CN104013696B - 一种防治代谢综合征的植物药组合物及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种防治代谢综合征的植物药组合物及其应用。所述的植物药组合物，是由海棠果配伍中药材黄芪、葛根、桑白皮为原料，经乙醇水溶液或水回流提取得到。实验结果表明：本发明提供的植物药组合物对代谢综合征相关疾病尤其是肥胖、糖尿病、高脂血症、动脉粥样硬化及脂肪肝具有显著的防治作用，且作用效果明显优于每单味药和由黄芪、葛根配伍桑白皮形成的组合物，四味药材的配伍产生了明显协同增效作用，是一种高效低毒防治代谢综合征相关疾病的天然植物药方；并且，所述的植物药组合物的制备工艺经济、简便，适用于工业化大规模生产，具有显著的临床应用价值。

Description

一种防治代谢综合征的植物药组合物及其应用

技术领域

本发明涉及一种防治代谢综合征的植物药组合物及其应用。

背景技术

代谢综合征，是一种合并有高血压以及葡萄糖与脂质代谢异常的综合征。伴有低密度脂蛋白升高和高密度脂蛋白胆固醇降低。其常见的症状为肥胖、糖尿病、高脂血症、动脉粥样硬化。

高脂血症包括高胆固醇血症、高甘油三脂血症及二者都高的复合性高脂血症。高胆固醇是导致动脉粥样硬化症，进而导致冠心病和脑中风；而高甘油三酯血症则与肥胖症、脂肪肝及II型糖尿病等疾病的发生密切相关。

代谢综合征最初的发病原因为肥胖和体重增加。目前市场的减肥药大多数都因会引起严重的不良反应和药效较差而相继退市或遭限用，因此，用药的安全性与有效性则是首要考虑因素。

天然植物来源的中药或药食两用植物的安全性比西药具有明显的优势。传统医学中虽没有对代谢综合征的记载，但中医药治疗糖尿病(消渴)历史悠久。黄芪、葛根均为治疗消渴病(糖尿病)的经典药物。黄芪，味甘、性温、乃补气之圣药。其治疗糖尿病基本病机为阴虚燥热。古今中医治疗本病，大多以黄芪为君药。有人对古今治疗糖尿病的方剂进行统计分析，发现黄芪的应用频率非常高。其有效成分黄芪多糖具有降血糖、抗肿瘤、增加机体免疫力等作用。葛根，据《本草纲目》中记载“性甘、辛、平、无毒，主治：消渴、身大热、呕吐、诸弊，起阴气，解诸毒”。葛根单独治疗消渴的记录较少，现代药理学研究，葛根中所含葛根素具有降糖、改善胰岛素抵抗、降血脂、扩血管等作用。本发明的发明人曾发现黄芪、葛根配伍桑白皮具有防治代谢综合征的作用(详见中国专利申请：201210197052.3，所述组合物简记为AMP-1915)。

海棠果又名楸子、海红，为蔷薇科苹果属植物的果实，品种繁多，广泛分布于我国大部分地区。由于其味道特别，多数需经过烹制处理后食用。传统应用是将海棠果酿酒、做蜜饯，做果酱、果醋、果酒、果丹皮，或制成海棠干，作为清凉泻火、健脾开胃的休闲食品。中国专利CN201010152792.6公开了一种水溶性海棠果多酚作为功能性饮料和化妆品添加剂，发挥抗氧化作用的报道。目前，未见海棠果对代谢综合征具有活性作用的报道，更未见海棠果与黄芪、葛根、桑白皮的配伍使用以用于防治代谢综合征的相关报道。

发明内容

本发明的目的是提供一种防治代谢综合征的植物药组合物及其应用，为防治代谢综合征相关疾病提供一种高效低毒的药物制剂或保健食品。

本发明所述的防治代谢综合征的植物药组合物，是由海棠果配伍中药材黄芪、葛根、桑白皮为原料，经乙醇水溶液或水回流提取得到。

作为优选方案，海棠果与黄芪、葛根、桑白皮的质量配比为1:1:1:1或2:1:1:1。

作为优选方案，所述的提取工艺为：按配比取新鲜的海棠果和干燥的黄芪、葛根、桑白皮，粉碎，过5～20目筛；加入乙醇水溶液或水，进行回流提取2～3次，每次1～5小时，合并提取液，减压浓缩。

作为进一步优选方案，所述的乙醇水溶液的体积百分比浓度为50％～95％。

作为进一步优选方案，每次提取时，1克药材使用6～10毫升的乙醇水溶液或水。

所述的防治代谢综合征的植物药组合物可作为活性成分用于制备预防或/和治疗代谢综合征相关疾病的药物制剂或保健食品。

所述的代谢综合征相关疾病包括但不限于肥胖、糖尿病、高脂血症、动脉粥样硬化及脂肪肝。

本发明中所述的药物制剂包括：颗粒剂、胶囊剂、注射剂、酊剂、口服液、片剂、口含剂、冲剂、丸剂、散剂等常见剂型或纳米制剂等缓释剂型。

实验结果表明：本发明提供的植物药组合物对代谢综合征相关疾病尤其是肥胖、糖尿病、高脂血症、动脉粥样硬化及脂肪肝具有显著的防治作用，且作用效果明显优于每单味药和由黄芪、葛根配伍桑白皮形成的组合物，四味药材的配伍产生了明显协同增效作用，是一种高效低毒防治代谢综合征相关疾病的天然植物药方；并且，所述的植物药组合物的制备工艺经济、简便，适用于工业化大规模生产，具有显著的临床应用价值。

附图说明

图1体现了本发明所述的植物药组合物对LDLR^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响；

图2体现了本发明所述的植物药组合物对肥胖小鼠肝脏中的甘油三酯含量的影响；

图3体现了本发明所述的植物药组合物对肥胖小鼠肝脏中的胆固醇含量的影响。

图中：*表示与阳性模型组比较，p<0.05。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步详细、完整地说明，但并不因此限制本发明；本领域的技术人员根据下述内容所作的一些非本质的改进或替换均属于本发明的保护范围。

实施例中所用的海棠果产自吉林长春，下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件或按照制造厂商所建议的条件。

实施例1

取新鲜海棠果、干燥黄芪、葛根饮片、桑白皮饮片各200g，粉碎，过5～20目筛；加入体积百分比浓度为50％的乙醇水溶液6L，进行回流提取2小时，过滤；向滤渣中加入体积百分比浓度为95％的乙醇水溶液6L，进行再次回流提取2小时，过滤；合并两次提取液，减压浓缩，得到约150g本发明所述的植物药组合物浸膏。

向上述浸膏中加入糊精，喷雾干燥使成细粉，可制成粉剂或干法制粒成颗粒剂；或向上述细粉中加入羟甲基淀粉钠、微粉硅胶、可溶性淀粉、乳糖、硬脂酸镁等，混合均匀后，以95％乙醇制颗粒剂或80℃干燥后压片剂；或向上述细粉中加入适量微粉硅胶，混匀后，装入胶囊，制成胶囊剂；或将上述部分细粉加入枸橼酸、淀粉制成颗粒，其余细粉加入碳酸氢钠、淀粉制成颗粒，向两种颗粒中加入硬脂酸镁后，再混合均匀，压片；或向上述浸膏中，加入适量体积百分比浓度为50％～85％的乙醇水溶液进行溶解，然后用水稀释至其中的乙醇量符合规定，静置，待澄清，滤过，制成酊剂等。

实施例2

取新鲜海棠果400g、干燥黄芪、葛根饮片、桑白皮饮片各200g，粉碎，过5～20目筛；加入8L水，进行回流提取2小时，过滤；向滤渣中加入8L水，进行再次回流提取2小时，过滤；合并两次提取液，适量浓缩，得到本发明所述的植物药组合物汤剂。

上述汤剂可通过醇沉、过滤等工艺加工成口服液。

对比例1

取新鲜海棠果800g，粉碎，过5～20目筛；加入体积百分比浓度为50％的乙醇水溶液6L，进行回流提取2小时，过滤；向滤渣中加入体积百分比浓度为95％的乙醇水溶液6L，进行再次回流提取2小时，过滤；合并两次提取液，减压浓缩，得到海棠果提取物。

对比例2

取干燥黄芪、葛根饮片、桑白皮饮片各200g，粉碎，过5～20目筛；加入体积百分比浓度为50％的乙醇水溶液6L，进行回流提取2小时，过滤；向滤渣中加入体积百分比浓度为95％的乙醇水溶液6L，进行再次回流提取2小时，过滤；合并两次提取液，减压浓缩，得到AMP-1915组合物。

实施例3

3.1实验目的：考察本发明所述的植物药组合物对高脂餐诱导的肥胖小鼠的代谢综合征的治疗作用

3.2实验方法

3.2.1动物模型的制备

取C57BL/6小鼠高脂饲料诱导3个月后，测空腹血糖和体重，较阴性对照组(喂食低脂饲料)均有明显的提高，证明造模成功。

3.2.2实验分组

C57BL/6雌性小鼠，42只，自造模之日起，根据体重随机分为2组，阴性对照组7只(低脂)，造模组35只。造模3个月后，将造模组随机分为5组：阳性模型组(高脂)，植物药组合物1治疗组、植物药组合物2治疗组、海棠果提取物治疗组及AMP-1915组合物治疗组，每组各7只。

3.2.3给药

给予低脂饲料于阴性对照组，高脂饲料于阳性模型组，将按1wt％配比分别混有植物药组合物1(由实施例1制得)、植物药组合物2(由实施例2制得)、海棠果提取物(由对比例1制得)、AMP-1915组合物(由对比例2制得)的高脂饲料给予相应的治疗组。小鼠自由进食，饮水，治疗期2至6周。

3.2.4体重观察

每2～3天测量小鼠体重和进食量，结果如表1所示。

表1治疗前后小鼠体重变化

*表示与阳性模型组比较，p<0.05。

3.2.5葡萄糖耐受试验(IPGTT)实验

治疗结束后，使小鼠禁食12小时，然后测量空腹血糖，之后腹腔注射胰岛素(1g/kg)，观察IPGTT指数的变化。于注射后15min、30min、60min、90min测量小鼠血糖，测试结果见表2所示。

表2小鼠空腹血糖和IPGTT水平

*表示与阳性模型组比较，p<0.05。

3.2.6血脂四项测试

IPGTT实验结束后2～3天，使小鼠禁食12小时后取血。血液离心，取上层血清，供血脂四项测试使用，测试结果如表3所示。

表3.治疗后小鼠血清中血脂四项变化

	甘油三酯	胆固醇	HDL-c	LDL-c
					阴性对照组	0.37±0.06*	2.78±0.10*	2.08±0.11*	0.63±0.08*
阳性模型组	0.58±0.02	4.15±0.14	3.30±0.12	0.78±0.04
					植物药组合物1组	0.41±0.04*	2.78±0.30*	1.93±0.24*	0.68±0.06*
植物药组合物2组	0.44±0.03*	2.97±0.15*	2.13±0.19*	0.67±0.05*
					海棠果提取物组	0.55±0.06	3.01±0.23*	2.77±0.26*	0.71±0.03*
AMP-1915组合物组	0.48±0.04*	3.16±0.17*	2.54±0.16*	0.70±0.05*

*表示与阳性模型组比较，p<0.05

3.3实验结果

实验结果显示：高脂餐诱导的阳性模型组小鼠体重明显增加，而植物药组合物1组、植物药组合物2组和AMP-1915组合物组虽喂食高脂饲料，但体重却有所下降，在治疗结束时，与阳性模型组呈显著性差异(详见表1所示)。说明本发明所述的植物药组合物不但能够抑制由高脂餐引起的小鼠体重的增加，更具有减肥的作用，且作用效果优于每单味药，且优于黄芪、葛根配伍桑白皮的组合物(AMP-1915)。另外，可能水提取物中糖类成分多于醇提取物，因此植物药组合物2组的减肥效果较植物药组合物1组效果差，但仍具有显著降低体重的作用。而单独喂食海棠果提取物不能够对小鼠体重产生抑制作用，体重增长与阳性模型组相当，说明单味海棠果本身没有减肥的作用。但通过上述四味药材的配伍，产生了明显协同增效的作用。

治疗结束后，植物药组合物1组、2组、AMP-1915组合物组小鼠的空腹血糖显著低于阳性模型组，接近阴性对照组(低脂组)水平(见表2)，相较而言，植物药组合物1组降血糖作用更为显著，而单味海棠果没有降血糖的作用；通过IPGTT实验发现，腹腔注射葡萄糖后，15min～90min时，阳性模型组(高脂组)血糖明显上升，而4组给药组除海棠果提取物组以外血糖上升趋势平缓且与阳性模型组呈显著性差异。说明本发明所述的植物药组合物不仅具有降血糖的作用，而且能够有效增加小鼠葡萄糖耐量能力，且作用效果优于每单味药，且优于黄芪、葛根配伍桑白皮的组合物(AMP-1915)，四味药材的配伍产生了明显协同增效的作用。

通过对小鼠血清中甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白(HDL-c)和低密度脂蛋白(LDL-c)含量的检测，发现一直喂食高脂餐能够使小鼠产生明显的高脂血症，而给药组小鼠的血脂水平均较阳性模型组低(详见表3所示)，尤其是小鼠的胆固醇，与阴性对照组(低脂组)相当，并且高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇均得到显著改善；AMP-1915组合物具有较好的降脂作用，但作用效果较本发明所述的植物药组合物弱；而单味海棠果则体现出较好的降胆固醇的作用，但作用效果仍然弱于本发明所述的植物药组合物；说明本发明所述的植物药组合物不仅能够有效治疗高脂餐引起的高脂血症，尤其是高胆固醇血症，而且作用效果优于每单味药，且优于黄芪、葛根配伍桑白皮的组合物(AMP-1915)。结果显示海棠果具有降低胆固醇但不能降低甘油三酯的作用，而通过配伍形成的本发明所述的植物药组合物体现了全面降血脂的作用，说明四味药材的配伍产生了明显协同增效的作用。

3.4实验结论

本发明所述的植物药组合物能够显著降低由高脂餐引起的肥胖、高血糖、提高小鼠葡萄糖耐受能力，并且对高脂血症，尤其是高胆固醇血症具有明显疗效。进一步证明本发明所述的植物药组合物能够有效治疗代谢综合征。

实施例4

4.1实验目的：考察本发明所述的植物药组合物对高脂餐诱导的肥胖小鼠的代谢综合征的预防作用

4.2实验方法

4.2.1动物模型

C57BL/6雌性小鼠，适应性饲养3天后，根据体重随机分组，每组7只。此时小鼠并未出现代谢综合征症状。

4.2.2实验分组

C57BL/6雌性小鼠，42只，根据体重随机分为6组：阴性对照组(低脂组)、阳性模型组(高脂组)、植物药组合物1给药组、植物药组合物2给药组、海棠果提取物给药组和AMP-1915组合物给药组。

4.2.3动物实验

给予低脂饲料于阴性对照组，高脂饲料于阳性模型组，将按1wt％配比分别混有植物药组合物1(由实施例1制得)、植物药组合物2(由实施例2制得)、海棠果提取物(由对比例1制得)、AMP-1915组合物(由对比例2制得)的高脂饲料给予相应的给药组。小鼠自由进食，饮水，治疗期为45天。

4.2.4体重观察

每2～3天测量小鼠体重，测试结果如表4所示。

表4.给药前后小鼠体重变化

*表示与阳性模型组比较，p<0.05

4.2.5IPGTT实验

治疗结束后，使小鼠禁食12小时，测量空腹血糖，之后腹腔注射胰岛素(1g/kg)，观察IPGTT指数的变化。于15min、30min、60min、90min测量小鼠血糖，测试结果如表5所示。

表5小鼠空腹血糖和IPGTT水平

*表示与阳性模型组比较，p<0.05。

4.2.6血脂四项测试

IPGTT实验结束后2～3天，使小鼠禁食12小时后取血。血液离心，取上层血清，供血脂四项测试使用，测试结果如表6所示。

表6.给药后小鼠血清中血脂四项变化

	甘油三酯	胆固醇	HDL-c	LDL-c
					阴性对照组	0.49±0.08*	2.54±0.18*	1.89±0.17*	0.77±0.19*
阳性模型组	0.71±0.09	3.78±0.12	2.53±0.22	1.10±0.09
					植物药组合物1组	0.52±0.04*	2.61±0.08*	2.01±0.11*	0.69±0.11*
植物药组合物2组	0.57±0.05*	2.70±0.10*	2.10±0.13*	0.59±0.17*
					海棠果提取物组	0.68±0.04	2.85±0.07*	2.32±0.15	0.63±0.09*
AMP-1915组合物组	0.55±0.07*	2.97±0.15*	2.05±0.16*	0.78±0.07*

*表示与阳性模型组比较，p<0.05

4.3实验结果

通过为期45天的预防实验发现：高脂餐诱导的阳性模型组小鼠体重明显增加，而植物药组合物给药组虽喂食高脂饲料，但体重却有所下降，在预防给药结束时，已与阳性对照组的平均体重产生显著性差异(详见表4所示)，AMP-1915组合物给药组虽然对小鼠体重的增长也有一定的抑制作用，但抑制作用效果没有植物药组合物显著；而单味海棠果则对小鼠体重没有影响。说明本发明所述的植物药组合物不但能够抑制由高脂餐引起的小鼠体重的增加，且作用效果优于每单味药，且优于黄芪、葛根配伍桑白皮的组合物(AMP-1915)，四味药材的配伍产生了明显协同增效的作用。

通过测量空腹血糖发现：植物药组合物1、2组和AMP-1915给药组均能够显著降低由高脂餐诱导的小鼠空腹血糖(详见表5所示)，但两给药组之间无显著差异。在注射葡萄糖后15～90min时，与阳性模型组相比，植物药组合物显著降低了每个时间点的血糖，而AMP-1915组合物在60min时血糖虽有下降，但与阳性模型组相比没有统计学差异。且从幅度上可以看出，植物药组合物1组对小鼠葡萄糖耐量的能力要优于AMP-1915组合物组，植物药组合物2组对血糖的影响较弱于1组，可能与提取溶剂相关。而单味海棠果则对血糖没有效果。说明本发明所述的植物药组合物具有比单味海棠果和AMP-1915组合物更为显著的降糖预防效果。

通过对小鼠血清中甘油三酯、胆固醇、高密度脂蛋白(HDL-c)和低密度脂蛋白(LDL-c)含量的检测，发现一直喂食高脂餐能够使小鼠产生明显的高脂血症，但通过给药，小鼠的血脂均有所改善，尤其是小鼠的胆固醇；特别是，植物药组合物对降低小鼠胆固醇的能力明显优于单味海棠果和AMP-1915组合物，四味药材的配伍产生了明显协同增效的作用(详见表6所示)。

4.4实验结论

本发明所述的植物药组合物具有比单味海棠果和AMP-1915组合物更加卓越的减肥、降糖、降脂的作用，尤其在降低胆固醇方面的作用更加显著。进一步证明本发明所述的植物药组合物具有有效预防代谢综合征的作用。

实施例5

5.1实验目的：观察本发明所述的植物药组合物对LDLR^-/-小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响。

5.2实验方法

LDLR^-/-小鼠是低密度脂蛋白受体突变小鼠，是动脉粥样硬化模型中常用的小鼠系之一。通过喂食高脂饮食，小鼠在3个月左右时间会在动脉中产生动脉粥样硬化斑块。

取LDLR^-/-小鼠36只，每组6只，随机分六组：阴性对照组(低脂组)、阳性模型组(高脂组)、植物药组合物1给药组、植物药组合物2给药组、海棠果提取物给药组和AMP-1915组合物给药组。

给予低脂饲料于阴性对照组，高脂饲料于阳性模型组，将按1wt％配比分别混有植物药组合物1(由实施例1制得)、植物药组合物2(由实施例2制得)、海棠果提取物(由对比例1制得)、AMP-1915组合物(由对比例2制得)的高脂饲料给予相应的给药组。小鼠自由进食，饮水，治疗期为3个月。

期间记录体重、摄食。实验技术后，小鼠心脏灌流，福尔马林固定后，解剖取主动脉弓-胸主动脉-腹主动脉，油红染色。油红与动脉粥样硬化斑块结合呈红色，统计小鼠动脉部分油红阳性面积，分析药物作用对小鼠动脉粥样硬化斑块形成的影响。

5.3实验结果

如图1所示：喂食高脂餐的小鼠主动脉弓部分形成明显的动脉粥样硬化斑块面积显著高于各给药组，且本发明所述的植物药组合物的抑制作用效果最为明显，动脉硬化斑块面积较其他各组均小，AMP-1915组合物虽然也能够降低动脉粥样硬化斑块形成的面积，但较植物药组合物大。而单味海棠果的抑制作用在各给药组中相对最弱，但与阳性模型组仍具有统计学差异。说明本发明所述的植物药组合物明显降低了动脉粥样硬化斑块形成的面积。

5.4实验结论

本发明所述的植物药组合物能显著降低小鼠动脉粥样硬化形成面积，具有防治动脉粥样硬化形成作用，且作用效果明显优于单味海棠果和AMP-1915组合物，四味药材的配伍产生了明显协同增效的作用。

实施例6

6.1实验目的：观察本发明所述的植物药组合物对高脂餐诱导肥胖小鼠脂肪肝的作用

6.2实验方法

取实施例3实验后的各组小鼠的肝脏约100g，超声粉碎后进行氯仿提取肝脏中甘油三酯和胆固醇，测定其含量，因胆固醇和甘油三酯含量与脂肪肝程度正相关。

6.3实验结果

与阴性对照组(低脂组)相比，高脂餐诱导肥胖小鼠的肝脏中含有大量甘油三酯和胆固醇，说明肝脏脂质代谢紊乱，已经产生严重的脂肪肝。如图2所示，单味海棠果、植物药组合物和AMP-1915组合物均能够显著降低肝脏中甘油三酯，但植物药组合物的作用更为显著。但对于肝脏中胆固醇含量，植物药组合物和海棠果均具有降低肝脏胆固醇含量的作用，而AMP-1915组合物对肝脏中胆固醇的作用并不明显(详见图3所示)。综上，本发明所述的植物药组合物能够显著降低肝脏中的胆固醇和甘油三酯含量，而单味海棠果或AMP-1915组合物都不能产生如此明显而全面的作用。

6.4实验结论

本发明所述的植物药组合物能够显著降低由高脂餐引起的小鼠肝脏中甘油三酯和胆固醇的含量，能够防治脂肪肝。且这一作用明显优于单味海棠果和AMP-1915组合物，四味药材的配伍产生了明显协同增效的作用。

Claims (4)

1.一种植物药组合物的应用，其特征在于：所述的植物药组合物是由海棠果配伍中药材黄芪、葛根、桑白皮为原料，经乙醇水溶液或水回流提取得到；所述应用是以所述的植物药组合物作为唯一活性成分用于制备预防或/和治疗肥胖的药物制剂；且所述的植物药组合物中，海棠果与黄芪、葛根、桑白皮的质量配比为1:1:1:1或2:1:1:1。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的提取工艺为：按配比取新鲜的海棠果和干燥的黄芪、葛根、桑白皮，粉碎，过5～20目筛；加入乙醇水溶液或水，进行回流提取2～3次，每次1～5小时，合并提取液，减压浓缩。

3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述的乙醇水溶液的体积百分比浓度为50％～95％。

4.如权利要求2所述的应用，其特征在于：每次提取时，1克药材使用6～10毫升的乙醇水溶液或水。