CN104000858A

CN104000858A - 一种人参花超微粉及其功能

Info

Publication number: CN104000858A
Application number: CN201410267375.4A
Authority: CN
Inventors: 赵伯涛; 钱骅; 陈斌
Original assignee: Institution Of Comprehensive Utllization Of Wild Plants All China Federation Of Supply And Maketing C00peratives
Current assignee: Institution Of Comprehensive Utllization Of Wild Plants All China Federation Of Supply And Maketing C00peratives
Priority date: 2014-06-17
Filing date: 2014-06-17
Publication date: 2014-08-27

Abstract

本发明公开了一种人参花超微粉及其功能。该人参花超微粉是将干燥人参花经粗粉碎后再经低温气流粉碎机粉碎为颗粒细度为2～5μm的人参花超微粉，已不存在完整的细胞结构。通过对总皂苷及5种单体皂苷(Rg₁、Re、Rb₁、Rc、Rd)进行含量测定，其皂苷溶出率与200目人参花粉相比均提高30%以上。该人参花超微粉制剂对由高脂饮食小鼠与链脲佐菌素（STZ）诱导的二型糖尿病模型小鼠的体重、空腹血糖、腹腔葡萄糖耐量、血清中谷胱甘肽含量、糖化血清蛋白、丙二醛含量以及超氧化物歧化酶活力各项生理生化指标具有很好的调节作用，提示了人参花超微粉制剂对二型糖尿病有明显的预防和治疗作用，可作为人类二型糖尿病预防和治疗的药物或功能性食品。

Description

一种人参花超微粉及其功能

技术领域

本发明属医药技术领域，具体涉及一种人参花超微粉及其功能。

背景技术

人参花为五加科植物人参（Panax ginseng C. A. Mey）的花，已报道人参花含有二十多种人参皂苷类活性物质、十七种氨基酸、十一种微量元素、三种抗癌活性硒及粗蛋白等。近年研究认为其药用价值比人参更好，对人参花成份的研究，发现人参根中没有的单体人参皂苷-Rms7cd唯独在人参花蕾中存在，人参花蕾还含有人参中没有的人参多肽，且含量极高；人参花总皂苷含量比人参高5倍，尤其单体皂苷Re比人参高出10倍。而Re已确认对Ⅱ型糖尿病及其并发症有显著作用，Re可以降低Ⅱ型糖尿病小鼠的空腹血糖，提高其糖代谢的能力并可以降低小鼠眼球、肾及主动脉细胞中MDA的含量同时还原型谷胱甘肽的含量有明显提高。可以明显降低糖尿病小鼠血浆中C-反应蛋白的含量，对糖尿病小鼠具有一定的抗炎作用，可以缓解糖尿病后期的并发症。此外，Rb1能促进脂肪细胞对葡萄糖的摄取，Rc能促进肌肉细胞对葡萄糖的摄取,Rd已被证明对心脑血管、神经系统、免疫系统等作用独特，在镇痛和神经保护等作用方面其作用也要大于其它人参皂苷。

发明内容

本发明的目的在于提供一种人参花超微粉及其对二型糖尿病小鼠各生理生化指标的调节功能，为将人参花开发为糖尿病预防及治疗的药物或保健食品提供基础。

为实现上述发明目的，本发明提供如下技术方案：

1.一种人参花超微粉的制备方法，将人参花粉碎60目粗粉，再经低温气流粉碎为颗粒细度为2-5μm，即得人参花超微粉。

2.本发明采用低温气流粉碎方式，使人参花的物理性质及生物利用度发生了巨大改变。由于人参花粉末颗粒细度达2-5μm，直接可以通过人体粘膜吸收，颗粒表面积增大，有效成分易于被人体吸收，生物利用度提高。同时整个粉碎过程在低温下完成，避免了某些活性成分的破坏，与传统的超微粉碎方法相比更具优势。扫描电子显微镜显示与普通粉碎（过200目筛）相比，人参花超微粉没有完整的细胞结构，表面积和孔隙率都显著增加。分别用水饱和正丁醇超声提取人参超微粉和普通粉中所含人参皂苷，结果与普通粉相比人参超微粉中总皂苷及各单体人参皂苷含量均提高30%以上。

3.本发明将人参花超微粉用水制成混悬液，以干重人参花超微粉计，根据小鼠体重按100-500mg/kg灌胃STZ诱导的二型糖尿病小鼠，20天后，与模型组相比，按500mg/kg灌胃人参花超微粉可使二型糖尿病小鼠体重提高31.7%（P<0.01），空腹血糖降低39.7%（P<0.01），葡萄糖耐量显著提高，糖化血清蛋白降低24.8%，血清谷胱甘肽含量提高26.9%，血清丙二醛含量降低45.3%，血清超氧化物歧化酶含量提高49.6%。

4.由人参花制备的超微粉碎制剂，还可进一步制成其他可接受的剂型，如片剂、胶囊剂、微囊剂、丸剂、冲剂、颗粒剂、皮肤外用制剂中的任何一种，供治疗或保健应用。

附图说明

图1普通粉碎500x电镜扫描图。

图2超微粉碎500x电镜扫描图。

图3普通粉碎1500x电镜扫描图。

图4超微粉碎1500x电镜扫描图。

图5普通粉碎5000x电镜扫描图。

图6超微粉碎5000x电镜扫描图。

图7人参花提取物HPLC图谱，其中A为人参皂苷混合标样，B为普通粉碎提取物，C为超微粉碎提取物（液相色谱图中1，2，3，4和5分别为人参皂苷Rg1，Re，Rb1，Rc和Rd）。

具体实施方式

实施例一：人参花超微粉碎。

将干燥人参花普通粉碎为颗粒细度为60目的人参花粗粉后，再利用流化床气流粉碎机进行气流粉碎，控制在高压气流温度在2～12C°，通过调控分级轮转速控制粉碎粒度，控制分级轮转速﹥2800转/分，得到粒度为2～5μm人参花超微粉。

实施例二：扫描电镜观察人参花经不同粉碎后的显微结构特征。

分别将该人参超微粉和普通粉碎人参花粉，用戊二醛固定，喷金镀膜后，扫描电镜观察其细胞形态（附图1-6）。图1和图2分别为普通粉和超微粉于500倍电镜扫描图，其中图1细胞结构完整很少有破损，图2细胞严重破损几乎看不到完整的细胞结构。图3和图4为1500倍下的电镜扫描图更加清晰说明普通粉碎并没有破坏细胞的结构，细胞依然保持着完整结构，而超微粉碎后细胞几乎完全破损，图5和图6为5000倍下的电镜扫描图，图5细胞表面结构清晰可见，而图6由于细胞破损严重表面凌乱。

实施例三：人参花普通粉和超微粉中总皂苷及单体皂苷含量测定。

分别用水饱和正丁醇在80Khz超声作用下，提取人参花超微粉和人参花普通粉中的人参皂苷，结果如表1和表2，与人参花普通粉相比人参花超微粉中总皂苷及单体人参皂苷溶出率都提高30%以上，液相色谱图见附图7。

表1分光光度法测定人参花普通粉和超微粉中总皂苷含量（n=6）

表2 HPLC法测定人参花超微粉和普通粉中各人参皂苷的含量（n=5）

实施例四：人参花超微粉功能性评价。

1 材料及方法

1.1 供试样品

供试样品为由人参花超微粉配置成10 mg/ml浓度的混悬液。

1.2 实验动物

选用清洁级昆明种小鼠100只，体重20～22g，由南通大学实验动物中心提供。饲养于温度25±2℃、湿度50±5%条件下。一周后，随机分为7组，分别为空白对照组、预防对照组、预防组1、预防组2、模型组、人参花小剂量组、人参花大剂量组。

1.3 实验方法

各组实验动物按如下方法开展实验。

空白对照组：全程用普通饲料喂养。

预防对照组：全程用高脂饲料喂养，第30天起每日根据体重灌胃与下述等体积生理盐水至实验结束。

预防组1：全程用高脂饲料喂养，第30天起按500mg/kg灌胃人参花总皂苷至实验结束。

预防组2：全程用高脂饲料喂养，第30天起按500mg/kg（以干重人参花计，下同）灌胃人参花总皂苷超微粉，第60天注射stz，继续按500mg/kg灌胃人参花。

模型组：全程高脂饲料喂养，第60天注射stz成模后按500mg/kg灌胃生理盐水。

人参花小剂量组（治疗组1）：全程高脂饲料喂养，第60天注射stz成模后按250mg/kg灌胃人参花总皂苷超微粉至实验结束。

人参花大剂量组（治疗组2）：全程高脂饲料喂养，第60天注射stz成模后按500mg/kg灌胃人参花总皂苷超微粉至实验结束。

针对各组实验小鼠，按如下方法分别检测体重、空腹血糖、腹腔葡萄糖耐量、糖化血清蛋白（GSP）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶（SOD）活力。

2 实验结果

2.1 体重变化

分别于实验开始后第0、30、60、70、80天对各组小鼠的体重进行称量。

表3人参花超微粉对小鼠体重影响（平均值±标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01）

2.2 空腹血糖

分别于第70、80天尾静脉取血用血糖仪对各组小鼠的空腹血糖值进行测定。

表4 人参花超微粉对小鼠空腹血糖影响（平均值+标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01）

2.3 腹腔葡萄糖耐量

第80天，尾静脉取血测定空腹血糖后，立即按2g/kg腹腔注射葡萄糖溶液，并于第30、60、120min尾静脉取血用血糖仪测定各组小鼠的血糖值。

表5 人参花超微粉对小鼠腹腔葡萄糖耐量的影响(平均值±标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01)

2.4糖化血清蛋白（GSP）的含量测定

第80天眼球取全血后，处死小鼠，离心后取上清备用。用糖化血清蛋白试剂盒测定小鼠血清中的糖化血清蛋白含量。

表6 人参花超微粉对小鼠糖化血清蛋白的影响（平均值+标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01）

2.5 还原型谷胱甘肽（GSH）的含量

第80天眼球取全血后，处死小鼠，离心后取上清备用。采用谷胱甘肽试剂盒测定小鼠血清中还原型谷胱甘肽的含量。

表7人参花超微粉对小鼠血清谷胱甘肽影响（平均值±标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01）

2.6 丙二醛（MDA）的含量

第80天眼球取全血后，处死小鼠，离心后取上清备用。采用丙二醛试剂盒测定小鼠血清中丙二醛的含量。

表8 人参花超微粉对小鼠血清MDA含量影响（平均值±标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01）

2.7超氧化物岐化酶（SOD）的活力

第80天眼球取全血后，处死小鼠，离心后取上清备用。采用超氧化物岐化酶活力测定试剂盒测定小鼠血清中超氧化物岐化酶的活力。

表9 人参花超微粉对小鼠血清SOD活力影响（平均值±标准差，n=10；“*”P<0.05，“**”P<0.01）

3 结论

人参花超微粉能显著改善糖尿病小鼠各生理生化指标，与模型组相比，人参花超微粉大剂量组能使STZ诱导的糖尿病小鼠：体重提高31.7%，空腹血糖值降低39.7%，腹腔葡萄糖耐量提高，糖化血清蛋白的水平降低24.8%，并在改善机体脂质过氧化程度（GSH含量提高26.7%、MDA含量降低45.3%）的同时使SOD的活力上升49.6%。提示人参花超微粉的降糖作用是由于人参皂苷类成分提高了SOD活力，保护胰腺细胞，降低STZ对小鼠胰腺B细胞的损伤，使其胰岛分泌功能相对于模型组强，从而使空腹血糖降低。这点在预防2组（成模前后均给提取物）中也得到了证实,由于预防2组在造模前30天就开始灌胃人参花超微粉，降低胰岛素抵抗的同时保护胰腺B细胞，有效的降低了STZ对胰腺B细胞的损伤，所以预防2中各生理生化指标都要比人参花超微粉治疗组理想。

人参花超微粉能显著改善高糖高脂饲料喂养下小鼠的生理生化指标，与空白组及预防对照组（不给提取物，不造模）相比：预防1组（第30天起给提取物，不造模）体重、空腹血糖值、糖化血清蛋白含量都略低于空白组，低于预防对照组，显著低于预防2组；腹腔葡糖耐量、脂质过氧化程度、SOD活力比空白组略高，低于预防对照组，显著低于预防2组。这是由于人参花中的人参皂苷Rb₁、Rc能促进肌肉及脂肪细胞对葡萄糖的摄取，但这种作用要明显弱于胰岛B细胞的调控作用，所以在STZ诱导的病理条件下人参花超微粉调节各生理生化指标的作用更显著。

Claims

1.本专利要求保护一种人参花超微粉的制备方法及其适用功能，其特征在于，先将干燥人参花粉碎为60目的颗粒，再经低温气流粉碎机粉碎颗粒细度为2～5μm的人参花超微粉，超微粉碎破坏了参花的细胞结构且人参皂苷溶出率与普通粉碎人参花（过200目筛）相比显著提高，并对高脂饮食小鼠、高脂饮食＋链脲佐菌素（STZ）诱导的二型糖尿病模型小鼠的体重、空腹血糖、腹腔葡萄糖耐量、糖化血清蛋白、血清谷胱甘肽、血清丙二醛及血清超氧化物歧化酶等生理生化指标均有较好的调节作用。

2.根据权利要求1所述人参花超微粉，其特征在于：通过扫描电镜观察显示其不存在完整的细胞结构，表面积和孔隙率都大大增加；其人参皂苷溶出率显著提高，与普通粉碎人参花相比总皂苷及5种单体皂苷(Rg₁、Re、Rb₁、Rc、 Rd)含量分别提高了25%～35%、37%～47%、25%～35%、35%～45%、33%～43%、 35%～45%。

3.根据权利要求1所述的人参花超微粉的功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠体重提高31.7%（P<0.01）。

4.根据权利要求1所述的人参花超微粉功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠空腹血糖降低39.7%（P<0.05）。

5.根据权利要求1所述的人参花超微粉功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠葡萄糖耐量显著提高（P<0.05）。

6.根据权利要求1所述的人参花超微粉功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠糖化血清蛋白含量下降24.8%（P<0.05）。

7.根据权利要求1所述的人参花超微粉功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠血清谷胱甘肽含量提高26.9%（P<0.01）。

8.根据权利要求1所述的人参花超微粉功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠血清丙二醛含量下降45.3%（P<0.01）。

9.根据权利要求1所述的人参花超微粉功能，其特征在于，与模型组相比人参花超微粉能使STZ诱导的二型糖尿病小鼠血清超氧化物歧化酶含量提高49.6%（P<0.01）。