CN104263835B - 一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法 - Google Patents

一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN104263835B
CN104263835B CN201410526930.0A CN201410526930A CN104263835B CN 104263835 B CN104263835 B CN 104263835B CN 201410526930 A CN201410526930 A CN 201410526930A CN 104263835 B CN104263835 B CN 104263835B
Authority
CN
China
Prior art keywords
bulbus lilii
primer
ssr
dna
purple
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Expired - Fee Related
Application number
CN201410526930.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN104263835A (zh
Inventor
钟程
田鑫
李性苑
刘伦沛
杨苓
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Kaili University
Original Assignee
Kaili University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kaili University filed Critical Kaili University
Priority to CN201410526930.0A priority Critical patent/CN104263835B/zh
Publication of CN104263835A publication Critical patent/CN104263835A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN104263835B publication Critical patent/CN104263835B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本发明涉及一种采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法。结果表明：从13对引物中筛选出2对多态性高、重复性好的引物，共检测出171个片段，其中多态性片段131个，每对引物可以检测出4～22个数目不等的片段，平均1.69个，多态率为76.60%，片段大小介于100～250bp之间；通过NTSYS-pc2.11进行相似系数和聚类分析，遗传相似系数为0.5882～0.9412，平均相似系数为0.7647；聚类分析将此材料划分为6个大类，11份百合种质间的遗传差异与品种特性、花形、花丝和花柱的颜色无相关性，但与花瓣颜色具有一定相关性，通过花色基因能较好地反映百合种质间亲缘关系远近，品种间花色不同，可通过调控花色的相关基因设计引物，为进一步区分亲缘关系远近提供了重要途径。

Description

一种采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法
技术领域
本发明涉及一种植物品种鉴别方法，具体地说，涉及一种采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法。
背景技术
百合（Liliumbrownine）是百合科（Liliaceae）百合属（liliumL.）植物的总称，中国是百合属植物自然分布中心之一，具有很高的食用、药用、观赏价值。目前，百合的鉴定方法主要有形态学、细胞学、生化标记鉴定十分普遍，这极大影响了我国对百合种质资源的评价与利用，各种分子标记技术的出现为百合种质的快速鉴定提供了新的技术方法，而SSR标记具有遍布整个基因组、多态性高、重复性及稳定性好、操作简单等优势，是目前最适合用于种质鉴定的分子标记技术之一。然而，有关百合种质鉴定的研究相对较少，尤其是利用SSR技术对百合品种进行亲本鉴定鲜见报道。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法，以解决上述的技术问题。
为实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：
一种采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法，其特征在于：包括如下步骤：
1、准备百合材料：将山丹玫紫、接曼、彩蝶、粉天使、香水白、索拉纳、黑色蒙特、紫衣姑娘、绿百合、加拿大黄、圭亚那这11种百合材料种植于园艺实验站进行常规管理；在苗期随机取每种百合材料20个单株的新鲜叶片混用，液氮冷冻后放入-70℃超低温冰箱中保存备用；
2、百合DNA的提取：用植物基因组试剂盒提取各种百合材料的DNA，用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度；将各材料的DNA浓度稀释至50ng/μL后，置于-20℃冰箱中备用；
3、SSR引物设计：根据NCBI上搜索的花色基因EST序列，剔除小于20bp的EST后，对余下的EST—SSR用软件Primer5.0设计13对百合SSR引物；所述百合SSR引物的长度18～24bp，GC含量40%～70%，理论退火温度57.2℃～59.2℃，产物长度控制在150～250bp之间；
4、SSR-PCR扩增反应、电泳检测：PCR反应体系20μL，其中，50ng/μLDNA样品1.5μL，10μmol·L-1正反向引物共1.5μL，10倍的含Mg2+的PCRreactionbuffer，2.0μL、25mmol·L-1dNTP，rTaq0.75U，加超纯水至20μL；PCR的反应程序：94℃变性1.5min，94℃变性30s，退火30s，32个循环，72℃延伸30s，72℃延伸5min，4℃保存；PCR扩增产物中加入6倍的Loadingbuffer2.0μL，取2.5μL上样，用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，银染显色；
5、统计分析：拍照并读带，有带记为1，无带记为0，缺失记为9，统计扩增情况，用NTSYS-pc2.11按照类平均法进行聚类分析，构建分子进化系统树；
6、结果与分析：
6A、采用改良CTAB法提取的百合DNA条带清晰明亮，无降解现象，DNA完整性好，分光光度计检测发现A260/280比值在1.8～2.0之内，浓度在318～684ng/μL，均能满足PCR的要求；
6B、根据SSR分析结果，计算出11个百合品种间的遗传相似系数，其中对13对引物进行多态性分析，选出2对带型稳定、多态性高重复性好的引物；共检出171个片段，其中，多态性片段131个，占总数的76.60%；每对引物可以检出4～22个数目不等的片段，平均每对引物扩增出1.69条带，片段大小介于100～250bp之间；结果表明，不同引物产生的条带数不同和多态性差异，其中，扩增多态性最好的引物为FL8和FL10；
6C、各品种间遗传距离在0.5882～0.9412之间，绿百合、圭亚那和加拿大黄之间的遗传相似系数最小，为0.5882；彩蝶、粉天使与山丹玫紫、索拉纳和黑色蒙特、接曼、香水白与粉天使遗传相似系数最大，为0.9412，11个品种的平均遗传相似系数为0.7647；
6D、聚类分析结果表明：将11个百合品种分为六大类，以加拿大黄为第Ⅰ大类，以圭亚那为第II大类，以紫衣姑娘为第III大类，以绿百合为第IV大类，以接曼、香水白为第V大类，其余的黑色蒙特、索拉纳、彩蝶、粉天使和山丹玫紫为第VI大类；花色相似的聚为一类，与遗传相似系数的分析结果一致。
有益效果：与现有技术相比，本发明利用SSR分子标记对11个品种进行亲缘关系分析，结果表明：从13对引物中筛选出2对多态性高、重复性好的引物，共检测出171个片段，其中多态性片段131个，每对引物可以检测出4～22个数目不等的片段，平均1.69个，多态率为76.60%，片段大小介于100～250bp之间；通过NTSYS-pc2.11进行相似系数和聚类分析，遗传相似系数为0.5882～0.9412，平均相似系数为0.7647，2对引物能将11个百合品种区分为2～6个类型，平均为1.83个类型；聚类分析将此材料划分为6个大类，11份百合种质间的遗传差异与品种特性、花形、花丝和花柱的颜色无相关性，但与花瓣颜色具有一定相关性，通过花色基因能较好地反映百合种质间亲缘关系远近，品种间花色不同，可通过调控花色的相关基因设计引物，为进一步区分亲缘关系远近提供了重要途径。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步说明。
本发明所述采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法，包括如下步骤：
1、准备百合材料：将山丹玫紫、接曼、彩蝶、粉天使、香水白、索拉纳、黑色蒙特、紫衣姑娘、绿百合、加拿大黄、圭亚那这11种百合材料种植于园艺实验站进行常规管理，11种百合品种的信息参见表1；在苗期随机取每种百合材料20个单株的新鲜叶片混用，液氮冷冻后放入-70℃超低温冰箱中保存备用；
表111种百合品种的信息
2、百合DNA的提取：用植物基因组试剂盒提取各种百合材料的DNA，用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度；将各材料的DNA浓度稀释至50ng/μL后，置于-20℃冰箱中备用；
3、SSR引物设计：根据NCBI上搜索的花色基因EST序列，剔除小于20bp的EST后，对余下的EST—SSR用软件Primer5.0设计13对百合SSR引物；所述百合SSR引物的长度18～24bp，GC含量40%～70%，理论退火温度57.2℃～59.2℃，产物长度控制在150～250bp之间；
4、SSR-PCR扩增反应、电泳检测：PCR反应体系20μL，其中，50ng/μLDNA样品1.5μL，10μmol·L-1正反向引物共1.5μL，10倍的含Mg2+的PCRreactionbuffer，2.0μL、25mmol·L-1dNTP，rTaq0.75U，加超纯水至20μL；PCR的反应程序：94℃变性1.5min，94℃变性30s，退火30s，32个循环，72℃延伸30s，72℃延伸5min，4℃保存；PCR扩增产物中加入6倍的Loadingbuffer2.0μL，取2.5μL上样，用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，银染显色；所述引物如下所述：
FL1，F：GCAGTGTCTTAGGGTGGTCAA，R:GAGGATGCGAGATTCAGAGG；
FL2，F:GCTCTTGGAGGGAGAAGGC，R:GGTTGTACGGCACGCTGAT；
FL3，F:CGTTATGCGTTGGTGATACTTT，R:GAGGATGCGAGATTCAGAGG；
FL4，F:GACTTCTCCGGGAGTTCGT，R:CATTGGGACAGTGTTTAGCG；
FL5，F:CCCCTCGGATCGAAGAAG，R:TCAGTGACTAGGAGCTACCAGAAT；
FL6，F:GAATGCAGTGTCTTAGGGTGG，R:GAGGATGCGAGATTCAGAGG；
FL7，F:CCTCGGATCGAAGAAGGATR:TCAGTGACTAGGAGCTACCAGAAT；
FL8，F:TTAAGCTGGCAGGCAAGAA，R:CATTGGGACAGTGTTTAGCG；
FL9，F:GCAGTGTCTTAGGGTGGTCAA，R:TGCAGCTTCCCAGTGGTC；
FL10，F:TCAGACTTCCTCCATCATACTTG，R:CATTGGGACAGTGTTTAGCG；
FL11，F:TGCTGCTCAGACTTCCTCCA，R:TCAGTTGACCACCCTAAGACACT；
FL12，F:AAATTAGGCGTTAATCGTGTTC，R:TGTCCGGTCAGGTTAGTCCA；
FL13，F:GACTTCTCCGGGAGTTCGT，R:ACTGTAGCGGTTCATTTGTCTG；
5、统计分析：拍照并读带，有带记为1，无带记为0，缺失记为9，统计扩增情况，用NTSYS-pc2.11按照类平均法进行聚类分析，构建分子进化系统树；
6、结果与分析：
6A、采用改良CTAB法提取的百合DNA条带清晰明亮，无降解现象，DNA完整性好，分光光度计检测发现A260/28比值在1.8～2.0之内，浓度在318～684ng/μL，均能满足PCR的要求；
6B、根据SSR分析结果，计算出11个百合品种间的遗传相似系数（参见表2），其中对13对引物进行多态性分析，选出2对带型稳定、多态性高重复性好的引物；共检出171个片段，其中，多态性片段131个，占总数的76.60%；每对引物可以检出4～22个数目不等的片段，平均每对引物扩增出1.69条带，片段大小介于100～250bp之间；结果表明，不同引物产生的条带数不同和多态性差异，其中，扩增多态性最好的引物为FL8和FL10；
表211个百合品种间的遗传相似系数
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
1 1.0000
2 0.8824 1.0000
3 0.9412 0.8235 1.0000
4 0.9412 0.9412 0.8824 1.0000
5 0.8824 0.8824 0.8235 0.9412 1.0000
6 0.8824 0.8824 0.7647 0.8235 0.8824 1.0000
7 0.8235 0.8235 0.8824 0.8824 0.8235 0.9412 1.0000
8 0.7647 0.7647 0.7059 0.8235 0.7647 0.7647 0.7059 1.0000
9 0.7647 0.8824 0.7059 0.8235 0.7647 0.7647 0.7059 0.6471 1.0000
10 0.8235 0.7059 0.7647 0.7647 0.7059 0.7059 0.6471 0.7059 0.5882 1.0000
11 0.7647 0.7647 0.7059 0.8235 0.7647 0.7647 0.7059 0.6471 0.6471 0.5882 1.0000
6C、各品种间遗传距离在0.5882～0.9412之间，绿百合、圭亚那和加拿大黄之间的遗传相似系数最小，为0.5882；彩蝶、粉天使与山丹玫紫、索拉纳和黑色蒙特、接曼、香水白与粉天使遗传相似系数最大，为0.9412，11个品种的平均遗传相似系数为0.7647；
6D、聚类分析结果表明：将11个百合品种分为六大类，以加拿大黄为第Ⅰ大类，以圭亚那为第II大类，以紫衣姑娘为第III大类，以绿百合为第IV大类，以接曼、香水白为第V大类，其余的黑色蒙特、索拉纳、彩蝶、粉天使和山丹玫紫为第VI大类；花色相似的聚为一类，与遗传相似系数的分析结果一致。

Claims (1)

1.一种采用SSR分子标记技术鉴别百合品种的方法，其特征在于：包括如下步骤：
（1）准备百合材料：将山丹玫紫、接曼、彩蝶、粉天使、香水白、索拉纳、黑色蒙特、紫衣姑娘、绿百合、加拿大黄、圭亚那这11种百合材料种植于园艺实验站进行常规管理；在苗期随机取每种百合材料20个单株的新鲜叶片混用，液氮冷冻后放入-70℃超低温冰箱中保存备用；
（2）百合DNA的提取：用植物基因组试剂盒提取各种百合材料的DNA，用1.5%的琼脂糖凝胶电泳检测DNA纯度；将各材料的DNA浓度稀释至50ng/μL后，置于-20℃冰箱中备用；
（3）SSR引物设计：根据NCBI上搜索的花色基因EST序列，剔除小于20bp的EST后，对余下的EST—SSR用软件Primer5.0设计13对百合SSR引物；所述百合SSR引物的长度18～24bp，GC含量40%～70%，理论退火温度57.2℃～59.2℃，产物长度控制在150～250bp之间；
（4）SSR-PCR扩增反应、电泳检测：PCR反应体系20μL，其中，50ng/μLDNA样品1.5μL，10μmol·L-1正反向引物共1.5μL，10倍的含Mg2+的PCRreactionbuffer，2.0μL、25mmol·L-1dNTP，rTaq0.75U，加超纯水至20μL；PCR的反应程序：94℃变性1.5min，94℃变性30s，退火30s，32个循环，72℃延伸30s，72℃延伸5min，4℃保存；PCR扩增产物中加入6倍的Loadingbuffer2.0μL，取2.5μL上样，用8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测，银染显色；所述引物如下所述：
FL1，F：GCAGTGTCTTAGGGTGGTCAA，R:GAGGATGCGAGATTCAGAGG；
FL2，F:GCTCTTGGAGGGAGAAGGC，R:GGTTGTACGGCACGCTGAT；
FL3，F:CGTTATGCGTTGGTGATACTTT，R:GAGGATGCGAGATTCAGAGG；
FL4，F:GACTTCTCCGGGAGTTCGT，R:CATTGGGACAGTGTTTAGCG；
FL5，F:CCCCTCGGATCGAAGAAG，R:TCAGTGACTAGGAGCTACCAGAAT；
FL6，F:GAATGCAGTGTCTTAGGGTGG，R:GAGGATGCGAGATTCAGAGG；
FL7，F:CCTCGGATCGAAGAAGGATR:TCAGTGACTAGGAGCTACCAGAAT；
FL8，F:TTAAGCTGGCAGGCAAGAA，R:CATTGGGACAGTGTTTAGCG；
FL9，F:GCAGTGTCTTAGGGTGGTCAA，R:TGCAGCTTCCCAGTGGTC；
FL10，F:TCAGACTTCCTCCATCATACTTG，R:CATTGGGACAGTGTTTAGCG；
FL11，F:TGCTGCTCAGACTTCCTCCA，R:TCAGTTGACCACCCTAAGACACT；
FL12，F:AAATTAGGCGTTAATCGTGTTC，R:TGTCCGGTCAGGTTAGTCCA；
FL13，F:GACTTCTCCGGGAGTTCGT，R:ACTGTAGCGGTTCATTTGTCTG；
（5）统计分析：拍照并读带，有带记为1，无带记为0，缺失记为9，统计扩增情况，用NTSYS-pc2.11按照类平均法进行聚类分析，构建分子进化系统树；
（6）结果与分析：
（6A）采用改良CTAB法提取的百合DNA条带清晰明亮，无降解现象，DNA完整性好，分光光度计检测发现A260/280比值在1.8～2.0之内，浓度在318～684ng/μL，均能满足PCR的要求；
（6B）根据SSR分析结果，计算出11个百合品种间的遗传相似系数，其中对13对引物进行多态性分析，选出2对带型稳定、多态性高重复性好的引物；共检出171个片段，其中，多态性片段131个，占总数的76.60%；每对引物可以检出4～22个数目不等的片段，平均每对引物扩增出1.69条带，片段大小介于100～250bp之间；结果表明，不同引物产生的条带数不同和多态性差异，其中，扩增多态性最好的引物为FL8和FL10；
（6C）各品种间遗传距离在0.5882～0.9412之间，绿百合、圭亚那和加拿大黄之间的遗传相似系数最小，为0.5882；彩蝶、粉天使与山丹玫紫、索拉纳和黑色蒙特、接曼、香水白与粉天使遗传相似系数最大，为0.9412，11个品种的平均遗传相似系数为0.7647；
（6D）聚类分析结果表明：将11个百合品种分为六大类，以加拿大黄为第Ⅰ大类，以圭亚那为第II大类，以紫衣姑娘为第III大类，以绿百合为第IV大类，以接曼、香水白为第V大类，其余的黑色蒙特、索拉纳、彩蝶、粉天使和山丹玫紫为第VI大类；花色相似的聚为一类，与遗传相似系数的分析结果一致。
CN201410526930.0A 2014-10-09 2014-10-09 一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法 Expired - Fee Related CN104263835B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410526930.0A CN104263835B (zh) 2014-10-09 2014-10-09 一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410526930.0A CN104263835B (zh) 2014-10-09 2014-10-09 一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN104263835A CN104263835A (zh) 2015-01-07
CN104263835B true CN104263835B (zh) 2016-06-08

Family

ID=52155409

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201410526930.0A Expired - Fee Related CN104263835B (zh) 2014-10-09 2014-10-09 一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN104263835B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105512513B (zh) * 2015-12-02 2018-04-13 新疆农业大学 一种基于ssr分子标记鉴别扁桃属植物种质的方法
CN106119388B (zh) * 2016-08-22 2019-10-11 北京市农林科学院 一种鉴别百合品种黄天霸的pcr引物对、试剂盒和方法
CN106434920B (zh) * 2016-09-28 2019-06-07 云南省农业科学院花卉研究所 泸定百合抗百合镰刀菌枯萎病相关基因kti的est-pcr分子标记及其应用
CN106995853B (zh) * 2017-05-16 2020-08-25 浙江海洋大学 筛选与少根紫萍叶生长相关的分子标记的方法
CN108396071B (zh) * 2018-03-20 2021-04-27 甘肃省农业科学院生物技术研究所 一种食用百合种质资源的分子鉴别方法
CN112251528B (zh) * 2020-10-19 2021-07-06 北京林业大学 用于鉴定百合倍性的微卫星dna分子标记及其应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102787115A (zh) * 2012-07-30 2012-11-21 浙江大学 百合属est-ssr标记及应用

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102787115A (zh) * 2012-07-30 2012-11-21 浙江大学 百合属est-ssr标记及应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
基于转录组信息的百合SSR标记开发及种质分子鉴定研究;葛亮;《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》;20121015(第10期);摘要、第二章和第三章 *
百合部分种及品种系统进化关系的EST-SSR标记分析;葛亮等;《园艺学报》;20121231;第39卷(第11期);2189-2198 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN104263835A (zh) 2015-01-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104263835B (zh) 一种采用ssr分子标记技术鉴别百合品种的方法
Sun et al. Genetic structure of three orchid species with contrasting breeding systems using RAPD and allozyme markers
Iketani et al. Incongruence between RFLPs of chloroplast DNA and morphological classification in east Asian pear (Pyrus spp.)
CN109706261B (zh) 一种鉴定西瓜品种真实性的方法及其专用snp引物组合
CN109868328B (zh) 鉴定紫斑牡丹品种的ssr分子标记及应用
Zhan et al. Genetic diversity and population structure of Toona ciliata revealed by simple sequence repeat markers
Li et al. Characterization of Hemerocallis citrina transcriptome and development of EST-SSR markers for evaluation of genetic diversity and population structure of Hemerocallis collection
Feng et al. Genetic diversity and geographical differentiation of cultivated six-rowed naked barley landraces from the Qinghai-Tibet plateau of China detected by SSR analysis
CN106591460B (zh) 一种ssr分子标记鉴定“中茶302”茶树品种的方法及应用
CN102876790B (zh) 一种菊属及其近缘种属通用的ssr标记pcr反应方法
Orhan et al. Molecular characterization of mulberry genotypes and species in Turkey
Zeinali et al. Molecular andmorphological diversity amonggrapevine (vitis vinifera L.) cultivars in Iran.
CN112029894B (zh) 蝶叶侧柏ssr标记的指纹图谱及其构建方法与应用
Sun et al. Assessment of genetic diversity and population structure of the genus Vicia (Vicia L.) using simple sequence repeat markers
CN107557487B (zh) 燕麦dna分子指纹图谱的构建方法及应用
CN112725521B (zh) 一种鼓槌石斛ssr分子标记引物组合物及其应用
CN105385768A (zh) 一种采用ssr分子标记技术鉴别谷子品种的方法及应用
CN113265481B (zh) 石蒜属荧光est-ssr分子标记引物和鉴定石蒜属种间杂交种f1代的方法及其应用
CN105420354B (zh) 基于InDel标记的常规稻品种淮稻5号和淮稻18号的鉴定方法
CN102220313B (zh) 适用于作物ssr分子标记分析的基因组dna提取方法
Jiao et al. Study of the relationship between the cultivars of Vitis vinifera and the white-fruited and hermaphrodite Chinese wild grapes
CN102251042B (zh) 快速检测瓠瓜品种种子纯度方法及其试剂盒
Fan et al. Anthocyanin composition and myba-related genotype in kyoho grape and its derivatives
CN101760509A (zh) 小麦-簇毛麦新种质山农05078的ssr标记
CN106868189B (zh) 用于鉴定春夏谷类型的引物对及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20160608

Termination date: 20171009