CN104072569A - 一种从积雪草中提取积雪草苷的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种从积雪草中提取积雪草苷的方法,其处理步骤包括:原料粉碎,过80目筛,复合酶发酵,发酵后的原料加入5~8倍的50~60%的乙醇,置于双频超声提取器中,超声频率分别为40KHz、80KHz,功率为400~600W,于50~60℃提取60~90min,过滤,浓缩,石油醚-水萃取,取下层,经氧化铝柱分离纯化、浓缩、重结晶等步骤,得到积雪草苷。本发明提取时间短、得率高、操作方便、安全可靠,是一种高效节能的积雪草苷提取分离的方法,适合于工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种积雪草中提取积雪草苷的方法,具体涉及一种复合酶发酵协同双频超声波提取积雪草苷的方法,属于天然植物提取产物技术领域。
背景技术
积雪草为伞形科植物的干燥全草,其性含,味苦、辛,具有清热利湿,解毒消肿之功效,主要用于湿热黄疸、中暑腹泻、砂淋、血淋、痈肿疮毒、跌扑损伤等症。其主要成分为积雪草苷和羟基积雪草苷等三萜皂苷类成分,具有促进伤口愈合,刺激肉芽生长,促进表皮角质化,并有助于形成新的结缔组织,对烧伤增生性癜痕有明显疗效。
酶工程技术,通过选用恰当的酶制剂,如纤维素酶、果胶酶、蛋白酶等与植物细胞作用,破坏细胞壁的致密结构,引起细胞壁及细胞质间结构产生局部疏松、膨胀、崩溃等变化,减小细胞壁、细胞质等传质屏障对有效成分从细胞内向提取介质扩散的传质阻力,从传质角度促使有效成分的提取率提高。
双频超声法是一门新兴的技术,双频超声同时辐射,能显著地增加空化效果,减少驻波所造成的死角,在低温下即可得到高的提取率,为热不稳定物质的提取提供了一种新的强化方法。经文献检索,未见与本发明相同的的公开文献报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种工艺简单、得率高、提取时间短且安全可靠的从积雪草中提积雪草苷的方法。
本发明包括以下步骤:
积雪草粉碎,过80目筛,将相当于积雪草粉末1~2%的复合酶喷洒其上,薄膜包裹,堆积在温度35~45℃的暗室内,发酵15~24h,发酵后的原料加入5~8倍的50~60%的乙醇,置于双频超声提取器中,超声频率分别为40KHz、80KHz,功率为400~600W,于50~60℃提取60~90min,过滤,浓缩,石油醚-水萃取,取下层,上氧化铝柱,10~15BV的50~70%的乙醇洗脱,洗脱液浓缩,甲醇重结晶2次,得到积雪草苷。
本发明所述的复合酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶按重量比0.5:0.3:0.2的混合物。
本发明所述的超声功率为双频超声作用时总功率(40KHz与80KHz各取一半)。
本发明的有益效果在于:(1)采用复合酶处理,能破坏植物的细胞壁,有利于有效成分的溶出,大大缩短处理时间,提高生产效率;(2)采用双频超声萃取,利用超声的空化作用,减少驻波所造成的死角,加速积雪草苷的溶出;(3)本发明操作方便,工艺简单,得率高,且生产安全可靠。
下面将结合具体实施方式进一步说明本发明,但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
具体实施方式:
实施例1:
积雪草粉碎,过80目筛,取1kg粉末,将相当于积雪草粉末1%的复合酶(纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的重量比为0.5:0.3:0.2)喷洒其上,薄膜包裹,堆积在温度35℃的暗室内,发酵24h,发酵后的原料加入8倍的50%的乙醇,置于双频超声提取器中,超声频率分别为40KHz、80KHz,功率为400W,于60℃提取60min,过滤,浓缩,石油醚-水萃取,取下层,上氧化铝柱,10BV的50%的乙醇洗脱,洗脱液浓缩,甲醇重结晶2次,得到积雪草苷10.2g,纯度为90.5%,得率为1.02%。
实施例2:
积雪草粉碎,过80目筛,取1kg粉末,将相当于积雪草粉末1.5%的复合酶(纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的重量比为0.5:0.3:0.2)喷洒其上,薄膜包裹,堆积在温度40℃的暗室内,发酵20h,发酵后的原料加入6倍的60%的乙醇,置于双频超声提取器中,超声频率分别为40KHz、80KHz,功率为600W,于55℃提取80min,过滤,浓缩,石油醚-水萃取,取下层,上氧化铝柱,12BV的60%的乙醇洗脱,洗脱液浓缩,甲醇重结晶2次,得到积雪草苷12.2g,纯度为94.1%,得率为1.22%。
实施例3:
积雪草粉碎,过80目筛,取1kg粉末,将相当于积雪草粉末2%的复合酶(纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶的重量比为0.5:0.3:0.2)喷洒其上,薄膜包裹,堆积在温度45℃的暗室内,发酵15h,发酵后的原料加入5倍的55%的乙醇,置于双频超声提取器中,超声频率分别为40KHz、80KHz,功率为500W,于50℃提取90min,过滤,浓缩,石油醚-水萃取,取下层,上氧化铝柱,15BV的70%的乙醇洗脱,洗脱液浓缩,甲醇重结晶2次,得到积雪草苷12.4g,纯度为93.6%,得率为1.24%。
Claims (3)
1. 一种从积雪草中提取积雪草苷的方法,其特征在于,包括以下步骤:积雪草粉碎,过80目筛,将相当于积雪草粉末1~2%的复合酶喷洒其上,薄膜包裹,堆积在温度35~45℃的暗室内,发酵15~24h,发酵后的原料加入5~8倍的50~60%的乙醇,置于双频超声提取器中,超声频率分别为40KHz、80KHz,功率为400~600W,于50~60℃提取60~90min,过滤,浓缩,石油醚-水萃取,取下层,上氧化铝柱,10~15BV的50~70%的乙醇洗脱,洗脱液浓缩,甲醇重结晶2次,得到积雪草苷。
2. 根据权利要求1所述的一种从积雪草中提取积雪草苷的方法,其特征在于,所述的复合酶为纤维素酶、半纤维素酶、果胶酶按重量比0.5:0.3:0.2的混合物。
3. 根据权利要求1所述的一种从积雪草中提取积雪草苷的方法,其特征在于,所述的超声功率为双频超声作用时总功率(40KHz与80KHz各取一半)。
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