间体：

实施例1A

1-(3-溴-4-氟苄基)环丙烷甲酸叔丁酯

在氩气下，将199.5 ml (1.42 mol)二异丙胺预先加入1300 ml干燥的THF中，并将混合物冷却至-50℃。缓慢地逐滴加入569.1 ml (1.42 mol)正丁基锂溶液(2.5 M在己烷中)。将得到的混合物温热至0℃，然后冷却至-70℃。将161.9 g (1.14 mol)环丙烷甲酸叔丁酯在380 ml THF中的溶液加入该反应溶液中，在加入过程中，保持温度低于-60℃。在-78℃搅拌4 h以后，加入262 g (0.95 mol) 2-溴-4-(溴甲基)-1-氟苯在480 ml THF中的溶液，在此过程中再次保持温度低于-60℃。然后将该反应混合物缓慢地温热至室温过夜，此后小心地加入1.5升饱和氯化铵水溶液和3.0升乙酸乙酯。相分离后，用乙酸乙酯萃取水相。将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。通过色谱法在3 kg硅胶上纯化粗产物(洗脱液环己烷/二氯甲烷9:1，然后5:1)。如此得到189.9 g (理论值的50.4%)标题化合物。

实施例2A

1-[3-(苄基氨基)-4-氟苄基]环丙烷甲酸叔丁酯

在氩气下和干燥条件下，将174.0 g (528.5 mmol) 1-(3-溴-4-氟苄基)环丙烷甲酸叔丁酯、69.2 ml (634.2 mmol)苄胺、4.84 g (5.29 mmol)三(二亚苄基丙酮)二钯、60.95 g (634.2 mmol)叔丁醇钠和3.29 g (5.29 mmol) (±)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘悬浮于1218 ml甲苯中。然后将该反应混合物在110℃搅拌2.0 h。冷却后，将2.1升乙酸乙酯和1.7升半饱和氯化铵水溶液加入反应混合物中。相分离后，将有机相用饱和氯化铵溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。通过色谱法在3.7 kg硅胶上纯化粗产物(洗脱液石油醚/乙酸乙酯20:1)。如此得到145.0 g (理论值的68.7%)标题化合物。

实施例3A

1-(3-氨基-4-氟苄基)环丙烷甲酸叔丁酯

将145.0 g (407.9 mmol) 1-[3-(苄基氨基)-4-氟苄基]环丙烷甲酸叔丁酯溶解在1450 ml乙醇中，并加入9.67 g氢氧化钯(20%，在碳上)。在室温，在氢气氛下，将该混悬液在常压下搅拌18 h。经硅藻土抽滤反应混合物，并浓缩滤液。在高真空下干燥后，将500 ml戊烷加入残余物中，由此产物作为固体沉淀出来。将该混悬液在冰浴中搅拌1 h。然后抽滤出固体，用少量戊烷洗涤2次，并在高真空下干燥。如此得到88.5 g (理论值的73.6%)标题化合物。

实施例4A

(2E)-3-(4-氟-3-硝基苯基)丙烯酸叔丁酯

在室温和略微冷却下，将99.23 g (394 mmol)二乙基膦酰基乙酸叔丁酯逐滴加入到15.74 g (394 mmol)氢化钠(60%，在矿物油中)在540 ml THF中的混悬液中。在加入结束后，在室温继续搅拌30 min，并在冷却至0℃以后，加入60.5 g (358 mmol) 4-氟-3-硝基苯甲醛在324 ml THF中的溶液。将该反应混合物温热至室温过夜，然后加入到10%的氯化钠水溶液中。用乙酸乙酯萃取2次。将合并的有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。通过色谱法在硅胶上纯化残余物(洗脱液石油醚/乙酸乙酯9:1) (2次)。得到82.0 g (理论值的84.9%)目标产物。

实施例5A

3-(3-氨基-4-氟苯基)丙酸叔丁酯

将81.0 g (303 mmol) (2E)-3-(4-氟-3-硝基苯基)丙烯酸叔丁酯在810 ml THF和810 ml乙醇的混合物中的溶液用氩气惰性化，并加入8.1 g 10%的炭载钯。将该混悬液在氢气氛下在标准压力在室温搅拌9 h。然后经硅藻土抽滤该反应混合物，并浓缩滤液。通过色谱法在硅胶上纯化粗产物(洗脱液石油醚/乙酸乙酯4:1)。得到66.0 g (理论值的91%)标题化合物。

实施例6A

(2E)-3-(4-氯-3-硝基苯基)丙烯酸叔丁酯

在0℃，在冷却下，将156.32 g (620 mmol)二乙基膦酰基乙酸叔丁酯逐滴加入到23.71 g (593 mmol)氢化钠(60%的，在矿物油中)在1.0升THF中的混悬液中。在加入结束后，将该混合物在0℃继续搅拌30 min，然后加入100.0 g (539 mmol) 4-氯-3-硝基苯甲醛在200 ml THF中的溶液。将该反应混合物在温热至室温过夜，然后加入水和乙酸乙酯。分离有机相，用硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。从异丙醇中重结晶出残余物。在高真空下干燥，得到144.0 g (理论值的94.2%)目标产物。

实施例7A

3-(3-氨基-4-氯苯基)丙酸叔丁酯

在氩气下，将5.4 g 10%的炭载钯加入到72.0 g (254 mmol) (2E)-3-(4-氯-3-硝基苯基)丙烯酸叔丁酯在1.0升乙酸乙酯中的溶液中。将该混悬液在氢气氛下在标准压力在室温搅拌7 h。然后经硅藻土抽滤该反应混合物，并浓缩滤液。通过色谱法在硅胶上纯化粗产物(洗脱液环己烷/乙酸乙酯9:1)。得到38 g (理论值的58%)标题化合物。

实施例8A

(E/Z)-3-(4-氟-3-硝基苯基)-2-甲基丙-2-烯酸乙酯

将3.17 g氢化钠(60%的在矿物油中的混悬液，79.36 mmol)悬浮于90 ml THF/DMF混合物(2:1)中。将该混合物冷却至0℃，并逐滴加入19.76 g (82.96 mmol) 2-膦酰基丙酸三乙酯在60 ml THF/DMF (2:1)中的溶液。30 min以后，在0℃逐滴加入12.2 g (72.14 mmol) 4-氟-3-硝基苯甲醛在60 ml THF/DMF (2:1)中的溶液。加入结束以后，将该反应混合物缓慢地温热至室温并在该温度搅拌2 h。然后将该反应混合物加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次，并在真空中浓缩合并的有机相。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯20:1)进行纯化。得到15.2 g (理论值的83.2%)目标产物，为E/Z异构体混合物(E/Z 91:9)。

实施例9A

(±)-3-(3-氨基-4-氟苯基)-2-甲基丙酸乙酯

在100 ml乙醇和100 ml THF的混合物中，将炭载钯(10%)加入到15.2 g (60.02 mmol) (E/Z)-3-(4-氟-3-硝基苯基)-2-甲基丙-2-烯酸乙酯(E/Z 91:9)中，并在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌过夜。然后将经硅藻土（Celite）过滤该反应混合物，将残余物用乙醇/二氯甲烷洗涤，并在真空中浓缩合并的滤液。将产物在高真空下干燥。得到13.34 g目标产物(理论值的98.7%)。

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.15 ml；温度：30℃；洗脱液：90%异己烷/10%乙醇；流速：15 ml/min；检测：220 nm]，将上面得到的外消旋体分离成对映异构体。由7.25 g外消旋体起始，得到3.43 g对映异构体1 (实施例 10A)和3.35 g对映异构体2 (实施例 11A)：

实施例10A

(+)-(2S)-3-(3-氨基-4-氟苯基)-2-甲基丙酸乙酯

。

实施例11A

(-)-(2R)-3-(3-氨基-4-氟苯基)-2-甲基丙酸乙酯

。

实施例12A

(E/Z)-3-(4-氯-3-硝基苯基)-2-甲基丙-2-烯酸乙酯

将4.74 g氢化钠(60%的在矿物油中的混悬液，118.56 mmol)悬浮于93 ml THF/DMF混合物(1:1)中。将该混合物冷却至0℃，并逐滴加入26.6 ml (123.95 mmol) 2-膦酰基丙酸三乙酯。30 min以后，在0℃加入20.0 g (107.78 mmol) 4-氯-3-硝基苯甲醛。加入结束以后，将该反应混合物缓慢地温热至室温并在该温度搅拌另外3 h。然后将该反应混合物加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次，并将合并的有机相在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯70:1→50:1)进行纯化。得到26.7 g (理论值的91.9%)目标产物，为E/Z异构体混合物(E/Z 91:9)。

实施例13A

(±)-3-(3-氨基-4-氯苯基)-2-甲基丙酸乙酯

将10.0 g (37.08 mmol) (E/Z)-3-(4-氯-3-硝基苯基)-2-甲基丙-2-烯酸乙酯(E/Z 91:9)溶解在25 ml乙酸乙酯和25 ml乙酸中，并加入炭载钯(10%)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌共6 h，在2 h以后再次加入25 ml乙酸和10%的炭载钯的其它部分。然后将该混合物经硅藻土（Celite）过滤，并将残余物用乙醇/二氯甲烷洗涤。将合并的滤液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯30:1→10:1)进行纯化。得到4.01 g目标产物(理论值的44.7%)。

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak OJ-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.15 ml；温度：35℃；洗脱液：50%异己烷/50%异丙醇；流速：15 ml/min；检测：220 nm]，将上面得到的外消旋体分离成对映异构体。由10.3 g外消旋体起始，得到4.0 g对映异构体1 (实施例 14A)和3.7 g对映异构体2 (实施例 15A)：

实施例14A

(-)-(2R)-3-(3-氨基-4-氯苯基)-2-甲基丙酸乙酯

。

实施例15A

(+)-(2S)-3-(3-氨基-4-氯苯基)-2-甲基丙酸乙酯

。

实施例16A

(2E/Z)-3-(4-氯-3-硝基苯基)丁-2-烯酸叔丁酯

将2.87 g氢化钠(60%的在矿物油中的混悬液，71.65 mmol)悬浮于80 ml THF中。将该混合物冷却至0℃，并逐滴加入17.6 ml (74.9 mmol) (二乙氧基磷酰基)乙酸叔丁酯。30 min以后，在0℃加入13.0 g (65.1 mmol) 4-氯-3-硝基乙酰苯。加入结束以后，将该反应混合物缓慢地温热至室温，并在室温搅拌另外1.5 h，然后将该混合物加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次，并将合并的有机相在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯20:1→10:1)进行纯化。得到17.03 g (理论值的87.8%)目标产物，为E/Z异构体混合物(E/Z约1:1)。

实施例17A

(±)-3-(3-氨基-4-氯苯基)丁酸叔丁酯

将11.5 g (38.62 mmol)　(2E/Z)-3-(4-氯-3-硝基苯基)丁-2-烯酸叔丁酯(E/Z约1:1)溶解在60 ml乙酸乙酯和60 ml乙酸中，并加入炭载钯(10%)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌6 h。将该混合物经硅藻土（Celite）过滤，并将残余物用乙酸乙酯洗涤。将合并的滤液用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯30:1)进行纯化。得到3.90 g (理论值的37.4%)目标产物。

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.15 ml；温度：30℃；洗脱液：90%异己烷/10%乙醇；流速：15 ml/min；检测：220 nm]，将上面得到的外消旋体分离成对映异构体。由5.0 g外消旋体起始，得到2.1 g对映异构体1 (实施例 18A)和1.8 g对映异构体2 (实施例 19A)：

实施例18A

(3R)-3-(3-氨基-4-氯苯基)丁酸(+)-叔丁酯

。

实施例19A

(3S)-3-(3-氨基-4-氯苯基)丁酸(-)-叔丁酯

。

实施例20A

2-溴-4-(溴甲基)-1-氯苯

。

步骤 1 ：

将199.0 g (0.845 mol) 3-溴-4-氯苯甲酸溶解在2.5升THF中，将该混合物冷却至-10℃，并在该温度加入1.69升(1.69 mol) 1 M的硼烷在THF中的溶液。将该反应混合物温热至室温过夜，然后加入饱和氯化铵水溶液。加入水以后，用乙酸乙酯萃取混合物2次。合并的有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。得到206 g作为粗产物的(3-溴-4-氯苯基)甲醇，其不经进一步纯化地用于下一步。

步骤 2 ：

将260 g (约1.05 mol)粗制的(3-溴-4-氯苯基)甲醇溶解在2.86升二氯甲烷中，将溶液冷却至-5℃，并缓慢地加入127.1 g (44.6 ml, 460 mmol)三溴化磷。在加入结束后，将该混合物在-5℃搅拌另外1 h，然后用二氯甲烷和水稀释。分离出有机相，经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。得到作为粗产物的280.5 g (理论值的约84%) 2-溴-4-(溴甲基)-1-氯苯。

实施例21A

1-(3-溴-4-氯苄基)环丙烷甲酸叔丁酯

在氩气下，将140.2 ml (1.0 mol)二异丙胺溶解在1200 ml干燥的THF中，并冷却至-30℃。逐滴加入400 ml (1.0 mol)正丁基锂溶液(2.5 M在己烷中)。将得到的混合物温热至0℃，然后冷却至-70℃。将94.8 g (0.667 mol)环丙烷甲酸叔丁酯在750 ml THF中的溶液加入该反应溶液中，其间保持温度低于-60℃。在-60℃搅拌4 h后，加入208.6 g (0.733 mol) 2-溴-4-(溴甲基)-1-氯苯在550 ml THF中的溶液，其间再次保持温度低于-60℃。将该反应混合物缓慢地温热至室温过夜，然后小心地加入饱和氯化铵水溶液。相分离后，用乙酸乙酯萃取水相。合并的有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/二氯甲烷4:1)纯化粗产物。得到95.5 g (理论值的41.4%)标题化合物。

实施例22A

1-[3-(苄基氨基)-4-氯苄基]环丙烷甲酸叔丁酯

在氩气下，依次地将95.0 g (274.8 mmol) 1-(3-溴-4-氯苄基)环丙烷甲酸叔丁酯、36.0 ml (330.0 mmol)苄胺、12.58 g (13.7 mmol)三(二亚苄基丙酮)二钯、31.69 g (329.8 mmol)叔丁醇钠和6.85 g (5.29 mmol) (±)-2,2'-双(二苯基膦基)-1,1'-联萘加入到633 ml干燥的甲苯中。将该反应混合物在110℃搅拌3.0 h，然后在室温搅拌过夜。然后经硅藻土抽滤反应混合物，用甲苯和乙酸乙酯彻底洗涤残余物。在真空中浓缩合并的滤液。通过色谱法在硅胶上(洗脱液石油醚/乙酸乙酯10:1)纯化粗产物。得到50.0 g标题化合物(理论值的48.9%)。

实施例23A

1-(3-氨基-4-氯苄基)环丙烷甲酸叔丁酯

将50.0 g (134.4 mmol) 1-[3-(苄基氨基)-4-氯苄基]环丙烷甲酸叔丁酯溶解在1.5升乙酸乙酯中，并加入1.43 g (1.34 mmol)钯(10%，在碳上)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下在室温搅拌过夜。然后经硅藻土抽滤反应混合物，并浓缩滤液。通过色谱法在硅胶上(洗脱液石油醚/乙酸乙酯10:1)，纯化粗产物。使用甲醇/水-混合物(70:30)拌和得到的产物，并分离固体。得到24.3 g (理论值的64.1%)目标化合物。

实施例24A

N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(外消旋的非对映异构体混合物)

将15.0 g (72 mmol) D,L-4,4,4-三氟缬氨酸盐酸盐逐份引入到160 ml饱和碳酸氢钠水溶液中。在室温，将19.8 g (79 mmol) N-(苄氧基碳酰氧基)琥珀酰亚胺在150 ml二噁烷中的溶液加入该混合物中。将得到的反应混合物剧烈搅拌2 h。然后在真空中很大程度地除去二噁烷。用1 N盐酸将该混合物酸化至约2的pH，然后用二氯甲烷萃取3次，并将合并的有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将粗产物在高真空下干燥，并不经进一步纯化用于后续反应。得到26.0 g目标产物(纯度约80%，理论值的约95%)。

((在每种情况下(在每种情况下

(在每种情况下

(在每种情况下。

实施例25A

N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(外消旋的非对映异构体混合物)

将6.63 g (57.8 mmol)琥珀酰亚胺预先加入到100 ml THF中，并在室温下加入10.1 ml (72.6 mmol)三乙胺。冷却至0℃以后，将6.98 g (57.8 mmol)氯甲酸烯丙酯在10 ml THF中的溶液逐滴加入到该混合物中。将该混合物在0℃搅拌1 h，然后加入10.1 ml (72.6 mmol)三乙胺和10.0 g (48.2 mmol) D,L-4,4,4-三氟缬氨酸盐酸盐。在加入结束后，将该反应混合物在剧烈搅拌下缓慢地温热至室温，并在2 h以后加入水。用1 N盐酸酸化至约2的pH后，用乙酸乙酯萃取水相3次。将合并的有机相经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯4:1 + 1%乙酸)进行纯化。得到9.15 g目标产物(理论值的74.4%)。

两种非对映异构体

((在每种情况下((在每种情况下

(在每种情况下d, 来自1H), 13.16 (br. s, 1H)。

实施例26A

(3R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯

在室温，将133 ml (1.82 mol)亚硫酰氯缓慢地加入到287 g (1.65 mol) (3R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸[A.Gerlach和U.Schulz, Speciality 　 Chemicals 　 Magazine 24 (4), 37-38 (2004); CAS登录号142:179196]在580 ml乙醇中的溶液中。然后将该反应混合物加热至80℃，并在该温度搅拌2 h。然后将该混合物冷却至室温，缓慢地加入250 ml水，并用每次150 ml叔丁基甲基醚萃取该混合物3次。合并的有机相经硫酸钠干燥。过滤后，在真空中在30℃和300毫巴压力下除去溶剂。然后在100毫巴和65℃的柱顶温度下蒸馏粗产物。分离出225.8 g (113 mol, 理论值的74%)作为无色液体的标题化合物。

。

实施例27A

(3R)-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物)

。

步骤 1: (3S)-2-溴-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯(非对映异构体混合物)

将91.2 ml (228 mmol) 2.5 M的正丁基锂溶液在己烷中的溶液加入冷却至-40℃的32.0 ml (228 mmol)二异丙胺在160 ml绝对THF中的溶液中。将得到的LDA溶液在-40℃再搅拌30 min，然后冷却至-78℃，随后逐滴加入52.4 ml (413 mmol)氯三甲基硅烷。5 min以后，历时1 h逐滴加入溶解在40 ml绝对THF中的40.0 g (217.2 mmol) (3R)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸(+)-乙酯。在-78℃，将分成3份的共计40.59 g (228 mmol) N-溴琥珀酰亚胺加入得到的混悬液中，然后将该混合物缓慢地温热至室温过夜。小心地加入水，并用乙酸乙酯萃取该反应混合物。依次用1 N盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤有机相，经硫酸钠干燥并在冷却下在真空中浓缩。将130 ml乙醚加入得到的混悬液中，并保持在4℃过夜。然后滤出并抛弃不溶的固体。在冷却下在真空中浓缩滤液，并将残余物在高真空下短暂地干燥。得到48.5 g作为粗产物的(3S)-2-溴-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯(非对映异构体混合物)。

步骤 2: (3R)-2-叠氮基-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯(非对映异构体混合物)

将48.5 g粗制的(3S)-2-溴-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯(非对映异构体混合物)溶解在130 ml DMF中，并在室温下加入17.98 g (276.55 mmol)叠氮化钠。将该反应混合物在室温剧烈搅拌过夜。然后用600 ml乙酸乙酯稀释，并用饱和氯化钠溶液和水的1:1混合物（调至pH 8）洗涤。相分离以后，将水相用200 ml乙酸乙酯重萃取。将合并的有机相依次用各100 ml饱和氯化钠溶液和水的1:1混合物洗涤2次，并用各50 ml饱和氯化钠溶液和水的1:1混合物洗涤2次，经硫酸钠干燥并在冷却下在真空中浓缩。将残余物在高真空下短暂地干燥(排气时小心)。得到32.8 g作为粗产物的(3R)-2-叠氮基-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯(非对映异构体混合物)，使其直接进一步反应。

步骤 3: (3R)-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物)

将32.8 g粗制的(3R)-2-叠氮基-4,4,4-三氟-3-甲基丁酸乙酯(非对映异构体混合物)溶解在110 ml乙醇中，并在用氩气惰性化以后，加入6.98 g炭载钯(5%)。将该混合物在氢气氛下在标准压力搅拌过夜，其间将反应容器多次排空并再用新鲜氢气填充。然后将该反应混合物经硅藻土（Celite）滤出，将滤渣用50 ml乙醇洗涤，并将滤液在真空(最多约20 mmHg)中浓缩。将剩下的淡黄色液体在高真空下短暂地除去残余溶剂。得到23.5 g作为约70%的纯粗产物的目标化合物，不对其进行任何进一步纯化(3步的收率为理论值的约38%)。

实施例28A

(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物)

将23.5 g (3R)-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物, 粗产物约70%)和18.1 ml (130 mmol)三乙胺溶解在235 ml THF中，并加入32.3 g (130 mmol) N-(苄氧基碳酰氧基)琥珀酰亚胺。将该反应混合物在室温搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释。将该混合物依次用饱和碳酸氢钠溶液、1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯6:1)进行纯化。得到22.1 g目标产物(理论值的约80%，非对映异构体比率约2:1)。

实施例29A

(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(非对映异构体混合物)

将2.15 g (6.45 mmol) (3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物)溶解在各8 ml的THF、甲醇和水的混合物中，并在0℃加入3.87 g (96.8 mmol)氢氧化钠。除去冰冷却，并将该反应混合物在室温搅拌1 h。然后将该混合物加入水中，用半浓缩的盐酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。得到1.95 g目标产物，不对其进行任何进一步纯化(理论值的99%，非对映异构体比率约2.8:1)。

两种非对映异构体

(在每种情况下(在每种情况下

约(在每种情况下

d, 来自1H), 12.63 (br. s, 1H)。

实施例30A

(3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物)

将9.7 ml (69.3 mmol)三乙胺逐滴加入到6.38 g (55.4 mmol)琥珀酰亚胺在90 ml绝对THF中的溶液中。将得到的混悬液冷却至0℃，并逐滴加入6.68 g (55.4 mmol)氯甲酸烯丙酯在10 ml绝对THF中的溶液。将该混合物在0℃搅拌1 h，并加入分成3份的共计9.2 g (约46 mmol) (3R)-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物，粗产物)。将该反应混合物温热至室温过夜，然后用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1→4:1)进行纯化。得到6.50 g目标产物(理论值的约50%，非对映异构体比率约2:1)。

实施例31A

(3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(非对映异构体混合物)

将6.50 g (22.9 mmol) (3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸乙酯(非对映异构体混合物)溶解在各28 ml的THF、乙醇和水的混合物中，并在0℃加入13.77 g (344 mmol)氢氧化钠。除去冰冷却，并将该反应混合物在室温搅拌过夜。然后将该混合物加入水中，用半浓缩的盐酸酸化，并用乙酸乙酯萃取。将有机相用饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。得到4.39 g目标产物不对其进行任何进一步纯化(理论值的75%，非对映异构体比率约2.5:1)。

实施例32A

1-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苄基]环丙烷甲酸叔丁酯(外消旋的非对映异构体混合物)

将4.80 g (15.7 mmol) N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(外消旋的非对映异构体混合物)和5.01 g (18.9 mmol) 1-(3-氨基-4-氟苄基)环丙烷甲酸叔丁酯溶解在40 ml DMF和10 ml吡啶的混合物中，并在室温下加入6.58 g (17.3 mmol) HATU。将该反应混合物在室温搅拌过夜，然后加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次，然后将合并的有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液、1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯20:1→10:1)进行纯化。得到5.34 g目标产物(理论值的61.5%，非对映异构体比率约2.5:1)。

(在每种情况下

(t和(在每种情况下

(在每种情况下

(在每种情况下。

实施例33A

3-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苯基]丙酸叔丁酯(外消旋的非对映异构体混合物)

将10.30 g (33.7 mmol) N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(外消旋的非对映异构体混合物)和9.69 g (40.5 mmol)　3-(3-氨基-4-氟苄基)丙酸叔丁酯溶解在40 ml DMF和10 ml吡啶的混合物中，并在室温下加入16.68 g (43.9 mmol) HATU。将该反应混合物在室温搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释。将该混合物依次用饱和碳酸氢钠溶液、1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1)预纯化。将含有产物的级分在真空中浓缩，并将残余物与环己烷/乙醚5:1一起拌和。将得到的固体抽滤出，并在高真空下干燥。得到12.29 g目标产物(理论值的69%，非对映异构体比率约2.5:1)。

两种非对映异构体

(t, 约(t和(在每种情况下

(在每种情况下。

一般规程 1: HATU介导的N-保护的4,4,4-三氟缬氨酸衍生物与苯胺的酰胺偶联

在室温，将HATU (1.0-2.0当量)加入所涉及的N-保护的4,4,4-三氟缬氨酸衍生物(约0.8-1.5当量，0.15-1.5 mol/l)和苯胺(约0.8-1.5当量，0.15-1.5 mol/l)在DMF和吡啶的混合物(混合比约3:1至1.5:1)中的溶液中。或者，也可使用N,N-二异丙基乙胺(2.0-5.0当量)替代吡啶。将得到的混合物在室温至60℃的温度下搅拌4 h至48 h。任选地，在24 h以后，加入另一部分的苯胺组分或三氟缬氨酸衍生物和HATU。在反应结束后，可以在真空中除去溶剂以后，通过制备型RP-HPLC (洗脱液：乙腈/水-梯度)纯化粗产物；或可替换地，在反应混合物的水性后处理以后，通过色谱法在硅胶上(洗脱液：环己烷/乙醚-、石油醚/乙酸乙酯-、环己烷/乙酸乙酯-或二氯甲烷/甲醇-混合物)纯化粗产物。

根据一般规程1，制备下述实施例：

。

实施例43A

(2S)-3-[3-({(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苯基]-2-甲基丙酸乙酯(非对映异构体混合物)

将0.87 g (2.85 mmol) (3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(非对映异构体混合物)和0.77 g (3.42 mmol) (2S)-3-(3-氨基-4-氟苯基)-2-甲基丙酸(+)-乙酯溶解在5 ml DMF和2.5 ml吡啶的混合物中，并在室温下加入1.41 g (3.71 mmol) HATU。将该反应混合物在室温搅拌过夜，然后用乙酸乙酯稀释。将该混合物依次用1 N盐酸、饱和碳酸氢钠溶液和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯6:1)进行纯化。得到1.27 g目标产物(理论值的87.2%，非对映异构体比率约4.8:1)。

实施例44A

(2S)-3-[3-({(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]-2-甲基丙酸乙酯(非对映异构体混合物)

将1.26 g (纯度76%，约3.14 mmol) (3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(非对映异构体混合物)和0.91 g (3.76 mmol) (2S)-3-(3-氨基-4-氯苯基)-2-甲基丙酸(+)-乙酯溶解在10 ml DMF和4 ml吡啶的混合物中，并在室温下加入1.55 g (4.08 mmol) HATU。将该反应混合物在室温搅拌过夜，然后加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次，然后将合并的有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液、1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将得到的固体在环己烷和乙醚(约3:1)的混合物中拌和，抽滤出并在高真空下干燥。得到0.99 g目标产物(理论值的59.9%，非对映异构体比率约7:1)。

实施例45A

1-[3-({(3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苄基]环丙烷甲酸叔丁酯(非对映异构体混合物)

将398.5 mg (1.56 mmol) (3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酸(非对映异构体混合物)和400 mg (1.42 mmol)　1-(3-氨基-4-氯苄基)环丙烷甲酸叔丁酯溶解在4.7 ml DMF和1.6 ml吡啶的混合物中，并在室温下加入647.8 mg (1.70 mmol) HATU。将该反应混合物在室温搅拌过夜。加入另外400 mg (1.42 mmol) 1-(3-氨基-4-氯苄基)环丙烷甲酸叔丁酯和647.8 mg (1.70 mmol) HATU，并将该反应混合物在50℃搅拌另外4 h。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物依次用饱和碳酸氢钠溶液、1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过制备型RP-HPLC (洗脱液：乙腈/水)进行纯化。得到453 mg目标产物(理论值的55.9%，非对映异构体比率>8:1)。

实施例46A和实施例47A

1-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苄基}环丙烷甲酸(±)-叔丁酯(非对映异构体 1 和 2)

将5.31 g (9.61 mmol)　1-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苄基]环丙烷甲酸叔丁酯(实施例32A，外消旋的非对映异构体混合物)溶解在100 ml乙醇和20 ml THF的混合物中。将该溶液用氩气惰性化，并加入511 mg炭载钯(10%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌过夜。经硅藻土过滤并用乙醇/THF洗涤以后，在真空中浓缩滤液。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯50:1→4:1)进行纯化，并分离非对映异构体：

实施例 46A ( 非对映异构体 1 ) ：

。

实施例 47A ( 非对映异构体 2 ) ：

。

实施例48A和实施例49A

3-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丙酸(±)-叔丁酯(非对映异构体 1 和 2)

将12.29 g (23.3 mmol)　3-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苯基]丙酸叔丁酯(实施例33A，外消旋的非对映异构体混合物)溶解在80 ml乙醇和20 ml THF的混合物中。将溶液用氩气惰性化，并加入745 mg炭载钯(10%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌过夜。经硅藻土过滤并用乙醇/THF洗涤以后，在真空中浓缩滤液。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯20:1→4:1)进行纯化，并分离非对映异构体：

实施例 48A ( 非对映异构体 1 ) ：

。

实施例 49A ( 非对映异构体 2 ) ：

。

实施例50A

3-(4-氟-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)丙酸(+)-叔丁酯

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.25 ml；温度：45℃；洗脱液：80%异己烷/20%乙醇(+ 0.2%二乙胺)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]，将上面得到的3-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丙酸叔丁酯(实施例48A)的外消旋非对映异构体1分离成对映异构体。由5.70 g外消旋体起始分离出2.59 g标题化合物(作为对映异构体2)。

实施例51A和实施例52A

3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丙酸(±)-叔丁酯(非对映异构体 1 和 2)

将3.19 g (5.87 mmol)　3-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]丙酸叔丁酯(实施例34A，外消旋的非对映异构体混合物)溶解在50 ml乙酸乙酯中。将溶液用氩气惰性化，并加入125 mg炭载钯(5%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌3 h。经硅藻土过滤以后，在真空中浓缩滤液。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯50:1→3:1)进行纯化，并分离非对映异构体：

实施例 51A ( 非对映异构体 1 ) ：

。

实施例 52A ( 非对映异构体 2 ) ：

。

实施例53A

3-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)丙酸(+)-叔丁酯

将1.17 g (2.16 mmol)　3-[3-({(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]丙酸叔丁酯(实施例35A, 非对映异构体混合物)溶解在20 ml乙酸乙酯中。将该溶液用氩气惰性化，并加入229 mg炭载钯(5%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌8 h。经硅藻土过滤以后，在真空中浓缩滤液。将得到的残余物再溶解在50 ml乙酸乙酯中。将溶液用氩气惰性化以后，加入另外230 mg炭载钯(5%的)，并将该反应混合物在标准氢压力下剧烈搅拌另外4 h。经硅藻土过滤以后，在真空中浓缩滤液，并将残余物再溶解在20 ml THF中。将溶液用氩气惰性化以后，加入另外230 mg炭载钯(5%的)，并将该反应混合物在标准氢压力下剧烈搅拌另外3 h。经硅藻土过滤以后，在真空中浓缩滤液，并将得到的残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯40:1→5:1)进行纯化，并分离成非对映异构体。由此得到197 mg标题化合物(理论值的22.4%)。

实施例54A

(2S)-3-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(非对映异构体混合物 1)

将2.60 g (5.07 mmol) (2S)-3-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苯基]-2-甲基丙酸乙酯(实施例36A，4种异构体的混合物)溶解在10.7 ml乙醇和10.7 ml THF的混合物中。将该溶液用氩气惰性化，并加入322 mg炭载钯(10%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌过夜。经硅藻土过滤并用二氯甲烷/甲醇洗涤以后，在真空中浓缩滤液。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1→4:1)进行纯化并分离。得到1.39 g作为非对映异构体混合物1的标题化合物(理论值的72.4%)。

实施例55A

(2S)-3-(4-氟-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)-2-甲基丙酸(+)-乙酯

。

方法 A ：

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.25 ml；温度：45℃；洗脱液：30%异己烷/70%乙醇(+ 0.2%二乙胺)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的(2S)-3-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(实施例54A)的非对映异构体混合物1。由1.39 g非对映异构体混合物起始分离出0.626 g标题化合物(作为对映异构体2)。

方法 B ：

将1.274 g (2.49 mmol) (2S)-3-[3-({(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苯基]-2-甲基丙酸乙酯(实施例43A, 非对映异构体混合物)溶解在10 ml乙醇和10 ml THF的混合物中。将溶液用氩气惰性化，并加入132 mg炭载钯(10%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌过夜。经硅藻土过滤并用二氯甲烷/甲醇洗涤以后，在真空中浓缩滤液。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯5:1→2:1)进行纯化并分离。得到713 mg标题化合物(理论值的75.9%)。

实施例56A

(2R)-3-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(非对映异构体混合物 1)

将2.36 g (4.61 mmol) (2R)-3-[3-({N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氟苯基]-2-甲基丙酸乙酯(实施例37A，4种异构体的混合物)溶解在9.8 ml乙醇和9.8 ml THF的混合物中。将溶液用氩气惰性化，并加入293 mg炭载钯(10%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌过夜。经硅藻土过滤并用二氯甲烷/甲醇洗涤以后，在真空中浓缩滤液，并将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1→4:1)进行纯化并分离。得到1.35 g作为非对映异构体混合物1的目标化合物(理论值的77.2%)。

实施例57A

(2R)-3-(4-氟-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)-2-甲基丙酸(+)-乙酯

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.4 ml；温度：45℃；洗脱液：80%异己烷/20%乙醇(+ 0.2%二乙胺)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的(2R)-3-{4-氟-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(实施例56A)的非对映异构体混合物1。由1.35 g非对映异构体混合物起始分离出0.635 g标题化合物(作为非对映异构体2)。

实施例58A

(2R)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(非对映异构体混合物 1)

将1.40 g (2.92 mmol) (2R)-3-[3-({N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]-2-甲基丙酸乙酯(实施例38A，4种异构体的混合物)和3.28 g (23.4 mmol)双甲酮预先加入10 ml绝对THF中。在室温，将溶液通过用氩气鼓泡30 min进行除氧。随后加入67.6 mg (0.058 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将该混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用饱和氯化钠溶液洗涤1次。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯40:1→20:1)进行纯化并分离。得到844 mg作为非对映异构体混合物1的目标化合物(理论值的73.1%)。

实施例59A

(2R)-3-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)-2-甲基丙酸乙酯

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.40 ml；温度：45℃；洗脱液：80%异己烷/20%乙醇(+ 2%二乙胺)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的(2R)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(实施例58A)的非对映异构体混合物1。由840 mg非对映异构体混合物起始分离出382 mg标题化合物(作为非对映异构体2)。

实施例60A

(2S)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(非对映异构体混合物 1)

将2.24 g (4.68 mmol) (2S)-3-[3-({N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]-2-甲基丙酸乙酯(实施例39A，4种异构体的混合物)和5.25 g (37.4 mmol)双甲酮预先加入25 ml绝对THF中。在室温，将溶液通过用氩气鼓泡30 min进行除氧。随后加入108.1 mg (0.094 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将该混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用饱和氯化钠溶液洗涤1次。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯40:1→20:1)进行纯化并分离。得到1.65 g作为非对映异构体混合物1的目标化合物(理论值的89.4%)。

实施例61A

(2S)-3-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)-2-甲基丙酸(+)-乙酯

。

方法 A ：

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.25 ml；温度：45℃；洗脱液：80%异己烷/20%乙醇(+ 0.2%二乙胺)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的(2S)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}-2-甲基丙酸乙酯(实施例60A)的非对映异构体混合物1。由1.65 g非对映异构体混合物起始分离出0.78 g目标化合物。

方法 B ：

将0.99 g (1.87 mmol) (2S)-3-[3-({(3R)-N-[(苄氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]-2-甲基丙酸乙酯(实施例44A, 非对映异构体混合物)溶解在50 ml乙酸乙酯中。将溶液用氩气惰性化，并加入40 mg炭载钯(5%的)。将该反应混合物在氢气氛下在标准压力下剧烈搅拌4 h。经硅藻土过滤以后，在真空中浓缩滤液，并将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯20:1→5:1)进行纯化并分离。得到444 mg标题化合物(理论值的60.1%)。

实施例62A

(3R)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丁酸叔丁酯(非对映异构体混合物 1)

将630 mg (1.24 mmol)　(3R)-3-[3-({N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]丁酸叔丁酯(实施例40A，4种异构体的混合物)和1.394 g (9.94 mmol)双甲酮预先加入10 ml绝对THF中。在室温，将溶液通过用氩气鼓泡30 min进行除氧。随后加入28.7 mg (0.025 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将该混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用饱和氯化钠溶液洗涤1次。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯40:1→20:1)进行纯化并分离。得到420 mg作为非对映异构体混合物1的目标化合物(理论值的79.9%)。

(在每种情况下(在每种情况下

。

实施例63A

(3S)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丁酸叔丁酯(非对映异构体混合物 1)

将1.39 g (2.74 mmol)　(3S)-3-[3-({N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]丁酸叔丁酯(实施例41A，4种异构体的混合物)和3.08 g (21.9 mmol)双甲酮预先加入9.4 ml绝对THF中。在室温，将溶液通过用氩气鼓泡30 min进行除氧。随后加入63.4 mg (0.055 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将该混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用饱和氯化钠溶液洗涤1次。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯40:1→20:1)进行纯化并分离。得到950 mg作为非对映异构体混合物1的目标化合物(理论值的81.9%)。

(在每种情况下(在每种情况下

。

实施例64A

(3S)-3-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苯基)丁酸叔丁酯

将1.30 g (2.56 mmol)　(3S)-3-[3-({(3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苯基]丁酸叔丁酯(实施例42A, 非对映异构体混合物)和2.88 g (20.5 mmol)双甲酮预先加入8.7 ml绝对THF中。在室温，将溶液通过用氩气鼓泡30 min进行除氧。随后加入59.3 mg (0.051 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将该混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用饱和氯化钠溶液洗涤1次。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1)进行纯化并分离。得到591 mg目标化合物(理论值的54.5%)。

实施例65A

1-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(+)-叔丁酯

将450 mg (0.867 mmol)　1-[3-({(3R)-N-[(烯丙氧基)羰基]-4,4,4-三氟缬氨酰基}氨基)-4-氯苄基]环丙烷甲酸叔丁酯(实施例45A, 非对映异构体混合物)和972.4 mg (6.94 mmol)双甲酮预先加入3 ml绝对THF中。在室温，将溶液通过用氩气鼓泡30 min进行除氧。随后加入20.0 mg (0.017 mmol)四(三苯基膦)钯(0)，并将该混合物在室温搅拌过夜。用乙酸乙酯稀释以后，将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤2次和用饱和氯化钠溶液洗涤1次。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将残余物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯20:1)进行纯化并分离。得到221.4 mg目标化合物(理论值的58.7%)。

实施例66A

3-(三氟甲基)戊烷-1,5-二醇

将12.0 g (59.97 mmol) 3-(三氟甲基)戊二酸溶解在70 ml绝对THF中，并在冷却至-10℃以后，逐滴加入120 ml (120 mmol) 1 M的氢化铝锂在THF中的溶液。在加入结束后，将该反应混合物温热至室温过夜。冷却至0℃以后，首先小心地逐滴加入约10 ml异丙醇，然后滴加20 ml异丙醇/水混合物(3:1)。将得到的混悬液通过加入1 N盐酸进行酸化并与硅藻土（Celite）混合。将该混合物过滤，并将得到的滤液在真空中浓缩。为了除去残余的水，将乙腈加入得到的油中，并将该混合物再次在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯4:1→1:1)进行纯化。得到4.5 g目标产物(理论值的43.6%)。

实施例67A

3-苯基戊烷-1,5-二醇

将3.0 g (14.4 mmol) 3-苯基戊二酸溶解在20 ml绝对THF中，将该混合物冷却至-10℃，并逐滴加入31.7 ml (31.7 mmol) 1 M的氢化铝锂在THF中的溶液。在加入过程中，加入另外50 ml绝对THF。将得到的混悬液缓慢地温热至室温，并在室温搅拌过夜。冷却至0℃以后，首先小心地逐滴加入异丙醇，然后滴加异丙醇和水(3:1)的混合物。将得到的混悬液通过加入1 N盐酸进行酸化，并与硅藻土（Celite）混合。将该混合物经硅藻土（Celite）过滤，将滤饼用异丙醇洗涤，并将得到的滤液在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯2:1→1:1)进行纯化。得到1.9 g目标产物(理论值的73%)。

可以制备不可商购得到的其它3-取代的戊烷-1,5-二醇，例如，类似于下述3步顺序68A - 69A - 70A：

实施例68A

3-环丙基丙烯酸乙酯

在0℃，将13.0 ml (64.85 mmol)二乙基膦酰基乙酸乙酯逐滴加入到2.59 g (64.85 mmol)氢化钠(60%的，在矿物油中)在110 ml绝对THF中的混悬液中。30 min以后，将该混合物温热至室温，并在再次冷却至0℃以后，逐滴加入5.3 ml (71.34 mmol)环丙烷甲醛。加入结束以后，将该反应混合物温热至室温，并用35 ml DMF稀释。将该混合物在室温搅拌过夜，然后加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相在真空中浓缩，并将粗产物通过硅胶过滤(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1→6:1)进行纯化。得到8.53 g目标产物(理论值的93.8%)。

实施例69A

3-环丙基戊烷二酸二乙酯

将29.1 ml (72.8 mmol) 2.5 M的正丁基锂在己烷中的溶液逐滴加入到冷却至-40℃的10.2 ml (72.8 mmol)二异丙胺在35 ml绝对THF中的溶液中。加入结束以后，将该混合物在-40℃搅拌另外30 min，然后冷却至-78℃，并逐滴加入7.1 ml (72.8 mmol)乙酸乙酯在10 ml绝对THF中的溶液。将该反应混合物在-78℃搅拌30 min，然后逐滴加入8.50 g (60.54 mmol) 3-环丙基丙烯酸乙酯在小量THF中的溶液。在-78℃保持1 h以后，将该混合物缓慢地温热至-40℃，然后达到0℃，最后加入饱和氯化铵水溶液。用乙酸乙酯萃取以后，将有机相用1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯30:1→6:1)进行纯化。得到3.28 g目标产物(理论值的23.7%)。

实施例70A

3-环丙基戊烷-1,5-二醇

将3.2 g (14.02 mmol) 3-环丙基戊烷二酸二乙酯溶解在24.7 ml绝对THF中，并在冷却至-10℃以后，逐滴加入25.2 ml (25.2 mmol) 1 M的氢化铝锂在THF中的溶液。将该反应混合物在室温搅拌过夜。冷却至0℃以后，小心地逐滴加入100 ml异丙醇。将该混合物通过加入1 N盐酸进行酸化并与硅藻土（Celite）混合。经硅藻土（Celite）过滤并用乙酸乙酯和水洗涤以后，将滤液用氯化钠饱和，并用乙酸乙酯萃取3次。将合并的有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。将粗产物通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯10:1→2:1)进行纯化。得到1.35 g目标产物(理论值的66.8%)。

实施例71A

3-乙基戊烷-1,5-二醇

类似于上述的3步法68A - 69A - 70A，可以得到标题化合物。

一般规程 2：将3-取代的戊烷-1,5-二醇氧化成二醛(或它们的环状缩醛)

将2.6当量的草酰氯溶解在绝对二氯甲烷(1.0-2.5 mol/l)中并冷却至约-50℃，并逐滴加入5当量的DMSO在绝对二氯甲烷(约5 mol/l)中的溶液。在约-50℃保持10 min以后，逐滴加入涉及的二醇(1.0当量)在绝对二氯甲烷(0.5-1.0 mol/l)中的溶液。另外10 min以后，将该反应混合物冷却至-78℃，并逐滴加入三乙胺(约10.5当量)和绝对二氯甲烷(体积比为1:1至1:2)的混合物。加入结束以后，将该反应混合物在约-78℃搅拌另外30 min，然后缓慢地温热(至约-20℃、0℃或室温)，然后用二氯甲烷稀释，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥，并在真空中浓缩。不对得到的粗产物进行任何进一步纯化，而是可以直接用于后续反应。

根据一般规程2制备下面的实施例，并不经进一步纯化地使用(一般而言，所述二醛可以作为粗产物在-20℃在氩气下储存):

。

实施例77A

亚环丙基乙酸甲酯

将240 g (1.38 mol) [(1-乙氧基环丙基)氧基](三甲基)硅烷, 598 g (1.79 mol) (甲氧基羰基亚甲基)三苯基正膦和21.9 g (0.179 mol)苯甲酸在3.94升甲苯中的混悬液在85℃搅拌过夜。冷却后，将该反应混合物直接通过色谱法在4.8 kg硅胶上 (洗脱液：石油醚/二氯甲烷混合物，从1:1至纯的二氯甲烷)进行纯化。将产物级分合并，并在轻微真空下浓缩。得到159 g作为澄清无色油的目标产物(粗产物仍然含有残余溶剂)。

实施例78A

2,2’-环丙烷-1,1-二基二乙酸乙酯甲酯

将240 ml (1.70 mol)二异丙胺溶解在700 ml绝对THF中，将该混合物冷却至-40℃，并缓慢地加入681 ml (1.7 mol) 2.5 M的正丁基锂在己烷中的溶液。将溶液在-40℃搅拌30 min，然后冷却至-78℃，并加入166.6 ml (1.7 mol)乙酸乙酯（分析纯）在200 ml绝对THF中的溶液。加入结束以后，将该混合物在-78℃搅拌另外30 min。然后逐滴加入溶解在小量绝对THF中的159 g (粗产物, 约1.42 mol)亚环丙基乙酸甲酯。将该反应混合物在-78℃搅拌1 h，然后，经由-40℃，缓慢地温热至约0℃，最后加入饱和氯化铵水溶液。将该混合物用乙酸乙酯萃取，并将有机相用1 N盐酸和饱和氯化钠溶液洗涤，经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残余物通过硅胶上的色谱(洗脱液环己烷/乙酸乙酯9:1)进行纯化。得到109.5 g目标化合物，其被二乙酯衍生物污染，且不经任何进一步纯化。

实施例79A

2,2'-环丙烷-1,1-二基二乙醇

将109.5 g (粗产物, 约547 mmol) 2,2’-环丙烷-1,1-二基二乙酸乙酯甲酯溶解在750 ml THF（分析纯）中，并在-20℃，逐滴加入984 ml (984 mmol) 1 M的氢化铝锂在THF中的溶液。将该反应混合物温热至室温过夜，并在再次冷却至-10℃以后，小心地加入500 ml异丙醇。将该混合物用1 N盐酸酸化，并经硅藻土（Celite）抽滤出。将残余物用乙酸乙酯和水洗涤。将滤液用氯化钠饱和，并用乙酸乙酯多次萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。将残余物从乙腈重结晶。得到50.4 g目标产物(理论值的70.8%)。

实施例80A

2,2'-环丙烷-1,1-二基二乙醛

将7.0 ml (79.9 mmol)草酰氯溶解在45 ml绝对二氯甲烷中，将该混合物冷却至-50℃，并逐滴加入10.9 ml (163.6 mmol) DMSO在45 ml绝对二氯甲烷中的溶液。加入结束以后，将该混合物在-50℃搅拌另外10 min，然后缓慢地加入溶解在45 ml绝对二氯甲烷中的4.0 g (30.7 mmol) 2,2'-环丙烷-1,1-二基二乙醇。将得到的混悬液在-50℃搅拌10 min，然后冷却至-78℃，逐滴加入44.5 ml (320 mmol)三乙胺在75 ml绝对二氯甲烷中的溶液。加入结束以后，将该反应混合物在-78℃搅拌30 min，然后缓慢地温热至室温，随后用饱和硫酸氢钠水溶液洗涤。将有机相经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。得到5.10 g作为橙色油的目标产物(约70%的粗产物，理论值的约92%)。

实施例81A

3-(4-氯-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸叔丁酯(外消旋的非对映异构体混合物)

。

步骤 1 ：

将705 mg (2.89 mmol) 1,5-二溴-3-甲基戊烷和7.2 ml 1 N氢氧化钠水溶液加入在6 ml乙醇中的300 mg (1.45 mmol) (±)-D,L-4,4,4-三氟缬氨酸盐酸盐中，并将该混合物在回流下搅拌过夜。加入另外1.0当量的1,5-二溴-3-甲基戊烷和5.0当量的氢氧化钠以后，将该混合物再次在回流下搅拌8 h，然后在冷却后，在真空中浓缩。将残余物溶解于小量水中，并用1 N盐酸中和。将水相用乙酸乙酯多次萃取。将合并的有机相经硫酸钠干燥并在真空中浓缩。得到作为粗产物的270 mg 4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酸(外消旋的非对映异构体混合物)。

步骤 2 ：

将270 mg 4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酸(粗产物，外消旋的非对映异构体混合物)溶解在2.5 ml吡啶和4.9 ml DMF中，并在室温下加入286 mg (1.12 mmol) 3-(3-氨基-4-氯苯基)丙酸叔丁酯和527 mg (1.37 mmol) HATU。将该混合物在40℃搅拌过夜。加入另外0.5当量的HATU和2 ml N,N-二异丙基乙胺，并将该反应混合物再次在50℃搅拌5 h，然后加入水中。将该混合物用乙酸乙酯萃取3次，并将合并的有机相用小量1 N盐酸洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将粗产物通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水)进行纯化。得到50 mg作为非对映异构体混合物(约3:2)的目标产物(理论值的9.6%)。

一般规程 3：根据下面的反应路线图，从氨基乙酰苯胺制备取代的哌啶子基乙酰苯胺：

。

步骤 1 ：

在室温，向所涉及的氨基乙酰苯胺组分(1.0当量)在甲醇(约0.05 mol/l至1 mol/l)中的溶液中加入三乙胺(1.5-2.0当量)、1 N盐酸(约0.25-0.5当量)、所涉及的二醛(或它的环状缩醛形式，作为粗制的混合物，约2.0-4.0当量)，并在约5-15 min以后，加入氰基硼氢化钠(2.0 - 4.0当量)。将该混合物在室温搅拌约12-72小时，其中任选在该阶段中加入另外量的三乙胺、1 N盐酸、二醛和/或氰基硼氢化钠。在反应结束后，将该反应混合物加入水中。将水相用乙酸乙酯萃取3次，并将合并的有机相在真空中浓缩。可以将得到的粗产物混合物直接用在下一步中，或(优选地)通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水梯度)预先纯化。

步骤 2 ：

在0℃或室温，将得自步骤1的所涉及的中间体混合物(粗制的或纯化的)溶解在三氟乙酸中(浓度约0.1-2.0 mol/l)，然后在0℃至室温逐滴加入大量过量的三乙基硅烷(6-15当量)。将该混合物在室温搅拌4-24 h；任选将该混合物加热至40℃，直到达到完全转化。然后将该反应混合物在真空中浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中，并用水和碳酸氢钠溶液洗涤直到约中性(pH 6-7)。在真空中浓缩以后，可以如下纯化粗产物：通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水-或甲醇/水-梯度)，通过色谱法在硅胶上(洗脱液环己烷/乙酸乙酯-或二氯甲烷/甲醇-混合物)，或通过这些方法的组合，或使它不经纯化直接进一步反应。

根据一般规程3，制备下述实施例:

。

实施例91A

消旋 -环戊-1-烯-1-基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酸

将50 mg (0.45 mmol)环戊-1-烯-1-基硼酸, 51 mg (0.45 mmol) 4-甲氧基哌啶和41 mg (0.45 mmol)乙醛酸一水合物预先加入2 ml二氯甲烷中，并加入78µl (57 mg, 0.45 mmol) N,N-二异丙基乙胺。将该混合物在室温搅拌2天，然后在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC (RP18柱；加入了0.1%TFA的乙腈/水梯度, 10:90→95:5；运行时间38 min)进行纯化。得到31 mg (理论值的29%)标题化合物。

实施例92A

消旋 -环戊-1-烯-1-基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酸

将50 mg (0.45 mmol)环戊-1-烯-1-基硼酸, 59.5 mg (0.45 mmol) 1,2,3,4-四氢异喹啉和41 mg (0.45 mmol)乙醛酸一水合物预先加入2 ml二氯甲烷中，并加入78µl (57 mg, 0.45 mmol) N,N-二异丙基乙胺。将该混合物在室温搅拌过夜，然后在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC (RP18柱；加入了0.1%TFA的乙腈/水梯度, 10:90→95:5；运行时间38 min)进行纯化。得到101 mg (91%纯度,理论值的80%)标题化合物。

实施例93A

1-(3-{[环戊-1-烯-1-基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯

将30.9 mg (0.13 mmol)消旋 -环戊-1-烯-1-基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酸预先加入0.87 ml DMF/吡啶(3:1)中，加入63.8 mg (0.17 mmol) HATU，并将该混合物在室温搅拌30 min。然后加入34.3 mg (0.13 mmol) 1-(3-氨基-4-氟苄基)环丙烷甲酸叔丁酯，并将该反应混合物在室温搅拌过夜。然后将该混合物用乙酸乙酯稀释，用饱和氯化钠溶液多次洗涤，经硫酸镁干燥并在真空中浓缩。将残余物通过制备型HPLC (RP18柱；加入了0.1%TFA的乙腈/水梯度, 10:90→95:5；运行时间38 min)进行纯化。得到20.7 mg (理论值的33%)标题化合物。

实施例94A

1-(3-{[环戊-1-烯-1-基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯

将100 mg (0.39 mmol)消旋 -环戊-1-烯-1-基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酸预先加入2.6 ml DMF/吡啶(3:1)中，加入192 mg (0.51 mmol) HATU，并将该混合物在室温搅拌30 min。然后加入103 mg (0.39 mmol) 1-(3-氨基-4-氟苄基)环丙烷甲酸叔丁酯，并将该反应混合物在室温搅拌过夜。然后将该混合物通过制备型HPLC (RP18柱；加入了0.1%TFA的乙腈/水梯度, 10:90→95:5；运行时间38 min)直接纯化。将以此方式得到的产物溶解于乙酸乙酯中，并用1 N盐酸多次洗涤。将有机相经硫酸镁干燥，并在真空中浓缩。得到103 mg (纯度72%，理论值的37%)标题化合物，使其不经进一步纯化地反应。

实施例95A

1-(3-{[环戊基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯

将20.7 mg (0.04 mmol) 1-(3-{[环戊-1-烯-1-基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯预先加入3 ml甲醇中，加入3 mg (0.01 mmol)氧化铂(IV)，并将该混合物在室温和标准压力氢化5 h。然后将该混合物经硅藻土过滤，将残余物用甲醇彻底洗涤，并在真空中浓缩滤液。得到19.5 mg (100%纯度,理论值的94%)标题化合物。

实施例96A

1-(3-{[环戊基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯

将102 mg (0.2 mmol, 纯度72%) 1-(3-{[环戊-1-烯-1-基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯预先加入14.4 ml甲醇中，加入14.4 mg (0.06 mmol)氧化铂(IV)，并将该混合物在室温和标准压力氢化5 h。然后将该混合物经硅藻土过滤，将残余物用甲醇彻底洗涤，并在真空中浓缩滤液。得到102 mg (纯度36%)标题化合物，将其不经纯化进一步反应。

工作实施例：

实施例1

3-(4-氯-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸(外消旋的非对映异构体混合物)

将45.0 mg (0.092 mmol)　3-(4-氯-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸叔丁酯(外消旋的非对映异构体混合物)溶解在0.1 ml二氯甲烷中，并在室温下加入0.35 ml三氟乙酸。将该反应混合物在室温搅拌过夜，然后在真空中浓缩。将粗产物通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水)进行纯化。得到39.0 mg作为非对映异构体混合物的目标产物(理论值的97.9%)。

一般规程 4：根据以下反应路线图，从氨基乙酰苯胺制备取代的哌啶子基乙酰苯胺：

。

步骤 1 ：

在室温，向涉及的氨基乙酰苯胺组分(1.0当量)在甲醇(约0.05 mol/l 至 1 mol/l)中的溶液中，加入三乙胺(1.5-2.0当量)、1 N盐酸(约0.25-0.5当量)、涉及的二醛(或它的环状缩醛形式，作为粗制的混合物, 约2.0-4.0当量)，并在约5-15 min以后，加入氰基硼氢化钠(2.0 - 4.0当量)。将该混合物在室温搅拌约12至最多72小时，其中任选在该阶段中加入另外量的三乙胺、1 N盐酸、二醛和/或氰基硼氢化钠。在反应结束后，将该反应混合物加入水中。将水相用乙酸乙酯萃取3次，并将合并的有机相在真空中浓缩。得到的粗产物混合物可以直接用在下一步中，或(优选地)通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水梯度)预先纯化。

步骤 2 ：

在0℃或室温，将得自步骤1的所涉及的中间体混合物(粗制的或纯化的)溶解在三氟乙酸中(浓度约0.1-2.0 mol/l)，然后在0℃至室温逐滴加入大量过量的三乙基硅烷(10-20当量)。将该混合物在室温搅拌4-24 h；任选将该混合物加热至40℃，直到达到完全转化。然后将该反应混合物在真空中浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中，并用水(通过加入小量饱和碳酸氢钠溶液调至接近中性(pH 6-7))洗涤。在真空中浓缩以后，可以如下纯化粗产物：通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水-或甲醇/水-梯度)，通过从乙腈或水/乙腈-混合物结晶，或通过这些方法的组合。

根据一般规程4，制备下述实施例:

。

实施例25

1-(3-{[(2R,3R)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苄基)环丙烷甲酸

根据一般规程4，从1-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(+)-叔丁酯和2,2'-环丙烷-1,1-二基二乙醛起始得到标题化合物。收率：111.7 mg (理论值的63.8%)。

实施例26

1-(4-氯-3-{[(2R,3R)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸

根据一般规程4，从1-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(+)-叔丁酯和3-乙基戊二醛起始得到标题化合物。收率：33 mg (理论值的39.7%)。

一般规程 5：使用盐酸或硫酸与乙酸的混合物，将乙酯裂解为对应的羧酸

将涉及的乙酯在乙酸与浓盐酸的混合物(约1:1至3:1)或乙酸与10%的、20%的或半浓缩硫酸的混合物(约1:1至3:1)中的溶液在80℃至140℃的温度(任选地在回流下)搅拌30 min至最多12 h。冷却后，将该反应混合物直接在真空中浓缩或加入水中。然后将水相使用氢氧化钠水溶液调节至约中性，并用乙酸乙酯或二氯甲烷萃取，并将合并的有机相在真空中浓缩。将残余物溶解于乙酸乙酯中，并用水(通过加入小量饱和碳酸氢钠溶液调节至约中性(pH 6-7.5))洗涤。在真空中浓缩以后，可以如下纯化粗产物：通过制备型RP-HPLC (洗脱液乙腈/水-或甲醇/水-梯度)，通过从乙腈或水/乙腈-混合物结晶，或通过这些方法的组合。

根据一般规程5，制备下述实施例:

。

实施例35

(+)-1-(4-氟-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(对映异构体 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.50 ml；温度：40℃；洗脱液：75%异己烷/25%异丙醇(+ 0.2%TFA + 1%H₂O)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的1-(4-氟-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(实施例2，外消旋非对映异构体1)的外消旋混合物。由290 mg混合物起始分离出127 mg作为对映异构体2的标题化合物。

实施例36

(+)-1-(4-氟-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(对映异构体 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.30 ml；温度：40℃；洗脱液：75%异己烷/25%异丙醇(+ 0.2%TFA + 1%H₂O)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的1-(4-氟-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(实施例4，外消旋非对映异构体1)的外消旋混合物。由400 mg混合物起始分离出271 mg作为三氟乙酸盐的标题化合物(作为对映异构体2)。然后将该盐悬浮于小量水/乙腈中，在搅拌下用1 N氢氧化钠水溶液中和，然后通过制备型RP-HPLC (洗脱液：乙腈/水-梯度)再次纯化。得到60 mg标题化合物。

实施例37

(+)-3-(4-氟-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸三氟乙酸盐(对映异构体 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.40 ml；温度：25℃；洗脱液：80%异己烷/20%乙醇(+ 0.2%TFA + 1%H₂O)；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的3-(4-氟-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸(实施例6，外消旋非对映异构体2)的外消旋混合物。由58 mg混合物起始分离出38 mg作为对映异构体2的标题化合物。

实施例38和实施例39

1-(3-{[2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸(对映异构体 1 和 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.5 ml；温度：室温；洗脱液：50%异己烷/50%异丙醇；流速：18 ml/min；检测：230 nm]，进一步分离上面得到的1-(3-{[2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸(实施例8，外消旋非对映异构体1)的外消旋混合物。由275 mg混合物起始分离出125 mg对映异构体1 (实施例38)和122 mg对映异构体2 (实施例 39)：

实施例 38

(-)-1-(3-{[(2S,3S)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸(对映异构体 1)

。

实施例 39

(+)-1-(3-{[(2R,3R)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸(对映异构体 2)

。

实施例40和实施例41

3-(3-{[2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苯基)丙酸(对映异构体 1 和 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.5 ml；温度：室温；洗脱液：60%异己烷/40%异丙醇；流速：18 ml/min；检测：230 nm]进一步分离上面得到的3-(3-{[2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苯基)丙酸(实施例9，外消旋非对映异构体1)的外消旋混合物。由260 mg混合物起始分离出101 mg对映异构体1 (实施例40)和92 mg对映异构体2 (实施例 41)：

实施例 40

(-)-3-(3-{[(2S,3S)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苯基)丙酸(对映异构体 1)

。

实施例 41

(+)-3-(3-{[(2R,3R)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氟苯基)丙酸(对映异构体 2)

。

实施例42和实施例43

3-(4-氯-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸(对映异构体 1 和 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.0 ml；温度：30℃；洗脱液：70%异己烷/30%异丙醇；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的3-(4-氯-3-{[4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸(实施例13，外消旋非对映异构体1)的外消旋混合物。由180 mg混合物起始分离出77 mg对映异构体1 (实施例42)和85 mg对映异构体2 (实施例 43)：

实施例 42

3-(4-氯-3-{[(2S,3S)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸(对映异构体 1)

。

实施例 43

(+)-3-(4-氯-3-{[(2R,3R)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丙酸(对映异构体 2)

。

实施例44和实施例45

3-(4-氯-3-{[2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}苯基)丙酸(对映异构体 1 和 2)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.0 ml；温度：30℃；洗脱液：70%异己烷/30%异丙醇；流速：15 ml/min；检测：220 nm]进一步分离上面得到的3-(4-氯-3-{[2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}苯基)丙酸(实施例11，外消旋非对映异构体1)的外消旋混合物。由151 mg混合物起始分离出52.2 mg对映异构体1 (实施例44)和72.2 mg对映异构体2 (实施例 45)：

实施例 44

(+)-3-(4-氯-3-{[(2S,3S)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}苯基)丙酸(对映异构体 1)

。

实施例 45

(-)-3-(4-氯-3-{[(2R,3R)-2-(4-乙基哌啶-1-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}苯基)丙酸(对映异构体 2)

。

实施例46

(+)-(2S)-3-(3-{[(2R,3R)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)-2-甲基丙酸(非对映异构体 2)

根据一般规程5，从(2S)-3-(3-{[2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)-2-甲基丙酸乙酯(实施例82A)起始制备作为非对映异构体混合物的相应的羧酸。然后通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.0 ml；温度：室温；洗脱液：60%异己烷/40%异丙醇；流速：18 ml/min；检测：230 nm]进一步分离该非对映异构体混合物。由348 mg非对映异构体混合物起始分离出160 mg非对映异构体2，将其借助制备型RP-HPLC (洗脱液：乙腈/水-梯度)进一步纯化。得到113 mg纯的标题化合物。

实施例47

(+)-(3R)-3-(3-{[(2R,3R)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)丁酸(非对映异构体 2)

通过制备型HPLC在手性相上分离从(3R)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丁酸叔丁酯(实施例62A)和2,2'-环丙烷-1,1-二基二乙醛起始根据一般规程4制备的(3R)-3-(3-{[(2R,3R)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)丁酸和(3R)-3-(3-{[(2S,3S)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)丁酸的非对映异构体混合物 [柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.75 ml；温度：室温；洗脱液：70%异己烷/30%异丙醇；流速：18 ml/min；检测：230 nm]。由209 mg非对映异构体混合物起始分离出76 mg作为非对映异构体2的标题化合物。

实施例48

(+)-(3R)-3-(4-氯-3-{[(2R,3R)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丁酸(非对映异构体 2)

通过制备型HPLC在手性相上分离从(3R)-3-{4-氯-3-[(4,4,4-三氟缬氨酰基)氨基]苯基}丁酸叔丁酯(实施例62A)和3-甲基戊二醛起始根据一般规程4制备的(3R)-3-(4-氯-3-{[(2R,3R)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丁酸和(3R)-3-(4-氯-3-{[(2S,3S)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丁酸的非对映异构体混合物[柱：Daicel Chiralpak AD-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：0.75 ml；温度：室温；洗脱液：70%异己烷/30%异丙醇；流速：20 ml/min；检测：230 nm]。由195 mg非对映异构体混合物分离出92 mg作为非对映异构体2的标题化合物。

实施例49

(-)-(3S)-3-(4-氯-3-{[(2R,3R)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丁酸(非对映异构体 1)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AS-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.2 ml；温度：室温；洗脱液：70%异己烷/30%异丙醇；流速：20 ml/min；检测：230 nm]分离上面得到的(3S)-3-(4-氯-3-{[(2R,3R)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丁酸和(3S)-3-(4-氯-3-{[(2S,3S)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苯基)丁酸(实施例20, 非对映异构体混合物1)的混合物。由182 mg非对映异构体混合物分离出77 mg作为非对映异构体1的标题化合物。

实施例50

(-)-(3S)-3-(3-{[(2R,3R)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)丁酸(非对映异构体 1)

通过制备型HPLC在手性相上 [柱：Daicel Chiralpak AS-H, 5µm, 250 mm x 20 mm；注射体积：1.0 ml；温度：室温；洗脱液：10%异己烷/90%异丙醇；流速：20 ml/min；检测：230 nm]，分离上面得到的(3S)-3-(3-{[(2R,3R)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)丁酸和(3S)-3-(3-{[(2S,3S)-2-(6-氮杂螺[2.5]辛-6-基)-4,4,4-三氟-3-甲基丁酰基]氨基}-4-氯苯基)丁酸(实施例21, 非对映异构体混合物1)的混合物。由252 mg非对映异构体混合物分离出104 mg作为非对映异构体1的标题化合物。

实施例51

1-(4-氯-3-{[(2R,3R)-4,4,4-三氟-3-甲基-2-(4-甲基哌啶-1-基)丁酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸

根据一般规程4，从1-(4-氯-3-{[(3R)-4,4,4-三氟-D-缬氨酰基]氨基}苄基)环丙烷甲酸(+)-叔丁酯(实施例65A)和3-甲基戊二醛起始得到标题化合物。

实施例52

消旋 -1-(3-{[环戊基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸三氟乙酸盐

将20.1 mg (0.04 mmol)　1-(3-{[环戊基(4-甲氧基哌啶-1-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯(实施例95A)溶解在2.4 ml 20%的三氟乙酸在二氯甲烷中的溶液中，并在室温搅拌5 h。然后将该混合物在旋转蒸发器上浓缩，并将残余物通过制备型HPLC (RP18柱；洗脱液：加入了0.1%TFA的乙腈/水梯度, 10:90→95:5；运行时间38 min)进行纯化。得到6.8 mg (理论值的30%)标题化合物。

实施例53

消旋 -1-(3-{[环戊基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸三氟乙酸盐

将101 mg (0.2 mmol)　1-(3-{[环戊基(3,4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酰基]氨基}-4-氟苄基)环丙烷甲酸消旋-叔丁酯(实施例96A)溶解在11.5 ml 20%的三氟乙酸在二氯甲烷中的溶液中，并在室温搅拌5 h。然后将该混合物在旋转蒸发器上浓缩，并将残余物通过制备型HPLC (RP18柱；洗脱液：加入了0.1%TFA的乙腈/水梯度, 10:90→95:5；运行时间38 min)进行纯化。得到14.4 mg (理论值的13%)标题化合物。

B. 药理学活性的评价

根据本发明的化合物的药理学效果可以在以下试验中显示：

B-1. 重组的可溶性鸟苷酸环化酶 (sGC) 的在体外的刺激：

根据在以下参考文献中详细描述的方法，在有和没有硝普钠存在下，在有和没有血红素依赖性的sGC抑制剂1H-1,2,4-噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮(ODQ)存在下，进行通过根据本发明的化合物刺激重组可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)的研究：M.Hoenicka, E.M.Becker, H.Apeler, T.Sirichoke, H.Schroeder, R.Gerzer和J.-P.Stasch, “Purified soluble guanylyl cyclase expressed in a baculovirus/Sf9 system: Stimulation by YC-1, nitric oxide, and carbon oxide”, J.Mol.Med. 77 (1999), 14-23。通过向样品缓冲液(以最终浓度0.5%)中加入吐温20，获得不含血红素的鸟苷酸环化酶。

通过测试物质对sGC的活化作为基本活性的x-倍刺激给出。实施例25的结果在表1中显示：

[DEA/NO = 2-(N,N-二乙基氨基)二氮烯醇化物(diazenolat)-2-氧化物; ODQ = 1H-1,2,4-噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮]。

由表1清楚看出，实现了包含血红素的和不含血红素的酶的刺激。此外，实施例25和2-(N,N-二乙基氨基)二氮烯醇-2-氧化物(DEA/NO)（一种NO-供体）的组合没有显示出协同效应，即DEA/NO的效果没有如在通过血红素依赖性机理起作用的sGC活化剂情况下预期的那样被加强。另外，根据本发明的sGC活化剂的效果未被可溶性鸟苷酸环化酶的血红素依赖性抑制剂1H-1,2,4-噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮(ODQ)阻滞，而是事实上被它增加。在表1中的结果因此证实了根据本发明的化合物作为可溶性鸟苷酸环化酶的活化剂的作用机理。

B-2. 对重组的鸟苷酸环化酶报道细胞系的作用

如在F.Wunder等人, Anal.Biochem. 339, 104-112 (2005)中所述，用重组的鸟苷酸环化酶报道细胞系测定了根据本发明的化合物的细胞作用。

根据本发明的化合物的代表性结果在表2中列出：

(MEC = 最小有效浓度)。

B-3. sGC 酶活性的刺激

可溶性鸟苷酸环化酶(sGC)在刺激下将GTP转化成cGMP和焦磷酸盐(PPi)。PPi借助于以下描述的试验来证实。在该试验中产生的信号随着反应进行而增加，并且用作在给出的刺激下的sGC酶活性的度量。

为进行该试验，向微量培养板中预先加入29µl酶溶液[在50 mM TEA中的0-10 nM可溶性鸟苷酸环化酶(根据Hönicka等人, J.Mol.Med. 77, 14-23 (1999)制备), 2 mM MgCl₂, 0.1%BSA (组分V), 0.005%Brij^®, pH 7.5]，并且加入1 μl待测物质(作为在DMSO中系列稀释的溶液)。将该混合物在室温下温育10min。然后加入20 μl检测混合物[1.2nM荧光虫萤光素酶(北美萤火虫（Photinus 　 pyralis）萤光素酶，Promega), 29 μM脱氢萤光素(根据Bitler & McElroy, Arch.Biochem.Biophys. 72, 358 (1957)制备)，122 μM萤光素(Promega), 153 μM ATP (Sigma)和0.4 mM DTT (Sigma), 在50 mM TEA中, 2 mM MgCl₂, 0.1%BSA (组分V), 0.005%Brij^®, pH 7.5]。通过加入20 μl底物溶液[在50 mM TEA中的1.25 mM鸟苷-5’-三磷酸(Sigma)，2 mM MgCl₂, 0.1%BSA (组分V), 0.005%Brij^®, pH 7.5]，开始酶反应，并且在光度计中连续测量。由待测物质造成的刺激程度可以相对于未刺激的反应的信号进行确定。

通过向酶溶液中添加25µM 1H-1,2,4-噁二唑并[4,3-a]喹喔啉-1-酮(ODQ)，随后温育30分钟来研究不含血红素的鸟苷酸环化酶的活化，并且与天然酶的刺激进行比较。

根据本发明化合物的代表性结果在表3中列出：

(MEC = 最小有效浓度; EC₅₀ = 在最大效力的50%时的浓度；n.d. = 未测定)。

B-4. 体外血管舒张效果：

通过静脉注射硫喷妥钠将兔子麻醉并处死(大约50mg/kg)，并抽血。取出隐动脉，并分成3毫米宽的环。将所述环单独放置在在每种情况中一对三角形钩子上，所述钩子在末端开口且由0.3mm厚的特种丝(Remanium^®)制成。每个环设置在5ml器官浴槽中的初始张力之下，所述器官浴槽具有37℃温热的Krebs-Henseleit溶液，所述溶液用碳合气通气，并具有以下组成：NaCl 119 mM；KCl 4.8 mM；CaCl₂ x 2 H₂O 1 mM；MgSO₄ x 7 H₂O 1.4 mM；KH₂PO₄ 1.2 mM；NaHCO₃ 25 mM；葡萄糖10 mM；牛血清白蛋白0.001%。收缩力用Statham UC2-细胞检测，放大并经由A/D转换器(DAS- 1802 HC，Keithley Instruments，慕尼黑)数字化，并在图表记录仪上并行记录。收缩是通过添加去氧肾上腺素引起的。

在多个(通常4个)控制周期以后，在每个进一步运行中以递增的剂量加入待研究的物质，且将在测试物质影响下实现的收缩水平与最后一个在先运行达到的收缩水平进行比较。由此计算在先控制中达到使收缩减少50％所必需的浓度(IC₅₀-值)。标准应用体积是5 μl。DMSO在浴液中的比例相当于0.1％。

B-5. 对清醒的 SH 大鼠的血压和心率的无线电遥测测量

使用Data Sciences International DSI，USA的市售可得的遥测系统，用于对清醒的大鼠进行下述测量。

所述系统由3个主要组件组成：(1)可植入的发射器，(2)接收器，其经由转换开关连接至(3)数据采集计算机。该遥测系统使得能够在清醒的动物的常规栖息地连续记录其血压和心率。

对体重＞200g的成年雌性自生性高血压大鼠(SH-大鼠)进行研究。在发射器植入以后，将实验动物独自地圈养在3型Makrolon笼中。它们自由摄取标准饲料和水。实验室中的日/夜节律通过室内照明在早上6.00和在晚上7.00进行变化。

将使用的遥测发射器(TAM PA-C40，DSI)在第一次实验使用以前至少14天于无菌条件下手术植入实验动物中。以此方式配备仪器的动物可以在伤口愈合且植入物稳定后重复使用。

为了植入，将禁食的动物用戊巴比妥(Nembutal，Sanofi，50mg/kg腹腔注射)进行麻醉，并对腹部侧大面积剃毛和消毒。在沿着腹白线将腹腔切开以后，将所述系统的液体填充的测量导管以头盖方向插入分歧部以上的降主动脉，并用组织胶(VetBonD^TM，3M)固定。将发射器外壳在腹膜内固定至腹壁肌肉，并进行伤口的分层闭合。手术后施用抗菌素(Tardomyocel COMP，Bayer，1ml/kg皮下注射)以预防感染。

试验规程：

在每种情况下，将待研究物质在每种情况下通过管饲口服给药至动物组(n＝6)。根据5ml/kg体重的给药体积使用溶解在合适的溶剂混合物中或悬浮在0.5%的甲基纤维素中的测试物质。将溶剂处理的动物组用作对照。

将遥测测量装置配置给24个动物。按实验编号记录每个实验。

生活在所述装置中的每只带仪器的大鼠分配有单独的接收天线(1010接收器，DSI)。植入的发射器可以从外部通过引入的磁力开关激活，并在实验预先开动中转换到发射状态。发射的信号可以通过数据采集系统(用于Windows的Dataquest^TM A.R.T.，DSI)在线获得，并适当地进行处理。在每种情况下数据被存储到为此生成的带有实验编号的文件中。

在标准程序中，下面各项在每种情况下测量10-秒时间：(1)收缩压(SBP)，(2)舒张压(DBP)，(3)平均动脉压(MAP)和(4)心率(HR)。

在计算机控制下以5分钟的间隔反复进行测量值采集。作为绝对值获得的源数据，在图表中用当前测量的气压表压力进行校正，并存储为单独的数据。进一步的技术细节在制造公司(DSI)的文件中给出。

测试物质在实验当天的9:00给药。给药之后，测量以上所述的参数24小时。实验结束以后，使用分析软件分选获得的个体数据(Dataquest^TM A.R.T.Analysis)。作为空白值设为在给药前2小时的时间点，因此所选数据集合包括实验当天7:00到第二天9:00的时间段。

通过测定平均值(15分钟平均值，30分钟平均值)将数据可预置时间进行平滑化（glaetten），并作为文本数据传送至存储介质。以此方式将预先分选并压缩的测量值传送至Excel模板中并制成表。

C.药物组合物的实施例

根据本发明的化合物可以以下述方式转化成药物制剂：

片剂：

组成：

100 mg根据本发明的化合物，50 mg乳糖(一水合物)，50 mg玉米淀粉(天然的)，10 mg聚乙烯吡咯烷酮(PVP 25) (得自BASF, Ludwigshafen, 德国)，和2 mg硬脂酸镁。

片剂重量212 mg，直径8 mm，曲率半径12 mm。

生产：

使用5%的PVPs在水中的溶液(m/m)，将根据本发明的化合物、乳糖和淀粉的混合物造粒。干燥后将该颗粒与硬脂酸镁混合5分钟。用常规压片机压制该混合物(关于片剂的形式，参见上面)。用于压制的标准值使用15 kN的压力。

可以口服施用的混悬液：

组成：

1000 mg根据本发明的化合物，1000 mg乙醇(96%)，400 mg Rhodigel®(黄原胶，得自FMC, Pennsylvania, USA)，和99 g水。

10 ml口服混悬液相当于100 mg根据本发明的化合物的单次剂量。

生产：

将Rhodigel悬浮于乙醇中，将根据本发明的化合物加入所述悬浮液中。在搅拌下，加入水。将所述混合物搅拌约6 h，直到Rhodigel溶胀结束。

可以口服施用的溶液：

组成：

500 mg根据本发明的化合物，2.5 g聚山梨酯和97 g聚乙二醇400。20 g口服液相当于100 mg根据本发明的化合物的单次剂量。

生产：

在搅拌下，将根据本发明的化合物悬浮于聚乙二醇和聚山梨酯的混合物中。搅拌过程持续至根据本发明的化合物已经完全溶解。

静脉内溶液：

以低于在生理上耐受的溶剂(例如等渗盐水、5%葡萄糖溶液和/或30%PEG 400溶液)中的饱和溶解度的浓度，溶解根据本发明的化合物。将所述溶液无菌过滤，并填充于无菌的且无热原的注射容器中。

Claims (10)

1.式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物

其中

R^1A和R^1B彼此独立地代表氢、甲基、乙基或正丙基

或者

彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

R^2A代表氢、甲基、乙基、正丙基、异丙基、环丙基、甲氧基、乙氧基或环丙基氧基，

R^2B代表氢或甲基，

或者

R^2A和R^2B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

R³代表氢、氟、氯、甲基、三氟甲基或乙基，

R^4A和R^4B彼此独立地代表甲基、三氟甲基或乙基

或者

彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环、环丁基环或环戊基环，所述环可以被氟取代最多2次

且

A代表下式的任选被取代的或稠合的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、(C₁-C₄)-烷基、环丙基、环丁基、甲氧基、乙氧基或苯基，其中(C₁-C₄)-烷其本身可以被氟取代最多3次，

R^5B代表氢或甲基，

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

且

R⁶代表氢、氟、氯、甲基或三氟甲基。

2.根据权利要求1所述的式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^1A代表氢或甲基，

R^1B代表氢，

或者

R^1A和R^1B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环或环丁基环，

R^2A代表氢、甲基、乙基、异丙基或环丙基，

R^2B代表氢，

或者

R^2A和R^2B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

R³代表氟、氯或甲基，

R^4A代表甲基，

R^4B代表三氟甲基，

或者

R^4A和R^4B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环戊基环，所述环可以被氟取代最多2次，

且

A代表下式的任选被取代的或稠合的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、甲基、三氟甲基、乙基、异丙基或环丙基，

R^5B代表氢

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

且

R⁶代表氢或氟。

3.根据权利要求1或2所述的式(I)的化合物和它们的盐、溶剂合物和所述盐的溶剂合物，其中

R^1A代表氢或甲基，

R^1B代表氢，

或者

R^1A和R^1B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环，

R^2A代表氢或甲基，

R^2B代表氢，

R³代表氟或氯，

R^4A代表甲基，

R^4B代表三氟甲基，

且

A代表下式的任选被取代的哌啶环

* 表示与所述分子的其余部分的连接位点，

R^5A代表氢、甲基、三氟甲基或乙基，

R^5B代表氢

或者

R^5A和R^5B彼此连接且与它们所连接的碳原子一起形成环丙基环。

4.用于制备如在权利要求1-3中定义的式(I)的化合物的方法，其特征在于，在惰性溶剂中在碱存在下借助于缩合剂，使式(II)的受保护的α-氨基羧酸

其中R^4A和R^4B具有在权利要求1-3中给出的含义

且

PG¹代表合适的氨基保护基团例如，烯丙氧基羰基(Alloc)、苄氧基羰基(Z)、叔丁氧基羰基(Boc)或9-芴基甲氧基羰基(Fmoc)，

与式(III)的胺偶联

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B和R³具有在权利要求1-3中给出的含义

且

T¹代表(C₁-C₄)-烷基或苄基，

得到式(IV)的羧酰胺

其中PG¹、R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B和T¹具有上面给出的含义，

然后，通过解离保护基团PG¹，释放胺化合物(V)

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B和T¹具有上面给出的含义

然后使其在合适的还原剂存在下与式(VI)的二醛反应

其中R^5A和R^5B具有在权利要求1-3中给出的含义，

得到2种环化产物(VII)和(VIII)的混合物(具有改变的比例)

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B、R^5A、R^5B和T¹具有上面给出的含义，

然后在三氟乙酸中用过量的三乙基硅烷处理所述混合物，以将所述“错误的”环化产物(VIII)也转化成期望的目标化合物(VII)，并且最后通过碱性或酸性溶剂解，或在T¹代表苄基的情况下也通过氢解，解离酯-残基T¹，得到式(I-A)的羧酸

其中R^1A、R^1B、R^2A、R^2B、R³、R^4A、R^4B、R^5A和R^5B具有上面给出的含义，

并且将如此制得的根据本发明的式(I-A)的化合物任选地分离成它们的对映异构体和/或非对映异构体，和/或用适当的(i)溶剂和/或(ii)酸或碱转化成它们的溶剂合物、盐和/或所述盐的溶剂合物。

5.如在权利要求1-3的任一项中定义的化合物， 其用于治疗和/或预防疾病。

6.如在权利要求1-3的任一项中定义的化合物在制备药物中的用途，所述药物用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺性高血压、血栓栓塞性疾病、缺血、血管疾病、微循环紊乱、肾机能不全、纤维化疾病和动脉硬化。

7.药物，其包含如在权利要求1-3的任一项中定义的化合物，并结合一种或多种惰性的、无毒的、药学上合适的赋形剂。

8.药物，其包含如在权利要求1-3的任一项中定义的化合物，并结合一种或多种选自以下的其它活性物质：有机硝酸盐、NO-供体、cGMP-PDE-抑制剂、鸟苷酸环化酶的刺激物、抗血栓形成剂、降血压剂和脂类代谢调节剂。

9.根据权利要求7或8所述的药物，其用于治疗和/或预防心力衰竭、心绞痛、高血压、肺性高血压、血栓栓塞性疾病、缺血、血管疾病、微循环紊乱、肾机能不全、纤维化疾病和动脉硬化。

10.通过施用有效量的至少一种如在权利要求1-3的任一项中定义的化合物或如在权利要求7-9中的任一项中定义的药物用于治疗和/或预防人类和动物中的心力衰竭、心绞痛、高血压、肺性高血压、血栓栓塞性疾病、缺血、血管疾病、微循环紊乱、肾机能不全、纤维化疾病和动脉硬化的方法。