CN104398478B - 兽用药物的复乳型载体及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供兽用药物的复乳型载体及其应用，涉及兽用药品工程的药物制剂领域。兽用药物的复乳型载体，包括水相和油相，其特征在于所述油相由下述质量份的物质组成：白油80‑90份，吐温80 2‑6份，聚氧乙烯（5）油醚1‑5份，聚氧乙烯氢化蓖麻油500 1‑3份，聚氧乙烯氢化蓖麻油360 3‑6份。采用本发明复乳型载体包埋兽用药物，稳定性好、无明显副反应、包埋率高，能够有效地控制药物缓慢释放。

Description

兽用药物的复乳型载体及其应用

技术领域

本发明涉及兽用药品工程的药物制剂领域，具体涉及兽用药物的复乳型载体及其应用。

背景技术

复乳于1925年被 Seifritz 发现， 1965 年开始有目的在医药领域进行研究和应用。其中，水包油包水（W/O/W）的复乳剂型常用于诸如蛋白质、抗癌化合物等亲水性药物制剂。复乳具有两层或多层液体乳膜结构，可有效地控制药物的扩散速率。药物包裹在复乳内，不仅起到“药库”的作用，还能够保护药物被机体的低pH体液、酶等破坏，也能减低药物对机体的毒性作用。

复乳的制备方法有一步乳化法和二步乳化法，以后者为常见。先制备初乳，将亲油性乳化剂与油相混合均匀，在一定的搅拌速度下将内水相倒入油相中进行粗分散，然后用高速分散法制备初级油包水（W/O）型乳状液（初乳）。再将初乳在一定的搅拌速度下倒入含有亲水性乳化剂的外水相中得到复乳。复乳属于热力学不稳定体系的非均相分散体系，常发生分层、絮凝、转相、奥氏熟化变化、合并与破裂等变化。

发明专利“一种均一、稳定的亲水性药物的复乳载体及其制备方法”（ZL03130833.3）等资料公布了以碘油、橄榄油、棉花籽油、豆油、烷类碳氢化合物等为油相，聚氧乙烯氢化蓖麻油、失水山梨糖醇三油酸酯、失水山梨糖醇油酸酯、失水山梨糖醇三硬脂酸酯、亲油-亲水嵌段共聚物等为乳化剂，二步乳化法，无论使用机械搅拌或者微孔膜压力乳化，制备的乳液储存不超过60天，难以商业化应用。发明专利“一种自乳化疫苗佐剂及其制备方法”（ZL 200510037639.8）公布了一系列W/O/W剂型疫苗的佐剂配制方法和疫苗制备方法，但是4℃稳定性也不超过12个月，且有副反应发生。因此，建立稳定、价廉的W/O/W剂型工艺具有极其重要的现实意义和市场价值。

发明内容

本发明的目的是提供兽用药物的复乳型载体。

本发明的另一目的是提供兽用药物的复乳型制剂，以上述复乳型载体包埋兽用药物，稳定性好、无明显副反应、包埋率高，能够有效地控制药物缓慢释放。

本发明的另一目的是提供兽用药物的复乳型制剂的制备方法，简单易行，效率高。

本发明的目的采用如下技术方案实现。

兽用药物的复乳型载体，包括水相和油相，其特征在于所述油相由下述质量份的物质组成：

白油 80-90份，

吐温80 2-6份，

聚氧乙烯（5）油醚 1-5份，

聚氧乙烯氢化蓖麻油500 1-3份，

聚氧乙烯氢化蓖麻油360 3-6份。

在本发明中，所述水相为注射用水或等渗溶液。

在本发明中，所述水相与油相的质量比为1:0.5-1.5。

本发明还提供所述兽用药物的复乳型载体的制备方法，将水相与油相混合、乳化。

本发明还提供兽用药物的复乳型制剂，含有所述复乳型载体，所述兽用药物为亲水性药物或可溶于白油的药物。

在本发明中，所述亲水性药物为具有生物活性的蛋白质、微生物。

本发明还提供兽用药物的复乳型制剂的制备方法，将水溶性药物溶于水相，然后与油相混合，乳化，得到兽用药物的复乳型制剂；或者将可溶于白油的药物溶于油相，然后与水相混合，乳化，得到兽用药物的复乳型制剂。

采用本发明载体制备的兽用药物的复乳型制剂，4℃可稳定储存18个月以上，37℃可稳定储存60天以上，黏度小于2.0s/0.4mL，易于注射。采用本发明复乳型载体制备的抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体制剂，具有缓释作用，显著延长了抗体的作用时间。采用本发明复乳型载体制备的猪口蹄疫病毒疫苗，不仅减少了副反应，而且提高了抗体阳性率。采用本发明复乳型载体制备的人参皂苷水包油包水型制剂，在4℃条件下储存120天，人参皂苷的包埋率达到92.3%，显示了良好的储存稳定性；在37℃下该制剂能够缓慢释放人参皂苷，显示了良好的缓释效果。

具体实施方式

白油由南京天邦生物科技有限公司提供。吐温80(Tween-80）、聚氧乙烯（5）油醚（Oleth-5）、聚氧乙烯氢化蓖麻油500（EL 60）和聚氧乙烯氢化蓖麻油360（EMULSOGEN EL360）购自上海美豪精细化工有限公司。

下面通过实施例进一步解释本发明，但本发明并不受这些实施例的限制。

实施例1 油相的制备

配方1：

白油 85g，

吐温80 5g，

聚氧乙烯（5）油醚 1g，

聚氧乙烯氢化蓖麻油500 3g，

聚氧乙烯氢化蓖麻油360 6g。

配方2：

白油 85g，

吐温80 6g，

聚氧乙烯（5）油醚 5g，

聚氧乙烯氢化蓖麻油500 1g，

聚氧乙烯氢化蓖麻油360 3g。

配方3：

白油 85g，

吐温80 2g,

聚氧乙烯（5）油醚 5g，

聚氧乙烯氢化蓖麻油500 3g，

聚氧乙烯氢化蓖麻油360 5g。

分别按照配方1、2、3，称取各物质。将白油、吐温80、聚氧乙烯（5）油醚、聚氧乙烯氢化蓖麻油500和聚氧乙烯氢化蓖麻油360混合均匀，于 115℃、20min灭菌后，按上述3种配方分别得到相应的油相1、油相2和油相3，室温保存备用。

实施例2 抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体的复乳型制剂

1制剂制备

参照专利号为ZL201310114768.7，名称为“用于禽免疫球蛋白的温控缓释注射剂、其制备方法及其应用”的发明专利实施例3，制备抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液（抗体的鸡胚中和价达到2⁸/ml）。称取15g抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液放入50ml的烧杯中，预热至室温。取15g油相1（实施例1）加入上述抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液中，再加入直径1.5cm的磁力转子，将烧杯至于磁力搅拌器上，温度控制在25℃左右，在2500rmp条件下搅拌20分钟，即得体系均一的抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体复乳型缓释制剂A。同法将抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液分别与实施例1中的油相2和油相3混合，制备抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体的复乳型缓释制剂B（对应于油相2）和C（对应于油相3）。

2 物理性状

表1 三种抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体复乳型缓释制剂的物理性状

3 药效试验

取3日龄非免疫健康雏鸭60只，随机分为3组，每组20只。第一组每只颈部皮下注射1ml抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体复乳型缓释制剂C，第二组每只颈部皮下注射0.5ml的抗鸭病毒性肝炎禽免疫球蛋白溶液，第三组每只颈部皮下注射生理盐水1ml。分别于接种后第5、10、15和20天，每组随机取5只雏鸭颈部皮下注射鸭病毒性肝炎病毒1型DHV-JS株（强毒，公开在申请号为201310489742.0的发明专利申请中，保藏号为CGMCC NO.8159），每只0.2ml(含100LD₅₀)，观察7天。另取10只雏鸭为第四组（空白组），不注射任何药品，单独隔离饲养。

表2 雏鸭攻毒保护结果

结果如表2，第一组在用药后15天内攻毒的保护率均达到100%，20天的保护率仍然高达80%；而第二组仅在用药后5天内攻毒的保护率达到100%，第10天攻毒保护率明显下降，15天后无疗效。上述表明，本发明的抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体复乳型缓释制剂对雏鸭的保护期为15天以上，与常规的免疫球蛋白比，具有延长保护期的效果，说明本发明复乳型载体能够缓慢抗鸭病毒性肝炎蛋黄抗体。

实施例3 猪口蹄疫病毒复乳型疫苗

1制剂制备

称取100g猪口蹄疫病毒溶液（OZK/93株，灭活前每0.2毫升病毒液病毒含量应≥10^7.0LD₅₀，由兰州兽医研究所提供）放入5搅拌杯中（500ml），预热至室温。取100g实施例1中油相1加入病毒溶液中，用3叶桨的组织匀浆机，在3500rmp条件下搅拌15分钟，即得体系均一的猪口蹄疫病毒复乳型疫苗D。同法将猪口蹄疫病毒溶液分别与实施例1中的油相2和油相3混合、乳化，制备猪口蹄疫病毒复乳型疫苗E（对应于油相2）和F（对应于油相3）。

同法，用ISA206佐剂替代上述油相制备对照疫苗，命名对照疫苗G。

2 制剂物理性状和免疫活性的比较

表3 三种复乳型疫苗与对照疫苗G的比较

通过表3可以看出，采用本发明复乳载体制备的疫苗，2-8℃的稳定性大于18个月，37℃稳定性大于60天，稳定性显著优于对照疫苗G；同时，其免疫效果显著优于对照疫苗G，副反应比对照疫苗G少，具有非常好的实际使用价值。

实施例4 人参皂苷复乳型制剂

1 人参皂苷复乳型制剂的制备

取1.2g人参皂苷Re（标准品，购自大连美仑生物技术有限公司，微水溶，易溶于含水正丁醇）加入烧杯中（50ml），加入8.8g实施例1中的油相1，在60℃的温度下磁力搅拌均匀。然后冷却至室温，加入10g生理盐水，用直径1.5cm的磁力转子，于磁力搅拌器上，温度控制在25℃左右，在2500rmp条件下搅拌10分钟，即得体系均一的人参皂苷复乳型制剂H。

同法，分别用实施例1中的油相2和3替代油相1，制备相应的人参皂苷复乳型制剂I（对应于油相2）和J（对应于油相3）。

2 物理性状

表4 三种人参皂苷复乳型制剂的性状

通过表4可以看出，采用本发明人参皂苷复乳型制剂，2-8℃可保存2年之久，37℃稳定性大于80天。

3 包埋率测定

取100g人参皂苷复乳型制剂J，装入透析袋中（MD18，截留分子量1000），置于4℃和37℃的水中做透析试验，并以100rmp的速度震荡，定期从透析袋外的水中取样，用紫外分光法在544nm处（2401型紫外可见分光光度计，日本岛津公司）测定人参皂苷的浓度，根据水体积测算出含量，再计算出复乳载体对人参皂苷的包埋率和在4℃和37℃条件下的释放效果。

表5 人参皂苷复乳型制剂J的包埋率和释放率

结果如表5，本发明的复乳载体可以有效将人参皂苷制备成复乳状注射液，包埋率为94.6%。该制剂4℃稳定，保存3个月无明显泄露；37℃下可缓慢、稳定释放人参皂苷。

Claims (4)

1.兽用药物的复乳型载体，包括水相和油相，其特征在于所述油相由下述质量份的物质组成：

白油 80-90份，

吐温80 2-6份，

聚氧乙烯（5）油醚 1-5份，

聚氧乙烯氢化蓖麻油500 1-3份，

聚氧乙烯氢化蓖麻油360 3-6份；

所述水相为注射用水或等渗溶液；所述水相与油相的质量比为1:0.5-1.5；所述兽用药物的复乳型载体是将水相与油相混合、乳化后得到。

2.兽用药物的复乳型制剂，其特征在于含有权利要求1所述复乳型载体，所述兽用药物为水溶性药物或可溶于白油的药物。

3.根据权利要求2所述兽用药物的复乳型制剂，其特征在于所述水溶性药物为具有生物活性的蛋白质、微生物。

4.权利要求2所述兽用药物的复乳型制剂的制备方法，其特征在于将水溶性药物溶于水相，然后与油相混合，乳化，得到兽用药物的复乳型制剂；或者将可溶于白油的药物溶于油相，然后与水相混合，乳化，得到兽用药物的复乳型制剂。