CN104039948A - 细胞捕获器件 - Google Patents

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上原寿茂
铃木崇裕
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Tokyo University of Agriculture
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Abstract

本发明提供在不分解器件的情况下能够对捕获至过滤器上的细胞进行观察的细胞捕获器件。所述细胞捕获器件具备筐体(120)和过滤器(105)，所述筐体(120)具有连接有供细胞分散液流入的流入管(125)的流入口(130)和连接有供细胞分散液流出的流出管(135)的流出口(140)，所述过滤器(105)配置于筐体(120)内，且具有对细胞分散液中含有的癌细胞进行捕获的捕获区域，过滤器(105)与筐体(120)接合，捕获区域的至少一部分成为用于从外部观察所述捕获区域的观察区域，流入管(125)及流入口(130)配置于在从过滤器(105)的法线方向观察时比观察区域更靠外侧的位置上，流入管(125)沿着过滤器(105)的面内方向延伸。

Description

细胞捕获器件
技术领域
本发明涉及对细胞分散液中含有的癌细胞进行捕获的细胞捕获器件。
背景技术
癌症在世界各国中占据死因的前列，在日本每年有30万人以上因癌而死亡，期待其的早期发现和治疗。因癌症导致的人的死亡大多是因癌症的转移复发所导致的。癌症的转移复发是因癌细胞从原始病灶经由血管或淋巴管扎根并浸润在其他脏器组织的血管壁上、形成微小转移病灶而引起的。这种经过血管或淋巴管的在人体内循环的癌细胞被称作血中循环癌细胞(Circulating Tumor Cell，以下根据情况称作“CTC”)。
血液中含有大量红细胞、白细胞及血小板等血细胞成分，其个数在1mL血液中据说有3.5～9×109个。其中CTC仅存在几个左右。为了有效地从血细胞成分中检测出CTC，需要对血细胞成分进行分离，观察和测定是非常困难的。
由于通过CTC的检测可期待癌症的早期发现等，因此进行了各种各样的研究。例如，在专利文献1中记载了利用具有微细贯通孔的Parylene制过滤器对含有癌细胞的细胞分散液进行过滤来捕获癌细胞(CTC)，从而有效地进行检测。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第2010/135603号
发明内容
发明要解决的技术问题
CTC等癌细胞与血液中的血细胞、例如红细胞或白细胞或者血小板等相比，尺寸大一圈。因此，理论上来说可以应用机械过滤法将这些血细胞成分除去以对癌细胞进行富集。
但是，组装有文献1所记载的过滤器的器件在上下突出有供细胞分散液流入的流入管及供流出的流出管。因此，流入管或流出管变成障碍，有时无法将显微镜的物镜移动至过滤器的观察位置。另外，有时难以将器件直接固定在显微镜的台座上。
另外，即便抛开上述问题，专利文献1的器件由于是利用刚性低的聚二甲基硅氧烷(PDMS)夹持Parylene制的树脂过滤器来进行固定的方式，因此在将过滤器安装于器件中时，无法获得过滤器的平坦度，当利用显微镜等进行直接观察时，观察时焦点深度发生偏离，需要在每个对象视野都调整焦点，有时操作效率降低。
由以上可知，对于专利文献1的器件，为了对捕获CTC之后的过滤器进行观察，需要对器件进行分解来将过滤器取出。因此，有时来自操作气体环境的灰尘等会对所取出的过滤器造成污染而发生误判。另外，在器件的分解中，由于有可能被各种病原菌或病毒污染，且附着有人来源样品的器件内部露出，因此有时确保操作安全性是很复杂的。另外，由于过滤器是极薄的膜，因此有时其处理复杂。
本发明鉴于上述问题点而完成，其目的在于提供在不分解器件的情况下能够对捕获至过滤器上的细胞进行观察的细胞捕获器件。
用于解决技术问题的手段
本发明提供一种细胞捕获器件，其具备筐体和过滤器，所述筐体具有连接有供细胞分散液流入的流入管的流入口和连接有供细胞分散液流出的流出管的流出口；所述过滤器配置于所述筐体内，且具有对细胞分散液中含有的癌细胞进行捕获的捕获区域，其中，过滤器与筐体接合，捕获区域的至少一部分成为用于从外部观察所述捕获区域的观察区域，流入管及流入口配置于在从过滤器的法线方向观察时比观察区域更靠外侧的位置上，流入管沿着过滤器的面内方向延伸。
根据上述本发明的细胞捕获器件，可以在不分解器件的情况下直接固定在显微镜的台座上来对捕获在过滤器上的细胞进行观察。另外，由于过滤器通过接合牢固地固定在筐体上，因此能够以更高的压力对细胞分散液进行过滤。由此，可以提高CTC的回收效率。另外，通过将过滤器接合于器件的筐体上，可以使器件内的过滤器变得平坦。由此，在显微镜观察时能够使焦点深度变得恒定，可以消除在每个对象视野都调整焦点的繁琐。
流入管及流入口也可以配置于在从过滤器的法线方向观察时比捕获区域更靠外侧的位置上。
由此，可以确保更广的观察区域，可以提高CTC的检测精度。
过滤器优选实质上是平坦的。由此，在显微镜观察时可以使焦点深度变得恒定，可以消除在每个对象视野都调整焦点的繁琐。
过滤器优选由金属构成。由此，可以减少血细胞成分的残存，能够以高捕获率将CTC富集。这里，残存是指细胞不通过过滤器而残留在过滤器上。金属由于加工性优异，因此能够提高过滤器的加工精度。由此，可以减少血细胞成分的残存，实现CTC的高捕获率。
另外，由于金属与塑料等其他材料比是刚直的，因此即便从外部施加力也会维持其尺寸或形状。因此，可以认为会使比过滤器的孔(贯通孔)大一些的血液成分(特别是白细胞)变形而使其通过，可以进行高精度的分离和富集。白细胞中存在具有与CTC同等程度的尺寸的细胞，有时仅通过尺寸的差异是无法以高精度仅将CTC区分出来的。但是，白细胞由于比癌细胞的变形能力大，因此通过利用抽吸或加压等的外部力量，可以通过比其本身小的孔，从而能够与CTC分离。
另外，通过使过滤器的材质为金属，可获得很高的刚性，因此固定在筐体上时可以施加规定的张力。因而，容易在过滤器不产生皱褶或松弛的情况下维持平滑的过滤器面，容易确保过滤器的平坦性。
筐体的至少一部分优选在可见光区域下实质上是透明的。由此，可以在不分解器件的情况下从外部对过滤器上的捕获区域进行观察。另外，由于无需将过滤器从器件中取出，因此可以防止因尘埃等对过滤器的污染所导致的误判。另外，由于无需使可能会被各种病原菌或病毒污染的、附着有人来源样品的器件内部露出，因此可以减少确保操作安全性时的繁琐。另外，可以减少对作为极薄的膜的过滤器进行处理操作时的繁琐。
发明效果
通过本发明，可以提供在不分解器件的情况下能够对捕获在过滤器上的细胞进行观察的细胞捕获器件。
附图说明
图1为表示细胞捕获器件的一个实施方式的立体图。
图2为图1的II-II线截面图。
图3为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。
图4为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。
图5(A)及(B)为分别表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。
图6为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。
图7(A)为表示过滤器的一个实施方式的概略图，图7(B)为一个实施方式的过滤器的贯通孔的俯视图。
具体实施方式
以下一边参照附图一边详细地说明本发明的细胞捕获器件的优选实施方式，但本发明并非限定于这些。
图1为表示本实施的细胞捕获器件的一个实施方式的立体图。图2为图1的II-II线截面图。
如图1和图2所示，细胞捕获器件100具备筐体120和过滤器105，所述筐体120具有连接有供细胞分散液流入的流入管125的流入口130和连接有供细胞分散液流出的流出管135的流出口140，所述过滤器105配置于筐体120内，且具有对细胞分散液中含有的癌细胞进行捕获的捕获区域，捕获区域的至少一部分成为用于从外部观察所述捕获区域的观察区域145，流入管125及流入口130配置于在从过滤器105的法线方向观察时比观察区域145更靠外侧的位置上，流入管125沿着过滤器105的面内方向延伸。
这里，面内方向是指过滤器105的面内的所有方向，是过滤器105的面上的二维的全部方向。本说明书中“沿着面内方向”是指相对于面内方向成小于60°的角度的方向、优选相对于面内方向成小于45°的角度的方向、更优选相对于面内方向成小于30°的角度的方向。流入管125及流入口130配置于在从过滤器105的法线方向观察时比观察区域145更靠外侧的位置上，通过流入管125沿着过滤器105的面内方向延伸，当从细胞捕获器件100的外部透过面160对过滤器105上的观察区域145进行显微镜观察时，由于不存在成为观察障碍的结构物，因此可以在不分解细胞捕获器件的情况下进行观察。
另一方面，下部构件115具备流出管135及流出口140。流出管135由于配置在下部构件115的侧面上，因此在对观察区域145进行显微镜观察时，可以将细胞捕获器件100直接稳定地固定在显微镜的台座上。
对于过滤器105，在接合区域155处，上部构件110及下部构件115接合在一起。作为接合方法，优选熔融粘接。熔融粘接是指通过高温将材料本身熔化而将它们直接结合。熔融粘接有时也被称作熔接、热粘接、热封。作为熔融粘接方法，可举出热熔融粘接、超声波熔融粘接、高频熔融粘接等。通过热或超声波等的处理对过滤器105的周围进行熔融粘接、固定，能以施加没有皱褶或松弛的张力的平坦状态配置过滤器105。由此，对过滤器105进行显微镜观察时的焦点深度变得恒定，因此在捕获至过滤器上的细胞的利用显微镜或放大镜进行的观察中，无需频繁地进行焦点的调整，可以有效地检测CTC。
本实施方式中，上部构件110、过滤器105及下部构件115分别通过熔融粘接而接合。因此，可以确实地获得筐体120的气密性，可以确保使细胞分散液流入到细胞捕获器件100内时的高液体密封性。另外，利用熔融粘接进行的接合由于能够在短时间内进行接合处理，因此生产率也优异。
另外，作为上部构件110及下部构件115的材料，通过选择刚性高的材料，可以抑制接合过滤器105时的因加压或热所导致的变形。这里，材料的刚性例如可以用杨氏模量来表示。作为上部构件110及下部构件115的材料，优选以杨氏模量计为0.1GPa以上的材料，更优选以杨氏模量计为1GPa以上的材料。
作为除熔融粘接以外的接合方法，可以举出利用粘接剂涂布的方法。但是，在利用粘接剂的接合中，有时难以进行优选的接合。例如，当粘接剂的涂布量过少时，粘接剂不会遍及到所需位置的整体上。因此，无法进行完全的接合，会从上部构件110与下部构件115之间发生漏液。相反地，当粘接剂的涂布量过多时，粘接剂会超过所需位置的范围被涂布，有可能会堵塞过滤器105的贯通孔。另外，粘接剂的涂布及固化需要时间，有时细胞捕获器件100的生产率会降低。
过滤器105的捕获区域是指在将过滤器105配置于筐体内的状态下能够对细胞进行捕获的区域。过滤器105可以在其整个面上存在贯通孔，也可仅在中央部分存在贯通孔。例如，当仅在中央部分存在贯通孔时，能够捕获细胞的区域是过滤器105的贯通孔所存在的中央部分。另外，当在过滤器105的整个面上存在贯通孔时，过滤器与筐体120的接合区域155由于无法捕获细胞，因此捕获区域是从过滤器105的整个面中除去了接合区域155之后的区域。捕获区域的至少一部分是观察区域145，在捕获至捕获区域内的细胞中，以捕获至观察区域145内的细胞作为观察对象。
筐体120由上部构件110及下部构件115构成。筐体120的形状可以是长方体或圆筒等，并无特别限定。上部构件110的面160及下部构件115的面170优选是平坦的且是相互平行的，特别优选面160是平滑的。由此，容易将细胞捕获器件100直接固定在显微镜的台座上，容易从细胞捕获器件100的外部透过面160对过滤器105上的观察区域145进行显微镜观察。
被下部构件115的内壁150及过滤器105包围的空间是空洞，在该空间内不存在支撑过滤器的支撑体等结构物。因此，不会妨碍通过过滤器105的细胞分散液的流路，将细胞分散液通过过滤器105时的阻力抑制在最小限，可以均匀地通过过滤器105。由此，可以抑制细胞捕获性能的不均或局部的堵塞，可以发挥稳定的捕获性能。
上部构件110由对于在检测CTC时所用波长的光实质上为透明的材料构成。作为上部构件110的材料，可举出玻璃、石英玻璃、丙烯酸树脂、聚二甲基硅氧烷等高分子，但并非限定于这些。在一个实施方式中，上部构件110及下部构件115两者均由上述材料构成。上部构件110和下部构件115并不一定是相同的材料，但从接合处理的容易性的观点出发，优选为相同的材料。作为上部构件110及下部构件115的材料，从可以进行器件的批量生产的方面出发，优选低自身荧光性的丙烯酸树脂，特别优选聚甲基丙烯酸甲酯。一般来说，在观察癌细胞等时，在对成为对象的细胞利用荧光试剂进行染色处理之后，照射波长为300～800nm的紫外光或可见光区域的光来进行荧光观察。因此，上部构件110优选选择在照射上述波长区域的光时材料本身所发出的自身荧光低的材料(低自身荧光性)。一般来说，具有芳香环的有机高分子、例如聚苯乙烯、聚碳酸酯等树脂的自身荧光性强，多不适于上述目的。
接着，对本发明的细胞捕获器件的变形例进行说明。
图3为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。在细胞捕获器件200中，在下部构件215上设置供保持过滤器205的高度差(台阶)。过滤器205嵌入到该高度差部分中，在接合区域255处通过熔融粘接与下部构件215接合。对于其他方面，与细胞捕获器件100相同。
图4为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。在细胞捕获器件300中，在下部构件315的内壁350上带有朝向流出口340的倾斜。由此，可以提高通过了过滤器305的细胞分散液的收集性，防止液体积存。下部构件315的内壁350的倾斜并非限定于直线，例如还可以为圆弧状。对于其他方面，与细胞捕获器件100相同。
图5(A)为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。在细胞捕获器件400中，在过滤器405及下部构件415之间设置有衬垫480。对于其他方面，与细胞捕获器件100相同。
图5(B)为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。在细胞捕获器件401中，过滤器405接合于下部构件415。进而，在过滤器405及上部构件410之间设置有衬垫480。对于其他方面，与细胞捕获器件100相同。
衬垫480可以作为上部构件410、下部构件415及过滤器405之间的耐流体用密封垫来使用。通过设置衬垫480，可以更为可靠地防止细胞分散液从过滤器405的外周部泄漏。使用O形环代替衬垫480也可期待同样的效果。
衬垫480优选由具有弹性的材料构成。作为衬垫480的材料，例如可举出热塑性树脂、橡胶、弹性体等。
图6为表示细胞捕获器件的一个实施方式的截面图。在细胞捕获器件500中，流入管525配置于上部构件510的侧面、即在从过滤器505的法线方向观察时比捕获区域更靠外侧的位置上。就该构成而言，在从细胞捕获器件500的外部透过面560对过滤器505上的观察区域545进行显微镜观察时，不存在成为观察障碍的结构物。因此，可以更广地设定观察区域545，最大可以扩展至与过滤器505的捕获区域相同的区域。另外，流出管535配置于下部构件515的侧面。对于其他方面，与细胞捕获器件100相同。
接着，对过滤器进行说明。
图7(A)为表示过滤器的一个实施方式的概略图。过滤器600由形成有多个贯通孔610的基板620构成，CTC被捕获至面630的表面。贯通孔610的配置可以是图7(A)那样的整列配置，也可以是每列配置错开的锯齿配置，还可以是任意配置的无规配置。
图7(B)是过滤器600的贯通孔610的俯视图。贯通孔610的开口形状是半径为c的2个半圆形与短边为a、长边为b的长方形的短边相邻地结合而成的形状。在一个实施方式中，a、b、c分别为8、37及4μm。
在一个实施方式中，作为过滤器的基板620的材质，可举出木棉、麻等天然高分子、尼龙、聚酯、聚丙烯腈、聚烯烃、卤化聚烯烃、聚氨酯、聚酰胺、聚砜、聚醚砜、聚(甲基)丙烯酸酯、卤化聚烯烃乙烯-聚乙烯醇共聚物、丁二烯-丙烯腈共聚物等合成高分子或它们的混合物。另外，还可例示出金属、陶瓷及它们的复合材料等。
在一个实施方式中，过滤器的基板620的材质为金属。作为金属，可例示出金、银等贵金属、铜、铝、钨、镍、铬等贱金属、及这些金属的合金，但并非限定于这些。金属可以以单质进行使用，也可以为了赋予功能性而作为与其他金属的合金或金属的氧化物进行使用。更优选使用以难以受到氧化或腐蚀的影响的镍或不锈钢、钛为主成分的金属。这里，主成分是指在形成上述基板的材料中占50重量％以上的成分。可以使用光刻法等方法在这些金属上形成贯通孔。
作为贯通孔的开口形状，可例示出圆、楕圆、长方形、圆角长方形、多边形等。从能够效率良好地捕获癌细胞的观点出发，优选圆、长方形或圆角长方形。另外，从防止过滤器堵塞的观点出发，特别优选长方形或圆角长方形。
一般的CTC的大小是直径为10μm以上。这里，细胞的直径是指在利用显微镜观察时连接细胞轮廓上的任意2点的直线中最长直线的长度。因此，从血细胞成分的透过性和CTC的捕获性能的观点出发，贯通孔的平均孔径优选为5～15μm、更优选为6～12μm、特别优选为7～10μm。本说明书中，开口形状为楕圆、长方形、多边形等圆以外的形状时的孔径是指能够通过各个贯通孔的球的直径的最大值。贯通孔的孔径例如在开口形状为长方形时，为该长方形的短边的长度，在开口形状为多边形时，为该多边形的内切圆的直径。开口形状为长方形或圆角长方形时，即便CTC或白细胞被捕获至贯通孔时，在开口部中，在开口形状的长边方向上产生间隙。通过该间隙，液体能够通过，因此可以防止过滤器的堵塞。
过滤器的贯通孔的平均开口率优选为0.1～50％、更优选为0.5～40％、特别优选为1～30％、最优选为1～10％。这里，开口率是指贯通孔在过滤器整个面积中所占的面积。平均开口率从防止堵塞的观点出发，越大越优选，但超过50％时，有时过滤器的强度会降低、加工变得困难。另外，当小于0.1％时，容易发生堵塞，因此有时过滤器的癌细胞捕获性能会降低。
过滤器的基板的厚度优选为3～100μm、更优选为5～50μm、特别优选为10～30μm。基板的厚度薄于3μm时，有时过滤器的强度会降低、处理变得困难。另外，当基板的厚度超过100μm时，由于消耗了比所需更多的材料、加工需要花费很长时间，因此有时对成本不利，或精密加工其本身变得困难。
过滤器表面的平坦度还取决于观察所使用的显微镜的倍率，优选以JISB0601-2001中规定的Rz(最大高度粗糙度)计为10μm以下。
接着，说明本实施方式的过滤器的制造方法。过滤器的制造方法并无特别限定，例如可举出利用光刻法实施刻蚀或电镀的制造方法。以下说明利用了光刻法等的制造方法。首先，在由不锈钢等构成的支撑体上粘贴感光性的抗蚀膜(感光层)。接着，在感光层上固定具有过滤器的贯通孔的开口形状图案的掩模。接着，从掩模上照射光(活性光线)。光照射后，在感光层上有支撑体时，将其除去，通过利用碱性水溶液、水系显影液及有机溶剂等显影液的湿式显影或者干式显影等将未曝光部除去来进行显影，形成抗蚀图案。接着，以显影得到的抗蚀图案作为掩模，在未被遮掩而露出的基板上进行镀覆。作为镀覆的方法，例如可举出镀铜、镀钎焊、镀镍、镀金等。镀覆处理后，将镀覆层从支撑体及感光层上剥离，即获得镀覆层。该镀覆层即为过滤器。也可对所得过滤器的表面进行粗糙化处理。作为粗糙化处理的方法，可举出利用酸性或碱性水溶液等的化学刻蚀、喷砂等物理处理等。
接着，对细胞捕获器件的使用方法进行说明。
作为细胞分散液，可利用储备在骨髓、脾脏、肝脏等中的血液、淋巴、组织液、脐带血等，最简单的是使用在体内循环的末梢血。检测末梢血中的CTC的存在是判断癌症的病情发展的有用手段。
在检测细胞分散液中有无CTC的存在时，向细胞捕获器件的流入管中导入细胞分散液，在过滤器上将含有CTC的细胞富集，确认所富集的细胞中是否存在CTC即可。细胞分散液向流入管内的导入可例示出利用加压或减压的方法、使用蠕动泵的方法等。另外，过滤器的捕获区域的面积在例如从1mL的血液中富集CTC时适合的是0.25～10cm2。
利用上述方法对CTC进行富集时，不仅CTC被富集，白细胞等血细胞也同时被富集。因此，需要确认在所回收的细胞中是否含有癌原发病灶来源的上皮细胞。例如，在利用上述方法对CTC进行富集之后，利用针对进行了荧光标记的上皮细胞标记物的抗体进行染色，可以确认是上皮细胞。作为针对上皮细胞标记物的抗体，可例示出抗Cytokeratin抗体等。
富集后的细胞的染色及观察例如可如下进行。将抗Cytokeratin抗体溶液导入至富集细胞之后的细胞捕获器件的流入管中，静置规定时间。接着，将洗涤用的缓冲液导入至细胞捕获器件的流入管中，将未反应的抗体洗涤除去。接着，将细胞捕获器件直接固定在显微镜的台座上，进行荧光显微镜观察。在将抗体溶液导入至细胞捕获器件之前，还可导入用于抑制抗体的非特异性反应的封闭用缓冲液。
另外，还可以通过将利用上述方法富集的细胞回收、对基因进行解析，来确认是癌细胞。细胞的回收例如可如下进行：从细胞捕获器件的流出管侧导入缓冲液，从流入管侧进行回收。例如对p53、K-RAS、H-RAS、N-RAS、BRAF、APC等基因中的突变进行解析，可以确认是癌细胞。另外，这些基因解析的结果还可用于之后的患者治疗方针的决定等。或者，通过测定利用上述方法富集的细胞的端粒酶活性等，也可确认是癌细胞。
在细胞分散液中有无CTC的存在的检测结束后，也可以通过从细胞捕获器件的流出管侧导入洗涤缓冲液、从流入管侧排出，将被过滤器捕获的细胞洗涤除去，从而对细胞捕获器件进行再利用。
符号说明
100、200、300、400、401、500 细胞捕获器件、
105、205、305、405、505、600 过滤器、
110、210、310、410、510 上部构件、
115、215、315、415、515 下部构件、
120、220、320、420、520 筐体、
125、225、325、425、525 流入管、
130、230、330、430、530 流入口、
135、235、335、435、535 流出管、
140、240、340、440、550 流出口、
145、245、345、445、545 观察区域、
150、250、350、450、550 下部构件的内壁、
155、255、355、455、555 接合区域、
160、170、260、270、360、370、460、470、560、570、630 面、
480 衬垫、
610 贯通孔、
620 基板、
a 短边、
b 长边、
c 半径。
权利要求书(按照条约第19条的修改)
1.(修改后)一种细胞捕获器件，其具备筐体和过滤器，所述筐体具有上部构件和下部构件，所述上部构件具备连接有供细胞分散液流入的流入管的流入口，所述下部构件具备连接有供所述细胞分散液流出的流出管的流出口；所述过滤器配置于所述筐体内，且具有对所述细胞分散液中含有的癌细胞进行捕获的捕获区域，
其中，所述过滤器与所述筐体接合，
所述捕获区域的至少一部分成为用于从外部观察所述捕获区域的观察区域，
所述流入管及所述流入口配置于在从所述过滤器的法线方向观察时比所述观察区域更靠外侧的位置上，
所述流入管沿着所述过滤器的面内方向延伸。
2.根据权利要求1所述的细胞捕获器件，其中，所述流入管及所述流入口配置于在从所述过滤器的法线方向观察时比所述捕获区域更靠外侧的位置上。
3.根据权利要求1或2所述的细胞捕获器件，其中，所述过滤器实质上是平坦的。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的细胞捕获器件，其中，所述过滤器由金属构成。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的细胞捕获器件，其中，所述筐体的至少一部分在可见光区域下实质上是透明的。
6.(追加)根据权利要求1～5中任一项所述的细胞捕获器件，其中，所述上述构件与所述下部构件通过熔融粘接而接合。
说明或声明(按照条约第19条的修改)
在权利要求1中，明确了筐体具有“具备连接有流入管的流入口的上部构件”和“具备连接有流出管的流出口的下部构件”这一特征。根据修改后的权利要求1的发明，由于过滤器通过接合牢固地固定在筐体上，因此发挥出可以在高压力下对细胞分散液进行过滤这一效果。
在权利要求6中，明确了“上部构件与下部构件通过熔融粘接而接合”这一特征。根据修改后的权利要求6的发明，发挥出可以可靠地获得筐体的气密性、可以在不使用密封构件等的情况下确保细胞捕获器件内的高液体密封性这一效果。

Claims (5)

1.一种细胞捕获器件，其具备筐体和过滤器，所述筐体具有连接有供细胞分散液流入的流入管的流入口和连接有供所述细胞分散液流出的流出管的流出口；所述过滤器配置于所述筐体内，且具有对所述细胞分散液中含有的癌细胞进行捕获的捕获区域，
其中，所述过滤器与所述筐体接合，
所述捕获区域的至少一部分成为用于从外部观察所述捕获区域的观察区域，
所述流入管及所述流入口配置于在从所述过滤器的法线方向观察时比所述观察区域更靠外侧的位置上，
所述流入管沿着所述过滤器的面内方向延伸。
2.根据权利要求1所述的细胞捕获器件，其中，所述流入管及所述流入口配置于在从所述过滤器的法线方向观察时比所述捕获区域更靠外侧的位置上。
3.根据权利要求1或2所述的细胞捕获器件，其中，所述过滤器实质上是平坦的。
4.根据权利要求1～3中任一项所述的细胞捕获器件，其中，所述过滤器由金属构成。
5.根据权利要求1～4中任一项所述的细胞捕获器件，其中，所述筐体的至少一部分在可见光区域下实质上是透明的。
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