CN103980333B

CN103980333B - 一种盐酸吉西他滨的纯化方法

Info

Publication number: CN103980333B
Application number: CN201410219659.6A
Authority: CN
Inventors: 阮诗文; 严海艳; 严恭超; 徐丽萍; 阮晓娜
Original assignee: Shanghai Ding Ya Pharmaceutical Chemistry Science And Technology Ltd
Current assignee: Shanghai Ding Ya Pharmaceutical Chemistry Science And Technology Ltd
Priority date: 2014-05-23
Filing date: 2014-05-23
Publication date: 2017-05-31
Anticipated expiration: 2034-05-23
Also published as: CN103980333A

Abstract

本发明提供了一种盐酸吉西他滨的纯化方法，属于化合物纯化技术领域。本发明方法主要是：取盐酸吉西他滨粗品，向其中加入注射用水溶解，再加入活性炭脱色，过滤，滤液放置冻干机中浓缩得到盐酸吉西他滨浓缩物，再向盐酸吉西他滨浓缩物中加入丙酮，在室温条件下搅拌过夜，过滤，洗涤，将滤饼放置冻干机中干燥，得到盐酸吉西他滨纯品。该方法具有实施方法简单，成本低，所得到的盐酸吉西他滨纯度高，适用于工业化生产等优点。

Description

一种盐酸吉西他滨的纯化方法

技术领域

本发明属于化合物纯化技术领域，具体涉及一种盐酸吉西他滨粗品的纯化方法。

技术背景

盐酸吉西他滨是一种抗代谢肿瘤药物，其化学名为(+)2’-脱氧-2’,2’-二氟胞苷盐酸盐，英文名为Gemcitabine Hydrochloride，化学结构式如下式所示：

与其他抗代谢肿瘤药物相比，盐酸吉西他滨具有抗肿瘤活性更强，抗瘤谱更广，治疗效果更显著，毒性更低的优点，因此被广泛用于非小细胞肺癌、胰腺癌、乳腺癌以及其他实体肿瘤的治疗中。正因为其广泛的用途，所以盐酸吉西他滨的质量就显得尤为重要，而目前合成盐酸吉西他滨所采用的工艺易造成α-异构体、胞嘧啶及其他杂质的出现，这些杂质的出现直接影响注射用盐酸吉西他滨临床用药的安全性和有效性，因此制备高纯度的盐酸吉西他滨原料药具有重要的实际应用价值。

专利CN102659884A公开了一种盐酸吉西他滨的提纯方法，该方法先向盐酸吉西他滨粗品中加入碱调节pH至8~9，抽滤，然后加入醇溶剂溶解，加入活性炭吸附，再进行色谱柱分离纯化，纯化后的盐酸吉西他滨的纯度为99.9%。但此方法也存在一些缺点，如向盐酸吉西他滨粗品中加入碱，在碱性条件下，盐酸吉西他滨被破坏，容易生成α-异构体，导致产品收率和纯度降低；此外采用色谱柱处理方法进行分离纯化具有较大的局限性，不适用于大规模的工业化生产。专利CN103232508A采用将盐酸吉西他滨溶于适量的水，向水溶液中滴加少量浓盐酸调解pH(<0.5)，搅拌下直接加入丙酮，析晶，分离，干燥得到盐酸吉西他滨纯品。此方法的不足之处在于向盐酸吉西他滨水溶液中直接加入丙酮，因为盐酸吉西他滨极易溶于水，水的存在会导致结晶过程中产品收率的降低，同时需使用大量的丙酮才能析出晶体，使溶剂的使用量增加，导致成本上升。南京理工大学硕士论文《盐酸吉西他滨原料药开发研究》中(第28页)给出的盐酸吉西他滨精制方法虽然将水进行了浓缩，但其所采取的浓缩方法是利用旋转蒸发仪在60℃条件下除水，在此温度下盐酸吉西他滨不稳定，会产生杂质，导致产品纯度和收率的降低。

发明内容

本发明针对现有技术存在的不足，提供了一种盐酸吉西他滨粗品的纯化方法，该方法具体步骤如下：

(1) 取一定量的盐酸吉西他滨粗品，向其中加入一定量的注射用水，在室温条件下搅拌溶解，再加入活性炭脱色，过滤，收集滤液，将滤液放置冻干机中浓缩至原体积的12%~14%，得到盐酸吉西他滨浓缩物；

(2) 向步骤(1)得到的盐酸吉西他滨浓缩物中加入一定量的丙酮，在室温条件下搅拌过夜，过滤，洗涤，将滤饼放置冻干机中干燥，得到盐酸吉西他滨纯品。

上述步骤(1)中，盐酸吉西他滨粗品与注射用水的质量体积比为1：6~10(wt/v)，若注射用水的量过少盐酸吉西他滨粗品溶解不完全，若注射用水的量过多又将延长浓缩时间；活性炭的加入量为盐酸吉西他滨粗品质量的3%~5%，活性炭的量过少无法达到脱色的效果，活性炭的量过多又会吸附盐酸吉西他滨，造成盐酸吉西他滨质量的损失，降低收率。

上述步骤(1)和(2)中，冻干机的温度设置在5℃~10℃，在此温度下能够有效防止盐酸吉西他滨的分解，提高产品的纯度和收率。

上述步骤(2)中，丙酮的加入量为盐酸吉西他滨浓缩物体积的2~3倍。

本发明所采用的冻干机干燥法不同于常规的冷冻干燥法，常规的冷冻干燥法是指利用冰的升华达到除水的效果。本发明所采用的冻干机干燥法是在5℃~10℃这样的低温条件下进行，此方法不仅克服了利用旋转蒸发仪除水需升温的缺陷，同时也克服了减压真空干燥无法使温度维持在5℃~10℃范围内的缺陷。简言之，本发明所述的冻干机干燥法本质上是温度能够维持在5℃~10℃范围内的真空干燥法。该方法最大限度地防止了盐酸吉西他滨的分解，有效的降低了盐酸吉西他滨中杂质的含量，提高了盐酸吉西他滨的收率，用该发明方法得到的盐酸吉西他滨纯品的纯度高达99.97%~99.98%，优于进口盐酸吉西他滨的纯度99.9%。该方法实施简单、成本低、适用于工业化生产。

具体实施方式

实施例1：

向6L注射用水中加入1kg盐酸吉西他滨粗品(盐酸吉西他滨含量99.03%，相关杂质含量0.95%)，于室温条件下搅拌至溶解，加入30g活性炭脱色15分钟，过滤，收集滤液，将冻干机温度设置在5℃~10℃，滤液放置冻干机中浓缩至720mL，得到盐酸吉西他滨浓缩物；再向盐酸吉西他滨浓缩物中加入1.6L丙酮，室温条件下搅拌过夜，0.22μm微孔滤膜过滤，用500mL丙酮洗涤，将滤饼放置冻干机中干燥，得到盐酸吉西他滨纯品839.3g，收率84.7%，取样做HPLC，其纯度为99.97%(相关杂质含量0.014%)。

实施例2：

向10L注射用水中加入1kg盐酸吉西他滨粗品(盐酸吉西他滨含量99.32%，相关杂质含量0.71%)，于室温条件下搅拌至溶解，加入50g活性炭脱色10分钟，过滤，收集滤液，将冻干机温度设置在5℃~10℃，滤液放置冻干机中浓缩至1.4L，得到盐酸吉西他滨浓缩物；再向盐酸吉西他滨浓缩物中加入4.2L丙酮，室温条件下搅拌过夜，0.22μm微孔滤膜过滤，用1L丙酮洗涤，将滤饼放置冻干机中干燥，得到盐酸吉西他滨纯品847.7g，收率85.3%，取样做HPLC，其纯度为99.98%(相关杂质含量0.013%)。

实施例3：

向9L注射用水中加入1kg盐酸吉西他滨粗品(盐酸吉西他滨含量99.10%，相关杂质含量0.92%)，于室温条件下搅拌至溶解，加入40g活性炭脱色15分钟，过滤，收集滤液，将冻干机温度设置在5℃~10℃，滤液放置冻干机中浓缩至1.1L，得到盐酸吉西他滨浓缩物；再向盐酸吉西他滨浓缩物中加入2.2L丙酮，室温条件下搅拌过夜，0.22μm微孔滤膜过滤，用800mL丙酮洗涤，将滤饼放置冻干机中干燥，得到盐酸吉西他滨纯品841.4g，收率84.9%，取样做HPLC，其纯度为99.98%(相关杂质含量0.016%)。

实施例4

本实施例用于说明对前三个实施例产物的验证。

对于精制盐酸吉西他滨分子结构的确证，采用了有机元素分析、有机质谱、红外光谱、紫外光谱、X射线衍射、差示扫描量热、热重、核磁共振谱等仪器分析手段。

有机质谱：

实施例的盐酸吉西他滨的EI质谱所显示的m/z263与标准吉西他滨C₉H₁₁F₂N₃O₄的相对分子质量相符（盐酸在质谱上不显示）。

元素分析：

有机元素分析结果表明实施例样品的C、H、N元素的实测质量百分含量分别为C36.06、H3.99、N13.95，与样品分子式的C、H、N元素的质量百分含量理论值（C36.07、H4.04、N14.02）接近。

红外光谱：

实施例样品的红外光谱显示含有-OH、NH³⁺、C-F、C=O、杂环、烷基。3392、3261cm^-1(s、m)为OH的吸收峰，3118、3079cm^-1为=C-H的吸收峰，2946cm^-1(w)为烷基C-H的吸收峰，2967~2750cm^-1(w、br)、1623、1536cm^-1(w)为NH³⁺的吸收峰，1701、1681cm^-1(s)为C=O的吸收峰，1623cm^-1(w)为杂环C=C、C=N吸收峰，1431cm^-1(w)为CH₂的吸收峰，1200cm^-1(m-s)为C-F键的吸收峰，1903、1065cm^-1(m-s)为C-O键的吸收峰。

紫外光谱：

实施例样品在水分中紫外吸收峰270.40nm(ε_max9.8×10³)为分子结构中取代嘧啶的吸收，在0.1mol/L NaOH溶液中的吸收峰为271.20nm(ε_max9.8×10³)，在0.1mol/L HCl溶液中的吸收峰275.40nm(ε_max1.3x10⁴）、214.00nm(ε_max1.0x10⁴)均为分子结构中取代嘧啶的吸收。

X射线衍射：

实施例样品的X射线衍射谱图有明显的结晶峰，为结晶物质。

差示扫描量热分析

差示扫描量热分析表明实施例样品跟标准品基本一致。

热重分析：

实施例样品在室温~685℃间失重变化：室温~210℃为0.07%，210~430℃为63.96%，430~685℃为36.50%，685℃最后剩余量为0.47%。

核磁NMR：

送检样品实施例样品的400兆赫核磁共振谱以D₂O作溶剂测试，氢谱中共检出7个质子峰，应采用重水做溶剂，结构的所有活泼质子因发生氘交换而无吸收信号。由¹³C-NMR谱和DEPT谱检测9组有效峰，其中1个仲碳峰，3个季碳峰。

¹³C-NMR谱中仲碳δ59.73归属为11位碳，由HSQC谱归属相关质子δ3.87（1H,dd，13.1,4.4）、4.02（1H，~d，13.1）为11位亚甲基上的两个同碳质子。COSY谱中11位质子与质子δ4.12（1H，m）相关，δ4.12（1H，m）又与δ4.39（1H，m）相关，归属质子δ4.12（1H，m）、4.39（1H，m）分别为10位、9位次甲基质子，由HSQC谱归属相关叔碳δ81.48(d,3Jcf=7.5Hz)、69.55（dd，2Jcf=27.5Hz，2Jcf=18.9Hz）分别为10位、9位碳。HMBC谱中季碳δ122.50(t,1Jcf=260.8Hz)为8位碳，质子δ6.24（1H，m）为7位次甲基质子，由HSQC谱归属相关叔碳δ84.99（dd，2Jcf=41.0Hz，2Jcf=23.6Hz）为7位碳。

HMBC谱中7位碳与质子δ8.02（1H，d，8）相关，季碳δ148.69与7位质子及质子δ8.02（1H，d，8）相关，季碳δ159.80与质子δ8.02（1H，d，8），6.30（1H，d，8）相关，质子δ8.02（1H，d，8）与质子δ6.30（1H，d，8）在COSY谱中相关，分别归属季碳δ148.69、159.80为1位、3位碳质子δ8.02（1H，d，8）、6.30（1H，d，8）分别为5位、4位质子，由HSQC谱归属相关叔碳δ144.35、95.99分别为5位、4位碳。

¹⁹F谱中δF-116.50(1F，ddd，2JFF=241.0Hz，3JFF=12.5Hz，3JFF=4.7Hz)、δF-117.85(1F，d，2JFF=241.0Hz)为8位碳上的两个氟原子。

根据以上有机元素分析、有机质谱、红外光谱、紫外光谱、X射线衍射、差示扫描量热、热重、核磁共振谱等仪器分析手段结果表明，由实施例制得的盐酸吉西他滨样品与标准品的结构一致。

Claims

1.一种盐酸吉西他滨粗品的纯化方法，其特征在于该方法具体步骤如下：

(1) 取一定量的盐酸吉西他滨粗品，向其中加入一定量的注射用水，在室温条件下搅拌溶解，再加入活性炭脱色，过滤，收集滤液，将滤液放置冻干机中浓缩至原体积的12%~14%得到盐酸吉西他滨浓缩物；

(2) 向步骤(1)得到的盐酸吉西他滨浓缩物中加入一定量的丙酮，在室温条件下搅拌过夜，过滤，洗涤，将滤饼放置冻干机中干燥，得到盐酸吉西他滨纯品；

其中，步骤(1)、步骤(2)所述的冻干机的温度控制在5℃~10℃范围内。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)所述的盐酸吉西他滨与注射用水的质量体积比为1：6~10(wt/v)。