CN104059116A

CN104059116A - 一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法

Info

Publication number: CN104059116A
Application number: CN201410182233.8A
Authority: CN
Inventors: 张天
Original assignee: XI'AN DAY NATURAL TECH Co Ltd
Current assignee: XI'AN DAY NATURAL TECH Co Ltd
Priority date: 2014-04-30
Filing date: 2014-04-30
Publication date: 2014-09-24

Abstract

本发明公开了一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，属于生物医药技术领域，包括以下步骤：1)将淫羊藿用乙醇分别提取两次；2)合并滤液，浓缩得到浸膏；3)加乙醇脱除淫羊藿多糖，用乙酸乙酯分6次萃取；4)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩、过滤、烘干即得到淫羊藿甙。本发明的提取方法，工艺精简，原料淫羊藿来源广泛，成本低廉，提取制备过程环境友好，本发明为开发新型的淫羊藿甙保健品和药品开辟了广阔的市场。

Description

一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，具体涉及一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法。

背景技术

淫羊藿甙是来源于小檗科(Berberidaceae)淫羊藿属(Epimedium)植物的一种8-异戊烯基黄酮甙类化合物,研究表明它具有改善心脑血管系统功能、增强机体免疫力和促进DNA合成等生理活性。药理作用：淫羊藿苷能增加心脑血管血流量、促进造血功能、免疫功能及骨代谢，具有补肾壮阳、抗衰老、抗肿瘤等功效。1、对内分泌的作用：淫羊藿甙能促进性功能是由于精液分泌亢进，精囊充满后，刺激感觉神经，间接兴奋性欲而引起。2、对免疫系统功能的影响：肾虚病人T细胞数量、淋转率、抗体、抗原以及网状内皮系统吞噬功能低下，而经过淫羊藿等补肾药治疗均可提高。3、抗衰老作用：淫羊藿甙可以从不同方面影响衰老机制。如影响细胞传代，延长生长期，调节免疫和分泌系统，改善机体代谢和各器官功能。4、对心血管系统的作用：淫羊藿甙对垂体后叶素引起的大鼠心肌缺血有一定保护作用，具有明显的降压作用。

目前从淫羊藿中初分离淫羊藿甙的方法有两大类。一类是采用溶剂萃取的方法进行初分离,此法步骤较多,收率不高,而且有机溶剂的残留影响产品质量。另一类采用大孔吸附树脂来分离,但其技术关键都是传统的吸附-解吸工艺,未对过程进行检测,因此分辨率较低。由于大孔吸附树脂具有吸附性强、解吸容易、机械强度好、可反复使用和流体阻力小等优点,用大孔吸附树脂柱层析结合紫外在线检测来实现淫羊藿甙的初分离

淫羊藿甙是从淫羊藿中分离出的，分子式如下所示:

与淫羊藿补肾阳、强筋骨功效主治相关的药理作用为增强性腺功能、调节机体免疫功能、促进骨生长、延缓衰老等作用。淫羊藿还具有强心、降血压、抗心律失常、增加脑血流量、抑菌、抗病毒、抗炎、降血脂、抗肿瘤等多种作用，具有较高的药用和保健价值。但是，现在的开发研究还处于初级阶段，对淫羊藿有效成分的研究尚不够深入，且在宏观上观察到的药理作用的微观作用机制有待进一步研究。因此，要利用我国的淫羊藿资源优势，运用祖国传统医学经验与现代科学技术相结合，在其有效成分、制剂工艺、药理作用和临床应用等方面进行深入的研究，淫羊藿有可能成为具有良好开发前景的增强免疫功能和免疫调节、抗骨质疏松、治疗心脑血管疾病的药物，具有广阔的应用前景。

发明内容

本发明解决的问题在于提供一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，本方法原料来源广泛，成本低廉，操作简便，适合工业化大规模的生产需求。

本发明是通过以下技术方案来实现：

从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，包括以下步骤：

1)100kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，1500L20％乙醇提取第一次，1300L20％乙醇提取第二次，每次1.5h，煮沸提取，温度约90度，合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏96Kg；

2)加入200Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏57Kg，用乙酸乙酯500L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

3)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，得棕色固体1.8Kg，将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解；

4)冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末900g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末710g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

将干燥后的淫羊藿甙粉碎，过20目筛，得到淫羊藿甙粉。

步骤1)所述的提取温度为50度。

步骤2)所述滤液浓缩密度在1.12以上。

步骤3)所述的脱水剂为无水硫酸钠。

与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：

本发明从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，以乙醇作为溶剂体系，采用反复萃取方法使目标产物淫羊藿甙流出，提取得到浸膏后，再用乙酸乙酯分6次萃取，合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，对分离得到的淫羊藿甙粗品过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末。

本发明的提取方法，工艺精简，原料淫羊藿来源广泛，成本低廉，提取制备过程环境友好，通过本发明的方法简单、高效的获得了高纯度的淫羊藿甙，有望在药理作用和临床应用等方面进行深入的研究，淫羊藿有可能成为具有良好开发前景的增强免疫功能和免疫调节、抗骨质疏松、治疗心脑血管疾病的药物，具有广阔的应用前景。

具体实施方式

下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而不是限定。

实施例1

从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，包括以下步骤：

1)70kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，780L20％乙醇提取第一次，130L20％乙醇提取第二次，每次2h，煮沸提取，温度约90度，合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏56Kg；

2)加入100Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏36Kg，用乙酸乙酯500L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

4)冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末600g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末350g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

实施例2

从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，包括以下步骤：

1)80kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，1100L20％乙醇提取第一次，1200L20％乙醇提取第二次，每次1h，煮沸提取，温度约90度，合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏87Kg；

2)加入200Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏63Kg，用乙酸乙酯300L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

3)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，得棕色固体2.3Kg，将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解；

4)冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末650g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末280g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

实施例3

从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，包括以下步骤：

1)60kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，800L20％乙醇提取第一次，900L20％乙醇提取第二次，每次3h，煮沸提取，温度约90度，合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏62Kg；

2)加入200Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏46Kg，用乙酸乙酯300L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

3)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，得棕色固体0.9Kg，将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解；

4)冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末300g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末170g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

实施例4

从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，包括以下步骤：

1)950kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，1100L20％乙醇提取第一次，1200L20％乙醇提取第二次，每次1.5h，煮沸提取，温度约90度，合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏91Kg；

2)加入180Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏52Kg，用乙酸乙酯400L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

3)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，得棕色固体1.6Kg，将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解；

4)冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末1200g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末780g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

实施例5

从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，包括以下步骤：

1)500kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，720L20％乙醇提取第一次，8000L20％乙醇提取第二次，每次1.5h，煮沸提取，温度约90度，合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏50Kg；

2)加入200Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏36Kg，用乙酸乙酯500L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

3)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，得棕色固体1.0Kg，将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解；

4)冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末630g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末410g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

Claims

1.一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1)取100kg淫羊藿，淫羊藿甙含量1.0％，置于提取罐中，1500L20％乙醇提取第一次，1300L20％乙醇提取第二次，每次1.5h，煮沸提取，温度约90度；

2)合并滤液，浓缩至密度达到1.12，得浸膏96Kg；

3)加入200Kg乙醇醇沉后，脱除淫羊藿多糖，将滤液再次浓缩至密度为1.12以上，得浸膏57Kg，用乙酸乙酯500L分6次萃取所得浸膏，直至水相用TLC检测不到淫羊藿甙；

4)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干，得棕色固体1.8Kg，将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解，冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末900g，该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末710g，经测定为淫羊藿甙，含量高于98％。

2.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：将淫羊藿置于罐中，用1500L20％乙醇提取。

3.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：所述乙醇必须煮沸提取，温度约90度。

4.根据权利要求3所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：合并的滤液浓缩至密度达到1.12。

5.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：步骤1)得到的浸膏用乙酸乙酯分6次萃取，知道水相TLC检测不出。

6.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：步骤2)合并所有乙酸乙酯萃取液，用无水硫酸钠脱水后，浓缩至干。

7.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：步骤2)和步骤4)脱水后得到的是棕色的固体。

8.根据权利要求7所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：将该固体加入5L无水甲醇中煮沸溶解，冷却后过滤析出晶体，烘干的棕黄色粉末900g。

9.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：步骤3)该粉末再用60％乙醇重结晶得淡黄色结晶粉末。

10.根据权利要求1所述的一种从淫羊藿中分离淫羊藿甙的方法，其特征在于：步骤3)所得到的淫羊藿甙含量超过98％。