CN104429964A - 一种紫香兰组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，主要步骤包括：人工授粉、无菌播种、原球茎继代增殖、原球茎分化、组培苗生根和炼苗；本发明通过逐步诱导种子萌发和培养，能够培育出大量紫香兰幼苗上市；本发明采用同株异花授粉得到的种子，提高了种子在特定条件下的发芽率；并且种子萌发培养基配方简单并且原料易得，通过实验证明可以提高紫香兰种子的萌发率；本发明的组培快繁方法具有极高的推广价值。
Description
技术领域
本发明涉及植物栽培及育苗技术领域，尤其涉及一种紫香兰组培快繁方法。
背景技术
紫香兰，拉丁学名Zygopetalums，原产美国加州一带。又名轭瓣兰或接瓣兰，因花瓣以紫色为基调色，偶有香味，故得名。紫香兰花期长，花姿美，又伴有芳香，其唇瓣大而成扇形，紫色斑纹点缀其上，整朵花显得高贵典雅。由于紫香兰株型较小，适合做成小盆栽排放于办公桌上，更是受到都市白领的喜爱，市场销量也在逐步提升。
但是由于紫香兰为国外引进种，国内生产种植紫香兰盆栽的公司还很少，量也不大，紫香兰种苗主要还是依靠进口，国内鲜有生产紫香兰种苗的公司。主要原因是紫香兰种子发育不完全，自然条件下难以萌发，种苗稀缺，目前国内对紫香兰种苗繁殖方法掌握较少，中国科学院华南植物园在2009年申请了“接瓣兰种苗的试管繁殖方法”，专利号：CN200910039928.X，但该方法操作复杂，选用种子较为随意，对后续的播种成功率产生影响；尤其是对培养基的配制配方较复杂，而且需要用试管苗移栽，移栽仍需专用的基质，生产成本高，不利于大规模生产。
本课题组经过两年研究，总结出一套成熟的紫香兰组培快繁方法，能够操作相对简单并且成萌发以及生根、成苗功率较高，所繁殖的组培苗健壮耐性强，可满足市场的需要。
发明内容
本发明旨在提供一种操作简单，产生经济价值高的紫香兰组培快繁方法。
本发明目的通过以下技术方案来予以实现：
一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，步骤包括a、同株异花授粉：取同一植株上开花2-4天的紫香兰花粉小心剥下，接到另一朵花的花柱上，并将该花上本身的花粉剥掉；b、无菌播种：授粉成功后80-120天，取成熟果荚中的种子拨到配好的诱导种子萌发培养基上，放置于培养室内诱导种子萌发；c、原球茎继代增殖：无菌播种1.5-3个月，种子萌发出绿色的原球茎；将原球茎转到增殖培养基上继代增殖，原球茎增殖培养基为：1/2MS+NAA0.5-1.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH为5.6-5.8；继代周期为40-50d；d、原球茎分化：原球茎经过几次继代增殖后，数量已达到生产所需要的量；此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗；e、组培苗生根：原球茎分化成苗后，生长到3-5cm高，叶片3-4片时，从基部切下转到生根培养基上生根；生根培养20-40天，组培苗长出3-4条根，根长3cm左右时，从组培室转到炼苗室炼苗5-9天，然后移植到土壤里即得到紫香兰组培苗。
所述无菌播种的方法为：先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面，流水冲洗一遍后转到超净工作台上；将果荚尾部花蒂残留切去，然后放在70%酒精中浸泡3-8S，立即用无菌水洗一遍；将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒5-10min，最后用无菌水洗4-5次；用无菌滤纸吸干果荚表面水分，用解剖刀将果荚从中间纵切，将里面的种子用镊子小心拨到配好的诱导种子萌发培养基上。
所述种子萌发培养基为：1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。培养室温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
所述原球茎增殖培养基为：1/2MS+NAA0.5-1.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8；
所述分化培养基为：1/2MS+6-BA1.0-2.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。培养温度25-26℃，光照时间14h/d，光照强度80-120μmol m-2s-1。
所述生根培养基为：1/3MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.5-1.0mg/L+香蕉泥6%+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。
所述生根培养的温度为20-29℃，光照时间8-14h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
本发明的有益效果：1、本发明采用同株异花授粉得到的种子，提高了种子在特定条件下的发芽率；2、本发明的种子萌发培养基配方简单并且原料易得，通过实验证明可以提高紫香兰种子的萌发率；3、原球茎增殖培养基和种子萌发培养基配方相同，无需更换配方，仅需更换培养皿即可，降低了材料和人工操作成本；4、分化培养基配方简单易得，降低了材料成本；5、生根培养基中加入了香蕉泥，不仅因为香蕉泥中含有乙烯利的催熟化合物，香蕉泥的其他成分也对生根产生了非常重要的作用。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步说明本发明。
实施例1
一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，步骤包括a、同株异花授粉：取同一植株上开花4天的紫香兰花粉小心剥下，接到另一朵花的花柱上，并将该花上本身的花粉剥掉；b、无菌播种：授粉成功后100天，取成熟果荚；先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面，流水冲洗一遍后转到超净工作台上；将果荚尾部花蒂残留切去，然后放在70%酒精中浸泡5S，立即用无菌水洗一遍；将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒8min，最后用无菌水洗4-5次；用无菌滤纸吸干果荚表面水分，用解剖刀将果荚从中间纵切，将里面的种子用镊子小心拨到配好的种子萌发培养基上，放置于培养室内诱导种子萌发，种子萌发培养基为：1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。培养室温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。c、原球茎继代增殖：无菌播种2个月，种子基本均萌发出绿色的原球茎；此时将原球茎转到增殖培养基上继代增殖，继代周期为40-50d；d、原球茎分化：原球茎经过几次继代增殖后，数量已达到生产所需要的量；此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗；分化培养基为：1/2MS+6-BA1.0-2.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8；培养温度25-26℃，光照时间14h/d，光照强度80-120μmol m-2s-1。e、组培苗生根：原球茎分化成苗后，生长到3-5cm高，叶片3-4片时，从基部切下转到生根培养基上生根。培养温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1；经过1个月，组培苗长出3-4条根，根长3cm左右时，从组培室转到炼苗室炼苗1周左右即可种植到合适的基质上；生根培养基为：1/3MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.5-1.0mg/L+香蕉泥6%+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。生根培养的温度为20-29℃，光照时间8-14h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
实施例2
一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，步骤包括a、同株异花授粉：取同一植株上开花4天的紫香兰花粉小心剥下，接到另一朵花的花柱上，并将该花上本身的花粉剥掉；b、无菌播种：授粉成功后90天，取成熟果荚；先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面，流水冲洗一遍后转到超净工作台上；将果荚尾部花蒂残留切去，然后放在70%酒精中浸泡7S，立即用无菌水洗一遍；将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒8min，最后用无菌水洗4-5次；用无菌滤纸吸干果荚表面水分，用解剖刀将果荚从中间纵切，将里面的种子用镊子小心拨到配好的种子萌发培养基上，放置于培养室内诱导种子萌发，种子萌发培养基为：1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。培养室温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。c、原球茎继代增殖：无菌播种1.5个月，种子基本均萌发出绿色的原球茎；此时将原球茎转到增殖培养基上继代增殖，继代周期为40-50d；d、原球茎分化：原球茎经过几次继代增殖后，数量已达到生产所需要的量；此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗；分化培养基为：1/2MS+6-BA1.0-2.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8；培养温度25-26℃，光照时间14h/d，光照强度80-120μmol m-2s-1。e、组培苗生根：原球茎分化成苗后，生长到3-5cm高，叶片3-4片时，从基部切下转到生根培养基上生根。培养温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1；经过1个月，组培苗长出3-4条根，根长3cm左右时，从组培室转到炼苗室炼苗1周左右即可种植到合适的基质上；生根培养基为：1/3MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.5-1.0mg/L+香蕉泥6%+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。生根培养的温度为20-29℃，光照时间8-14h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
对比例1
一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，步骤包括a、同株异花授粉：取同一植株上开花4天的紫香兰花粉小心剥下，接到另一朵花的花柱上，并将该花上本身的花粉剥掉；b、无菌播种：授粉成功后90天，取成熟果荚；先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面，流水冲洗一遍后转到超净工作台上；将果荚尾部花蒂残留切去，然后放在70%酒精中浸泡7S，立即用无菌水洗一遍；将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒8min，最后用无菌水洗4-5次；用无菌滤纸吸干果荚表面水分，用解剖刀将果荚从中间纵切，将里面的种子用镊子小心拨到配好的种子萌发培养基上，放置于培养室内诱导种子萌发，种子萌发培养基为：1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。培养室温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。c、原球茎继代增殖：无菌播种2个月，种子基本均萌发出绿色的原球茎；此时将原球茎转到增殖培养基上继代增殖，继代周期为40-50d；d、原球茎分化：原球茎经过几次继代增殖后，数量已达到生产所需要的量；此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗；分化培养基为：1/2MS+6-BA1.0-2.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8；培养温度25-26℃，光照时间14h/d，光照强度80-120μmol m-2s-1。e、组培苗生根：原球茎分化成苗后，生长到3-5cm高，叶片3-4片时，从基部切下转到生根培养基上生根。培养温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1；经过1个月，组培苗长出3-4条根，根长3cm左右时，从组培室转到炼苗室炼苗1周左右即可种植到合适的基质上；生根培养基为：1/3MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.5-1.0mg/L+乙烯利0.001g/L+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。生根培养的温度为20-29℃，光照时间8-14h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
对比例2
一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，步骤包括a、同株同花授粉：取同一植株上开花4天的紫香兰花粉小心剥下，接到同一朵花的花柱上；b、无菌播种：授粉成功后90天，取成熟果荚；先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面，流水冲洗一遍后转到超净工作台上；将果荚尾部花蒂残留切去，然后放在70%酒精中浸泡7S，立即用无菌水洗一遍；将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒8min，最后用无菌水洗4-5次；用无菌滤纸吸干果荚表面水分，用解剖刀将果荚从中间纵切，将里面的种子用镊子小心拨到配好的种子萌发培养基上，放置于培养室内诱导种子萌发，种子萌发培养基为：1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。培养室温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。c、原球茎继代增殖：无菌播种2个月，种子基本均萌发出绿色的原球茎；此时将原球茎转到增殖培养基上继代增殖，继代周期为40-50d；d、原球茎分化：原球茎经过几次继代增殖后，数量已达到生产所需要的量；此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗；分化培养基为：1/2MS+6-BA1.0-2.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8；培养温度25-26℃，光照时间14h/d，光照强度80-120μmol m-2s-1。e、组培苗生根：原球茎分化成苗后，生长到3-5cm高，叶片3-4片时，从基部切下转到生根培养基上生根。培养温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1；经过1个月，组培苗长出3-4条根，根长3cm左右时，从组培室转到炼苗室炼苗1周左右即可种植到合适的基质上；生根培养基为：1/3MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.5-1.0mg/L+香蕉泥6%+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8。生根培养的温度为20-29℃，光照时间8-14h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
将以上实施例培养的秧苗炼苗1周后移至花盆栽培，通过以下表格对实施例中的结果进行统计和对比如下：
由实施例数据看以看出，经过本发明培养的紫香兰新苗较为健壮，炼苗后成活率高，与对比例相比，本发明同株异花授粉的播种萌发率较高，采用生根培养基中加入香蕉泥，增加了组培苗的生根条数，而且炼苗成活率较高，所以本发明具有极高的推广价值。
以上所述并非对本新型的技术范围作任何限制，凡依据本发明技术实质对以上的实施例所作的任何修改、等同变化与修饰，均仍属于本发明的技术方案的范围内。
Claims (6)
1.一种紫香兰组培快繁方法，其特征在于，步骤包括a、同株异花授粉：取同一植株上开花2-4天的紫香兰花粉剥下，接到另一朵花的花柱上，并将该花上本身的花粉剥掉；b、无菌播种：授粉成功后80-120天，取成熟果荚中的种子拨到配好的诱导种子萌发培养基上，放置于培养室内诱导种子萌发；c、原球茎继代增殖：无菌播种1.5-3个月，种子萌发出绿色的原球茎；将原球茎转到增殖培养基上继代增殖，继代周期为40-50d；d、原球茎分化：原球茎经过几次继代增殖后，数量已达到生产所需要的量；此时将原球茎转到分化培养基上诱导原球茎分化成苗；e、组培苗生根：原球茎分化成苗后，生长到3-5cm高，叶片3-4片时，从基部切下转到生根培养基上生根；生根培养20-40天，组培苗长出3-4条根，根长3cm左右时，从组培室转到炼苗室炼苗5-9天，然后移植到土壤里即得到紫香兰组培苗；
所述无菌播种的方法为：先用饱和洗衣粉溶液擦洗表面，流水冲洗一遍后转到超净工作台上；将果荚尾部花蒂残留切去，然后放在70%酒精中浸泡3-8S，用无菌水洗；将果荚浸泡于0.01%升汞溶液中消毒5-10min，最后用无菌水洗4-5次；用无菌滤纸吸干果荚表面水分，用解剖刀将果荚从中间纵切，将里面的种子用镊子拨到配好的诱导种子萌发培养基上。
2.根据权利要求1所述的紫香兰组培快繁方法，所述诱导种子萌发培养基为：1/2MS+NAA0.2-0.5mg/L+椰汁5%-10%+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH为5.6-5.8；培养室温度25-26℃，光照时间12h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
3.根据权利要求1所述的紫香兰组培快繁方法，所述原球茎增殖培养基为：1/2MS+NAA0.5-1.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH为5.6-5.8。
4.根据权利要求1所述的紫香兰组培快繁方法，所述分化培养基为：1/2MS+6-BA1.0-2.0 mg/L+蔗糖2%+卡拉胶0.7%，pH5.6-5.8；培养温度25-26℃，光照时间14h/d，光照强度80-120μmol m-2s-1。
5.根据权利要求1所述的紫香兰组培快繁方法，所述生根培养基为：1/3MS+NAA0.2-0.5mg/L+IBA0.5-1.0mg/L+香蕉泥6%+活性炭2g/L+蔗糖15mg/L+卡拉胶0.7%，pH为5.6-5.8。
6.根据权利要求1所述的紫香兰组培快繁方法，所述生根培养的温度为20-29℃，光照时间8-14h/d，光照强度50-90μmol m-2s-1。
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