CN104072626A

CN104072626A - 一种灵仙新苷的制备方法

Info

Publication number: CN104072626A
Application number: CN201310097384.9A
Authority: CN
Inventors: 李洋; 张喜全; 刘利民; 李超
Original assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd
Current assignee: Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd
Priority date: 2013-03-26
Filing date: 2013-03-26
Publication date: 2014-10-01

Abstract

本发明为一种灵仙新苷的制备方法，涉及天然药物领域，具体涉及一种从中药威灵仙中提取灵仙新苷的工业化制备方法。其特征是将含有威灵仙的药材的用热水回流提取，大孔树脂吸附提取液后，经水-乙醇溶液梯度洗脱分离出威灵仙总皂苷，再将威灵仙总皂苷用特定的无水有机溶剂加热回流提取，提取液干燥后经丙酮-水溶液低温结晶得到的产物即为灵仙新苷。本发明提供的灵仙新苷生产工艺成本低廉，工艺流程简单，灵仙新苷得率达25%以上，产品纯度达90%以上，适合大规模工业化生产。

Description

一种灵仙新苷的制备方法

技术领域

本发明涉及天然药物领域，具体涉及一种从中药威灵仙中提取灵仙新苷的工业化制备方法。

背景技术

中药威灵仙来源于毛茛科植物威灵仙Clematis chinensis Osbeck、棉团铁线莲Clematis hexa petala Pall.或东北铁线莲Clematis manshurica Rupr.的干燥根及根茎。秋季采挖，除去泥沙，晒干制得，具祛风湿、通经络、止痛等功效。灵仙新苷是威灵仙的皂苷提取物，分子式为C₈₂H₁₃₄O₄₃，分子量1806，结构式如下式所示：

灵仙新苷占总皂苷部分50%以上，是威灵仙总皂苷药理活性的主要物质基础，具有重要的应用价值。吕雪发表的“灵仙新苷镇痛抗炎作用的实验研究”表明其具有较强的抗炎镇痛作用，专利201110301287.8“灵仙新苷的调血脂、抗动脉粥样硬化及抗心肌缺血作用”表明其具有治疗心血管疾病的用途。

专利200910030660.3公开了威灵仙总皂苷和灵仙新苷的提取制备方法，包括4种灵仙新苷的精制方法。但如何获得高纯度并适合工业化生产的灵仙新苷的提取方法，仍是目前需要解决的技术问题。

发明内容

本发明的目的在于提供一种灵仙新苷的提取工艺，包括如下步骤：

1.取威灵仙药材，热水回流提取，过滤，滤液用大孔树脂吸附后，依次分别用水、15-25%乙醇液、40-60%乙醇液洗脱大孔树脂，每次均洗脱至流出液无色，收集40-60%乙醇洗脱液并干燥得粉末A，即威灵仙总皂苷；

2.用无水有机溶剂搅拌回流提取A，趁热过滤后取滤液静置沉淀，再过滤取沉淀干燥得粉末B，即灵仙新苷粗品；

3.粉末B用水溶解后加入丙酮，低温静置析晶得粉末C，即精制后的灵仙新苷。

上述步骤1中，其中回流用热水为威灵仙药材的5-15倍量，优选为8-10倍量；回流提取次数为2-4次，优选3次；回流时间为1-3小时，优选2小时。

上述步骤1中，其中大孔树脂型号选自D101型、HPD100型、HPD200型和HD300型，优选D101型大孔树脂。

上述步骤1中，其中依次分别用水、15-25%乙醇液、40-60%乙醇液洗脱大孔树脂，每次均洗脱至流出液无色，亦可以描述为依次用12-16倍量水、9-12倍量15-25%乙醇溶液、5-7倍量40-60%乙醇溶液洗脱大孔树脂。

上述步骤2中，其中有机溶剂的用量为粉末A质量的40-70倍，优选40-60倍；回流提取次数为1-4次，优选2次；回流时间为1-4小时，优选2-3小时。

上述步骤2中，其中无水有机溶剂选自无水甲醇、乙醇中的一种或两种的混合液，优选无水乙醇。

上述步骤1和2中，其中干燥方法为常压干燥、微波干燥、红外线干燥、减压干燥和冷冻干燥，优选微波干燥。

上述步骤3中，其中低温静置温度范围为-10-10℃，优选0-5℃，放置时间8-16小时，优选10-12小时。

上述步骤3中，其中水用量为粉末B质量的1.5-4倍，优选2-3倍；丙酮用量为B粉末的水溶液质量的2-4倍，优选2-3倍。为提高产物纯度，可再重复析晶一次或多次。

本发明提供的灵仙新苷生产工艺，提高了产率，降低了成本，简化了工艺流程，使之更适合大规模工业化生产。

具体实施方式

实施例1：取威灵仙药材4kg，其药材来源于东北铁线莲，灵仙新苷含量为2.02%，用10倍量热水回流2小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂D101后，依次分别用水、20%乙醇、50%乙醇洗脱至流出液无色，收集50%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用50倍量无水乙醇加热回流提取2次，每次2小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，微波法干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以2.5倍量水溶解，溶解后加入3倍质量于上述溶液的丙酮，0-5℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷27g，得率30.83%，HPLC法测得纯度为92.25%。

实施例2：取威灵仙药材4kg，其药材来源于毛茛科植物威灵仙，灵仙新苷含量为1.92%。用12倍量热水回流3小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂D101后，依次分别用水、20%乙醇、50%乙醇洗脱至流出液无色，收集50%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用70倍量无水乙醇加热回流提取2次，每次3小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，微波法干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以3倍量水溶解，溶解后加入2.5倍质量于上述溶液的丙酮，-5-0℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷26.2g，得率31.34%，HPLC法测得纯度为91.89%。

实施例3：取威灵仙药材4kg，其药材来源于东北铁线莲，灵仙新苷含量2.07%。用8倍量热水回流2小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂D101后，依次分别用水、20%乙醇、50%乙醇洗脱至流出液无色，收集50%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用40倍量无水甲醇在加热搅拌回流提取2次，每次3小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，减压干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以3倍量水溶解，溶解后加入3.5倍质量于上述溶液的丙酮，0-5℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷26.1g，得率28.83%，HPLC法测得纯度为91.46%。

实施例4：取威灵仙药材4kg，其药材来源于东北铁线莲，灵仙新苷含量2.02%。用10倍量热水回流2小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂HPD100后，依次分别用水、20%乙醇、40%乙醇洗脱至流出液无色，收集40%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用50倍量无水乙醇加热搅拌回流提取3次，每次2小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，微波法干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以2倍量水溶解，溶解后加入2.5倍量于上述溶液的丙酮，0-5℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷23.3g，得率26.68%，HPLC法测得纯度为92.52%。

实施例5：取威灵仙药材4kg，其药材来源于东北铁线莲，灵仙新苷含量为2.02%。用10倍量热水回流2小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂D101后，依次分别用水、25%乙醇、55%乙醇洗脱至流出液无色，收集55%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用60倍量无水乙醇加热搅拌回流提取2次，每次3小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，微波法干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以2.5倍量水溶解，溶解后加入2.5倍量于上述溶液的丙酮，0-5℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷25.8g，得率29.72%，HPLC法测得纯度为93.08%。

实施例6：取威灵仙药材400kg，其药材来源于东北铁线莲，灵仙新苷含量为2.02%。用10倍量热水回流2小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂D101后，依次分别用水、20%乙醇、50%乙醇洗脱至流出液无色，收集50%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用50倍量无水乙醇加热搅拌回流提取2次，每次2小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，微波法干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以2.5倍量水溶解，溶解后加入2.5倍质量于上述溶液的丙酮，0-5℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷2.35kg，得率26.32%，HPLC法测得纯度为90.52%。

实施例7：取威灵仙药材700kg，其药材来源于东北铁线莲，灵仙新苷含量为2.02%用10倍量热水回流2小时，重复3次，过滤，取滤液上预先处理好的大孔树脂D101后，依次分别用水、20%乙醇、50%乙醇洗脱至流出液无色，收集50%乙醇的洗脱液，微波法浓缩干燥，得威灵仙总皂苷，威灵仙总皂苷用50倍量无水乙醇加热搅拌回流提取2次，每次2小时，之后趁热过滤，滤液静置过夜沉淀，次日过滤并收集沉淀，微波法干燥后得灵仙新苷粗品，将粗品以2.5倍量水溶解，溶解后加入2.5倍质量于上述溶液的丙酮，0-5℃静置过夜，析晶，析出物重结晶一次即得灵仙新苷4.58kg，得率29.44%，HPLC法测得纯度为90.89%。

Claims

1.一种灵仙新苷的制备方法，包括以下步骤：步骤1，取威灵仙药材，热水回流提取，过滤，滤液经大孔树脂吸附后，依次分别用水、15-25%乙醇液、40-60%乙醇液洗脱大孔树脂，每次均洗脱至流出液无色，收集40-60%乙醇洗脱液并干燥得粉末A，即威灵仙总皂苷；步骤2，用无水有机溶剂搅拌回流提取A，趁热过滤后取滤液静置沉淀，再过滤取沉淀干燥得粉末B，即灵仙新苷粗品；步骤3，粉末B用水溶解后加入丙酮，低温静置析晶得粉末C，即精制后的灵仙新苷。

2.权利要求1所述的方法，其中步骤1热水用量为威灵仙药材的5-15倍量，热水回流提取次数为2-4次，每次回流时间为1-3小时。

3.权利要求1所述的方法，其中步骤1大孔树脂型号选自D101型、HPD100型、HPD200型和HD300型。

4.权利要求1所述的方法，其中步骤2无水有机溶剂选自乙醇、甲醇中的一种或两种的混合液。

5.权利要求1所述的方法，其中步骤2无水有机溶剂用量为粉末A质量的40-70倍，回流提取次数为1-3次，提取时间为1-3小时。

6.权利要求1所述的方法，其中步骤1和2的干燥方法选自冷冻干燥、常压干燥、微波干燥、红外线干燥和减压干燥。

7.权利要求1所述的方法，其中步骤3溶解粉末B的水溶液用量为粉末B质量的1.5-4倍，加入丙酮量为水溶液质量的2-4倍，放置时间为8-18小时。

8.权利要求1所述的方法，其中步骤3丙酮溶液低温析晶的温度范围为：-10℃至10℃。