CN104277050B - 一种制备莫西克汀的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种制备莫西克汀的方法，该方法包括对尼莫克汀依次进行保护反应、氧化反应、肟化反应和脱保护反应，从而得到莫西克汀；其中，所述保护反应中所用的保护剂为叔丁基二甲基氯硅烷，并且在进行所述肟化反应后，先将该肟化反应得到的固体形式的粗产物进行结晶，再对所获得的结晶物进行所述脱保护反应。本发明的方法提高了产品含量，进而降低了后续利用大孔树脂纯化的难度，并且提高了上柱量，减少了柱层析的次数，保持甚至提高了最终产品的纯度，并且降低了生产成本。

Description

一种制备莫西克汀的方法

技术领域

本发明属于药物化学领域，具体涉及一种制备莫西克汀的方法。

背景技术

莫西克汀（Moxidectin）的分子式为C₃₇H₅₃NO₈，分子量为639.83，CAS号为113507-06-5，其结构式为：

莫西克汀是一种目前广泛用于兽医临床的广谱、高效、新型大环内酯类驱虫抗生素，尤其对线虫(成虫和幼虫)和节肢动物有很好的抗虫活性，即使在极低的剂量下也是如此。莫西克汀对动物有很好的安全性。莫西克汀可以通过使链霉素发酵产生尼莫克汀，然后再以尼莫克汀为原料通过半合成反应而获得。

中国专利申请公开CN101372492A对由尼莫克汀通过化学反应来合成莫西克汀进行了描述。该方法使链霉素发酵产生含有尼莫克汀的发酵液，然后通过固液分离、浸泡、上大孔吸附树脂层析分离，层析液浓缩反萃得到尼莫克汀粗品。之后对尼莫克汀粗品进行上保护反应，再次上大孔树脂层析分离。层析液浓缩反萃后进行氧化、脱保护、肟化反应，肟化后的产物第三次上大孔树脂层析分离，得到的层析液浓缩后进行结晶。然而，该在专利文献中，整个合成反应中有两次树脂层析，操作步骤较复杂，极性有机溶媒的使用量大，溶媒回收压力较大。

发明内容

为解决上述现有技术中所存在的问题，本发明提供了一种制备莫西克汀的方法。

具体而言，本发明提供了：

（1）一种制备莫西克汀的方法，该方法包括对尼莫克汀依次进行保护反应、氧化反应、肟化反应和脱保护反应，从而得到莫西克汀；其中，所述保护反应中所用的保护剂为叔丁基二甲基氯硅烷，并且在进行所述肟化反应后，先将该肟化反应得到的固体形式的粗产物进行结晶纯化，再对所获得的结晶物进行所述脱保护反应；

其中所述结晶纯化包括：

1）制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80%(v/v)的极性有机溶剂的水溶液，然后去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40%(v/v)的所述极性有机溶剂的水溶液；

2）用低极性有机溶剂对所述步骤1）中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1。

（2）根据（1）所述的方法，其中，在所述步骤1）中，所述极性有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种，其中优选为乙醇。

（3）根据（1）所述的方法，其中，在所述步骤2）中，所述低极性有机溶剂选自甲苯、庚烷、环己烷、正己烷中的一种或多种，其中优选为庚烷。

（4）根据（1）所述的方法，其中，在所述步骤2）中，所述结晶在10℃至20℃下进行。

（5）根据（1）所述的方法，其中，所述保护反应所采用的所述叔丁基二甲基氯硅烷与所述尼莫克汀的摩尔比为(1～3):1。

（6）根据（1）所述的方法，其中，所述氧化反应所采用的氧化剂选自以下物质：二甲基亚砜和草酰氯；二甲基亚砜和三氟醋酸酐；二甲基亚砜和苯氧磷酰二氯；氯铬酸吡啶鎓盐；或者重铬酸吡啶鎓盐；其中优选二甲基亚砜和苯氧磷酰二氯；优选地，所述氧化剂与上保护的尼莫克汀的摩尔比为(0.5～2):1。

（7）根据（1）所述的方法，其中，所述肟化反应所采用的肟化剂为盐酸甲氧胺；优选地，所述肟化剂与所述氧化反应所获得的产物的摩尔比为(0.5～2):1。

（8）根据（1）所述的方法，其中，所述脱保护反应采用的脱保护剂选自对甲苯磺酸、氢氧化钠、硫酸中的一种或多种，其中优选对甲苯磺酸；优选地，所述脱保护剂与所述结晶物的摩尔比为(0.5～2):1。

（9）根据（1）所述的方法，其中所述方法还包括利用大孔树脂对所述脱保护反应之后获得的产物进行层析纯化的步骤。

（10）根据（1）-（9）中任意一项所述的方法，其中所述方法包括：

i）在二氯甲烷中，在咪唑存在下，使尼莫克汀与叔丁基二甲基氯硅烷在15℃至25℃下进行保护反应8小时至12小时，从而获得上保护的产物的溶液；

ii）在三乙胺中，在苯氧磷酰二氯存在下，使所述步骤i）中获得的所述上保护的产物的溶液与二甲基亚砜在-25℃至-15℃下进行氧化反应2小时至3小时，分离，从而获得固体形式的氧化产物；

iii）在1,4-二氧六环、无水醋酸钠和醋酸中，在惰性气氛下，使所述步骤ii）中获得的所述氧化产物与盐酸甲氧胺在常温下进行肟化反应6小时至12小时，分离，从而获得固体形式的粗产物；

iv）由步骤iii）中获得的所述粗产物制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80%(v/v)的极性有机溶剂的水溶液，去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40%(v/v)的所述极性有机溶剂的水溶液；

v）用低极性有机溶剂对所述步骤iv）中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1；

vi）在无水甲醇中，使所述步骤v）中获得的结晶物与对甲苯磺酸在-10℃至5℃下进行脱保护反应3～6小时，分离，从而获得脱保护的产物；

vii）用大孔树脂对所述脱保护的产物进行层析纯化，从而获得纯化的莫西克汀。

（11）根据（10）所述的方法，其中，在所述步骤iv）中，所述极性有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种，其中优选为乙醇。

（12）根据（10）所述的方法，其中，在所述步骤v）中，所述低极性有机溶剂选自甲苯、庚烷、环己烷、正己烷中的一种或多种，其中优选为庚烷。

（13）根据（10）所述的方法，其中，在所述步骤v）中，所述结晶在10℃至20℃下进行。

本发明与现有技术相比具有以下优点和积极效果：

1.本发明在利用尼莫克汀合成莫西克汀的过程中，采用结晶对肟化后的粗产物进行纯化，由此提高了产品含量，进而降低了后续利用大孔树脂纯化的难度，并且提高了上柱量，减少了柱层析的次数，保持甚至提高了最终产品的纯度，并且降低了生产成本。

2.本发明对保护反应所采用的保护剂进行了筛选，并对结晶条件进行了摸索和选择，由此使得结晶能够成功进行，并且保证了结晶物的质量。

具体实施方式

以下通过具体实施方式的描述对本发明作进一步说明，但这并非是对本发明的限制，本领域技术人员根据本发明的基本思想，可以做出各种修改或改进，但是只要不脱离本发明的基本思想，均在本发明的范围之内。

本发明对常规的利用尼莫克汀依次通过上保护、氧化、肟化、脱保护（常规方法中肟化和脱保护的顺序可互换，可参见例如美国专利No.4,988,824）反应制备莫西汀的方法进行了改进。其中，本发明的发明人经过大量的试验摸索，发现在肟化反应之后，利用本发明方法中所述的结晶方法使肟化反应产物结晶，之后进行脱保护，可提高产品含量，进而还能降低后续利用大孔树脂纯化的难度，并且提高了上柱量，减少了柱层析的次数，保持甚至提高了最终产品的纯度，并且降低了生产成本。此外，本发明对保护反应所采用的保护剂进行了筛选，并对结晶条件进行了摸索和选择，由此使得结晶能够成功进行，并且保证了结晶物的质量。

由此，本发明提供了一种制备莫西克汀的方法，该方法包括对尼莫克汀依次进行保护反应、氧化反应、肟化反应和脱保护反应，从而得到莫西克汀；其中，所述保护反应中所用的保护剂为叔丁基二甲基氯硅烷，并且在进行所述肟化反应后，先将该肟化反应得到的固体形式的粗产物进行结晶，再对所获得的结晶物进行所述脱保护反应；

其中所述结晶包括：

1）制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80%(v/v)的极性有机溶剂的水溶液，然后去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40%(v/v)的所述极性有机溶剂的水溶液；

2）用低极性有机溶剂对所述步骤1）中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1。

在本文中，“极性有机溶剂”的定义是本领域技术人员所公知的。“低极性有机溶剂”的定义是本领域技术人员所公知的，其例子为（例如）甲苯、庚烷、环己烷、正己烷等。

在本文中，“常温”是指15℃～25℃。

在本文中，“室温”是指20℃左右（例如20±5℃）。

在本发明的方法中，尼莫克汀可以按照中国专利申请No.201010237843.5和中国专利申请No.201210414027.6中公开的方法制备，从而获得尼莫克汀固形物，其固形物的HPLC纯度可约为85%至94%，尼莫克汀在固形物中所占的重量百分比可约为80%至90%。

在本发明的方法中，在肟化反应所得固体形式的粗产物中，肟化物的重量百分比一般为70%至90%。

在本发明的所述步骤1）中，所述极性有机溶剂优选选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种，其中优选为乙醇。

此外，优选的是，在本发明的所述步骤1）中，所述的制备浓度为10g/L～15g/L的所述粗产物的第一溶液的步骤优选包括：利用所述极性有机溶剂溶解所述固体形式的粗产物，加水稀释到极性有机溶剂浓度为70～80%(v/v)，同时将所述粗产物的浓度控制在10g/L～15g/L。所述的去除不溶物的方式优选采用a）离心、b）过滤、和/或c）加入活性炭、硅藻土、活性白土和/或珍珠岩后进行自然沉降的方式进行。采用过滤方式时，过滤介质可以为除菌板、耐有机溶剂的膜、超滤膜或纳滤膜，也可以采用装填有活性炭、硅藻土、活性白土和/或珍珠岩的囊式过滤器。以上三种方式可以单独使用也可以组合使用，其中优选a）与c）组合使用，以及b）与c）组合使用。

在本发明的所述步骤2）中，所述低极性有机溶剂优选选自甲苯、庚烷、环己烷、正己烷中的一种或多种，其中优选为庚烷。所述萃取优选进行2～4次（例如2次），每次萃取均使用体积比为(0.5～1):1的所述低极性有机溶剂和所述第二溶液。所述结晶优选在10℃至20℃下进行。此外，所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比优选为0.5:1。

此外，本发明还进一步优化了利用尼莫克汀制备莫西克汀的各个步骤的反应条件。

A.保护反应：使尼莫克汀与保护剂叔丁基二甲基氯硅烷进行反应，从而获得上保护的尼莫克汀。

优选地，在本发明中，所述保护反应所采用的叔丁基二甲基氯硅烷与所述尼莫克汀的摩尔比为（1～3):1，更优选为(1～2):1。上保护反应优选在15℃至25℃下进行，更优选在20℃至25℃下进行。反应时间优选为8至12小时。

B.氧化反应：使上保护的尼莫克汀与氧化剂反应，从而获得氧化产物。

在本发明中，所述氧化反应所采用的氧化剂优选选自以下物质：二甲基亚砜和草酰氯；二甲基亚砜和三氟醋酸酐；二甲基亚砜和苯氧磷酰二氯；氯铬酸吡啶鎓盐（PCC）；或者重铬酸吡啶鎓盐（PDC）；其中优选为二甲基亚砜和苯氧磷酰二氯。当使用二甲基亚砜作为氧化剂时，优选将其与草酰氯、三氟醋酸酐、苯氧磷酰二氯中的一种或多种组合使用，其中苯氧磷酰二氯是优选的；反应优选在-25℃至-15℃下进行2至3小时。当使用PCC或PDC作为氧化剂时，反应优选在20℃至30℃下，最优选在30℃下进行4～6小时。所述氧化剂与上保护的尼莫克汀的摩尔比优选为(0.5～2):1，更优选为(1～2):1。

C.肟化反应：使所获得的氧化产物与肟化剂反应，从而获得肟化物。

在本发明中，所述肟化反应所采用的肟化剂优选为盐酸甲氧胺。优选地，所述肟化剂与所述氧化反应所获得的产物的摩尔比为(0.5～2):1，更优选为(1～2):1。肟化反应优选在惰性气氛（例如氮气气氛）下常温反应6至12小时。

此外，优选的是，在所述肟化反应完成后，对肟化反应获得的含有肟化物的溶液进行萃取，得到有机相，然后脱水并浓缩，从而分离得到固体形式的粗产物。萃取优选进行2～4次（例如2次），所述萃取所用的有机溶剂优选选自乙酸乙酯、乙酸丁酯、甲基环己烷中的一种或多种，其中优选乙酸乙酯。

在本发明中，将得到的所述固体形式的粗产物进行上述结晶，再对所获得的结晶物进行所述脱保护反应。

D.脱保护反应：使所获得的肟化物的结晶物与脱保护剂进行反应，从而获得莫西克汀。

在本发明的方法中，所述脱保护所采用的脱保护剂优选选自对甲苯磺酸、氢氧化钠、硫酸中的一种或多种，其中优选对甲苯磺酸。所述脱保护剂与所述结晶物的摩尔比优选为(0.5～2):1，更优选为(1～2):1。脱保护反应优选在-10℃至5℃下，更优选在0℃至5℃下反应3至6小时。

此外，本发明的方法还优选包括利用大孔树脂对所述脱保护反应之后获得的产物进行层析纯化的步骤。大孔树脂可以为聚苯乙烯型的低极性大孔吸附树脂，优选日本三菱公司的HP20、SP70和罗蒙哈斯生产的XAD-1600。所述层析纯化优选使用甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种的水溶液作为流动相的溶剂，其中优选使用甲醇的水溶液作为流动相的溶剂。所述层析纯化优选使用甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种与水的混合溶液作为洗脱液，其中优选使用甲醇与水的混合溶液作为洗脱液。如本领域技术人员所公知的，洗脱液中溶剂的浓度与流动相中溶剂的浓度不同。

此外，优选的是，在层析之后，将含有莫西克汀的洗脱液浓缩至溶剂在该溶液中的比例为30体积%至35体积%，缓慢搅拌并降温至10℃至20℃，保温5小时至8小时，由此分离得到高纯度的莫西克汀固体。

在本发明的一个具体的实施方案中，本发明的方法包括：

i）在二氯甲烷中，在咪唑存在下，使尼莫克汀与叔丁基二甲基氯硅烷在15℃至25℃下进行保护反应8小时至12小时，从而获得上保护的产物的溶液；

ii）在三乙胺中，在苯氧磷酰二氯存在下，使所述步骤i）中获得的所述上保护的产物的溶液与二甲基亚砜在-25℃至-15℃下进行氧化反应2小时至3小时，分离，从而获得固体形式的氧化产物；

iii）在1,4-二氧六环、无水醋酸钠和醋酸中，在惰性气氛下，使所述步骤ii）中获得的所述氧化产物与盐酸甲氧胺在常温下进行肟化反应6小时至12小时，分离，从而获得固体形式的粗产物；

iv）由步骤iii）中获得的所述粗产物制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80%(v/v)的极性有机溶剂的水溶液，然后去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40%(v/v)的所述极性有机溶剂的水溶液；

v）用低极性有机溶剂对所述步骤iv）中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1；

vi）在无水甲醇中，使所述步骤v）中获得的结晶物与对甲苯磺酸在-10℃至5℃下进行脱保护反应3～6小时，分离，从而获得脱保护的产物；

vii）用大孔树脂对所述脱保护的产物进行层析纯化，从而获得纯化的莫西克汀。

在本发明的另一个具体的实施方案中，本发明的方法包括：

I）在500～700体积份（单位：ml）二氯甲烷中，在0.10～0.30摩尔份（单位：mol）咪唑存在下，使0.10摩尔份尼莫克汀与0.10～0.30摩尔份叔丁基二甲基氯硅烷在15℃至25℃下进行保护反应8小时至12小时，从而获得上保护的产物的溶液；

II）在0.05～0.20摩尔份三乙胺中，在0.05～0.20摩尔份苯氧磷酰二氯存在下，使所述步骤I）中获得的所述上保护的产物的溶液与0.05～0.20摩尔份二甲基亚砜在-25℃至-15℃下进行氧化反应2小时至3小时，分离，从而获得固体形式的氧化产物；

III）在600～700体积份1,4-二氧六环、0.045～0.18摩尔份无水醋酸钠和0.0098～0.039摩尔份醋酸中，在惰性气氛下，使所述步骤II）中获得的所述氧化产物与0.045～0.18摩尔份盐酸甲氧胺在常温下进行肟化反应6小时至12小时，分离，从而获得固体形式的粗产物；

IV）由步骤III）中获得的所述粗产物制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80%(v/v)的极性有机溶剂的水溶液，然后去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40%(v/v)的所述极性有机溶剂的水溶液；

V）用低极性有机溶剂对所述步骤IV）中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1；

VI）在1000～2000体积份无水甲醇中，使所述步骤V）中获得的结晶物与0.034～0.14摩尔份对甲苯磺酸在-10℃至5℃下进行脱保护反应3～6小时，分离，从而获得脱保护的产物；

VII）用大孔树脂对所述脱保护的产物进行层析纯化，从而获得莫西克汀固体。

在本发明的又一个具体的实施方案中，本发明的方法包括：

a）利用150ml～300ml二氯甲烷溶解0.082mol尼莫克汀，使其与0.082mol～0.24mol咪唑混合，向其中滴加浓度为0.3mol/L～0.7mol/L的叔丁基二甲基氯硅烷的二氯甲烷溶液300ml～400ml，并使所述叔丁基二甲基氯硅烷与所述尼莫克汀的摩尔比为符合(1～3):1，同时保持温度为15℃至25℃，滴加完成后室温搅拌8小时至12小时，薄板层析（TLC）检测原料基本反应完后，用纯化水洗涤所得溶液，用无水硫酸钠进行脱水，由此获得上保护的产物；

b）使所述步骤a）中获得的所述上保护的产物与0.041mol～0.16mol二甲基亚砜、0.041mol～0.16mol三乙胺混合，缓慢滴加0.041mol-0.16mol的苯氧磷酰二氯，在-25℃至-15℃下反应2小时至3小时，薄板层析检测原料基本反应完后，用饱和碳酸氢钠溶液洗涤所得溶液，用无水硫酸钠进行脱水，浓缩获得固形物；

c）用500ml～600ml1,4-二氧六环溶解所述步骤b）中获得的所述固形物，依次与0.037mol～0.15mol无水醋酸钠、0.0081mol～0.032mol醋酸、0.037mol～0.15mol盐酸甲氧胺混合，在惰性环境下常温反应6小时至12小时。薄板层析检测原料基本反应完后，使所得溶液与纯化水和乙酸乙酯混合，萃取2～4次，合并有机相，用无水硫酸钠进行脱水，浓缩获得第一固体产物；

d）用2500ml～6000ml第一极性有机溶剂溶解所述步骤c）中获得的所述第一固体产物，加水将所述第一极性有机溶剂的浓度稀释至70～80%(v/v)，从而获得第一溶液，去除不溶物，加水使所述第一极性有机溶剂的浓度稀释至30～40%(v/v)，从而获得第二溶液，其中所述第一极性有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种，其中优选为乙醇；

e）用低极性有机溶剂对所述步骤d）中获得的所述第二溶液进行萃取2～4次，合并有机相，浓缩并结晶，从而获得结晶物，其中每次萃取所用的所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1，优选为0.5:1；

f）在≤-0.085MPa的真空度，35℃至45℃的温度下，对所述步骤e）中获得的所述结晶物进行干燥；

g）将所述步骤f）中获得的干燥的结晶物与500ml～1000ml无水甲醇混合，降低温度至0℃以下，滴加1.1mol/L～1.4mol/L对甲苯磺酸的甲醇溶液15ml～100ml，同时控制反应温度为-10℃至5℃，滴加完成后反应3～6小时，用HPLC检测原料基本反应完后，利用所得溶液2倍体积的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，之后用所述无水甲醇1倍体积的乙酸乙酯进行萃取2～4次，合并有机相，用无水硫酸钠进行脱水，浓缩获得第二固体产物；

h）用60-70%(v/v)第二极性有机溶剂的水溶液10L～25L溶解所述步骤g）中获得的第二固体产物，从而获得第三溶液，利用大孔树脂对所述第三溶液进行层析，用70～80%(v/v)所述第二极性有机溶剂与水的混合溶液20L～30L进行洗脱，由此获得含有莫西克汀的洗脱液，其中所述第二极性有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种，其中优选为甲醇；

i）使步骤h）中获得的所述含有莫西克汀的洗脱液浓缩至所述第二极性有机溶剂在该溶液中的比例为30体积%至35体积%，缓慢搅拌并降温至10℃至20℃，保温5小时至8小时，分离得到莫西克汀固体。

本领域技术人员能够理解的是，在本发明的上述方法中，所用的各物质的量可以根据需要而成比例地调整。

以下通过例子的方式进一步解释或说明本发明的内容，但这些例子不应被理解为对本发明的保护范围的限制。

实施例

尼莫克汀可按照中国专利申请No.201010237843.5中的方法制备。

叔丁基二甲基氯硅烷可购自国药集团。

苯氧磷酰二氯可购自国药集团。

盐酸甲氧胺可购自川东化工公司。

1,4-二氧六环可购自成都金山公司。

对甲苯磺酸可购自国药集团。

PCC可够自重庆沃肯精细化工公司

HP20大孔树脂柱可购自三菱化学公司。

实施例1：

在1L的三口反应瓶中，投入尼莫克汀的固形物（尼莫克汀在其中的重量百分比为80%，摩尔数为0.098mol），咪唑0.10mol，二氯甲烷300ml室温下搅拌至溶解，然后滴加含叔丁基二甲基氯硅烷（0.26mol）的二氯甲烷（400ml）溶液，同时保持温度25℃，滴加完成后室温搅拌9小时。TLC（薄板层析）检测显示原料基本反应完，用1000ml纯化水洗涤所得溶液，之后用无水硫酸钠干燥脱水。

向脱水后的溶液中，先后加入二甲基亚砜（0.11mol）、三乙胺（0.15mol），混合均匀并降温到-30℃，向其中滴加苯氧磷酰二氯（0.11mol）的二氯甲烷（39.56ml）溶液，控制反应温度为-20℃，反应2.5h。TLC检测显示原料基本反应完，用800ml饱和的碳酸氢钠溶液充分洗涤所得溶液，用无水硫酸钠干燥脱水，之后浓缩干二氯甲烷，由此得到含氧化产物的固形物0.087mol。

将所得固形物（0.087mol）用1,4-二氧六环（640ml）溶解，向其中先后加入无水醋酸钠（0.13mol）、醋酸（0.028mol）、盐酸甲氧胺（0.14mol），氮气环境下常温反应10小时。TLC检测显示原料基本反应完成后，加入1000ml纯化水终止反应，用1000ml乙酸乙酯搅拌萃取，同样操作再重复1次，合并两次乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水，之后浓缩干得到固形物78.4g（肟化物在其中的重量百分比：75%）。

所得固形物用4120ml乙醇溶解，加1760ml纯化水稀释至乙醇浓度为70%(v/v)，过滤去除不溶物后，加入7840ml纯化水。用13720ml庚烷进行萃取，重复1次，合并两次萃取庚烷层，庚烷层浓缩至有晶体析出，停止浓缩。缓慢搅拌下降温至20℃，抽滤分离，并将潮晶在-0.085MPa的真空度，45℃的温度下干燥，得类白色固体0.071mol。

干燥后的结晶物（0.071mol）用无水甲醇（1270ml）溶解，降低温度至0℃，滴加对甲苯磺酸（0.13mol）的甲醇（120ml）溶液，控制反应温度为0℃。滴加完成后反应4小时，用HPLC检测原料基本反应完。将所得溶液转入2780ml饱和碳酸氢钠溶液中，充分洗涤，分别用1270ml乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠脱水后，浓缩干得到固体0.054mol。

所得固体用23030ml70体积%甲醇水溶液溶解，过滤除去不溶物后，上HP20大孔树脂柱吸附，用80体积%甲醇水溶液解吸树脂，收集到的解吸液用HPLC检测，纯度为98%。将解吸液浓缩，检测到浓缩液中的甲醇的比例为35体积%，停止浓缩。冷却降温到20℃，缓慢搅拌5小时，抽滤析出物，烘干得到0.015mol莫西克汀，含量96.2%。

实施例2：

在1L的三口反应瓶中，投入尼莫克汀的固形物（尼莫克汀在其中的重量百分比为82.5%，摩尔数为0.14mol），咪唑0.14mol，二氯甲烷425ml，室温下搅拌至溶解，然后滴加含叔丁基二甲基氯硅烷（0.37mol）的二氯甲烷（550ml）溶液，同时保持温度15℃，滴加完成后室温搅拌12小时。TLC（薄板层析）检测显示原料基本反应完，用1420ml纯化水洗涤所得溶液，之后用无水硫酸钠干燥脱水。

向脱水后的溶液中，先后加入二甲基亚砜（0.15mol）、三乙胺（0.14mol），混合均匀并降温到-30℃，向其中滴加苯氧磷酰二氯（0.14mol）的二氯甲烷（52ml）溶液，控制反应温度为-25℃，反应3h。TLC检测显示原料基本反应完，用750ml饱和的碳酸氢钠溶液充分洗涤所得溶液，用无水硫酸钠干燥脱水，之后浓缩干二氯甲烷，得到含产品的固形物0.13mol。

将所得固形物（0.13mol）用1,4-二氧六环（940ml）溶解，先后加入无水醋酸钠（0.16mol）、醋酸（0.035mol）、盐酸甲氧胺（0.16mol），氮气环境下常温反应12小时。TLC检测显示原料基本反应完成。加入1000ml纯化水终止反应，用1000ml乙酸乙酯搅拌萃取，重复2次，合并三次乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水，之后浓缩干得到固形物107.7g（肟化物在其中的重量百分比：77%）。

所得固形物用8080ml乙醇溶解，加2690ml纯化水稀释至乙醇浓度为75%(v/v)，过滤去除不溶物后，加入9420ml纯化水。用10100ml环己烷进行萃取，重复3次，合并四次萃取环己烷层，将环己烷层浓缩至有晶体析出，停止浓缩。缓慢搅拌下降温至13℃，抽滤分离，并将潮晶在-0.09MPa的真空度，35℃的温度下干燥，得类白色固体0.097mol。

干燥后的结晶物（0.097mol）用无水甲醇（1720ml）溶解，降低温度至0℃，滴加对甲苯磺酸（0.10mol）的甲醇（90ml）溶液，控制反应温度为5℃。滴加完成后反应6小时，用HPLC检测原料基本反应完。将所得溶液转入3620ml饱和碳酸氢钠溶液中充分洗涤，分别用1720ml乙酸乙酯萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠脱水，之后浓缩干，得到固体0.078mol。

所得固体用29350ml65体积%乙醇水溶液溶解，过滤除去不溶物后上SP70大孔树脂柱吸附，用75体积%乙醇水溶液解吸树脂，收集到的解吸液用HPLC检测，纯度为97.4%。将解吸液浓缩，检测到浓缩液中的乙醇的比例为33体积%，停止浓缩。冷却降温到18℃，缓慢搅拌6.5小时，抽滤析出物，烘干得到0.021mol莫西克汀，含量95.8%。

实施例3：

在1L的三口反应瓶中，投入尼莫克汀的固形物（尼莫克汀在其中的重量百分比为86%，摩尔数为0.086mol），咪唑0.091mol，二氯甲烷265ml，室温下搅拌至溶解，然后滴加含叔丁基二甲基氯硅烷（0.19mol）的二氯甲烷（320ml）溶液，同时保持温度20℃，滴加完成后，室温搅拌8小时。TLC（薄板层析）检测显示原料基本反应完，用880ml纯化水洗涤所得溶液，之后用无水硫酸钠干燥脱水。

向脱水后的溶液中，先后加入二甲基亚砜（0.096mol）、三乙胺（0.094mol），混合均匀并降温到-30℃，向其中滴加苯氧磷酰二氯（0.088mol）的二氯甲烷（25ml）溶液，控制反应温度为-15℃，反应2h。TLC检测显示原料基本反应完后。用700ml饱和的碳酸氢钠溶液充分洗涤所得溶液，用无水硫酸钠干燥脱水，之后浓缩干二氯甲烷，得到含产品的固形物0.077mol。

将所得固形物（0.077mol）用1,4-二氧六环（550ml）溶解，先后加入无水醋酸钠（0.081mol）、醋酸（0.018mol）、盐酸甲氧胺（0.081mol），氮气环境下常温反应6小时。TLC检测显示原料基本反应完成。加入550ml纯化水终止反应，用550ml乙酸乙酯搅拌萃取，重复1次，合并两次乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水，之后浓缩干得到固形物63.8g（肟化物在其中的重量百分比：81.5%）。

所得固形物用3400ml丙酮溶解，加850ml纯化水稀释至丙酮浓度为80%(v/v)，过滤去除不溶物后，加入4250ml纯化水。用4250ml甲苯进行萃取，萃取两次，合并两次萃取甲苯层，将甲苯层浓缩至有晶体析出，停止浓缩。缓慢搅拌下降温至10℃，抽滤分离，并将潮晶在-0.087MPa的真空度，40℃的温度下干燥，得类白色固体0.058mol。

干燥后的结晶物（0.058mol）用无水甲醇（1000ml）溶解，降低温度至0℃，滴加对甲苯磺酸（0.063mol）的甲醇（45ml）溶液，控制反应温度为-10℃。滴加完成后反应3小时，用HPLC检测原料基本反应完。将所得溶液转入2090ml饱和碳酸氢钠溶液中充分洗涤，分别用1000ml乙酸乙酯进行萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠脱水，之后浓缩干，得到固体0.044mol。

所得固体用14070ml62体积%丙酮水溶液溶解，过滤除去不溶物后，上XAD-1600大孔树脂柱吸附，用73体积%丙酮水溶液解吸树脂，收集到的解吸液用HPLC检测，纯度为97%。将解吸液浓缩，检测到浓缩液中的丙酮的比例为32.3体积%，停止浓缩。冷却降温到13℃，缓慢搅拌8小时，抽滤析出物，烘干，得到16.7g莫西克汀，含量0.013mol。

实施例4：

在1L的三口反应瓶中，投入尼莫克汀的固形物（尼莫克汀在其中的重量百分比为90%，摩尔数为0.12mol），咪唑0.13mol，二氯甲烷360ml，室温下搅拌至溶解，然后滴加含叔丁基二甲基氯硅烷（0.32mol）的二氯甲烷（480ml）溶液，同时保持温度23℃，滴加完成后，室温搅拌10小时。TLC（薄板层析）检测显示原料基本反应完，用1200ml纯化水洗涤所得溶液，之后用无水硫酸钠干燥脱水。

向脱水后的溶液中，先后加入二甲基亚砜（0.13mol）、三乙胺（0.13mol），混合均匀并降温到-30℃，向其中滴加苯氧磷酰二氯（0.12mol）的二氯甲烷（60ml）溶液，控制反应温度为-25℃，反应2.3h。TLC检测显示原料基本反应完，用960ml饱和的碳酸氢钠溶液充分洗涤所得溶液，用无水硫酸钠干燥脱水，之后浓缩干二氯甲烷，得到含产品的固形物0.10mol。

将所得固形物（0.10mol）用1,4-二氧六环（800ml）溶解，先后加入无水醋酸钠（0.12mol）、醋酸（0.026mol）、盐酸甲氧胺（0.12mol），氮气环境下常温反应11小时。TLC检测显示原料基本反应完成。加入800ml纯化水终止反应，用400ml乙酸乙酯搅拌萃取，重复2次，合并三次乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水，之后浓缩干得到固形物80.7g（肟化物在其中的重量百分比：85%）。

所得固形物用4800ml异丙醇溶解，加2060ml纯化水稀释至异丙醇浓度为70%(v/v)，过滤去除不溶物后，加入5150ml纯化水。用6000ml正己烷进行萃取，萃取两次，合并两次萃取正己烷层，将正己烷层浓缩至有晶体析出，停止浓缩。缓慢搅拌下降温至16℃，抽滤分离，并将潮晶在-0.091MPa的真空度，35℃的温度下干燥，得类白色固体0.082mol。

干燥后的结晶物0.082mol用无水甲醇（1470ml）溶解，降低温度至0℃，滴加对甲苯磺酸（0.090mol）的甲醇（80ml）溶液，控制反应温度为-5℃。滴加完成后反应5小时，用HPLC检测原料基本反应完。将所得溶液转入3100ml饱和碳酸氢钠溶液中充分洗涤，分别用1470ml乙酸乙酯进行萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠脱水，之后浓缩干，得到固体0.062mol。

所得固体用26440ml60体积%异丙醇水溶液溶解，过滤除去不溶物后，上HP20大孔树脂柱吸附，用70体积%异丙醇水溶液解吸树脂，收集到的解吸液用HPLC检测，纯度为96.8%。将解吸液浓缩，检测到浓缩液中的异丙醇的比例为30体积%，停止浓缩。冷却降温到10℃，缓慢搅拌7小时，抽滤析出物，烘干得到0.017mol莫西克汀，含量94.6%。

实施例5

在1L的三口反应瓶中，投入尼莫克汀的固形物（尼莫克汀在其中的重量百分比为85%，摩尔数为0.067mol），咪唑0.068mol，二氯甲烷210ml，室温下搅拌至溶解，然后滴加含叔丁基二甲基氯硅烷（0.18mol）的二氯甲烷（260ml）溶液，同时保持温度25℃，滴加完成后，室温搅拌10小时。TLC（薄板层析）检测显示原料基本反应完，用700ml纯化水洗涤所得溶液，之后用无水硫酸钠干燥脱水。

向脱水后的溶液中，加入PCC（0.067mol），控制反应温度为30℃，反应6h。TLC检测显示原料基本反应完，加入1400ml石油醚，抽滤，滤液用无水硫酸钠干燥脱水，之后浓缩干石油醚，得到含产品的固形物0.054mol。

将所得固形物（0.054mol）用1,4-二氧六环（390ml）溶解，先后加入无水醋酸钠（0.055mol）、醋酸（0.012mol）、盐酸甲氧胺（0.055mol），氮气环境下常温反应11小时。TLC检测显示原料基本反应完成。加入390ml纯化水终止反应，用390ml乙酸乙酯搅拌萃取，重复1次，合并两次乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水，之后浓缩干得到固形物46.4g（肟化物在其中的重量百分比：79.5%）。

所得固形物用2590ml甲醇溶解，加1110ml纯化水稀释至甲醇浓度为70%(v/v)，过滤去除不溶物后，加入2770ml纯化水。用3230ml庚烷进行萃取，萃取两次，合并两次萃取庚烷层，将庚烷层浓缩至有晶体析出，停止浓缩。缓慢搅拌下降温至15℃，抽滤分离，并将潮晶在-0.091MPa的真空度，37℃的温度下干燥，得类白色固体0.044mol。

干燥后的结晶物0.044mol用无水甲醇（790ml）溶解，降低温度至0℃，滴加1mol/L硫酸溶液（21ml），控制反应温度为5℃。滴加完成后反应8小时，用HPLC检测原料基本反应完。将所得溶液转入2400ml饱和碳酸氢钠溶液中充分洗涤，分别用790ml乙酸乙酯进行萃取2次，合并有机相，无水硫酸钠脱水，之后浓缩干，得到固体0.034mol。

所得固体用14500ml70体积%甲醇水溶液溶解，过滤除去不溶物后，上HP20大孔树脂柱吸附，用80体积%甲醇水溶液解吸树脂，收集到的解吸液用HPLC检测，纯度为97.1%。将解吸液浓缩，检测到浓缩液中的甲醇的比例为35体积%，停止浓缩。冷却降温到20℃，缓慢搅拌5小时，抽滤析出物，烘干得到0.0089mol莫西克汀，含量94.2%。

Claims (22)

1.一种制备莫西克汀的方法，该方法包括对尼莫克汀依次进行保护反应、氧化反应、肟化反应和脱保护反应，从而得到莫西克汀；其中，所述保护反应中所用的保护剂为叔丁基二甲基氯硅烷，并且在进行所述肟化反应后，先将该肟化反应得到的固体形式的粗产物进行结晶纯化，再对所获得的结晶物进行所述脱保护反应；

其中所述结晶纯化包括：

1)制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80％的极性有机溶剂的水溶液，其中的百分比为按体积比计，然后去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40％的所述极性有机溶剂的水溶液，其中的百分比为按体积比计；

2)用低极性有机溶剂对所述步骤1)中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤1)中，所述极性有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种。

3.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤1)中，所述极性有机溶剂为乙醇。

4.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤2)中，所述低极性有机溶剂选自甲苯、庚烷、环己烷、正己烷中的一种或多种。

5.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤2)中，所述低极性有机溶剂为庚烷。

6.根据权利要求1所述的方法，其中，在所述步骤2)中，所述结晶在10℃至20℃下进行。

7.根据权利要求1所述的方法，其中，所述保护反应所采用的所述叔丁基二甲基氯硅烷与所述尼莫克汀的摩尔比为(1～3):1。

8.根据权利要求1所述的方法，其中，所述氧化反应所采用的氧化剂选自以下物质：二甲基亚砜和草酰氯；二甲基亚砜和三氟醋酸酐；二甲基亚砜和苯氧磷酰二氯；氯铬酸吡啶鎓盐；或者重铬酸吡啶鎓盐。

9.根据权利要求1所述的方法，其中，所述氧化反应所采用的氧化剂选自二甲基亚砜和苯氧磷酰二氯。

10.根据权利要求1所述的方法，其中，所述氧化反应所采用的氧化剂与上保护的尼莫克汀的摩尔比为(0.5～2):1。

11.根据权利要求1所述的方法，其中，所述肟化反应所采用的肟化剂为盐酸甲氧胺。

12.根据权利要求1所述的方法，其中，所述肟化反应所采用的肟化剂与所述氧化反应所获得的产物的摩尔比为(0.5～2):1。

13.根据权利要求1所述的方法，其中，所述脱保护反应采用的脱保护剂选自对甲苯磺酸、氢氧化钠、硫酸中的一种或多种。

14.根据权利要求1所述的方法，其中，所述脱保护反应采用的脱保护剂为对甲苯磺酸。

15.根据权利要求1所述的方法，其中，所述脱保护反应采用的脱保护剂与所述结晶物的摩尔比为(0.5～2):1。

16.根据权利要求1所述的方法，其中所述方法还包括利用大孔树脂对所述脱保护反应之后获得的产物进行层析纯化的步骤。

17.一种制备莫西克汀的方法，该方法包括对尼莫克汀依次进行保护反应、氧化反应、肟化反应和脱保护反应，从而得到莫西克汀；其中，所述保护反应中所用的保护剂为叔丁基二甲基氯硅烷，并且在进行所述肟化反应后，先将该肟化反应得到的固体形式的粗产物进行结晶纯化，再对所获得的结晶物进行所述脱保护反应，其中所述方法包括：

i)在二氯甲烷中，在咪唑存在下，使尼莫克汀与叔丁基二甲基氯硅烷在15℃至25℃下进行保护反应8小时至12小时，从而获得上保护的产物的溶液；

ii)在三乙胺中，在苯氧磷酰二氯存在下，使所述步骤i)中获得的所述上保护的产物的溶液与二甲基亚砜在-25℃至-15℃下进行氧化反应2小时至3小时，分离，从而获得固体形式的氧化产物；

iii)在1,4-二氧六环、无水醋酸钠和醋酸中，在惰性气氛下，使所述步骤ii)中获得的所述氧化产物与盐酸甲氧胺在常温下进行肟化反应6小时至12小时，分离，从而获得固体形式的粗产物；

iv)由步骤iii)中获得的所述粗产物制备其中所述粗产物的浓度为10g/L～15g/L的第一溶液，其中该第一溶液的溶剂为70～80％的极性有机溶剂的水溶液，其中的百分比为按体积比计，去除不溶物，加水稀释得到第二溶液，其中该第二溶液的溶剂为30～40％的所述极性有机溶剂的水溶液，其中的百分比为按体积比计；

v)用低极性有机溶剂对所述步骤iv)中获得的所述第二溶液进行萃取，浓缩所得低极性有机溶剂相并进行结晶，分离，从而得到所述结晶物，其中所述低极性有机溶剂与所述第二溶液的体积比为(0.5～1):1；

vi)在无水甲醇中，使所述步骤v)中获得的结晶物与对甲苯磺酸在-10℃至5℃下进行脱保护反应3～6小时，分离，从而获得脱保护的产物；

vii)用大孔树脂对所述脱保护的产物进行层析纯化，从而获得纯化的莫西克汀。

18.根据权利要求17所述的方法，其中，在所述步骤iv)中，所述极性有机溶剂选自甲醇、乙醇、丙酮、异丙醇中的一种或多种。

19.根据权利要求17所述的方法，其中，在所述步骤iv)中，所述极性有机溶剂为乙醇。

20.根据权利要求17所述的方法，其中，在所述步骤v)中，所述低极性有机溶剂选自甲苯、庚烷、环己烷、正己烷中的一种或多种。

21.根据权利要求17所述的方法，其中，在所述步骤v)中，所述低极性有机溶剂为庚烷。

22.根据权利要求17所述的方法，其中，在所述步骤v)中，所述结晶在10℃至20℃下进行。