CN104027352A - 一种鹿茸寡肽肠溶微囊的制备及应用 - Google Patents
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Abstract
一种鹿茸寡肽肠溶微囊的制备及应用，属于医药领域，解决了鹿茸物质基础不明的科学技术问题。包括以下步骤：取干燥的梅花鹿茸进行乙醇或水或缓冲液闪提，过滤药渣，得提取液，超滤，得分子量小于1K的药液，脱盐并冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉。将冻干粉加入到丙烯酸树脂II的乙醇溶液中，加适量蓖麻油后，在磁力搅拌器中搅拌均匀，最后喷雾干燥，得鹿茸寡肽肠溶微囊。本发明的有益效果是对鹿茸总寡肽进行了液质分析，鉴定了三个寡肽的氨基酸序列，并对其进行了肾阳虚大鼠实验，从而证明了其有显著的壮阳作用。将其开发为疗效确切、无毒副作用的治疗肾阳虚证的五类中药新药“鹿茸寡肽肠溶微囊”，将具有广阔的开发前景。
Description
技术领域
本发明属于从梅花鹿茸中提取制备总寡肽的技术方法领域，特别是涉及到该提取物的壮阳功能，和在治疗肾阳虚证的应用。
背景技术
鹿茸为传统壮阳名贵中药，在我国更多的是应用鹿茸来治疗男性性功能减退疾病，从组方到鹿茸提取物都有涉及。经常利用鹿茸与人参、雄蚕娥、菟丝子、熟地黄等中药进行配伍，经动物实验表明这些组方通过多种途径达到促进正常动物性器官发育和修复受损睾丸生精细胞的作用；一些临床实验也证明鹿茸组方具有补肾壮阳、改善性功能的作用。除组方外，鹿茸单方及其提取液对性器官的发育、性激素的分泌及性功能的改善也有较好的疗效。田育璋等对健康成年wistar大鼠饲以鹿茸乙醇提取液后，大鼠睾丸精原细胞数目增多，生精细胞层数增多，一定程度上反映了体内睾酮含量的增多。何刚等的实验证明，鹿茸多肽能使雄鼠血浆中和细胞培养液中黄体生成素含量增多，并呈明显的量效关系；在体实验中，鹿茸多肽也能使雄鼠血浆中睾酮含量增多。因此，不论从传统中医理论还是现代研究结果均表明应用鹿茸壮阳生精功效治疗肾阳虚致性功能减退具有重要的现实意义。
综上所述,在现有技术当中亟需要一种新的药品来治疗男性性功能减退类疾病问题。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是：本发明提供了一种从梅花鹿茸中提取、制备总寡肽的方法，以及该提取物的壮阳功能，和在治疗肾阳虚证的应用。
一种鹿茸寡肽肠溶微囊的制备，其特征是：
步骤一、将梅花鹿茸于干燥箱中进行干燥脱去水分，将干燥后的梅花鹿茸粉碎，粉碎的细度为100目～300目；
步骤二、采用浓度为10％～90％的乙醇对干燥鹿茸进行闪提，滤去药渣，取得提取液；
步骤三、将步骤二中取得的提取液进行超滤操作，首先采用过滤膜孔径为10K的超滤膜进行过滤，以便于去除提取液中的蛋白质，然后再采用过滤膜孔径为1K的超滤膜进行过滤，得到分子量在小于1K区间内的药液；
步骤四、将步骤三中的药液脱盐并冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉；
步骤五、鹿茸寡肽肠溶微囊的制备
将步骤四中取得的鹿茸总寡肽冻干粉，加入到浓度为2％-5％的丙烯酸树脂II乙醇溶液中，获得鹿茸总寡肽冻干粉的丙烯酸树脂II乙醇溶液；
步骤六、向步骤五中获得的溶液里添加占该溶液体积10％～20％的蓖麻油，并在磁力搅拌器中搅拌均匀；
步骤七、将步骤六中搅拌均匀的溶液进行喷雾和干燥操作，最后获得得鹿茸寡肽肠溶微囊。
所述的步骤二中采用水或缓冲液(Tris-HCl)对干燥鹿茸进行闪提。
鹿茸寡肽肠溶微囊中的三个寡肽具有壮阳功能，将该鹿茸寡肽肠溶微囊用于治疗肾阳虚证。
所述的鹿茸寡肽肠溶微囊中具有壮阳功能的三个寡肽为
其一为2HN-Met-His-Leu-COOH；
其二为2HN-Cys-Ala-Val-COOH；
其三为2HN-Tyr-Asn-COOH；
所述的鹿茸寡肽肠溶微囊中具有壮阳功能的三个寡肽，采用液质联用分析法获得其中三个寡肽的氨基酸序列。
通过上述设计方案，本发明可以带来如下有益效果：本发明通过梅花鹿茸对治疗肾阳虚大鼠实验研究，鉴定了三个寡肽的氨基酸序列，并对其进行了肾阳虚大鼠实验，从而证明了其有显著的壮阳作用。
以梅花鹿茸为研究对象，应用肌肉注射氢化可的松诱发肾阳虚大鼠模型，进行了它们壮阳生精作用的实验研究，结果其醇提物和水体物均具有促进性腺、附性腺的生长作用，而且在整体动物上是通过提高垂体中LH及睾丸间质细胞cAMP的水平，最终促进T的分泌而发挥药效的。
对梅花鹿茸总寡肽进行了液质联用分析，并确定了其中三个寡肽的氨基酸序列(1:2HN-Met-His-Leu-COOH；2:2HN-Cys-Ala-Val-COOH；3:2HN-Tyr-Asn-COOH；)。
本发明的有益效果是对鹿茸总寡肽进行了液质分析，鉴定了三个寡肽的氨基酸序列，并对其进行了肾阳虚大鼠实验，从而证明了其有显著的壮阳作用。将其开发为疗效确切、无毒副作用的治疗肾阳虚证的五类中药新药“鹿茸寡肽肠溶微囊”，将具有广阔的开发前景。
梅花鹿茸壮阳生精作用的实验数据表：
附图说明
下面结合附图说明和具体实施方式对本发明作进一步说明：
图1为本发明的梅花鹿茸总寡肽液质联用分析图。
图2为本发明的梅花鹿茸对肾阳虚模型大鼠血清中的T、LH和cAMP水平的影响示意图一。
图3为本发明的梅花鹿茸对肾阳虚模型大鼠血清中的T、LH和cAMP水平的影响示意图二。
图4为本发明的梅花鹿茸对肾阳虚模型大鼠血清中的T、LH和cAMP水平的影响示意图三。
具体实施方式
实施例1：干燥鹿茸1kg粉碎成粗粉，用60％乙醇进行闪提，过滤药渣，得到提取液，将提取液过膜孔径为10K超滤膜进行超滤，然后再过膜孔径为1K的超滤膜，得到分子量为小于1K的药液，冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉。将冻干粉加入到丙烯酸树脂II的乙醇溶液中，加适量蓖麻油后，在磁力搅拌器中搅拌均匀，最后喷雾干燥，得鹿茸寡肽肠溶微囊。
实施例2：干燥鹿茸1kg粉碎成粗粉，用70％乙醇进行闪提，过滤药渣，得到提取液，将提取液过膜孔径为10K超滤膜进行超滤，然后再过膜孔径为1K的超滤膜，得到分子量为小于1K的药液，冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉。将冻干粉加入到丙烯酸树脂II的乙醇溶液中，加适量蓖麻油后，在磁力搅拌器中搅拌均匀，最后喷雾干燥，得鹿茸寡肽肠溶微囊。
实施例3：干燥鹿茸1kg粉碎成粗粉，用80％乙醇进行闪提，过滤药渣，得到提取液，将提取液过膜孔径为10K超滤膜进行超滤，然后再过膜孔径为1K的超滤膜，得到分子量为小于1K的药液，冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉。将冻干粉加入到丙烯酸树脂II的乙醇溶液中，加适量蓖麻油后，在磁力搅拌器中搅拌均匀，最后喷雾干燥，得鹿茸寡肽肠溶微囊。
实施例4：干燥鹿茸1kg粉碎成粗粉，用蒸馏水进行闪提，过滤药渣，得到提取液，将提取液过膜孔径为10K超滤膜进行超滤，然后再过膜孔径为1K的超滤膜，得到分子量为小于1K的药液，冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉。将冻干粉加入到丙烯酸树脂II的乙醇溶液中，加适量蓖麻油后，在磁力搅拌器中搅拌均匀，最后喷雾干燥，得鹿茸寡肽肠溶微囊。
实施例5：干燥鹿茸1kg粉碎成粗粉，用缓冲盐进行闪提，过滤药渣，得到提取液，将提取液过膜孔径为10K超滤膜进行超滤，然后再过膜孔径为1K的超滤膜，得到分子量为小于1K的药液，脱盐并冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉。将冻干粉加入到丙烯酸树脂II的乙醇溶液中，加适量蓖麻油后，在磁力搅拌器中搅拌均匀，最后喷雾干燥，得鹿茸寡肽肠溶微囊。
Claims (5)
1.一种鹿茸寡肽肠溶微囊的制备，其特征是：
步骤一、将梅花鹿茸于干燥箱中进行干燥脱去水分，将干燥后的梅花鹿茸粉碎，粉碎的细度为100目～300目；
步骤二、采用浓度为10％～90％的乙醇对干燥鹿茸进行闪提，滤去药渣，取得提取液；
步骤三、将步骤二中取得的提取液进行超滤操作，首先采用过滤膜孔径为10K的超滤膜进行过滤，以便于去除提取液中的蛋白质，然后再采用过滤膜孔径为1K的超滤膜进行过滤，得到分子量在小于1K区间内的药液；
步骤四、将步骤三中的药液脱盐并冻干，得鹿茸总寡肽冻干粉；
步骤五、鹿茸寡肽肠溶微囊的制备
将步骤四中取得的鹿茸总寡肽冻干粉，加入到浓度为2％-5％的丙烯酸树脂II乙醇溶液中，获得鹿茸总寡肽冻干粉的丙烯酸树脂II乙醇溶液；
步骤六、向步骤五中获得的溶液里添加占该溶液体积10％～20％的蓖麻油，并在磁力搅拌器中搅拌均匀；
步骤七、将步骤六中搅拌均匀的溶液进行喷雾和干燥操作，最后获得得鹿茸寡肽肠溶微囊。
2.根据权利要求1所述的一种鹿茸寡肽肠溶微囊的制备，其特征是：所述的步骤二中采用水或缓冲液Tris-HCl对干燥鹿茸进行闪提。
3.鹿茸寡肽肠溶微囊的应用，其特征是：鹿茸寡肽肠溶微囊中的三个寡肽具有壮阳功能，将该鹿茸寡肽肠溶微囊用于治疗肾阳虚证。
4.根据权利要求3所述的鹿茸寡肽肠溶微囊的应用，其特征是：所述的鹿茸寡肽肠溶微囊中具有壮阳功能的三个寡肽为
其一为2HN-Met-His-Leu-COOH；
其二为2HN-Cys-Ala-Val-COOH；
其三为2HN-Tyr-Asn-COOH。
5.根据权利要求3所述的鹿茸寡肽肠溶微囊的应用，其特征是：所述的鹿茸寡肽肠溶微囊中具有壮阳功能的三个寡肽，采用液质联用分析法获得其中三个寡肽的氨基酸序列。
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2014
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Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 刘善奎等: "丙烯酸树脂系列辅料在药物新剂型中的应用", 《药学实践杂志》 * |
| 吴梧桐主编: "《生物制药工艺学》", 30 April 2013 * |
| 王华等: "鹿茸寡肽的制备及其促成骨细胞的增殖作用", 《高等学校化学学报》 * |
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