CN104277051B

CN104277051B - 4‑氨基‑噻吩并[3,2‑c]吡啶‑7‑羧酸衍生物

Info

Publication number: CN104277051B
Application number: CN201410415096.8A
Authority: CN
Inventors: 戴维·约瑟夫·巴尔特科维兹; 陈奕; 崔信洁; 陆建春; 帕梅拉·劳伦·罗斯曼; 苏松塞
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2005-09-15
Filing date: 2006-09-05
Publication date: 2017-06-09
Anticipated expiration: 2026-09-05
Also published as: BRPI0616239A2; EP1926737B1; AU2006290802A1; WO2007031428A1; TW200745136A; CN101263145B; EP1926737A1; JP2009507883A; AU2006290802B2; CA2621830A1; IL189667A; KR20080039987A; AR055431A1; CN101263145A; KR100968099B1; JP4908511B2; IL189667A0; US20070060607A1; CA2621830C; CN104277051A

Abstract

本发明涉及式(I‑A)的化合物，含有它们的药物和这些化合物作为药物活性剂的应用。这些化合物显示作为Raf激酶抑制剂的活性并因此可以用于治疗由所述激酶介导的疾病，特别是作为抗癌剂。

Description

4-氨基-噻吩并[3,2-C]吡啶-7-羧酸衍生物

本申请是申请日为2006年9月5日、发明名称为“4-氨基-噻吩并[3,2-C]吡啶-7-羧酸衍生物”的中国专利申请No.200680033689.1的分案申请。

正常、未突变形式的ras蛋白是几乎所有组织中由生长因子受体指导的信号转导级联系统中的关键元件。参见J.Avruch等,TIBS(19),279-283(1994)。在生化上，ras是鸟嘌呤核苷酸结合蛋白，并且在GTP-结合活化和GDP-结合静止形式之间的循环受ras的内源GTP酶活性和其它调节蛋白的严格控制。在癌细胞中的ras突变体中，内源GTP酶活性被激活并且因此该蛋白将组成型生长信号向下游效应物如酶raf激酶传递。这导致携带这些突变体的细胞的癌性生长，Magnuson等,癌症生物学(Cancer Biology),5,247-253(1994)。已经显示，通过施用反义RNA抑制raf激酶信号转导途径或通过小分子Raf激酶抑制剂来抑制活性ras的作用导致转化细胞向正常生长表型的逆转，Sridhar等,分子癌症治疗(Mol CancerTher)2005,4(4),2005年4月和Bollag等,研究药物最新评论(Current Opinion inInvestigational Drugs),4,卷12,2003。

本发明提供4-氨基-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸衍生物，其为Raf激酶的小分子抑制剂。除了抑制Raf，这些化合物也可以抑制一些其它的重要激酶，包括ABL,BRAF,BRAF(V600E)突变体,EPHA,EPHB,FGFR1,FGFR2,FGFR3,FLT3,FLT4,KIT,PDGFRA,PDGFRB,和VEFGR-2。这些化合物可以是有效的和选择性的抗癌剂，特别是用于治疗结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、子宫颈癌、肾癌或肾脏癌、白血病或淋巴瘤的药剂。

本发明提供至少一种式(I-A)的化合物

或其药用盐，

其中

R¹选自由下列各项组成的组：氢,低级烷基,卤素,氰基,三氟甲基,低级烷氧基,-C(O)-NH-低级烷基,-C(O)-NH-低级烷氧基,氧代和NO₂；

R³选自由下列各项组成的组：氢,低级烷基,被-OR⁴取代的低级烷基和-NR⁴R⁵；

R⁴和R⁵选自氢；低级烷基；被OH或低级烷氧基取代的低级烷基；或

R⁴和R⁵与它们连接的氮原子一起形成吗啉基；

Q是氢或基团

R²可以是相同或不同的低级链烯基,低级炔基,甲基磺酰基,磺酰胺,氢,低级烷基,卤素,氰基,三氟甲基,低级烷氧基,NO₂,磺酰脲,酰胺,酯,氨基甲酰基,氨基甲酸酯,脲,

-NR⁴R⁵；和被-OR⁴或-NR⁴R⁵取代的低级烷基；

基团-X-Y-选自-OCH₂-,-CH₂O-,-NHCO-,-CONH-,-O-,-OCH₂CH₂-,-CH₂OCH₂,-CH₂CH₂O-,-CF＝CH-,-CH＝CF-,-NH-,-NHCH₂-,-CH₂NH-,-SCH₂-,-NHSO₂,-SO₂NH-,-CH₂S-,-SOCH₂-,-CH₂SO-,-SO₂CH₂-,-CH₂SO₂-,-S-,-CH＝CH-和低级烷基；

W是O或NH；

n是1或2；

环A选自由下列各项组成的组：芳基,杂芳基或取代的杂芳基,环烷基和杂环；和

环B选自由下列各项组成的组：芳基,杂芳基和取代的杂芳基。

作为一个优选实施方案，提供了式(I)的4-氨基-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸衍生物

或其药用盐,

其中

R¹选自由下列各项组成的组：氢,低级烷基,卤素,氰基,三氟甲基,低级烷氧基和NO₂；

R²选自由下列各项组成的组：低级链烯基,低级炔基,甲基磺酰基,磺酰胺,氢,低级烷基,卤素,氰基,三氟甲基,低级烷氧基,NO₂；磺酰脲,酰胺,酯,氨基甲酰基,氨基甲酸酯,脲,被OR⁴取代的低级烷基,和NR⁴R⁵；

R³选自由下列各项组成的组：氢,低级烷基,被OR⁴取代的低级烷基和NR⁴R⁵；

R⁴和R⁵选自氢,低级烷基,或被OH或低级烷氧基取代的低级烷基；

X-Y选自由下列各项组成的组：-OCH₂-,-CH₂O-,-NHCO-,-CONH-,-O-,-OCH₂CH₂-,-CH₂OCH₂,-CH₂CH₂O-,-CF＝CH-,-CH＝CF-,-NH-,-NHCH₂-,-CH₂NH-,-SCH₂-,-CH₂S-,-SOCH₂-,-CH₂SO-,-SO₂CH₂-,-CH₂SO₂-,-S-,-CH＝CH-和低级烷基；

W是–O-或–NH-；

特别优选的是式(I-A)或(I)的化合物，其中-X-Y-选自由下列各项组成的组：-OCH₂-,-CH₂O-,-NHCO-和-CONH-。

还优选式(I-A)或(I)的化合物，其中R¹选自由下列各项组成的组：-CH₃,-Cl和–F。

另外优选的是式(I-A)或(I)的化合物，其中R²选自由下列各项组成的组：-Cl,-F,-CF₃,-CONH₂,低级烷氧基,-NR⁴R⁵,和低级烷基。

还优选的另一个优选实施方案是式(I-A)的化合物，其中Q是氢,并且其余取代基具有以上给出的含义。

还优选的另一个优选实施方案是式(I-A)的化合物，其中Q是氢,并且其中

R¹是–O-CH₃或–C(O)-NH-CH₃；

R³是乙基,其是未取代的或被-OH取代一次；

W是–O-或–NH-；且

环B是苯基或吡啶基。

还优选的另一个优选实施方案是式(I-A)的化合物,其中

Q是基团且

其余取代基和n具有以上给出的含义。

还优选的另一个优选实施方案是式(I-A)的化合物,其中Q是基团

且其中

环A选自嘧啶基,吡啶基,哌啶基,环丙基,环戊基,环己基,四氢-吡喃基,苯基,吡唑基或噻吩基；且

环B是嘧啶基,2-氧代-嘧啶基或苯基；且

其余取代基具有以上给出的含义。

还优选的另一个优选实施方案是式(I-A)或(I)的化合物,其中环A和B两者都是苯基。

还优选式(I-A)或(I)的化合物，其中环B是苯基或吡啶基。

更优选式(I-A)或(I)的化合物，其中环B是2,5-二-取代的苯基。

还更优选式(I-A)或(I)的化合物，其中环B是3-羟基-2,5-二取代的吡啶基。

特别优选以下化合物：

4-氨基-3-[3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸；

4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸；

4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺三氟乙酸盐；

3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-(2-羟基-乙基氨基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-甲氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-甲氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺盐酸盐；

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氟-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-氟-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸三氟-乙酸盐；

4-氨基-3-[3-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸丙基酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙基酰胺；

4-氨基-3-{3-[(4-氯-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(1-甲基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(5-甲基-吡啶-2-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-{3-[(4-氯-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[5-(3-氨基甲酰基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(2-甲基-5-苯基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺三氟-乙酸盐；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-甲基-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-甲氧基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸甲基酰胺；

3-[4-氨基-7-(吗啉-4-羰基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-3-基甲氧基]-N-(4-氯-苯基)-苯甲酰胺；

4-氨基-3-(3-环己基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(四氢-吡喃-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(1-甲基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺三氟-乙酸盐；

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺盐酸盐；

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐；

4-氨基-3-(2-氧代-1-苯乙基-1,2-二氢-嘧啶-4-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(2,6-二氧代-3-苯乙基-3,6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(2,6-二氧代-3-苯乙基-3,6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[2-甲氧基-5-(3-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[5-(3,5-二甲氧基-苯基氨基甲酰基)-2-甲氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[5-(4-氯-3-甲基-苯基氨基甲酰基)-2-甲氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(5-苄基氨基甲酰基-2-硝基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(2-甲基-3-苯基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3,5-二甲氧基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[2-硝基-5-(3-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[2-甲基-3-(3-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-甲磺酰基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[2-甲基-3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(5-氯-噻吩-2-基甲氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(3-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(5-氯-噻吩-2-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(4-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(2,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-甲基-5-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-甲基-5-(2-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(2-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-[3-(2-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-甲基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-环丙基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-环戊基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(3-环己基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-[3-(四氢-吡喃-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-甲基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-环丙基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(3-环戊基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺；

4-氨基-3-(5-甲基氨基甲酰基-吡啶-3-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；

4-氨基-3-(5-甲基氨基甲酰基-吡啶-3-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(2-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-甲基-5-(2-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(3-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-甲基-5-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(3,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(2,3-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸,

4-氨基-3-[3-(嘧啶-5-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-[3-(嘧啶-5-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-[5-(3-氯-4-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯,

4-氨基-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐,

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯；和

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸酰胺。

如本文所用，下列术语应当具有下列定义。

"芳基"是指单环或二环芳族碳环烃基，优选6-10元芳环系。优选芳基包括但不限于苯基、萘基和甲苯基。

"杂芳基"是指含有最多两个环的芳族杂环系。优选的杂芳基包括但不限于噻吩基、呋喃基、吲哚基、吡咯基、吡啶基、吡嗪基、噁唑基、噻唑基、喹啉基、嘧啶基、咪唑基、吡唑基、苯并呋喃基和四唑基。

如本文所用，特别是在R²中，术语

(a)“酰胺”是指具有下式的取代基

(b)“酯”是指具有下式的取代基

(c)“氨基甲酰基”指具有下式的取代基

(d)“氨基甲酸酯”指具有下式的取代基

(e)“脲”指具有下式的取代基

并且

R⁴和R⁵选自氢；低级烷基；被OH或低级烷氧基取代的低级烷基。

“有效量”是指有效预防、缓解或改善疾病症状或延长被治疗的受试者的生存的量。

“卤素”是指氟、氯、溴或碘，优选氟或氯。

“杂环子”是指选自N,O和S的原子。

单独或与另一个术语联合的“低级烷基”，例如低级烷基-杂环，表示直链或支链的具有1至6个、优选1至4个碳原子的饱和脂族烃。典型的低级烷基包括甲基,乙基,丙基,异丙基,丙基，丁基，叔丁基，2-丁基，戊基，己基等。

术语“烷氧基”是指基团–O-烷基，优选基团–O-低级烷基,其中“低级烷基”具有以上给出的含义。

术语“链烯基”,单独或与其它基团联合，代表含有烯键和最多可达20个、优选最多可达16个碳原子、更优选最多可达10个碳原子的直链或支链烃残基。以下所述的低级-链烯基也是优选的链烯基。术语“低级-链烯基”是指含有烯(双)键和最多可达7个、优选最多可达4个碳原子的直链或支链烃残基，如例如2-丙烯基。链烯基或低级-链烯基可以具有先前关于术语"烷基"描述的取代模式。

术语“炔基”，单独或与其它基团联合，代表含有三键和最多可达20个、优选最多可达16个碳原子的直链或支链烃残基。术语“低级-炔基”是指含有三键和最多可达7个、优选最多可达4个碳原子的直链或支链烃残基，如例如2-丙炔基。炔基或低级-炔基可以具有先前关于术语"烷基"描述的取代模式。

术语“环烷基”表示具有3至10个碳原子的饱和单-或双环烃。优选具有3至6个碳原子的单环烃，如环丙基、环戊基和环己基等。

术语“杂环”是指如上定义的“环烷基”，其中一个、两个或三个碳原子，优选一个或两个碳原子被选自N、S或O的杂原子替换。特别优选5-和6-元杂环。这样的杂环的实例有哌啶，四氢-吡喃，哌嗪，吗啉，吡咯烷，吡唑烷，四氢噻吩，咪唑烷等。

术语“药用盐”是指常规的酸加成盐或碱加成盐，它们保持式I化合物的生物学功效和性能并且由适当的非毒性有机或无机酸或有机或无机碱形成。酸加成盐的实例包括衍生于无机酸的那些和衍生于有机酸的那些，所述无机酸如盐酸、氢溴酸、氢碘酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸和硝酸，所述有机酸如对甲苯磺酸，水杨酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，柠檬酸，苹果酸，乳酸，富马酸等。碱加成盐的实例包括衍生于铵、钾、钠、锂、镁、钙和季铵氢氧化物如例如氢氧化四甲铵的那些。将药物化合物(即，药物)化学修饰成盐是药物化学家众所周知的技术，该技术用于获得化合物的改善的物理和化学稳定性、吸湿性、流动性和溶解度。参见，例如H.Ansel等,药物剂型和药物递送系统(Pharmaceutical Dosage Forms and DrugDelivery Systems)(第6版，1995)，第196页和第1456-1457页。

“药用的”，如药用载体、赋形剂等，是指药理学上可接受的和对具体化合物所施用的受试者基本上非毒性。

本文所用的、例如在取代的烷基或取代的杂芳基中使用的“取代的”是指取代可以在一个或多个位置上发生，并且除非另外指出，在每个取代位置上的取代基独立地选自指定的选项。

“治疗有效量”是指至少一种式I化合物、或其药用盐或酯的量，该量显著抑制人肿瘤细胞(包括人肿瘤细胞系)的增殖和/或防止其分化。

含有本发明化合物或其药用盐和治疗学上惰性载体的药物是本发明的一个目的，如它们的制备方法，该方法包括将一种或多种本发明的化合物和/或药用盐以及(如果需要)一种或多种其它在治疗上有价值的物质以及一种或多种治疗惰性赋形剂/载体一起制成盖仑制剂给药形式。

按照本发明，本发明的化合物以及它们的药用盐有效用于控制或预防疾病，特别是增殖病症，如癌症，更具体地结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、子宫颈癌、肾癌或肾脏癌、白血病或淋巴瘤。基于它们的Raf激酶抑制和它们的增殖活性，所述化合物有效用于治疗人或动物中诸如癌症的疾病和用于生产相应的药物。该剂量取决于多种因素，如给药方式，物种，年龄和/或个体健康状态。

本发明的化合物可以按照下列反应路线和一般方法进行制备，其中除非另外明确指出，所有取代基和变量具有上文给出的含义。除非在本文中明确描述，所有反应、反应条件、缩写如用于保护基的“PG”，和物质是本领域普通技术人员已知的。

反应路线1:

中间体1

4-甲基-2-噻吩甲醛

C₆H₆OS M.W.126.18

将3-甲基噻吩(58.90g,0.60mol)(Fluka)在无水乙醚(600mL)中的溶液搅拌并在冰水浴中冷却。将该溶液在15分钟内用在戊烷中的正丁基锂(2M,450mL,0.90mol)(Aldrich)逐滴处理。在室温下搅拌2小时后，将混合物在冰水浴中冷却并在5分钟内用N,N-二甲基甲酰胺(48.24g,0.66mol)(Fisher)逐滴处理，接着在室温下搅拌过夜。将该混合物用乙醚(600mL)稀释并用水和盐水洗涤。在干燥(硫酸钠)后，在非真空下在旋转蒸发仪上蒸发乙醚，获得114g红色液体。该液体通过在硅胶垫上60(1Kg,70-230目)色谱分离纯化，用40％二氯甲烷-己烷洗脱。非真空下蒸发获得4-甲基-2-噻吩甲醛，为浅红色油。(收率56.62g,74.7％)。该产物含有少量己烷。

中间体2

3-(4-甲基-噻吩-2-基)-丙烯酸

M.W.168.22 C₈H₈O₂S

将4-甲基-2-噻吩甲醛(56.62g,0.448mol)(来自上文中间体1),丙二酸(186.77g,1.79mol)(Aldrich)和哌啶(1.90g,0.022mol)(Fluka)在吡啶(550mL)中的溶液在回流下在搅拌下加热过夜。将反应混合物蒸发至干燥。将获得的残余物溶解在二氯甲烷中并连续用3N盐酸、水和盐水洗涤。将有机层干燥并蒸发，获得3-(4-甲基-噻吩-2-基)-丙烯酸，为棕褐色固体。(收率49.52g,65.7％)。

中间体3

3-(4-甲基-噻吩-2-基)-丙烯酰叠氮化物

M.W.193.23 C₈H₇N₃OS

向3-(4-甲基-噻吩-2-基)-丙烯酸(49.52g,0.294mol)(来自以上中间体2)和三乙胺(44.68g,0.441mol)(Aldrich)在丙酮(2000mL)中的溶液在搅拌和在冰水浴中冷却下加入氯甲酸乙酯(35.14g,0.323mol)(Aldrich)。在室温搅拌20分钟后，加入叠氮化钠(28.70g,0.441mol)(Aldrich)并在室温下持续搅拌另外20分钟。然后减压蒸发掉丙酮并将残余物用水稀释。将这用二氯甲烷萃取。将有机萃取物用盐水洗涤，干燥并浓缩，获得3-(4-甲基-噻吩-2-基)-丙烯酰叠氮化物，为棕色固体。(收率48.51g,85.4％)。

中间体4

3-甲基-5H-噻吩并[3,2-c]吡啶-4-酮

M.W.165.22 C₈H₇NOS

将3-(4-甲基-噻吩-2-基)-丙烯酰叠氮化物(1.54g；7.95mmol)(来自中间体3，见上文)溶解在间-二甲苯(16mL)中。将该溶液在油浴中在105-115℃加热30分钟，直至氮气停止逸出。此时，将少许碘晶体加入反应并将油浴温度升高至145-150℃。将反应在回流下加热6小时。在冷却后，固体从溶液中沉淀出来。过滤和干燥获得3-甲基-5H-噻吩并[3.2-c]吡啶-4-酮。(收率1.05g；80.1％)。

HRMS(EI+)m/z理论值C₈H₇NOS[(M⁺)]:165.0248.实验值:165.0250。

中间体5

7-碘-3-甲基-5H-噻吩并[3,2-c]吡啶-4-酮

M.W.291.11 C₈H₆INOS

将3-甲基-5H-噻吩并[3,2-c]吡啶-4-酮(24.27g,0.146mol)(来自中间体4，见上文)和N-碘琥珀酰亚胺(34.70g,0.154mol)(Avocado)在二甲基甲酰胺(1000mL)中的溶液在室温下搅拌过夜。将反应混合物减压浓缩并将残余物与乙醚(1000mL)搅拌0.5小时。过滤悬浮液，用乙醚洗涤，吸干而获得7-碘-3-甲基-5H-噻吩并[3,2-c]吡啶-4-酮，为棕色固体。(收率41.88g,97.9％)。

中间体6

3-甲基-4-氧代-4,5-二氢-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.237.28 C₁₁H₁₁NO₃S

将7-碘-3-甲基-5H-噻吩并[3,2-c]吡啶-4-酮(1.14g,3.92mmol)(来自中间体5，见上文),三乙胺(2.5mL,17.94mmol)(Aldrich)和双(三苯膦)钯(II)氯化物(0.14g,0.2mmol)(Aldrich)在乙醇(50mL)中的搅拌的悬浮液用氩气脱气，然后用一氧化碳饱和。将混合物在一氧化碳覆盖下在75℃油浴中加热下搅拌过夜。在冷却后，将反应混合物减压浓缩，去除一部分乙醇(约20％)。通过过滤收集形成的固体，用乙醇-二乙醚(1:1)和然后二乙醚洗涤，最后真空干燥，获得3-甲基-4-氧代-4,5-二氢-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.78g,84.0％)。

HRMS(EI+)m/z理论值C₁₁H₁₁NO₃S[(M⁺)]:237.0460.实验值:237.0451.

中间体7

4-氯-3-甲基-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.255.72 C₁₁H₁₀ClNO₂S

将3-甲基-4-氧代-4,5-二氢-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(2.43g,10.24mmol)(来自中间体6，见上文)和N,N-二异丙基乙胺(2.4mL,13.87mmol)(Fluka)的混合物在冷却下在冰水浴中搅拌。将该混合物缓慢用磷酰氯(7.8mL,83.68mmol)(Fluka)处理，然后使得升温至室温。然后加入N,N-二甲基甲酰胺(1.0mL,12.86mmol)，将混合物在70℃加热下搅拌30分钟。加入第二部分的N,N-二甲基甲酰胺(0.5mL,6.43mmol)，将混合物在70℃加热另外30分钟。在冷却后，将冰加入溶液中，将混合物用乙酸乙酯萃取。有机萃取物用水、饱和碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤。将水相用乙酸乙酯反萃取。合并乙酸乙酯溶液，干燥(硫酸钠)并减压浓缩。将该残余物通过硅胶快速色谱法(Biotage 65M,5:95乙酸乙酯-己烷)纯化，获得4-氯-3-甲基-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率1.57g,60.0％)。

HRMS(EI+)m/z理论值C₁₁H₁₀ClNO₂S[(M⁺)]:255.0121.实验值:255.0119.

中间体8

3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.334.62 C₁₁H₉BrClNO₂S

向4-氯-3-甲基-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(14.65g,57.29mmol)(来自中间体7，见上文)在四氯化碳(250mL)中的溶液加入N-溴琥珀酰亚胺(12.24g,68.75mmol)和2,2’-偶氮二异丁腈(0.94g,5.73mmol)。将反应混合物在80℃下加热24小时。然后将混合物冷却并减压浓缩。将残余物从乙酸乙酯-己烷中再结晶，获得3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色晶体。(收率11.73g)。将母液浓缩并通过快速色谱法(二乙醚-己烷,1:4,V/V)纯化，获得第二批的3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率4.39g,84％，合并的)。

反应路线2

X至XI的转化也可以经由本领域公知的其它偶联方法实现。反应路线3

反应路线4

反应路线5

反应路线6

PG是适当的保护基，如例如boc,mom醚,sam醚等。

反应路线7

反应路线8

反应路线9

用在反应路线8和9中的R”具有以下的结构，其中n为1或2。

反应路线10

反应路线11

一般方法1

合成XXX

将化合物XXIX(18mmol)(反应路线10)溶解在N,N’-二甲基甲酰胺(10体积)中。向其加入碳酸钾(1.2当量),碘化钾(1.0当量)和3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.0当量)(来自中间体8，见上文)。将该反应在70℃下搅拌16小时。加入水(100mL)并将粗制反应混合物用乙酸乙酯(4x50mL)萃取。将合并的有机层干燥(MgSO₄)，过滤，将溶剂真空去除。将粗制固体悬浮在乙酸乙酯(50mL)中。将获得的悬浮液过滤，并将固体用另一等分部分的乙酸乙酯(20mL)洗涤，获得粗产物XXX。

一般方法2

合成XXXI

将化合物XXX(8mmol)(来自一般方法1，见上文)溶解在氨饱和的2-丙醇(10体积)中。将该溶液在160℃下在微波反应器中加热20分钟。将反应溶剂真空去除。加入热甲醇，过滤获得的悬浮液。将固体(主要是未反应的原材料)在微波条件(如上)下再处理；加入二噁烷(～5mL)以促进在一些情形中需要的溶解性。滤液含有所需的产物，将其蒸发干燥并分析。重复该过程，直至获得>90％的原材料向所需产物XXXI的转化。

一般方法3

合成XXXII

将化合物XXX1(6mmol)(来自一般方法2，见上文)溶解在二氯甲烷中的20％三氟乙酸中(10体积)。将反应混合物室温搅拌1.5小时。蒸发反应混合物至干燥，获得产物XXXII。

一般方法4

合成XXXIII

将化合物XXXII(160μmol)(来自一般方法3，见上文)溶解在二氯乙烷(3mL)和DMF(1滴)中。加入亚硫酰(二)氯(3当量)，将反应混合物室温搅拌，直至酰氯形成完成(通过LCMS监视；～16小时)。将三乙胺(6当量)加入粗制反应混合物，接着加入苯胺(3当量)。将反应混合物在40℃下搅拌16小时，期间形成沉淀。将反应混合物过滤，将滤液用1N HCl(2mL)洗涤。将有机层通过MgSO₄滤器，然后与来自反应混合物的沉淀合并。减压去除溶剂，将获得的固体用THF洗涤。将收集的固体悬浮在2-丙醇/氯仿(1:1)的混合物中，并上样到制备TLC板之上(在20％甲醇-二氯甲烷中运行)。通过用甲醇洗涤从硅胶上去除所需的物质并浓缩，获得产物XXXIII。

一般方法5

合成XVII

向溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5体积)中的取代的间苯二酚(6.4mmol)(反应路线4)中加入碳酸铯(1.2当量)和苄基卤(1当量)(反应路线4)。室温搅拌反应过夜。将粗制反应混合物溶解在二氯甲烷(20mL)中并用1N HCl(2x20mL)洗涤。合并的水层用二氯甲烷(2x20mL)萃取，将有机层合并和用盐水(20mL)洗涤，然后干燥(MgSO₄)。将所需产物通过色谱法纯化，用庚烷然后20％EtOAc/庚烷洗脱。收率典型地是30-50％。

一般方法6

合成XXV

向溶解在N,N-二甲基甲酰胺(5体积)中的烷基化的间苯二酚XVII(来自一般方法5，见上文)或其它取代的酚XXIV(反应路线8)加入碳酸钾(1.2当量),碘化钾(1当量)和3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.0当量)(来自中间体8，见上文)。将反应在75℃下搅拌过夜。将粗制反应混合物溶解在二氯甲烷(20mL)中并用1N HCl(20mL)洗涤。收集有机层，水层用二氯甲烷(20mL)萃取。干燥(MgSO₄)合并的有机层。所需产物通过色谱法纯化，用庚烷然后10％EtOAc/庚烷洗脱，然后从乙腈再结晶。收率典型地是25-30％。

一般方法7

合成XXVI

将化合物XXV(来自一般方法6，见上文)溶解在氨饱和的2-丙醇(10体积)中。将该溶液在140℃在微波反应器中加热3x30分钟。过滤任何形成的沉淀，用2-丙醇洗涤。如果没有沉淀形成，减压去除溶剂，将获得的固体用2-丙醇洗涤。不需要另外的纯化。收率典型地为60-75％。

一般方法8

合成XXVII

在氮气下向烘箱干燥的容器中加入溶解在无水二噁烷(25体积)中的化合物XXVI(来自一般方法7，见上文)。在氮气下在室温下滴加三甲基铝(2.0M，在庚烷中；4当量)，然后搅拌反应混合物10分钟。滴加乙醇胺(4当量)，将反应混合物室温搅拌另外10分钟，之后加热至95℃并搅拌过夜。可能需要使用2当量的试剂再处理。将Rochelle氏盐(1体积饱和溶液)加入冷却的反应混合物，并搅拌1小时。将混合物用二氯甲烷(50mL)稀释，加入水(50mL)。去除有机层，将水层用1:1CHCl₃:2-丙醇(3x20mL)萃取。将合并的有机洗涤液干燥(Na₂SO₄)，过滤并在减压下去除溶剂。将制备HPLC用于纯化最终化合物。

中间体9

N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-羟基-苯甲酰胺

M.W.315.682 C₁₄H₉ClF₃NO₂

将3-羟基苯甲酸(16.2g,117.3mmol)(Aldrich)在乙酐(20mL)(Aldrich)中的悬浮液回流加热5小时。在加热后形成澄清溶液。在冷却至室温后，将混合物倒在冰-水(400mL)中并搅拌。形成白色晶体物质。这通过过滤收集，用水洗涤，在真空炉中干燥，分两批获得3-乙酰氧基苯甲酸，为白色晶体。(收率18.97g,89.8％)。

将3-乙酰氧基苯甲酸(1.80g,10mmol)在N,N-二甲基-甲酰胺(3滴)和亚硫酰(二)氯(3mL,40mmol)(Aldrich)的混合物中的悬浮液在90℃浴中加热2小时。在冷却后，将混合物用甲苯(20mL)稀释，减压浓缩，去除过量的亚硫酰(二)氯。将获得的油溶解在二氯甲烷(10mL)中并在冰水浴中冷却和磁力搅拌下滴加至4-氯-3-(三氟甲基)苯胺(1.96g,10mmol)(Aldrich)、4-二甲基氨基-吡啶(0.1g,0.08mmol)(Fluka)和N,N-二异丙基乙胺(1.6g,12.4mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(10mL)中的溶液。当加入完成后，去除冷却浴，将混合物室温搅拌2小时。然后将反应混合物在水(50mL)和二氯甲烷(2X50mL)之间分配。合并有机层，浓缩至干燥。将残余物溶解在THF(10mL)、甲醇(10mL)和1N氢氧化钠水溶液(10mL)中并室温搅拌16小时。将黄色溶液用水(100mL)和乙酸(5mL)稀释，用乙酸乙酯(2X100mL)萃取。将乙酸乙酯层用饱和盐水(100mL)洗涤，合并，干燥，过滤并浓缩。将残余物从乙酸乙酯-己烷中再结晶，获得N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-羟基-苯甲酰胺，为无色片状物。(收率2.54g,80.4％)。

中间体10

4-氯-3-[3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.569.390 C₂₅H₁₇Cl₂F₃N₂O₄S

在磁力搅拌下将N-(4-氯-3-三氟甲基-苯基)-3-羟基-苯甲酰胺(0.33g,1.05mmol)(来自中间体9，见上文)和碳酸钾(0.16g,1.15mmol)在N,N-二甲基甲酰胺中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.33g,1mmol)(来自中间体8，见上文)，将混合物在相同温度下加热另外5小时。在冷却后，将混合物在乙酸乙酯(2X50mL)和水(2X50mL)之间分配。将有机层用盐水(50mL)洗涤，合并,干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。将残余物从乙酸乙酯-二氯甲烷-己烷中再结晶，获得4-氯-3-[3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色晶体物质。(收率0.16g,28.5％)。

附图说明

图1是式(I-A)的结构式。

实施例

提供下列实施例以帮助理解本发明，本发明的真实范围在后附权利要求中阐明。

实施例1

4-氨基-3-[3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.549.955 C₂₅H₁₉ClF₃N₃O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[4-(4-氯-3-三氟甲基-苯基-氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.11g,0.19mmol)(来自中间体10，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液达20分钟。将混合物在密封压力容器中在165℃加热1.5天。在冷却后，浓缩反应混合物。将残余物用热甲醇洗涤，过滤固体。浓缩溶液。通过快速色谱法纯化残余物，用在己烷中的(40-100％)乙酸乙酯洗脱，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-3-三氟甲基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.05g,50％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₁₉ClF₃N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:550.0810.实验值:550.0811.

中间体11

3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.453.944 C₂₄H₂₀ClNO₄S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(苄氧基)苯酚(0.21g,1.07mmol)(TCI-US)和催化量的18-冠-6(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬浮液在65℃下加热2小时。然后加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。将合并的有机相用水和盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱，获得3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.14g,30％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀ClNO₄S+H[(M+H)⁺]:454.0875.实验值:454.0876.

实施例2

4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.434.514 C₂₄H₂₂N₂O₄S

将氨气鼓泡进入3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.14g,0.31mmol)(来自中间体11，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液达20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃下加热1天。浓缩反应混合物。将混合物在密封压力容器中在160℃加热达1天。将反应混合物浓缩。残余物用二氯甲烷稀释并用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法纯化，用二氯甲烷中的5％乙酸乙酯洗脱，获得4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率80mg,62％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:435.1373.实验值:435.1373.

实施例3

4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.449.529 C₂₄H₂₃N₃O₄S

将4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.07g,0.16mmol)(来自实施例2，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(2.0mL,33.24mmol)(Aldrich)处理，并在微波反应器中在130℃加热2小时。过滤形成的沉淀，用热乙酸乙酯洗涤并干燥，获得4-氨基-3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色固体。(收率56mg,80％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₃N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:450.1482.实验值:450.1483.

中间体12

3-(4-氯-苄氧基)-苯酚

M.W.234.68 C₁₃H₁₁ClO₂

将碳酸钾(2.02g,14.6mmol)和间苯二酚(16.08g,0.146mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入4-氯苄基溴(3.0g,14.6mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷(1X)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱，获得3-(4-氯-苄氧基)-苯酚。(收率2.62g,76％)。

中间体13

4-氯-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.488.39 C₂₄H₁₉Cl₂NO₄S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(4-氯-苄氧基)-苯酚(0.25g,1.07mmol)(来自中间体12，见上文)和催化量的18-冠-6(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬浮液在65℃下加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续10小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.14g,28％)。

实施例4

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.468.959 C₂₄H₂₁ClN₂O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.14g,0.29mmol)(来自中间体13，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液达20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤，过滤和干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率0.13g,100％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁ClN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:469.0984.实验值:469.0983.

实施例5

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.483.974 C₂₄H₂₂ClN₃O₄S

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例4，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理，并在130℃在微波反应器中加热2小时。将形成的沉淀过滤并用热乙酸乙酯洗涤并干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色固体。(收率40mg,77％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:484.1093.实验值:484.1096.

中间体14

3-(3-氯-苄氧基)-苯酚

M.W.234.68 C₁₃H₁₁ClO₂

将碳酸钾(2.02g,14.6mmol)和间苯二酚(16.08g,0.146mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入3-氯苄基溴(3.0g,14.6mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。回流加热持续2.5天。在冷却后，将反应混合物减压浓缩。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷(1X)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(3-氯-苄氧基)-苯酚。(收率2.80g,82％)。

中间体15

4-氯-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.488.39 C₂₄H₁₉Cl₂NO₄S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(3-氯-苄氧基)-苯酚(0.25g,1.07mmol)(来自中间体14，见上文)和催化量的18-冠-6在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续10小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.13g,26％)。

实施例6

4-氨基-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.468.959 C₂₄H₂₁ClN₂O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.13g,0.27mmol)(来自中间体15，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液达20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物从甲醇中再结晶，获得4-氨基-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.11g,92％)。

实施例7

4-氨基-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.483.974 C₂₄H₂₂ClN₃O₄S

将4-氨基-3-[3-(3-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例6，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理，并在130℃在微波反应器中加热2小时。将形成的沉淀过滤和用热乙酸乙酯洗涤并干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色固体。(收率25mg,48％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:484.1093.实验值:484.1095.

中间体16

3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯酚

M.W.268.24 C₁₄H₁₁F₃O₂

将碳酸钾(1.73g,12.6mmol)和间苯二酚(13.87g,0.126mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入1-溴甲基-3-三氟甲基-苯(2.3g,12.6mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷(1X)萃取。合并的有机相用盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱，获得3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯酚。(收率2.29g,68％)。

中间体17

4-氯-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.521.95 C₂₄H₁₉ClF₃NO₄S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯酚(0.29g,1.07mmol)(来自中间体16，见上文)和催化量的18-冠-6(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬浮液在65℃下加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续10小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.13g,25％)。

实施例8

4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.502.511 C₂₅H₂₁F₃N₂O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.13g,0.25mmol)(来自中间体17，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液达20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤而获得4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.08g,64％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁F₃N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:503.1247.实验值:503.1246.

实施例9

4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.517.526 C₂₅H₂₂F₃N₃O₄S

将4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例8，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。将形成的沉淀过滤和用热乙酸乙酯洗涤，并且干燥，获得4-氨基-3-[3-(3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率28mg,55％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂F₃N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:518.1356.实验值:518.1356.

中间体18

3-苄硫基-苯酚

M.W.216.30 C₁₃H₁₂OS

将苄基溴(7.61g,43.6mmol)(Fluka)加入3-巯基苯酚(5.0g,39.6mmol)(Aldrich)和氢氧化钠(1.78g,43.6mmol)在甲醇(100mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌过夜，然后用水(200mL)和乙酸(10mL)稀释并浓缩以去除有机溶剂。收集获得的沉淀，用水洗涤，获得3-苄硫基-苯酚。(收率7.40g,86.3％)。

中间体19

3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.470.01 C₂₄H₂₀ClNO₃S₂

将碳酸钾(0.48g,3.44mmol),3-苄硫基-苯酚(0.69g,3.17mmol)(来自中间体18，见上文)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:1,30mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.0g,2.99mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.78g,56％)。

实施例10

4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.450.581 C₂₄H₂₂N₂O₃S₂

将氨气鼓泡进入3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.78g,0.25mmol)(来自中间体19，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。然后将反应混合物浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用二氯甲烷中的5％乙酸乙酯洗脱，获得4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.18g,50％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₂O₃S₂+H[(M+H)⁺]:451.1145.实验值:451.1143.

实施例11

4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.465.596 C₂₄H₂₃N₃O₃S₂

将4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例10，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理，在微波反应器中在130℃加热2小时。将形成的沉淀过滤和用热乙酸乙酯洗涤，并干燥，获得4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率23mg,37％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₃N₃O₃S₂+H[(M+H)⁺]:466.1254.实验值:466.1255.

实施例12

4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.482.579 C₂₄H₂₂N₂O₅S₂

向4-氨基-3-(3-苄硫基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.10g,0.22mmol)(来自实施例10，见上文)在二氯甲烷(10mL)中的溶液在-10℃下加入3-氯-过氧苯甲酸(0.16g,0.55mmol)(Aldrich)。将反应混合物在0℃搅拌3小时。浓缩混合物。将残余物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.05g,45％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₂O₅S₂+H[(M+H)⁺]:483.1043.实验值:483.1047.

实施例13

4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.497.594 C₂₄H₂₃N₃O₅S₂

将4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.04g,0.08mmol)(来自实施例12，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并且在130℃在微波反应器中加热2小时。将粗制物质通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱，获得4-氨基-3-(3-苯基甲磺酰基-苯氧基-甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺。(收率20mg,49％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₃N₃O₅S₂+H[(M+H)⁺]:498.1152.实验值:498.1151.

中间体20

3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯酚

M.W.230.27 C₁₄H₁₄O₃

将碳酸钾(2.02g,14.6mmol)和间苯二酚(16.08g,0.146mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入3-甲氧基苄基溴(2.94g,14.6mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷萃取。合并的有机相用盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤,并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱，获得3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯酚。(收率2.43g,72％)。

中间体21

4-氯-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.483.97 C₂₅H₂₂ClNO₅S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯酚(0.25g,1.07mmol)(来自中间体20，见上文)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,30mL)中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续10小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤,并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯梯度洗脱而获得4-氯-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.21g,43％)。

实施例14

4-氨基-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.464.54 C₂₅H₂₄N₂O₅S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.21g,0.43mmol)(来自中间体21，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤而获得4-氨基-3-[3-(3-甲氧基-苄基-氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.15g,75％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₂O₅S+H[(M+H)⁺]:465.1479.实验值:465.1479.

实施例15

4-氨基-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.479.555 C₂₅H₂₅ClN₃O₅S

将4-氨基-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例14，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。过滤沉淀，用热乙酸乙酯洗涤并干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率34mg,65％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₅ClN₃O₅S+H[(M+H)⁺]:480.1588.实验值:480.1587.

中间体22

3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯酚

M.W.230.27 C₁₄H₁₄O₃

将碳酸钾(3.53,25.5mmol)和间苯二酚(28.12g,0.26mol)(Aldriah)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入4-甲氧基苄基氯(4.0g,25.5mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷萃取。合并的有机相用盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤,并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯酚。(收率0.37g,6％)。

中间体23

4-氯-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.483.97 C₂₅H₂₂ClNO₅S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯酚(0.25g,1.07mmol)(来自中间体22，见上文)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,30mL)中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续10小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤,并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯梯度洗脱而获得4-氯-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.16g,33％)。

实施例16

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.464.54 C₂₅H₂₄N₂O₅S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.16g,0.43mmol)(来自中间体23，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤而获得4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.10g,67％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₂O₅S+H[(M+H)⁺]:465.1479.实验值:465.1477.

实施例17

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.479.555 C₂₅H₂₅N₃O₅S

将4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例16，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率34mg,65％)。

中间体24

3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯酚

M.W.298.26 C₁₅H₁₃F₃O₃

将碳酸钾(1.44g,10.4mmol)和间苯二酚(11.01g,0.10mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入4-甲氧基-3-(三氟甲基)-苄基溴(2.8g,10.4mmol)(Matrix)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷萃取。合并的有机相用盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(4-甲氧基-3-三氟-甲基-苄氧基)-苯酚。(收率0.99g,32％)。

中间体25

4-氯-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.551.97 C₂₆H₂₁ClF₃NO₅S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯酚(0.32g,1.07mmol)(来自中间体24，见上文)和催化量的18-冠-6(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续10小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.12g,21％)。

实施例18

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.532.537 C₂₆H₂₃F₃N₂O₅S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.12g,0.22mmol)(来自中间体25，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的5％乙酸乙酯洗脱而获得4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄基-氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.065g,54％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₃F₃N₂O₅S+H[(M+H)⁺]:533.1353.实验值:533.1352.

实施例19

4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.547.552 C₂₆H₂₄F₃N₃O₅S

将4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例18，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。将粗制物质通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-[3-(4-甲氧基-3-三氟-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率20mg,39％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₄F₃N₃O₅S+H[(M+H)⁺]:548.1462.实验值:548.1463.

中间体26

4-氯-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.439.92 C₂₃H₁₈ClNO₃S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-苯氧基苯酚(0.20g,1.07mmol)(Aldrich)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,30mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.22g,49％)。

实施例20

4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.420.487 C₂₃H₂₀N₂O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.22g,0.25mmol)(来自中间体26，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物从乙酸乙酯-己烷中再结晶而获得4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色晶体。(收率0.10g,48％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₀N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:421.1217.实验值:421.1216.

实施例21

4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.435.502 C₂₃H₂₁N₃O₄S

将4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.12mmol)(来自实施例20，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。过滤沉淀，用热甲醇洗涤并干燥，获得4-氨基-3-(3-苯氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率40mg,77％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₁N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:436.1326.实验值:436.1326.

中间体27

4-氯-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.438.94 C₂₃H₁₉ClN₂O₃S

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-羟基二苯胺(0.20g,1.07mmol)(Alfa Aesar)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,30mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.16g,36％)。

实施例22

4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.419.503 C₂₃H₂₁N₃O₃S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.16g,0.36mmol)(来自中间体27，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用甲醇洗涤并干燥而获得4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.10g,67％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₁N₃O₃S+H[(M+H)⁺]:420.1377.实验值:420.1375.

实施例23

4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.434.518 C₂₃H₂₂N₄O₃S

将4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.12mmol)(来自实施例22，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。将粗制物质通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-(3-苯基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率30mg,58％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₂N₄O₃S+H[(M+H)⁺]:435.1486.实验值:435.1485.

中间体28

苯甲酸3-苯甲酰基氨基-苯酯

M.W.317.347 C₂₀H₁₅NO₃

将苯甲酰氯(3.0g,21.3mmol)(J.T.Baker)在四氢呋喃(15mL)中的溶液在室温下在磁力搅拌下滴加到间-氨基苯酚(1.09g,10mmol)(Eastman Organic)、4-二甲基氨基-吡啶(20mg)(Fluka)和三乙胺(2.54g,25mmol)(Aldrich)在四氢呋喃(30mL)中的溶液中。在搅拌1小时后，滤去沉淀和用乙醚洗涤。合并的滤液在减压下浓缩，从二氯甲烷-己烷再结晶残余物而获得苯甲酸3-苯甲酰基氨基-苯酯，为棕褐色晶体固体。(收率3.08g,97.1％)。

中间体29

3-苄基氨基-苯酚

M.W.199.255 C₁₃H₁₃NO

在氩气气氛下在室温下伴随磁力搅拌将氢化铝锂溶液(19mL,1M，在四氢呋喃中)(Aldrich)缓慢加入苯甲酸3-苯甲酰基氨基-苯酯(2.0g,6.3mmol)(来自中间体28，见上文)在无水四氢呋喃(30mL)中的悬浮液中(放热反应)。当加入完成时，将混合物在回流下加热1小时。使得反应混合物冷却至室温，通过缓慢倒入15％氯化铵水溶液(100mL)和乙醚(100mL)中猝灭。在充分搅拌后，将混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，通过过滤。将滤饼用乙酸乙酯充分洗涤。合并的滤液和洗涤物在减压下浓缩。将获得的油通过快速色谱法(Biotage 40M硅胶,二氯甲烷,然后在二氯甲烷中的5％乙酸乙酯作为溶剂)纯化而获得作为含有苯甲醇的棕色油的粗产物。

该物质通过快速色谱法(Biotage 40L硅胶,15％然后30％在己烷中的丙酮作为溶剂)纯化，获得3-苄基氨基-苯酚，为无色油。(收率0.93g,74.1％)。

中间体30

3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.452.96 C₂₄H₂₁ClN₂O₃S

将碳酸钾(0.32g,2.31mmol),3-苄基氨基-苯酚(0.42g,2.11mmol)(来自中间体29，见上文)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,30mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.68g,2.03mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(3-苄基-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.51g,55％)。

实施例24

4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.433.53 C₂₄H₂₃N₃O₃S

将氨气鼓泡进入3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.51g,0.25mmol)(来自中间体30，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.064g,13％)，回收原材料。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₃N₃O₃S+H[(M+H)⁺]:434.1533.实验值:434.1532.

实施例25

4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.448.545 C₂₄H₂₄N₄O₃S

将4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例24，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(2.0mL)(Aldrich)处理并且在130℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-(3-苄基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率22mg,42％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₄N₄O₃S+H[(M+H)⁺]:449.1642.实验值:449.1640.

中间体31

4-(3-羟基-苯氧基甲基)-苄腈

M.W.225.25 C₁₄H₁₁NO₂

将碳酸钾(2.11g,15.3mmol)和间苯二酚(16.85g,0.153mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入4-溴甲基-苄腈(3.0g,15.3mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。将水相用二氯甲烷(1X)萃取。合并的有机相用盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物用热二氯甲烷洗涤。将固体过滤和干燥，获得4-(3-羟基-苯氧基甲基)-苄腈。(收率1.77g,51％)。

中间体32

4-氯-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.478.96 C₂₅H₁₉ClN₂O₄S

将碳酸钾(0.24g,1.71mmol),4-(3-羟基-苯氧基甲基)-苄腈(0.35g,1.56mmol)(来自中间体31，见上文)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.50g,1.49mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的0-5％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.38g,54％)。

实施例26

4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.459.524 C₂₅H₂₁N₃O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.16g,0.33mmol)(来自中间体32，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.10g,67％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:460.1326.实验值:460.1327.

实施例27

4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸

M.W.431.47 C₂₃H₁₇N₃O₄S

将氢氧化钠水溶液(1.0N,0.63mL,0.63mmol)加入4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.17g,0.37mmol)(来自实施例26，见上文)在四氢呋喃-甲醇(8mL,3:1)中的溶液，将混合物在40℃加热1天。将反应混合物浓缩和与甲苯共沸。将固体残余物用二氯甲烷研制。将固体然后悬浮在水中和用盐酸(1N,3mL)处理。在搅拌30分钟后，收集固体，用水和然后用二乙醚洗涤，干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸，为白色固体，其被少量4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸甲酯所污染。(收率0.086g,54％)。

实施例28

4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.474.539 C₂₅H₂₂N₄O₄S

在搅拌下将4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(86mg,0.13mmol)(来自实施例27，见上文),1-羟基苯并三唑水合物(43mg,0.32mmol)(Aldrich)和1,3-二异丙基碳二亚胺(0.044mL,0.29mmol)(Aldrich)合并在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(3.6mL,5:1)中。在1小时后，加入乙醇胺(36mg,0.60mmol)(Aldrich)。将混合物在室温下搅拌18小时，然后浓缩。将残余物通过HPLC纯化，用乙腈-水洗脱而获得4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率65mg,68％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂N₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:497.1254.实验值:497.1254.

中间体33

3-(3-羟基-苯氧基甲基)-苄腈

M.W.225.25 C₁₄H₁₁NO₂

将碳酸钾(2.11g,15.3mmol)和间苯二酚(16.85g,0.153mol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的悬浮液在回流下加热1小时。加入3-溴甲基-苄腈(3.0g,15.3mmol)(Aldrich)在乙腈(60mL)中的溶液。将反应混合物在回流下加热2.5天。浓缩溶液。将残余物在二氯甲烷和水之间分配。水相用二氯甲烷(1X)萃取。合并的有机相用盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(3-羟基-苯氧基甲基)-苄腈。(收率2.89g,84％)。

中间体34

4-氯-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.478.96 C₂₅H₁₉ClN₂O₄S

将碳酸钾(0.24g,1.71mmol),3-(3-羟基-苯氧基甲基)-苄腈(0.35g,1.56mmol)(来自中间体33，见上文)在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.50g,1.49mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)，过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的0-5％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.43g,61％)。

实施例29

4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.459.524 C₂₅H₂₁N₃O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.14g,0.29mmol)(来自中间体34，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.10g,77％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:460.1326.实验值:460.1325.

实施例30

4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸

M.W.431.47 C₂₃H₁₇N₃O₄S

将氢氧化钠水溶液(1.0N,0.63mL,0.63mmol)加入4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.17g,0.37mmol)(来自实施例29，见上文)在四氢呋喃-甲醇(8mL,3:1)中的溶液，将混合物在40℃加热1天。将反应混合物浓缩并与甲苯共沸。固体残余物用二氯甲烷研制。然后将固体悬浮在水中，用盐酸水溶液(1N,3mL)处理。在搅拌30分钟后，收集固体，用水和然后二乙醚洗涤并干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸，为白色粉末，其被少量4-氨基-3-[3-(4-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸甲酯污染。(收率86mg,54％)。

实施例31

4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺三氟乙酸盐

M.W.474.54 C₂₅H₂₂N₄O₄S

在搅拌下将4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(86mg,0.13mmol)(来自实施例30，见上文),1-羟基苯并三唑水合物(43mg,0.32mmol)(Aldrich)和1,3-二异丙基碳二亚胺(0.044mL,0.29mmol)(Aldrich)合并在四氢呋喃-N,N-二甲基甲酰胺(3.6mL,5:1)中。在1小时后，加入乙醇胺(0.036g,0.60mmol)(Aldrich)。将混合物室温搅拌18小时，然后浓缩。将残余物通过HPLC纯化，用乙腈-含有三氟乙酸的水洗脱，获得4-氨基-3-[3-(3-氰基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺三氟乙酸盐，为白色粉末。(收率65mg,68％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:475.1435.实验值:475.1434.

实施例32

3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-(2-羟基-乙基氨基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.493.581 C₂₆H₂₇N₃O₅S

将3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.16g,0.35mmol)(来自中间体11，见上文)在二甲亚砜(1.0mL)中的溶液用乙醇胺(4.0mL)(Aldrich)处理并在130℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用水和盐水洗涤，干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。从乙酸乙酯-己烷中再结晶残余物而获得3-(3-苄氧基-苯氧基甲基)-4-(2-羟基乙基-氨基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色晶体。(收率0.06g,35％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₇N₃O₅S+H[(M+H)⁺]:494.1744.实验值:494.1746

中间体35

3-羟基-苯甲酸叔丁酯

M.W.194.23 C₁₁H₁₄O₃

将3-羟基苯甲酸(5g,36.2mmol)(Aldrich)悬浮在无水苯(200mL)中并将混合物加热至回流。滴加N,N’-二甲基甲酰胺二叔丁缩醛(34.7mL,0.14mol)(Aldrich)，将混合物在回流下加热另外1小时。将冷却的溶液用水、饱和碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。在干燥(硫酸镁)和过滤后，蒸发溶剂。残余物通过快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的25％己烷和在二氯甲烷中的10％乙酸乙酯洗脱而获得3-羟基-苯甲酸叔丁酯。(收率3.47g,49％)。

中间体36

3-(3-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.447.94 C₂₂H₂₂ClNO₅S

将碳酸钾(1.47g,10.65mmol),3-羟基-苯甲酸叔丁酯(1.89g,9.73mmol)(来自中间体35，见上文)和催化量的18-冠-6(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(3.10g,9.26mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(3-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率2.5g,60％)。

中间体37

4-氨基-3-(3-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.428.507 C₂₂H₂₄N₂O₅S

将氨气鼓泡进入3-(3-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.62g,1.38mmol)(来自中间体36，见上文)在二噁烷(20mL)中的溶液30分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热乙酸乙酯洗涤,将固体过滤和干燥而获得4-氨基-3-(3-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.46g)。将溶液浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的40％乙酸乙酯洗脱，获得所述产物(0.13g)。(合并收率0.59g,100％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₂H₂₄N₂O₅S+H[(M+H)⁺]:429.1479.实验值:429.1480.

中间体38

4-氨基-3-(3-羧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.372.399 C₁₈H₁₆N₂O₅S

将4-氨基-3-(3-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.13g,0.30mmol)(来自中间体37，见上文)溶解在三氟乙酸-二氯甲烷(1:1,4mL)中。将混合物室温搅拌1小时，然后浓缩。将残余物溶解在碳酸钠水溶液中并用二氯甲烷萃取。将水相用6N盐酸酸化。收集形成的固体，用水洗涤，干燥，获得4-氨基-3-(3-羧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.11g,100％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₈H₁₆N₂O₅S+H[(M+H)⁺]:373.0853.实验值:373.0853.

中间体39

4-羟基-苯甲酸叔丁酯

M.W.194.23 C₁₁H₁₄O₃

将4-羟基苯甲酸(5.29g,38.3mmol)(Aldrich)悬浮在无水苯(200mL)中，将混合物加热至回流。滴加N,N’-二甲基甲酰胺二叔丁缩醛(36.7mL,0.15mol)(Aldrich)，将混合物在回流下加热另外1小时。将冷却的溶液用水、碳酸氢钠饱和水溶液和盐水洗涤。在干燥(硫酸镁)和过滤后，蒸发溶剂。残余物通过快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的25％己烷和在二氯甲烷中的10％乙酸乙酯洗脱而获得4-羟基-苯甲酸叔丁酯。(收率1.72g,23％)。

中间体40

3-(4-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.447.94 C₂₂H₂₂ClNO₅S

将碳酸钾(1.34g,9.70mmol),4-羟基-苯甲酸叔丁酯(1.72g,8.86mmol)(来自中间体39，见上文)和催化量的18-冠-6(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中的悬浮液在65℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(2.82g,8.43mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(4-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率2.65g,70％)。

中间体41

4-氨基-3-(4-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.428.507 C₂₂H₂₄N₂O₅S

将氨气鼓泡进入3-(4-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(2.70g,6.03mmol)(来自中间体40，见上文)在二噁烷(60mL)中的溶液30分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物从乙酸乙酯中再结晶,将固体过滤和干燥而获得4-氨基-3-(4-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.3g)。浓缩母液。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的40％乙酸乙酯洗脱，获得所述产物(0.8g)。(合并收率2.1g,81％)。

中间体42

4-氨基-3-(4-羧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.372.399 C₁₈H₁₆N₂O₅S

将4-氨基-3-(4-叔丁氧羰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(2.1g,4.9mmol)(来自中间体40，见上文)溶解在三氟乙酸-二氯甲烷(1:2,60mL)中。将混合物在室温下搅拌3小时，然后浓缩。将残余物溶解在饱和碳酸钠水溶液中，用二氯甲烷萃取。水相用6N盐酸水溶液酸化。收集固体，用水洗涤，干燥，获得4-氨基-3-(4-羧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率1.83g,100％)。

实施例33

4-氨基-3-(3-甲氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.358.419 C₁₈H₁₈N₂O₄S

根据在上文实施例2中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₈H₁₈N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:359.1060.实验值:359.1058.

实施例34

4-氨基-3-(3-甲氧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.373.434 C₁₈H₁₉N₃O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₈H₁₉N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:374.1169.实验值:374.1169.

实施例35

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.447.517 C₂₄H₂₁N₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:448.1326.实验值:448.1325.

实施例36

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.462.531 C₂₄H₂₂N₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:463.1435.实验值:463.1436.

实施例36a

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺盐酸盐

M.W.462.531+36.461 C₂₄H₂₂N₄O₄S·HCl

通过用1当量的盐酸处理4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:463.1435.实验值:463.1437.

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:485.1254.实验值:485.1256.

实施例36b

4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐

M.W.462.531+172.204 C₂₄H₂₂N₄O₄S·C₇H₈O₃S

通过用1当量的甲苯-4-磺酸处理4-氨基-3-(3-苯甲酰基氨基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺来制备该化合物。

实施例37

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.481.962 C₂₄H₂₀ClN₃O₄S

向4-氨基-3-(3-羧基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(49.2mg,0.132mmol)(来自中间体38，见上文)在DMF(5mL)中的悬浮液加入二异丙基乙胺(68mg,0.528mmol),HOBt(26.7mg,0.198mmol)(Aldrich)和HBTU(75.0mg,0.198mmol)(AdvancedChemTech)。在搅拌30分钟后，加入在DMF(0.5mL)中的4-氯苯胺(20.0mg,0.158mmol)(Aldrich)。将反应混合物在室温下搅拌2小时，之后将其用EtOAc(80mL)稀释，用1N HCl(10mL)、饱和Na₂CO₃水溶液(10mL)、盐水(2x10mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄)并过滤。去除溶剂，接着柱色谱法分离(CH₂Cl₂/MeOH,98/2)，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率34.1mg,53.6％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:482.0936.实验值:482.0936.

实施例38

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.496.976 C₂₄H₂₁ClN₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:497.1045.实验值:497.1045.

实施例39

4-氨基-3-[3-(4-氟-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.465.507 C₂₄H₂₀FN₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀FN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:466.1232.实验值:466.1230.

实施例40

4-氨基-3-[3-(4-氟-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.480.522 C₂₄H₂₁FN₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁FN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:503.1160.实验值:503.1158.

实施例41

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸三氟-乙酸盐

M.W.440.909 C₂₂H₁₇ClN₂O₄S

通过氢氧化钠水解4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自实施例3，见上文)，接着用反相色谱法纯化(使用乙腈–含有0.1％三氟乙酸的水作为溶剂)来制备该化合物。

实施例42

4-氨基-3-[3-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.481.962 C₂₄H₂₀ClN₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:482.0936.实验值:482.0937.

实施例43

4-氨基-3-[3-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.496.976 C₂₄H₂₁ClN₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:519.064.实验值:519.0864.

实施例44

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与氨基1-丙醇偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:533.1021.实验值:533.1022.

实施例45

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸丙基酰胺

M.W.495.004 C₂₅H₂₃ClN₄O₃S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与丙胺偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₃S+Na[(M+Na)⁺]:517.1071.实验值:517.1072.

实施例46

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙基酰胺

M.W.480.977 C₂₄H₂₁ClN₄O₃S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与乙胺偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁ClN₄O₃S+Na[(M+Na)⁺]:503.0915.实验值:503.0917.

实施例47

4-氨基-3-{3-[(4-氯-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.495.989 C₂₅H₂₂ClN₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:496.1093.实验值:496.1088.

实施例48

4-氨基-3-[3-(1-甲基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.468.579 C₂₄H₂₈N₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₈N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:469.1904.实验值:469.1900.

实施例49

4-氨基-3-[3-(5-甲基-吡啶-2-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.462.531 C₂₄H₂₂N₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₂N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:463.1435.实验值:463.1430.

实施例50

4-氨基-3-[3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.532.642 C₂₄H₂₈N₄O₆S₂

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₈N₄O₆S₂+Na[(M+Na)⁺]:555.1342.实验值:555.1332.

实施例51

4-氨基-3-{3-[(4-氯-苯基)-甲基-氨基甲酰基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:533.1021.实验值:533.1016.

实施例52

4-氨基-3-[5-(3-氨基甲酰基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.504.569 C₂₆H₂₄N₄O₅S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₄N₄O₅S+H[(M+H)⁺]:505.实验值:505.

实施例53

4-氨基-3-(2-甲基-5-苯基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.461.544 C₂₅H₂₃N₃O₄S

根据上文一般方法4制备该化合物。

实施例54

4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺三氟-乙酸盐

M.W.498.005 C₂₅H₂₄ClN₃O₄S

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.04g,0.09mmol)(来自实施例4，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将混合物通过HPLC纯化，用乙腈/含有0.1％三氟乙酸的水洗脱，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺三氟-乙酸盐。(收率9.0mg,17％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:498.1249.实验值:498.1248.

实施例55

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.468.963 C₂₄H₂₁ClN₂O₄S

在冰水浴中冷却下将N,N-二异丙基乙胺(19.2mL,110mmol)(Aldrich)加入3-羟基苯甲醛(12.21g,100mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(50mL)中的悬浮液。然后滴加氯甲基甲基醚(15.19mL,200mmol)(Aldrich)，将混合物在室温下搅拌3小时。然后将混合物用盐水(30mL)和水(30mL)的混合物洗涤，接着用0.1N HCl(3X20mL)和盐水(2X20mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(30mL)反洗。将有机溶液合并，干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。将残余物过滤通过硅胶(Biotage 40M)，用二氯甲烷洗脱。将级分合并并浓缩而获得3-甲氧基甲氧基-苯甲醛，为淡黄色油。(收率13.94g,83.9％)。

将硼氢化钠(1.14g,30mmol)(Aldrich)以小份加入3-甲氧基甲基氧基-苯甲醛(4.99g,30mmol)在甲醇(90mL)和水(3mL)中的溶液。将混合物在室温下搅拌3小时，然后用水(50mL)稀释。将混合物在减压下浓缩，将获得的水悬浮液用乙酸乙酯(2X75mL)萃取。有机层用水(50mL)和盐水(50mL)洗涤，然后合并,干燥(MgSO₄),过滤并浓缩而获得粗制(3-甲氧基甲氧基-苯基)-甲醇，为无色油。将这用于下一步骤而不进一步纯化。(收率5.04g,100％)。

将(3-甲氧基甲氧基-苯基)-甲醇(1.68g,10mmol),4-氯苯酚(1.29g,10mmol)(Aldrich)和N,N’-二环己基碳二亚胺(2.06g,10mmol)(Aldrich)的纯混合物在密封管中在100℃加热24小时。将样品冷却至室温，然后用乙醚研制。通过过滤去除二环己基脲。将滤液用1N盐酸水溶液和盐水洗涤。将水层用乙醚反洗。将合并的乙醚层干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。将残余物过滤通过Biotage快速柱(40S,用二氯甲烷洗脱)，获得(4-氯苯氧基-甲基)-3-甲基氧基甲氧基-苯，为淡黄色油。(收率2.07g,74.3％)。

向(4-氯苯氧基-甲基)-3-甲基氧基甲氧基-苯(2.07g,7.43mmol)在四氢呋喃/2-丙醇(1:1,40mL)中的溶液加入在二噁烷中的4M HCl(18.5mL)(Aldrich)。将反应混合物室温搅拌18小时。浓缩溶液。将残余物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱，获得3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯酚。(收率1.72g,99％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯酚(0.25g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.19g,38％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.11g,0.23mmol)在二噁烷(20mL)中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率0.087g,79％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁ClN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:469.0984.实验值:469.0984.

实施例56

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.464.975 C₂₅H₂₁ClN₂O₃S

将氢化钠(在油中60％，1.0g,25mmol)(Aldrich)以小份加入4-氯苄基膦酸二乙酯(2.63g,1.0mmol)(Alfa Aesar)、催化量的18-冠-6(Aldrich)和甲醇(0.8mL,20mmol)在无水DMF(15mL)中的溶液。在搅拌5分钟后，加入在无水DMF(5mL)中的3-甲氧基甲氧基-苯甲醛(1.66g,10mmol)，将混合物室温搅拌1小时，然后在120℃搅拌5小时。在冷却至室温后，混合物用水(100mL)稀释，用乙醚(2X100mL)萃取。将有机层用水和盐水洗涤，干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。残余物通过色谱法(Biotage 40M,20％,然后40％在己烷中的二氯甲烷作为溶剂)纯化。从己烷中再结晶产物，获得纯E-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-3-甲基氧基甲氧基-苯，为白色晶体片。(收率2.74g,100％)。

向E-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-3-甲基氧基甲氧基-苯(2.22g,8.08mmol)在四氢呋喃/2-丙醇(1:1,40mL)中的溶液加入在二噁烷中的4M HCl(15mL)(Aldrich)。将反应混合物室温搅拌18小时。浓缩溶液。将残余物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。将残余物用热二氯甲烷洗涤，干燥，获得3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯酚。(收率0.81g,44％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯酚(0.25g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.31g,63％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.11g,0.23mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)的混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-{3-[(E)-2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.093g,96％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁ClN₂O₃S+H[(M+H)⁺]:465.1034.实验值:465.1034.

实施例57

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.479.989 C₂₅H₂₂ClN₃O₃S

将4-氨基-3-{3-[(E)-2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例56，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将形成的沉淀过滤和用乙酸乙酯洗涤，干燥，获得4-氨基-3-{3-[(E)-2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率36.0mg,69％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClN₃O₃S+H[(M+H)⁺]:480.1143.实验值:480.1144.

实施例58

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.483.978 C₂₄H₂₂ClN₃O₄S

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例55，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理，在微波反应器中在160℃加热2小时。将形成的沉淀过滤和用热甲醇洗涤，干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯氧基甲基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色固体。(收率25.8mg,50％)。

实施例59

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-甲基-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与2-甲基氨基-乙醇偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:533.1021.实验值:533.1019.

实施例60

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-甲氧基-乙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与2-甲氧基-乙胺偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:533.1021.实验值:533.1020.

实施例61

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸甲基酰胺

M.W.466.950 C₂₃H₁₉ClN₄O₃S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与甲胺偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₁₉ClN₄O₃S+H[(M+H)⁺]:467.0939.实验值:467.0941.

实施例62

3-[4-氨基-7-(吗啉-4-羰基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-3-基甲氧基]-N-(4-氯-苯基)-苯甲酰胺

M.W.523.015 C₂₆H₂₃ClN₄O₄S

根据以上实施例27中所述的方法，通过水解相应的乙酯(来自实施例37，见上文)和将获得的酸与吗啉偶联来制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₃ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:523.1202.实验值:523.1202.

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₃ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:545.1021.实验值:545.1022.

实施例63

4-氨基-3-(3-环己基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.453.564 C₂₄H₂₇N₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₇N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:454.1795.实验值:454.1797.

实施例64

4-氨基-3-[3-(四氢-吡喃-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.455.537 C₂₃H₂₅N₃O₅S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₅N₃O₅S+H[(M+H)⁺]:456.1588.实验值:456.1590.

实施例65

4-氨基-3-[3-(1-甲磺酰基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.547.657 C₂₄H₂₉N₅O₆S₂

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₉N₅O₆S₂+H[(M+H)⁺]:548.1632.实验值:548.1636.

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₉N₅O₆S₂+Na[(M+Na)⁺]:570.1451.实验值:570.1453.

实施例66

4-氨基-3-[3-(1-甲基-哌啶-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.483.594 C₂₄H₂₉N₅O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₉N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:484.2013.实验值:484.2012.

实施例67

4-氨基-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺三氟-乙酸盐

M.W.448.548 C₂₄H₂₄N₄O₃S

将3-乙酰氧基苯甲酸(1.80g,10mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(3滴)和亚硫酰(二)氯(3mL,40mmol)(Aldrich)的混合物中的悬浮液在90℃浴中加热2小时。在冷却后，将混合物用甲苯(20mL)稀释并减压浓缩，以去除过量的亚硫酰(二)氯。将获得的油溶解在二氯甲烷(10mL)中并在磁力搅拌下滴加到苯胺(0.93g,10mmol)(Aldrich)、4-二甲基氨基-吡啶(0.1g,0.08mmol)(Fluka)和N,N-二异丙基乙胺(1.6g,12.4mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(10mL)中的溶液中。当加入完成时，将混合物室温搅拌另外2小时。然后将反应混合物在水(50mL)和二氯甲烷(2X50mL)之间分配。将有机层合并并浓缩至干燥。将残余物溶解在THF(10mL)、甲醇(10mL)和1N氢氧化钠水溶液(10mL)中并室温搅拌16小时。将黄色溶液用水(100mL)和乙酸(5mL)稀释并用乙酸乙酯(2X100mL)萃取。将乙酸乙酯用盐水(100mL)洗涤，合并,干燥(MgSO₄),并浓缩而获得粗制3-羟基-N-苯基-苯甲酰胺，其用于下一步骤而不进一步纯化。(收率2.20g,103％)。

在氩气气氛下在磁力搅拌和在冰水浴中冷却下将氢化铝锂溶液(19mL,1M在四氢呋喃)(Aldrich)缓慢加入粗制3-羟基-N-苯基-苯甲酰胺(2.0g,6.3mmol)在无水四氢呋喃(30mL)中的悬浮液(放热反应)。当加入完成后，将混合物在回流下加热1小时。使得反应混合物冷却至室温并通过缓慢倒入15％氯化铵水溶液(100mL)和乙醚(100mL)中猝灭。在充分搅拌后，将混合物用乙酸乙酯(100mL)稀释，通过硅藻土过滤。将滤饼用乙酸乙酯充分洗涤，合并滤液，将洗涤物减压浓缩。将获得的油通过快速色谱法(Biotage 40M硅胶,在己烷中的20％乙酸乙酯作为溶剂)纯化，获得3-苯基氨基甲基-苯酚，为无色油。(收率1.48g,73.5％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-苯基氨基甲基-苯酚(0.21g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续2天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.15g,33％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.15g,0.33mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)的混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将粗制物通过HPLC纯化，用乙腈/水洗脱，获得4-氨基-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.030g,21％)。

将4-氨基-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.03g,0.07mmol)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物通过HPLC纯化，用乙腈/水洗脱，获得4-氨基-3-(3-苯基氨基甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色固体。(收率13.0mg,33％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₄N₄O₃S+H[(M+H)⁺]:449.1642.实验值:449.1645.

实施例68

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.482.990 C₂₅H₂₃ClN₂O₄S

在室温下将DEAD(2.0g,11.5mmol)(Aldrich)加入三苯膦(3.01g,11.5mmol)(Aldrich)在四氢呋喃(80mL)中的搅拌的溶液中。在搅拌10分钟后，加入对-氯苯乙醇(1.40g,8.9mmol)(Aldrich)。在搅拌10分钟后，快速加入在四氢呋喃(20mL)中的间苯二酚(2.92g,26.55mmol)(Aldrich)，搅拌混合物另外18小时。浓缩反应混合物，将残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20-40％乙酸乙酯洗脱，获得3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯酚。(收率1.44g,65％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯酚(0.27g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.10g,20％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.10g,0.20mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)的混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.093g,96％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:483.1140.实验值:483.1143.

实施例69

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.498.005 C₂₅H₂₄ClN₃O₄S

将4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.04g,0.08mmol)(来自实施例68，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将形成的沉淀过滤并用乙酸乙酯和甲醇洗涤,干燥而获得4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙氧基]-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率28.0mg,70％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:498.1249.实验值:498.1249.

实施例70

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.481.962 C₂₄H₂₀ClN₃O₄S

将碳酸钾(0.74g,5.39mmol),4-氯-N-(3-羟基-苯基)-苯甲酰胺(1.07g,4.30mmol)(通过过量4-氯苯甲酰氯与3-氨基苯酚和N,N-二异丙基乙胺反应，接着用1N氢氧化钠水解来制备)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,35mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.20g,3.59mmol)(来自上文中间体8)。加热持续2天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。将残余物用热二氯甲烷洗涤并干燥，获得4-氯-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.99g,55％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.28g,0.56mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)的混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.20g,74％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:482.0936.实验值:482.0925.

实施例71

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.496.976 C₂₄H₂₁ClN₄O₄S

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例70，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并且在微波反应器中在160℃加热2小时。将形成的沉淀过滤和用乙酸乙酯洗涤,干燥而获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率21.0mg,40％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:519.0864.实验值:519.0858.

实施例72

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例70，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用3-氨基-1-丙醇(1.5mL)(Aldrich)处理，在160℃在微波反应器中加热2小时。反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗涤而获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基-氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺。(收率22.0mg,43％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:511.1202.实验值:511.1195.

实施例72a

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺盐酸盐

M.W.511.003+36.461 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S·HCl

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基-氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺(0.05g,0.10mmol)(来自实施例72，见上文)在甲醇(7.5mL)中的溶液用在二乙醚中的1M HCl(0.15mL)处理并且在48℃加热15分钟。在冷却后，加入二乙醚(30mL)。将溶液保持在冰箱中过夜。将形成的固体过滤和干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基-氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺盐酸盐。(收率52.0mg,96％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:511.1202.实验值:511.1203.

实施例72b

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐

M.W.511.003+172.204 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S·C₇H₈O₃S

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基-氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺(0.05g,0.10mmol)(来自实施例72，见上文)在甲醇(6mL)中的溶液用甲苯-4-磺酸水合物(18.6mg,0.10mmol)(Aldrich)处理，在40℃加热30分钟。将溶液浓缩。将残余物用二乙醚洗涤，溶解在水中并冻干，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基-氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-羟基-丙基)-酰胺,甲苯-4-磺酸盐。(收率67.0mg,100％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:511.1202.实验值:511.1202.

实施例73

4-氨基-3-(2-氧代-1-苯乙基-1,2-二氢-嘧啶-4-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.450.520 C₂₃H₂₂N₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₂N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:451.1435.实验值:451.1434.

实施例74

4-氨基-3-(2,6-二氧代-3-苯乙基-3,6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.450.520 C₂₃H₂₂N₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

实施例75

4-氨基-3-(2,6-二氧代-3-苯乙基-3,6-二氢-2H-嘧啶-1-基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.465.535 C₂₃H₂₃N₅O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₃N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:466.1544.实验值:466.1548.

实施例76

4-氨基-3-[2-甲氧基-5-(3-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.507.570 C₂₆H₂₅N₃O₆S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₅N₃O₆S+H[(M+H)⁺]:508.实验值:508.

实施例77

4-氨基-3-[5-(3,5-二甲氧基-苯基氨基甲酰基)-2-甲氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.537.596 C₂₇H₂₇N₃O₇S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₇H₂₇N₃O₇S+H[(M+H)⁺]:538.实验值:538.

实施例78

4-氨基-3-[5-(4-氯-3-甲基-苯基氨基甲酰基)-2-甲氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.526.01 C₂₆H₂₄ClN₃O₅S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₇H₂₇N₃O₇S[M⁺]:526.实验值:526.

实施例79

4-氨基-3-(5-苄基氨基甲酰基-2-硝基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.506.541 C₂₅H₂₂N₄O₆S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂N₄O₆S+H[(M+H)⁺]:507.实验值:507.

实施例80

4-氨基-3-(2-甲基-3-苯基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.461.544 C₂₅H₂₃N₃O₄S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:462.实验值:462.

实施例81

4-氨基-3-[3-(3,5-二甲氧基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.521.597 C₂₇H₂₇N₃O₆S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:522.实验值:522.

实施例82

4-氨基-3-[2-硝基-5-(3-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.576.512 C₂₅H₁₉F₃N₄O₇S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₁₉F₃N₄O₇S+H[(M+H)⁺]:577.实验值:577.

实施例83

4-氨基-3-[2-甲基-3-(3-三氟甲氧基-苯基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.545.542 C₂₆H₂₂F₃N₃O₅S

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₂F₃N₃O₅S+H[(M+H)⁺]:546.实验值:546.

实施例84

4-氨基-3-[3-(3-甲磺酰基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.539.634 C₂₆H₂₅N₃O₆S₂

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₅N₃O₆S₂+H[(M+H)⁺]:540.实验值:540.

实施例85

4-氨基-3-[3-(3-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.495.989 C₂₅H₂₂ClN₃O₄S

根据上文一般方法4制备该化合物。

实施例86

4-氨基-3-[2-甲基-3-(5-甲基-1H-吡唑-3-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.465.535 C₂₃H₂₃N₅O₄S

根据上文一般方法4制备该化合物。

实施例87

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.466.991 C₂₅H₂₃ClN₂O₃S

将3-[2-(4-氯-苯基)-乙烯基]-苯酚(0.35g,1.52mmol)(来自实施例56，见上文)在甲醇(20mL)中的溶液用10％Pd/C(0.04g)(Aldrich)处理。将反应混合物氢化6小时。将反应混合物通过硅藻土并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的30％乙酸乙酯洗脱，获得3-[2-(4-氯苯基)-乙基]-苯酚。(收率0.33g,94％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol)、3-[2-(4-氯苯基)-乙基]-苯酚(0.25g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:1,18mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.13g,26％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.13g,0.27mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)的混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.08g,67％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₂O₃S+H[(M+H)⁺]:467.1191.实验值:467.1192.

实施例88

4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.482.005 C₂₅H₂₄ClN₃O₃S

将4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例87，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将形成的沉淀过滤和用热甲醇处理并干燥，获得4-氨基-3-{3-[2-(4-氯-苯基)-乙基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率31.6mg,61％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄ClN₃O₃S+H[(M+H)⁺]:482.1300.实验值:482.1302.

实施例89

4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.495.989 C₂₅H₂₂ClN₃O₄S

将3-羟基-4-甲基苯甲酸(10.73g,70.5mmol)(Lancaster)在乙酐(25mL,265mmol)(Aldrich)中的悬浮液在回流下加热5小时。在冷却至室温后，将混合物倒入冰-水混合物(600mL)中，并搅拌过夜。将固体块破碎并通过过滤收集。将残余物用水洗涤并在真空炉中干燥，获得3-乙酰氧基-4-甲基-苯甲酸，为棕褐色固体。(收率11.82g,86.3％)。

将3-乙酰氧基-4-甲基-苯甲酸(1.94g,10mmol)悬浮在亚硫酰二氯(3mL,40mmol)(Aldrich)和N,N-二甲基-甲酰胺(3滴)中并在回流下加热2小时。在冷却至室温后，将混合物用甲苯(30mL)稀释并减压浓缩。将获得的油溶解在二氯甲烷(30mL)中并滴加到4-氯苯胺(1.34g,10.5mmol)(Aldrich)和N,N-二异丙基乙胺(1.6g,12.5mmol)在二氯甲烷(50mL)中的溶液中。在搅拌另外2小时后，将混合物用水(50mL)稀释并搅拌另外分钟。分离各层。将有机层用水(50mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(50mL)反洗。将有机层然后合并并浓缩。将残余物溶解在四氢呋喃(25mL)、甲醇(25mL)和1N氢氧化钠水溶液(10mL,10mmol)的混合物中。在搅拌16小时后，将混合物用水(100mL)和乙酸(5mL)稀释并减压浓缩以去除大部分有机溶剂。将形成的沉淀通过过滤收集并用水洗涤，干燥，获得N-(4-氯-苯基)-3-羟基-4-甲基-苯甲酰胺，为灰白色晶体。(收率2.57g,98.2％)。

将碳酸钾(0.21g,1.53mmol),N-(4-氯-苯基)-3-羟基-4-甲基-苯甲酰胺(0.32g,1.22mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,21mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续2天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。将残余物用热二氯甲烷洗涤并干燥而获得4-氯-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.23g,43％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.23g,0.45mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱，获得4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基-甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.08g,36％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:496.1093.实验值:496.1094.

实施例90

4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

将4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例89，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基-氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率25.0mg,48％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:533.1021.实验值:533.1025.

实施例91

4-氨基-3-[5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.495.989 C₂₅H₂₂ClN₃O₄S

在磁力搅拌和在冰水浴中冷却下将对-氯苯甲酰氯(19.25g,110mmol)(Aldrich)在四氢呋喃(50mL)中的溶液滴加到5-氨基-邻-甲酚(6.16g,50mmol)(Aldrich)和三乙胺(17.5mL,125mmol)(Aldrich)和THF(100mL)的溶液中。当加入完成时，使得混合物升温至室温并搅拌16小时。将反应混合物用水(400mL)稀释。在搅拌另外30分钟后，收集沉淀而获得粗制4-氯-苯甲酸5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯酯，为灰白色粉末。(收率21.24g,106％)。

将4-氯-苯甲酸5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯酯(4.04g,10mmol)溶解在四氢呋喃(25mL,甲醇(50mL)和1N氢氧化钠水溶液(10mL,10mmol)的混合物中。室温搅拌混合物18小时。将混合物减压浓缩以去除大部分有机溶剂。获得的悬浮液用水(100mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)稀释。在静置30分钟后，收集沉淀并用水洗涤，干燥，获得4-氯-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺，为白色粉末。(收率2.46g,93.1％)。

将碳酸钾(0.21g,1.53mmol),4-氯-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺(0.32g,1.22mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,21mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续2天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。将残余物用热二氯甲烷洗涤并干燥而获得4-氯-3-[5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.10g,19％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.10g,0.19mmol)在2-丙醇/二噁烷(1:1,20mL)混合物中的溶液20分钟。将混合物在密封压力容器中在160℃加热1天。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率95.0mg,99％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:496.1093.实验值:496.1092.

实施例92

4-氨基-3-[5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

将4-氨基-3-[5-(4-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例91，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)处理并在微波反应器中在160℃加热2小时。反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-[5-(4-氯-苯甲酰基-氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺。(收率34.0mg,65％)。

实施例93

4-氨基-3-[3-(4-氟-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.465.507 C₂₄H₂₀FN₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀FN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:466.12322.实验值:466.1231.

实施例94

4-氨基-3-[5-(4-氯-2-甲基-苯基氨基甲酰基)-2-甲氧基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.526.015 C₂₆H₂₄ClN₃O₅S

根据上文一般方法4制备该化合物。

实施例95

4-氨基-3-[3-(5-氯-2-甲氧基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.526.015 C₂₆H₂₄ClN₃O₅S

根据上文一般方法4制备该化合物。

实施例96

4-氨基-3-[4-(3-甲磺酰基-苯基氨基甲酰基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.539.634 C₂₆H₂₅N₃O₆S₂

根据上文一般方法4制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₆H₂₅N₃O₆S₂[M⁺]:539.实验值:539.

实施例97

4-氨基-3-(5-苯基氨基甲酰基-吡啶-3-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.448.504 C₂₃H₂₀N₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₀N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:449.1278.实验值:449.1278.

实施例98

4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-基氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.482.949 C₂₃H₁₉ClN₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₁₉ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:483.0889.实验值:483.0890.

中间体43

4-氯-3-[3-(3-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.467.975 C₂₅H₂₂ClNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体44

4-氯-3-[3-(4-氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.471.939 C₂₄H₁₉ClFNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体45

4-氯-3-[3-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.467.975 C₂₅H₂₂ClNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体46

4-氯-3-[3-(2,4-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.489.929 C₂₄H₁₈ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

实施例99

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-甲氧基-乙基)-酰胺

M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

根据上述实施例60所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:511.1202.实验值:511.1201.

实施例100

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(3-甲氧基-丙基)-酰胺

M.W.525.031 C₂₆H₂₅ClN₄O₄S

根据上述实施例60所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₅ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:525.1358.实验值:525.1357.

实施例101

4-氨基-3-[5-(吡啶-4-基氨基甲酰基)-吡啶-3-基氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙基酯

M.W.449.492 C₂₂H₁₉N₅O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₈H₁₉N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:450.1231.实验值:450.1229.

实施例102

4-氨基-3-[5-(4-氯-苯基氨基甲酰基)-吡啶-3-基氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.497.964 C₂₃H₂₀ClN₅O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₀ClN₅O₄S+H[(M+H)⁺]:498.0998.实验值:498.1000.

实施例103

4-氨基-3-(5-苯基氨基甲酰基-吡啶-3-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.463.519 C₂₃H₂₁N₅O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₁N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:464.1387.实验值:464.1390.

实施例104a

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(4-吡咯烷-1-基-丁基)-酰胺三氟-乙酸盐

M.W.578.138+114.024 C₃₀H₃₂ClN₅O₃S·C₂HF₃O₂

在搅拌下将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(0.15g,0.13mmol)(来自下文实施例151),1-羟基苯并三唑水合物(71mg,0.56mmol)(Aldrich)和1,3-二异丙基碳二亚胺(0.077mL,0.50mmol)(Aldrich)的混合物合并在四氢呋喃:N,N-二甲基甲酰胺(9.0mL,5:1)中。在1小时后，加入4-吡咯烷丁胺(0.14g,1.04mmol)(Aldrich)。将混合物室温搅拌3天，然后浓缩。将残余物通过HPLC纯化，用乙腈/含有0.1％三氟乙酸的水洗脱，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(4-吡咯烷-1-基-丁基)-酰胺,三氟乙酸盐，为白色粉末。(收率0.16g,67％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₃₀H₃₂ClN₅O₃S+H[(M+H)⁺]:578.1987.实验值:578.1982.

实施例104b

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(4-吡咯烷-1-基-丁基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐

M.W.578.138+172.204 C₃₀H₃₂ClN₅O₃S·C₇H₈O₃S

向4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(4-吡咯烷-1-基-丁基)-酰胺(0.047g,0.08mmol)(来自实施例104a，见上文)在甲醇(6mL)中的溶液用甲苯-4-磺酸水合物(18.6mg,0.10mmol)(Aldrich)处理并在40℃加热30分钟。浓缩溶液。将残余物用二乙醚洗涤，溶解在水中并冻干，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(4-吡咯烷-1-基-丁基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐，为白色粉末。(收率60.0mg,100％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₃₀H₃₂ClN₅O₃S+H[(M+H)⁺]:578.1987.实验值:578.1984.

实施例105

4-氨基-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.482.990 C₂₅H₂₃ClN₂O₄S

将2,4-二羟基苯甲醛(6.62g,48mmol)(Fluka),氟化钾(5.57g,96mmol)(Aldrich)和4-氯苄基氯(13.50g,84mmol)(Aldrich)在乙腈(50mL)中的混合物在90℃加热24小时。在冷却后，将混合物在乙醚(2X100mL)和水(2X100mL)之间分配。将有机层用盐水(100mL)洗涤，合并,干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。残余物通过快速色谱法(Biotage 75S,己烷,然后己烷-二氯甲烷1:1作为溶剂)纯化，获得部分分离。将产物的纯级分合并并浓缩，从具有痕量的二氯甲烷的己烷中结晶残余物，获得4-(4-氯-苄氧基)-2-羟基-苯甲醛，为白色晶体。(收率4.74g,37.6％)。将母液和不纯级分合并并且通过快速色谱法(Biotage 40L,与以上溶剂相同)进一步纯化，将纯级分合并并且浓缩。将残余物再结晶而获得第二批的4-(4-氯-苄氧基)-2-羟基-苯甲醛。(收率3.03g,24.1％)。

向4-(4-氯-苄氧基)-2-羟基苯甲醛(1.31g,5.0mmol)和氰基硼氢钠(1.0g,15.9mmol)(Aldrich)在四氢呋喃(30mL)中的溶液加入作为指示剂的甲基橙，赋予溶液以黄色；缓慢加入1N HCl水溶液(7.5mL)，保持溶液橙色。将混合物室温搅拌过夜。加入水，将混合物用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用己烷中的0-40％乙酸乙酯洗脱，获得5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯酚。(收率0.43g,35％)。

将碳酸钾(0.33g,2.36mmol),5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯酚(0.43g,1.73mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,17.5mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.53g,1.57mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgS₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.37g,47％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.21g,0.29mmol)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。将混合物在微波反应器中在140℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.18g,90％)。

实施例106

4-氨基-3-[3-(4-氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.452.508 C₂₄H₂₁FN₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁FN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:453.实验值:453.

实施例107

4-氨基-3-[3-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.448.545 C₂₅H₂₄N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₂O₄+H[(M+H)⁺]:449.实验值:449.

中间体47

M.W.483.975 C₂₅H₂₂ClNO₅S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClNO₅S+H[(M+H)⁺]:484.实验值:484.

中间体48

4-氯-3-[3-(3-氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.471.939 C₂₄H₁₉ClFNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₁₉ClFNO₄S+H[(M+H)⁺]:472.实验值:472.

中间体49

4-氯-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.489.929 C₂₄H₁₈ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₁₈ClF₂NO₄S+H[(M+H)⁺]:490.实验值:490.

中间体50

4-氯-3-[3-(2-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.467.975 C₂₅H₂₂ClNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClNO₄S+H[(M+H)⁺]:468.实验值:468.

实施例108

4-氨基-3-[3-(3-氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.452.508 C₂₄H₂₁FN₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁FN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:453.实验值:453.

实施例109

4-氨基-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.470.499 C₂₄H₂₀F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₀F₂N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:471.实验值:471.

实施例110

4-氨基-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.498.005 C₂₅H₂₄ClN₃O₄S

将4-氨基-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例105，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-[5-(4-氯-苄氧基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率28mg,54％)。

实施例111

4-氨基-3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.448.545 C₂₅H₂₄N₂O₄S

向4-苄氧基-2-羟基苯甲醛(2.28g,10.0mmol)(通过以上实施例105的方法制备)和氰基硼氢钠(2.0g,15.9mmol)在四氢呋喃(60mL)中的溶液加入作为指示剂的甲基橙，赋予溶液以黄色；缓慢加入1N HCl水溶液(15mL)，保持溶液为橙色。将混合物室温搅拌过夜。加入水，将混合物用乙酸乙酯萃取三次。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用己烷中的0-40％乙酸乙酯洗脱，获得5-苄氧基-2-甲基-苯酚。(收率0.64g,30％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),5-苄氧基-2-甲基-苯酚(0.23g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,14mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的10-20％乙酸乙酯洗脱而获得3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.17g,35％)。

将氨气鼓泡进入3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.17g,0.36mmol)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。将混合物在微波反应器中在140℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.07g,44％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:449.1530.实验值:449.1529.

实施例112

4-氨基-3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.463.560 C₂₅H₂₅N₃O₄S

将4-氨基-3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例111，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-(5-苄氧基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率27mg,52％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₅N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:464.1639.实验值:464.1642.

实施例113

4-氨基-3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.461.544 C₂₅H₂₃N₃O₄S

在磁力搅拌下将苯甲酰氯(7.75g,55mmol)(Aldrich)在四氢呋喃(25mL)中的溶液滴加到5-氨基-邻-甲酚(3.08g,25mmol)(Aldrich)和三乙胺(8.8mL,62.5mmol)(Aldrich)和THF(50mL)的溶液中。当加入完成时，使得混合物升温至室温，搅拌4小时。将反应混合物用水(400mL)稀释。在搅拌另外30分钟后，收集沉淀。将该物质溶解在THF(120mL)、甲醇(40mL)和1N氢氧化钠水溶液(25mL,25mmol)的混合物中，室温搅拌16小时。然后将混合物用水(100mL)稀释，并减压浓缩，去除有机溶剂。收集形成的沉淀，用水洗涤并干燥，获得N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺，为灰白色粉末。(收率2.14g,37.7％)。进一步浓缩和在静置后形成第二批的N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺。(收率3.66g,64.4％)。

将碳酸钾(0.16g,1.17mmol),N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺(0.24g,1.07mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,14mLl)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续2天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用己烷中的0-20％乙酸乙酯洗脱，获得3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.12g,24％)。

将氨气鼓泡进入3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.21g,0.44mmol)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。将混合物在微波中在140℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.12g,60％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:462.1482.实验值:462.1483.

实施例114

4-氨基-3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.476.558 C₂₅H₂₄N₄O₄S

将4-氨基-3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.11mmol)(来自实施例113，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-(5-苯甲酰基氨基-2-甲基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率23.0mg,44％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:499.1410.实验值:499.1411.

中间体51

4-氯-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.503.956 C₂₅H₂₀ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₀ClF₂NO₄S+H[(M+H)⁺]:504.实验值:504.

中间体52

4-氯-3-[3-(3,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.503.956 C₂₅H₂₀ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体53

4-氯-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.489.929 C₂₄H₁₈ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体54

4-氯-3-[3-(2,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.503.956 C₂₅H₂₀ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

实施例115

4-氨基-3-[3-(2-氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.452.508 C₂₄H₂₁FN₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁FN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:453.实验值:453.

中间体55

4-氯-3-[3-(2,3-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.489.929 C₂₄H₁₈ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体56

M.W.483.975 C₂₅H₂₂ClNO₅S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂ClNO₅S+H[(M+H)⁺]:484.实验值:484.

中间体57

4-氯-3-[3-(5-氯-噻吩-2-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.494.419 C₂₂H₁₇Cl₂NO₄S₂

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₂H₁₇Cl₂NO₄S₂+H[(M+H)⁺]:494.实验值:494.

中间体58

4-氯-3-[3-(4-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.485.966 C₂₅H₂₁ClFNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁ClFNO₄S+H[(M+H)⁺]:486.实验值:486.

中间体59

4-氯-3-[3-(3-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.485.966 C₂₅H₂₁ClFNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁ClFNO₄S+H[(M+H)⁺]:486.实验值:486.

中间体60

4-氯-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.503.956 C₂₅H₂₀ClF₂NO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

中间体61

4-氯-3-[3-甲基-5-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.482.002 C₂₆H₂₄ClNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₄ClNO₄S+H[(M+H)⁺]:482.实验值:482.

中间体62

4-氯-3-[3-甲基-5-(2-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.482.002 C₂₆H₂₄ClNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₄ClNO₄S+H[(M+H)⁺]:482.实验值:482.

中间体63

4-氯-3-[3-(2-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.485.966 C₂₅H₂₁ClFNO₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁ClFNO₄S+H[(M+H)⁺]:486.实验值:486.

中间体64

4-氯-3-[3-(5-氯-噻吩-2-基甲氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.508.446 C₂₃H₁₉Cl₂NO₄S₂

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₁₉Cl₂NO₄S₂+H[(M+H)⁺]:508.实验值:508.

实施例116

4-氨基-3-[3-(2,3-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.470.499 C₂₄H₂₀F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

实施例117

4-氨基-3-[3-(3-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.466.535 C₂₅H₂₃FN₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃FN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:467.实验值:467.

实施例118

4-氨基-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.484.526 C₂₅H₂₂F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₂F₂N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:485.实验值:485.

实施例119

4-氨基-3-[3-(3,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.484.526 C₂₅H₂₂F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

实施例120

4-氨基-3-[3-(5-氯-噻吩-2-基甲氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.489.016 C₂₃H₂₁ClN₂O₄S₂

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₁ClN₂O₄S₂+H[(M+H)⁺]:489.实验值:489.

中间体65

M.W.478.958 C₂₅H₁₉ClN₂O₄S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₁₉ClN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:479.实验值:479.

实施例121

4-氨基-3-[3-(3-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.448.545 C₂₅H₂₄N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:449.实验值:449.

中间体66

4-氯-3-[3-(3-甲氧基-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.498.002 C₂₆H₂₄ClNO₅S

根据上文一般方法6制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₄ClNO₅S+H[(M+H)⁺]:498.实验值:498.

实施例122

4-氨基-3-[3-(5-氯-噻吩-2-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.474.989 C₂₂H₁₉ClN₂O₄S₂

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₂H₁₉ClN₂O₄S₂+H[(M+H)⁺]:475.实验值:475.

实施例123

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.470.499 C₂₄H₂₀F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

实施例124

4-氨基-3-[3-(4-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.466.535 C₂₅H₂₃FN₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃FN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:467.实验值:467.

实施例125

4-氨基-3-[3-(2,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.484.526 C₂₅H₂₂F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

实施例126

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.484.526 C₂₅H₂₂F₂N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

实施例127

4-氨基-3-[3-甲基-5-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.462.572 C₂₆H₂₆N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₆N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:463.实验值:463.

实施例128

4-氨基-3-[3-甲基-5-(2-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.462.572 C₂₆H₂₆N₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₆H₂₆N₂O₄S+H[(M+H)⁺]:463.实验值:463.

实施例129

4-氨基-3-[3-(2-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.466.535 C₂₅H₂₃FN₂O₄S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃FN₂O₄S+H[(M+H)⁺]:467.实验值:467.

实施例130

4-氨基-3-[3-(2-甲氧基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.464.544 C₂₅H₂₄N₂O₅S

根据上文一般方法7制备该化合物。

LRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄N₂O₅S+H[(M+H)⁺]:465.实验值:465.

实施例131

4-氨基-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.591.691 C₃₀H₃₃N₅O₆S

在冰-水浴中冷却下将N,N-二异丙基乙胺(15.51g,120mmol)(Aldrich)加入3-硝基苯酚(13.91g,100mmol)(Aldrich)在二氯甲烷(50mL)中的悬浮液。然后滴加氯甲基甲基醚(15.19mL,200mmol)(Aldrich)，将混合物室温搅拌3小时。将混合物然后用盐水(30mL)和水(30mL)的混合物洗涤，接着用0.1N HCl(3X20mL)和盐水(2X20mL)洗涤。将水层用二氯甲烷(30mL)反洗。将有机溶液合并,干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。将残余物过滤通过硅胶(Biotage 40M)，用二氯甲烷洗脱。合并级分并浓缩而获得甲氧基甲氧基-3-硝基-苯，为淡黄色油。(收率17.15g,93.6％)。

向甲氧基甲氧基-3-硝基-苯(5.06g,27.6mmol)在甲醇(50mLl)中的溶液加入10％Pd/C(0.5g)(Aldrich)。将混合物氢化过夜。将混合物通过硅藻土并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用己烷中的30％乙酸乙酯洗脱，获得3-甲氧基甲氧基-苯胺。(收率3.45g,15％)。

向甲基-3-羟基苯甲酸酯(3.04g,20.0mmol)在二甲基甲酰胺(60mL)中的溶液加入4-(2-氯乙基)吗啉(5.58g,30.0mmol)(Aldrich)和碳酸钾(8.30g,60.0mmol)。将混合物在80℃加热1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用二氯甲烷中的10％甲醇洗脱，获得3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酸甲酯。(收率5.63g,100％)。

将氢氧化钠水溶液(1N,32.0mL,32mmol)加入3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酸甲酯(5.31g,20.0mmol)在甲醇(20mL)中的溶液，将混合物在回流下加热18小时。将反应混合物浓缩并与甲苯共沸。用二乙醚洗涤固体残余物。将固体溶解在水中并且用盐酸(2.5N)处理至pH2。浓缩水溶液，然后溶解在二氯甲烷和过滤。浓缩该溶液而获得3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酸。(收率1.05g,21％)。

向3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酸(1.05g,4.18mmol),HBTU(1.90g,5.01mmol)(Oakwood)和二异丙基乙胺(1.82mL,10.45mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(15.0mL)中的混合物加入3-甲氧基甲氧基-苯胺(0.77g.5.01mmol)。将混合物室温搅拌1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(MgSO₄)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱而获得N-(3-甲氧基甲氧基-苯基)-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰胺。(收率0.39g,24％)。

向N-(3-甲氧基甲氧基-苯基)-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰胺(0.39g,1.0mmol)在四氢呋喃/2-丙醇(1:1,10mL)中的溶液加入在二噁烷中的4M HCl(2mL)(Aldrich)。将反应混合物在室温下搅拌18小时。浓缩溶液。将残余物用乙酸乙酯稀释，用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并浓缩。将残余物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得N-(3-羟基-苯基)-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰胺。(收率0.20g,57％)。

将碳酸铯(0.20g,0.61mmol),N-(3-羟基-苯基)-3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰胺(0.14g,0.41mmol)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,17.5mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.14g,0.41mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续2天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。浓缩水相。将残余物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氯-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.13g,54％)。

将氨气鼓泡进入4-氯-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.13g,0.44mmol)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。将混合物在140℃在微波中加热4小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.05g,38％)。

将4-氨基-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.09mmol)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并且在160℃在微波反应器中加热2小时。反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱，获得4-氨基-3-{3-[3-(2-吗啉-4-基-乙氧基)-苯甲酰基氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率20.0mg,39％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₃₀H₃₃N₅O₆S+H[(M+H)⁺]:592.2225.实验值:592.2220.

实施例132

4-氨基-3-(3-甲基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.385.445 C₁₉H₁₉N₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₉H₁₉N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:386.1169.实验值:386.1170.

实施例133

4-氨基-3-(3-环丙基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.411.483 C₂₁H₂₁N₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₁H₂₁N₃O₄S+Na[(M+Na)⁺]:434.1145.实验值:434.1147.

实施例134

4-氨基-3-(3-环戊基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.439.537 C₂₃H₂₅N₃O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₅N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:440.1639.实验值:440.1637.

实施例135

4-氨基-3-(3-环己基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.468.579 C₂₄H₂₈N₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₈N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:469.1904.实验值:469.1905.

实施例136

4-氨基-3-[3-(四氢-吡喃-4-基氨基甲酰基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.470.551 C₂₃H₂₆N₄O₅S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₆N₄O₅S+H[(M+H)⁺]:471.1697.实验值:471.1699.

实施例137

4-氨基-3-(3-甲基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.400.460 C₁₉H₂₀N₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₉H₂₀N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:401.1278.实验值:401.1281.

实施例138

4-氨基-3-(3-环丙基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.426.498 C₂₁H₂₂N₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₁H₂₂N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:427.1435.实验值:427.1437.

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₁H₂₂N₄O₄S+Na[(M+Na)⁺]:449.1254.实验值:449.1257.

实施例139

4-氨基-3-(3-环戊基氨基甲酰基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.454.552 C₂₃H₂₆N₄O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₆N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:455.1748.实验值:455.1752.

实施例140

4-氨基-3-(5-甲基氨基甲酰基-吡啶-3-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.386.433 C₁₈H₁₈N₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₈H₁₈N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:387.1122.实验值:387.1122.

实施例141

4-氨基-3-(5-甲基氨基甲酰基-吡啶-3-基氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.401.447 C₁₈H₁₉N₅O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₈H₁₉N₅O₄S+Na[(M+Na)⁺]:424.1050.实验值:424.1052.

实施例142

4-氨基-3-[3-(2-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.481.550 C₂₅H₂₄FN₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₅H₂₄FN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:482.实验值:482.

实施例143

4-氨基-3-[3-(3,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.499.541 C₂₅H₂₃F₂N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₅H₂₃F₂N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:500.实验值:500.

实施例144

4-氨基-3-[3-甲基-5-(2-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.477.587 C₂₆H₂₇N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₆H₂₇N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:478.实验值:478.

实施例145

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.485.513 C₂₄H₂₁F₂N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₄H₂₁F₂N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:486.实验值:486.

实施例146

4-氨基-3-[3-(3-氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.481.550 C₂₅H₂₄FN₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₅H₂₄FN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:482.实验值:482.

实施例147

4-氨基-3-[3-(2,5-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.499.541 C₂₅H₂₃F₂N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₅H₂₃F₂N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:500.实验值:500.

实施例148

4-氨基-3-[3-甲基-5-(4-甲基-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.477.587 C₂₆H₂₇N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₆H₂₇N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:478.实验值:478.

实施例149

4-氨基-3-[3-(3,4-二氟-苄氧基)-5-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.499.541 C₂₅H₂₃F₂N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₅H₂₃F₂N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:500.实验值:500.

实施例150

4-氨基-3-[3-(2,3-二氟-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

M.W.485.513 C₂₄H₂₁F₂N₃O₄S

根据上文一般方法8制备该化合物。

LRMS m/z理论值C₂₄H₂₁F₂N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:486.实验值:486.

实施例151

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸

M.W.453.91 C₂₂H₁₆ClN₃O₄S

将氢氧化钠水溶液(1N,1.0mL,1.0mmol)加入4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.16g,0.33mmol)(来自实施例70，见上文)在四氢呋喃-甲醇(8mL,3:1)中的溶液，将混合物在40℃加热2天。将反应混合物浓缩并与甲苯共沸。将固体残余物用热乙酸乙酯洗涤。然后将固体悬浮在水中并用盐酸(1N,2mL)处理。在搅拌30分钟后，收集固体，用水和然后用二乙醚洗涤，干燥，获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸。(收率0.15g,100％)。

实施例152

4-氨基-3-[3-(嘧啶-5-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5066450-000 37010-93-5 M.W.436.493 C₂₂H₂₀N₄O₄S

根据在上文实施例1中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₂H₂₀N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:437.1278.实验值:437.1278.

实施例153

4-氨基-3-[3-(嘧啶-5-基甲氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5066451-000 37010-95-1 M.W.451.508 C₂₂H₂₁N₅O₄S

根据在上文实施例3中所述的方法制备该化合物。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₂H₂₁N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:452.1387.实验值:452.1385.

中间体67

4-氯-3-(3-硝基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5027750-000 37304-5A M.W.392.821 C₁₇H₁₃ClN₂O₅S

将3-硝基苯酚(457mg,3.29mmol)(Aldrich)和碳酸钾粉末(498mg,3.60mmol)在无水THF(10mL)和DMF(5mL)中的混合物在50℃搅拌15分钟，之后加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.00g,2.99mmol)(来自中间体8，见上文)在THF(10mL)中的溶液。在50℃搅拌反应3小时，将获得的混合物浓缩以去除大部分溶剂。将残余物溶解在EtOAc(200mL)中，用水(2x25mL)和盐水(25mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄),过滤并浓缩。将粗产物通过柱色谱法(CH₂Cl₂/MeOH,98/2至90/10)纯化，获得4-氯-3-(3-硝基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率911mg,78％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₇H₁₃ClN₂O₅S+H[(M+H)⁺]:393.0307.实验值:393.0308.

中间体68

3-(3-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5134429-000 37304-92A M.W.362.838 C₁₇H₁₅ClN₂O₃S

向4-氯-3-(3-硝基-苯氧基甲基)-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(503.6mg,1.28mmol)(来自中间体67，见上文)在THF(175mL)中的溶液加入10％Pd/C(253mg)(Aldrich)，将混合物在氢气气氛(40psi)中搅拌4小时。滤去Pd/C，浓缩滤液，获得粗产物，其通过柱色谱法(己烷/EtOAc,80/20至50/50)纯化，获得3-(3-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率278mg,60％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₁₇H₁₅ClN₂O₃S+H[(M+H)⁺]:363.0565.实验值:363.0565.

中间体69

4-氯-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5134433-000 37304-94A M.W.537.444 C₂₃H₁₈Cl₂N₂O₅S₂

向3-(3-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(96.9mg,0.267mmol)(来自中间体68，见上文)在THF(3mL)中的溶液加入二异丙基乙胺(78mg,0.603mmol)和然后加入4-氯苯磺酰氯(64.7mg,0.297mmol)(Aldrich)。室温搅拌反应30分钟，之后浓缩以去除溶剂。将残余物用EtOAc(50mL)稀释，用1N NaOH水溶液(10mL)、盐水(2x10mL)洗涤，干燥(Na₂SO₄),过滤,并浓缩。将残余物通过柱色谱法(己烷/EtOAc,80/20至60/40)纯化，获得4-氯-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率95.3mg,66％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₁₈Cl₂N₂O₅S₂+H[(M+H)⁺]:537.0107.实验值:537.1015.

实施例154

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5070056-000 37304-96A M.W.518.014 C₂₃H₂₀ClN₃O₅S₂

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(89.6mg,0.167mmol)(来自中间体69，见上文)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。在微波反应器中将混合物在密封容器中在130℃加热1.5小时。浓缩反应混合物，将残余物通过柱色谱法(CH₂Cl₂/MeOH,98/2)纯化而获得4-氨基-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色固体。(收率76.5mg,88.6％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₀ClN₃O₅S₂+H[(M+H)⁺]:518.0606.实验值:518.0602.

实施例155

4-氨基-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5070057-000 37304-97A M.W.533.029 C₂₃H₂₁ClN₄O₅S₂

将4-氨基-3-[3-(4-氯-苯磺酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(54.4mg,0.105mmol)(来自实施例154，见上文)在二甲亚砜(1mL)和乙醇胺(3mL)(Aldrich)中的悬浮液在135℃在微波反应器中加热2小时。在冷却至室温后，滤去沉淀，用MeOH洗涤并干燥，获得3-[3-(4-氯-苯甲酰基氨基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)酰胺，为白色固体。(收率41.7mg,74.5％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₁ClN₄O₅S₂+H[(M+H)⁺]:533.0715.实验值:533.0710.

中间体70

2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯酚

36721-167A M.W.269.129 C₁₃H₁₀Cl₂O₂

将4-氯间苯二酚(2.89g,20mmol)(Aldrich),氟化钾(2.32g,40mmol)(Aldrich)和4-氯苄基氯(4.83g,30mmol)(Aldrich)在乙腈中的混合物在90℃加热24小时。在冷却至室温，将混合物在乙酸乙酯(2X100mL)和水(2X100mL)之间分配。将有机层用盐水(100mL)洗涤，合并,干燥(MgSO₄),过滤并浓缩。将残余物通过快速色谱法(Biotage 40L,乙酸乙酯-己烷作为溶剂)纯化。没有获得好的纯化。将级分合并并浓缩。将残余物通过快速色谱法(Biotage 40L,二氯甲烷-己烷1:1作为溶剂)再纯化，以两批获得产物，为白色晶体。(收率1.93g,35.9％)。

中间体71

4-氯-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.522.838 C₂₄H₁₈Cl₃NO₄S

将碳酸铯(0.50g,1.53mmol),2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯酚(0.30g,1.12mmol)(来自中间体70，见上文)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,14mL)中的悬浮液在70℃加热2小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.34g,1.02mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续1天。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用在己烷中的20％乙酸乙酯洗脱而获得4-氯-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.12g,23％)。

实施例156

4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.503.408 C₂₄H₂₀Cl₂N₂O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.12g,0.23mmol)(来自中间体71，见上文)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。将混合物在微波反应器中在140℃加热2小时。在浓缩后，残余物通过快速色谱法纯化，用在二氯甲烷中的2-5％乙酸乙酯洗脱，获得4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.10g,83％)。

实施例157

4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5092167-000 37009-215A M.W.518.423 C₂₄H₂₁Cl₂N₃O₄S

将4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.04g,0.08mmol)(来自实施例156，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)处理并在160℃在微波反应器中加热2小时。过滤沉淀，用甲醇洗涤并干燥，获得4-氨基-3-[2-氯-5-(4-氯-苄氧基)-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率20mg,49％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₁Cl₂N₃O₄S+H[(M+H)⁺]:518.0703.实验值:518.0706.

中间体72

4-氯-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5134444-000 37304-110A M.W.467.935 C₂₃H₁₈ClN₃O₄S

根据在以上中间体69中所述的类似方法，由3-(3-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自中间体68，见上文)和吡啶甲酰氯盐酸盐(TCI-US)制备4-氯-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为灰白色固体。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₁₈ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:468.0780.实验值:468.0779.

实施例158

4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5092195-000 37304-111A M.W.448.504 C₂₃H₂₀N₄O₄S

根据在以上实施例154中所述的类似方法，从4-氯-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自中间体72，见上文)制备4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为灰白色固体。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₀N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:449.1278.实验值:449.1279.

实施例159

4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5092196-000 37304-112P M.W.463.519 C₂₃H₂₁N₅O₄S

根据在以上实施例155中所述的类似方法，由4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自实施例158，见上文)制备4-氨基-3-{3-[(吡啶-2-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为灰白色固体。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₁N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:464.1387.实验值:464.1388.

中间体73

4-氯-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5137038-000 37304-124A M.W.481.962 C₂₄H₂₀ClN₃O₄S

根据在以上中间体69中所述的类似方法，由3-(3-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(中间体68，见上文)和6-甲基-烟酰氯制备4-氯-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2c]吡啶-7-羧酸乙酯，为灰白色固体，所述6-甲基-烟酰氯由6-甲基-烟酸(来自Aldrich)和草酰氯(Aldrich)制备。

实施例160

4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5092201-000 37304-126A M.W.462.531 C₂₄H₂₂N₄O₄S

根据在以上实施例154中所述的类似方法，由4-氯-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自中间体73，见上文)制备4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为灰白色固体。

实施例161

4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5092203-000 37304-127 M.W.477.546 C₂₄H₂₃N₅O₄S

根据在以上实施例155中所述的类似方法，由4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自实施例160，见上文)制备4-氨基-3-{3-[(6-甲基-吡啶-3-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为灰白色固体。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₄H₂₃N₅O₄S+H[(M+H)⁺]:478.1544.实验值:478.1538.

中间体74

4-氯-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5134441-000 37304-107A M.W.467.935 C₂₃H₁₈ClN₃O₄S

根据在以上中间体69中所述的类似方法，由3-(3-氨基-苯氧基甲基)-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(中间体68，见上文)制备4-氯-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为灰白色固体。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₁₈ClN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:468.0780.实验值:468.0777.

实施例162

4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5092660-000 37304-108A M.W.448.504 C₂₃H₂₀N₄O₄S

根据在以上实施例154中所述的类似方法，由4-氯-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自中间体74，见上文)制备4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为灰白色固体。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₃H₂₀N₄O₄S+H[(M+H)⁺]:449.1278.实验值:449.1276.

实施例163

4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5092667-000 37304-109A M.W.463.519 C₂₃H₂₁N₅O₄S

根据在以上实施例155中所述的类似方法，由4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(来自实施例162，见上文)制备4-氨基-3-{3-[(吡啶-4-羰基)-氨基]-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为灰白色固体。

中间体75

3-氯-4-氟-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺

M.W.279.701 C₁₄H₁₁ClFNO₂

在磁力搅拌下和在冰水浴中冷却下将3-氯-4-氟苯甲酰氯(21.23g,110mmol)(Avocado)在四氢呋喃(50mL)中的溶液滴加到5-氨基-邻-甲酚(6.16g,50mmol)(Aldrich)和三乙胺(17.5mL,125mmol)(Aldrich)和THF(50mL)的溶液中。当加入完成后，使得混合物升温至室温并搅拌16小时。将反应混合物用水(125mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(125mL)稀释。在搅拌另外30分钟后，收集沉淀，获得粗制3-氯-4-氟-苯甲酸5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯酯，为灰白色粉末。(收率21.83g,101％)。

将3-氯-4-氟-苯甲酸5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯酯(3.93g,9mmol)溶解在四氢呋喃(25mL),甲醇(50mL)和1N氢氧化钠水溶液(9mL,9mmol)的混合物中。室温搅拌混合物18小时。减压浓缩混合物以去除大部分有机溶剂。将获得的悬浮液用水(45mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(5mL)稀释。在静置30分钟后，收集沉淀和用水洗涤，干燥，获得粗制3-氯-4-氟-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺，为白色粉末。(收率2.59g,103％)。

中间体76

4-氯-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.533.410 C₂₅H₁₉Cl₂FN₂O₄S

将碳酸铯(0.73g,2.24mmol),3-氯-4-氟-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺(0.46g,1.64mmol)(来自中间体75，见上文)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,21mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.50g,1.49mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)并浓缩。将残余物用热二氯甲烷/乙酸乙酯洗涤并干燥，获得4-氯-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.14g,18％)。

实施例164

4-氨基-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

RO5093562-000 37009-220A M.W.513.979 C₂₅H₂₁ClFN₃O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.14g,0.26mmol)(来自中间体76，见上文)在2-丙醇(15mL)中的悬浮液20分钟。将混合物在微波反应器中在140℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.09g,69％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₁ClFN₃O₄S+H[(M+H)⁺]:514.0998.实验值:514.0995.

中间体77

3-氯-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺

在磁力搅拌和在冰水浴中冷却下将3-氯苯甲酰氯(32.81g,187.5mmol)(Aldrich)在四氢呋喃(50mL)中的溶液滴加到5-氨基-邻-甲酚(9.24g,75mmol)(Aldrich)和三乙胺(31.43mL,225mmol)(Aldrich)和THF(150mL)的溶液中。当加入完成后，使得混合物升温至室温，搅拌16小时。用水(200mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)稀释反应混合物。再搅拌另外30分钟，收集沉淀而获得粗制3-氯-苯甲酸5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯酯，为灰白色粉末。(收率31.74g,106％)。

将粗制3-氯-苯甲酸5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯酯(11.42g,28.5mmol)溶解在四氢呋喃(70mL)、甲醇(140mL)和1N氢氧化钠水溶液(28.5mL,28.5mmol)的混合物中。将混合物室温搅拌18小时。减压浓缩混合物以去除大部分有机溶剂。将获得的悬浮液用水(90mL)和饱和碳酸氢钠水溶液(10mL)稀释。在静置30分钟，收集沉淀，用水洗涤，干燥，获得3-氯-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺，为灰白色粉末。(收率6.06g,81.2％)。

中间体78

4-氯-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.515.419 C₂₅H₂₀Cl₂N₂O₄S

将碳酸铯(0.73g,2.24mmol),3-氯-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺(0.43g,1.64mmol)(来自中间体77，见上文)在四氢呋喃/N,N-二甲基甲酰胺(5:2,21mL)中的悬浮液在70℃加热3小时。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.50g,1.49mmol)(来自中间体8，见上文)。加热持续18小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用乙酸乙酯(1X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)并浓缩。将残余物用热二氯甲烷/乙酸乙酯洗涤，干燥，获得4-氯-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.35g,45％)。

实施例165

4-氨基-3-[5-(3-氯-4-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.495.989 C₂₅H₂₂ClN₃O₄S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-[5-(3-氯-4-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.10g,0.19mmol)(来自中间体78，见上文)在2-丙醇(15mL)中的溶液20分钟。将混合物在微波反应器中在140℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯，为白色粉末。(收率0.04g,43％)。

实施例166

4-氨基-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5093565-000 37009-222A M.W.511.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₄S

将4-氨基-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.04g,0.08mmol)(来自实施例165，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理，在160℃在微波反应器中加热2小时。将反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-[5-(3-氯-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率8.0mg,20％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₃ClN₄O₄S+H[(M+H)⁺]:511.1202.实验值:511.1198.

实施例167

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺

RO5093566-000 37009-223A M.W.570.072 C₂₇H₂₈ClN₅O₅S

将4-氨基-3-[5-(3-氯-4-氟-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.05g,0.10mmol)(来自实施例164，见上文)在二甲亚砜(0.5mL)中的溶液用乙醇胺(1.5mL)(Aldrich)处理并且在160℃在微波反应器中加热2小时。反应混合物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺，为白色粉末。(收率37.0mg,67％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₇H₂₈ClN₅O₅S+H[(M+H)⁺]:570.1573.实验值:570.1566.

实施例167a

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基)-2-甲基-苯氧基甲基]-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺甲苯-4-磺酸盐

RO5093566-001 37976-056A M.W.570.072+172.204C₂₇H₂₈ClN₅O₅S·C₇H₈O₃S

向4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺(51.6mg,0.09mmol)(来自实施例167，见上文)在甲醇(6mL)中的溶液用甲苯-4-磺酸水合物(18.9mg,0.10mmol)(Aldrich)处理，在40℃加热30分钟。浓缩溶液。将残余物用二乙醚洗涤,溶解在水中并冻干而获得4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(2-羟基-乙基)-酰胺,甲苯-4-磺酸盐。(收率56.0mg,86％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₇H₂₈ClN₅O₅S+H[(M+H)⁺]:570.1573.实验值:570.1567.

中间体79

3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺

M.W.320.778 C₁₆H₁₇ClN₂O₃

将3-氯-4-氟-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺(1.0g,3.58mmol)(来自中间体75，见上文)在二甲亚砜(5.0mL)中的溶液用乙醇胺(10.0mL)(Aldrich)处理并且在140℃在微波反应器中加热50分钟。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将水相用2N盐酸酸化。过滤沉淀，用水洗涤并干燥。将水相用乙酸乙酯(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)并浓缩。合并两个固体样品并干燥，获得3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺。(收率1.13g,98％)。

中间体80

M.W.574.487 C₂₇H₂₅Cl₂N₃O₅S

将碳酸钾(0.56g,4.05mmol),3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-N-(3-羟基-4-甲基-苯基)-苯甲酰胺(1.13g,4.30mmol)(来自中间体79，见上文)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的悬浮液室温搅拌10分钟。加入3-溴甲基-4-氯-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(1.44g,4.30mmol)(来自中间体8，见上文)。持续搅拌18小时。将反应混合物在二氯甲烷和水之间分配。过滤沉淀，用水洗涤并干燥。将水相用二氯甲烷(2X)萃取。合并的有机相用水和盐水洗涤,干燥(硫酸镁)并浓缩。残余物通过快速色谱法纯化，用己烷中的40-100％乙酸乙酯洗脱，获得第二部分的产物。将合并的固体干燥，获得4-氯-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率1.68g,83％)。

实施例168

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯

M.W.555.057 C₂₇H₂₇ClN₄O₅S

将氨气鼓泡进入4-氯-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.96g,1.67mmol)(来自中间体80，见上文)在2-丙醇(70mL)中的溶液20分钟。将混合物在微波反应器中在140℃加热2小时。将反应混合物浓缩。将残余物用热甲醇洗涤,过滤和干燥而获得4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯。(收率0.83g,89％)。

中间体81

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸

M.W.527.003 C₂₅H₂₃ClN₄O₅S

将氢氧化钠水溶液(2N,11.0mL,5.5mmol)加入4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸乙酯(0.83g,1.50mmol)(来自实施例168，见上文)在四氢呋喃/甲醇(3:1,28mL)中的溶液中，将混合物在50℃加热18小时。将反应混合物浓缩并与甲苯共沸。然后将固体悬浮在水中，用盐酸(2N)处理。在搅拌30分钟后，收集固体，用水洗涤，干燥，获得4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基-甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸，为白色粉末。(收率0.90g,95％)。

实施例169

4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸酰胺

RO5132722-000 37976-045B M.W.526.018 C₂₅H₂₄ClN₅O₄S

向4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸(0.30g,0.57mmol)(来自中间体81，见上文),HBTU(0.27g,0.71mmol)(Advanced ChemTech)和二异丙基乙胺(0.0.24mL,1.43mmol)(Aldrich)在N,N-二甲基甲酰胺(15mL)中的混合物加入氯化铵粉末(39.0mg,0.73mmol)。将混合物室温搅拌1天，然后浓缩。将残余物通过C18柱色谱法纯化，用乙腈/水洗脱而获得作为粉末的4-氨基-3-{5-[3-氯-4-(2-羟基-乙基氨基)-苯甲酰基氨基]-2-甲基-苯氧基甲基}-噻吩并[3,2-c]吡啶-7-羧酸酰胺。(收率0.17g,57％)。

HRMS(ES⁺)m/z理论值C₂₅H₂₄ClN₅O₄S+H[(M+H)⁺]:526.1311.实验值:526.1306.

实施例170

体外激酶测定

使用HTRF测定，以6H-MEK为底物(剂量反应)，用c-Raf测定体外酶活性。

测定原理:

该测定使用6H-MEK作为底物。在c-Raf磷酸化后，用兔抗-磷酸-MEK1/2、Eu-标记的抗-兔和APC-标记的抗-6H抗体检测磷酸化的6H-MEK。

试剂和仪器:

c-Raf酶是具有EE-标记的、克隆的人c-Raf并被磷酸化(在杆状病毒Hi5细胞中与v-src-FLAG共表达)并贮存在-15℃。将野生型全长6H-MEK用作底物，4.94mg/mL(154.4μM，假定MW为32kD)并贮存在-15℃。

将下列抗体用于检测步骤：兔α-P-(Ser 217/221)-MEK-1/2 Ab(来自CellSignaling,目录号9121S,Lot 4)；Eu-α-兔IgG(来自Wallac,目录号AD0083,批号107557,标记日期06/21/02,8Eu/蛋白,580μg/mL,3.63μM)；α-6H-SureLight-APC(来自Martek,目录号AD0059H,批号E011AB01,3.15μM)。

用来自PerkinElmer的Envision来读取测定，HTRF读取模式，412镜像。

用Costar 384全黑板进行测定，120μL(目录号3710)。

将测试化合物分配在Weidman 384聚丙烯板(REMP)中。

测定步骤：

制备激酶测定缓冲液(KAB):50mM HEPES(HyClone)pH7,10mM MgCl₂,1mM DTT,0.1mM Na₃V₂O₄,和0.2mg/mL BSA.

在KAB中制备6H-MEK(150nM)。加40μL/孔至Weidman平板。

在KAB中制备ATP(66μM)。

在KAB中制备c-Raf(60nM)。加25μL/孔至Weidman平板。

在DMSO中稀释化合物至2.4mM。在DMSO中进行10-点3x稀释。取出2.5ul/孔的DMSO溶液并加至27.5μL/孔的(3)中的ATP溶液。

将12μL/孔6H-MEK加至Cybiwell上的测定平板，接着加入6μL/孔的(5)中的溶液和6μL/孔的(4)中的溶液，在MEK磷酸化期间DMSO浓度为2.1％。

在37℃温育30分钟。

在AB1(50mM HEPES pH7,0.2mg/mL BSA,和53mM EDTA)中制备兔α-P-(Ser 217/221)-MEK-1/2 Ab(1:225，来自贮液)。

为了终止反应，加6μL/孔的(8)的溶液到测定平板中并在37℃温育30分钟。

在AB2(50mM HEPES pH7和0.2mg/mL BSA)中制备Eu-α-兔IgG(9nM)和α-6H-SureLight-APC(120nM)。

将6μL/孔的来自(10)的溶液加入测定平板。

为了测定光谱串话干扰(cross talk)因子，根据步骤(6)至(9)制备2个样品。对于空白样品，加入6μL/孔的AB2。对于串话干扰因子样品，加入6μL/孔的Eu-抗兔IgG(9nM)。

在37℃温育1小时。

在Envision上在615nm和665nm读取HTRF信号。在光谱串话干扰校正后将HTRF信号归一化。

本发明的化合物在上述测定中显示0.001至50μM的C-Raf IC₅₀值。代表性的IC₅₀值有，例如：

实施例2 0.836μM

实施例7 0.022μM

实施例18 0.324μM

实施例14 2.016μM

Claims

1.式(I)的化合物

或其药用盐，

其中

R¹选自由下列各项组成的组：氢,C_1-6-烷基,卤素,氰基,三氟甲基,C_1-6-烷氧基和NO₂；

R²选自由下列各项组成的组：C_1-7-链烯基,C_1-7-炔基,甲基磺酰基,氢,C_1-6-烷基,卤素,氰基,三氟甲基,C_1-6-烷氧基,NO₂；酰氨基,酯基,氨基甲酰基,氨基甲酸酯基,脲基,和被-OR⁴或-NR⁴R⁵取代的C_1-6-烷基；

其中所述氨基甲酰基是指具有下式的取代基

其中所述酰氨基是指具有下式的取代基

所述酯基是指具有下式的取代基

所述氨基甲酸酯基指具有下式的取代基

和

所述脲基指具有下式的取代基

其中所述氨基甲酰基、酰氨基、酯基、氨基甲酸酯基和脲基与A环的连接位点用*表示，

R³选自由下列各项组成的组：氢,C_1-6-烷基,被-OR⁴取代的C_1-6-烷基和-NR⁴R⁵；

R⁴和R⁵选自氢,C_1-6-烷基,或被-OH或C_1-6-烷氧基取代的C_1-6-烷基；

X-Y选自由下列各项组成的组：-OCH₂-,-CH₂O-,-NHCO-,-CONH-,-O-,-OCH₂CH₂-,-CH₂OCH₂,-CH₂CH₂O-,-CF＝CH-,-CH＝CF-,-NH-,-NHCH₂-,-CH₂NH-,-SCH₂-,-CH₂S-,-SOCH₂-,-CH₂SO-,-SO₂CH₂-,-CH₂SO₂-,-S-,-CH＝CH-和C_1-6-烷基；

W是–O-或-NH-；

环A是苯基；并且

环B是苯基。

2.权利要求1所述的化合物，其中基团-X-Y-选自–OCH₂-,-CH₂O-,-NHCO-和–CONH-。

3.权利要求2所述的化合物，其中R¹选自由下列各项组成的组：–CH₃,-Cl和–F。

4.权利要求3所述的化合物，其中R²选自由下列各项组成的组：–Cl,-F,-CF₃,-CONH₂,C_1-6-烷氧基,和C_1-6-烷基。

5.权利要求1至4任何一项所述的化合物，其用于治疗癌症。

6.权利要求1至4任何一项所述的化合物，其用于治疗结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、子宫颈癌、肾癌或肾脏癌、白血病或淋巴瘤。

7.药物制剂，其包含权利要求1至4任何一项所述的化合物以及药用载体或赋形剂。

8.权利要求7所述的药物制剂，其用于治疗癌症。

9.权利要求7所述的药物制剂，其用于治疗结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、子宫颈癌、肾癌或肾脏癌、白血病或淋巴瘤。

10.权利要求1至4任何一项所述的化合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗癌症。

11.权利要求1至4任何一项所述的化合物在制备药物中的应用，所述药物用于治疗结直肠癌、乳腺癌、肺癌、前列腺癌、胰腺癌、胃癌、膀胱癌、卵巢癌、黑素瘤、成神经细胞瘤、子宫颈癌、肾癌或肾脏癌、白血病或淋巴瘤。