CN104127491A

CN104127491A - 一种具有解热作用的药物组合物及其制备方法和用途

Info

Publication number: CN104127491A
Application number: CN201410367450.4A
Authority: CN
Inventors: 唐华侨; 房春林; 吴学渊; 李超; 杨海涵; 丁晓刚
Original assignee: Chengdu Qiankun Veterinary Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Chengdu Qiankun Veterinary Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2014-07-29
Filing date: 2014-07-29
Publication date: 2014-11-05

Abstract

本发明提供了一种具有解热作用的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：柴胡挥发油1-2份、柴胡提取物总皂苷1-2份、黄芩提取物8-12份。本发明还提供了该药物组合物的制备方法和用途。本发明药物充分提高柴芩的药效，降低柴胡的毒性，分别提取柴胡的挥发油、柴胡的总皂苷和黄芩的黄芩苷，最终制备成在一定剂量下无毒并且高效，具有靶向作用的乳剂，实验研究证实该乳剂安全并能提高药效。

Description

一种具有解热作用的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及一种具有解热作用的药物组合物。

背景技术

目前中兽药分类中具有解热作用的中药有清热解毒药、清热凉血药、清热燥湿药和部分解表药，根据药性的不同，其中又以清热解毒药的解热作用较好。但是大多数药材均需成方使用，单味药材的效果不能达到理想效果。

柴胡在中国医学主要用于有和解表里，疏肝，升阳之功效。用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱垂、月经不调。现代研究表明，柴胡皂苷和柴胡挥发油既是柴胡的活性成分又是其主要毒性成分。柴胡皂苷理作用主要表现在具有解热、镇痛、镇咳、降血脂、护肝、抗炎、抗病毒、抗癌、解毒等作用；柴胡挥发油则主要是解热和抗炎作用。柴胡皂苷亦有溶血作用，其溶血强度为柴胡皂苷d>柴胡皂苷a>柴胡皂苷h，>柴胡皂苷b>柴胡皂苷c。柴胡的挥发油毒性较大，其毒性成分是柴胡毒素和乙酰柴胡毒素。黄芩和柴胡是中医学上常用的药对，黄芩具有清热燥湿、泻火解毒等功效，近年运用新技术探索黄芩的活性成分，现已证实黄芩主要成分黄芩苷具有如下药理作用：抗氧比、抗致癌作用、抗病毒和抗菌作用。目前兽医临床使用的柴胡注射液主要是使用水蒸气蒸馏法得到的柴胡挥发油，而对另外的柴胡皂苷类成分关注较少。

申请号：200510104218.2，发明名称：柴胡和黄芩苷的药物组合物及其制备方法和用途；摘要：本发明属于医药技术领域，公开了一种用于抗菌、抗病毒以及解热镇痛的药物组合物及其制备方法和用途,该组合物由柴胡和黄芩苷制成,其重量比为:柴胡500～8000份、黄芩苷60～1000份。该组合物还可以由柴胡挥发油和黄芩苷制成,其重量比为:1∶15～500,可制成各种药学上可接受的剂型；该组合物具有协同增效作用,稳定性好,比单用同剂量的柴胡或黄芩苷的效果大大提高。申请号：200610020397.6，发明名称；具有抗病毒和解热作用的药物组合物及其制备方法，具有抗病毒和解热作用的药物组合物及其制备方法。该药物以莪术油和至少含有柴胡挥发油的柴胡提取物成分为基本有效药用成分,与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成,以其相应提取原料生药重量份计的有效药用成分比例是莪术/柴胡为1/0.5～20。在此基础上还可以添加黄芩苷作用有效药物成分。

发明内容

本发明的技术方案是提供了一种新的具有解热作用的药物组合物。本发明的另一技术方案是提供了该药物组合物的制备方法和用途。

本发明提供了一种具有解热作用的药物组合物，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

柴胡挥发油1-2份、柴胡总皂苷提取物1-2份、黄芩苷提取物8-12份。

进一步优选地，它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

柴胡挥发油1份、柴胡总皂苷提取物1.5份、黄芩苷提取物8.5份。

本发明药物组合物是由柴胡挥发油、柴胡总皂苷提取物、黄芩苷提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

其中，所述的制剂是片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、口服液、乳剂。

本发明还提供了一种制备所述的药物组合物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

a、取柴胡饮片，粉碎，浸泡，水蒸气蒸馏，收集挥发油，残渣备用；

b、将a步骤的柴胡残渣或柴胡药材，干燥，与黄芩药材混合，粉碎成粗粉，再进冷冻超微粉碎，得超微粉；

c、将b步骤的超微粉加入乙醇，调至碱性，加热回流提取，合并提取液，趁热过滤，合并滤液，浓缩得浸膏；将浸膏加水分散，调至碱性，加入乙醇沉淀，静置，过滤，滤液减压浓缩干燥得柴胡皂苷和黄芩苷提取物；

d、取c步骤的柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加入a步骤的柴胡挥发油，以及药学上可接受的辅料或辅助性成分制备成药学上常用的制剂。

其中，b步骤所述的柴胡、黄芩的重量配比为：1-2:1-2。

进一步优选地，b步骤所述的柴胡、黄芩的重量配比为：1：2。

其中，所述的制剂是乳剂，d步骤具体为：取柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加水分散后用氢氧化钠调节pH使其溶解，加水、苯甲酸钠、甜菊素、吐温80、柴胡挥发油混合均匀，定容，加入胶体磨中研磨，分装、即得乳剂。

本发明还提供了所述的药物组合物在制备具有解热作用的中药或兽药中的用途。

本发明提供了所述的药物组合物在制备治疗病毒性肝炎或药物肝损伤的药物中的用途。其中，所述的药物是动物病毒性肝炎；药物性肝损伤的药物。

本发明药物乳剂是两种互不混溶的液体组成的非均相分散体系，由于乳剂作为载体对药物具有缓释、靶向、定位和稳定等作用以及降低毒性的独特优点，并具有使用方便、稳定性好和生物利用度高的特点。本发明药物原料中包含了解热效果较好的柴胡挥发油，同时关注了柴胡的主要成分柴胡皂苷的提取，另外配伍清热解毒的黄芩，使药物达到最好的效果和最有效的利用。

本发明药物充分提高柴芩的药效，降低柴胡的毒性，分别提取柴胡的挥发油、柴胡的总皂苷和黄芩的黄芩苷，最终制备成在一定剂量下无毒并且高效，具有靶向作用的乳剂，实验研究证实该乳剂安全并能提高药效。

具体实施方式

实施例1 本发明药物乳剂的制备

1 处方工艺

中药材：柴胡(为伞形科植物Bupleurum Chinese DC的干燥根)、黄芩(为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi.的干燥根)，购自于巴中科伦医药贸易有限公司，经鉴定符合兽药典2010版相关规定。称取柴胡饮片500g，粉碎后，加6倍量水，浸泡过夜后，水蒸气蒸馏，收集挥发油，密封保存备用。另取干燥后的柴胡药材100g与黄芩药材100g混合，粗粉后，进行冷冻超微粉碎，使用YQ100实验室专用小型气流粉碎机超微粉碎机(上海赛山粉体机械制造有限公司)。取适量黄芩和柴胡的超微粉加8倍量70％乙醇，使用碳酸氢钠调节pH为8，于80℃加热回流提取2次，每次60min，合并提取液，趁热过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，将浸膏用适量的水分散，加氢氧化钠调节pH为8，使其溶解完全，加入三倍量90％的乙醇，静置3h，过滤，减压浓缩干燥即得柴胡皂苷和黄芩苷提取物10g。取柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加水分散后用氢氧化钠调节pH为8溶解后，加水至约40ml，然后分别加入0.15g苯甲酸钠、0.5g甜菊素、1ml吐温80、1ml柴胡挥发油混合均匀后，定容至全量100ml，加入胶体磨中研磨5min，分装、即得本发明药物乳剂。

实施例2 本发明药物乳剂的制备

1 处方工艺

中药材：柴胡(为伞形科植物Bupleurum Chinese DC的干燥根)、黄芩(为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi.的干燥根)，购自于巴中科伦医药贸易有限公司，经鉴定符合兽药典2010版相关规定。称取柴胡饮片500g，粉碎后，加6倍量水，浸泡过夜后，水蒸气蒸馏，收集挥发油，密封保存备用。另取干燥后的柴胡药材133.3g与黄芩药材66.6g混合，粗粉后，进行冷冻超微粉碎，使用YQ100实验室专用小型气流粉碎机超微粉碎机(上海赛山粉体机械制造有限公司)。取适量黄芩和柴胡的超微粉加8倍量70％乙醇，使用碳酸氢钠调节pH为8，于80℃加热回流提取2次，每次60min，合并提取液，趁热过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，将浸膏用适量的水分散，加氢氧化钠调节pH为8，使其溶解完全，加入三倍量90％的乙醇，静置3h，过滤，减压浓缩干燥即得柴胡皂苷和黄芩苷提取物8g。取柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加水分散后用氢氧化钠调节pH为8溶解后，加水至约40ml，然后分别加入0.15g苯甲酸钠、0.5g甜菊素、1ml吐温80、1ml柴胡挥发油混合均匀后，定容至全量，加入胶体磨中研磨5min，分装、即得本发明药物乳剂。

实施例3 本发明药物乳剂的制备

1 处方工艺

中药材：柴胡(为伞形科植物Bupleurum Chinese DC的干燥根)、黄芩(为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi.的干燥根)，购自于巴中科伦医药贸易有限公司，经鉴定符合兽药典2010版相关规定。称取柴胡饮片500g，粉碎后，加6倍量水，浸泡过夜后，水蒸气蒸馏，收集挥发油，密封保存备用。另取干燥后的柴胡药材66.6g与黄芩药材133.3g，粗粉后，进行冷冻超微粉碎，使用YQ100实验室专用小型气流粉碎机超微粉碎机(上海赛山粉体机械制造有限公司)。取适量黄芩和柴胡的超微粉加8倍量70％乙醇，使用碳酸氢钠调节pH为8，于80℃加热回流提取2次，每次60min，合并提取液，趁热过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，将浸膏用适量的水分散，加氢氧化钠调节pH为8，使其溶解完全，加入三倍量90％的乙醇，静置3h，过滤，减压浓缩干燥即得柴胡皂苷和黄芩苷提取物12g。取柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加水分散后用氢氧化钠调节pH为8溶解后，加水至约40ml，然后分别加入0.15g苯甲酸钠、0.5g甜菊素、1ml吐温80、1ml柴胡挥发油混合均匀后，定容至全量，加入胶体磨中研磨5min，分装、即得本发明药物乳剂。

实施例4 本发明药物乳剂的制备

1 处方工艺

中药材：柴胡(为伞形科植物Bupleurum Chinese DC的干燥根)、黄芩(为唇形科植物黄芩Scutellaria baicalensis Georgi.的干燥根)，购自于巴中科伦医药贸易有限公司，经鉴定符合兽药典2010版相关规定。称取柴胡饮片500g，粉碎后，加6倍量水，浸泡过夜后，水蒸气蒸馏，收集挥发油，密封保存备用。另取干燥后的柴胡药材100g与黄芩药材100g混合，粗粉后，进行冷冻超微粉碎，使用YQ100实验室专用小型气流粉碎机超微粉碎机(上海赛山粉体机械制造有限公司)。取适量黄芩和柴胡的超微粉加8倍量70％乙醇，使用碳酸氢钠调节pH为8，于80℃加热回流提取2次，每次60min，合并提取液，趁热过滤，合并滤液，浓缩得浸膏，将浸膏用适量的水分散，加氢氧化钠调节pH为8，使其溶解完全，加入三倍量90％的乙醇，静置3h，过滤，减压浓缩干燥即得柴胡皂苷和黄芩苷提取物10g。取柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加水分散后用氢氧化钠调节pH为8溶解后，加水至约40ml，然后分别加入0.15g苯甲酸钠、0.5g甜菊素、1ml吐温80、2ml柴胡挥发油混合均匀后，定容至全量100ml，加入胶体磨中研磨5min，分装、即得本发明药物乳剂。

以下通过药效学试验证明本发明的有益效果。

试验例1 本发明药物药理作用实验

对乙酰氨基酚为兽医临床解热的常用药物，但是当对乙酰氨基酚剂量过大时，其代谢过程中产生的大量N-乙酰-对苯醌亚胺(NAPQI)超过了谷胱甘肽(GSH)的解毒能力，于是未被清除的NAPQI与生物大分子共价结合，导致蛋白质巯基被氧化和芳基化而影响他们的功能。此外，对乙酰氨基酚在肝内代谢过程中产生自由基可引起肝细胞膜脂质过氧化，并可通过破坏钙稳态而产生细胞毒性。因此使用对乙酰氨基酚肝损伤模型来评价本发明药物乳剂的药效

2.1 实验方法

小鼠正常饲养适应一周后，120只小鼠，雌雄各半，随机分为6组，每组20只。分别为正常组、模型组、市售柴芩清肝胶囊组、本发明药物乳剂1：2组(实施例3制备)、本发明药物乳剂1：1组(实施例1制备)、本发明药物乳剂2：1组(实施例2制备)(其中，柴胡、黄芩药材比分别为：1：2，1：1，2：1)。分组后，本发明药物乳剂按照0.1ml/10g.W给药，连续给药一周，柴芩清肝胶囊按说明书给药。将对乙酰氨基酚(对乙酰氨基酚：广东环球制药有限公司)溶于40度无菌生理盐水，于末次给药后，一次性腹腔注射对乙酰氨基酚500mg/kg。24h取血清，用试剂盒分别测定血清ALT,AST活力，并取肝脏组织匀浆测定抗氧化指标。剖腹切取新鲜肝脏约0.1g，精密称定，剪碎后加入9倍生理盐水在冰浴中匀浆，匀浆液3000转/分钟，离心30分钟，上清液即为肝匀浆制品。其中，乳剂药物使用前摇匀。按试剂盒(丙氨酸氨基转移酶(GPT/ALT)试剂盒、门冬氨酸氨基转移酶(GOT/AST)试剂盒、碱性磷酸酶(AKP/ALP)试剂盒、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、丙二醛(MDA)，均购南京建成生物工程研究所)的方法测定血清中ALT、AST、ALP酶活力和肝脏组织匀浆中SOD、GSH-PX、MDA含量(BIO-RAD680酶标仪)。

试验数据处理和分析采用SPSS(19.0)中的一般线性模式(GeneralLinear Models Procedure)方差分析，差异显著时采用Duncan氏方法对各组间平均数进行多重比较，P<0.05表示差异显著，结果以表示。

2.2 结果

2.2.1 本发明药物乳剂对肝酶的影响

从实验结果表1看，模型组ALT、AST、ALP量显著高于正常组(p<0.05)，说明肝损伤模型制作成功。药物本发明药物乳剂组ALT、AST、ALP量均显著低于模型组(p<0.05)，说明柴芩保肝效果明显，而且柴芩比例1：1效果较佳，效果优于柴芩清肝胶囊。

表1本发明药物乳剂对肝酶的影响

分组

正常组

模型组

柴芩清肝胶囊

柴芩1：2

柴芩1：1

柴芩2：1

ALT

65.7±1.6a

1303.5±22.3b

760.2±27.2c

829.5±30.8c

406.8±14.3d

766.8±23.4c

AST

160.5±5.3a

942.9±34.2b

495.6±25.7c

547.8±29.2c

381.6±17.4d

430.8±14.6d

ALP

287.4±12.3a

559.5±21.8b

415.5±27.8c

438.9±21.2c

367.5±15.6d

407.1±15.7c

注：有不同的小写字母肩标表示差异显著p<0.05。

2.2.2 本发明药物乳剂对抗氧化酶的影响

从实验结果表2看，模型组SOD、GSH-PX量显著低于正常组而MDA的量显著高于正常组(p<0.05)，说明氧化损伤模型制作成功。柴芩口服乳剂组的SOD、GSH-PX量显高于模型组而MDA的量显著低于模型组(p<0.05)，说明柴芩的抗氧化能力较好；且柴芩1：1的效果较好，优于市售柴芩清肝胶囊。

表2本发明药物乳剂对抗氧化酶的影响

分组

正常组

模型组

柴芩清肝胶囊

柴芩1：2

柴芩1：1

柴芩2：1

SOD

169.7±15.1^a

125.5±25.1^b

147.2±15.3^a

165.4±15.3^a

139.4±13.3^b

145.7±21.2^a

GSH-PX

158.7±15.6^a

113.1±17.5^b

147.5±15.4^a

151.2±13.6^a

141.2±11.3^a

142.8±25.1^a

MDA

1.67±0.12^a

3.28±0.53^b

2.46±0.38^a

1.92±0.24^a

2.24±0.41^b

2.11±0.12^a

注：有不同的小写字母肩标表示差异显著p<0.05。

2.3讨论

对乙酰氨基酚是兽医临床最常用的解热镇痛药,在治疗剂量时疗效显著，用药安全。但在过量或特殊情况下(如饥饿、合用某种药物等)会对机体的肝脏造成严重的损伤，甚至死亡。对乙酰氨基酚在肝内代谢过程中产生自由基引起肝细胞膜脂质过氧化，而肝脏细胞的Ⅱ相代谢，包括解毒酶和抗氧化酶，是清除体内有害物质的重要途径。将柴芩制成乳剂后，能增强保肝的效力。

试验例2 本发明药物毒理学研究

大多数研究柴胡的毒性主要是集中在柴胡的肝脏毒性，因此我们以大鼠为实验载体，研究本发明药物乳剂的肝脏毒性。

1 实验方法

5-6周龄清洁级SD大鼠80只，雌雄各半，体重在160～180g之间，由成都达硕实验动物中心提供。药物选用柴芩1：1药效较好的比例，按照工艺制备，其中制备时柴胡挥发油为1ml。。

在大鼠购入后观察1周，随机均分为4组(Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ)，每组40只，雌雄各半。Ⅰ组为空白对照组，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组为受试物组，分别按2ml/kg·bw、6ml/kg·bw、10ml/kg·bw的剂量灌胃给药。第一次给药前对大鼠进行称重，确定首次给药量，之后每3天进行称重记录，调整大鼠的给药量，连续30d。空白组灌服等量生理盐水。

于第10天、第20天和第30天各组取10只大鼠，雌雄各半，眼球采血，血清作血液生化指标检验，检测天冬氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、尿素氮(BUN)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、总胆固醇(CHO)、肌酐(CRE)、总胆血红素(TBIL)等指标等。

数据以χ±SD表示,用SPSS应用软件进行组间数据的显著性检验。采用t检验比较实验组与对照组间均增重、饲料利用率、血液生理指标和血清生化指标等各项指标的显著性差异。

2 结果与分析

2.1 临床表现

各组大鼠灌胃给药直至30d各组均无中毒死亡，期间临床表现正常。各试验组在给药至10d、20d、30d时，各剂量组大鼠体重的与对照组相比均无显著差异(P＞0.05)(见表2.1)。

表3本发明药物乳剂对大鼠体重的影响

注:同列数据肩标不同大小写字母表示差异极显著(P<0.01)，肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，肩标相同字母或无肩标字母表示差异不显著(P>0.05)

2.2血清生化指标

由表4-7可知，在远大于临床剂量的条件下，连续给药30天，大鼠没有表现出明显的生理生化指标改变，肝脏酶指标也正常，说明本发明药物乳剂在此剂量下没有明显毒性。

表4本发明药物乳剂对大鼠生化指标的影响(10d)

表5本发明药物乳剂对大鼠生化指标的影响(20d)

表6本发明药物乳剂对大鼠生化指标的影响(30d)

表7本发明药物乳剂对大鼠生化指标的影响(停药后14d)

注:同行数据肩标不同大小写字母表示差异极显著(P<0.01)，肩标不同小写字母表示差异显著(P<0.05)，肩标相同字母或无肩标字母表示差异不显著(P>0.05)

试验例3 本发明药物临床用于鸭病毒性肝炎

1 实验方法

鸭病毒性肝炎(duck viral hepatitis，DVH)是由鸭肝炎病鸭肝炎毒引起的危害雏鸭最严重的疫病之一。该病传播快、发病急、死亡率高，剖检肝脏有明显出血点和出血斑，雏鸭日龄越小，死亡率越高，最高死亡率90％-95％。鸭病毒性肝炎发病后，目前还没有有效治疗虽然卵黄抗体、高免血清和单克隆抗体治疗鸭肝炎有很好的效果，但由于价格较贵，货源紧缺，致使实际应用较少。

于绵阳市某爆发鸭病毒性肝炎的鸭场进行实验，选取具有临床症状死亡的病鸭，无菌采取病鸭的肝脏组织，称重、剪碎并用玻璃匀浆器制备组织匀浆，应用聚合酶链式反应的方法确诊病鸭感染鸭病毒性肝炎后进行实验。

将病鸭分为3组，分别是生理盐水组、本发明药物乳剂低剂量组和本发明药物乳剂(1：1)高剂量组，每组30只，药物灌服每日一次，每次低剂量2ml，高剂量4ml，模型组灌服生理盐水。

2 结果与分析

从表8可以看出，本发明药物乳剂对鸭病毒性肝炎具有良好的治疗作用，而且具有量效关系，可用于临床。

表8本发明药物乳剂对鸭病毒性肝炎的疗效观察

Claims

1.一种具有解热作用的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

柴胡挥发油1-2份、柴胡提取物总皂苷1-2份、黄芩提取物8-12份。

2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于：它是由下述重量配比的原料药制备而成的制剂：

柴胡挥发油1份、柴胡提取物总皂苷1.5份、黄芩提取物8.5份。

3.根据权利要求1或2所述的药物组合物，其特征在于：它是由柴胡挥发油、柴胡总皂苷提取物、黄芩苷提取物为活性成分，加入药学上可接受的辅料或辅助性成分制备而成的制剂。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是片剂、颗粒剂、胶囊剂、丸剂、口服液、乳剂。

5.一种制备权利要求1-4任意一项所述的药物组合物的方法，其特征在于：它包括如下步骤：

b、将a步骤的柴胡残渣或柴胡药材，干燥，与黄芩药材混合，粉碎成粗粉，再进行冷冻超微粉碎，得超微粉；

6.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于：b步骤所述的柴胡、黄芩的重量配比为：1-2:1-2；优选地，所述的柴胡、黄芩的重量配比为：1：2。

7.根据权利要求5所述的药物组合物，其特征在于：所述的制剂是乳剂，d步骤具体为：取柴胡皂苷和黄芩苷提取物，加水分散后用氢氧化钠调节pH使其溶解，加水、苯甲酸钠、甜菊素、吐温80、柴胡挥发油混合均匀，定容，加入胶体磨中研磨，分装、即得乳剂。

8.权利要求1-4任意一项所述的药物组合物在制备具有解热作用的中药或中兽药中的用途。

9.权利要求1-4任意一项所述的药物组合物在制备治疗病毒性肝炎或药物肝损伤的药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述的药物是治疗动物病毒性肝炎或/和药物性肝损伤的药物。