CN104255529A - 一种厚叶旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法 - Google Patents
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Abstract
本发明研究了一种厚叶旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得，愈伤组织的诱导，愈伤组织的分化，生根诱导等步骤。本研究对厚叶旋蒴苣苔的组织培养及无性系建立展开了探索，最终成功建立了厚叶旋蒴苣苔的再生系，为其进一步开发利用奠定了技术基础。
Description
技术领域
本发明涉及植物组织培养的快繁方法，属于植物技术领域。
背景技术
厚叶旋蒴苣苔，Boea crassifolia Hemsl.，苦苣苔科，多年生草本，又名厚叶牛耳草、岩白菜，叶基生，卵形或近圆形，稀为长圆形，长6-10cm，边缘具细钝锯齿，两面均伏生短柔毛，叶具柄，分布于湖北、四川、贵州、云南。厚叶旋蒴苣苔可做药用，性味：甘，平，滋补强壮，止血，止咳，主治肝脾虚弱，劳伤吐血，内伤咯血，肺病咳喘，白带，无名肿毒等症。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供厚叶旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，本研究对厚叶旋蒴苣苔的组织培养及无性系建立展开了探索，最终成功建立了厚叶旋蒴苣苔的再生系，为其进一步开发利用奠定了技术基础。
本发明所要解决的技术问题是通过以下方案来实现的：
取厚叶旋蒴苣苔幼嫩叶片，在1g/L多菌灵+25mg/L四环素的溶液中浸泡1h，无菌水冲洗3次，超净工作台上0.05%升汞处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的厚叶旋蒴苣苔叶片接入培养基为SH+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度25±1℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度25±1℃，分化培养出来的厚叶旋蒴苣苔芽苗放入生根培养基3/2SH+NAA0.01-0.02mg/L+IAA0.01-0.02mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂5.0g/L，pH5.85，光照5500lx，温度25±1℃。
采用本发明制备的厚叶旋蒴苣苔成活率高，培养周期短，利于大规模种植。
下面将结合具体实施方式对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式
实施例1
取厚叶旋蒴苣苔幼嫩叶片，在1g/L多菌灵+25mg/L四环素的溶液中浸泡1h，无菌水冲洗3次，超净工作台上0.05%升汞处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的厚叶旋蒴苣苔叶片接入培养基为SH+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度25±1℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度25±1℃，分化培养出来的厚叶旋蒴苣苔芽苗放入生根培养基3/2SH+NAA0.01mg/L+IAA0.01mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂5.0g/L，pH5.85，光照5500lx，温度25±1℃，生根率90%。
实施例2
取厚叶旋蒴苣苔幼嫩叶片，在1g/L多菌灵+25mg/L四环素的溶液中浸泡1h，无菌水冲洗3次，超净工作台上0.05%升汞处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的厚叶旋蒴苣苔叶片接入培养基为SH+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度25±1℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度25±1℃，分化培养出来的厚叶旋蒴苣苔芽苗放入生根培养基3/2SH+NAA0.02mg/L+IAA0.02mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂5.0g/L，pH5.85，光照5500lx，温度25±1℃，生根率91%。
实施例3
取厚叶旋蒴苣苔幼嫩叶片，在1g/L多菌灵+25mg/L四环素的溶液中浸泡1h，无菌水冲洗3次，超净工作台上0.05%升汞处理6min，无菌水冲洗5次，消毒处理过的厚叶旋蒴苣苔叶片接入培养基为SH+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度25±1℃，诱导出来的愈伤组织放入分化培养基SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度25±1℃，分化培养出来的厚叶旋蒴苣苔芽苗放入生根培养基3/2SH+NAA0.02mg/L+IAA0.01mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂5.0g/L，pH5.85，光照5500lx，温度25±1℃，生根率92%。
Claims (2)
1. 一种厚叶旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，包括无菌叶片的获得，愈伤组织的诱导，愈伤组织的分化，生根诱导，其主要步骤如下：
（1）取厚叶旋蒴苣苔的幼嫩叶片，对其进行消毒处理；
（2）将步骤（1）消毒处理过的厚叶旋蒴苣苔叶片接入培养基为SH+2，4-D2.0mg/L+6-BA1.0mg/l诱导培养基中进行愈伤组织诱导，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，暗光照，温度25±1℃；
（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入分化培养基SH+6-BA1.0mg/L+TDZ0.5mg/L+2，4-D2.0mg/L，附加蔗糖30g/L，琼脂6.5g/L，pH5.8，光照1200lx，温度25±1℃；
（4）取步骤（3）分化培养出来的厚叶旋蒴苣苔芽苗放入生根培养基3/2SH+NAA0.01-0.02mg/L+IAA0.01-0.02mg/L，附加蔗糖20g/L，琼脂5.0g/L，pH5.85，光照5500lx，温度25±1℃。
2. 按照权利要求1所述的一种厚叶旋蒴苣苔植株再生的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述厚叶旋蒴苣苔无菌叶片的获得为，取厚叶旋蒴苣苔幼嫩叶片，在1g/L多菌灵+25mg/L四环素的溶液中浸泡1h，无菌水冲洗3次，超净工作台上0.05%升汞处理6min，无菌水冲洗5次。
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Cited By (4)
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|---|---|---|---|---|
| CN106106166A (zh) * | 2016-07-15 | 2016-11-16 | 四川禾木本业农林科技有限公司 | 一种苦苣苔科植物组织培养方法 |
| CN106565727A (zh) * | 2016-11-01 | 2017-04-19 | 聊城大学 | 一种利用石蒜鳞茎愈伤组织产生石蒜碱、力克拉敏的方法 |
| CN106900559A (zh) * | 2017-03-24 | 2017-06-30 | 广西壮族自治区农业科学院花卉研究所 | 一种微斑报春苣苔的无菌播种和组织培养方法 |
| CN109418156A (zh) * | 2017-07-21 | 2019-03-05 | 中国科学院植物研究所 | 复苏植物的快速繁殖和高效栽培技术 |
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| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
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