CN104381245B - 一种稳定血液样品细胞的试剂 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种稳定血液样品细胞的试剂，其包括以下浓度的物料：100μmol/Lβ-环糊精、100μmol/L二钠色甘酸、0.05%重铬酸钾、50μmol/L三氟柳、100μmol/L特鲁曲班、11mmol/L柠檬酸钠、1.5mmol/L茶碱、20μmol/L双嘧达莫、0.37mmol/L腺苷、20mmol/L葡萄糖、1.25mmol/L？PEG。本发明能稳定血细胞并防止血小板聚集且使血细胞稳定至少36小时，经处理的血液样品不会影响后续样品分子分析，除可广泛应用于血液样品分子分析及检测外，还特别适用于对样品细胞有严格要求的细胞或分子检测以及分析技术平台，如微流控技术、流式细胞仪等。
Description
技术领域
本发明涉及血液保鲜试剂技术领域，尤其涉及一种稳定血液样品细胞的试剂。
背景技术
稳定血液样品对于血样品的运输和临床试验流程的操作极为重要，有一些检测技术和方法，例如富集和分析稀有循环细胞（循环肿瘤细胞、循环胎儿细胞、循环干细胞以及循环血管内皮细胞）或者检测血液中的病原菌等等，通常需要多步骤和复杂的富集处理过程，稳定血细胞和富集的目标细胞能经受富集处理过程细胞不溶解是成功研发这类产品的关键环节。
福而马林作为组织和细胞的保鲜试剂已经应用近百年，其中，福而马林是一种会引起蛋白交联的防腐剂，其会掩盖或损坏细胞表面蛋白受体或其他目标抗原以及造成核酸和核蛋白交联，这些会干扰样品细胞和分子分析。
需进一步指出，对于检测血细胞的精细系统而言，例如微流控平台以及流式血细胞分离仪器等，需要能够防止血细胞聚集和血凝固，即需要避免血液样品堵塞；然而，目前市场并没有有效的抗凝保鲜试剂。另外，在对血液样品进行直接细胞分析的过程中，一般采用普通的抗凝剂来保持样品新鲜，且必须在6小时内对样品进行处理。
发明内容
本发明的目的在于提供一种稳定血液样品细胞的试剂，该稳定血液样品细胞的试剂能够有效地稳定血细胞并防止血小板聚集，且能够使血细胞（红血球、白血球以及血小板）稳定至少36小时，经处理的血液样品不会影响后续的样品分子分析，除可以广泛应用于血液样品分子分析以及检测外，还特别适用于对样品细胞有严格要求的细胞或分子检测以及分析技术平台，例如微流控技术、流式细胞仪等。
为达到上述目的，本发明通过以下技术方案来实现。
一种稳定血液样品细胞的试剂，包括有以下浓度的物料，具体为：
β-环糊精100μmol/L
二钠色甘酸100μmol/L
重铬酸钾0.05%
三氟柳50μmol/L
特鲁曲班100μmol/L
柠檬酸钠11mmol/L
茶碱1.5mmol/L
双嘧达莫20μmol/L
腺苷0.37mmol/L
葡萄糖20mmol/L
PEG1.25mmol/L。
其中，所述PEG为PEG-1000。
本发明的有益效果为：本发明所述的一种稳定血液样品细胞的试剂，其包括有以下浓度的物料：100μmol/Lβ-环糊精、100μmol/L二钠色甘酸、0.05%重铬酸钾、50μmol/L三氟柳、100μmol/L特鲁曲班、11mmol/L柠檬酸钠、1.5mmol/L茶碱、20μmol/L双嘧达莫、0.37mmol/L腺苷、20mmol/L葡萄糖、1.25mmol/LPEG。通过上述物料配比，本发明能够有效地稳定血细胞并防止血小板聚集，且能够使血细胞（红血球、白血球以及血小板）稳定至少36小时，经处理的血液样品不会影响后续的样品分子分析，除可以广泛应用于血液样品分子分析以及检测外，还特别适用于对样品细胞有严格要求的细胞或分子检测以及分析技术平台，例如微流控技术、流式细胞仪等。
具体实施方式
下面结合具体的实施方式来对本发明进行说明。
一种稳定血液样品细胞的试剂，包括有以下浓度的物料，具体为：
β-环糊精100μmol/L
二钠色甘酸100μmol/L
重铬酸钾0.05%
三氟柳50μmol/L
特鲁曲班100μmol/L
柠檬酸钠11mmol/L
茶碱1.5mmol/L
双嘧达莫20μmol/L
腺苷0.37mmol/L
葡萄糖20mmol/L
PEG1.25mmol/L。
需进一步解释，本发明的PEG为PEG-1000。
其中，对于本发明的稳定血液样品细胞的试剂而言，β-环糊精、二钠色甘酸、重铬酸钾能够直接稳定血细胞膜，三氟柳、特鲁曲班、茶碱、双嘧达莫能够有效地保护血小板并抑制血小板聚集，腺苷、葡萄糖能够有效地保护血红细胞。
使用时，本发明的稳定血液样品细胞的试剂和血液抗凝试剂混合一起加入至真空采血管，因此使用上与普通抗凝采血管在采集全血样品、运输以及储存方面没有大的区别。
通过上述物料配比，本发明能够有效地稳定血细胞并防止血小板聚集，且能够使血细胞（红血球、白血球以及血小板）稳定至少36小时，经处理的血液样品不会影响后续的样品分子分析，除可以广泛应用于血液样品分子分析以及检测外，还特别适用于对样品细胞有严格要求的细胞或分子检测以及分析技术平台，例如微流控技术、流式细胞仪等。
在将本发明的试剂与现有的普通血液抗凝试剂（EDTA）进行对比的过程中，具体过程如下：1、将全血样品分别抽取到含有普通血液抗凝试剂（EDTA）的试剂管以及含有本发明的稳定血液样品细胞的试剂的试剂管内；2、将血红细胞溶解试剂（15mmol/LNH4Cl、12mmol/LNaHCO3和0.1mmol/LEDTA）加人样品中；3、混合均匀后放置室温5分钟，其中，含有本发明的稳定血液样品细胞试剂的试剂管内的全血样品呈红色，而含有普通血液抗凝试剂（EDTA）的试剂管内的全血样品呈淡色。通过上述对比分析可知，本发明能够有效地稳定血细胞。
以上内容仅为本发明的较佳实施例，对于本领域的普通技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
Claims (2)
1.一种稳定血液样品细胞的试剂，其特征在于，包括有以下浓度的物料，具体为：
β-环糊精100μmol/L
二钠色甘酸100μmol/L
重铬酸钾0.05%
三氟柳50μmol/L
特鲁曲班100μmol/L
柠檬酸钠11mmol/L
茶碱1.5mmol/L
双嘧达莫20μmol/L
腺苷0.37mmol/L
葡萄糖20mmol/L
PEG1.25mmol/L。
2.根据权利要求1所述的一种稳定血液样品细胞的试剂，其特征在于：所述PEG为PEG-1000。
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106950319A (zh) * | 2017-04-20 | 2017-07-14 | 西安科技大学 | 一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法 |
| JP7036670B2 (ja) | 2018-05-31 | 2022-03-15 | アークレイ株式会社 | 血液中の稀少細胞検査、該検査ための血液処理方法及び採血管 |
Families Citing this family (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106386785B (zh) * | 2016-08-30 | 2017-09-12 | 浙江博真生物科技有限公司 | 一种细胞保存液及其在流式样本保存中的应用 |
| WO2018220601A1 (en) * | 2017-06-02 | 2018-12-06 | Hitachi Chemical Co., Ltd. | Sample storage system and methods of use thereof |
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| CN107760673B (zh) * | 2017-08-25 | 2020-08-07 | 南通普惠精准医疗科技有限公司 | 游离dna的稳定剂和用于游离dna检测的采血管 |
| WO2019079743A1 (en) * | 2017-10-19 | 2019-04-25 | Streck, Inc. | COMPOSITIONS FOR HEMOLYSIS AND REGULATION OF COAGULATION AND STABILIZATION OF EXTRACELLULAR VESICLES |
| CN109497045B (zh) * | 2018-12-30 | 2021-09-07 | 广州阳普医疗科技股份有限公司 | 一种保存液及其制备方法与应用 |
| JP7402727B2 (ja) | 2020-03-26 | 2023-12-21 | テルモ株式会社 | リン脂質含有物質安定化剤およびそれを含む体液検査キット |
| CN113243360B (zh) * | 2021-07-07 | 2021-12-07 | 天津德祥生物技术有限公司 | 血浆保存液及其应用 |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5753428A (en) * | 1995-07-19 | 1998-05-19 | Kawasumi Laboratories, Inc. | Synthetic composition for storage of platelets comprising glycerol |
| CN103323296A (zh) * | 2012-03-23 | 2013-09-25 | 南京柯伦迪检测技术有限公司 | 一种用于血小板功能检测的抗凝剂配合使用方法 |
| CN103424294A (zh) * | 2013-07-12 | 2013-12-04 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 一种检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法 |
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Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5753428A (en) * | 1995-07-19 | 1998-05-19 | Kawasumi Laboratories, Inc. | Synthetic composition for storage of platelets comprising glycerol |
| CN103323296A (zh) * | 2012-03-23 | 2013-09-25 | 南京柯伦迪检测技术有限公司 | 一种用于血小板功能检测的抗凝剂配合使用方法 |
| CN103424294A (zh) * | 2013-07-12 | 2013-12-04 | 北京大北农科技集团股份有限公司 | 一种检测猪外周血和脾脏淋巴细胞膜表面分子的样品制备试剂盒及其制备方法 |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN106950319A (zh) * | 2017-04-20 | 2017-07-14 | 西安科技大学 | 一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法 |
| CN106950319B (zh) * | 2017-04-20 | 2019-08-30 | 西安科技大学 | 一种检测特鲁曲班光学异构体含量的方法 |
| JP7036670B2 (ja) | 2018-05-31 | 2022-03-15 | アークレイ株式会社 | 血液中の稀少細胞検査、該検査ための血液処理方法及び採血管 |
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| Publication number | Publication date |
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