CN1850258A - 具有抗病毒和解热作用的药物组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
具有抗病毒和解热作用的药物组合物及其制备方法。该药物以莪术油和至少含有柴胡挥发油的柴胡提取物成分为基本有效药用成分,与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成,以其相应提取原料生药重量份计的有效药用成分比例是莪术/柴胡为1/0.5~20。在此基础上还可以添加黄芩苷作用有效药物成分。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有抗病毒和解热作用的药物组合物。
背景技术
莪术油是存在于中药莪术中的挥发油,体内外试验已证实莪术油对流感病毒A1、A3、合胞病毒均具有明显的抗病毒作用,抗病毒范围广,且无毒副作用。《中国药典》(2005年版一部)记载,在莪术中莪术油的含量大于1.5%,可通过传统的蒸馏法或超临界CO2萃取等方式得到。中国药典2000年版二部收载的含莪术油提取物的莪术油葡萄糖注射液,已广泛用于治疗小儿肺炎、病毒性肺炎、急性上呼吸道感染、病毒性肠炎及病毒性心肌炎、脑炎等疾病。
柴胡为中国药典收载的一味常用中药,性苦、微寒,具有和表解里,疏肝,升阳的功效,用于感冒发热、寒热往来等,柴胡主要有效成分为挥发油和柴胡皂苷。李秀琴等在“柴胡挥发油提取方法的研究”(《中国药学杂志》2004,39(2):103-105)中报道,柴胡中约含有0.15%的挥发油。柴胡挥发油毒性低,有一定的解热作用,临床上有以柴胡挥发油制成的注射液供肌内注射,用于治疗感冒、流行性感冒及疟疾等的发热。卫生部药品标准中药成方制剂第17册中收载的柴胡注射液,为以柴胡的水蒸气蒸馏液制成的灭菌水溶液。临床使用中发现,无论是柴胡注射液,还是莪术油葡萄糖注射液,其功效作用方面都不够全面,与实际治疗需要尚存在有不相适应之处。
发明内容
鉴于此,本发明首先将提供一种能具有更为理想的抗病毒和解热作用的药物组合物。在此基础上,本发明还将提供一种所说抗病毒和解热药物组合物的制备方法。
本发明具有抗病毒和解热作用的药物组合物,是以莪术油和至少含有柴胡挥发油的柴胡提取物成分为基本有效药用成分,与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成。其中,所说两有效药用成分以其相应提取原料的生药重量份计的比例是莪术/柴胡为1/0.5~20。
上述的药物组合物中,所说有效药用成分中的柴胡提取物成分可以单独采用为柴胡挥发油。其中,所说的有效药用挥发油成分既可以直接使用已有市售的相应商品挥发油,也可以由相应的莪术和/或柴胡生药原料中制取得到。例如,在采用由目前已有市售的商品莪术油与由柴胡生药原料方式制取得到的柴胡挥发油的方式制备药物时,所说有效药用成分的莪术油/柴胡生药的重量份比例范围相应可以为1/25~1000,进一步的较好比例范围是1/50~400,最佳比例范围是1/100~200。
以上述组成为基础,对于口服型药物而言,所说有效药用成分中的柴胡提取物成分,在含有柴胡挥发油的同时,还可以含有与该柴胡挥发油量相当的同一比例量柴胡生药原料的柴胡皂苷成分提取物,有利于疗效的提高。
在上述使用莪术油和柴胡提取物两有效药用成分的基础上,为进一步提高对所说适应症的功效和作用,还可以在所说有效药物成分中进一步增加黄芩苷,其与柴胡提取原料生药的重量份比为1/10~20。
将上述的有效药用成分与药学上可以接受和使用的辅料、载体等辅助添加成分混合,并按相应的制剂方式处理,即可制备得到相应的药物制剂,如多种常用形式的口服制剂、注射剂、滴鼻剂、喷雾剂、气雾剂或喷雾吸入剂等。药效学试验结果表明,本发明上述有效药用组成形式的药物在抗病毒和解热作用方面,可以产生协同增效的作用,使疗效更为满意。
由抗病毒和解热试验结果显示,本发明上述的药物组合物,可用于治疗感冒、流行性感冒及疟疾等的发热,小儿肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒,急性上呼吸道感染、病毒性肠炎及病毒性心肌炎、脑炎等病毒性疾病。特别是制成高浓度的乳剂型滴鼻剂、喷雾剂等制剂后,通过鼻腔和口腔粘膜给药吸收,能具有比目前的莪术油葡萄糖注射液和柴胡注射液更好的药效作用,同时还可避免中药注射剂过敏等不安全隐患,具有使用方便,患者容易接受等诸多优点。
如上述,有效药用成分中的莪术挥发油以使用有市售的商品莪术油最为方便。如果有效药用成分的莪术挥发油和柴胡提取物均采用由生药原料提取得到的方式时,一种可供参考的方式和步骤可以为:
a、将所说比例量的原料生药莪术和柴胡以蒸馏方式提取挥发油成分,以药物中可以接受的水不溶油性成分,如药物中允许使用或允许直接作为药物制剂辅助成分使用的植物油、动物油、矿物油或合成油脂中的至少一种,与水共同组成的两相体系作为蒸馏液的收集介质;
b、由提取挥发油后的柴胡剩余物,按目前已有报道和使用的方式提取柴胡皂苷;
c、由a步收集介质中的挥发油成分,或由a步得到的挥发油成分和b步的柴胡皂苷成分为有效药用成分,与药物中可接受的辅助添加成分按相应的制药方法和工艺加工处理,即可制成为相应的口服型、注射型或其它可用形式的药物制剂。例如,与在口服制剂中可以被接受的崩解剂、赋形剂、润滑剂、粘合剂、填充剂等常用的辅助添加成份混合后,按相应的常规工艺方法处理,即可制成为片剂、滴丸剂、胶囊剂或适当形式的缓释剂、控释剂等固体制剂形式的口服药物;与常用的增溶剂、助溶剂、乳化剂、润湿剂等表面活性剂、pH调节剂、稀释剂、稳定剂、增稠剂等混合,按相应的常规工艺方法处理,即可制成为乳剂、喷雾剂、滴鼻剂、气雾剂等相应的药物制剂。按注射药物制剂中允许使用的适当溶剂和附加剂配合及相应的工艺操作处理后,可以制备成相应的乳剂或粉针等肌肉或静脉形式的注射制剂药物。
上述制备中所说的对挥发油的提取过程,既可以将原料生药莪术和柴胡混合后同时蒸馏和收集馏出物,也可以采用将两原料生药分别蒸馏和收集后再混合处理的方式进行。
由于在蒸馏时采用了油/水两相的介质体系作收集馏出液,因此挥发油成分即可被富集于油相收集层中,并减少了损失。当油相层使用的是药物中可以接受的水不溶油性成分时,如药学中允许使用的大豆油、红花油、棉籽油、玉米油、橄榄油、芝麻油、轻质矿物油、液体石蜡、硬脂酸、硅油等中的一种或几种时,富集有馏出挥发油成分的该油相混合物无需分离即可直接用于下步的制剂。
当还需加用黄芩苷作为有效药用成分时,可以在上述的c步制剂过程中按所说比例量加入。
作为本发明上述药物有效药用成分的莪术油,其来源除可为市售的商品莪术油外,也可以采用以常规蒸馏方法或CO2超临界萃取技术从中药原料莪术中提取得到莪术油成分。
由抗病毒和解热试验结果显示,本发明上述的药物组合物,可用于治疗感冒、流行性感冒及疟疾等的发热,小儿肺炎、病毒性肺炎、病毒性感冒,急性上呼吸道感染、病毒性肠炎及病毒性心肌炎、脑炎等病毒性疾病。
以下通过具体实施方式的实例再对本发明的上述内容作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。在不脱离本发明上述技术思想情况下,根据本领域普通技术知识和惯用手段做出的各种替换或变更,均包括在本发明的范围内。
具体实施方式
实施例1:
取柴胡500g,切断,加水温浸,经水蒸气蒸馏,常规方式直接收集初馏液,再重蒸馏,收集重馏液约1000ml,加入市售成品的注射用莪术油0.5g和聚山梨酯80适量,搅拌使油完全溶解,再加入氯化钠9g,溶解后,滤过,加注射用水至1000ml,调节pH值,精滤,灌封,灭菌,即得溶液型注射液。
实施例2:
将柴胡250g,切断,装入常规的蒸馏器中,加水温浸,以普通的油水分离器作为蒸馏液收集装置,并在其中的下层装入适量水,上层装入大豆油5g。对柴胡蒸馏提取5小时,分离收集上述装置中的油相层,得富集有柴胡挥发油的大豆油,加入市售成品莪术油10g,作为油相备用。将蛋黄卵磷脂0.6g加蒸馏水50ml分散,加入甘油2.3g、西黄芪胶1g、尼泊金乙酯0.1g和食用香精适量,搅拌使溶解,加热至70℃,并继续搅拌,同时缓慢加入油相,高速均质8分钟制得初乳,将初乳过高压乳匀机循环6次,在低速搅拌下加蒸馏水至100ml,过滤、分装,置专用滴鼻瓶中或喷雾瓶中,即得滴鼻剂和喷雾剂。
实施例3:
将柴胡1000g,装入常规的水蒸气蒸馏器中,以普通的油水分离器作为蒸馏液收集装置,并在其中的下层装入适量水,上层装入注射用大豆油20g。对柴胡水蒸气蒸馏提取5小时,分离收集上述装置中的油相层,得富集有柴胡挥发油的大豆油,再加入大豆油80g、成品莪术油10g和辛葵酸甘油酯10g,作为油相预热至55℃,备用。将注射用大豆磷脂12g加注射用水500ml分散,再加入注射用甘油25g,搅拌使溶解,加热至55℃,并继续搅拌,同时缓慢加入油相,高速均质6分钟制得初乳,将初乳过高压乳匀机循环4次,即得亚微乳。低速搅拌下将亚微乳加注射用水至1000ml,过滤、分装,灭菌,即得乳剂型注射液。
实施例4:
将柴胡6000g和莪术3000g,粉碎,装入常规的蒸馏器中,加水温浸,以普通的油水分离器作为蒸馏液收集装置,并在其中的下层装入适量水,上层装入大豆油50g。蒸馏提取6小时,分离收集上述装置中的油相层,得富集有柴胡挥发油和莪术油的大豆油,加入大豆卵磷脂25g作为油相备用。实测显示,其中莪术挥发油的蒸馏收得率一般至少可达2%。取甘油25g、α-生育酚1g、山犁酸1g、卡波姆10g溶于适量的蒸馏水中作为水相。分别加热至55℃,混匀,先在组织捣碎机中分散乳化3-4分钟,再加蒸馏水至1000ml,调节pH值6.0-7.0,经高速乳匀机乳化至油滴粒径小于5um。分装,置专用滴鼻瓶中,每瓶10ml,即为所述的滴鼻剂。或置耐压容器中,加阀门、封帽,压入抛射剂,摇匀,即得气雾剂。
实施例5:
将柴胡2000g,切断,装入常规的水蒸气蒸馏器中,加水温浸,以普通的油水分离器作为蒸馏液收集装置,并在其中的下层装入适量水,上层装入橄榄油50g。对柴胡水蒸气蒸馏提取4-6小时,分离收集上述装置中的油相层,得富集有柴胡挥发油的橄榄油,备用。提取柴胡挥发油后的药液,滤过,滤液备用,药渣再加水煎煮2次,滤过,煎液与滤液合并,按常规方式通过大孔吸附树脂柱吸附,用适量水洗涤除杂,再用70%乙醇洗脱,收集乙醇洗脱液,回收乙醇,浓缩、干燥,即得柴胡总皂苷,粉碎成细粉,备用。
取明胶110g加水浸泡溶胀,加甘油45g和适量防腐剂加热混合均匀,作为胶囊壳材料。另取橄榄油260g与蜂蜡17g加热融化,加入黄芩苷144g和上述柴胡总皂苷,过胶体磨,再入莪术油10g和上述富集有柴胡挥发油的橄榄油,混合均匀,制成软胶胶囊1000粒,即得所述的胶囊剂。
实施例6:
取莪术200g和柴胡2000g,粉碎,装入常规的水蒸气蒸馏器中,以普通的油水分离器作为蒸馏液收集装置,并在其中的下层装入适量水,上层装入大豆油30g,经水蒸气蒸馏提取5小时,分离收集上述装置中的油相层,得富集有莪术油和柴胡挥发油的大豆油,预热至80℃,加入到PEG-6000熔融液中,搅拌混匀,在滴丸机中制成1000粒滴丸,即为所述的丸剂型药物。
以莪术油注射液(0.1g莪术油/250ml)与含柴胡挥发油的商品柴胡注射液(1g柴胡药材/ml)配制成不同比例形式的本发明药物组合物作为试验药物,以病毒唑为阳性对照药物,进行抗病毒作用的药效学试验。经预试验显示,莪术油注射液与柴胡注射液对RSV病毒的半数有效浓度分别为0.005mg/ml和0.5mg/ml,以10倍上述半数有效浓度分别按1∶0(I)、4∶1(II)、2∶1(III)、1∶1(IV)、1∶2(V)、1∶4(VI)、1∶10(VII)和0∶1(VIII)的比例配制成本发明的各试验药物组,分别相当于莪术油/原料生药柴胡重量比例为1/0、1/25、1/50、1/100、1/200、1/400、1/1000和0/1各组。
一、实验方法
采用组织细胞半数感染量(TCID50)的方法,根据药物对细胞病变的抑制效果,以确定试验药物对HSV-I和RSV的抗病毒效果。
1.药液配制:用RPMI-1640对上述各试验药物进行对倍稀释,稀释倍数为1∶2、1∶4、1∶8、1∶16和1∶32。病毒唑的浓度分别为0.062,0.031,0.015和0.008mg/ml。
2.对Vero细胞和Hep-2细胞的最大无毒浓度测定:在96孔细胞培养板的Vero单层细胞和Hep-2单层细胞中分别加入不同浓度的试验药物,置37℃和5%CO2培养箱中96小时,观察细胞病变,测定其对Vero细胞和Hep-2单层细胞的最大无毒浓度。
3.对HSV-I病毒致Vero细胞病变的抑制试验:在96孔细胞培养板的Vero单层细胞内,每孔感染HSV-I 10TCID50(7LgTCID50)病毒液,2小时后倾去病毒液,每孔内再加入不同浓度的试验药物或病毒唑,培养96小时后观察细胞病变。
4、对RSV病毒致Hep-2细胞病变的抑制试验:在96孔细胞培养板的Hep-2单层细胞内,每孔感染RSV 10TCID50(6LgTCID50)病毒液,2小时后倾去病毒液,每孔内再加入不同浓度的试验药物或病毒唑,培养96小时后观察细胞病变。
二、实验结果
1.各试验药物对Vero细胞的最大无毒浓度,经CPE法测定均小于1∶2。正式药物试验中则采用小于1∶2的药物进行体外抗病毒试验。
2.各试验药物对HSV-I病毒致Vero细胞病变的抑制作用,对RSV病毒致Hep-2细胞病变的抑制作用。试验结果如表1所示。其中,试验药物中的II~VII组为不同比例的本发明药物组合物,I、VIII两组分别为以单一莪术油和柴胡挥发油为有效成分的药物组。
表1 不同组成的试验药物体外抗病毒作用
药物 | 病毒株 | 试验药物稀释倍数 | 病毒对照 | 细胞对照 | ||||
1∶4 | 1∶8 | 1∶16 | 1∶32 | |||||
试验药物组 | I | HSV-IRSV | 1+1+ | 2+2+ | 3+3+ | 4+4+ | 4+4+ | -- |
II | HSV-IRSV | -- | 1+1+ | 2+2+ | 3+3+ | 4+4+ | -- | |
III | HSV-IRSV | -- | -1+ | 1+2+ | 2+3+ | 4+4+ | -- | |
IV | HSV-IRSV | -- | -- | -- | 1+2+ | 4+4+ | -- | |
V | HSV-IRSV | -- | -- | -- | 1+2+ | 4+4+ | -- | |
VI | HSV-IRSV | -- | -- | 1+2+ | 2+3+ | 4+4+ | -- | |
VII | HSV-IRSV | -- | 1+2+ | 2+3+ | 3+4+ | 4+4+ | -- | |
VIII | HSV-IRSV | 1+1+ | 2+2+ | 3+3+ | 4+4+ | 4+4+ | -- | |
对照药物(病毒唑) | mG/ml | 0.062 | 0.0031 | 0.015 | 0.008 | |||
HSV-IRSV | -- | -- | -2+ | 2+3+ | 4+4+ | -- |
注:“-”表示细胞无病变;
“1+”约25%细胞发生病变、“2+”约50%细胞发生病变、“3+”约75%细胞发生病变,“4+”约100%细胞发生病变。
表1的试验结果表明:本发明药物组各种组成比例的莪术油/柴胡组合物(II~VII)对HSV-1和RSV均具有显著的抑制作用,且强于单独使用形式的莪术油(I)和柴胡(VIII),其中优选的比例为1∶1(IV)和1∶2(V)。
在上述试验结果的基础上,以上述IV组(莪术油/柴胡为1/100)组成形式的药物为试验药物进行解热作用的药效学试验。其中,莪术油为市售商品莪术油,符合中国药典2005年版一部莪术油质量标准的规定;柴胡按实施例3的水蒸气蒸馏方式提取柴胡挥发油,分别制成相应的乳剂型注射液。试验药物为:柴胡注射乳剂(0.5g/ml)、莪术油注射乳剂(5mg/ml)、本发明组合物注射乳剂(0.5g柴胡、5mg莪术油/ml)。
取体重2.0-2.5kg的健康家兔,雌雄兼用,实验前禁食2h,测量家兔正常体温2次,相隔30min,选取体温在38.3-39.3℃之间,且两次体温之差不超过0.2℃之家兔40只,随机分为4组,每组8只。分别经耳缘静脉注射三联菌苗1ml/kg,当体温升高1℃以上(约2h)时,1组:肌注灭菌生理盐水(4ml/kg);2-4组:分别肌注柴胡、莪术油和本发明药物组合物注射乳剂各4ml/kg,于给药后1、2、3、4、5小时测定动物体温,记录家兔体温变化,结果见表2。
表2 解热作用实验结果(x±s)
组别 | 剂量 | 正常体温(℃) | 给药后不同时间(h)体温(℃) | ||||
1h | 2h | 3h | 4h | 5h | |||
NS柴胡莪术油本发明组合物 | 4ml/kg2g/kg20mg/kg2g柴胡/kg,20mg莪术油/kg | 38.8±0.438.9±0.238.7±0.338.9±0.4 | 40.0±0.539.9±0.639.7±0.539.4±0.4** | 39.8±0.439.7±0.539.4±0.4*39.1±0.5** | 39.9±0.639.6±0.239.3±0.5*39.2±0.4** | 39.8±0.539.5±0.539.4±0.439.0±0.6** | 39.8±0.439.6±0.439.4±0.638.9±0.3** |
与生理盐水组比较:*p<0.05,**p<0.01
表2结果显示,本发明组合物组对致热家兔体温有明显的降温作用,与生理盐水(NS)空白对照组在5h内经t检验比较,有显著性差异(p<0.01),而柴胡组与生理盐水组在5h内经t检验比较,无显著性差异(p>0.05),莪术油组与生理盐水组在5h内经t检验比较,仅在2h和3h有明显差异(p<0.05)。上述试验结果充分表明:本发明药物组合物(莪术油/柴胡)具有明显的解热作用,且显示协同增效作用,优于单独使用形式的莪术油和柴胡。
上述试验结果清楚显示,本发明有效药用成分组成形式的上述药物组合物在综合的抗病毒和解热作用方面,可具有显著的协同增效作用,其结果明显优于其中有效药用成分莪术油和柴胡的单独作用,因而具有令人满意的开发前景和价值。
Claims (10)
1.具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是以莪术油和至少含有柴胡挥发油的柴胡提取物成分为基本有效药用成分,与药物中可以接受的辅助添加成分共同组成,以所说有效药用成分相应提取原料生药重量份计的比例是莪术/柴胡为1/0.5~20。
2.如权利要求1所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是所说有效药用成分中的柴胡提取物成分为柴胡挥发油,其中莪术油/柴胡生药的重量份比例为1/25~1000。
3.如权利要求2所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是所说有效药物成分中莪术油/柴胡生药的重量份比例为1/50~400。
4.如权利要求3所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是所说有效药物成分中莪术油/柴胡生药的重量份比例为1/100~200。
5.如权利要求1所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是所说有效药用成分中的柴胡提取物成分为与同一比例用量的柴胡生药相当的柴胡挥发油和柴胡皂苷。
6.如权利要求1所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是所说的有效药物成分中还有黄芩苷,其与柴胡生药的重量份比为1/10~20。
7.如权利要求1至6之一所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物,其特征是为口服制剂、注射剂、滴鼻剂、喷雾剂或气雾剂。
8.制备如权利要求1所述的具有抗病毒和解热作用的药物组合物的方法,按下列步骤进行:
a、将所说比例量的原料生药莪术和柴胡以蒸馏方式提取挥发油成分,以药物中可以接受的水不溶油性成分与水共同组成的两相体系作为蒸馏液的收集介质;
b、由提取挥发油后的柴胡剩余物提取柴胡皂苷;
c、由a步收集介质中的挥发油成分,或由a步得到的挥发油成分和b步的柴胡皂苷成分为有效药用成分,与药物中可接受的辅助添加成分制备成相应的药物制剂。
9.如权利要求8所述的制备方法,其特征是所说的挥发油提取为对原料生药莪术和柴胡的混合物共同蒸馏的方式进行,蒸馏液收集介质中含有挥发油的混合油相成分无需分离直接用于c步制剂。
10.如权利要求8或9所述的制备方法,其特征是在所说的c步中还加入所说比例量的黄芩苷作为有效药用成分。
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