CN104292283A

CN104292283A - 尼莫克汀的纯化方法

Info

Publication number: CN104292283A
Application number: CN201310298096.XA
Authority: CN
Inventors: 彭平; 郭萍; 张洪兰; 易钟
Original assignee: CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICALS Co Ltd OF PKU INTERNATIONAL HEALTHCARE GROUP; Peking University Founder Group Co Ltd; PKU International Healthcare Group Co Ltd
Current assignee: CHONGQING DAXIN PHARMACEUTICAL CO LTD; New Founder Holdings Development Co ltd; Peking University Medical Management Co ltd; Peking University Founder Group Co Ltd; PKU Healthcare Industry Group
Priority date: 2013-07-16
Filing date: 2013-07-16
Publication date: 2015-01-21
Anticipated expiration: 2033-07-16
Also published as: CN104292283B

Abstract

本发明提供了一种尼莫克汀的纯化方法。所述的方法包括：1）提供尼莫克汀粗品；2）将所述的尼莫克汀粗品与液态有机盐混合，过滤，得到滤液；3）将步骤2）得到的滤液与C₅-C₂₀烷烃混合，以进行洗涤，分离得到液态有机盐相溶液；以及4）将步骤3）得到的液态有机盐相溶液进行降温结晶，从而得到所述的尼莫克汀。本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：本发明克服了现行的树脂吸附分离等方法的缺陷，所得尼莫克汀的纯度高，方法简单易行，能耗低，成本低廉，且一次处理量大，适合应用于工业化大生产。

Description

尼莫克汀的纯化方法

技术领域

本发明属于制药领域，具体而言，涉及一种尼莫克汀的纯化方法。

背景技术

尼莫克汀（Nemadectin）是由蓝灰链霉菌（Streptomycescyaneogriseus sp.Noncyanogenus）产生的十六元大环内酯类抗生素，由Sankyo的科学家于1973年发现，并且与阿维菌素以及米尔贝霉素一样，表现出很好的抗寄生虫活性。尼莫克汀为白色粉末，溶于甲醇、乙醇、二氯甲烷、二甲基亚砜、甲酰二甲胺。尼莫克汀的分子式：C₃₆H₅₂O₈，分子量：312.3705，分子式如下式I所示：

上世纪90年代，我国农业病虫害防治面积为2.7亿hm²，90%使用农药进行防治，减少粮食损失315亿斤；大量地使用化学农药对环境影响很大，甚至造成了严重的污染，危及人们的身体健康。而尼莫克汀作为抗寄生虫抗生素，具有杀虫谱广，易降解，低残留，无抗药性，对人畜无害，环境污染少等优点，并且还可由尼莫克汀合成活性更强的莫西克汀（Moxidectin），因此受到了广泛的应用。

欧洲专利申请公开EP0170006A2公开了一种包含尼莫克汀及类似结构物的发酵产物的分离纯化方法，其中所述的方法通过将发酵液加硅藻土助滤，用甲醇萃取湿渣，浓缩萃取液，用二氯甲烷萃取，收集的二氯甲烷用无水Na₂SO₄干燥、浓缩，再上硅胶柱层析得到尼莫克汀，该法使用一次性硅胶分离尼莫克汀，导致提取成本高，不适合应用于工业化生产。

中国专利申请No.200810126358.3公开了一种制备高纯度莫西克汀的方法，其中所述的方法包括：发酵液固液分离，萃取后的尼莫克汀，用20-40目的大孔树脂吸附，吸附量为10g/L，用有机溶剂与水作混合溶剂进行解析，浓缩处理后纯度为41%～45%的尼莫克汀粗品。此方法获得的尼莫克汀纯度较低、效率低，为尼莫克汀使用带来了困难。

中国专利申请No.201010237843.5公开了一种制备尼莫克汀的方法，其中所述的方法包括：发酵液直接喷雾干燥，有机溶剂萃取后，用HP20SS树脂吸附，解析、萃取、浓缩、干燥，获得尼莫克汀纯品，此法采用喷雾干燥发酵液，耗能大。

因此，目前亟需一种能够达到较高纯度并适合工业化大生产的尼莫克汀的纯化方法。

发明内容

为解决上述现有技术中存在的问题，本发明提供了一种尼莫克汀的纯化方法。

具体而言，本发明提供：

（1）一种尼莫克汀的纯化方法，其包括：

1）提供尼莫克汀粗品；

2）将所述的尼莫克汀粗品与液态有机盐混合，过滤，得到滤液；

3）将步骤2）得到的滤液与C₅-C₂₀烷烃混合，以进行洗涤，分离得到液态有机盐相溶液；以及

4）将步骤3）得到的液态有机盐相溶液进行降温结晶，从而得到所述的尼莫克汀。

（2）根据（1）所述的方法，其中，所述的液态有机盐选自醋酸三乙胺、醋酸二乙胺、甲酸二乙胺、甲酸乙胺、甲酸三乙胺、醋酸二甲胺、醋酸三甲胺、丙酸三乙胺、丙酸二乙胺、丙酸乙胺、丙酸甲胺、丙酸二甲胺以及丙酸三甲胺中的一种或几种，优选为醋酸二乙胺。

（3）根据（1）所述的方法，其中，所述的尼莫克汀粗品与所述的液态有机盐的重量体积比为1:(2-10)；优选为1:(3-5)。

（4）根据（1）所述的方法，其中，所述的C₅-C₂₀烷烃选自戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、十三烷、十四烷、十五烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、甲基环戊烷、乙基环戊烷、丙基环戊烷、丁基环戊烷、甲基环己烷、乙基环己烷、丙基环己烷、丁基环己烷、甲基环庚烷、乙基环庚烷、丙基环庚烷以及丁基环庚烷中的一种或几种；优选为辛烷。

（5）根据（1）所述的方法，其中，所述的尼莫克汀粗品与所述的C₅-C₂₀烷烃的重量体积比为1:(0.6-5)；优选为1:(1-3)。

（6）根据（1）所述的方法，其中，步骤4）所述的降温结晶包括：

i）将步骤3）得到的液态有机盐相溶液降温至-20～15℃，优选为-10～10℃；以及

ii）将步骤i）得到的液态有机盐相溶液与水混合，以进行结晶，从而得到所述的尼莫克汀。

（7）根据（1）-（6）中任意一项所述的方法，其中，步骤1）所述的尼莫克汀粗品是通过以下方法得到的：

a）将经过发酵产生尼莫克汀的发酵液的pH调至2-7，过滤，得到滤渣；

b）将步骤a）得到的滤渣与第一有机溶剂混合，以进行提取，过滤，浓缩滤液，从而得到固态混合物；以及

c）将步骤b）得到的固态混合物与第二有机溶剂混合，以进行提取，浓缩提取液，从而得到所述的尼莫克汀粗品，

其中，所述的第一有机溶剂的极性高于所述的第二有机溶剂。

（8）根据（7）所述的方法，其中，所述的发酵液是通过对蓝灰链霉菌（Streptomyces cyaneogriseus sp.Noncyanogenus）进行发酵而获得的。

（9）根据（7）所述的方法，其中，将所述的发酵液的pH调至3-5。

（10）根据（7）所述的方法，其中，所述的第一有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、二甲基亚砜以及苯甲醇中的一种或几种；优选为异丙醇。

（11）根据（7）所述的方法，其中，所述的第二有机溶剂选自苯、甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、异丁醇以及戊醇中的一种或几种；优选为二氯甲烷。

本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

本发明提纯尼莫克汀的工艺运用了液态有机盐的特殊溶解性，成功地实现了尼莫克汀的提取，克服了现行的树脂吸附分离等方法的缺陷。所得尼莫克汀的纯度高，例如，能够将尼莫克汀粗品的纯度从30%提高至85%。方法简单易行，能耗低，成本低廉，且一次处理量大，适合应用于工业化大生产。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

本发明所述的“液态有机盐”也称为离子液体，是指在室温或接近室温下（此处所述的室温或接近室温指的是10-35℃）呈现液态的、由阴阳离子所组成的有机盐，也可称为低温熔融盐。液态有机盐一般由低熔点的有机酸与低熔点的有机碱等当量反应的产物。

本发明人对包含尼莫克汀粗品进行了大量的纯化试验，出人意料地发现将尼莫克汀粗品用液态有机盐浸取后，再用烷烃洗涤除去低极性物质，能够提高尼莫克汀结晶液纯度，使尼莫克汀能够通过降温结晶进行纯化。上述步骤能够将尼莫克汀粗品的纯度从（例如）30%提高至85%。本发明人在此发现的基础上，进一步得到了本发明的技术方案。

具体而言，本发明提供了一种尼莫克汀的纯化方法，其包括：

1）提供尼莫克汀粗品；

所述的尼莫克汀粗品为待进一步纯化的尼莫克汀固体混合物，其中尼莫克汀的纯度没有特别的限制，例如，纯度可以为25-80%，又例如，纯度可以为20-45%，但是本发明并不限于此。尼莫克汀粗品可通过本领域常规方法制备得到，例如，可通过欧洲专利申请公开EP0170006A2中的萃取步骤再经浓缩制备得到，或者通过中国专利申请No.200810126358.3中的方法制备得到的纯度为41%～45%的尼莫克汀粗品。但是本发明并不限于此。

优选的是，所述的液态有机盐选自醋酸三乙胺、醋酸二乙胺、甲酸二乙胺、甲酸乙胺、甲酸三乙胺、醋酸二甲胺、醋酸三甲胺、丙酸三乙胺、丙酸二乙胺、丙酸乙胺、丙酸甲胺、丙酸二甲胺以及丙酸三甲胺中的一种或几种，优选为醋酸二乙胺。其中，本领域技术人员所公知的是，所述的液态有机盐可由相应的酸与相应的碱通过简单的酸碱反应制备得到，其制备过程中的各原料均市售可得，例如，丙酸三乙胺可通过将纯丙酸与纯三乙胺反应后得到。

优选的是，所述的尼莫克汀粗品与所述的液态有机盐的重量体积比为1:(2-10)；优选为1:(3-5)。

优选的是，所述的C₅-C₂₀烷烃可为直链或支链的烷烃或环烷烃，优选选自戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、十三烷、十四烷、十五烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、甲基环戊烷、乙基环戊烷、丙基环戊烷、丁基环戊烷、甲基环己烷、乙基环己烷、丙基环己烷、丁基环己烷、甲基环庚烷、乙基环庚烷、丙基环庚烷以及丁基环庚烷中的一种或几种；优选为辛烷。

优选的是，所述的尼莫克汀粗品与所述的C₅-C₂₀烷烃的重量体积比为1:(0.6-5)；优选为1:(1-3)。

优选的是，步骤4）所述的降温结晶包括：

更优选的是，将水加入（例如，滴加入）至步骤i）得到的液态有机盐相溶液中，以进行所述的结晶。更优选的是，所述的液态有机盐相溶液与所述的水的体积比为1:(0.6-3)；优选为1:(1-2)。

优选的是，步骤1）所述的尼莫克汀粗品是通过以下方法得到的：

a）将经过发酵产生尼莫克汀的发酵液的pH调至2-7，过滤，得到滤渣（即，固体不溶物）；

更优选的是，所述的发酵液是通过对蓝灰链霉菌蓝灰链霉菌（Streptomyces cyaneogriseus sp.Noncyanogenus）进行发酵而获得的。

更优选的是，将所述的发酵液的pH调至3-5。

更优选的是，步骤a）调pH所用的酸选自盐酸、硫酸、磷酸、醋酸以及草酸中的一种或多种。

更优选的是，所述的第一有机溶剂为极性相对较高的有机溶剂，优选选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、二甲基亚砜以及苯甲醇中的一种或几种；优选为异丙醇。更优选的是，所述的滤渣与所述的第一有机溶剂的重量体积比为1:(1.5-10)；优选为1:(2-5)。

更优选的是，所述的第二有机溶剂为极性相对较低的有机溶剂，优选选自苯、甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、异丁醇以及戊醇中的一种或几种；优选为二氯甲烷。更优选的是，所述的滤渣与所述的第二有机溶剂的重量体积比为1:(0.6-10)；优选为1:(2-5)。

更优选的是，在步骤c）中，将步骤b）得到的固态混合物与第二有机溶剂混合后，再将所得溶液与碱性水溶液进行混合，例如，第二有机溶剂的0.7-0.8倍体积的5%（w/v）碳酸氢钠水溶液，以除去部分酸性杂质，静止分层，分离得到第二有机溶剂层提取液，浓缩，从而得到所述的尼莫克汀粗品。

在本发明的一个优选实施方案中，所述的方法包括：将尼莫克汀发酵液调pH2-7，过滤，得滤饼；加入有机溶剂1提取，过滤，得滤液；浓缩回收有机溶剂1。混合物中加入有机溶剂2提取，加入碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤1h，静置分层；浓缩回收有机溶剂2，从而得到尼莫克汀粗品。

加入液态有机盐，搅拌溶解，过滤；滤液加入烷烃洗涤，取下层，降温，搅拌下滴加水，结晶，过滤，洗涤，减压烘干，得尼莫克汀。

其中，所述的尼莫克汀发酵液为将蓝灰链霉菌进行发酵获得的尼莫克汀发酵液。pH优选为3～5。调发酵液pH所用的酸选自盐酸、硫酸、磷酸、醋酸和草酸中的一种或多种，优选硫酸。

其中，所述的滤饼与所述的有机溶剂1的重量体积比为1:(1.5-10)；优选为1:(2-5)；有机溶剂1选自：甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、二甲基亚砜、苯甲醇或它们的混合物，优选异丙醇。

其中，所述的滤饼与所述的有机溶剂2的重量体积比为1:(0.6-10)；优选为1:(2-5)。有机溶剂2选自：苯、甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、异丁醇、戊醇或它们的混合物。优选二氯甲烷。

其中，加入第二有机溶剂0.5-1.5倍体积的5%的碳酸氢钠溶液；优选0.7-0.8倍；

其中，所述的尼莫克汀粗品与所述的液态有机盐的重量体积比为1:(2-10)；优选为1:(3-5)。液态有机盐选自：醋酸三乙胺溶液、醋酸二乙胺、甲酸二乙胺、甲酸乙胺、甲酸三乙胺、醋酸二甲胺、醋酸三甲胺、丙酸三乙胺溶液、丙酸二乙胺、丙酸乙胺、丙酸甲胺、丙酸二甲胺、丙酸三甲胺或它们的混合物，优选醋酸二乙胺。

其中，滤液加体积为液态有机盐0.2-10倍的烷烃萃取，优选为0.3～4倍；烷烃选自戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、十三烷、十四烷、十五烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、甲基环戊烷、乙基环戊烷、丙基环戊烷、丁基环戊烷、甲基环己烷、乙基环己烷、丙基环己烷、丁基环己烷、甲基环庚烷、乙基环庚烷、丙基环庚烷、丁基环庚烷；优选辛烷。

其中，降温至-20～15℃，优选为-10～10℃，搅拌下滴加液态有机盐0.6～3倍体积的水，结晶，优选1～2倍。

在本发明的另一个优选实施方案中，所述的方法包括：将尼莫克汀发酵液调pH3-7，过滤，得滤饼；加入有机溶剂1提取，所述的滤饼与所述的有机溶剂1的重量体积比为1:(1.5-10)；过滤，得滤液；浓缩回收有机溶剂1。加入有机溶剂2提取，所述的滤饼与所述的有机溶剂2的重量体积比为1:(0.6-10)；之后加入第二有机溶剂0.5-1.5倍体积的5%的碳酸氢钠溶液，搅拌洗涤1h，静置分层；浓缩回收有机溶剂2，从而得到尼莫克汀粗品。向尼莫克汀粗品中加入液态有机盐，所述的尼莫克汀粗品与所述的液态有机盐的重量体积比为1:(2-10)；搅拌溶解，过滤；滤液加体积为液态有机盐0.2-2倍的烷烃萃取，取下层，降温至-20～15℃，搅拌下滴加液态有机盐体积1～3倍的水，结晶，过滤，洗涤，减压烘干，得淡黄色的尼莫克汀。

以下通过实施例的方式进一步解释或说明本发明内容，但这些实施例不应被理解为对本发明保护范围的限制。

在以下实施例中，尼莫克汀发酵液是通过将蓝灰链霉菌进行发酵获得的，发酵工艺可参见（例如）中国专利申请No.201010237843.5。

在以下实施例中，如无特殊说明，各试剂均市售可得，例如，可得自成都金山化学试剂有限公司。

在以下实施例中，HPLC法检测尼莫克汀纯度的步骤可参见（例如）中国专利申请No.201010237843.5。

实施例1

醋酸二乙胺的制备：100ml醋酸搅拌下加入180ml二乙胺中，备用。

将尼莫克汀发酵液10L用稀硫酸调pH3.1，过滤，得滤饼451.2g；加入异丙醇1.5L提取，过滤，得滤液；浓缩回收异丙醇。固态混合物中加入二氯甲烷0.6L，加入5%碳酸氢钠溶液0.4L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品50.2g，HPLC纯度为35.67%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺200ml，搅拌溶解，过滤；滤液加入庚烷60ml萃取，取下层，降温至-2～0℃，搅拌下滴加水250ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀13.6g。HPLC纯度85.76%。

实施例2

醋酸三乙胺的制备：100ml醋酸搅拌下加入243ml三乙胺中，备用。

将尼莫克汀发酵液10L用稀盐酸调pH3.2，过滤，得滤饼463.5g；加入异丙醇1.2L提取，过滤，得滤液；浓缩回收异丙醇。固态混合物中加入二氯甲烷0.5L，加入5%碳酸氢钠溶液0.35L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品52.4g，HPLC纯度为33.59%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸三乙胺220ml，搅拌溶解，过滤；滤液加己烷70ml萃取，取下层，降温至-5～4℃，搅拌下滴加水250ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀13.8g。HPLC纯度84.57%。

实施例3

将尼莫克汀发酵液10L用磷酸调pH5.0，过滤，得滤饼475.6g；加入乙醇1.5L提取，过滤，得滤液；浓缩回收乙醇。固态混合物中加入二氯甲烷0.6L，加入5%碳酸氢钠溶液0.4L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品55.4g，HPLC纯度为30.71%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺200ml，搅拌溶解，过滤；滤液加甲基环己烷60ml萃取，取下层，降温至-1～0℃，搅拌下滴加水250ml，结晶，过滤，用20%（v/v）乙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀14.1g。HPLC纯度82.83%。

实施例4

甲酸二乙胺的制备：50ml甲酸搅拌下加入137ml二乙胺中，备用。

将尼莫克汀发酵液10L用醋酸调pH3.5，过滤，得滤饼455.4g；加入丙酮1.5L提取，过滤，得滤液；浓缩回收丙酮。固态混合物中加入二氯甲烷0.6L，加入5%碳酸氢钠溶液0.4L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品66.8g，HPLC纯度为25.03%。

向所得尼莫克汀粗品中加入甲酸二乙胺180ml，搅拌溶解，过滤；滤液加环己烷60ml萃取，取下层，降温至1～2℃，搅拌下滴加水230ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀14.8g。HPLC纯度80.76%。

实施例5

将尼莫克汀发酵液10L用稀硫酸调pH4.6，过滤，得滤饼467.8g；加入异丙醇1.1L提取，过滤，得滤液；浓缩回收异丙醇。固态混合物中加入二氯甲烷0.6L，加入5%碳酸氢钠溶液0.4L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品53.4g，HPLC纯度为37.56%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺200ml，搅拌溶解，过滤；滤液加庚烷60ml萃取，取下层，降温至-3～-2℃，搅拌下滴加水230ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀13.1g。HPLC纯度86.14%。

实施例6

将尼莫克汀发酵液10L用稀硫酸调pH3.8，过滤，得滤饼458.4g；加入异丙醇1.3L提取，过滤，得滤液；浓缩回收异丙醇。固态混合物中加入二氯甲烷0.55L，加入5%碳酸氢钠溶液0.4L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品54.8g，HPLC纯度为35.21%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺200ml，搅拌溶解，过滤；滤液加甲基环己烷60ml萃取，取下层，降温至3～4℃，搅拌下滴加水300ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀13.9g。HPLC纯度83.11%。

实施例7

将尼莫克汀发酵液10L用稀硫酸调pH3.0，过滤，得滤饼447.8g；加入异丙醇1.0L提取，过滤，得滤液；浓缩回收异丙醇。固态混合物中加入二氯甲烷0.5L，加入5%碳酸氢钠溶液0.35L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品45.2g，HPLC纯度为39.05%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺160ml，搅拌溶解，过滤；滤液加庚烷50ml萃取，取下层，降温至-5～-3℃，搅拌下滴加水200ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀10.7g。HPLC纯度86.77%。

实施例8

丙酸乙胺的制备：50ml丙酸搅拌下加入43ml乙胺中，备用。

将尼莫克汀发酵液10L用稀硫酸调pH4.2，过滤，得滤饼457.1g；加入异丙醇0.7L和0.7L乙醇提取，过滤，得滤液；浓缩至干。固态混合物中加入二氯甲烷0.4L和0.4L甲苯，加入5%碳酸氢钠溶液0.35L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品47.2g克，HPLC纯度为29.61%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺100ml和丙酸乙胺70ml，搅拌溶解，过滤；滤液加35ml庚烷和35ml环己烷萃取，取下层，降温至-5～-3℃，搅拌下滴加水210ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀9.5g，HPLC纯度75.39%。

实施例9

丙酸乙胺的制备：100ml丙酸搅拌下加入86ml乙胺中，备用。

将尼莫克汀发酵液10L用稀硫酸调pH4.4，过滤，得滤饼459.4g；加入异丙醇1.7L和0.7L乙醇提取，过滤，得滤液；浓缩至干。固态混合物中加入二氯甲烷0.5L和0.4L甲苯，加入5%碳酸氢钠溶液0.5L，搅拌洗涤1h，静置分层；取上层，浓缩回收溶剂，得尼莫克汀粗品52.3g克，HPLC纯度为28.73%。

向所得尼莫克汀粗品中加入醋酸二乙胺160ml和丙酸乙胺110ml，搅拌溶解，过滤；滤液加55ml庚烷和35ml环己烷萃取，取下层，降温至-5～-3℃，搅拌下滴加水810ml，结晶，过滤，用15%（v/v）异丙醇水溶液洗涤，减压烘干，得尼莫克汀11.7g，HPLC纯度73.19%。

Claims

1.一种尼莫克汀的纯化方法，其包括：

1）提供尼莫克汀粗品；

2.根据权利要求1所述的方法，其中，所述的液态有机盐选自醋酸三乙胺、醋酸二乙胺、甲酸二乙胺、甲酸乙胺、甲酸三乙胺、醋酸二甲胺、醋酸三甲胺、丙酸三乙胺、丙酸二乙胺、丙酸乙胺、丙酸甲胺、丙酸二甲胺以及丙酸三甲胺中的一种或几种，优选为醋酸二乙胺。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，所述的尼莫克汀粗品与所述的液态有机盐的重量体积比为1:(2-10)；优选为1:(3-5)。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，所述的C₅-C₂₀烷烃选自戊烷、己烷、庚烷、辛烷、壬烷、癸烷、十三烷、十四烷、十五烷、环戊烷、环己烷、环庚烷、甲基环戊烷、乙基环戊烷、丙基环戊烷、丁基环戊烷、甲基环己烷、乙基环己烷、丙基环己烷、丁基环己烷、甲基环庚烷、乙基环庚烷、丙基环庚烷以及丁基环庚烷中的一种或几种；优选为辛烷。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，所述的尼莫克汀粗品与所述的C₅-C₂₀烷烃的重量体积比为1:(0.6-5)；优选为1:(1-3)。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，步骤4）所述的降温结晶包括：

7.根据权利要求1-6中任意一项所述的方法，其中，步骤1）所述的尼莫克汀粗品是通过以下方法得到的：

8.根据权利要求7所述的方法，其中，所述的发酵液是通过对蓝灰链霉菌（Streptomyces cyaneogriseus sp.Noncyanogenus）进行发酵而获得的。

9.根据权利要求7所述的方法，其中，将所述的发酵液的pH调至3-5。

10.根据权利要求7所述的方法，其中，所述的第一有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、丙酮、二甲基亚砜以及苯甲醇中的一种或几种；优选为异丙醇。

11.根据权利要求7所述的方法，其中，所述的第二有机溶剂选自苯、甲苯、二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、异丁醇以及戊醇中的一种或几种；优选为二氯甲烷。