CN105920198B - 一种具有补血功效的细胞破壁微粉及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有补血功效的细胞破壁微粉，它是由下述重量配比的原料组成：龙眼肉2.4～3.6份、桑椹1.6～2.4份、枸杞子1.6～2.4份、覆盆子1.6～2.4份；其中，所述原料经粉碎，粒径为0.1～100μm。本发明根据中医理论合理配方，既补先天之肾，又补后天之脾；既补心、肝之血，又补肝肾之阴，且寒热平调，气血阴阳兼顾，且补益同时兼顾固涩，加强了补益的力量。功效实验表明，本发明龙眼肉、桑椹、枸杞子和覆盆子四味原料协同增效，可发挥显著的补血作用。另外，该四种原料均为药食同源的原材料，可进一步开发成具有补血功效的食品或保健品，具有广阔的市场前景。
Description
技术领域
本发明涉及一种具有补血功效的细胞破壁微粉及其制备方法，属于医药领域。
背景技术
血虚属于中医病证范畴，是指血液不足、血的营养和滋润功能减退，以致脏腑经络、形体器官等失养的病理状态，临床上以面色淡白或萎黄、毛发不泽、唇舌爪甲淡白、头晕、视物昏花、怔仲、心悸、健忘、失眠、乏力等为主要表现。血虚证在西医病种分布上，不仅见于贫血，还可见于其他疾病，如冠心病、神经官能症、病毒性心肌炎等等。
现代研究证实，血虚可导致骨髓造血功能及外周血红细胞含量和功能的减退、免疫功能下降、机体清除自由基能力降低，甚至出现多种激素分泌的紊乱、影响生育能力等严重后果，危害极大(郭平等.血虚证病理研究进展[J].山东中医杂志，2006，25(9)：643～645)。由于血虚的发病机制复杂，常伴随多个系统、器官的病理变化，现有治疗手段大多效果不佳，有的药物还具有明显的不良反应。比如，对于缺铁性贫血，目前临床上常给予铁制剂进行治疗；然而，人体摄入的铁大部分难以得到充分利用，只有少量能被机体吸收并发挥生理功效，再加上铁制剂往往具有肠胃道刺激作用，更加阻碍了药物的吸收，治疗贫血效果甚微。
因此，提供一种具有显著的补血功效，且无明显毒副作用的药物、保健品或食品，成为了一个亟待解决的问题。
细胞级微粉技术是将现代粉体工程的超细粉碎(或称微粉碎、超微粉碎)技术与以植物药、动物药为主的中药相结合，以打破中药材细胞为目的的粉碎作业。经细胞级微粉碎作业所获得的中药微粉称为细胞级中药微粉，以细胞级中药微粉为基础制作出的中药，称之为细胞级微粉中药，简称微粉中药。
龙眼肉为无患子科植物龙眼Dimocarpus longan Lour.的假种皮。其味甘性温，归心、脾经。具有补益心脾，养血安神之功效，常用于气血不足，心悸怔忡，健忘失眠，血虚萎黄。龙眼肉中主要含有葡萄糖(27％)、酒石酸(1.26％)、蔗糖、蛋白质、脂肪、多种维生素类成分。现代研究表明，龙眼肉具有促进生长发育、抗衰老、抗疲劳、提高免疫力等多种功效。
桑椹为桑科植物桑Morus alba L.的果穗。味甘、酸性寒，归肝、肾经。具有滋阴补血，生津润燥之功效，用于肝肾阴虚，眩晕耳鸣，心悸失眠，须发早白，津伤口渴，内热消渴，肠燥便秘等症。桑椹主要含有黄酮类物质，还含有类脂、有机酸、芳香油、磷脂、维生素等营关成分。现代研究表明，桑椹具有增加免疫力、促进骨髓造血、抗氧化等多种功效。
枸杞子为茄科植物宁夏枸杞Lycium barbarum L.的成熟果实。其味甘性平，归肝、肾经。具有滋补肝肾，益精明目之功效，用于虚劳精亏，腰膝酸痛，眩晕耳鸣，阳萎遗精，内热消渴，血虚萎黄，目昏不明等症。枸杞子中主要含有胡萝卜为主的色素、枸杞多糖、枸杞油、多种维生素等。现代研究表明，枸杞子具有增强免疫、抗氧化、抑制自由基、保肝、降血脂、降血糖、延缓衰老、降低视疲劳、辅助抑制肿瘤、保护生殖系统等多种功效。
覆盆子为蔷薇科植物华东覆盆子Rubus chingii Hu的干燥果实。其味甘、酸，性微温，入肝、肾经，具有益肾固精缩尿，养肝明目之功效，用于遗精滑精，遗尿尿频，阳痿早泄，目暗昏花等症。覆盆子中主要含有覆盆子酸、掌叶覆盆子劳丹苷、蛋白质、多糖、有机酸、多种维生素等成分。现代研究表明，覆盆子具有抑菌、激素样作用。
迄今，尚未见将龙眼肉、桑椹、枸杞子和覆盆子细胞破壁微粉组合使用，用于补血的相关报道。
发明内容
本发明的目的在于提供一种具有补血功效的细胞破壁微粉及其制备方法。
本发明提供了一种具有补血功效的细胞破壁微粉，它是由下述重量配比的原料组成：龙眼肉2.4～3.6份、桑椹1.6～2.4份、枸杞子1.6～2.4份、覆盆子1.6～2.4份；其中，所述原料经粉碎，粒径为0.1～100μm。
进一步的，它是由下述重量配比的原料组成：龙眼肉3份、桑椹2份、枸杞子2份、覆盆子2份。
其中，300目以上的微粉含量95％，细胞破壁率98％。
本发明提供了一种所述细胞破壁微粉的制备方法，包括如下步骤：取各重量配比的原料，粉碎成粗粉，再经超微粉碎，即得。
进一步的，所述的粗粉粒径为60目以上；所述的超微粉碎条件为：粉碎温度为0～10℃，研磨介质填充率60～70％，振动频率1000次/min，振动强度8g，振幅5mm，粉碎时间60min。
本发明提供了所述细胞破壁微粉在制备具有补血功效的药物、保健品或食品中的用途。
进一步的，所述的药物、保健品或食品具有治疗和/或预防血虚的功效。
进一步的，所述的药物、保健品或食品具有治疗和/或预防失血性血虚、化学性血虚的功效。
本发明提供了一种具有补血功效的食品、保健品或药物组合物，它是由所述细胞破壁微粉为活性成分，加入药学上或保健品中可接受的辅料或辅助性成份制备而成的制剂，或加入食品用辅料制备而成的食品。
进一步的，所述的制剂为口服制剂。
本发明提供了一种具有补血功效的细胞破壁微粉。该微粉组合物配方合理，重用甘温的龙眼肉为君，补益心脾，养血安神，用于气血不足，心悸怔忡，健忘失眠，血虚萎黄；臣以桑椹，甘酸性寒，入肝肾经，滋阴养血，生津，润肠。主肝肾不足和血虚精亏的头晕目眩、腰酸耳鸣、须发早白、失眠多梦、津伤口渴、消渴、肠燥便秘。龙眼肉大补气血，桑椹滋阴养血，二药合用，旨在气血阴阳同补；且一温一寒，久服既不燥热、又无虚寒之弊。佐以甘平的枸杞子，滋补肝肾，益精明目；佐以甘酸，温的覆盆子，益肾，固精，缩尿。四味合用，既补先天之肾，又补后天之脾；既补心、肝之血，又补肝肾之阴，且寒热平调，气血阴阳兼顾，且补益同时兼顾固涩，加强了补益的力量。
功效实验表明，本发明龙眼肉、桑椹、枸杞子和覆盆子四味原料协同增效，可发挥显著的补血作用。另外，该四种原料均为药食同源的原材料，可进一步开发成具有补血功效的食品或保健品，具有广阔的市场前景。
本发明提供的细胞破壁微粉具有如下优点：
1、用符合炮制规范的中药材为原料，经现代化超微粉技术制取、干燥精制而成纯中药精细加工产品中药微粉，未经过煎煮、化学溶剂等处理，其性味、归经、功效与原中药饮片一致。
2、将本发明中药微粉制成制剂，无论内服或外用制剂，机体对其有效成分的吸收和利用都明显提高，从而提高其药效，因而可以大大提高原生药材的生物利用度和治疗效果。以中药微粉取代普通中药材或普通粉体，可在不降低或提高疗效的前提下，减少中药的用量，从而节省宝贵的中药资源；更适合养生康复的长期用药，节约成本，并有可能提高药效。
3、由于混于原生药材中的螨类等寄生虫及其虫卵和某些微生物可在超微粉碎中被破坏、杀死，可以明显控制中药的虫害。本发明微粉可直接冲服，服用量小，质量稳定可靠，使用安全，方便携带，十分有利于中医药的国内外推广。
显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。
以下通过实施例形式的具体实施方式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
具体实施方式
本发明具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。
实施例1 本发明细胞破壁微粉的制备
称取饮片龙眼肉150g、桑椹100g、枸杞子100g、覆盆子100g，除去杂质，洗净，60℃干燥至含水为6％以下，使用万能粉碎机粉碎，过60目筛，得粗粉。将上述粗粉至贝利微粉机中，按以下参数进行超微粉碎：粉碎温度为0～10℃，研磨介质填充率60～70％，振动频率1000次/min，振动强度8g，振幅5mm，粉碎时间60min，收集超微粉，即得。
参照李娟，麻晓雪，李顺祥，等.铁皮石斛超微粉碎破壁工艺的优化.中国实验方剂学杂志,2014,20(7):30-33文中报道的检测方法。经检测，按上法进行粉碎，平均得粉率(300目以上)95％，平均细胞破壁率98％，粒径为0.1～100μm。
以下通过实验例证明本发明的有益效果。
实验例1 本发明原料药补血的功效性试验
1、试验用溶液的制备
补血方普通饮片提取物：取龙眼肉30g、桑椹20g、枸杞子20g、覆盆子20g，加2倍体积量水浸泡30分钟，每次用6倍体积量水，煎煮2次，每次30分钟，合并煎液，滤过，减压浓缩每1ml含1g生药量的浓度。
龙眼肉提取物：取龙眼肉90g,同上方法制备，即可。
桑椹提取物：取龙眼肉90g,同上方法制备，即可。
枸杞子提取物：取枸杞子90g,同上方法制备，即可。
覆盆子提取物：取覆盆子90g,同上方法制备，即可。
2、对失血性血虚小鼠影响的研究
取小鼠(昆明种，一级，雌雄各半，体重18～22g)56只，雌雄各半，随机分为7组，分别灌服补血方普通饮片提取物(1.35g/kg)、龙眼肉提取物(1.35g/kg)、桑椹提取物(1.35g/kg)、枸杞子提取物(1.35g/kg)、覆盆子提取物(1.35g/kg)或同体积生理盐水，连续7天,于给药的第7日眼眶后静脉放血约0.6ml，造成小鼠失血模型，正常对照组不放血。失血后继续给药7天，末次给药1.5h后，眼眶取血，肝素抗凝，用自动血细胞分析仪测定小鼠RBC、Hb值。测定结果见表1。
表1本发明原料药对失血性血虚小鼠影响的研究结果(n＝8)
| 组别 | RBC(10<sup>12</sup>/L) | Hb(g/L) |
| 补血方提取物 | 8.72±0.73** | 151.05±9.03* |
| 龙眼肉提取物 | 8.14±0.75** | 148.03±9.82 |
| 桑椹提取物 | 8.25±0.86** | 147.88±12.86* |
| 枸杞子提取物 | 5.33±0.88 | 130.84±11.28 |
| 覆盆子提取物 | 5.22±0.87 | 137.02±13.08 |
| 正常对照 | 9.27±0.51** | 151.23±9.02* |
| 模型对照 | 5.28±0.87 | 132.26±17.21 |
注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
实验结果：小鼠放血造模后出现行动迟缓，喘促，毛蓬竖而少光泽，眼耳、尾苍白等血虚症状；与正常组比较，模型组红细胞数量和血红蛋白含量均显著下降，提示造模成功。
本发明补血方组小鼠行动敏捷，毛色正常，与正常组小鼠无明显区别；与模型组比较，本发明补血方组红细胞数量和血红蛋白含量均显著提高，表明本发明组合物对失血性血虚有明显的治疗作用。
另外，与模型组相比，单用枸杞子提取物或覆盆子提取物并不能有效提高小鼠红细胞数量或血红蛋白含量；单用龙眼肉提取物或桑椹提取物，小鼠红细胞数量或血红蛋白含量也低于本发明补血方组。
以上结果表明，本发明四味原料发挥了协同增效作用，具有显著的治疗失血性血虚的功效。
3、对化学性血虚小鼠影响的研究
取小鼠(昆明种，一级，雌雄各半，体重18～22g)56只，雌雄各半，随机分为7组，同上给药，于给药的第3日、第6日皮下注射乙酰苯肼20mg/kg、40mg/kg，从第3日起每日腹腔注射环磷酰胺40mg/kg连续5日，于末次给药1.5h后，眼眶取血，肝素抗凝，用自动血细胞分析仪测定WBC、RBC、Hb、HCT值。取血后处死小鼠，称定脾脏重量。测定结果见表2。
表2本发明组合物对化学性血虚小鼠影响的研究结果(
n＝8)
注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
实验结果：小鼠经乙酰苯肼、环磷酰胺联合造模后，第4日开始出现行动迟缓、喘促、毛蓬竖而少光泽，眼、耳、尾苍白等血虚症状，本发明补血方组小鼠变化不大，行动敏捷，毛色正常，与正常组小鼠无明显区别。各实验组动物均无死亡。
模型组与正常组比较，红细胞数、白细胞数、血红蛋白含量、红细胞比容和脾脏重量均显著下降。与模型组比较，本发明补血方组红细胞数、白细胞数、血红蛋白含量、红细胞比容和脾脏重量均显著提高，表明本发明有对抗环磷酰胺所致的骨髓抑制、促进造血机能的作用。
另外，与单用枸杞子提取物、覆盆子提取物、龙眼肉提取物或桑椹提取物相比，本发明补血方组小鼠上述各项指标均处于最佳水平，表明四味原料发挥了协同增效作用，具有显著的治疗化学性血虚的功效。
实验例2 本发明细胞破壁微粉与原料药普通饮片对比试验
1、浸出物和总多糖含量测定比较
破壁微粉组：根据实施例1制备的本发明破壁微粉；
普通饮片组：称取与实施例1相同的各原料药普通饮片，不经微粉化。
采用《中国药典》2015版第四部2201浸出物测定法热浸法，测定本发明破壁微粉与普通饮片的水溶性浸出物。
采用苯酚-硫酸比色法，以无水葡萄糖为对照品，于488nm处测定吸光度，测定本发明破壁微粉与普通饮片中总多糖含量。
测定结果见表3。
表3本发明破壁微粉与普通饮片浸出物和总多糖含量比较
结果显示，在相同的原料用量情况下，破壁微粉中测得的浸出物含量和总多糖含量明显高于普通饮片。
2、补血功效的比较
2.1试验用溶液的制备
本发明原料药普通饮片提取物：取龙眼肉30g、桑椹20g、枸杞子20g、覆盆子20g，加2倍体积量水浸泡30分钟，每次用6倍体积量水，煎煮2次，每次30分钟，合并煎液，滤过，减压浓缩每1ml含1g生药量的浓度。
本发明破壁微粉提取物：取处方比例称取龙眼肉30g、桑椹20g、枸杞子20g、覆盆子20g，按本发明中破壁微粉制备工艺制备得到超微粉，用6倍体积量水，煎煮2次，每次5分钟，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩每1ml含1g生药量的浓度。
2.2对失血性血虚小鼠影响的研究
取小鼠(昆明种，一级，雌雄各半，体重18～22g)32只，雌雄各半，随机分为4组，分别灌普通饮片提取物(1.35g/kg)、破壁微粉提取物(0.67g/kg)或同体积生理盐水，连续7天,于给药的第7日眼眶后静脉放血约0.6ml，造成小鼠失血模型，正常对照组不放血。失血后继续给药7天，末次给药1.5h后，眼眶取血，肝素抗凝，用自动血细胞分析仪测定小鼠RBC、Hb值。测定结果见表4。
表4本发明破壁微粉与普通饮片对失血性血虚小鼠影响对比(
n＝8)
| 组别 | RBC(10<sup>12</sup>/L) | Hb(g/L) |
| 普通饮片提取物 | 8.72±0.73** | 151.05±9.03* |
| 破壁微粉提取物 | 8.89±0.63** | 150.82±7.03* |
| 正常对照 | 9.27±0.51** | 151.23±9.02* |
| 模型对照 | 5.28±0.87 | 132.26±17.21 |
注：与模型对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01
实验结果：破壁微粉组在给药剂量只有普通饮片组一半的情况下，其提高红细胞数量和血红蛋白含量的效果仍能达到与普通饮片组相当的水平，两者之间无显著性差异。
以上结果表明：本发明原料药普通饮片具有显著的补血功效，将其制备成细胞破壁微粉后，能进一步提高治疗血虚药效、减少服药量。
Claims (8)
1.一种具有补血功效的细胞破壁微粉，其特征是：它是由下述重量配比的原料组成：龙眼肉3份、桑椹2份、枸杞子2份、覆盆子2份；其中，所述原料经粉碎，粒径为0.1～100μm，其中，300目以上的微粉含量95％，细胞破壁率98％。
2.一种权利要求1所述细胞破壁微粉的制备方法，其特征是：包括如下步骤：取各重量配比的原料，粉碎成粗粉，再经超微粉碎，即得。
3.如权利要求2所述的制备方法，其特征是：所述的粗粉粒径为60目以上；所述的超微粉碎条件为：粉碎温度为0～10℃，研磨介质填充率60～70％，振动频率1000次/min，振动强度8g，振幅5mm，粉碎时间60min。
4.权利要求1所述细胞破壁微粉在制备具有补血功效的药物、保健品或食品中的用途。
5.如权利要求4所述的用途，其特征是：所述的药物、保健品或食品具有治疗和/或预防血虚的功效。
6.如权利要求5所述的用途，其特征是：所述的药物、保健品或食品具有治疗和/或预防失血性血虚、化学性血虚的功效。
7.一种具有补血功效的食品、保健品或药物组合物，其特征是：它是由权利要求1所述细胞破壁微粉为活性成分，加入药学上或保健品中可接受的辅料或辅助性成份制备而成的制剂，或加入食品用辅料制备而成的食品。
8.如权利要求7所述的组合物，其特征是：所述的制剂为口服制剂。
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Legal Events
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Inventor after: Liu Jing Inventor after: Wang Qiong Inventor after: Zhao Bin Inventor after: Xie Cailing Inventor after: Chen Nian Inventor after: Wen Chunsheng Inventor before: Zhao Bin Inventor before: Wang Qiong Inventor before: Liu Jing Inventor before: Xie Cailing Inventor before: Chen Nian Inventor before: Wen Chunsheng |
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| CB03 | Change of inventor or designer information | ||
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Effective date of registration: 20191127 Address after: 528436, Guangdong Torch Development Zone, Zhongshan Port Road, Zhongshan Province Applicant after: Zhongshan Torch Polytechnic College Address before: 60 No. 528400 Guangdong city of Zhongshan province Zhongshan Torch Development Zone, Zhongshan Port Road Applicant before: Zhao Bin |
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Effective date of registration: 20200618 Address after: No.49, Gongye Road, Zhujiang street, Nansha District, Guangzhou City, Guangdong Province, 510000 Patentee after: GUANGDONG GNPP BIOSCIENCES Inc. Address before: 528436, Guangdong Torch Development Zone, Zhongshan Port Road, Zhongshan Province Patentee before: ZHONGSHAN TORCH POLYTECHNIC |
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