CN104043098A - 一种用于治疗妇女阴道炎的抗菌肽冻干制剂及制备方法 - Google Patents
一种用于治疗妇女阴道炎的抗菌肽冻干制剂及制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种治疗妇女阴道炎的冻干制剂,包括抗菌肽冻干粉和抗菌肽基本液,所述抗菌肽冻干粉包括如下按照总质量百分数计的组分:抗菌肽人β防御素0.1%-8%、低分子肝素钠0.01%-0.2%、稳定剂1%-15%,所述抗菌肽基本液包括如下按总质量百分数计的组分:透明质酸0.01%-0.4%,甲基丙二醇0.5%-4%,蜂蜜提取物0.5%-5%,PCA钠0.5%-5%,溶解蛋白酶0.5%-5%,1,2己二醇0.3%-0.7%,燕麦β葡聚糖1.5%-6%,大豆异黄酮1%-5%,余量为去离子水或注射用水。本发明的抗菌肽冻干制剂具有广谱抗菌活性,对细菌、真菌、病毒、原虫和癌细胞等具有很强的杀伤作用,甚至能提高免疫力,加速伤口愈合过程,治疗疗效显著,不反弹,无任何副作用。
Description
技术领域
本发明涉及医学领域,尤其涉及一种治疗妇女阴道炎的抗菌肽冻干制剂及其制备方法。
背景技术
在女性生殖道内广泛分布着人防御素,与女性天然免疫的防御机制有密切关系。对保证女性生殖系统在正常状态下维持生殖健康,抵抗各种外源病菌感染起重要的作用。正常情况下,女性阴道内存在多种微生物,这些微生物维持生殖道生理状态而不致发生感染,除了宫颈黏液栓屏障、阴道酸碱度等自净作用外,子宫内膜、宫颈、阴道广泛分布的防御素也同样起到重要作用。
现今社会由于环境污染和生活节奏加快等诸多原因,妇科疾病的患病率越来越高,年龄范围在逐步扩大,从未成年人到老年人不等且有逐年上升的趋势。虽说目前市场上治疗疾病的药物很多,但普遍的药物治疗效果却不显著,而且基本上都会出现治疗不彻底及出现反弹现象。给患者的生活,工作造成了诸多不便,更是给她们的身心健康带来极大的影响,然而现在很多药物都产生了细菌耐药问题。
发明内容
为了解决以上技术问题,本发明提供一种抗菌肽人源防御素。这种防御素不仅是新型高效的抗菌多肽,而且能调节机体免疫应答和炎症反应,调节组织创伤修复,具有特殊的生物学作用及天然免疫原性,其抗肿瘤、抗病毒、无耐药性等特点,对治疗女性生殖系统感染及肿瘤等疾病有着显著的疗效作用。
一种治疗妇女阴道炎的冻干制剂,所述抗菌肽冻干粉包括如下按照总质量百分数计的组分:抗菌肽人β防御素0.1%-8%、低分子肝素钠0.01%-0.2%、稳定剂1%-15%,所述抗菌肽基本液包括如下按总质量百分数计的组分:透明质酸0.01%-0.4%,甲基丙二醇0.5%-4%,蜂蜜提取物0.5%-5%,PCA钠0.5%-5%,溶解蛋白酶0.5%-5%,1,2己二醇0.3%-0.7%,燕麦β葡聚糖1.5%-6%,大豆异黄酮1%-5%,余量为去离子水或注射用水。
其中,透明质酸的HA分子量为150万-250万。
本发明治疗妇女阴道炎抗菌肽冻干制剂各组分的具体功效和相关原理为:
抗菌肽(人β防御素)具有广谱抗菌活性,对细菌、真菌、病毒、原虫和癌细胞等具有很强的杀伤作用,基于β-防御素的杀菌作用,可将其作为“超级”抗生素,发挥其强效的抗多种微生物感染的作用,甚至能提高免疫力,加速伤口愈合过程。
低分子肝素不仅有抗血栓作用,还有抗炎和抗过敏作用,可增加皮肤血管的通透性,改善局部血液循环,有利于营养供给和代谢废物的排泄,有良好的保健和养护作用。
优选的,所述抗菌肽人β防御素采用人β防御素-1、人β防御素-2、人β防御素-3、人β防御素-4中的一种或几种。
优选的,所述稳定剂采用冻干保护剂、抗氧化剂和酸碱调整剂的一种或多种。
优选的,所述冻干保护剂采用甘油、蔗糖、海藻糖、肌醇、葡聚糖、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮、甘氨酸中的一种或几种。
优选的,所述抗氧化剂采用维生素D、维生素E、维生素C、氨基酸、卵磷脂、蛋白质水解物、硫代硫酸钠、抗坏血酸钠蛋白质水解物中的一种或几种。
优选的,所述酸碱调整剂采用碳酸钠、磷酸、EDTA、柠檬酸钾、酒石酸、山梨酸、
氨基酸中的一种或几种。
优选的,所述酸碱调整剂的摩尔浓度为2-30mmol/L。
本发明还提供一种治疗妇女阴道炎冻干制剂的制备方法,包括如下步骤:
步骤A:采用注射级用水将抗菌肽冻干粉中各原料溶解混匀,过滤除菌后分装于洗净的西林瓶中,半加塞置于真空冷冻干燥机中,真空冷冻干燥15-35h,直至水分升华干燥完全,真空条件下压塞密封后扎盖包装,得到治疗妇女阴道炎冻干粉;
步骤B:使用注射级用水或去离子水将抗菌肽冻干粉中各原料溶解混匀,过滤除菌后分装、扎盖,得到治疗妇女阴道炎的基本液;
步骤C:将步骤A所得到的抗菌肽冻干粉与步骤B所得到的基本液混合。
优选的,所述步骤B中,所述真空冷冻干燥的工艺条件为:对制品进行预冻,使其温度降至-50℃,降温时间为4-8h,抽真空至0.3mbar,加热升华干燥,干燥时间为15-25h,直至制品中的水分升华完全。
优选的,步骤A中,滤膜的直径为0.22μm。
本发明治疗妇女阴道炎的试用方法为:将本发明的抗菌肽冻干粉和抗菌肽基本液混合溶解后,用于清洗外阴或使用器具导入阴道冲洗。
本发明提供一种通过基因工程技术从大肠杆菌中提取抗菌肽人β防御素,经过真空冷冻干燥技术制作而成的一款抗菌肽冻干制剂,可用于预防、治疗妇科炎症,且具有明显功效,不复发功能。
本发明治疗妇女阴道炎可用于细菌性、霉菌性、滴虫性、真菌性所引起的阴道炎、外阴瘙痒、异味具有很强的消炎止痒杀菌等疗效作用,保护妇女们的身心健康。
与现有技术相比,本发明具有如下有益效果:
本发明是通过基因工程技术从大肠杆菌中提取抗菌肽人β防御素,经过真空冷冻干燥技术制作而成的一款抗菌肽冻干制剂。本发明的抗菌肽冻干制剂具有广谱抗菌活性,对细菌、真菌、病毒、原虫和癌细胞等具有很强的杀伤作用,甚至能提高免疫力,加速伤口愈合过程,治疗疗效显著,不反弹,无任何副作用。同时利用真空冷冻干燥技术,在除去产品中绝大部分水分的同时也保护了所添加活性物质的稳定性,受污染的机会减小,这不仅方便了运输还延长了制品的保存期限。
具体实施方式
下面对本发明的较优的实施例作进一步的详细说明:
实施例1
冻干粉配置为:称取50g抗菌肽人β防御素、5g低分子肝素钠、600g稳定剂,加入10000ml注射级用水,混合均匀后过滤除菌,于3.2ml灌装于西林瓶中半加塞后放入真空冷冻干燥机上冻干15h。真空冷冻干燥的工艺条件为:对制品进行预冻,使其温度降至-50℃,降温时间为4h,抽真空至0.3mbar,加热升华干燥,干燥时间为15h,直至制品中的水分升华完全。
其中稳定剂配方为:200g甘氨酸、300g蛋白质水解物、100g(10mM)磷酸。
本发明基本液的配置为:
基本液配方:
上述配方溶解后过滤除菌,按15ml/瓶进行灌装、轧盖。使用时,将本发明的抗菌肽冻干粉和抗菌肽基本液混合溶解后,用于清洗外阴或使用器具导入阴道冲洗。
实施例2
本发明冻干粉配置为:
称取80g抗菌肽人β防御素、8g低分子肝素钠、500g稳定剂,加入10000ml注射级用水,混合均匀后过滤除菌,于3.2ml灌装于西林瓶中半加塞后放入真空冷冻干燥机上冻干25h。真空冷冻干燥的工艺条件为:对制品进行预冻,使其温度降至-50℃,降温时间为6h,抽真空至0.3mbar,加热升华干燥,干燥时间为20h,直至制品中的水分升华完全。
其中稳定剂配方为:150g海藻糖、200g硫代硫酸钠、150g(15mM)碳酸钠
本实施例中基本液的配置为:
基本液配方:
上述配方溶解后过滤除菌,按15ml/瓶进行灌装、轧盖。使用时,将本发明的抗菌肽冻干粉和抗菌肽基本液混合溶解后,用于清洗外阴或使用器具导入阴道冲洗。
实施例3
本发明冻干粉配置为:
称取100g抗菌肽、5g低分子肝素钠、500g稳定剂,加入10000ml注射级用水,混合均匀后过滤除菌,于3.2ml灌装于西林瓶中半加塞后放入真空冷冻干燥机上冻干35h。真空冷冻干燥的工艺条件为:对制品进行预冻,使其温度降至-50℃,降温时间为8h,抽真空至0.3mbar,加热升华干燥,干燥时间为25h,直至制品中的水分升华完全。
其中稳定剂配方为:200g蔗糖、200g维生素D、100g(10mM)柠檬酸钾
本实施例基本液的配置为:
基本液配方:
上述配方溶解后过滤除菌,按15ml/瓶进行灌装、轧盖。使用时,将本发明的抗菌肽冻干粉和抗菌肽基本液混合溶解后,用于清洗外阴或用使器具导入阴道冲洗。
本发明实施例中所使用到的原料、仪器、设备及辅助工具均可从市场上购得。
本发明的抗菌肽制剂实验方案及结果如下:
1.平板涂布抑菌试验
将金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞杆菌培养在营养肉汁液体培养基中,于37℃摇床培养16.5h;白色念珠菌培养在改良马丁液体培养基中,于28℃培养16.5h以上,收集细胞并将用于测试中。
将本发明的冻干粉及基本液溶解后,向96孔板中加入190ul,未加本发明成品的为空白对照,再分别取10ul菌悬液加入上述各孔,然后将96孔板放入28℃培养3h。
取出96孔板,分别从各孔中取100ul菌液用PB溶液稀释浓度为1×10-5,然后取100ul涂布到对应编号平板,于37℃培养24h,白色念珠菌于28℃培养48h,并对所产生的菌落进行计数。
表1-1实施例1所得到的产品通过平板涂布法抑菌实验结果
表1-2实施例2所得到的产品通过平板涂布法抑菌实验结果
表1-3实施例3所得到的产品通过平板涂布法抑菌实验结果
由表1中可以看出本发明的治疗妇女阴道炎冻干粉具有很强的抗菌功效,而空白对照组基本没有产生抗菌作用。
2.临床抗菌消炎试验
本发明的治疗妇科炎症冻干粉,对细菌性、霉菌性、滴虫性、真菌性所引起的阴道炎、外阴瘙痒、异味等使用效果如下:
表2-1实施例1产品的临床抗菌消炎试验
治疗项目 | 例数 | 治愈例数 | 显著例数 | 好转例数 | 无效例数 | 有效率 |
阴道炎 | 25 | 21 | 2 | 1 | 1 | 98% |
外阴瘙痒 | 22 | 20 | 2 | / | / | 100% |
异味 | 28 | 22 | 6 | / | / | 100% |
表2-2实施例2产品的临床抗菌消炎试验
治疗项目 | 例数 | 治愈例数 | 显著例数 | 好转例数 | 无效例数 | 有效率 |
阴道炎 | 30 | 25 | 4 | 1 | / | 100% |
外阴瘙痒 | 20 | 19 | 1 | / | / | 100% |
异味 | 25 | 22 | 3 | / | / | 100% |
表2-3实施例3产品的临床抗菌消炎试验
治疗项目 | 例数 | 治愈例数 | 显著例数 | 好转例数 | 无效例数 | 有效率 |
阴道炎 | 20 | 17 | 2 | 1 | / | 98% |
外阴瘙痒 | 25 | 23 | 2 | / | / | 100% |
异味 | 30 | 26 | 4 | / | / | 100% |
由表2结果中可看出本发明的治疗妇科炎症冻干粉具有很强的抗菌消炎止痒作用,且患者在治疗过程中均无不良反应。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明,不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明构思的前提下,还可以做出若干简单推演或替换,都应当视为属于本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种治疗妇女阴道炎的冻干制剂,其特征在于,包括抗菌肽冻干粉和抗菌肽基本液,所述抗菌肽冻干粉包括如下按照总质量百分数计的组分:抗菌肽人β防御素 0.1%-8%、低分子肝素钠 0.01%-0.2%、稳定剂1%-15%,所述抗菌肽基本液包括如下按总质量百分数计的组分:透明质酸0.01%-0.4%,甲基丙二醇0.5%-4%,蜂蜜提取物 0.5%-5%,PCA钠0.5%-5%, 溶解蛋白酶0.5%-5%,1,2己二醇0.3%-0.7%,燕麦β葡聚糖1.5%-6%,大豆异黄酮1%-5%,余量为去离子水或注射用水。
2.如权利要求1所述的治疗妇女阴道炎冻干制剂,其特征在于所述抗菌肽人β防御素采用人β防御素-1、人β防御素-2、人β防御素-3和人β防御素-4中的一种或几种。
3.如权利要求1所述的治疗妇女阴道炎冻干制剂,其特征在于,所述稳定剂采用冻干保护剂、抗氧化剂和酸碱调整剂的一种或多种。
4.如权利要求1所述的治疗妇女阴道炎冻干制剂,其特征在于,所述冻干保护剂采用甘油、蔗糖、海藻糖、肌醇、葡聚糖、乳糖、聚乙烯吡咯烷酮和甘氨酸中的一种或几种。
5.如权利要求1所述的治疗妇女阴道炎冻干制剂,其特征在于,所述抗氧化剂采用维生素D、维生素E、维生素C、氨基酸、卵磷脂、蛋白质水解物、硫代硫酸钠、抗坏血酸钠和蛋白质水解物中的一种或几种。
6.根据权利要求1所述的治疗妇女阴道炎冻干制剂,其特征在于,所述酸碱调整剂采用碳酸钠、磷酸、EDTA、柠檬酸钾、酒石酸、山梨酸、氨基酸中的一种或几种。
7.如权利要求3所述的治疗妇女阴道炎冻干制剂,其特征在于,所述酸碱调整剂的摩尔浓度为2-30mmol/L。
8.如权利要求1所述治疗妇女阴道炎冻干制剂的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤A:采用注射级用水将抗菌肽冻干粉中各原料溶解混匀,过滤除菌后分装于洗净的西林瓶中,半加塞置于真空冷冻干燥机中,真空冷冻干燥15-35h,直至水分升华干燥完全,真空条件下压塞密封后扎盖包装,得到治疗妇女阴道炎的抗菌肽冻干粉;
步骤B:使用注射级用水或去离子水将抗菌肽冻干粉中各原料溶解混匀,过滤除菌后分装、扎盖,得到治疗妇女阴道炎的基本液;
步骤C:将步骤A所得到的抗菌肽冻干粉与步骤B所得到的基本液混合。
9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,所述步骤B中,所述真空冷冻干燥的工艺条件为:对制品进行预冻,使其温度降至-50℃,降温时间为4-8h,抽真空至0.3mbar,加热升华干燥,干燥时间为15-25h,直至制品中的水分升华完全。
10.如权利要求8所述的方法,其特征在于,步骤A 中,滤膜的直径为0.22μm。
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Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
C12 | Rejection of a patent application after its publication | ||
RJ01 | Rejection of invention patent application after publication |
Application publication date: 20140917 |