CN104144693A

CN104144693A - 用于治疗肝脏疾病和障碍的组合物和方法

Info

Publication number: CN104144693A
Application number: CN201380004625.9A
Authority: CN
Inventors: E·麦肯纳
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2012-01-16
Filing date: 2013-01-16
Publication date: 2014-11-12
Also published as: JP6632802B2; NZ625592A; CR20140342A; US20140030194A1; HK1198909A1; IL233639B; EA201491081A1; US20190290703A1; IL233639A0; CA2860311A1; BR112014016389A2; KR20220042485A; SG11201402650RA; KR20140121818A; KR20200106088A; AP2014007804A0; AU2021203147A1; AU2013209887A1; NI201400076A; US9713630B2

Abstract

本公开内容提供了经口组合物和使用此类组合物治疗感染有一种或多种肝脏障碍的受试者的方法。该组合物包括一种或多种革兰氏阳性菌的裂解物或细胞壁提取物，显示出针对丙型肝炎病毒5(HCV)的特定活性，并且可用于治疗感染有HCV以及其他肝脏疾病或障碍的那些人。还描述的是通过施用治疗有效量的至少一种能够上调或下调补体系统途径的治疗活性剂来治疗肝脏疾病或障碍的方法，其中10治疗活性剂增强一种或多种转换酶的形成。

Description

用于治疗肝脏疾病和障碍的组合物和方法

与相关申请的交叉参考

本专利申请基于2012年1月16日提交的美国临时专利申请系列号61/586,975，并且要求所述美国临时专利申请的优先权，所述美国临时专利申请的内容全文并入本文。

关于联邦资助的研究或开发的陈述

不适用。

附录的提及

不适用。

技术领域

在本文中公开且教导的本发明一般涉及用于肝脏障碍的治疗性处理的组合物，并且更具体而言涉及经由作用于补体替代途径的组合物，用于治疗患有肝炎特别是丙型肝炎的患者的组合物和方法。

背景技术

丙型肝炎病毒(HCV)是主要的人病原体，感染全世界估计170,000,000人—大致是由人免疫缺陷病毒1型感染数目的五倍。这些受HCV感染的个体中的大部分发展严重进行性肝病，包括肝硬化和肝细胞癌[Lauer,G.M.等人，N.Engl.J.Med.,第345卷:第41-52页(2001)]。

HCV分类为正链RNA病毒。基于推导的氨基酸序列的比较和5'非翻译区中的广泛相似性，HCV已分类为黄病毒科(Flaviviridae)内的分开的属。黄病毒科的所有成员均具有有包膜的病毒粒子，其含有经由单个、不间断的开放读码框的翻译而编码所有已知病毒特异性蛋白质的正链RNA基因组。

在HCV基因组各处的核苷酸和编码的氨基酸序列内发现相当大的异质性。至少六个主要基因型已得到表征，并且超过50个亚型已得到描述。HCV的主要基因型在其全世界的分布中不同，并且尽管有基因型对发病机理和治疗的可能作用的众多研究，HCV的遗传异质性的临床意义仍是难以捉摸的。

单链HCV RNA基因组长度为大约9500个核苷酸，并且具有编码约3000个氨基酸的单个大多聚蛋白的单个开放读码框(ORF)。在受感染的细胞中，该多聚蛋白通过细胞和病毒蛋白酶在多个位点处切割，以产生结构和非结构(NS)蛋白质。在HCV的情况下，成熟的非结构蛋白质(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的生成受两种病毒蛋白酶影响。第一种蛋白酶被认为是金属蛋白酶并且在NS2-NS3连接处切割；第二种蛋白酶是在NS3的N末端区域内包含的丝氨酸蛋白酶(也称为NS3蛋白酶)，并且介导NS3下游的所有后续切割，在NS3-NS4A切割位点处顺式和对于剩余的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位点反式。NS4A蛋白质看起来发挥多重功能，充当NS3蛋白酶的辅因子且可能帮助NS3及其他病毒复制酶组分的膜定位。NS3蛋白质与NS4A的复合物形成看起来是加工事件所需的，增强在所有位点处的蛋白酶解效率。NS3蛋白质也显示出核苷三磷酸酶和RNA解旋酶活性。NS5B(也称为HCV聚合酶)是RNA依赖性RNA聚合酶，其涉及HCV的复制。HCV NS5B蛋白质的细节在多篇论文中详细描述[参见例如Bressanelli,S.等人，Journal of Virology,第76(7)卷，第3482-3492页(2002)；和Defrancesco等人，Clinics in Liver Disease,第7卷，第211-242页(2003))。

目前，最有效的HCV治疗之一采用α干扰素和利巴韦林的组合，导致在40％患者中的持续功效[Poynard,T.等人，Lancet,第352卷:第1426-1432页(1998)]。近期临床结果证实聚乙二醇化的α干扰素作为单一治疗优于未经修饰的α干扰素[Zeuzem,S.等人，N.Engl.J.Med.,第343卷:第1666-1672页(2000)]。然而，即使对于涉及聚乙二醇化的α干扰素和利巴韦林的组合的实验治疗方案，大部分的患者也不具有病毒载量的持续减少。

HCV-796(HCV NS5B抑制剂)和这类相关化合物据报道具有减少患者中的HCV RNA水平的能力，如美国专利号7,265,152中所述。病毒RNA水平瞬时降低，并且随后当治疗使用该化合物作为单一试剂时，在给药过程中反弹，但当与其为干扰素和利巴韦林形式的标准护理组合时，水平更有力下降。由于在组合方案的延长给药过程中观察到的肝脏毒性，该化合物的开发被暂停。

乙型肝炎病毒(HBV)是属于嗜肝病毒科(Hepadnaviridae)的DNA病毒。HBV在人中引起乙型肝炎。据估计全世界20亿人已受感染(3个人中的1个)。约350,000,000人保持慢性感染，并且估计每年1百万人死于乙型肝炎及其并发症。HBV可引起终生感染、肝硬化、肝癌、肝功能衰竭和死亡。该病毒通过血液和体液传播。这可通过直接的血液至血液接触、无保护的性行为、未消毒针的使用、和在分娩过程期间从受感染女性到其新生儿而发生。被感染的大多数健康成人(90％)将恢复且发展针对未来乙型肝炎感染的保护性抗体。小部分(5-10％)将不能除去该病毒且将发展慢性感染，而当由该病毒感染时，90％的婴儿和高达50％的幼儿发展慢性感染。α干扰素是使用的最常见的治疗类型。该治疗涉及显著副作用，包括流感样症状、抑郁、皮疹、其他反应和异常血细胞计数。另一种治疗选项包括3TC，其也具有与其使用相关的许多副作用。在过去数年中，已存在渐增数目的显示用3TC治疗的患者发展HBV抗性株的报道。这在由HBV和HIV共感染的患者群体中尤其是有问题的。

丙型肝炎病毒(HCV)感染是美国最常见的慢性血液传播性感染，其中受感染患者数目可能超过4百万。该常见病毒感染是肝硬化和肝癌的主要原因，并且目前是美国肝移植的主要原因。由感染恢复是罕见的，并且约85百分比的受感染患者变成该病毒的慢性携带者，并且10–20百分比发展肝硬化。据估计全世界目前有170,000,000人是慢性携带者。根据疾病控制预防中心，单独在美国每年慢性丙型肝炎引起8,000-10,000例死亡，并且导致约1,000例肝移植。目前不存在可用于丙型肝炎的疫苗。使用干扰素α或干扰素与利巴韦林的组合的延长治疗仅在约40百分比的患者中是有效的，并且通常引起患者中的严重副作用。

今天，一般而言的病毒感染的治疗前景是不利的。一般而言，病毒的治疗具有平庸的功效并且与强烈副作用相关，所述强烈副作用或阻止有效剂量的施用或阻止长期治疗。

在疱疹病毒科(herpesviridae)的情况下，存在目前批准用于临床使用的五种主要治疗：疱疹净、阿糖腺苷、阿昔洛韦、膦甲酸和更昔洛韦。虽然具有有限功效，但这些治疗也伴随副作用。变态反应已在用疱疹净治疗的35％患者中报道，阿糖腺苷可在15％患者中导致胃肠道紊乱，阿昔洛韦、膦甲酸和更昔洛韦是核苷类似物，影响宿主细胞中的DNA复制。在更昔洛韦的情况下，在用该药物治疗的40％患者中报道嗜中性粒细胞减少症和血小板减少症。

虽然存在目前可用于治疗肝炎感染特别是丙型肝炎感染的许多不同药物，但所有这些均与副作用有关，所述副作用足够有力以需要广泛的补充用药，以给予患者合理的生活质量。在疱疹病毒科感染中发现的药物抗性株的另外问题通常需要治疗混合物(cocktail)的定期更换，并且在一些情况下，使得感染非常难以治疗。

明确的是，存在治疗患有此类病毒障碍的患者的改善疗法。本公开内容提供了超过一般在先前方法中使用的那种的技术优点。例如，组合物是新型的，并且有效针对至少丙型肝炎，以及可能的其他肝炎病毒包括乙型肝炎。另外，该化合物提供了例如就其作用机制、结合、抑制功效、靶选择性、可溶性、安全概况和/或生物利用度中的一种或多种而言的药学用途的优点。

本文公开且教导的本发明涉及使用包含至少一部分革兰氏阳性菌的口服制剂，用于治疗需要此类治疗的受试者中的肝炎病毒感染的组合物和方法。

发明内容

申请人已制备可用于患有肝脏疾病或障碍的受试者的治疗性处理的组合物、方法和制剂，所述肝脏疾病或障碍包括感染例如病毒感染例如甲型肝炎、乙型肝炎或丙型肝炎，医源性障碍，胆汁郁积障碍，遗传性障碍，肉瘤样病，器官移植等等。

依照本公开内容的第一个实施例，描述了用于跨越受试者的粘膜递送用于治疗肝炎障碍的治疗试剂的组合物，其中该组合物包含(a)来自革兰氏阳性菌的裂解物或细胞壁提取物，或其药学可接受的盐；(b)促进剂(promoter)；和(c)任选的载体，其中该细胞壁裂解物以有效治疗肝炎障碍的量存在。依照该实施例的进一步方面，该组合物还包含一种或多种对照释放试剂。

在该实施例的另外一个方面，革兰氏阳性菌选自嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、长双歧杆菌(Bifidobacterium longum)、短双歧杆菌(Bifidobacterium breve)、嗜酸乳杆菌(Lactobacillus acidophilus)、植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种(Lactobacillus delbrueckiisubsp.bulgaricus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)、乳酸双歧杆菌(Bifidobacterium lactis)、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌(包括干酪乳杆菌鼠李糖亚种(Lactobacillus casei ssp.Rhamnosus))、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)、和瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)及其组合。

在该公开内容的另一个实施例中，描述了治疗受试者中的丙型肝炎感染的方法，该方法包括给需要此类治疗的受试者施用治疗有效量的治疗组合物，其中该治疗组合物包含(a)来自革兰氏阳性菌的裂解物或细胞壁提取物，或其药学可接受的盐；和(b)促进剂，其中该细胞壁裂解物以有效治疗肝炎障碍的量存在。

依照本公开内容的进一步实施例，描述了治疗受试者中的肝炎疾病的方法，该方法包括给有此需要的受试者施用治疗有效量的至少一种能够上调或下调补体系统途径的治疗活性剂，其中该治疗活性剂增强一种或多种转换酶的形成。在该实施例的进一步方面，至少一种治疗活性剂是选自乳杆菌科(Lactobacillus family)、链球菌科(Streptococcus family)或双歧杆菌科(Bifidobacterium family)的革兰氏阳性菌，或其生物活性片段或变体。

附图说明

下述附图构成本说明书的部分，并且包括以进一步证实本发明的某些方面。本发明可通过参考与本文呈现的具体实施例的详细描述组合的这些附图中的一个或多个得到更好理解。

图1举例说明了依照本公开内容的组合物的作用机制，经典和替代补体途径的一般示意图。

图2举例说明了图1的经典和替代补体途径的详细示意图。

图3举例说明了本发明的组合物对所选TLR/NLR细胞系的示例性刺激作用的图；该图中的值对应于筛选1-3的平均值。

图4举例说明了本发明的对照和样品组合物针对NF-κB对照细胞的刺激作用的图；该图中的值对应于筛选1-3的平均值。

图5举例说明了人TLR/NLR配体筛选的结果。

图6举例说明了NF-κB对照细胞筛选的结果。

虽然本文公开的本发明可实施多种修饰和替代形式，但仅少数具体实施例已在附图中作为例子显示并且在下文详细描述。附图和这些具体实施例的详细描述不预期以任何方式限制本发明概念或所附权利要求的宽度或范围。相反，提供附图和详细书面描述以对本领域普通技术人员举例说明本发明的概念，并且使得此类人能够制备且利用本发明概念。

定义

提供下述定义以便帮助本领域技术人员理解本发明的详细描述。

短语“药物组合物”指化合物和本领域一般公认的用于将生物活性化合物递送至哺乳动物例如人的介质的制剂。此类介质因此包括所有药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

如本文使用的短语“药学可接受的载体、稀释剂或赋形剂”包括但不限于任何佐剂、载体、赋形剂、助流剂、甜味剂、稀释剂、防腐剂、染料/着色剂、风味增强剂、表面活性剂、湿润剂、分散剂、悬浮剂、稳定剂、等渗剂、溶剂或乳化剂，其已由美国食品与药物管理局批准为在人或驯养动物中使用是可接受的。

如本文使用的，术语“治疗有效量”，即施用于动物例如哺乳动物特别是人的剂量应足以预防靶向疾病或障碍，例如癌症，延迟其发作，减慢其进展，或治疗该疾病或障碍(例如逆转或取消该病症)。本领域技术人员将认识到剂量将取决于多种因素，包括采用的特定组合物的强度，以及动物的年龄、物种、状况和体重。剂量的大小还由施用途径、时机和频率以及任何不利副作用的存在、性质和程度和所需生理效应决定，所述任何不利副作用可能伴随特定组合物的施用。

如本文使用的，“生物活性剂”指天然或合成的任何氨基酸、肽、蛋白质或抗体(包括嵌合、单克隆、分离的或人源化抗体)，其显示出治疗上有用的效应。此类生物活性剂可包括重组蛋白质、酶、类肽(peptoid)或PNA以及此类试剂的组合。

短语“药学可接受的”或“药理学可接受的”指当在医学或兽医学背景下施用于人或动物时，不产生变态反应或类似出乎意料的反应的组合物。

如本文使用的术语“配体”意指与中心金属原子相关的分子基团。术语二齿(或双齿(didentate))、三齿、四齿和多齿用于指示配体的潜在结合位点数目。例如，羧酸可以是二齿或其他多齿配体，因为它具有至少两个结合位点，羧基氧和羟基氧。以相似方式，酰胺具有至少两个结合位点，羧基氧和氮原子。氨基糖可具有至少两个结合位点，并且许多氨基糖将具有多个结合位点包括氨基氮、羟基氧、乙醚氧、醛羰基和/或酮羧基。

如本文使用的术语“氨基糖”指具有一个醇式羟基(通常但不一定在‘第2位’)替换为氨基的单糖，系统地称为x-脱氧-x-单糖。作为非限制性例子，D-葡糖胺或2-氨基-2-脱氧-D-吡喃葡萄糖是氨基糖。其他举例说明性氨基糖包括但不限于赤藓糖胺(erythrosamine)、threosamine、核糖胺(ribosamine)、阿拉伯糖胺(arabinosamine)、木糖胺、来苏糖胺(lyxosamine)、阿洛糖胺、altrosamine、葡糖胺、甘露糖胺、idosamine、半乳糖胺、塔罗糖胺及其衍生物，所有这些均适合于在本公开内容的组合物内使用。氨基糖包括醛糖和醛糖。另外，氨基糖可具有直链结构；然而，氨基糖的醛或酮基可与不同碳原子上的羟基反应，以形成半缩醛或半缩酮，在所述情况下存在两个碳原子之间的氧桥，形成杂环。具有五和六原子的氨基糖环分别被称为呋喃糖和吡喃糖形式，并且与其相应直链形式平衡存在。应当指出环形式具有比直链形式多一个的光学活性碳，并且因此具有平衡互换的α-和β-形式。术语“氨基糖”还意指葡基胺，为其中氮由除H外的官能团取代的氨基糖。葡基胺的举例说明性非限制性例子包括N-乙酰葡糖胺(NAG)和N-甲基葡糖胺。

如本文使用的术语“糖胺聚糖”意指含有氨基糖的任何一组多糖中的任何。糖胺聚糖还可与蛋白质形成复合物。

如本文使用的术语“水合物”或“n-水合物”意指具有一定水合度的分子实体，其中n是代表结合水数目的整数，例如一水合物、二水化物、三水合物、四水合物、五水合物、六水合物、七水合物、八水合物、九水合物等。

本发明的组合物可制备用于通过本领域一般已知的方法和与本领域一般已知的赋形剂的药物施用，例如Remington's Pharmaceutical Sciences[Troy,David B.,编辑；Lippincott,Williams and Wilkins；第21版，(2005)]中所述。

如本文使用的“治疗”涵盖具有目的疾病或病症的哺乳动物优选人中目的疾病或病症例如组织损伤的治疗，以及疾病或障碍的预防或抑制措施，并且包括：(i)预防疾病或病症在哺乳动物中出现，特别当此类哺乳动物易患该病症但仍未诊断为具有该病症时；(ii)抑制疾病或病症，即停止其发展；(iii)缓解疾病或病症，即引起疾病或病症消退；或(iv)缓解起因于疾病或病症的症状。因此，例如术语“治疗”包括在疾病或障碍发作前或后试剂的施用，由此预防或去除所有疾病或障碍体征。作为另一个例子，在疾病的临床表现后对抗疾病症状的试剂的施用包括疾病的“治疗”。进一步地，在发作后和在临床症状已发展后试剂的施用包括疾病的“治疗”，其中施用影响疾病或障碍的临床参数，例如组织损伤程度或疾病的改善。

术语“一氧化氮释放”或“一氧化氮贡献”指贡献、释放和/或直接或间接转移一氧化氮的三种氧化还原形式(NO+、NO～、NO*)中的任一种的方法，使得一氧化氮种类的生物活性在预期作用位点处表达。

术语“一氧化氮供体”或“NO供体”指这样的化合物，其贡献、释放和/或直接或间接转移一氧化氮种类，和/或刺激一氧化氮或内皮衍生的舒张因子(EDRF)在体内的内源生产，和/或升高一氧化氮或EDRF在体内的内源水平，和/或氧化以产生一氧化氮，和/或是一氧化氮合酶和/或细胞色素P450的底物。“NO供体”还包括其为L-精氨酸前体、精氨酸酶抑制剂和一氧化氮介质的化合物。

短语“需要治疗”包括已具有疾病或障碍的哺乳动物例如人或动物，包括其中待预防疾病或障碍的哺乳动物。

如本文使用的，术语“疾病”、“障碍”和“病症”可互换使用，或可以是不同的，因为特定病或病症可能不具有已知成因剂(使得病原学尚未解决)，并且因此仍未识别为疾病而是仅作为不希望的状况或综合征，其中或多或少的特定症状组已由临床医生鉴定。

如本文使用的，表达“试剂”、“组合物”和“拮抗剂”在本公开内容的范围内可互换使用，并且意欲包括当施用于患有淋巴障碍的受试者时，导致疗效的任何分子或物质。

如本文使用的，术语“医源性障碍”指通过暴露于预期治疗一些其他障碍的治疗化合物诱导的那些障碍。药物诱导的肝病或障碍的例子包括例如与安咪奈丁、氯苯酰吲酸(clometacine)、丹曲林、双氯芬酸和非诺贝特(仅举几个例子)施用相关的慢性活动性肝炎；与乙酰异丙嗪(Aceprometazine)、阿义马林和有关药物、阿米替林(Amitryptyline)和氨苄青霉素(仅举几个例子)施用相关的慢性胆汁郁积；或与别嘌呤醇(Allopurinal)、阿司匹林和地西泮施用相关的肝脏肉芽肿。在该背景下，可参考“MacSween’s Pathology of theLiver，5th Ed.”[(Burt,Portman和Ferrell编辑)，Churchill Livingstone(2007)，在第14章中，“Hepatic Injury Due to Drugs,Chemicals and Toxins”通过Lewis,J.H.和Kleiner,D.E.,第649-759页]的表14.8、14.10和14.11，所述参考文献的公开内容在相关部分中以引用的方式并入本文。

术语“不溶于水的”包含术语难溶于水的、微或极微溶于水的以及实际上或完全不溶于水的化合物[参见，Remington:The Science and Practice ofPharmacy,第I卷，194-195(Gennaro，编辑，1995)]。如本文使用的，如果化合物需要至少30份溶剂(例如水或盐水)溶解一份溶质(同上)，则它对于本发明的目的是不溶于水的。依照本公开内容，术语“不溶于水的”还包含油或脂质可溶的，以及基本上油或脂质可溶的。

除非上下文另有具体规定或由上下文明确，术语本发明的“化合物”应解释为包括适当的其“药学可接受的盐”(为简便起见，所述表达已在某些情况下消除)。

如本文使用的，当无需限定条件(如与w/v、v/v或w/w一起)使用时，术语“％”意指固体在液体中的溶液的％重量比体积(w/v)、气体在液体中的溶液的％重量比体积(w/v)、液体在液体中的溶液的％体积比体积(v/v)以及固体和半固体的混合物的重量比重量(w/w)，例如Remington's PharmaceuticalSciences[Troy,David B.，编辑；Lippincott,Williams and Wilkins；第21版，(2005)]中描述的。

如本文使用的，术语“患者”和“受试者”可互换使用，并且一般指哺乳动物，且更具体地指人、猿、猴、大鼠、猪、犬、兔、猫、牛、马、小鼠、绵羊和山羊。依照该定义，依照本公开内容描述且提及的肺表面或膜指哺乳动物优选人或动物测试受试者的肺表面或膜。

如本文使用的，就公开的治疗组合物而言的“增强”和/或“提供缓解”意指提及的组合物对受试者的施用对受试哺乳动物提供肝炎障碍的一种或多种症状的立即和/或延长的减轻、改善、抑制或缓和。

如与本公开内容结合使用的术语“药物”意指任何化合物，其为生物活性的，例如显示出或能够显示出体内疗效或预防效应，或体外生物效应。

如本文使用的，术语“口腔粘膜”指覆盖除了牙齿之外的口腔内部的所有结构的粘膜基质。口腔粘膜一般在颜色中从粉红色到紫褐色改变，取决于个体的肤色。口腔粘膜的结构取决于其在口腔中的位置和该区域的功能而改变。例如，内衬颊的粘膜未设计为经得住咀嚼的重力，而覆盖颌的咀嚼粘膜有经得住咀嚼力的结构。包括味蕾的特殊分化粘膜覆盖舌。口腔粘膜组织的例子包括但不限于腭组织、牙龈组织、颊粘膜组织、舌组织和口腔组织的底部。

如本文使用的，术语“控制药物递送系统”或“DDS”指这样的制剂，其控制治疗试剂/药物递送的速率和周期(即时间释放剂量)，靶向受试者身体的特定区域，并且设计为维持所需治疗期过程中的治疗水平，例如由M.Vallet-Regí[Chem.Eur.J.,第12卷，第5934-5943页(2006)]描述的。

术语“生物利用度”指药物被吸收或变得对体内的治疗部位可用的速率和/或程度。

如本文使用的术语“施用”指本发明的组合物对口腔的粘膜(即口腔粘膜)的施用。在口腔粘膜内的合适施用部位的例子包括但不限于口底部(舌下粘膜)、颊(颊粘膜)、牙龈(牙龈粘膜)、口顶部(腭粘膜)、唇衬里的粘膜及其组合。优选地，将本发明的组合物施用于舌下粘膜、颊粘膜或其组合。

如本文使用的术语“功能上等价的变体”指基本上具有与原始微生物相同的特性和功能的微生物。此类变体可任意形成，例如通过紫外线照射、或本领域技术人员已知的其他诱变技术，以及分类学名称改变，例如双歧杆菌属中的改变。

如本文使用的，就细胞悬浮液而言的术语“裂解”指破裂细胞壁和/或细胞膜、细胞组分、至少一部分细胞的细胞器，使得至少一部分内含物例如细胞的生物分子被释放。在本发明的方法的某些实施例中，至少一部分生物材料被裂解，以形成裂解物。虽然不受任何特定操作理论束缚，生物样品在由适当溶剂环境的组合产生的物理化学力下、连同压力和热或空化或两种的组合裂解。在裂解后释放的生物分子包括核酸、碳水化合物、氨基酸、蛋白质、肽、DNA、RNA、复合糖(寡糖)、肽聚糖及其任何组合。生物样品通常是含水的，这意指它们含有有效量的水分子以促使它们处于液态。

如本文使用的术语“裂解”指细胞膜或细胞壁的破裂(例如通过使用酶或其他适当材料消化)和来自细胞的细胞质释放。如本文使用的，术语“裂解物”指由裂解的破坏性过程产生的材料，特别是具有裂解的细胞碎片的液化相(例如破裂的细胞壁和/或细胞膜)和DNA。

如本文使用的，术语“裂解物”指裂解生物材料的产物，例如如上文列出的释放的生物分子。尽管大多数裂解物在生物样品流体中容易溶解，但某些裂解物部分例如疏水组分可能需要另外的步骤，以确保至少一部分裂解物被溶解。用于确保裂解物溶解的另外的步骤的例子包括合适的表面活性剂(或脱水剂)，例如通常包括在缓冲液中的十二烷基硫酸钠(SDS)，或其任何组合。裂解物溶解还可以使用剧烈混合、剪切、在表面活性剂中加热、空化、珠击打、煮沸、除气或其任何组合得到帮助。

如本文使用的，术语“细胞”预期包含原核细胞、真核细胞、噬菌体颗粒和细胞器。

如本文使用的，术语“化学治疗剂”意指抑制受试者中的肿瘤或癌细胞增殖的细胞毒性化合物。在一些情况下，化学治疗剂对患者中的正常(非癌性和非肿瘤)细胞具有细胞毒性作用。

如本文使用的术语“下调”指响应外部变量例如治疗试剂，细胞通过其降低细胞组分例如RNA或蛋白质的数量的过程。

如本文使用的术语“上调”指响应外部变量例如治疗试剂，细胞通过其增加细胞组分例如RNA或蛋白质的数量的过程。

具体实施方式

上文描述的附图和下文特定结构和功能的书面描述不呈现为限制申请人已发明的范围或所附权利要求的范围。相反，提供附图和书面描述以教导本领域技术人员制备且使用对于其寻求专利保护的本发明。本领域技术人员应当理解并非本发明的商业实施例的所有特点均为清楚和理解起见而描述或显示。本领域技术人员还理解掺入本发明方面的实际商业实施例的开发需要众多实施特异性决定，以实现开发者用于商业实施例的最终目标。此类实施特异性决定可包括且可能不限于顺应系统相关、商业相关、政府相关的及其他约束，其可通过特异性实施、位置和偶尔地改变。虽然开发者的努力在绝对意义上可能是复杂和耗时的，然而，此类努力将是具有本公开内容益处的本领域技术人员的例行工作。必须理解本文公开且教导的本发明可实施众多和多种修饰和替代形式。最后，单数术语例如但不限于“一个/一种”的使用不预期为项目数目的限制。另外，有关术语例如但不限于“顶部”、“底部”、“左”、“右”、“上”、“下”、“向下”、“向上”、“侧面”等等的使用在书面描述中在对附图的具体提及中为了清楚起见而使用，并且不预期限制本发明或所附权利要求的范围。

申请人已制备用于肝脏障碍包括丙型肝炎和乙型肝炎的治疗性处理的组合物和方法，其中该组合物可经口递送至受试者且显示出很少的有害副作用或无有害副作用。

申请人也已提供使用本公开内容的治疗活性组合物，用于调节(例如控制例如通过上调或下调)补体系统的替代途径(AP)的方法。

A.组合物

本公开内容的治疗活性组合物包括天然、非合成生物活性剂，优选例如以裂解物形式的一种或多种革兰氏阳性菌的一种或多种细胞壁级分；促进剂；和任选的一种或多种其他添加剂，包括控制释放成分，以便允许组合物被吸收到需要治疗的受试者的粘膜壁内，或与需要治疗的受试者的粘膜壁相互作用。

根据本发明，活性治疗试剂是革兰氏阳性菌的一种或多种裂解物或细胞壁级分的混合物，根据需要，取决于具体治疗应用，其量范围为约1mg/kg至约100mg/kg。依照本公开内容，革兰氏阳性菌的裂解物或细胞壁级分来自选自下述的革兰氏阳性菌：嗜酸乳杆菌、布赫内氏乳杆菌(Lactobacillusbuchneri)、干酪乳杆菌、链状乳杆菌(Lactobacillus catenaforme)、纤维二糖乳杆菌(Lactobacillus cellobiosus)、卷曲乳杆菌(Lactobacillus crispatus)、弯曲乳杆菌(Lactobacillus curvatus)、德氏乳杆菌(Lactobacillus delbrueckii)、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种、德氏乳杆菌乳酸亚种(Lactobacillus delbrueckii subsp.lactis)、瑞士乳杆菌(Lactobacillus helveticus)、詹氏乳杆菌(Lactobacillusjensenii)、莱士曼氏乳酸杆菌(Lactobacillus leichmannii)、微小乳杆菌(Lactobacillus minutus)、副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)、植物乳杆菌、鼠李糖乳杆菌、罗氏乳杆菌(Lactobacillus rogosae)、唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)、芽孢乳杆菌(Lactobacillus sporogenes)(也称为凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans))、短乳杆菌(Lactobacillus brevis)、加氏乳杆菌(Lactobacillus gasseri)、发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、青春双歧杆菌(Bifidobacterium adolescentis)、动物双歧杆菌(Bifidobacterium animalis)(尤其是动物双歧杆菌动物亚种(B.animalis,subspecies animalis))、角双歧杆菌(Bifidobacterium angulatum)、两歧双歧杆菌(Bifidobacterium bifidum)、短双歧杆菌、链状双歧杆菌(Bifidobacterium catenulatum)、齿双歧杆菌(Bifidobacterium dentium)、艾氏双歧杆菌(Bifidobacterium eriksonii)、婴儿双歧杆菌(Bifidobacterium infantis)、乳酸双歧杆菌(动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis))、长双歧杆菌、植物双歧杆菌(Bifidobacterium plantarum)、假小链双歧杆菌(Bifidobacteriumpseudo-catenulatum)、假长双歧杆菌(Bifidobacterium pseudo-longum)、乳酸乳球菌(Leptococcus lactis)、乳酸链球菌(Streptococcus lactis)(也称为乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcus lactis subsp.lactis))、棉子糖乳酸链球菌(Streptococcus raffinolactis)、发酵氨基酸球菌(Acidaminococcus fermenta)、发酵噬纤维菌(Cytophaga fermentans)、发酵红育菌(Rhodoferax fermentans)、发酵纤维单胞菌(Cellulomonas fermentans)、运动发酵单胞菌(Zymomonasmobilis)、和嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)以及其功能等价变体，所有这些均适合于执行本发明。这些众所周知的物种的混合物可由具有本领域普通经验的任何人容易制备。

可使用其他物种，例如本领域状态中公开和保藏中心中一般可获得的物种，所述保藏中心例如ECACC(欧洲细胞培养物保藏中心(EuropeanCollection of Cell Cultures))、ASTM；和DSM。

根据本发明的优选治疗活性剂是选自下述的革兰氏阳性菌的裂解物或细胞壁提取物：嗜热链球菌、动物双歧杆菌(尤其是动物双歧杆菌动物亚种)、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种、乳酸乳球菌、凝结芽孢杆菌(芽孢乳杆菌)、乳酸双歧杆菌(动物双歧杆菌乳酸亚种(Bifidobacterium animalis subsp.lactis))、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌和瑞士乳杆菌以及其功能等价变体。这些混合物中的一些以冻干形式是商购可得的。

本公开内容的治疗组合物还可包含且任选包含一种或多种促进剂，以帮助活性剂跨越生物膜的治疗递送。优选地，依照本公开内容有用的促进剂是氨基酸、N-烷基化肽、糖、氨基糖或氨基糖螯合物。氨基糖螯合物包含一种或多种氨基糖配体、一种或多种饱和羟基化羧酸配体和营养可接受的金属，其中一种或多种氨基糖配体中的至少一种是葡糖胺，并且其中金属选自锰、镁、钠、钾和锌，并且其中一种或多种饱和羟基化羧酸配体是葡糖酸，并且其中葡糖胺配体与营养可接受的金属的比为2:1，其中营养金属是非铁的。

依照本公开内容的一个方面，治疗制剂可包括一种或多种选自下述的乙酰化或脱乙酰化氨基糖：以单体、寡聚体和/或其聚合物形式的NAG、半乳糖胺、N-乙酰半乳糖胺、甘露糖胺和N-乙酰甘露糖胺，包括几丁质和人糖胺聚糖以及其衍生物。在本文中提及氨基糖使用的术语“其衍生物”意指在灭菌过程中具有形成细胞毒性降解产物的相同或基本上相同能力的氨基糖衍生物。依照本公开内容选择的进一步方面，促进剂是选自下述的成员：聚-L-赖氨酸、葡糖胺、聚-L-精氨酸、半乳糖胺、N-乙酰甘露糖胺(NAM；N-Ac-Man)、N-乙酰葡糖胺(NAG；N-Ac-Glc),N,N’-二乙酰葡糖胺(NAG-NAG；N,N’-二乙酰壳二糖)、N,N’,N”,N’”-四乙酰葡糖胺(NAG-NAG-NAG-NAG；N,N’,N”,N’”-四乙酰壳四糖)及其混合物。

任选地和同样可接受的，促进剂可以是具有2至12个α-1,2和/或α-1,6连接的糖的酰化糖基氧基糖或任选的酰化寡聚糖基氧糖部分，其中一种或多种糖选自D-甘露糖、D-半乳糖、D-葡萄糖、D-葡糖胺、N-乙酰葡糖胺和6-脱氧-L-甘露糖，其中寡聚糖基氧基糖部分可包含相同或不同的糖。

依照本公开内容的进一步方面，本发明的治疗制剂还可包含一种或多种另外的治疗试剂，例如下文描述的第二治疗试剂。该组合物通常还作为无菌药物组合物的一部分供应，所述药物组合物通常包括药学可接受的载体。包含另外的治疗试剂的该组合物可以任何合适形式(取决于将其施用于患者的所需方法)。

在某些方面，第二治疗试剂是抗风湿药、抗炎剂、化学治疗剂、放射治疗剂、免疫抑制剂、干扰素、基于干扰素的化学治疗剂、不同的细菌壁裂解物或细胞毒性药物。

抗风湿药包括但不限于金诺芬、硫唑嘌呤、氯喹、D-青霉胺、硫代苹果酸金钠羟氯喹、硫代苯酸金钠(Myocrisin)和柳氮磺胺吡啶氨甲蝶呤。

抗炎剂包括但不限于地塞米松、颇得斯安、美沙拉嗪、安萨科、磷酸可待因、扑炎痛、芬布芬、萘普生、双氯芬酸、依托度酸和吲哚美辛、阿司匹林和布洛芬以及非甾体抗炎药(NSAID)。

化学治疗剂包括但不限于放射性分子、毒素也称为细胞毒素或细胞毒素剂(其包括对细胞活力有害的任何试剂)、试剂、和脂质体或其他含化学治疗化合物的囊泡。合适的化学治疗剂的例子包括但不限于1-去氢睾酮、5-氟尿嘧啶氮烯咪胺、6-巯嘌呤、6-硫鸟嘌呤、放线菌素D、阿霉素、阿地白介素、烷基化剂、别嘌呤醇钠、六甲蜜胺、氨磷汀、阿那曲唑、氨茴霉素(AMC))、抗有丝分裂剂、顺式二氯二氨铂(II)(DDP)顺铂)、二氨基二氯铂、蒽环、抗生素、抗代谢药、天冬酰胺酶、活BCG(膀胱内的)、倍他米松磷酸钠和乙酸倍他米松、比卡鲁胺、硫酸博来霉素、白消安、甲酰四氢叶酸钙、卡奇霉素、卡培他滨、卡铂、洛莫司汀(CCNU)、卡莫司汀(BSNU)、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、秋水仙碱、缀合雌激素、环磷酰胺、Cyclothosphamide、阿糖胞苷、阿糖胞苷、细胞松弛素B、环磷酰胺(Cytoxan)、达卡巴嗪、更生霉素、更生霉素(以前的放线菌素)、盐酸柔红霉素(daunirubicin)、柠檬酸柔红霉素、地尼白介素、右雷佐生、二溴甘露醇、二羟基炭疽菌素二酮、多西他赛、甲磺酸多拉司琼、盐酸阿霉素、屈大麻酚、大肠杆菌(E.coli)L-天冬酰胺酶、依米丁、α红细胞生成素、欧文氏菌属(Erwinia)L-天冬酰胺酶、酯化雌激素、雌二醇、雌氮芥磷酸钠、溴化乙啶、炔雌醇、依替膦酸、依托泊苷嗜橙菌因子、磷酸依托泊苷、非格司亭、氟尿苷、氟康唑、磷酸氟达拉滨、氟尿嘧啶、氟他胺、亚叶酸、盐酸吉西他滨、糖皮质激素、乙酸戈舍瑞林、短杆菌肽D、盐酸格拉司琼、羟基脲、盐酸伊达比星、异环磷酰胺、干扰素α-2b、盐酸伊立替康、来曲唑、甲酰四氢叶酸钙、乙酸亮丙瑞林、盐酸左旋咪唑、利多卡因、洛莫司汀、美登素(maytansinoid)、盐酸氮芥、乙酸甲羟孕酮、乙酸甲地孕酮、盐酸美法仑、巯嘌呤、美司钠、氨甲蝶呤、甲睾酮、光辉霉素、丝裂霉素C、米托坦、米托蒽醌、尼鲁米特、乙酸奥曲肽、盐酸昂丹司琼、紫杉醇、帕米膦酸二钠、喷司他丁、盐酸匹鲁卡品、普利霉素(plimycin)、聚苯丙生20卡莫司汀植入剂(polifeprosan20with carmustineimplant)、卟吩姆钠、普鲁卡因、盐酸丙卡巴肼、普萘洛尔、利妥昔单抗、沙格司亭、链脲霉素、它莫西芬、泰素、替尼泊苷、替尼泊苷(tenoposide)、睾内酯、丁卡因、噻替哌(thioepa)苯丁酸氮芥、硫鸟嘌呤、噻替派、盐酸托泊替康、柠檬酸托瑞米芬、曲妥珠单抗、维甲酸、戊柔比星、硫酸长春碱、硫酸长春新碱和酒石酸长春瑞滨。

在本公开内容的另外其他方面，第二治疗试剂是本公开内容的TNF-α拮抗剂或抗TNF-α抗体。此类TNF-α拮抗剂的例子包括但不限于可溶性TNF-α受体；依那西普(Immunex)或其片段、衍生物或类似物；英夫利昔单抗(Centacor)或其衍生物、类似物或抗原结合片段；IL-10，其已知阻断经由干扰素-γ活化的巨噬细胞的TNF-α产生，TNFR-IgG；鼠产品TBP-1；疫苗CytoTAb(Protherics)；反义分子104838(ISIS)；肽RDP-58(SangStat)；沙立度胺(Celgene)；CDC-801(Celgene)；DPC-333(Dupont)；VX-745(Vertex)；AGIX-4207(AtheroGenics)；ITF-2357(Italfarmaco)；NPI-13021-31(Nereus)；SCIO-469(Scios)；TACE靶向剂(targeter)(Immunix/AHP)；CLX-120500(Calyx)；Thiazolopyrim(Dynavax)；金诺芬(瑞得)(SmithKline Beecham Pharmaceuticals)；奎纳克林(二氯水合米帕林)；替尼达普(Enablex)；黑色素(Large Scale Biological)；和通过Uriach的抗p38MAPK试剂。

另外，第二治疗试剂由特定乳酸菌的微粒细胞壁片段制备(例如Del-ImmunePure Research Products,LLC,Colorado,USA)，其预期刺激免疫系统。

在本公开内容的进一步方面，第二治疗试剂是雷帕霉素或类似的大环抗生素。如本文使用的，雷帕霉素包括雷帕霉素及其所有类似物、衍生物和同源物，和具有与雷帕霉素相同的药理学特性的其他亲免蛋白(immunophilin)，所述药理学特性包括TOR或mTOR(雷帕霉素的哺乳动物靶)的抑制(例如充当TOR激酶抑制剂)。可用作第二治疗试剂的其他免疫抑制剂包括但不限于环孢菌素、他克莫司(FK-506)、硫唑嘌呤和霉酚酸酯)。

可与单独的第一治疗试剂或与第一和第二治疗试剂组合的进一步治疗试剂还包括血管生成剂例如血管内皮生长因子(VEGF)和成纤维细胞生长因子(FGF)；血管收缩素受体阻断剂；一氧化氮供体；反义寡核苷酸及其组合；细胞周期抑制剂、mTOR抑制剂和生长因子受体信号转导激酶抑制剂；类维生素A(retenoid)；细胞周期蛋白/CDK抑制剂；HMG辅酶还原酶抑制剂(他汀)；和蛋白酶抑制剂。

雷帕霉素是示例性的优选免疫抑制剂。雷帕霉素是如美国-3929992中公开的由吸水链霉菌(Streptomyces hygroscopicus)产生的大环三烯抗生素。已发现雷帕霉素尤其抑制体内血管平滑肌细胞增殖。相应地，雷帕霉素可用于治疗哺乳动物中的内膜平滑肌细胞增生、再狭窄和血管闭塞，特别是在生物或机械介导的血管损伤后，或在使哺乳动物易患此类血管损伤的条件下。雷帕霉素作用于抑制平滑肌细胞增殖且不干扰血管壁的再内皮化。响应在血管成形术诱导的损伤过程中释放的丝裂信号，雷帕霉素通过拮抗平滑肌增殖减少血管增生。在细胞周期的晚期G1期时，生长因子和细胞因子介导的平滑肌增殖的抑制被认为是雷帕霉素的显性作用机制。然而，当全身施用时，雷帕霉素也已知预防T细胞增殖和分化。这是其免疫抑制活性的基础。

在1977年，雷帕霉素也显示在下述模型中作为免疫抑制剂是有效的：实验性过敏性脑脊髓炎模型，是多发性硬化的模型；佐剂性关节炎模型，是类风湿性关节炎的模型；并且显示有效抑制IgE样抗体的形成[Martel,R.等人，Can.J.Physiol.Pharmacol.,第55卷，48(1977)]。雷帕霉素的免疫抑制效应也已公开于FASEB,1989,3,3411中，因为其具有延长组织相容性啮齿类动物中的器官移植物的存活时间的能力[Morris,R.,Med.Sci.Res.,第17卷，877(1989)]。雷帕霉素抑制T细胞活化的能力由M.Strauch[FASEB,1989,3,3411]公开。雷帕霉素的这些及其他生物效应在Transplantation Reviews,第6卷39-87(1992)中综述。

在另一个实施例中，本发明的组合物为选自锭剂、口香糖、咀嚼片剂和溶解片剂(例如缓慢溶解片剂、快速溶解片剂、或控制释放片剂)或其他合适的控制释放制剂的剂型。优选地，该组合物是锭剂或溶解片剂。

在优选实施例中，本公开内容的活性剂跨越受试者的口腔粘膜递送，所述口腔粘膜选自舌下粘膜、颊粘膜及其组合。优选地，该组合物舌下施用，使得活性成分跨越舌下粘膜递送。

在另一个实施例中，载体通常是固体、半固体或液体例如粘合剂、胶基或其组合。在本发明的组合物中使用的合适粘合剂包括但不限于糖醇例如甘露醇、山梨糖醇和木糖醇；糖例如乳糖、右旋糖、蔗糖、葡萄糖和糖粉；其他物质例如肌醇、糖蜜、麦芽糖糊精、淀粉、纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯胶、瓜尔胶、黄蓍胶、海藻酸盐、爱尔兰苔提取物、panwar胶、茄替胶(ghatti gum)、依莎贝果壳(isapol husk)粘液、落叶松阿拉伯半乳聚糖、明胶、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚丙烯酸(例如卡波普)、硅酸钙、磷酸钙、磷酸二钙、硫酸钙、高岭土、氯化钠、聚乙二醇；及其组合。在本发明的组合物中使用的合适胶基包括例如选自本领域已知的许多不溶于水的和不溶于唾液的胶基材料的材料。在某些情况下，胶基包含至少一种疏水聚合物和至少一种亲水聚合物。用于胶基的合适疏水和亲水聚合物的非限制性例子包括天然和合成聚合物例如弹性体、橡胶及其组合。合适天然聚合物的例子包括但不限于植物起源的物质例如糖胶树胶、节路顿胶(jelutong)、杜仲胶(gutta percha)、冠胶(crown gum)及其组合。合适合成聚合物的例子包括弹性体例如丁二烯-苯乙烯共聚物、异丁烯和异戊二烯共聚物(例如“丁基橡胶”)、聚乙烯、聚异丁烯、聚乙烯基酯(例如聚乙酸乙烯酯和聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯)及其组合。在其他情况下，胶基包含丁基橡胶(即异丁烯和异戊二烯共聚物)、聚异丁烯和任选的聚乙烯乙酸酯(例如具有大约12,000的分子量)的混合物。

在另外一个实施例中，本发明的组合物还可包含甜味剂、调味剂、保护剂、增塑剂、蜡、弹性体溶剂、填充材料、防腐剂或其组合。在再另外一个实施例中，本发明的组合物还可包含润滑剂、湿润剂、乳化剂、增溶剂、悬浮剂、着色剂、崩解剂或其组合。在优选实施例中，与约75至约100微米的典型平均药物粒径相比较，在本文描述的组合物中的药物的平均粒径为约20微米。在另一个优选实施例中，在本文描述的组合物中的药物的平均粒径小于或等于载体成分(例如胶基、粘合剂等)的平均粒径。

在本公开内容的一个方面，治疗组合物可任选包括缓冲系统以使唾液的pH升高至约8.0至约11的pH，不考虑待治疗受试者的口腔中的起始唾液pH。在本发明中使用的合适治疗试剂在上文描述。在本发明的缓冲系统中使用的合适碳酸盐和碳酸氢盐也在上文描述。在某些情况下，组合物还包含非生物治疗试剂例如NSAID。

合适的柠檬酸盐、磷酸盐和硼酸盐包括但不限于本领域已知的任何柠檬酸、磷酸或硼酸的盐。例如，在一些实施例中，柠檬酸盐选自柠檬酸钠、柠檬酸钾、柠檬酸钙、柠檬酸镁和柠檬酸铵。在其他实施例中，磷酸盐选自一碱式磷酸钠、二碱式磷酸钠、一碱式磷酸钾、二碱式磷酸钾、一碱式磷酸钙、二碱式磷酸钙、一碱式磷酸镁、二碱式磷酸镁、一碱式磷酸铵和二碱式磷酸铵。在另外其他实施例中，硼酸盐选自硼酸钠、硼酸钾、硼酸钙、硼酸镁和硼酸铵。在某些情况下，缓冲系统包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或柠檬酸盐。在某些其他情况下，缓冲系统包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或磷酸盐。在进一步的情况下，缓冲系统包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或硼酸盐。

除包含碳酸盐、碳酸氢盐和/或金属氧化物的缓冲系统之外，其他缓冲系统也适合于在本发明的组合物中使用。例如，在可替代实施例中，三元缓冲系统包含碳酸盐、碳酸氢盐和柠檬酸盐、磷酸盐或硼酸盐。在另一个可替代实施例中，缓冲系统包含碳酸盐或碳酸氢盐和选自下述的两种或更多种缓冲剂：金属氧化物、柠檬酸盐、磷酸盐和硼酸盐。在另外一个替代实施例中，缓冲系统是包含碳酸盐或碳酸氢盐和金属氧化物的二元缓冲系统。在再另外一个替代实施例中，缓冲系统是包含碳酸盐或碳酸氢盐和柠檬酸盐、磷酸盐或硼酸盐的二元缓冲系统。在进一步的替代实施例中，缓冲系统是包含金属氧化物和柠檬酸盐、磷酸盐或硼酸盐的二元缓冲系统。在再另外一个替代实施例中，缓冲系统是包含碳酸盐和碳酸氢盐优选碳酸钠和碳酸氢钠的二元缓冲系统。

在本发明的其他实施例中，本文描述的革兰氏阳性菌裂解物组合物可包括一种或多种有机一氧化氮增强化合物或有机一氧化氮供体。有机一氧化氮增强化合物优选但不一定是形成盐例如优选的有机硝酸盐、有机亚硝酸盐、亚硝基硫醇(nitrosothiol)、亚硝酸硫醇(thionitrite)和杂环一氧化氮供体的有机化合物。

进一步依照该实施例，有机一氧化氮供体是抗微生物化合物的盐。依照该实施例的方面，可用于形成盐且因此变成一氧化氮供体的抗微生物化合物包括但不限于氨苯砜乙酸、乙酰甘氨酸盐、acetylsulfametossipirazine、乙酰基磺胺甲氧吡嗪、羟胺氯吖胺、阿苯达唑、阿来西定、金刚烷胺(amatadine)、安巴腙、阿德诺西林、对氨基水杨酸、对氨基水杨酸肼、阿莫西林、氨苄青霉素、茴香霉素、阿帕西林、阿哌环素(apicyclin)、安普霉素、argininsa、阿扑西林、叠氮氯霉素、阿度西林、阿奇霉素、阿洛西林、巴氨西林、苯沙酸(benzoylpas)、苄青霉素酸、苄基磺酰胺、二环霉素、比阿培南(bipenam)、溴莫普林、卷曲霉素、羧苄青霉素、卡波霉素、头孢西酮(cafazedone)、卡茚西林、头孢卡品匹酯、头孢克洛、头孢羟氨苄、cefafroxil、头孢孟多、头孢他美(cefatamet)、头孢曲嗪、头孢西酮、头孢唑林、头孢拉宗、头孢克定、头孢地尼、头孢特仑、头孢克肟、头孢甲肟、头孢美唑、头孢米诺、头孢地嗪、头孢尼西、头孢哌酮、头孢雷特、头孢噻肟、头孢替坦、头孢替安、头孢西丁、头孢唑兰、头孢咪唑、头孢匹胺、头孢匹罗、头孢泊肟酯、头孢丙烯、头孢沙定、头孢磺啶、头孢他啶、头孢特仑、头孢替唑、头孢布烯、头孢噻呋、头孢唑肟、头孢曲松、头孢呋辛、头孢唑喃、头孢赛曲钠、cephadrine、头孢氨苄、头孢来星、头孢噻啶、头孢菌素C、头孢噻吩、头孢匹林钠、头孢拉定、氯霉素、金霉素、西诺沙星、环丙沙星、克拉霉素(claritromycin)、克拉维酸、克林沙星、克林霉素、氯法齐明、氯福克酚(clofoctal)、氯甲西林、氯莫环素、氯唑西林、氯羟喹、环己西林、环丝氨酸、达氟沙星(danoflaxcin)、氨苯砜、强力霉素、去氧双氢链霉素、双氯西林、二氟沙星、双氢链霉素、二甲硝唑、二脒那嗪、地红霉素(dirirtomycin)、多尼培南(doripenam)、耐久霉素、依氟鸟氨酸、依诺沙星、恩氟沙星、恩维霉素、依匹西林、红霉素、海他青霉素、乙胺丁醇、乙硫异烟胺、泛昔洛韦(famcyclovir)、fenbecillin、氟罗沙星、氟氧头孢、氟氯西林、氟甲喹、呋烟腙(furonazide)、福提霉素(fortimycin)、呋唑氯胺、庆大霉素、葡烟腙(glyconiazide)、格帕沙星、胍甲环素、卤夫酮、海他西林、乙菲啶(homidium)、羟基二苯乙烯脒、ibostamycin、咪多卡、亚胺培南(imipenam)、异丙硝唑、异烟肼、iseganan、交沙霉素(iosamycin)、肌苷、月桂胍、仑氨西林、左氧氟沙星、林可霉素、洛美沙星、氯碳头孢、赖甲环素(lymecyclin)、磺胺米隆、甲苯达唑、氯甲烯土霉素(meclocyclin)、美罗培南、美坦西林、metacicline、甲烯土霉素、甲氧西林钠、甲硝唑、4'-(甲基氨磺酰)磺酰基苯胺、美洛西林、meziocillin、小诺霉素(micronomycin)、麦迪霉素A1、米诺环素、米卡霉素、米奥卡霉素、吗琳米特(morfazinamide)、拉氧头孢、莫匹罗星、堆囊粘菌素(myxin)、那氟沙星、萘啶酸、负霉素、新霉素、奈替米星(netlimycin)、硝呋复林、硝呋吡醇、硝呋拉嗪、尼莫唑、硝羟喹啉、诺氟沙星、新生霉素、氧氟沙星、竹桃霉素、奥匹烟肼、苯唑西林、氧芬胂、奥索利酸、土霉素(oxytetracyclme)、帕尼培南(panipenam)、巴龙霉素、帕珠沙星、培氟沙星、青霉素G钾盐、青霉素N、青霉素O、青霉素V、氢碘酸喷沙西林、喷他脒、氧二苯脒、非奈西林钾盐、苯基氨基水杨酸酯、匹哌环素、吡哌酸、哌拉西林、吡利霉素、吡咯米酸、匹氨西林、pivcefalexin、甲基丝裂霉素、普罗帕脒、丙匹西林、丙硫异烟胺、puraltadone、嘌呤霉素、吡嗪酰胺、乙胺嘧啶、喹那西林、奎纳克林、喹匹拉明、quintine、核糖霉素、利福布汀(rifabutine)、利福米特、利福平、利福霉素、利福平(rifanpin)、利福喷汀、利福昔明(rifaxymine)、利替培南、罗他霉素、罗利环素、蔷薇霉素、芦氟沙星、柳氮磺嘧啶、水杨烟肼、山环素、沙氟沙星、西地霉素(sedacamycin)、塞克硝唑、西梭霉素、司帕沙星、壮观霉素、螺旋霉素、螺旋霉素I、螺旋霉素II、螺旋霉素EH、二苯乙烯脒、链霉素、streptonicizid、舒巴坦、磺苄西林、琥珀氨苯砜、磺胺、磺胺苯酰、磺胺乙酰、磺胺氯哒嗪、磺胺柯定、磺胺西汀、磺胺嘧啶、磺胺戊烯、磺胺地托辛、磺胺多辛、sulfadrazine、sulfaetidol、磺胺苯吡唑(sulfafenazol)、磺胺脒、磺胺胍诺、磺胺林、磺胺甲嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲噻二唑、磺胺甲氧甲嘧啶、磺胺甲基异噁唑、磺胺甲氧嗪、磺胺甲噁唑(sulfamethyltiazol)、磺胺甲噻唑、磺胺美曲、磺胺米柯定、磺胺噁唑、磺胺、4-磺胺基水杨酸、4-4'-磺胺酰基苄胺(sulfanilylbenzylamine)、对磺胺酰基苄胺、2-对磺胺酰基苯氨基乙醇、磺胺酰脲、苯磺烟肼、磺胺培林、磺胺苯吡唑、磺胺普罗林、磺胺吡嗪、磺胺吡啶、磺胺噻唑、磺胺乙二唑、磺胺硫脲、磺胺索嘧啶、磺胺异噻唑、磺胺均三嗪、磺胺异噁唑、4,4'-氨苯亚砜、N4-磺胺酰磺胺、N-磺胺酰-3,4-丙谷酰胺、舒他西林、酞氨西林、tambutol、牛磺罗定、替考拉宁(teiclplanin)、替莫西林、四环素、四氧普林、噻苯达唑、噻唑砜、替贝碘铵、替卡西林、替吉莫南、替硝唑、托氟沙星、甲氧苄啶、三乙酰竹桃霉素(troleandromycin)、丙大观霉素、曲伐沙星、结核霉素(tubercidine)、米卡霉素、竹桃霉素、三乙酰竹桃霉素(troleandromycin)、万古霉素、维拉烟肼、紫霉素、维吉霉素、扎西他滨、阿昔洛韦、金刚烷胺、西多福韦、阿糖胞苷、去羟肌苷、双脱氧腺苷、依度尿苷、泛昔洛韦、氟尿苷、丙氧鸟苷、碘苷、茚地那韦(indanavir)、凯托沙(kethoxal)、拉米夫定、MADU、喷昔洛韦、鬼臼毒素、利巴韦林(ribavirine)、金刚烷乙胺、沙奎那韦、索立夫定、司他夫定、曲氟尿苷、伐昔洛韦、阿糖腺苷、珍那佐酸、扎西他滨、齐多夫定、达托霉素、耐久霉素、萘夫西林和替加环素。

具有一个或多个不对称碳原子的本发明的化合物可作为光学纯的对映体、纯非对映体、对映体混合物、非对映体混合物、对映体的外消旋混合物、非对映体外消旋物或非对映体外消旋物的混合物存在。应当理解本发明在其范围内考虑且包括所有此类同分异构体及其混合物。

本发明的另一个实施例考虑在治疗组合物中包括抗微生物剂的代谢产物的有机一氧化氮供体盐。这些代谢产物包括但不限于抗微生物化合物的降解产物、水解产物等等。

本发明还包括这样的方面，其中治疗组合物还包括一种或多种一氧化氮增强化合物，其可增加内源一氧化氮。此类化合物包括例如含硝基氧化合物，包括但不限于取代的2,2,6,6-四甲基-l-哌啶氧基化合物、取代的2,2,5,5-四甲基-3-吡咯啉-l-氧基化合物、取代的2,2,5,5-四甲基-l-吡咯烷氧基化合物、取代的1,1,3,3-四甲基异吲哚啉-2-基氧基化合物、取代的2,2,4,4-四甲基-l-噁唑烷基-3-氧基化合物、取代的3-咪唑啉-l-基氧基、2,2,5,5-四甲基-3-咪唑啉-l-基氧基化合物、OT-551、4-羟基-2,2,6,6-四甲基-l-哌啶氧基(tempol)等等。

B.控制释放添加剂

本发明的治疗组合物还可包括控制释放添加剂。控制释放添加剂在治疗组合物中的存在基本上减少在递送至受试者的粘膜后的最初前1-2分钟过程中，从治疗组合物中释放的生物活性剂的“最初爆发”。如本文使用的，术语“基本上减少”意指与不含添加剂的组合物相比较，从治疗组合物中释放的生物活性剂的至少15％降低。优选地，与不包括控制释放添加剂的治疗组合物相比较，控制释放添加剂使从聚合物组合物中释放的生物活性剂的最初爆发减少约15％至约70％、更优选约30％至约60％。

根据本公开内容，控制释放添加剂是任何合适的控制释放添加剂，优选具有聚(丙交酯共乙交酯)(PLG)部分和聚乙二醇(PEG)部分的热塑性聚合物。优选地，控制释放添加剂是PLG/PEG嵌段共聚物，其包括约50摩尔％至约90摩尔％的丙交酯单体和约50摩尔％至约10摩尔％的乙交酯单体。更优选地，PLG/PEG嵌段共聚物包括约50摩尔％至约75摩尔％的丙交酯单体和约50摩尔％至约25摩尔％的乙交酯单体。优选地，PEG部分具有约1,000道尔顿至约10,000道尔顿、更优选约5000道尔顿的分子量。嵌段共聚物的PEG部分范围为嵌段共聚物总重量的约1重量％至约20重量％。百分比取决于制备的嵌段共聚物的分子量和使用的聚乙二醇的分子量。因此，由具有5,000道尔顿分子量的PEG制备的具有100,000道尔顿(I.V.大约0.8dL/g)的重量平均分子量的嵌段共聚物将含有约5重量％PEG。如果使用具有1,000道尔顿的分子量的PEG，则嵌段共聚物将包括约1重量％的PEG。

控制释放添加剂的固有粘度(缩写为“I.V.”；单位是分升/克)是其分子量的量度。优选地，适合于与本公开内容的组合物一起使用的控制释放添加剂的固有粘度是约0.50dL/g至约1.0dL/g(如在氯仿中测量的)、更优选约0.70dL/g至约0.90dL/g。

合适的聚合物控制释放添加剂包括但不限于具有先前提及的属性的任何PLG/PEG嵌段共聚物。合适的聚合物控制释放添加剂的例子包括但不限于50/50 PLG/PEG-5000(0.81)；70/30 PLG/PEG-5000(0.73)；和70/30PLG/PEG-5000(0.79)。

当包括在制剂中时，控制释放添加剂可存在于治疗组合物中的量有效减少在递送至粘膜后的前2分钟过程中，从治疗组合物中释放的生物活性剂的最初爆发。优选地，药物组合物包括约1重量％至约50重量％、更优选约2重量％至约20重量％的控制释放添加剂。

C.剂型

本发明的治疗组合物可采取固体、半固体、冻干粉末或液体剂型的形式，例如片剂(例如可咀嚼的、缓慢溶解的、快速溶解的)、丸剂、胶囊、锭剂、糖果(candy)、树胶、粉剂、溶液、悬浮液、乳状液、气溶胶等等。优选地，剂型是口香糖、快速溶解片剂、糖果或锭剂。

虽然每个受试者或患者具有可能影响本文描述的治疗试剂的吸收速率和程度的独特因素，但剂型例如口香糖、糖果、快速溶解片剂或锭剂提供超过经口施用的常规剂型的优点。例如，这些剂型各自避免肝脏首过代谢、在胃肠道内的降解和在吸收过程中的药物丧失。因此，每个剂量所需的活性治疗试剂的量小于如果例如在经口施用的丸剂或片剂中配制所需的量。类似地，对于这些剂型中的每一种，治疗试剂的生物利用度是增加的，由此减少治疗活性发作的时间。

如本文使用的，术语“剂型”指适合作为用于人受试者及其他哺乳动物的单位剂量的物理不连续单位，每个单位含有治疗试剂的预定数量，所述数量计算为与一种或多种合适的药学赋形剂例如载体结合而产生所需发作、耐受性和疗效。制备此类剂型的方法是本领域技术人员已知的或将是显而易见的。例如，在一些实施例中，本发明的口香糖剂型可根据工业标准操作进行制备。在其他实施例中，本发明的片剂、锭剂或糖果剂型(例如棒糖(sucker))可根据例如下述中所示的操作进行制备：Remington’s“The Science andPractice of Pharmacy,20th Ed.,”[Lippincott,Williams&Wilkins(2003)；和“Pharmaceutical Dosage Forms,Volume1:Tablets,”第2版，Marcel Dekker,Inc.,New York,N.Y.(1989)]。待施用的剂型在任何情况下均含有治疗有效量的活性治疗试剂数量，当依照本发明的教导施用时，用于缓解被治疗的病症。

如本文使用的，术语“载体”指用作药物例如治疗试剂的稀释剂或媒介物的通常惰性的物质。该术语还包含对组合物赋予粘附性质的通常惰性的物质。在本发明的组合物中使用的合适载体包括但不限于固体、半固体或液体例如粘合剂或胶基。粘合剂的非限制性例子包括甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、麦芽糖糊精、乳糖、右旋糖、蔗糖、葡萄糖、肌醇、糖粉、糖蜜、淀粉、纤维素、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、阿拉伯胶、瓜尔胶、黄蓍胶、海藻酸盐、爱尔兰苔提取物、panwar胶、茄替胶、依莎贝果壳粘液、落叶松阿拉伯半乳聚糖、明胶、甲基纤维素、乙基纤维素、羧甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、聚丙烯酸(例如卡波普)、硅酸钙、磷酸钙、磷酸二钙、硫酸钙、高岭土、氯化钠、聚乙二醇及其组合。这些粘合剂可通过本领域已知的方法预加工，以改善其流动性和味道，所述方法例如冷冻干燥[参见例如，“Fundamentals of Freeze-Drying,”Pharm.Biotechnol.,第14卷，第281-360页(2002)；“Lyophililization of Unit Dose Pharmaceutical Dosage Forms,”Drug.Dev.Ind.Pharm.,第29卷，第595-602页(2003)]；固体-溶液制备；以及润滑剂喷粉和使用合适润滑剂的湿法制粒制备(参见例如，Remington:TheScience and Practice of Pharmacy，同上)。例如，由SPI Pharma Group(NewCastle,Delaware)销售的和分别是冷冻干燥、加工形式的甘露醇和山梨糖醇。通常，当粘合剂包括在制剂中时，本发明的组合物包含按重量计约15％至约90％，且优选约35％至约80％的粘合剂。然而，本领域技术人员应当理解本发明的组合物可无需任何粘合剂进行制备，例如以产生非常易碎的剂型。

胶基的非限制性例子包括选自本领域已知的许多不溶于水的和不溶于唾液的胶基材料的材料。例如，在一些情况下，胶基包含至少一种疏水聚合物和至少一种亲水聚合物。用于胶基的合适疏水和亲水聚合物的非限制性例子包括天然和合成聚合物例如弹性体、橡胶及其组合。合适天然聚合物的例子包括但不限于植物起源的物质例如糖胶树胶、节路顿胶、杜仲胶、冠胶及其组合。合适合成聚合物的例子包括弹性体例如丁二烯-苯乙烯共聚物、异丁烯和异戊二烯共聚物(例如“丁基橡胶”)、聚乙烯、聚异丁烯、聚乙烯基酯(例如聚乙酸乙烯酯和聚乙酸乙烯邻苯二甲酸酯)及其组合。在其他情况下，胶基包含丁基橡胶(即异丁烯和异戊二烯共聚物)、聚异丁烯和任选的聚乙烯乙酸酯(例如具有大约12,000的分子量)的混合物。通常，胶基包含按重量计约25％至约75％、且优选约30％至约60％的这些聚合物。

本发明的组合物可另外包括润滑剂；湿润剂；乳化剂；增溶剂；悬浮剂；防腐剂例如羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸乙酯和羟基苯甲酸丙酯，丁羟甲苯和丁羟茴醚；甜味剂；调味剂；着色剂；和崩解剂(即溶解剂)例如交聚维酮以及交联羧甲纤维素钠及其他交联纤维素聚合物。

润滑剂可用于预防剂型与模具和冲头表面的粘附，并且减少颗粒间摩擦。润滑剂还可促进剂型从模具腔中喷出，且改善在加工过程中的造粒流速。合适润滑剂的例子包括但不限于硬脂酸镁、硬脂酸钙、硬脂酸锌、硬脂酸、二甲基硅油、二氧化硅、滑石、氢化植物油、聚乙二醇、矿物油及其组合。本发明的组合物可包含按重量计约0％至约10％、且优选约1％至约5％的润滑剂。

甜味剂可通过掩蔽组合物可能具有的任何令人不快的味道而用于改善组合物的适口性。合适甜味剂的例子包括但不限于选自下述的化合物：糖类家族例如单糖、二糖、三糖、多糖和寡糖；糖例如蔗糖、葡萄糖(玉米糖浆)、右旋糖、转化糖、果糖、麦芽糖糊精和聚葡萄糖；糖精及其盐例如钠盐和钙盐；环拉酸及其盐；二肽增甜剂；氯化糖衍生物例如三氯蔗糖和二氢查耳酮；糖醇例如山梨糖醇、山梨糖醇糖浆、甘露醇、木糖醇、六间苯二酚等等；及其组合。还可使用氢化淀粉水解物以及3,6-二氢-6-甲基-1-1,2,3-噁噻嗪-4-酮-2,2-二氧化物的钾盐、钙盐和钠盐。在前述中，单独或组合的山梨糖醇、甘露醇和木糖醇是优选的甜味剂。本发明的组合物可包含按重量计约0％至约80％、优选约5％至约75％、且更优选约25％至约50％的甜味剂。

调味剂也可用于改善组合物的适口性。合适调味剂的例子包括但不限于天然和/或合成(即人工)化合物，例如薄荷、留兰香、冬青、肉桂、薄荷脑、樱桃、草莓、西瓜、葡萄、香蕉、桃、菠萝、杏、梨、覆盆子、柠檬、葡萄柚、橙、李、苹果、水果宾治(fruit punch)、西番莲、巧克力(例如白色、牛奶、黑色)、香草、焦糖、咖啡、榛子及其组合等等。着色剂可用于给组合物进行颜色编码，例如以指示本文治疗试剂的类型和剂量。合适的着色剂包括但不限于天然和/或人工化合物例如FD&C着色剂，天然果汁浓缩剂，色素例如氧化钛、二氧化硅和氧化锌，其组合等等。本发明的组合物可包含按重量计约0％至约10％、优选约0.1％至约5％、且更优选约2％至约3％的调味剂和/或着色剂。

1.口香糖

当剂型是口香糖时，本发明的组合物包含源自革兰氏阳性菌的活性治疗剂或其药学可接受的盐、促进剂、载体例如胶基、二元或三元缓冲系统、和任选的保护剂。口香糖组合物还可包含润滑剂、湿润剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、甜味剂、调味剂和着色剂。通常，口香糖组合物包含按重量计约0.001％至约10.0％、更通常约0.01％至约5.0％、且更加通常约0.1％至约3.0％的活性治疗试剂(以选择的任何形式，根据其游离碱形式测量)。本领域技术人员应当理解前述百分比将取决于利用的基于革兰氏阳性菌的活性治疗试剂的具体源，最终制剂中所需的活性治疗试剂的量，以及所需活性治疗试剂的特定释放率而改变。口香糖组合物的任选缓冲系统可提供超过至少约8.0、优选至少约9.5且更优选在约9.9至约11范围中的最终唾液pH。口香糖组合物通常包含按重量计约20％至约95％的胶基、更通常约30％至约85％、且最通常约50％至约70％的胶基。

口香糖组合物还可包含保护剂。保护剂涂布至少一部分治疗试剂，通常在两种试剂混合后。保护剂可与活性治疗试剂以按重量计约0.1至约100的比、优选以约1至约50的比、且更优选以约1至约10的比混合。不受任何具体理论束缚，保护剂减少治疗试剂和胶基之间的粘附，使得治疗试剂可更容易地从胶基中释放。以这种方式，治疗试剂可在咀嚼约5至约20分钟内、优选在咀嚼约10分钟内跨越口腔的粘膜递送。可使用多种不同的保护剂。合适保护剂的例子包括但不限于硬脂酸钙、单硬脂酸甘油酯、山嵛酸甘油酯、棕榈酸硬脂酸甘油酯、氢化蓖麻油、氢化植物油I型、轻质矿物油、月桂基硫酸镁、硬脂酸镁、矿物油、泊洛沙姆、聚乙二醇、苯甲酸钠、氯化钠、十二烷基硫酸钠、硬脂酸、硅石粉(cab-o-sil)、滑石、硬脂酸锌及其组合。

胶基可另外包括增塑剂例如软化剂或乳化剂。此类增塑剂可例如帮助减少胶基的粘度至所需稠度，并且改善其总体纹理和咬劲(bite)。增塑剂还可促进治疗试剂在咀嚼后的释放。增塑剂的非限制性例子包括卵磷脂、甘油单酯和甘油二酯、羊毛脂、硬脂酸、硬脂酸钠、硬脂酸钾、甘油三乙酸酯、单硬脂酸甘油酯、甘油及其组合。胶基通常包含按重量计约0％至约20％、且更通常约5％至约15％的增塑剂。

胶基还可包含蜡例如蜂蜡和微晶蜡、脂肪或油例如大豆油和棉籽油及其组合。通常，胶基包含按重量计约0％至约25％、且更通常约15％至约20％的这些蜡和油。

另外，胶基还可包含一种或多种弹性体溶剂例如松香和树脂。此类溶剂的非限制性例子包括松香的甲酯、甘油酯和季戊四醇酯，改性松香例如氢化、二聚化或聚合松香，或其组合(例如部分氢化的木松香的季戊四醇酯、木松香的季戊四醇酯、木松香的甘油酯、部分二聚化的松香的甘油酯、聚合松香的甘油酯、妥尔油松香的甘油酯、木松香和部分氢化的木松香的甘油酯和松香的部分氢化的甲酯例如α-蒎烯或β-蒎烯的聚合物、萜烯树脂包括多萜烯及其组合)。通常，胶基包含按重量计约0％至约75％、且更通常小于约10％的弹性体溶剂。

胶基还可包含填充材料以增强最终口香糖组合物的咀嚼性。与最终口香糖制剂的其他组分基本上不反应的填充剂是优选的。合适填充剂的例子包括但不限于碳酸钙、硅酸镁(即滑石)、磷酸二钙、金属矿物盐(例如铝、氢氧化铝和硅酸铝)及其组合。通常，胶基包含按重量计约0％至约30％、且更通常约10％至约20％的填充剂

本领域技术人员应当理解胶基无需由其个别组分制备。例如，胶基还与其中含有的所需成分一起购买，并且可修饰以包括另外的试剂。几个制造商生产适合于与所述口香糖组合物一起使用的胶基。此类胶基的例子包括但不限于PHARMGUM^TM M、S或C(SPI Pharma Group；New Castle,Del.)。一般而言，PHARMAGUM^TM包含胶基、甜味剂、增塑剂和糖的混合物。

在某些情况下，口香糖组合物包括治疗试剂中心填充(centerfill)。当治疗试剂的立即释放是优选的时，中心填充可以是特别合适的。另外，将活性治疗试剂封装在中心填充中可帮助掩蔽治疗试剂可能具有的任何不希望的味道。在这些情况下，胶基至少部分围绕中心填充。中心填充包含至少一种治疗试剂，并且可以是液体或半固体材料。中心填充材料可以是合成聚合物、半合成聚合物、低脂或脱脂的，并且含有一种或多种甜味剂、调味剂、着色剂和/或香味剂。优选地，中心填充包括缓冲系统，包括如本文描述的二元或三元缓冲系统。用于制备中心填充口香糖的方法例如在美国专利号3,806,290中描述，所述专利在此在相关部分中以引用的方式并入。

口香糖组合物可具有任何所需形状、大小和纹理。例如，组合物可具有棒、药片(tab)、口香糖球(gumball)等等的形状。类似地，口香糖可具有任何希望的颜色。例如，口香糖可具有任何色度的红色、蓝色、绿色、橙色、黄色、紫色、靛蓝及其混合物，并且可进行颜色编码，以指示本文治疗试剂的类型和剂量。口香糖可个别包裹或以小片集合在一起用于通过本领域众所周知的方法包装。

2.片剂

当剂型是片剂例如溶解片剂(即崩解片剂)或咀嚼片时，本发明的组合物包含如本文描述的源自一种或多种革兰氏阳性菌的治疗剂或其药学可接受的盐、促进剂、载体例如粘合剂、和缓冲系统包括二元或三元缓冲系统。片剂组合物还可包含润滑剂、湿润剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、着色剂和崩解剂。通常，本发明的片剂组合物包含按重量计约0.001％至约10.0％、且更通常约1.0％至约5.0％的活性治疗试剂(以选择的任何形式，根据其游离碱形式测量)。本领域技术人员应当理解前述百分比将取决于利用的活性治疗试剂的具体源，最终制剂中所需的活性治疗试剂的量，以及所需活性治疗试剂的特定释放率而改变。片剂组合物的缓冲系统提供超过至少约8.0、优选至少约9.5且更优选在约pH9.9至约pH11范围中的最终唾液pH。

在某些实施例中，片剂是无需咀嚼、由受试者的唾液溶解的溶解片剂例如缓慢溶解或快速溶解片剂。例如，置于受试者的舌上的溶解片剂可用于治疗试剂的颊递送。作为另外一种选择，置于受试者的舌下的溶解片剂可用于治疗试剂的舌下递送。这类剂型对于儿科和老年患者可能是特别希望的，因为幼儿和年老的个体通常具有咀嚼某些物品的困难。通常，溶解片剂配制为在施用后约1至约15分钟内，优选在约2至约10分钟内，例如在约2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内溶解。本领域技术人员应当理解快速溶解片剂比缓慢溶解片剂更快速溶解，所述缓慢溶解片剂通常由受试者的唾液逐渐而不是快速溶解。在优选实施例中，缓慢溶解或快速溶解片剂经过大于约1分钟的时间段跨越舌下粘膜递送治疗试剂。

在某些其他实施例中，片剂是由受试者咀嚼且配制为或快速或逐渐溶解的咀嚼片。例如，置于受试者的舌上的咀嚼片可用于治疗试剂的颊递送。在咀嚼过程中，咀嚼片可在口内四处移动并且有时可停留在牙龈和面颊之间或在舌下面。因此，在咀嚼片内包含的至少一部分治疗试剂也可舌下递送(即跨越舌下粘膜)。通常，咀嚼片配制为在施用后约1至约15分钟内，优选在约2至约10分钟且不小于1分钟内，例如在约2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内溶解。

如上所述，本发明的溶解片剂和咀嚼片通常配制为在施用后约1至15分钟、且优选不小于约1分钟内溶解。然而，虽然这些时帧可顺应治疗试剂对口腔粘膜(例如舌下和/或颊粘膜)的最大暴露，但它们不总是顺应用户依从(例如用户可能太频繁吞咽并因此阻碍最大的经粘膜吸收)。因此，在某些情况下，可能希望在患者依从和治疗试剂对口腔粘膜的最大暴露时间之间达成平衡。这可例如通过下述来实现：减少片剂大小(例如从约700-800mg至约200-300mg)，而不减少每单位剂量的缓冲系统或治疗试剂的浓度或量。另外，对片剂制剂的细微改变例如用一种调味剂替换另一种(例如巧克力替换留兰香)或用一种粘合剂或甜味剂替换另一种(例如乳糖替换甘露醇或山梨糖醇)可用于减少唾液分泌。

本发明的片剂中存在的载体通常是这样的粘合剂，其可用于使片剂保持半固体状态，并且可以是固体或液体，并且可以例如是高熔点脂肪或蜡质材料。作为粘合剂合适的材料在上文详细讨论，并且可在本发明的片剂组合物中单独或组合使用。另外，粘合剂例如甘露醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖和肌醇可对片剂赋予允许或增强其在口中的崩解的特性。

片剂组合物还可包含保护剂。保护剂涂布至少一部分治疗试剂，通常在两种试剂混合后。保护剂可与治疗试剂以按重量计约0.1至约100的比、优选以约1至约50的比、且更优选以约1至约10的比混合。不受任何具体理论束缚，保护剂减少治疗试剂和粘合剂之间的粘附，使得治疗试剂可更容易地从粘合剂中释放。以这种方式，治疗试剂可在约5至约20分钟内、优选在约10分钟内跨越口腔的粘膜递送。作为保护剂合适的材料在上文详细讨论，并且可在本发明的片剂组合物中单独或组合使用。

片剂组合物还可包含一种或多种弹性体溶剂例如松香和树脂。此类溶剂的非限制性例子在上文详细讨论，并且可在本发明的片剂组合物中单独或组合使用。另外，片剂组合物还可包含蜡例如蜂蜡和微晶蜡、脂肪或油例如大豆油和棉籽油及其组合。此外，片剂组合物可另外包括增塑剂例如软化剂或乳化剂。此类增塑剂可例如帮助减少溶解的片剂的唾液溶液的粘度至所需稠度，并且改善其总体纹理和咬劲，并且帮助促进治疗试剂的释放。此类增塑剂的非限制性例子在上文详细讨论，并且可在本发明的片剂组合物中单独或组合使用。

在某些情况下，片剂组合物包括治疗试剂中心填充。当治疗试剂的立即释放是优选的时，中心填充可以是特别合适的。另外，将活性治疗试剂封装在中心填充中可帮助掩蔽治疗试剂可能具有的任何不希望的味道。在这些情况下，粘合剂至少部分围绕中心填充。中心填充包含至少一种依照本公开内容的治疗试剂，并且可以是液体或半固体材料。中心填充材料可以是低脂或脱脂的，并且含有一种或多种甜味剂、调味剂、着色剂和/或香味剂。优选地，中心填充包括如本文描述的二元或三元缓冲系统。

在某些其他情况下，本发明的片剂组合物是多层的。以这种方式，溶解片剂或咀嚼片可设计为提供超过一种治疗试剂，例如两种或更多种活性治疗试剂，或与源自第二革兰氏阳性菌的一种或多种活性治疗试剂组合的源自第一革兰氏阳性菌的一种或多种活性治疗试剂。例如，对于双层片剂，第一层含有源自第一革兰氏阳性菌的第一活性治疗试剂，并且第二层含有源自相同或不同革兰氏阳性菌的相同或不同活性治疗试剂。通常，第一层包含片剂的溶解或咀嚼部分，并且第二(即后续)层由第一层涂布。当希望活性治疗试剂的立即释放，随后为第二治疗试剂的胃肠道吸收时，这类制剂可以是特别合适的。第二治疗试剂的胃肠道吸收可能是希望的，例如以便缓和共病症状或支持在片剂的溶解或咀嚼部分中的活性治疗试剂的治疗益处。作为另外一种选择，第二层作为第一层横向的层存在。第二层通常包含至少一种治疗试剂，并且还可包含一种或多种如上所述的甜味剂、调味剂、着色剂和香味剂。在一些情况下，第二层还包括如本文描述的二元或三元缓冲系统。

在另外其他情况下，活性治疗试剂连同或不连同另外的治疗试剂的组合无需采取多层片剂的形式，而是包含单一同质片剂层。这类制剂还可用于其中希望至少一种治疗试剂的胃肠道吸收的情况下。在这种情况下，两种或更多种治疗试剂的相对电离程度决定它们如何被吸收。例如，未电离的那些治疗试剂通过口腔粘膜被吸收，而电离的试剂被吞咽用于胃肠道吸收。

片剂组合物可具有任何所需形状、大小和纹理。例如，片剂可具有棒、药片、团块、球体等等的形状。类似地，片剂可具有任何希望的颜色。例如，片剂可具有任何色度的红色、蓝色、绿色、橙色、黄色、紫色、靛蓝及其混合物，并且可进行颜色编码，以指示本文治疗试剂的类型和剂量。片剂可个别包裹或以小片集合在一起用于通过本领域众所周知的方法包装。

3.锭剂

当剂型是锭剂或糖果时，本发明的组合物包含来自革兰氏阳性菌的活性剂或其药学可接受的盐、任选的促进剂、载体例如粘合剂、和缓冲系统包括二元或三元缓冲系统；锭剂或糖果组合物还可包含润滑剂、湿润剂、乳化剂、悬浮剂、防腐剂、甜味剂、调味剂、着色剂和崩解剂。锭剂和糖果的一般讨论例如在“Pharmaceutical Dosage Forms,Volume1:Tablets”[第2版，MarcelDekker,Inc.,New York,N.Y.,第75-418页(1989)]中提供。

通常，本发明的锭剂或糖果组合物包含按重量计约0.001％至约10.0％、优选约1.0％至约5.0％、且更优选约2.5％至约4.5％的活性治疗试剂(以选择的任何形式，根据其游离碱形式测量)。本领域技术人员应当理解前述百分比将取决于利用的活性治疗试剂的具体源，最终制剂中所需的活性治疗试剂的量，以及所需活性治疗试剂的特定释放率而改变。当包括或需要时，锭剂或糖果组合物的缓冲系统可以是单一化合物缓冲系统，但通常是二元或三元缓冲系统，其包含无定形氧化镁等等与碳酸盐和/或碳酸氢盐。例如，示例性三元缓冲系统通常包含按重量计约4.0％至约7.0％的碳酸钠；按重量计约8.0％至约12.0％的干燥剂涂布的碳酸氢钠；和按重量计约20％至约30％的无定形氧化镁。缓冲系统提供在需要时超过至少约8.0、优选至少约9.5且更优选在约9.9至约11范围中的最终唾液pH。

在某些实施例中，锭剂或糖果由受试者的唾液溶解，而无需咀嚼。例如，置于受试者的舌上的锭剂可用于治疗试剂的颊递送。作为另外一种选择，置于受试者的舌下的锭剂可用于治疗试剂的舌下递送。这类剂型对于儿科和老年患者可能是特别希望的，因为幼儿和年老的个体通常具有咀嚼某些物品的困难。通常，锭剂配制为在施用后约1至约15分钟内，优选在约2至约10分钟内且优选不小于约1分钟，例如在约2、3、4、5、6、7、8、9或10分钟内溶解。在优选实施例中，锭剂或糖果在大于1分钟的时间段内跨越舌下粘膜递送治疗试剂。

如上所述，本发明的锭剂通常配制为在施用后约1至约15分钟、且优选不小于约1分钟内溶解。然而，虽然这些时帧可顺应治疗试剂对口腔粘膜(例如舌下和/或颊粘膜)的最大暴露，但它们不总是顺应用户依从(例如用户可能太频繁吞咽并因此阻碍最大的经粘膜吸收)。因此，在某些情况下，可能希望在患者依从和治疗试剂对口腔粘膜的最大暴露时间之间达成平衡。这可例如通过下述来实现：减少锭剂大小(例如从约700-800mg至约200-300mg)，而不减少每单位剂量的缓冲系统或治疗试剂的浓度或量。另外，对锭剂制剂的细微改变例如用一种调味剂替换另一种(例如巧克力替换留兰香)或用一种粘合剂或甜味剂替换另一种(例如乳糖替换甘露醇或山梨糖醇)可用于减少唾液分泌。

本发明的锭剂中存在的载体通常是这样的粘合剂，其可用于使锭剂保持半固体状态，并且可以是固体或液体，并且可以例如是高熔点脂肪或蜡质材料。作为粘合剂合适的材料在上文详细讨论，并且可在本发明的锭剂组合物中单独或组合使用。另外，粘合剂例如甘露醇、山梨糖醇、乳糖、蔗糖和肌醇可对锭剂赋予允许或增强其在口中的崩解的特性。

锭剂组合物还可包含保护剂。保护剂涂布至少一部分治疗试剂，通常在两种试剂混合后。保护剂可与治疗试剂以按重量计约0.1至约100的比、优选以约1至约50的比、且更优选以约1至约10的比混合。不受任何具体理论束缚，保护剂减少治疗试剂和粘合剂之间的粘附，使得治疗试剂可更容易地从粘合剂中释放。以这种方式，治疗试剂可在约5至约20分钟内、优选在约10分钟内跨越口腔的粘膜递送。作为保护剂合适的材料在上文详细讨论，并且可在本发明的锭剂组合物中单独或组合使用。

锭剂组合物还可包含一种或多种弹性体溶剂例如松香和树脂。此类溶剂的非限制性例子在上文详细讨论，并且可在本发明的片剂组合物中单独或组合使用。另外，锭剂组合物还可包含蜡例如蜂蜡和微晶蜡、脂肪或油例如大豆油和棉籽油及其组合。此外，锭剂组合物可另外包括增塑剂例如软化剂或乳化剂。此类增塑剂可例如帮助减少溶解的锭剂的唾液溶液的粘度至所需稠度，并且改善其总体纹理和咬劲，并且帮助促进治疗试剂的释放。此类增塑剂的非限制性例子在上文详细讨论，并且可在本发明的锭剂组合物中单独或组合使用。

在某些情况下，锭剂组合物包括治疗试剂中心填充。当治疗试剂的立即释放是优选的时，中心填充可以是特别合适的。另外，将治疗试剂封装在中心填充中可帮助掩蔽治疗试剂可能具有的任何不希望的味道。在这些情况下，粘合剂至少部分围绕中心填充。中心填充包含至少一种治疗试剂，并且可以是液体或半固体材料。中心填充材料可以是合成聚合物、半合成聚合物、低脂或脱脂的，并且含有一种或多种甜味剂、调味剂、着色剂和/或香味剂。优选地，中心填充包括如本文描述的二元或三元缓冲系统。

在某些其他情况下，本发明的锭剂组合物是多层的。以这种方式，锭剂可设计为提供超过一种治疗试剂，例如两种或更多种治疗试剂，或与源自第二革兰氏阳性菌的一种或多种治疗试剂组合的源自第一革兰氏阳性菌的一种或多种治疗试剂。例如，对于双层锭剂，第一层含有源自乳杆菌属的治疗试剂，并且第二层含有相同或不同的治疗试剂或源自第二革兰氏阳性菌的治疗试剂。通常，第一层包含锭剂的溶解部分，并且第二(即后续)层由第一层涂布。当希望治疗试剂的立即释放，随后为第二治疗试剂的胃肠道吸收时，这类制剂可以是特别合适的。第二治疗试剂的胃肠道吸收可能是希望的，例如以便缓和共病症状或支持在锭剂的溶解部分中的主要治疗试剂的治疗益处。作为另外一种选择，第二层作为第一层横向的层存在。第二层通常包含至少一种治疗试剂，并且还可包含一种或多种如上所述的甜味剂、调味剂、着色剂和香味剂。在一些情况下，第二层还包括如本文描述的缓冲系统。

在另外其他情况下，治疗试剂连同或不连同非细菌性治疗试剂的组合无需采取多层锭剂的形式，而是包含单一同质锭剂层。这类制剂还可用于其中希望至少一种治疗试剂的胃肠道吸收的情况下。在这种情况下，两种或更多种治疗试剂的相对电离程度决定它们如何被吸收。例如，未电离的那些治疗试剂通过口腔粘膜被吸收，而电离的试剂被吞咽用于胃肠道吸收。

锭剂组合物可具有任何所需形状、大小和纹理。例如，锭剂可具有棒、药片、团块、球体等等的形状。类似地，锭剂可具有任何希望的颜色。例如，锭剂可具有任何色度的红色、蓝色、绿色、橙色、黄色、紫色、靛蓝及其混合物，并且可进行颜色编码，以指示本文治疗试剂的类型和剂量。锭剂可个别包裹或以小片集合在一起用于通过本领域众所周知的方法包装。

除上文描述的优选剂型之外，本发明的组合物还可采取溶液制剂的形式用于跨越口腔粘膜递送如本文描述的治疗试剂。例如，溶液制剂可通过使用双室注射器递送系统舌下施用，其中上室含有无缓冲的治疗试剂溶液，下室含有干燥缓冲系统组分，并且不透性膜分开上室和下室。压下注射器破裂不透性膜且允许无缓冲的治疗试剂溶液与干燥缓冲系统组分的混合。所得的缓冲的治疗试剂溶液随后从注射器的尖端释放。像这样，通过简单地将注射器尖端置于受试者的舌下面的任何地方，并且压下注射器，本发明的溶液制剂可用于跨越受试者的舌下粘膜递送活性治疗组合物。

相应地，本发明还提供了为了治疗肝脏疾病和/或障碍而跨越受试者的口腔粘膜递送治疗组合物的组合物，该组合物包含：(a)革兰氏阳性菌提取物、裂解物或其药学可接受的盐，优选来自细菌的乳杆菌属物种；(b)活性剂促进剂；和任选的，(c)包含碳酸盐和/或碳酸氢盐的缓冲系统，其中该缓冲系统使唾液的pH升高至大于约9.9的pH，不考虑起始唾液pH。优选地，该组合物是紧在施用于口腔粘膜前制备的溶液。在某些优选实施例中，缓冲系统包含碳酸钠和碳酸氢钠，其中碳酸氢钠与碳酸钠的比范围为按重量计约1:1至约5:1。在其他实施例中，碳酸钠以等于或超过碳酸氢钠的量使用。更具体而言，该组合物是在小于15分钟(例如约1至约15分钟)、优选在约5分钟至约10分钟内提供活性成分的峰值血浆水平的组合物。

D.施用方法

本发明的组合物可用于治疗应用中，例如用于治疗肝脏疾病或障碍，包括但不限于需要此类治疗的受试者中的甲型、乙型和/或丙型肝炎。本发明的方法可用于治疗多种肝脏障碍，特别是特征在于与受试者的补体系统中的替代途径的相关联系的障碍。因此，根据本公开内容，肝脏障碍是肝或周围脉管系统中的任何肝病或障碍。例如，本发明的方法和组合物可用于治疗多种肝脏障碍，包括起因于感染的障碍、医源性障碍、遗传性障碍、自身免疫性障碍、胆汁郁积综合征、肉瘤样病、器官移植、肝癌等等。

在本公开内容的范围内的示例性疾病或障碍包括但不限于表1中详述的疾病和障碍。

表1.可用本公开内容的组合物治疗的示例性疾病。

在本发明的背景下特别优选的障碍是慢性肝炎，特别是起因于感染特别是病毒感染的肝炎。在这个类别内包括的是确定的血清学类别的慢性肝炎，包括病毒(HBV、HDV、HCV)、自身免疫性肝炎(经典狼疮型和亚型)、自身免疫性重叠综合征、药物诱导的(例如呋喃妥因、α甲基多巴、异烟肼)和所谓的“隐原性”肝炎。在这方面，技术人员将参考“McSween’s Pathology ofthe Liver，第5版，(同上)的第8和9章，且尤其是表9.2和9.3。如本领域技术人员认识到的，未包括在慢性肝炎的定义内的一些慢性肝病可具有慢性肝炎的组织学特点(例如碎屑样坏死)。这些障碍例如肝内或肝外胆管的疾病包括在本文定义内。由多种病毒感染已知导致肝的严重炎症，包括肝炎病毒，即甲型肝炎(HAV)、乙型肝炎(HBV)、丙型肝炎(HCV)、丁型肝炎(HDV，δ因子)、戊型肝炎、己型肝炎，及其他病毒例如EB病毒、巨细胞病毒、腺病毒、副粘病毒等等。迄今为止已鉴定了至少七个类型的肝炎病毒(指定为A-G)。在这些中，最具破坏性的一种是丙型肝炎病毒(HCV，也称为非甲非乙型)。在美国估计3.9百万人目前感染有HCV，并且每年估计8,000-10,000例死亡起因于HCV相关慢性肝病。目前治疗包括γ-干扰素、emphasize B和利巴韦林，其中每一种均具有对患者的有限功效和严重副作用。目前治疗还包括移植，然而，因为受感染个体仍由病毒感染，所以移植后免疫抑制的患者显示出增加的病毒RNA水平，并且通常快速进展至对于新肝的肝病。

慢性胆汁郁积综合征特征在于肝内胆管的进行性炎症性破坏，从而导致肝功能障碍、纤维化和肝硬化。这类障碍的例子包括原发性胆汁性肝硬化、原发性硬化性胆管炎和成人特发性胆管缺失症。

可由本文公开的方法治疗的遗传性障碍包括与基因连锁性状相关的那些炎症性障碍。例子包括但不限于威尔逊氏病、α1-抗胰蛋白酶缺乏症和遗传性代谢障碍，例如半乳糖血症和酪氨酸贫血(tyrosineanemia)。

可通过本发明的组合物调节的其他疾病和障碍包括HIV；糖尿病；多发性硬化(MS)；癌症；氧化性应激；脑雾/认知功能障碍；周围神经病变；和水肿。优选地，依照本公开内容的一个方面，待通过本发明的天然组合物治疗或调节的疾病是MS。如果多发性硬化待使用本公开内容的天然治疗组合物治疗，则待治疗的多发性硬化类型是进行性多发性硬化，包括原发性进行性、继发性进行性、或慢性进行性多发性硬化。作为另外一种选择，待治疗的多发性硬化类型是复发缓解型多发性硬化。

作为另外一种选择，依照本公开内容的进一步优选方面，待用本公开内容的天然组合物调节或治疗的障碍是脑雾/认知功能障碍。认知功能障碍(或脑雾)通常伴随弱精神功能，尤其是关于概念、言语、记忆，并且特征在于意识错乱、健忘、难以集中和焦点维持。睡眠模式通常是紊乱的，并且缺陷型REM(梦)睡眠可导致严重抑郁障碍。

重要的是，本发明的组合物提供了本公开内容的活性治疗试剂组合物跨越口腔粘膜的快速递送，不考虑起始唾液pH。特别地，治疗试剂跨越口腔粘膜的递送避免肝脏首过代谢、在胃肠道内的降解和在吸收过程中的治疗试剂丧失。因此，治疗试剂在比常规经口(例如片剂)施用基本上更短的时间段内且以基本上更高的浓度到达大循环。

本发明的组合物可在人和兽医学治疗剂领域中具有特别效用。一般地，施用的剂量对于将皮摩尔至微摩尔浓度的活性组合物递送至适当部位是有效的。

本发明的组合物的施用可优选经由公认的对口腔粘膜的施用模式中的任一种进行。在口腔粘膜内的合适施用部位的例子包括但不限于口底部(舌下粘膜)、颊(颊粘膜)、牙龈(牙龈粘膜)、口顶部(腭粘膜)、唇衬里的粘膜及其组合。这些区域就其解剖学、药物渗透性和对药物的生理学应答而言彼此不同。优选地，将本发明的组合物施用于舌下粘膜、颊粘膜或其组合。

具有丰富血液供给和合适的药物渗透性的口腔粘膜尤其是治疗试剂的全身递送的有吸引力的施用途径。此外，治疗试剂跨越口腔粘膜的递送绕过肝脏首过代谢、避免在胃肠道内的酶促降解且提供更合适的药物吸收的酶菌群。如本文使用的，术语“舌下递送”指治疗试剂跨越内衬口底部和/或舌腹的粘膜的施用。如本文使用的术语“颊递送”指治疗试剂跨越内衬颊的粘膜的施用。

口腔粘膜由复层鳞状上皮的最外层组成。在该层下存在基膜，即粘膜固有层，随后为作为最内层的粘膜下层。口腔粘膜的上皮类似于在身体的其余部分中发现的复层鳞状上皮，因为它含有分裂活跃的基底细胞层，推进穿过许多分化中间层至浅层，在其中细胞从上皮的表面脱落。例如，颊粘膜的上皮厚约40-50细胞层，而舌下上皮的那种含有略微更少的细胞层。上皮细胞大小增加且在它们从基底层行进到浅层时变得更平。

估计为5-6天的颊粘膜上皮的周转时间代表舌下粘膜上皮以及口腔粘膜中的其他上皮的周转时间[Harris等人，J.Pharm.Sci,第81卷，第1-10页(1992)]。口腔粘膜的厚度取决于在口腔中的部位而改变。例如，颊粘膜测量为厚度约500-800μm，而硬和软腭粘膜、舌下粘膜、舌腹和牙龈粘膜测量为厚度约100-200μm。上皮的组成也取决于在口腔中的部位而改变。例如，遭受机械应力的区域的粘膜(即牙龈和硬腭)是类似于表皮角质化的。然而，软腭、舌下区和颊区的粘膜不是角质化的[Harris等人，同上]。角质化的上皮含有中性脂质如神经酰胺和酰基神经酰胺，其已与提供屏障功能相关。因此，这些上皮对于水是相对不透性的。相比之下，非角质化上皮例如舌下和颊上皮不含酰基神经酰胺，并且仅具有少量神经酰胺[Wertz等人，Crit.Rev.Ther.Drug Carr.Sys.,第8卷，第237-269页(1991)；Squier等人，J.Invest.Dermat.,第96卷，第123-126页(1991)；Squier等人，“Oral Mucosal DrugDelivery,”编辑M.J.Rathbone,Marcel Dekker,Inc.,New York,N.Y.,第1-26页(1996)]。非角质化上皮还含有少量中性但极性脂质，例如胆固醇硫酸盐和葡糖基神经酰胺。像这样，已发现与角质化上皮相比较，这些上皮对于水是相当更可渗透的。

一般而言，口腔粘膜是在表皮和肠粘膜之间中间的略微渗漏性上皮。例如，颊粘膜的渗透性据估计为是皮肤的渗透性约4-4000倍大[Galey等人，J.Invest.Dermat.,67:713-717(1976)]。口腔粘膜的不同区域的渗透性一般以舌下粘膜大于颊粘膜、和颊粘膜大于腭粘膜的次序降低。该渗透性一般基于这些膜的相对厚度和角质化程度，其中舌下粘膜是相对薄和非角质化的，颊粘膜是更厚和非角质化的，并且腭粘膜在厚度上是中间的，但是角质化的。

口腔粘膜的上皮细胞由主要包含蛋白质和碳水化合物的复合物的粘液围绕，所述粘液可附着至或不附着至细胞表面上的某些区域。粘液可在细胞间粘着中起作用以及充当润滑剂，允许细胞相对于彼此移动[Tabak等人，J.Oral Pathol.,11:1-17(1982)]。在体内其他地方发现的复层鳞状上皮中，粘液由专门的粘液分泌细胞例如杯状细胞合成；然而，在口腔粘膜中，粘液由主要和次要唾液腺作为唾液的部分分泌[Tabak等人，同上；Rathbone等人，Adv.Drug Del.Rev.,13:1-22(1994)]。在生理学pH下，由于碳水化合物上存在的唾液酸和硫酸盐残基，粘液网络携带负电荷。在该pH下，粘液可形成强粘合的凝胶结构，其作为胶质层与上皮细胞表面结合。虽然不受任何具体理论束缚，但本发明的缓冲系统中和碳水化合物上存在的唾液酸残基，并且阻止其与治疗试剂相互作用，由此进一步增强药物渗透。

口腔环境的另一个特点是由唾液腺产生的唾液的存在。唾液是所有口腔组织的保护性流体。唾液是具有约1％有机和无机材料的含水流体。唾液组成的主要决定因素是流量，其依次又取决于诸如一天的时间、刺激类型和刺激程度的因素。取决于流量，唾液pH通常范围为约5.5至约7.0。例如，在高流量下，钠和碳酸氢盐浓度增加，导致pH中的增加。因为每天唾液量为约0.5至约2升，所以口腔提供用于本发明的口腔粘膜剂型的水合和/或溶解的含水环境。

舌下粘膜是最高度可渗透的口腔区域，并且在方便、可接近和充分公认的施用途径中提供药物的快速吸收和高生物利用度[Harris等人，同上]。合适的舌下剂型包括但不限于片剂(例如快速溶解、缓慢溶解)、锭剂、糖果和由液体药物填充的软明胶胶囊。在药物跨越舌下粘膜全身吸收前，此类系统在舌下区域中产生极高药物浓度。因此，舌下粘膜特别地非常适合于产生快速作用开始，并且舌下剂型可用于递送具有更短的递送时期需求和/或更不频繁的给药方案的药物。尽管颊粘膜比舌下区域相对更不可渗透，但对于颊施用也可观察到药物的快速吸收和高生物利用度。合适的颊剂型包括但不限于口香糖、片剂(例如快速溶解、缓慢溶解)、锭剂、糖果等等。对于提供增加的药物吸收和生物利用度，颊粘膜和舌下粘膜两者均远远优于胃肠道。

为了增加药物通过口腔粘膜的渗透性，渗透增强剂可包括在本发明的剂型内。渗透增强剂可为改变口腔粘膜性质以增强渗透的类型，或改变治疗试剂的性质以增强通过口腔粘膜的渗透的类型。合适的渗透增强剂包括但不限于聚氧乙烯23-月桂醚、抑肽酶(aprotin)、氮酮、苯扎氯铵、西吡氯铵、溴化十六烷基三甲铵、环糊精、硫酸葡聚糖、月桂酸、丙二醇、溶血磷脂胆碱、薄荷脑、甲氧基水杨酸酯、油酸甲酯、油酸；磷脂酰胆碱、聚氧乙烯、聚山梨醇酯80、乙二胺四乙酸钠(“EDTA”)、脱氧胆酸钠、甘胆酸钠、脱氧甘胆酸钠、月桂基硫酸钠、水杨酸钠、牛磺胆酸钠、牛磺脱氧胆酸钠以及某些亚砜和糖苷及其组合。

应当指出虽然通过口腔粘膜的递送依照本公开内容是优选的，但设想将活性治疗试剂递送至在其中它可开始起治疗作用的粘膜壁的任何递送方法，此类可替代的粘膜递送制剂包括但不限于栓剂(直肠和阴道)、喷雾剂(经口和经鼻)、皮下植入剂和允许制剂移动经过患者的胃部区域的控制释放胶囊例如pH控制释放胶囊。

E.作用机制

本公开内容的活性治疗试剂组合物被认为是先天免疫的补体系统中的替代途径(AP)的激活物。虽然不希望受任何具体理论束缚，但认为本公开内容的活性治疗试剂组合物通过起始替代途径的级联且驱动C3-转换酶的形成而工作。该化合物C3-转换酶随后通过补体的C3放大环调节AP，形成其已知显示出杀病毒(virocidal)效应的C5。

图1举例说明了替代途径和补体系统的一般图解。图2举例说明了依照本公开内容，经典和替代途径的一般流程。如图1中一般所示，该途径通过C3的自发水解起始，所述C3在血液的血浆中是丰富的。“慢车运转(Tickover)”通过C3中的硫酯键自发切割以形成C3(H₂O)而发生。这种形状改变允许血浆蛋白质因子B的结合，其允许因子D将因子B切割成Ba和Bb。Bb保留一部分C3(H₂O)，以形成C3(H₂O)Bb。该复合物也称为流体相C3转换酶。尽管仅以少量产生，该转换酶仍可将多重C3蛋白质切割成C3a和C3b。

替代途径C3转换酶由活化的B和D因子组成，形成在结合血清蛋白质备解素后可变得稳定的不稳定化合物。在C3转换酶产生后，补体系统遵循相同路径，与活化方式(替代、经典或MBL)无关。另一个C3b片段与替代途径的C3转换酶的结合产生类似于MBL或经典途径的C5转换酶。替代途径的C5转换酶由C3bBbC3b也称为C3b2Bb(代替其他途径中的C4b2a3b)组成。

参考图2，经典和替代途径显示为一般举例说明，其中呈现的途径的流程比图1的一般示意图更详细。经典途径通过C1复合物(由1分子的C1q、2分子的C1r和2分子的C1s组成，因此形成C1qr²s²)活化而触发，这在C1q结合与抗原复合的IgM或IgG时(单个IgM可起始途径，而IgG需要多个)或在C1q直接结合病原体表面时发生。此类结合导致C1q分子中的构象改变，这导致两个C1r(丝氨酸蛋白酶)分子的活化。它们随后切割C1s(另一种丝氨酸蛋白酶)。C1r²s²组分目前拆分C4且随后为C2，从而产生C4a、C4b、C2a和C2b。C4b和C2b结合以形成经典途径C3转换酶(C4b2b复合物)，其促进C3切割成C3a和C3b；C3b以后与C4b2b(C3转换酶)连接，以制备C5转换酶(C4b2b3b复合物)。C1r和C1s的抑制受C1抑制剂控制。C3转换酶可通过衰变加速因子(DAF)抑制，所述衰变加速因子经由GPI锚与红细胞质膜结合。

因为由于内部硫酯键分解的自发C3水解(C3在含水环境中是轻度不稳定的)，替代途径连续以低水平活化，类似于闲置的汽车发动机(car engine atidle)。替代途径不像其他途径一样依赖病原体结合抗体。通过流体相中的C3转换酶复合物由C3生成的C3b通过因子H和因子I被快速失活，如其为内部硫酯的自发切割产物的C3b样C3一样。相比之下，当C3的内部硫酯与细胞或病原体表面上的分子的羟基或氨基反应时，目前与表面共价结合的C3b被保护不受因子H介导的失活。表面结合的C3b目前可结合因子B，以形成C3bB。在因子D的存在下，该复合物将被切割成Ba和Bb。Bb保持与C3b结合以形成C3bBb，其是替代途径C3转换酶。C3bBb复合物通过结合因子P的寡聚体而得到稳定。稳定的C3转换酶C3bBbP随后酶促作用，以切割多得多的C3，其中一些变得共价附着至与C3b相同的表面。该新近结合的C3b召募更多的B、D和P活性，并且极大放大补体激活。当补体在细胞表面上活化时，活化受内源补体调节蛋白质限制，取决于细胞，所述内源补体调节蛋白质包括CD35、CD46、CD55和CD59。一般而言，病原体不具有补体调节蛋白质(存在许多例外，其反映微生物病原体对脊椎动物免疫防御的适应)。因此，替代补体途径能够基于补体调节蛋白质的表面表达来区分自身与非自身。宿主细胞不积累细胞表面C3b(和被称为iC3b的C3b蛋白酶解片段)，因为这被补体调节蛋白质阻止，而外源细胞、病原体和异常表面可由C3b和iC3b重度装饰。

由于本公开内容的组合物在调节(或上调或下调)补体系统中的替代途径的作用，本文详述的组合物和制剂可用于治疗应用中，以治疗多种由补体靶向的其他疾病(除肝脏疾病和障碍之外)，其中包括但不限于其他病毒感染、细菌感染、胰岛素抗性(II型糖尿病)、实体瘤和氧化性应激相关疾病，和如上文描述的。例如，本公开内容的天然、非合成革兰氏阳性菌裂解物组合物可活化一种或多种TLR或NOD，如下文更详细地讨论的。

TLR。TLR是识别来自细菌、真菌、原生动物和病毒的结构的保守分子受体。TLR的活化起始一系列细胞内事件，导致特征在于促炎细胞因子产生的先天性免疫应答。TLR信号传导源于在所有TLR中保守的细胞质TIR结构域。含有TIR结构域和死亡结构域两者的衔接分子MyD88与TLR和IRAK蛋白质的TIR结构域结合。IRAK的磷酸化导致与TRAF6的结合以及NF-κB的后续活化和促炎细胞因子的分泌。A52R，来自牛痘病毒的免疫调节蛋白质，先前已显示为TIR依赖性信号传导的细胞内抑制剂。当在HEK293细胞中表达时，A52R显示响应通过多种TLR(包括TLR4、TLR5以及TLR2和6与TLR2和1的组合)的刺激而抑制NF-κB活化。另外，A52R响应聚(I:C)(TLR3的合成配体)而抑制NF-κB活化。TLR3已牵涉抗病毒先天性免疫应答。

针对病原体的免疫应答的起始是先天性免疫应答的关键组分，并且设计为控制感染。然而，炎症介质的持续产生可导致慢性炎症、组织损害和疾病发展。由PAMP/TLR相互作用起始且最终导致细胞活化的信号传导级联已与许多疾病状态相关，包括脓毒症、自身免疫疾病、哮喘、心脏病和癌症。例如，假设在细菌及其产物活化宿主衍生介质例如促炎细胞因子的不受控制的网络时发生脓毒症，其可导致多器官衰竭、心血管性虚脱和死亡。异常TLR信号传导应答可导致夸大的细胞活化应答，从而促成脓毒症。炎症也是自身免疫的关键方面，并且假设在疾病例如多发性硬化、类风湿性关节炎和胰岛素依赖性糖尿病中的组织破坏中起作用。先天性免疫系统的细胞具有在获得性/适应性免疫中的基本作用。TLR蛋白质涉及树突状细胞的成熟和活化，所述树突状细胞是视为与获得性免疫发展最相关的抗原呈递细胞类型。变应性哮喘是伴随适应性免疫应答的慢性炎性疾病的例子，并且TLR信号传导途径假设在变应性表型的诱导期中起重要作用。引起增加的炎症细胞活化的细菌和病毒感染是疾病例如哮喘和COPD(慢性阻塞性肺疾病)中的恶化主因。理解和操纵TLR细胞活化途径具有对具有炎症性病因学的多种疾病提供治疗益处的潜力。炎症的治疗已包括阿司匹林和糖皮质激素的使用，以阻断NF-κB活化和特异性炎症介质例如TNF-α的靶向。近期研究报道，阻断TLR及其配体的相互作用或抑制TLR表达，可提供控制炎症的新方法。涉及TIR信号传导的蛋白质鉴定及其分子表征已导致抑制TIR信号传导级联内的特定点的试剂的开发。通过靶向共同信号传导组分抑制多重TLR依赖性应答，可证明为控制炎症应答的更有效方法。因此，依照本公开内容的进一步方面，本发明的组合物可用于治疗与补体系统相关的炎症或其他障碍(其为TLR相关障碍(例如TLR诱导的炎症))，该方法包括施用治疗有效量的如本文描述的组合物，其中受累的TLR是TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8和TLR9中的一种或多种。

依照本公开内容的进一步实施例，本发明的组合物可调节或在其他方面影响Nod2蛋白质和/或编码Nod2蛋白质的核酸。Nod2蛋白质已发现与Nod1蛋白质具有结构同源性。Apaf-1和Nod1(也称为CARD4)是细胞内蛋白质家族的成员，其由NH₂末端半胱天冬酶召募结构域(CARD)、中心定位的核苷酸结合结构域(NBD)和COOH末端调节结构域组成[Bertin等人，J.Biol.Chem.274:12955-12958(1999)；Inohara等人，J.Biol.Chem.274:14560-14568(1999)]。虽然Apaf-1具有WD40重复，但Nod1在其C末端中含有富含亮氨酸的重复(LRR)。Apaf-1和Nod1之间的结构和功能相似性提示这些蛋白质共享关于活化和效应子功能的共同分子机制。在Apaf-1的情况下，WD-40重复通过与细胞色素c结合而充当线粒体损害的识别结构域，从而允许Apaf-1寡聚且通过CARD--CARD嗜同性相互作用与半胱天冬酶前体(procaspase)-9相互作用[Zou等人，J.Bio.Chem.274:11549-11556(1999)]。Apaf-1寡聚由NBD介导，并且被认为诱导在细胞凋亡体复合物中的半胱天冬酶前体-9分子的接近和蛋白酶解活化[Hu等人，J.Bio.Chem.273:3348934494(1998)]。

Nod2是含LRR蛋白质，与Nod1具有结构和功能相似性。研究已指出Nod2活化NF-kB，但与Nod1不同，Nod2主要在单核细胞中表达。本发明并不限于任何具体作用机制。事实上，作用机制的理解不是实践本发明所必需的。然而，Nod2是Nod1/Apaf-I家族的成员，其通过与其NH₂末端CARDS的相互作用活化NF-κB，因为这些结构域对于NF-κB活化是明显必需和足够的。另外，Nod2经由CARD-CARD嗜同性相互作用与RICK结合。

依照本公开内容的其他方面，在组合物施用后，本文描述的组合物可在治疗上用于刺激受试者中的CdK5。Cdk5，细胞周期蛋白依赖性激酶(cdk)家族的成员，在神经元中是占优势活性的，在所述神经元中它的活性通过其神经元激活物p35和p39的结合得到紧密调节。Cdk5已牵涉调节适当的神经元功能；进一步地，Cdk5的脱调节已发现与阿尔茨海默氏病和肌萎缩侧索硬化相关。依照本公开内容，预期本发明的天然、非合成组合物显示出对受试者中的Cdk5活性以及Cdk5和p35蛋白质表达的正面疗效。例如，认为当施用于有此需要的受试者时，本公开内容的组合物刺激Cdk5活性，且诱导其调节和催化亚基表达在重要细胞中的上调。

包括下述实例以证实本发明的优选实施例。本领域技术人员应当理解在下文实例中公开的技术代表由本发明人发现在本发明的实践中良好起作用的技术，并且因此可视为构成其实践的优选模式。然而，按照本公开内容，本领域技术人员应当理解可在公开的具体实施例中作出许多改变，并且仍获得相同或相似结果，而不背离本发明的范围。

实施例

实施例1：活性成分组合物制备。

为了制备适合于治疗测试和进一步的细胞系测试，例如在筛选测试中的如本文描述的示例性制剂，活性成分。

发酵。革兰氏阳性菌德氏乳酸杆菌保加利亚亚种的细胞在500L适当培养基中发酵大约120小时。

细胞分离。将500L肉汤离心且将所得的细胞团块用DI水洗涤三次。这产生大约60kg湿细胞团块。

裂解和纯化。将湿细胞团块重构且将pH调整至6.8-7.0。加入氯化溶菌酶(从鸡蛋白中提取)，以制备浓度为500ppm的氯化溶菌酶溶液。将浆搅动且使温度在40-50℃下维持24小时。在裂解后，活性组分在液相中。含有水溶性活性组分的该液体材料通过离心回收，以去除固体材料，并且随后用DI水洗涤三次。所得的混合物在团块中冷冻且弃去离心机中的剩余固体材料。

制剂。将冷冻团块冷冻干燥，以形成干燥粉末且在需要时磨碎。该材料与促进剂例如盐酸N-乙酰D-葡糖胺(NAG)混合，以形成裂解的德氏乳酸杆菌保加利亚亚种和NAG的混合物。该产物随后用于下述筛选测试中。

实例2：TLR筛选。

TLR刺激通过在表达给定TLR或NLR的HEK293细胞中评价NF-κB活化进行测试。样品的活化对七种不同人TLR：TLR2、3、4、5、7、8和9Invivogen,San Diego,CA)以及两种不同的人NLR(NOD1和NOD2)进行测试。每种配体在TLR或NLR细胞上以1/100原液的最终浓度进行测试，并且如下所述与对照配体相比较。该步骤一式三份进行。

在实例中使用的对照配体、对照细胞系和样品产物显示于表2中。

表2.在配体筛选测试中使用的对照配体和对照细胞系信息。

一般操作。在筛选中的TLR刺激通过在表达给定TLR的HEK293细胞中评价NF-κB活化进行测试。分泌型碱性磷酸酶报道分子处于可由转录因子NF-κB诱导的启动子的控制下。筛选中的TLR刺激通过在表达给定TLR或NLR的HEK293细胞中评价NF-κB活化进行测试。该报道基因允许监控基于NF-κB的活化通过TLR/NLR的信号传导。在含有适当细胞(50,000-75,000细胞/孔)的96孔板(200μL总体积)中，将20μL样品(裂解产物)或阳性对照配体加入孔中。加入孔中的培养基设计用于检测NF-κB诱导的SEAP(分泌型碱性磷酸酶)表达。在16-20小时温育后，在Molecular DevicesSpectra Max340PC吸光度检测器上阅读在650nm处的OD(光密度)并记录。

这些实验的筛选结果图解显示于图3中以及图5中所示的筛选数据结果表中。对照细胞系比较图解显示于图4中以及图6的概括表中所示的数据中。考虑到这些结果，明确的是测试的裂解物样品以1/100浓度活化人TLR2、4和NOD2。

可设计利用上文描述的本发明的一个或多个方面的其他和进一步的实施例，而不背离本申请人的发明的精神。例如，来自两种分离的革兰氏阳性菌的两种或更多种活性成分可用于配制在治疗应用中使用的活性组合物。此外，经口施用的多种方法和方法的实施例可彼此组合包括，以产生公开的方法和实施例的变化。单数元件的讨论可包括复数元件，并且反之亦然。

除非另有具体限制，否则步骤次序可以多种顺序发生。本文描述的多个步骤可与其他步骤组合，由所述步骤间插，和/或拆分成多个步骤。类似地，元件已在功能上描述，并且可作为分开元件体现或可组合成具有多重功能的组分。

本发明已在优选和其他实施例的背景下描述，并且并非本发明的每一个实施例均已得到描述。所述实施例的明显修饰和改变是本领域普通技术人员可获得的。公开和未公开的实施例不预期限制或约束由申请人设想的本发明的范围或适用性，相反，与专利法一致，申请人预期完全保护在下述权利要求的等价物的范围或幅度内的所有此类修饰和改善。

Claims

1.一种治疗肝脏疾病或障碍的方法，所述方法包括：

给有此需要的受试者施用治疗有效量的至少一种能够上调或下调补体系统途径的治疗活性剂，

其中所述治疗活性剂增强一种或多种转换酶的形成。

2.根据权利要求1所述的方法，其中所述至少一种治疗活性剂是选自乳杆菌科(Lactobacillaceae)、链球菌科(Streptococcaceae)或双歧杆菌科(Bifidobacteriaceae)、芽孢杆菌科(Bacillaceae)的革兰氏阳性菌，或其生物活性片段或变体。

3.根据权利要求2所述的方法，其中所述革兰氏阳性菌选自凝结芽孢杆菌(芽孢乳杆菌)、嗜热链球菌、动物双歧杆菌(尤其是动物双歧杆菌动物亚种)、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种、乳酸乳球菌、乳酸乳球菌乳酸亚种(乳酸链球菌)、嗜热链球菌、乳酸双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和瑞士乳杆菌及其组合。

4.根据权利要求1所述的方法，其中所述上调或下调的转换酶是C3转换酶或C5转换酶。

5.根据权利要求1所述的方法，其中所述肝炎疾病是甲型肝炎、乙型肝炎或丙型肝炎。

6.根据权利要求1所述的方法，其中所述施用方法是通过被治疗的受试者的粘膜。

7.根据权利要求6所述的方法，其中所述粘膜选自舌下粘膜、颊粘膜及其组合。

8.一种减少或抑制受试者中Toll样受体(TLR)诱导的炎症的方法，所述方法包括：

给有此需要的受试者施用有效量的包含下述的组合物：

(a)来自革兰氏阳性菌的裂解物或细胞壁提取物，或其药学可接受的盐；

(b)促进剂；和

(c)任选的载体，

其中所述细胞壁裂解物以有效治疗炎症障碍的量存在，

由此减少或抑制所述受试者中Toll样受体(TLR)诱导的炎症。

9.根据权利要求8所述的方法，其中所述炎症由病毒引起。

10.根据权利要求9所述的方法，其中所述TLR是TLR2、TLR3、TLR4、TLR5、TLR7、TLR8和TLR9中的一种或多种。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述TLR是TLR2。

12.根据权利要求10所述的方法，其中所述TLR是TLR4。

13.一种用于治疗有此需要的受试者中的肝脏障碍的组合物，所述组合物包含：

(b)促进剂；和

(c)任选的载体，

其中所述裂解物或细胞壁提取物以有效治疗肝脏障碍的量存在。

14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述革兰氏阳性菌选自凝结芽孢杆菌(芽孢乳杆菌)、嗜热链球菌、动物双歧杆菌(尤其是动物双歧杆菌动物亚种)、婴儿双歧杆菌、长双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌、德氏乳酸杆菌保加利亚亚种、乳酸乳球菌、乳酸乳球菌乳酸亚种(乳酸链球菌)、嗜热链球菌、乳酸双歧杆菌、短双歧杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌、干酪乳杆菌和瑞士乳杆菌及其组合。

15.根据权利要求13所述的组合物，其中所述促进剂选自聚-L-赖氨酸、葡糖胺、聚-L-精氨酸、半乳糖胺、N-乙酰甘露糖胺(NAM；N-Ac-Man)、N-乙酰葡糖胺(NAG；N-Ac-Glc)、N,N’-二乙酰葡糖胺(NAG-NAG；N,N’-二乙酰壳二糖)、N,N’,N”,N’”-四乙酰葡糖胺(NAG-NAG-NAG-NAG；N,N’,N”,N’”-四乙酰壳四糖)及其混合物。

16.一种试剂盒，所述试剂盒包含至少一种根据权利要求13所述的化合物。

17.根据权利要求16所述的试剂盒，所述试剂盒还包含(i)至少一种另外的治疗试剂；(ii)至少一种一氧化氮增强化合物；或(iii)至少一种另外的治疗试剂和至少一种一氧化氮增强化合物。

18.一种减少或抑制受试者中Nod诱导的障碍的方法，所述方法包括：

给有此需要的受试者施用有效量的包含下述的组合物：

(b)促进剂；和

(c)任选的载体，

其中所述细胞壁裂解物以有效治疗所述障碍的量存在，

由此减少或抑制所述受试者中Nod诱导的障碍。

19.根据权利要求17所述的方法，其中所述Nod是Nod1和Nod2中的一种或多种。

20.根据权利要求17所述的方法，其中所述Nod是Nod2。