CN104232547A

CN104232547A - 一种用于羊饲料的微生物菌群添加剂及其制备方法

Info

Publication number: CN104232547A
Application number: CN201410491189.9A
Authority: CN
Inventors: 曾伟; 张文荟; 吴庆儒; 邓文颖; 赵燕
Original assignee: NANJING GLOBAL BIOLOGICAL SCIENCE & TECHNOLOGY Co Ltd
Current assignee: Shanghai Global Biotechnology Group Co ltd
Priority date: 2014-09-24
Filing date: 2014-09-24
Publication date: 2014-12-24
Anticipated expiration: 2034-09-24
Also published as: CN104232547B

Abstract

本发明公开了一种用于羊饲料的微生物菌群添加剂，其特征在于，所述的添加剂中包括如下数量比复合菌群：两歧双歧杆菌：酿酒酵母：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：粪肠球菌=（56-58）:（24-27）：7:7:1，复合菌群的活菌数量为2.0×10⁸-1.0×10⁹cfu/g。本发明的微生物菌群之间通过协同作用调节肠道内微生态平衡，避免了抗生素等药物的使用，产品更加环保且成本低廉，有着很好的应用前景。

Description

一种用于羊饲料的微生物菌群添加剂及其制备方法

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，更具体的涉及一种用于养羊的微生物菌群及其制备方法。

背景技术

近年来，我国非常重视草食家畜的发展，尤其是牛羊的发展状况，然而牛羊的生长离不开饲料，饲料中更不可缺少饲料添加剂。饲料添加剂用量虽小，但作用巨大，具有补充或平衡饲料营养，预防疾病，促进羊的生长，保障饲料质量和提高羊的产品产量等多功能。科学使用饲料添加剂，既能有效地增加羊产品产量，还可以提高饲料利用率，节省饲料，降低成本，达到增产增收的目的。羊的饲料添加剂种类众多，包括抗生素、激素类添加剂，以及中草药类的添加剂，但这些添加剂多为普用饲料添加剂，这些普用饲料添加剂在羊的养育过程中均会有不同程度的药物残留和不良的副作用，部分饲料添加剂价格昂贵，进而造成养羊的成本增加。

此外，羊属反刍动物，瘤胃内有原虫，也有乳酸菌、芽孢菌和酵母菌等微生物。原虫虽对纤维素有较强分解作用，但也会吞噬大量细菌，且原虫的增加会使瘤胃内的丙酸含量减少，而丙酸是反刍动物葡萄糖的主要来源，因此，若原虫所占比例过高，则无法保障动物对能量的需求，且还会造成羊瘤胃内菌群失调而产生的腹泻问题。现有的羊饲料添加剂均未能解决此问题。

发明内容

为了克服通用饲料添加剂药物残留问题、原虫增加问题以及保障羊瘤胃内有益微生物数量，维持微生态平衡，本发明研发专门针对羊的复合微生物菌群替代普适的饲料添加剂。本发明选用由两歧双歧杆菌、酿酒酵母、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和粪肠球菌形成的复合微生物菌群作为羊的饲料添加剂。

本发明所采取的技术方案为：一种用于羊饲料的微生物菌群添加剂，其特征在于，所述的添加剂中包括如下数量比的复合菌群：两歧双歧杆菌：酿酒酵母：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：粪肠球菌=（56-58）:（24-27）：7:7:1，复合菌群的活菌数量为2.0×10⁸-1.0×10⁹cfu/g。

所述微生物菌群添加剂还包括辅料，所述辅料包含：麸皮、淀粉、寡糖和玉米粉等

所述微生物菌群添加剂的投加量仅为饲料总重量的0.2% - 0.6%，以拌喂、喂饮等方式使用。

所述微生物菌群添加剂的制备方法为：首先生产两歧双歧杆菌、酿酒酵母、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和粪肠球菌发酵液，然后根据菌种密度按数量比换算成发酵液的比例，并按换算后的比例将发酵液混合，并与辅料经低温干燥、粉碎过筛后制成固体。

所述两歧双歧杆菌发酵液的生产方法为：将目的菌株以2%的接种量加入到MRS液体培养基中，37℃下厌氧培养48h，然后进入发酵罐中进行厌氧发酵，发酵培养基为：酵母浸出粉1%、葡萄糖0.8%、玉米糖浆1.5%、磷酸二氢钾0.2%；采用补料分批发酵，检测菌液浓度，使其数量级维持在亿个/mL。其中，MRS液体培养基即常规的通用培养基。

所述啤酒酵母发酵液的生产方式：将菌株以2%的接种量加入到YPD培养基中，32℃好氧培养48h，再以2%的接种量接种到麦芽汁培养基中，并辅以汤米酵母粉；所述汤米酵母粉为酵母粉加入米汤中，使酵母粉的浓度为0.2%。其中，YPD培养基即常规的通用培养基。

所述凝结芽孢杆菌发酵液的生产方式：将目的菌株以2%的接种量加入到种子培养基中，种子培养基配方为：酵母膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，好氧培养24h，再以2%接种量接入到发酵培养基中，发酵培养基配方为：葡萄糖10 g/L，蛋白胨5 g/L，玉米浆10g/L，MgSO4·7H₂O 1 g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.5 g/L，MnSO₄ 0.05 g/L，采用补料分批发酵方式发酵3-7天。

所述枯草芽孢杆菌发酵液的生产方式：将目的菌株以2%的接种量加入到种子培养基中，种子培养基配方为葡萄糖5g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉1g/L，牛肉膏3g/L，MgSO₄ 0.5g/L，MnSO₄ 0.05g/L，好氧过夜培养，再以2%接种量接入到发酵罐中，发酵培养基配方为：玉米粉1.0%，葡萄糖0.5%，豆饼粉15%，鱼粉0.5%，CaCO₃ 0.5%，(NH₄)₂SO₄ 0 .1%，K₂HPO4 0.03%，MgSO₄·7H₂O 0.02%，MnSO₄ 0.02%，好氧发酵2 - 5天。

所述粪肠球菌发酵液生产方式：将目的菌株以2%的接种量接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，然后以10%的接种量添加到TSB培养基中进行厌氧发酵，TSB培养基配方为：胰蛋白胨1.5%，大豆蛋白胨0.5%，氯化钠0.5%，调节pH为7.2，于25℃ - 30℃下培养3天。

本发明所述的两歧双歧杆菌能够增加羊的肠道有益菌数量，使肠道中各类微生物保持动态平衡，在肠粘膜表面形成微生物屏障，抑制有害菌生长；而且能够分解食物中的蛋白质、糖类，使部分脂肪少量降解，加强胃肠道对营养物质的消化吸收；菌体或代谢产物能够增加肠道粘膜的免疫作用，增强免疫力。所述酿酒酵母的甘露聚糖能够干扰或阻断病原微生物的定植，加强肠道免疫力；酵母菌能够直接提供多种营养成分，促进动物生长；提高肠道消化酶活性，促进微生物繁殖和增强活性。所述的凝结芽孢杆菌无毒副作用，能够有效的抑制有害菌的生长，改良肠道微生态环境，促进肠道发育；可以有效改善菌群失调性腹泻；还可以提高饲料品质，促进饲料的消化吸收，降低料重比。所述枯草芽孢杆菌能够快速消耗游离氧，造成低氧环境，促进有益厌氧菌的增殖，调节微生态平衡；可以分泌多种酶类，提高消化酶活性，改善饲料利用率；产生微生物、促生长因子等多种营养物质，提高钙磷利用率；刺激动物生长的免疫器官，激活淋巴细胞，提高动物免疫力。所述粪肠球菌耐热耐酸、具有两歧双歧杆菌的作用，繁殖速度快，抑制大肠杆菌生长；提高矿物元素的生物学活性，促进营养物质吸收，改善微生态环境。

本发明的相对于现有的羊饲料添加剂，具有如下有益效果：

1、本复合微生物菌群针对性强，是专门针对羊的微生物菌群，增加有益菌群比例，防止羊瘤胃内的原虫比例过高。

2、本复合微生物菌群优化了羊的肠道微生态平衡，羊瘤胃内乳酸菌、芽孢菌和酵母菌可达10⁷-10⁸个/克，增加了有益菌的数量，抑制了有害微生物的繁殖，使肠内菌群保持正常，减缓羊由菌群失调而产生的腹泻问题，有效避免了抗生素的使用。

3、本复合微生物产生的消化酶促进了不易分解物质的水解，有利于维生素和微量元素等物质的吸收，使营养物质的利用更加充分，促进羊的快速生长，同时避免了抗生素等物质的使用，使得羊肉等食品更加安全。

4、本复合微生物通过刺激肠道内的免疫细胞，同时产生抗菌物质杀灭病害微生物，增强机体免疫作用，羊的防病、抗病能力增强。

具体实施方式

实施例1

一种用于羊饲料的微生物菌群添加剂，其特征在于，所述的添加剂中包括如下数量比复合菌群：两歧双歧杆菌：酿酒酵母：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：粪肠球菌=58：26：7：7：1。所述微生物菌群添加剂还包括辅料，所述辅料包含：麸皮、淀粉、寡糖和淀粉。

上述的微生物菌群添加剂的制备方法为：首先生产两歧双歧杆菌、酿酒酵母、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和粪肠球菌发酵液，然后根据菌种密度按数量比换算成发酵液的比例，并按换算后的比例将发酵液混合，并与辅料经低温干燥、粉碎过筛后制成固体。其中：所述两歧双歧杆菌发酵液的生产方法为：将目的菌株以2%的接种量加入到MRS液体培养基中，37℃下厌氧培养48h，然后进入发酵罐中进行厌氧发酵，发酵液的成分为：酵母浸出粉1%、葡萄糖0.8%、玉米糖浆1.5%、磷酸二氢钾0.2%；采用补料分批发酵，检测菌液浓度，使其数量级维持在亿个/mL。所述啤酒酵母发酵液的生产方式：将菌株以2%的接种量加入到YPD培养基中，32℃好氧培养48h，再以2%的接种量接种到麦芽汁培养基中，并辅以汤米酵母粉；所述汤米酵母粉为酵母粉加入米汤中，使酵母粉的浓度为0.2%。所述凝结芽孢杆菌发酵液的生产方式：将目的菌株以2%的接种量加入到种子培养基中，种子培养基配方为：酵母膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，好氧培养24h，再以2%接种量接入到发酵培养基中，发酵培养基配方为：葡萄糖10 g/L，蛋白胨5 g/L，玉米浆10g/L，MgSO4·7H₂O 1 g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.5 g/L，MnSO₄ 0.05 g/L，采用补料分批发酵方式发酵3-7天。所述枯草芽孢杆菌发酵液的生产方式：将目的菌株以2%的接种量加入到种子培养基中，种子培养基配方为葡萄糖5g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉1g/L，牛肉膏3g/L，MgSO₄ 0.5g/L，MnSO₄ 0.05g/L，好氧过夜培养，再以2%接种量接入到发酵罐中，发酵培养基配方为：玉米粉1.0%，葡萄糖0.5%，豆饼粉15%，鱼粉0.5%，CaCO₃ 0.5%，(NH₄)₂SO₄ 0 .1%，K₂HPO4 0.03%，MgSO₄·7H₂O 0.02%，MnSO₄ 0.02%，好氧发酵2 - 5天。所述粪肠球菌发酵液生产方式：将目的菌株以2%的接种量接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，然后以10%的接种量添加到TSB培养基中进行厌氧发酵，TSB培养基配方为：胰蛋白胨1.5%，大豆蛋白胨0.5%，氯化钠0.5%，调节pH为7.2，于25℃ - 30℃下培养3天。

实施例2

实施例1所述的微生物菌群添加剂，其中复合菌群的活菌数量为2.0×10⁸cfu/g。按实施例1所述的方法制备成成品，并将成品以0.2%的添加量投加到用于养羊的饲料中，饮喂，对三个养羊场经过1个月的考察，比较50只羊投加复合菌群后其瘤胃pH的变化，处理前后其pH平均值由6.13降到5.78，对有害微生物起到了进一步的抑制作用，取得了本发明所述的有益效果。

实施例3

实施例1所述的微生物菌群添加剂，其中复合菌群的活菌数量为1.0 ×10⁹cfu/g。按实施例1所述的方法制备成成品，并将成品以0.3%的添加量投加到用于养羊的饲料中，拌喂，在一个有约600头羊的养羊场随机各选取30头羊，分别作为本实施例的实验组和对照组，比较其半个月后的羊瘤胃内的乳酸菌、酵母菌和芽孢菌、纤毛虫（原虫的主要类群）的数量变化（表1）。由表1可知经过半个月的考察，对照组羊瘤胃内的乳酸菌、酵母菌和芽孢菌几乎无变化，原虫数量有小幅增加；实验组羊瘤胃内的乳酸菌、酵母菌和芽孢菌在半个月后分别约为原来的5.5倍和6.5倍，纤毛虫数量减少了7%，体内维持了较好的微生态环境，取得了本发明所述的有益效果。

表1 15天后羊瘤胃内微生物数量变化（个/克）

实施例4

实施例1所述的微生物菌群添加剂，其中复合菌群的活菌数量为8×10⁸cfu/g。按实施例1所述的方法制备成成品，并将成品以0.5%的添加量投加到用于养羊的饲料中，拌喂，在三个养羊场经过两个月的考察，每个养羊场约500头，共计1500头。分别测定3个羊场的各50头羊的腹泻发病率死亡率（表2）。由表2可知，3个羊场150头羊中，对照组羊的腹泻发病率和死亡率分别为18.0%和12.0%，均高于试验组的7.3%和2.0%，该复合微生物菌群可以加强羊的抗病能力、较好的抑制了羊的腹泻发病率和死亡率，取得了本发明所述的有益效果。

表2 羊的平均腹泻发病率和死亡率

组别	数量（头）	腹泻数量（头）	腹泻发病率（%）	死亡数量（头）	死亡率（%）
						对照组	150	27	18.0	18	12.0
实验组	150	11	7.3	3	2.0

Claims

1.一种用于羊饲料的微生物菌群添加剂，其特征在于，所述的添加剂中包括如下数量比的复合菌群：两歧双歧杆菌：酿酒酵母：凝结芽孢杆菌：枯草芽孢杆菌：粪肠球菌=（56-58）:（24-27）：7:7:1，复合菌群的活菌数量为2.0×10⁸-1.0×10⁹cfu/g。

2.根据权利要求1所述的用于羊饲料的微生物菌群添加剂，其特征在于，所述微生物菌群添加剂还包括辅料。

3.根据权利要求2所述的用于羊饲料的微生物菌群添加剂，其特征在于，所述辅料包含：麸皮、淀粉、寡糖和玉米粉。

4.权利要求1-3任一项所述的用于羊饲料的微生物菌群添加剂的使用方法，其特征在于，所述微生物菌群添加剂的投加量仅为饲料总重量的0.2% - 0.6%，以拌喂、喂饮等方式使用。

5.权利要求2或3所述的微生物菌群添加剂的制备方法，其特征在于，首先生产两歧双歧杆菌、酿酒酵母、凝结芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌和粪肠球菌发酵液，然后根据菌种密度按数量比换算成发酵液的比例，并按换算后的比例将发酵液混合，并与辅料经低温干燥、粉碎过筛后制成固体。

6.权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述两歧双歧杆菌发酵液的生产方法为：将目的菌株以2%的接种量加入到MRS液体培养基中，37℃下厌氧培养48h，然后进入发酵罐中进行厌氧发酵，发酵培养基为：酵母浸出粉1%、葡萄糖0.8%、玉米糖浆1.5%、磷酸二氢钾0.2%；采用补料分批发酵，检测菌液浓度，使其数量级维持在亿个/mL。

7.权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述啤酒酵母发酵液的生产方式：将菌株以2%的接种量加入到YPD培养基中，32℃好氧培养48h，再以2%的接种量接种到麦芽汁培养基中，并辅以1%的汤米酵母粉；所述汤米酵母粉为酵母粉加入米汤中，使酵母粉的浓度为0.2%。

8.权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述凝结芽孢杆菌发酵液的生产方式：将目的菌株以2%的接种量加入到种子培养基中，种子培养基配方为：酵母膏5g/L，蛋白胨10g/L，氯化钠10g/L，好氧培养24h，再以2%接种量接入到发酵培养基中，发酵培养基配方为：葡萄糖10 g/L，蛋白胨5 g/L，玉米浆10g/L，MgSO4·7H₂O 1 g/L，K₂HPO₄·3H₂O 0.5 g/L，MnSO₄ 0.05 g/L，采用补料分批发酵方式发酵3-7天。

9.权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌发酵液的生产方式：将目的菌株以2%的接种量加入到种子培养基中，种子培养基配方为葡萄糖5g/L，蛋白胨5g/L，酵母粉1g/L，牛肉膏3g/L，MgSO₄ 0.5g/L，MnSO₄ 0.05g/L，好氧过夜培养，再以2%接种量接入到发酵罐中，发酵培养基配方为：玉米粉1.0%，葡萄糖0.5%，豆饼粉15%，鱼粉0.5%，CaCO₃ 0.5%，(NH₄)₂SO₄ 0 .1%，K₂HPO4 0.03%，MgSO₄·7H₂O 0.02%，MnSO₄ 0.02%，好氧发酵2 - 5天。

10.权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述粪肠球菌发酵液生产方式：将目的菌株以2%的接种量接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，然后以10%的接种量添加到TSB培养基中进行厌氧发酵，TSB培养基配方为：胰蛋白胨1.5%，大豆蛋白胨0.5%，氯化钠0.5%，调节pH为7.2，于25℃ - 30℃下培养3天。