CN104173426B - 一种具有保肝功能的中药组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种具有保肝功能的中药组合物及其制备方法，它是由三七总皂苷提取物，灵芝多糖提取物，葛根总黄酮提取物和药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成。本发明根据中医药理论和肝脏的生理功能特点，经现代提取、纯化方法制备得到，有效成分含量高，杂质含量低，经功能性药理实验表明，本发明提供的中药组合物具有很好的保护肝脏，提高肝功能，促进肝细胞修复和再生的作用，相比现有技术用药更加安全可靠。并且本发明提供的制备方法，根据各原料药有效成分的理化性质优选确定最佳的制备工艺，可操作性强，适合工业化大生产。

Description

一种具有保肝功能的中药组合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及一种中药组合物，具体涉及一种具有保肝功能的中药组合物及其制备方法与应用。

背景技术

由于生活压力过大、生活或工作环境恶化，导致因接触化学性毒物(如酒精或其他有毒物质)引起的肝损伤人数也在不断增多，尤其是酗酒和酒精中毒者日益增多，或从事化学药物合成、化工生产等行业的工作人员中化学性肝损伤的人数逐渐增多，而由化学性肝肝损伤，引发的急慢性肝炎患者也逐渐增多，严重影响了人们的身心健康和家庭、社会的稳定。

目前，市场上有各种保肝护肝的药物或中药组合物，但是现有的保肝护肝药或中药组合物在保护人体肝脏的同时，本身存在易损肝的物质，长远疗效不佳。

因此，很有必要在现有技术的基础之上，研究开发一种对化学性肝损伤具有明显保护作用，安全性好，无毒副作用的中药组合物。

发明内容

发明目的：本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种对化学性肝损伤具有明显保护作用，安全有效的中药组合物。

技术方案：为了实现以上目的，本发明所采取的技术方案为：

一种具有保肝功能的中药组合物，其特征在于，它是由三七总皂苷提取物，灵芝多糖提取物，葛根总黄酮提取物和药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成；

所述的三七总皂苷提取物是由下列方法制备得到：

取三七药材6～12份，粉碎，加入三七药材重量6～12倍，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取2～4次，每次0.5～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，并用近红外光谱在线跟踪洗脱终点，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

所述的灵芝多糖提取物是由下列方法制备得到：

取灵芝药材3～9份，粉碎，加灵芝药材重量20～60倍水，在70℃～100℃水浴提取2～3次，每次1～2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～6倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

所述的葛根总黄酮提取物是由下列方法制备得到：

取葛根药材10～25份，粉碎，加入葛根药材8～15倍重量，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用。

本发明所述的具有保肝功能的中药组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材6～12份，粉碎，加入三七药材重量6～12倍，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取2～4次，每次0.5～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材3～9份，粉碎，加灵芝药材重量20～60倍水，在70℃～100℃水浴提取2～3次，每次1～2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～6倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材10～25份，粉碎，加入葛根药材8～15倍重量，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取1～3次，每次1～3小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物与药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成。

作为优选方案，以上所述的具有保肝功能的中药组合物，它是由三七总皂苷提取物，灵芝多糖提取物，葛根总黄酮提取物和药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成；

所述的三七总皂苷提取物是由下列方法制备得到：

取三七药材8～10份，粉碎，加入三七药材重量8～10倍，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取2～3次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，并用近红外光谱在线跟踪洗脱终点，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

所述的灵芝多糖提取物是由下列方法制备得到：

取灵芝药材6～9份，粉碎，加灵芝药材重量20～40倍水，在70℃～100℃水浴提取2～3次，每次1～2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

所述的葛根总黄酮提取物是由下列方法制备得到：

取葛根药材10～25份，粉碎，加入葛根药材10～15倍重量，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取1～2次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用。

本发明所述的具有保肝功能的中药组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材8～10份，粉碎，加入三七药材重量8～10倍，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取2～3次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材6～9份，粉碎，加灵芝药材重量20～40倍水，在70℃～100℃水浴提取2～3次，每次1～2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材15～25份，粉碎，加入葛根药材10～15倍重量，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取1～2次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物与药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成。

本发明所述的具有保肝功能的中药组合物，它是由三七总皂苷提取物，灵芝多糖提取物，葛根总黄酮提取物和药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成片剂、胶囊、颗粒、丸剂或口服液。

本发明所述的具有保肝功能的中药组合物，实验结果表明具有很好的保肝护肝作用，安全性好，可用于防治肝病。

本发明提供的具有保肝作用的中药组合物，是以传统中医药学理论为基础，结合现代医学理论研制而成。其中葛根：甘、辛，凉。归脾、胃、肺经。具有解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，舒经活络，解酒毒的功能。用于外感发热头痛，项背强痛，口渴，消渴，麻疹不透，热痢，泄泻，眩晕头痛，中风偏瘫，胸痹心痛，酒毒伤中。

三七：甘、微苦，温。归肝、胃经。具散瘀止血，消肿定痛的功能。用于咯血，吐血，衄血，便血，崩漏，外伤出血，胸腹刺痛，跌扑肿痛。

灵芝：甘，平。归心、肺、肝、肾经。具有补气安神，止咳平喘的功能。用于心神不宁，失眠心悸，肺虚咳喘，肺劳短气，不思饮食。

经现代药理学研究发现，葛根含多种黄酮类成分，具有解酒毒、降血脂等多种药理活性；三七可通过有效改善肝脏微循环，使肝脏血运增加，改善肝脏缺血缺氧，增强细胞超氧化物歧化酶(SOD)活力，减轻细胞损伤，通过抑制肝星状细胞增生及细胞内外I型胶原生成来实现抗肝纤维化作用的，灵芝含有的灵芝多糖具有保肝护肝的作用。本发明根据各药物活性成分的理化性质，经过大量实验确定其最佳的提取工艺，得到提取物活性成分含量高，杂质少，从而具有很好的保肝作用，并且无杂质等带来的毒副作用，相比现有技术，服用更加安全，疗效更好。

有益效果：本发明根据中医药理论和肝脏的生理功能特点，采用辨证论治的理论，经科学配伍组方制定本发明，经功能性药理实验表明本发明提供的中药组合物具有很好的保护肝脏，提高肝功能，促进肝细胞修复和再生的作用，且杂质少，用药更加安全可靠。

本发明提供的具有保肝作用的中药组合物的制备方法，针对传统提取分离方法的不足，根据本发明提供的具有保肝作用的中药组合物原料药有效成分的特殊性质，经过系统条件正交实验优选出最佳的制备工艺，可操作性强，适合工业化大生产。

具体实施方式

下面结合具体实施例进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施例1

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材10份，粉碎，加入三七药材重量10倍，浓度为80％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材9份，粉碎，加灵芝药材重量40倍水，在100℃水浴提取2次，每次2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材25份，粉碎，加入葛根药材15倍重量，浓度为80％的乙醇，回流提取2次，每次2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物与乳糖或玉米淀粉，混合均匀，整粒，然后压片制成片剂。

实施例2

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材8份，粉碎，加入三七药材重量8倍，浓度为50％的乙醇，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材6份，粉碎，加灵芝药材重量20倍水，在70℃水浴提取2次，每次2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材15份，粉碎，加入葛根药材10倍重量，浓度为50％的乙醇，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物，加蒸馏水溶解，过滤，加入糖浆，调节pH值,制成口服液。

实施例3

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材6份，粉碎，加入三七药材重量6倍，浓度为50％％的乙醇，回流提取2次，每次1小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材3份，粉碎，加灵芝药材重量20倍水，在70℃水浴提取2次，每次1小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～6倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材10份，粉碎，加入葛根药材8倍重量，浓度为50％的乙醇，回流提取2次，每次2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物和稀释剂乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，干燥，制成颗粒剂。

实施例4

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材12份，粉碎，加入三七药材重量12倍，浓度为80％的乙醇，回流提取4次，每次2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材9份，粉碎，加灵芝药材重量60倍水，在100℃水浴提取3次，每次1小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材20份，粉碎，加入葛根药材15倍重量，浓度为80％的乙醇，回流提取3次，每次2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物和载体乳糖或玉米淀粉混合均匀，整粒，然后装胶囊制成胶囊剂。

实施例5 化学性肝损伤模型的药理实验

1、实验动物：SPF级昆明小鼠50只(山东大学实验动物中心提供)，雄性，18～22g，随机分为5组：药物组:本发明实施例1制备得到的中药组合物提取物(按200mg/kg、400mg/kg、1200mg/kg分别设低、中、高三个剂量组)，同时设阴性对照组及5600mg/kg乙醇阳性对照组)，每组各10只小鼠。

2、实验方法：实施例1的低、中、高三个剂量组小鼠分别按体重给予20ml/kg的药液(实施例1制备得到，按低、中、高三个剂量分别加水溶解至含药量为0.01g/ml、0.02g/ml、0.06g/ml)灌胃给药，阴性对照组及阳性对照组给予等体积蒸馏水。连续灌胃32天，每4天称1次体重，按体重调整给药量。第32天三个剂量组及阳性对照组小鼠均灌胃50％(V/V)乙醇14ml/kg，禁食16小时后处死动物，取肝脏制成10％(W/V)的肝匀浆，用试剂盒测定MDA、GSH和TG的含量。同时从肝脏左叶中部做横切面取材，制作冰冻切片，苏丹Ⅲ染色，苏木素复染细胞核，封片，观察脂滴在肝脏的分布范围和面积。

3、实验结果：具体实验结果如表1所示：

表1 本发明中药组合物对小鼠体重的影响(g)

表1的实验结果表明，各组动物在试验期内体重持续增长，各组之间无统计学差异(P＞0.05)。

表2 本发明中药组合物对小鼠肝脏中MDA含量的影响

组别	动物数	MDA含量(μmol/g肝)
			阴性对照组	10	0.25±0.04*
阳性对照组	10	0.37±0.09
			实施例1低剂量组	10	0.34±0.05
实施例1中剂量组	10	0.29±0.04*
			实施例1高剂量组	10	0.27±0.03*

与阳性对照组比较：*P＜0.05

由表2的实验结果表明，阳性对照组与阴性对照组相比，肝组织中MDA含量明显升高，有统计学差异(P＜0.05)；与阳性对照组相比，本发明提供的中药组合物的中、高剂量组MDA含量显著降低并具有统计学差异(P＜0.05)，显示出很好的保护肝脏的活性。

表3 本发明中药组合物对小鼠肝脏中GSH含量的影响

组别	动物数	GSH含量(μmol/g肝)
			阴性对照组	10	4.81±0.52*
阳性对照组	10	3.60±0.33
			实施例1低剂量组	10	3.99±0.57
实施例1中剂量组	10	4.25±0.49*
			实施例1高剂量组	10	4.59±0.67*

与阳性对照组比较：*P＜0.05

由表3的实验结果表明，阳性对照组与阴性对照组相比，肝组织中GSH含量明显降低，有统计学差异(P＜0.05)；与阳性对照组相比，本发明的中、高剂量组GSH含量显著增高并具有统计学差异(P＜0.05)，显示出很好的保护肝脏的活性。

表4 本发明中药组合物对小鼠肝脏甘油三酯的影响

组别	动物数	TG含量(μmol/g肝)
			阴性对照组	10	41.78±8.77*
阳性对照组	10	137.04±26.81
			实施例1低剂量组	10	119.25±13.25
实施例1中剂量组	10	116.95±15.63*
			实施例1高剂量组	10	96.84±18.53*

与阳性对照组比较：*P＜0.05

由表4的实验结果表明，阳性对照组与阴性对照组比较，肝脏TG含量明显升高，有统计学差异(P＜0.05)；与阳性对照组相比，中、高剂量组TG含量均显著降低，并具有统计学差异(P＜0.05)。

肝脏病理组织学检查：从肝脏左叶中部做横切面取材，制作冰冻切片，苏丹Ⅲ染色，苏木素复染细胞核，甘油明胶封片，观察脂滴在肝脏的分布范围和面积。①阴性对照组：肝脏基本正常；②阳性对照组：全部动物出现肝细胞脂肪变性，与阴性对照组比较，有统计学差异(P＜0.05)；③本发明中药组合物的高剂量组与阳性对照组相比，肝细胞脂肪变性明显减轻，有统计学差异(P＜0.05)。结果见表5。

表5 本发明中药组合物对肝脏脂滴分布的影响

与阳性对照组比较：*P＜0.05

肝细胞脂肪变性评分标准：

本发明提供的保肝作用的中药组合物高剂量组，肝组织MDA含量低于阳性对照组(P＜0.05)，中、高剂量组TG含量均低于阳性对照组(P＜0.05)，高剂量组GSH含量高于阳性对照组(P＜0.05)，病理检查高剂量组肝细胞脂肪变性比阳性对照组明显减轻(P＜0.05)。表明本发明制剂对化学性肝损伤有很好的保护功能。

本发明提供的具有保肝作用的中药组合物，活性成分含量高，杂质少，临床保肝护肝疗效更佳优越，无毒副作用。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种具有保肝功能的中药组合物，其特征在于，它是由三七总皂苷提取物，灵芝多糖提取物，葛根总黄酮提取物制成；

所述的三七总皂苷提取物是由下列方法制备得到：

取三七药材8～10份，粉碎，加入三七药材重量8～10倍，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取2～3次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

所述的灵芝多糖提取物是由下列方法制备得到：

取灵芝药材6～9份，粉碎，加灵芝药材重量20～40倍水，在70℃～100℃水浴提取2～3次，每次1～2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

所述的葛根总黄酮提取物是由下列方法制备得到：

取葛根药材15～25份，粉碎，加入葛根药材10～15倍重量，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取1～2次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用。

2.一种具有保肝功能的中药组合物的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

(1)三七总皂苷提取物的制备：

取三七药材8～10份，粉碎，加入三七药材重量8～10倍，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取2～3次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，然后上大孔吸附树脂，用体积浓度为40％～80％乙醇洗脱，合并体积浓度为40％～60％的乙醇洗脱液，浓缩，真空干燥，得三七总皂苷提取物，备用；

(2)灵芝多糖提取物的制备：

取灵芝药材6～9份，粉碎，加灵芝药材重量20～40倍水，在70℃～100℃水浴提取2～3次，每次1～2小时，滤过，滤液浓缩，加入浓缩液2～4倍体积的无水乙醇溶液，0～4℃冷藏，过滤，干燥，得灵芝多糖提取物，备用；

(3)葛根总黄酮提取物的制备：

取葛根药材10～25份，粉碎，加入葛根药材10～15倍重量，浓度为50％～80％的乙醇，回流提取1～2次，每次1～2小时，合并提取液，0～4℃冷藏，压滤得滤液，浓缩，干燥，得葛根总黄酮提取物，备用；

(4)取步骤(1)制备得到的三七总皂苷提取物，步骤(2)制备得到的灵芝多糖提取物和步骤(3)制备得到的葛根总黄酮提取物与药学上或者中药组合物上可接受的辅料制成。

3.权利要求1所述的中药组合物在制备用于治疗或预防肝损伤的药物中的应用。