CN104297412B - 一种蛋白粉新鲜度的测定方法 - Google Patents

一种蛋白粉新鲜度的测定方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104297412B
CN104297412B CN201410555280.2A CN201410555280A CN104297412B CN 104297412 B CN104297412 B CN 104297412B CN 201410555280 A CN201410555280 A CN 201410555280A CN 104297412 B CN104297412 B CN 104297412B
Authority
CN
China
Prior art keywords
solution
albumen powder
chaff propylhomoserin
need testing
freshness
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410555280.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104297412A (zh
Inventor
梁峙
梁骁
马捷
梁瑛
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Xuzhou University of Technology
Original Assignee
Xuzhou University of Technology
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Xuzhou University of Technology filed Critical Xuzhou University of Technology
Priority to CN201410555280.2A priority Critical patent/CN104297412B/zh
Publication of CN104297412A publication Critical patent/CN104297412A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104297412B publication Critical patent/CN104297412B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Landscapes

  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了一种蛋白粉新鲜度的测定方法，该方法先将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液；然后将糠氨酸标准品溶液和供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作为蛋白粉新鲜度的评价指标。本发明的方法采用化学法前期处理和反相离子对色谱法的创新结合，用以测定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法来确定蛋白粉的产品质量和新鲜度具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。

Description

一种蛋白粉新鲜度的测定方法
技术领域
本发明属于含量测定技术领域，具体涉及一种蛋白粉新鲜度的测定方法。
背景技术
蛋白粉是采用提纯的大豆蛋白或乳清蛋白，通过加工制作成粉剂，为缺乏蛋白质的人群补充蛋白质，具有提高机体免疫力和缓解体力疲劳的保健功能，被广泛应用到保健食品和食品添加剂中。蛋白粉分为乳清蛋白粉和大豆蛋白粉，其中的蛋白质含量在2.6g/100kJ～8.5g/100kJ的范围内，平均在4.4g/100kJ～5.4g/100kJ，蛋白粉在烘干、压榨、制粉的加工过程，以及包装、贮藏的过程中，由于条件不恰当，将会降低其营养价值及品位，直接影响到其经济价值。因此，探求和确立能如实反应蛋白粉新鲜度品质的指标，有效监控蛋白粉质量，需要不断改进、完善蛋白粉品质标准的检测方法和手段。
糠氨酸(furosine)是美拉德反应产物Amadori化合物的水解产物，糠氨酸是美拉德反应前期评价营养损失程度的一个重要指标，被广泛应用于评价奶制品、焙烤食品、蜂蜜、鸡蛋等在热处理和贮存过程中的营养损失的程度。由于蛋白粉中的蛋白质及碳水化合物含量丰富，在一定条件下会发生美拉德反应。
现有的糠氨酸检测方法有离子交换色谱法、表面荧光方法、HPLC梯度洗脱、反相离子对色谱法等，这些测定方法常用于对奶制品中的糠氨酸的测试，由于奶制品具有成分单一、纯净、易溶解的特点，以上测试方法的准确度高。但蛋白粉则不同，主要是其成分较为复杂，不够纯净，有些蛋白粉中还添加其他补充人体需要的物质，成为是一种集多种有机物和无机物的混合物，同时蛋白粉的粘性大，蛋白质含量高，若单纯采用上述检测方法，测定的干扰大，导致对蛋白质中的糠氨酸无法进行准确分析，其精密度、准确度和检出限等误差较大。
发明内容
本发明的目的是提供一种蛋白粉新鲜度的测定方法，该方法采用化学法前期处理和反相离子对色谱法的创新结合，用以测定蛋白粉中糠氨酸的含量，用此方法来确定蛋白粉的产品质量和新鲜度具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。
一种蛋白粉新鲜度的测定方法，包括以下步骤：
步骤1，糠氨酸标准品溶液制备；
步骤2，样品前处理：将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液；
步骤3，将步骤1所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作为蛋白粉新鲜度的评价指标。。
作为上述发明的进一步改进，步骤1中用0.1mol/L的盐酸溶液作溶剂配制糠氨酸标准品溶液。
作为上述发明的进一步改进，步骤2中蛋白粉样品的加入量为0.35g，混合溶液的用量为6mL。
作为上述发明的进一步改进，所述混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1。
作为上述发明的进一步改进，所述混合溶液中盐酸溶液的浓度为10.2mol/L，草酸溶液的浓度为0.5mol/L。
作为上述发明的进一步改进，步骤2中溶液的加热方法为在110℃烘箱内放置24小时。
作为上述发明的进一步改进，步骤3中高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。
本发明与现有技术相比，其显著优点在于：第一，选用盐酸溶液、草酸溶液和超纯水的混合溶液对蛋白粉样品进行前处理，可去除蛋白粉中的杂质干扰，并使蛋白粉中的糠氨酸得到充分溶解；第二，用反相离子对色谱法测定蛋白粉中糠氨酸的含量，方法具有准确、快速、简单、重复性好的特点，适用于蛋白粉中糠氨酸的定量分析，可用以判断蛋白粉的新鲜度和质量。
具体实施方式
实施例1
精密度实验
步骤1，糠氨酸标准品溶液制备：称取糠氨酸标准样品2.5mg，用0.1mol/L的盐酸溶解于25mL容量瓶中，其浓度为100mg/L，作为标准贮备液，放置于-20℃冰箱中保存。分别吸取2.0、4.0、6.0、8.0ml糠氨酸标准贮备液于10ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸稀释至刻度摇匀。
步骤2，样品前处理：将0.35g蛋白粉样品加入到6mL盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀，在溶液中通入高纯氮气，放入110℃烘箱内24小时，取出后冷却至室温，过滤，取滤液作供试品溶液，其中混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1、盐酸溶液的浓度为10.2mol/L、草酸溶液的浓度为0.5mol/L；
步骤3，将步骤所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。
精确取6份蛋白粉样品，经处理后测定，结果如下，方法精密度较好。
实施例2
一种蛋白粉新鲜度的测定方法，包括以下步骤：
步骤1，糠氨酸标准品溶液制备：称取糠氨酸标准样品2.5mg，用0.1mol/L的盐酸溶解于25mL容量瓶中，其浓度为100mg/L，作为标准贮备液，放置于-20℃冰箱中保存。分别吸取2.0、4.0、6.0、8.0ml糠氨酸标准贮备液于10ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸稀释至刻度摇匀。
步骤2，样品前处理：将0.35g蛋白粉样品加入到6mL盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀，在溶液中通入高纯氮气，放入110℃烘箱内24小时，取出后冷却至室温，过滤，取滤液作供试品溶液，其中混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1、盐酸溶液的浓度为10.2mol/L、草酸溶液的浓度为0.5mol/L；
步骤3，将步骤所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。
选取不同贮藏时间的蛋白粉及不同品种的蛋白粉，测定其中糠氨酸的含量，测定结果见下表1：
表1蛋白粉样品中糠氨酸含量
从表中可以看出：试验样品中乳清蛋白粉糠氨酸的含量在4793.91mg/100g蛋白～6085.37mg/100g蛋白之间，试验样品中乳清蛋白粉糠氨酸的含量在3632.61mg/100g蛋白～4528.83mg/100g蛋白之间，且糠氨酸的含量受贮存时间的影响较明显，蛋白粉中的蛋白质质量受热损伤程度差异较大。
实施例3
一种蛋白粉新鲜度的测定方法，包括以下步骤：
步骤1，糠氨酸标准品溶液制备：称取糠氨酸标准样品2.5mg，用0.1mol/L的盐酸溶解于25mL容量瓶中，其浓度为100mg/L，作为标准贮备液，放置于-20℃冰箱中保存。分别吸取2.0、4.0、6.0、8.0ml糠氨酸标准贮备液于10ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸稀释至刻度摇匀。
步骤2，样品前处理：将0.35g蛋白粉样品加入到6mL盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀，在溶液中通入高纯氮气，放入110℃烘箱内24小时，取出后冷却至室温，过滤，取滤液作供试品溶液，其中混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1、盐酸溶液的浓度为10.2mol/L、草酸溶液的浓度为0.5mol/L；
步骤3，将步骤所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。
选取同一品牌不同贮藏时间、不同类型的蛋白粉，测定其中糠氨酸的含量，测定结果见下表2：
表2蛋白粉样品中糠氨酸含量
从表中可以看出：在该分析条件下，乳清蛋白粉和大豆蛋白粉糠氨酸含量随储存时间长度而增高，且乳清蛋白粉糠氨酸含量高于同期的大豆蛋白粉糠氨酸含量。
实施4
本实施例中蛋白粉新鲜度的测定方法与实施例2的区别在于高效液相色谱仪采用的流动相为乙腈-3mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2，流速为0.9mL/min，具体如下：
蛋白粉新鲜度的测定方法，包括以下步骤：
步骤1，糠氨酸标准品溶液制备：称取糠氨酸标准样品2.5mg，用0.1mol/L的盐酸溶解于25mL容量瓶中，其浓度为100mg/L，作为标准贮备液，放置于-20℃冰箱中保存。分别吸取2.0、4.0、6.0、8.0ml糠氨酸标准贮备液于10ml容量瓶中，用0.1mol/L的盐酸稀释至刻度摇匀。
步骤2，样品前处理：将0.35g蛋白粉样品加入到6mL盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀，在溶液中通入高纯氮气，放入110℃烘箱内24小时，取出后冷却至室温，过滤，取滤液作供试品溶液，其中混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1、盐酸溶液的浓度为10.2mol/L、草酸溶液的浓度为0.5mol/L；
步骤3，将步骤所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-3mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。
选取不同品牌不同贮藏时间、不同类型的蛋白粉，测定其中糠氨酸的含量，测定结果见下表3：
表3蛋白粉样品中糠氨酸含量
从表中可以看出：在该分析条件下，乳清蛋白粉和大豆蛋白粉糠氨酸含量随储存时间长度变化规律性不够明显。

Claims (6)

1.一种蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤1，糠氨酸标准品溶液制备；
步骤2，样品前处理：将蛋白粉样品加入到盐酸溶液和草酸溶液的混合溶液中，混合均匀后，在氮气氛围中将溶液加热，然后冷却至室温，过滤，取滤液作为供试品溶液；
步骤3，将步骤1所得糠氨酸标准品溶液和步骤2所得供试品溶液分别注入高效液相色谱仪中进行检测，得到供试品溶液中糠氨酸的含量，以供试品溶液中糠氨酸的含量作为蛋白粉新鲜度的评价指标；
步骤3中高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为乙腈-5mmol/L庚烷磺酸钠水溶液-甲酸，体积比为20:80:0.2；流速为0.8mL/min；检测器波长为280nm；柱温为26℃；进样量为5μL。
2.根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤1中用0.1mol/L的盐酸溶液作溶剂配制糠氨酸标准品溶液。
3.根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤2中蛋白粉样品的加入量为0.35g，混合溶液的用量为6mL。
4.根据权利要求3所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：所述混合溶液中盐酸溶液、草酸溶液的体积比为8:1。
5.根据权利要求4所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：所述混合溶液中盐酸溶液的浓度为10.2mol/L，草酸溶液的浓度为0.5mol/L。
6.根据权利要求1所述的蛋白粉新鲜度的测定方法，其特征在于：步骤2中溶液的加热方法为在110℃烘箱内放置24小时。
CN201410555280.2A 2014-10-17 2014-10-17 一种蛋白粉新鲜度的测定方法 Expired - Fee Related CN104297412B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410555280.2A CN104297412B (zh) 2014-10-17 2014-10-17 一种蛋白粉新鲜度的测定方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410555280.2A CN104297412B (zh) 2014-10-17 2014-10-17 一种蛋白粉新鲜度的测定方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104297412A CN104297412A (zh) 2015-01-21
CN104297412B true CN104297412B (zh) 2015-12-02

Family

ID=52317233

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410555280.2A Expired - Fee Related CN104297412B (zh) 2014-10-17 2014-10-17 一种蛋白粉新鲜度的测定方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104297412B (zh)

Families Citing this family (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105203651B (zh) * 2015-07-10 2017-07-11 广东出入境检验检疫局检验检疫技术中心 乳制品中糠氨酸的测定方法
CN115508473A (zh) * 2022-10-12 2022-12-23 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 一种评价婴幼儿配方乳粉的鲜活品质的方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0430045A2 (en) * 1989-11-21 1991-06-05 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Ascorbic acid tocopheryl phosphate diesters for inhibition of Maillard's reaction
DE10210436A1 (de) * 2002-03-09 2003-10-02 Michael Licht Verfahren und Vorrichtung zur zerstörungsfreien spektroskopischen Bestimmung von Analytkonzentrationen
CN101292682A (zh) * 2007-04-24 2008-10-29 光明乳业股份有限公司 一种液态奶的浓缩方法
CN101788461A (zh) * 2009-12-25 2010-07-28 昆明理工大学 一种检测鲜牛奶受热强度的方法

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0430045A2 (en) * 1989-11-21 1991-06-05 Senju Pharmaceutical Co., Ltd. Ascorbic acid tocopheryl phosphate diesters for inhibition of Maillard's reaction
DE10210436A1 (de) * 2002-03-09 2003-10-02 Michael Licht Verfahren und Vorrichtung zur zerstörungsfreien spektroskopischen Bestimmung von Analytkonzentrationen
CN101292682A (zh) * 2007-04-24 2008-10-29 光明乳业股份有限公司 一种液态奶的浓缩方法
CN101788461A (zh) * 2009-12-25 2010-07-28 昆明理工大学 一种检测鲜牛奶受热强度的方法

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Developments in understanding and assessment of egg and egg product quality over the last century;M.ROSSI et al;《World"s Poultry Science Journal》;20130630;第69卷(第02期);414-429 *
Furosine as a Freshness Parameter of Shell Eggs;Alyssa Hidalgo et al;《J. Agric. Food Chem》;19950630;第43卷(第6期);1673-1677 *
High-performance liquid chromatographic determination of Maillard compounds in store-brand and name-brand ultra-high-temperature-treated cows’ milk;E.Ferrer et al;《Journal of Chromatography A》;20000609;第881卷(第1-2期);599-606 *
Monitoring nutritional quality of milk powderscapillary electrophoresis of the whey protein fraction compared with other methods;J. De Block;《International Dairy Journal》;20031231;第13卷(第2-3期);87-94 *
前表面荧光法在牛奶美拉德反应检测中的应用;杨晓倩 等;《食品工业科技》;20120815;第33卷(第16期);157-160，164 *
反相离子对色谱法测定牛奶与奶粉中糠氨酸的含量;李广 等;《分析测试学报》;20101125;第29卷(第11期);1207-1210 *
蜂花粉中糠氨酸的高效液相色谱测定方法;周骁 等;《现代科学仪器 》;20080415(第2期);90-92 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104297412A (zh) 2015-01-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN107202836B (zh) 一种茶叶鲜样中茶氨酸含量的快速分析方法
CN105467019A (zh) 维生素a、e的测定方法和相应的在线固相萃取分析系统
CN104297412B (zh) 一种蛋白粉新鲜度的测定方法
CN110261530A (zh) 一种果汁饮料中20种有机胺、生物胺和阳离子同时测定的方法
CN110554114B (zh) 一种酸奶中低聚异麦芽糖及其同分异构体的分析方法
CN109633010A (zh) 一种测定全血中糖化血红蛋白的试剂盒及方法
CN103760121A (zh) 一种血液中亚硝酸盐的检测方法
Wang et al. Integration of phase separation with ultrasound-assisted salt-induced liquid–liquid microextraction for analyzing the fluoroquinones in human body fluids by liquid chromatography
CN107037150A (zh) 一种同时测定食品中多种防腐剂、甜味剂和着色剂的方法
CN104181313B (zh) 凝血因子ⅸ质控品制备方法
CN106841408A (zh) 一种氨基酸注射液中蛋氨酸亚砜的快速检测方法
CN104407093B (zh) 一种快速检测发酵液中l-谷氨酰胺含量的方法
CN102507757A (zh) 一种高效液相色谱法测定条斑紫菜中抗坏血酸含量的方法
CN107271588B (zh) 一种超高效液相色谱测定b族维生素的方法
CN104698159B (zh) 一种内毒素含量的检测方法
CN102539575A (zh) 一种乳制品中β-乳球蛋白含量的检测方法
CN108593829A (zh) 一种对牛奶产地溯源影响因素的稳定同位素分析方法
CN105588900A (zh) 复方氨基酸注射液18aa-ii含量测定方法
CN106596765A (zh) 一种食品原料中麦芽糊精添加量的检测方法
CN103308639B (zh) 一种水产品中蓝藻毒素β-甲氨基-L-丙氨酸含量的检测方法
CN104297376A (zh) 牛奶中低聚果糖的检测方法
CN105651890B (zh) 一种水产品中生物胺的快速检测方法
CN103630636A (zh) 多种饲用调味剂的同时测定方法
CN102590429B (zh) 一种测定食品包装材料用添加剂含量的方法
CN105842352A (zh) 一种简便的gc法测定人血白蛋白中辛酸钠含量的方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20151202

Termination date: 20161017

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee