CN104357353A - 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 - Google Patents
一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN104357353A CN104357353A CN201410607958.7A CN201410607958A CN104357353A CN 104357353 A CN104357353 A CN 104357353A CN 201410607958 A CN201410607958 A CN 201410607958A CN 104357353 A CN104357353 A CN 104357353A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- plant lactobacillus
- application
- zzu
- vegetables juice
- vegetable juice
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 title claims abstract description 29
- 235000012055 fruits and vegetables Nutrition 0.000 title claims abstract description 29
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 title claims abstract description 13
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 title abstract description 8
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 title abstract description 8
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 52
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims description 27
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims description 27
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 24
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 18
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 18
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 16
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 claims description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 12
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 claims description 11
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000000654 additive Substances 0.000 claims description 7
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 6
- 241000227653 Lycopersicon Species 0.000 claims description 5
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 claims description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 claims description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 claims description 5
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims description 2
- 241000191938 Micrococcus luteus Species 0.000 claims description 2
- 241001138501 Salmonella enterica Species 0.000 claims description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 54
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 abstract description 27
- 230000003385 bacteriostatic effect Effects 0.000 abstract description 14
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 abstract description 8
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 abstract description 4
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 abstract description 2
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 abstract description 2
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 abstract description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 abstract description 2
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 abstract description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 abstract description 2
- 239000004460 silage Substances 0.000 abstract description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 abstract 2
- 238000004321 preservation Methods 0.000 abstract 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 abstract 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 6
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 6
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 6
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 239000002932 luster Substances 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 101150079601 recA gene Proteins 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 4
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 4
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 3
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 235000013361 beverage Nutrition 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 238000012797 qualification Methods 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010067770 Endopeptidase K Proteins 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 235000019985 fermented beverage Nutrition 0.000 description 2
- 235000015203 fruit juice Nutrition 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- RPAJSBKBKSSMLJ-DFWYDOINSA-N (2s)-2-aminopentanedioic acid;hydrochloride Chemical class Cl.OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O RPAJSBKBKSSMLJ-DFWYDOINSA-N 0.000 description 1
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinoline Chemical compound N1CCCC2=CC(OC)=CC=C21 FRXSZNDVFUDTIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010003210 Arteriosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 238000009631 Broth culture Methods 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 238000003794 Gram staining Methods 0.000 description 1
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000866650 Lactobacillus paraplantarum Species 0.000 description 1
- 241000186684 Lactobacillus pentosus Species 0.000 description 1
- 201000010538 Lactose Intolerance Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 208000011775 arteriosclerosis disease Diseases 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 235000009508 confectionery Nutrition 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000000151 deposition Methods 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 230000007661 gastrointestinal function Effects 0.000 description 1
- 230000007407 health benefit Effects 0.000 description 1
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 1
- 210000002490 intestinal epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000009545 invasion Effects 0.000 description 1
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 1
- 235000021266 loss of appetite Nutrition 0.000 description 1
- 239000004462 maize silage Substances 0.000 description 1
- 206010025482 malaise Diseases 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 1
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 1
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 150000004666 short chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L2/00—Non-alcoholic beverages; Dry compositions or concentrates therefor; Their preparation
- A23L2/70—Clarifying or fining of non-alcoholic beverages; Removing unwanted matter
- A23L2/84—Clarifying or fining of non-alcoholic beverages; Removing unwanted matter using microorganisms or biological material, e.g. enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/225—Lactobacillus
- C12R2001/25—Lactobacillus plantarum
Abstract
本发明公开了一株植物乳杆菌及其在发酵果蔬汁制作中的应用。本发明提供了一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208，其保藏号CGMCC NO.8990。本发明的实验证明了，从玉米青贮饲料中分离纯化到的乳酸菌ZZU 208对病原菌具有较好的抑菌活性。在发酵果蔬汁制作中能够有效抑制病原菌的生长，延长果蔬汁的保存期，改善果蔬汁的口感，增加乳酸菌及其代谢产物，有益于健康，在作为发酵果蔬汁制作方面具有潜在的应用价值。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域，尤其涉及一株植物乳杆菌及其在发酵果蔬汁制作中的应用。
背景技术
益生菌是指有益于人类生命健康的一类肠道生理细菌。益生菌发挥作用需要满足2个基本条件，一是活的微生物，二是通过摄入充足的数量，对宿主产生功能性健康益处。益生菌有很多种，乳酸菌是一类常见的益生菌，可以通过与有害菌竞争营养素来抑制有害菌生长，或通过释放抗菌性物质杀伤有害菌，也可以在肠道上皮细胞形成一层保护粘膜，阻止有害菌的入侵，还能够在肠道内产生酸性物质，抑制有害菌生长，以起到改善肠道微生态环境，保持健康的胃肠道功能。另外，乳酸菌还可以产生乳糖酶，缓解乳糖不耐受症，合成短链脂肪酸和维生素(B族、K族),加强营养物质的吸收。此外，乳酸菌还能够增强免疫功能。因此，乳酸菌的补充不仅可以改善胃口不好，吸收差的症状，还有益于体质弱，反复生病感染，过敏等症状的改善。目前市场上发酵饮品种类较少，且产品多集中于各种发酵乳制品。果蔬汁含有丰富的维生素、矿物质、果胶质等天然营养元素，服用果蔬汁可以降低癌症的发病率,同时还能有效防止动脉硬化、高血脂和冠心病等心血管疾病的发生。以果蔬汁为原料，接种乳酸菌进行发酵，进行果蔬汁发酵饮品的开发，有助于丰富风味发酵饮品的种类，能够满足在补充果蔬营养的同时，增加益生菌。
发明内容
本发明的一个目的是提供一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208。
本发明提供的植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208，其保藏号为CGMCCNO.8990。
上述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液在作为发酵果蔬汁添加剂或制备发酵果蔬汁添加剂中的应用。
上述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液在发酵果蔬汁中的应用。
上述应用中，所述果蔬汁按照包括如下的方法制备：将质量百分含量分别为25％西红柿、12.5％胡萝卜、25％苹果、7.5％的白糖和水混合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁。
上述应用中，所述灭菌温度为90℃，所述灭菌的时间为5min。
本发明的另一个目的是提供一种发酵果蔬汁的方法。
本发明提供的方法，包括如下步骤：
1)、将质量百分含量分别为25％西红柿、12.5％胡萝卜、25％苹果、7.5％的白糖和水混合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁；
2)将上述的植物乳杆菌接入所述果蔬汁中，发酵，得到发酵后果蔬汁。
上述方法中，所述植物乳杆菌是以植物乳杆菌种子液接入，所述植物乳杆菌种子液中菌含量大于等于108cfu/g。
所述植物乳杆菌种子液按照体积百分含量2.5％接入果蔬汁中，其植物乳杆菌种子液中菌含量大于等于108cfu/g。
上述植物乳杆菌种子液按照包括如下步骤的方法进行：将所述植物乳杆菌在MRS固体培养基30℃厌氧培养箱培养48h，收集菌体，将其重悬于水中；
上述方法中，所述发酵条件为30℃静置培养17h-23h。
本发明的第三个目的是提供一种发酵果蔬汁添加剂。
本发明提供的发酵果蔬汁添加剂，其活性成分为上述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液。
上述的植物乳杆菌在制备抑菌产品中的应用；
所述抑菌为抑制Salmonella enterica、抑制Escherichia coli或抑制Micrococcus luteus。
乳酸菌ZZU 208于2014年4月2日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC NO.8990，分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
本发明的实验证明了，菌株ZZU 208在混合果汁发酵中不仅能够有效补充乳酸菌、降低果蔬汁pH，而且能够进一步改善果蔬汁的气味、色泽及口感，在发酵果蔬汁饮料制作方面具有潜在的应用价值。
附图说明
图1为recA基因的PCR扩增产物电泳图。
具体实施方式
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
实施例1、植物乳杆菌的获得
1、分离纯化
从河南省郑州市取得的玉米(品种：郑超甜2号)青贮饲料中分离纯化到乳酸菌ZZU 208，为同型发酵乳酸菌，具体如下：
称取10g玉米青贮饲料样品加入灭菌的90ml蒸馏水中，利用漩涡振荡器震荡30s，10倍梯度稀释，然后分别取10-1、10-3和10-5倍样品稀释液涂布在MRS固体培养基上，放置于厌氧培养箱培养48h，然后将其取出，依据菌落的大小、形态和颜色，挑取MRS上生长的单菌落，进行过氧化氢酶实验及革兰氏染色。将过氧化氢酶阴性及革兰氏染色阳性者暂定为乳酸菌，于MRS固体培养基上继续划线纯化2次。-80℃保存于10％二甲基亚砜的Nutrient肉汤培养基中，该菌株命名为ZZU 208，为同型发酵乳酸菌。
2、生理生化检测
乳酸菌ZZU 208在10℃-45℃条件下及pH3.5-9.0条件生长良好，能够耐受3.0％的盐浓度，部分理化特性如表1所示。该菌株能够利用的碳源如表2所示。
表1菌株ZZU 208的生理生化特性
表2菌株ZZU 208的碳源发酵试验结果
注：+代表反应为阳性；—代表反应为阴性；w代表反应为弱阳性
3、分子鉴定
1)16rRNA基因序列鉴定
将固体平板上培养48h的乳酸菌ZZU 208，采用菌落PCR扩增，进行16rRNA基因序列鉴定。引物选用细菌的16S rRNA基因扩增通用引物：27F(5’-AGAGTTTGA-TCCTGGCTCAG-3’)和1492R(5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’)。PCR反应体系为50μl：Premix Taq25μl，27F和1492R(均为20μM)1μl，补充灭菌蒸馏水至50μl，直接将菌落加入反应体系，进行PCR扩增，得到PCR产物。
将PCR产物送去测序，结果为序列表中序列1所示。
2)recA基因检测
将固体平板上培养48h的乳酸菌ZZU 208，采用菌落PCR扩增，进行recA基因检测。引物选用基于recA基因的引物：paraF(5’-GTCACAGGCATTACGAAAAC-3’),pentF(5’-CAGTGGCGCGGTTGATATC-3’),planF(5’-CCGTTTATGCGGAACACCTA-3’)和pREV(5’-TCGGGATTACCA AACAT CAC-3’)。PCR扩增体系(40μl)包括Premix Taq20μl，引物paraF,pentF,和pREV(各0.25μM),引物planF0.12μM，补充灭菌蒸馏水至40μl，用10μl无菌枪头在单菌落挑取少许，加入反应体系，进行PCR反应。
结果如图1所示，1：LactobacilluscaseiJCM 16167T(阴性对照)；2：L.paraplantarum JCM 12533T；3：L.pentosus JCM 1558T；4：L.plantarum subsp.plantarumJCM 1149T；5：L.plantarum subsp.argentoratensisJCM 16169T；6：ZZU 208；M：DNA Markers，可以看出，得到318bp的PCR产物。
经过上述鉴定，乳酸菌ZZU 208于2014年4月2日，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，保藏编号为CGMCC NO.8990，分类命名为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。
实施例2、乳酸菌ZZU 208在抑菌中的应用
乳酸菌ZZU 208接种到MRS液体培养基，30℃培养48h，得到的发酵液经10000rpm离心5min，收集上清液，将上清液采用牛津杯双层平板法进行抑菌活性检测，结果菌株ZZU 208发酵上清液对革兰氏阳性及阴性指示菌都有较强的抑菌活性，如表3所示。
表3菌株ZZU 208发酵上清液的抑菌活性
注：抑菌活性以抑菌圈直径表示，牛津杯外径为7.80mm。+，抑菌圈直径：8.00-12.00mm；++，12.00-16.00mm；+++，16.00-20.00mm；++++，＞20.00mm
其发酵上清液在排除酸和过氧化氢的作用后对革兰氏阳性及阴性指示菌仍然有较强的抑菌活性，然而在经过蛋白酶K或胰蛋白酶的作用后抑菌活性消失，结果如表4所示，表明该抑菌活性物质可能为蛋白类或肽类物质。具体方法为：用2mol/L NaOH调发酵上清液pH值至6.0，并用2mol/L HCL调未接种的MRS液体培养基pH值至6.0作为对照，按照过氧化氢酶、胰蛋白酶或蛋白酶K的终浓度分别为1.0mg/mL、100μg/mL及100μg/mL分别加入到发酵液中，37℃水浴2h，采用牛津杯双层平板法进行抑菌活性检测。
表4不同处理后菌株ZZU 208发酵上清液的抑菌活性
注：抑菌活性以抑菌圈直径表示，牛津杯外径为7.80mm。+，抑菌圈直径：8.00-12.00mm；++，12.00-16.00mm；+++，16.00-20.00mm；++++，＞20.00mm；-，≤7.80mm
乳酸菌ZZU 208接种到MRS液体培养基，30℃培养48h，得到的发酵液经10000rpm离心5min，收集上清液，在不同的温度条件下处理不同时间，或用2mol/L NaOH或2mol/L HCL将上清液调至不同的pH值，应用采用牛津杯双层平板法进行抑菌活性检测，结果如表5所示，
表5温度和pH对菌株ZZU 208发酵上清液抑菌活性的影响
注：抑菌活性以抑菌圈直径表示，牛津杯外径为7.80mm。+，抑菌圈直径：8.00-12.00mm；++，12.00-16.00mm；+++，16.00-20.00mm；++++，＞20.00mm；-，≤7.80mm
该发酵上清液中的抑菌活性物质在100℃保持60min具有较好的稳定性，在pH≤6的条件下具有抑菌活性，且随pH降低活性增强。
实施例3、ZZU 208在发酵果蔬汁制作中的应用
1、乳酸菌种子液的制备
乳酸菌ZZU 208接种到MRS固体培养基，于30℃厌氧培养箱培养48h，取出，将固体MRS培养基上生长的菌株ZZU 208无菌刮擦于无菌水中，使乳酸菌浓度≥108cfu/ml，备用。
2、乳酸菌在发酵果蔬汁制作中的应用
将质量百分含量分别为25％西红柿、12.5％胡萝卜及25％苹果切块、匀浆，加入质量百分含量为7.5％的白糖混匀，90℃灭菌5min，待温度降至30℃时，无菌取出部分未发酵果蔬汁作为0h对照，其余果蔬汁接种乳酸菌浓度108cfu/ml的ZZU 208种子液，接种量为体积百分含量2.5％，分别30℃静置发酵17h、23h无菌取出发酵果蔬汁。
应用酸度计测定pH；梯度稀释平板计数法统计乳酸菌活菌数；
由30人组成的试饮评价组对3种果蔬汁的气味、色泽及口感进行满意度评价，评价分为3个级别，分别是一般、好及很好。
未发酵果蔬汁、发酵17h及23h果蔬汁的pH、乳酸菌含量及对3种果蔬汁的试饮评价调查结果如表6所示，随发酵时间延长果蔬汁的pH下降，在发酵的17h及23h，pH分别降至3.6及3.2，乳酸菌数在发酵17h已超过108cfu/ml，随发酵时间延长，数量有所降低，发酵果蔬汁在放置一段时间后，乳酸菌活菌数有下降趋势，在4℃存放10d，乳酸菌活菌数均比存放前有所减少，但仍然高于108cfu/ml。30人对未发酵果蔬饮料、发酵17h及23h果蔬饮料的试饮评价结果表明，无论是气味、色泽，还是口感，发酵后果蔬汁的满意度都超过未发酵果蔬汁，因此接种乳酸菌发酵果蔬汁不仅增加果蔬汁中益生菌的数量，而且能够赋予果蔬汁更好的气味、色泽及口感。
综上所述，菌株ZZU 208在混合果汁发酵中不仅能够有效补充乳酸菌、降低果蔬汁pH，而且能够进一步改善果蔬汁的气味、色泽及口感，在发酵果蔬汁饮料制作方面具有潜在的应用价值。
表6为未发酵与乳酸菌发酵果蔬饮料的pH、乳酸菌含量及试饮评价
Claims (10)
1.一株植物乳杆菌Lactobacillus plantarum ZZU 208，其保藏号CGMCC NO.8990。
2.权利要求1所述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液在作为发酵果蔬汁添加剂或制备发酵果蔬汁添加剂中的应用。
3.权利要求1所述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液在发酵果蔬汁中的应用。
4.根据权利要求2或3所述的应用，其特征在于：所述果蔬汁按照包括如下的方法制备：将质量百分含量分别为25％西红柿、12.5％胡萝卜、25％苹果、7.5％的白糖和水混合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁。
5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述灭菌温度为90℃，所述灭菌的时间为5min。
6.一种发酵果蔬汁的方法，包括如下步骤：
1)、将质量百分含量分别为25％西红柿、12.5％胡萝卜、25％苹果、7.5％的白糖和水混合匀浆后，灭菌，得到果蔬汁；
2)将权利要求1所述的植物乳杆菌接入所述果蔬汁中，发酵，得到发酵后果蔬汁。
7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：
所述植物乳杆菌是以植物乳杆菌种子液接入，所述植物乳杆菌种子液的菌含量大于等于108cfu/ml。
8.根据权利要求6或7所述的方法，其特征在于：
所述发酵条件为30℃静置培养17h-23h。
9.一种发酵果蔬汁添加剂，其活性成分为权利要求1所述的植物乳杆菌或其发酵产物或其菌悬液或其培养液。
10.权利要求1所述的植物乳杆菌在制备抑菌产品中的应用；
所述抑菌为抑制Salmonella enterica、抑制Escherichia coli或抑制Micrococcus luteus。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410607958.7A CN104357353B (zh) | 2014-11-03 | 2014-11-03 | 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201410607958.7A CN104357353B (zh) | 2014-11-03 | 2014-11-03 | 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN104357353A true CN104357353A (zh) | 2015-02-18 |
| CN104357353B CN104357353B (zh) | 2017-09-15 |
Family
ID=52524667
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201410607958.7A Active CN104357353B (zh) | 2014-11-03 | 2014-11-03 | 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN104357353B (zh) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104336416A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-11 | 郑州大学 | 一株植物乳杆菌及其在苜蓿青贮中的应用 |
| CN106234895A (zh) * | 2016-07-30 | 2016-12-21 | 大连工业大学 | 一种白刺果乳酸菌发酵饮料及其制备方法 |
| CN106418061A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-02-22 | 华南理工大学 | 一种发酵混合果蔬汁饮料及其制备方法 |
| CN109628350A (zh) * | 2019-01-04 | 2019-04-16 | 中国食品发酵工业研究院有限公司 | 植物乳杆菌及其应用 |
| CN110236052A (zh) * | 2019-07-26 | 2019-09-17 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一种百香果发酵果汁及制备方法 |
| CN110301565A (zh) * | 2019-05-08 | 2019-10-08 | 新派(上海)餐饮管理有限公司 | 一种发酵果蔬汁及其制备方法 |
| CN111607534A (zh) * | 2020-05-08 | 2020-09-01 | 晶叶(银川)生物科技有限公司 | 植物乳杆菌及其在具有缓解便秘功效的果蔬酵素中的应用 |
| CN112813006A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-05-18 | 广东石油化工学院 | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 |
| CN113234639A (zh) * | 2021-06-16 | 2021-08-10 | 广东海天创新技术有限公司 | 一株植物乳杆菌zf632及其应用 |
| CN113337442A (zh) * | 2021-06-23 | 2021-09-03 | 北京林业大学 | 一株植物乳杆菌Lp goji及其在改善鲜枸杞果汁风味中的应用 |
| CN116179405A (zh) * | 2022-10-21 | 2023-05-30 | 广东海天创新技术有限公司 | 一株植物乳植物杆菌zf617及其应用 |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1161175A (zh) * | 1997-01-01 | 1997-10-08 | 阜新市天然食品饮料厂 | 果蔬汁、蔬菜乳酸发酵汁复合饮料及其制备方法 |
| CN102100252A (zh) * | 2009-12-18 | 2011-06-22 | 光明乳业股份有限公司 | 发酵乳制品及其制备方法和原料组合物，植物乳杆菌应用 |
| CN102358888A (zh) * | 2011-09-20 | 2012-02-22 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一株植物乳杆菌r23 |
| CN102971413A (zh) * | 2010-03-19 | 2013-03-13 | 株式会社益力多本社 | 属于植物乳杆菌的新型乳酸菌及其应用 |
| EP2592158A1 (en) * | 2011-11-14 | 2013-05-15 | University College Cork, National University of Ireland, Cork | Lactobacillus plantarum species possessing broad spectrum anti-fungal activity and exhibiting high heat tolerance and osmotolerance |
| CN103284243A (zh) * | 2013-05-31 | 2013-09-11 | 石家庄市兄弟伊兰食品配料有限公司 | 一种植物乳杆菌发酵果蔬汁饮料及制作方法 |
| CN104336416A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-11 | 郑州大学 | 一株植物乳杆菌及其在苜蓿青贮中的应用 |
-
2014
- 2014-11-03 CN CN201410607958.7A patent/CN104357353B/zh active Active
Patent Citations (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1161175A (zh) * | 1997-01-01 | 1997-10-08 | 阜新市天然食品饮料厂 | 果蔬汁、蔬菜乳酸发酵汁复合饮料及其制备方法 |
| CN102100252A (zh) * | 2009-12-18 | 2011-06-22 | 光明乳业股份有限公司 | 发酵乳制品及其制备方法和原料组合物，植物乳杆菌应用 |
| CN102971413A (zh) * | 2010-03-19 | 2013-03-13 | 株式会社益力多本社 | 属于植物乳杆菌的新型乳酸菌及其应用 |
| CN102358888A (zh) * | 2011-09-20 | 2012-02-22 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一株植物乳杆菌r23 |
| EP2592158A1 (en) * | 2011-11-14 | 2013-05-15 | University College Cork, National University of Ireland, Cork | Lactobacillus plantarum species possessing broad spectrum anti-fungal activity and exhibiting high heat tolerance and osmotolerance |
| US20130121977A1 (en) * | 2011-11-14 | 2013-05-16 | University College Cork, National University Of Ireland, Cork | Lactobacillus plantarum species possessing broad spectrum anti-fungal activity and exhibiting high heat tolerance and osmotolerance |
| CN103284243A (zh) * | 2013-05-31 | 2013-09-11 | 石家庄市兄弟伊兰食品配料有限公司 | 一种植物乳杆菌发酵果蔬汁饮料及制作方法 |
| CN104336416A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-11 | 郑州大学 | 一株植物乳杆菌及其在苜蓿青贮中的应用 |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104336416A (zh) * | 2014-11-03 | 2015-02-11 | 郑州大学 | 一株植物乳杆菌及其在苜蓿青贮中的应用 |
| CN106234895A (zh) * | 2016-07-30 | 2016-12-21 | 大连工业大学 | 一种白刺果乳酸菌发酵饮料及其制备方法 |
| CN106418061A (zh) * | 2016-08-30 | 2017-02-22 | 华南理工大学 | 一种发酵混合果蔬汁饮料及其制备方法 |
| CN109628350A (zh) * | 2019-01-04 | 2019-04-16 | 中国食品发酵工业研究院有限公司 | 植物乳杆菌及其应用 |
| CN109628350B (zh) * | 2019-01-04 | 2021-02-19 | 中国食品发酵工业研究院有限公司 | 植物乳杆菌及其应用 |
| CN110301565B (zh) * | 2019-05-08 | 2022-10-04 | 新派(上海)餐饮管理有限公司 | 一种发酵果蔬汁及其制备方法 |
| CN110301565A (zh) * | 2019-05-08 | 2019-10-08 | 新派(上海)餐饮管理有限公司 | 一种发酵果蔬汁及其制备方法 |
| CN110236052A (zh) * | 2019-07-26 | 2019-09-17 | 福建省农业科学院农业工程技术研究所 | 一种百香果发酵果汁及制备方法 |
| CN111607534A (zh) * | 2020-05-08 | 2020-09-01 | 晶叶(银川)生物科技有限公司 | 植物乳杆菌及其在具有缓解便秘功效的果蔬酵素中的应用 |
| CN112813006A (zh) * | 2021-02-08 | 2021-05-18 | 广东石油化工学院 | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 |
| CN112813006B (zh) * | 2021-02-08 | 2023-08-18 | 广东石油化工学院 | 植物乳杆菌及其在果蔬汁发酵中的应用 |
| CN113234639A (zh) * | 2021-06-16 | 2021-08-10 | 广东海天创新技术有限公司 | 一株植物乳杆菌zf632及其应用 |
| CN113337442A (zh) * | 2021-06-23 | 2021-09-03 | 北京林业大学 | 一株植物乳杆菌Lp goji及其在改善鲜枸杞果汁风味中的应用 |
| CN116179405A (zh) * | 2022-10-21 | 2023-05-30 | 广东海天创新技术有限公司 | 一株植物乳植物杆菌zf617及其应用 |
| CN116179405B (zh) * | 2022-10-21 | 2023-11-28 | 广东海天创新技术有限公司 | 一株植物乳植物杆菌zf617及其应用 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN104357353B (zh) | 2017-09-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104357353A (zh) | 一株植物乳杆菌在发酵果蔬汁制作中的应用 | |
| CN104830731B (zh) | 一株具有广谱抑菌特性的植物乳杆菌ab-1及其应用 | |
| CN104845912B (zh) | 一株植物乳杆菌 | |
| Ao et al. | Identification of lactic acid bacteria in traditional fermented yak milk and evaluation of their application in fermented milk products | |
| CN101338283B (zh) | 一种干酪乳杆菌及其在固态发酵中的应用 | |
| CN102056489B (zh) | 新型发酵乳及其应用 | |
| CN103540545B (zh) | 一种戊糖片球菌及其应用 | |
| CN107873841B (zh) | 乳酸菌饮品及其生产工艺 | |
| CN102747009A (zh) | 一株植物乳杆菌及其在发酵乳制品中的使用方法 | |
| CN102391962B (zh) | 一种屎肠球菌制剂及其生产工艺 | |
| CN113068782B (zh) | 一种褐色活性乳酸菌饮品及其制备方法 | |
| CN104560784B (zh) | 副干酪乳杆菌及其应用以及发酵制品及其制备方法 | |
| CN107177522A (zh) | 一株高活性饲用植物乳杆菌及其培养方法和应用 | |
| CN105420150A (zh) | 一种嗜酸乳杆菌及其应用 | |
| Hossein Marhamatizadeh et al. | Effect of permeate on growth and survival of Lactobacillus acidophilus and Bifidobacterium bifidum for production of probiotic nutritive beverages | |
| CN103315061B (zh) | 一种活性乳酸菌饮料的制备方法及其产品 | |
| CN102321550A (zh) | 低温发酵的乳酸乳球菌及用其制备酸奶的方法 | |
| CN111635875A (zh) | 一种长双歧杆菌cz70及其制备活菌型黑莓果浆的方法 | |
| JP2015159749A (ja) | 石川県の伝統水産発酵食品に由来する乳酸菌を含有するヨーグルト | |
| CN104365858B (zh) | 一种发酵型银杏花生乳饮料的制备方法 | |
| CN101073341A (zh) | 酸奶型乳酸菌奶粉 | |
| CN105670959A (zh) | 一株益生菌菌株及其应用 | |
| CN105154369A (zh) | 德氏乳杆菌保加利亚亚种及其应用 | |
| CN104830730B (zh) | 一株具有抗甜瓜枯萎菌和抗甜瓜疫霉菌活性的植物乳杆菌ab-4及其应用 | |
| CN102703345B (zh) | 一株抑制生物胺产生的棒状乳杆菌及其应用 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| TR01 | Transfer of patent right | ||
| TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20221214 Address after: 450001 No. 100, science Avenue, hi tech Development Zone, Henan, Zhengzhou Patentee after: Zhengzhou University Address before: 450001 Zhengzhou University, 100 science Avenue, Henan, Zhengzhou Patentee before: Zhengzhou University Patentee before: THE INSTITUTE OF CROPS AND NUCLEAR TECHNOLOGY UTILIZATION, ZHEJIANG ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES |